CN113646051A - 重症肌无力的治疗方法 - Google Patents

Abstract

本公开涉及使用抗FcRn抗体或其抗原结合片段在有此需要的人中治疗或预防重症肌无力(MG)的方法。特别地，该方法为这种治疗提供了合适的剂量方案。

Description

重症肌无力的治疗方法

本公开涉及使用对FcRn特异的抗体治疗重症肌无力(MG)的方法。

新生儿MHC I类样FcRn从大多数细胞中回收免疫球蛋白和白蛋白，并将其双向转运通过上皮屏障，以影响全身和粘膜免疫。研究表明，FcRn通过将IgG和白蛋白从分选内体中回收到细胞表面，而将它们从细胞内溶酶体降解中拯救出来(Anderson等人，2006年)。对于IgG，这是通过IgG与受体FcRn的相互作用实现的。因此，实际上FcRn挽救了IgG，使其免于降解并将其返回循环。白蛋白类似地被FcRn回收，尽管是通过FcRn分子上不同的结合位点。已经表明，敲除或阻断FcRn消除了这种再循环，导致IgG的内体分解代谢以及血管和血管外(组织)隔室中IgG浓度的显著降低。事实上，阻断FcRn可加速内源性IgG的清除，如果白蛋白结合位点也被阻断，还可能加速白蛋白的清除。

UCB7665(罗扎诺昔单抗(rozanolixizumab))是人源化抗新生儿Fc受体IgG(FcRn)单克隆抗体，被专门设计用于抑制IgG与FcRn的结合，而不抑制白蛋白与FcRn的结合。UCB7665正被开发为FcRn活性的抑制剂，旨在降低患有IgG自身抗体介导的疾病的患者中的致病IgG的浓度。

作为个体疾病实体，IgG自身抗体介导的疾病相对罕见。这些病症的治疗仍然是困难的临床问题，在这些疾患中的许多疾患中需要长期单独使用大剂量皮质类固醇或与细胞毒性剂组合使用。这些治疗方法并非对所有患者和病症都有效，它们具有广泛的免疫抑制效应，导致相当大的毒性和治疗相关的发病率。

旨在减少循环IgG自身抗体的量的治疗，包括血浆置换术(plasmapheresis)、免疫吸附或大剂量静脉注射免疫球蛋白(IVIg)正被用于自身免疫性疾病的一级和二级治疗，特别是在基于皮质类固醇的免疫抑制无效或不再有效的情况下。这些治疗的治疗方法被认为是基于降低致病性自身抗体的水平，这代表了自身免疫性疾病的合理和有效的治疗方式。

重症肌无力是罕见的外周运动系统自身免疫性病症，其中自身免疫抗体最常见的形式是在神经肌肉接头(NMJ)对抗乙酰胆碱烟碱受体(nAChR)。nAChR自身抗体损害乙酰胆碱与受体结合的能力，并通过诱导肌肉细胞通过内吞作用或补体固定来消除受体，从而导致受体的破坏。

第二类MG是由针对肌肉特异性激酶(MuSK)蛋白(一种形成NMJ所需的酪氨酸激酶受体)的自身抗体导致的。针对MuSK的抗体抑制信号传导，导致NMJ的通畅性下降，从而导致MG的后续症状。在这两个类别中，这导致了一种特征性的模式，即肌肉强度随着重复使用而逐渐降低，并且在一段时间的休息后肌肉强度恢复。已经发现其它抗体与MG相关，但对它们的了解还很少，它们似乎不如主要的两种抗体常见。

血浆置换(plasma exchange，PLEX)后看到的改善支持了自身免疫抗体在介导这种病理中的重要作用。降低包括致病性IgG自身抗体在内的IgG水平的血浆置换，用于对乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制剂或免疫抑制治疗无反应的患者和经历肌无力危象的患者(Gilhus和Verschuuren，2015年)。

虽然在过去的数十年中，MG的预后有了显著的改善，但随着新疗法的出现，生存率显著提高，但显著的死亡率甚至发病率仍然是个问题。MG的治疗仍然是困难的临床问题，需要长期单独使用大剂量皮质类固醇或与细胞毒性剂组合使用。许多被认为对MG有效的疗法没有足够的数据来明确支持它们的使用，并不是对所有的患者和疾患都有效，并且具有广泛的免疫抑制作用，导致相当大的毒性和治疗相关发病率。此外，由于疾病过程中的自然波动，许多患者需要对需要紧急治疗的急性情况的有效治疗。

PLEX和IVIg目前都在需要慢性间歇性治疗的情况下用作改善症状的护理标准；然而，这两种治疗在美国均未被批准用于MG，而且所述治疗过程对患者来说是一种负担。因此，在这一患者群体中，对为全身性MG患者提供更多便利的有效的慢性间歇性治疗存在显著的未满足的医疗需求。

因此，在MG的治疗中，对新的治疗选择仍然存在对新的治疗选择的未满足的医学需求。

因此，阻断或减少IgG与FcRn的结合的药剂可用于通过去除致病性IgG而治疗或预防MG。先前已在WO2009/131702、WO2007/087289、WO2006/118772、WO2014/019727、WO2015/071330、WO2015/167293和WO2016/123521中描述了抗FcRn抗体。

UCB7665(罗扎诺昔单抗)是人源化的抗FcRn单克隆抗体，其被特别地设计为在不抑制白蛋白与FcRn结合的情况下抑制IgG与FcRn的结合(描述于本文和WO2014/019727以及Smith等人，2019,MABS,10,111-1130中)。UCB7665正被开发为FcRn活性的抑制剂，旨在降低MG患者中的致病性IgG的浓度。通过将大鼠抗体工程化为人源化的IgG4P形式，从对人FcRn具有特异性的大鼠抗体产生UCB7665。编码UCB7665的构建体是通过将来自亲代大鼠重链和轻链可变区的互补决定区(CDR)移植到人IgG4P和κ链遗传背景(分别为SEQ ID NO:43和SEQID NO:22)上而产生的。

Kiessling等人2017,Sci.Transl.Med.9，第1-12页描述了在健康受试者中进行的随机、受试者盲、研究者盲、设有安慰剂对照、单剂量递增的1期临床试验。抗体降低了血清IgG，但血清白蛋白浓度没有任何统计学意义上的显著降低。获得了可接受的安全性、药代动力学和药效学特征。

发明内容

本公开首次证明了抗FcRn抗体在治疗人的MG中的治疗效果，并为此种治疗提供了合适的剂量方案。

因此，在一个方面，提供了在有此需要的人中治疗或预防重症肌无力(MG)的方法，该方法包括向所述人施用至少3剂抗FcRn抗体或其抗原结合片段，其中每剂独立地选自4mg/kg、7mg/kg、10mg/kg、15mg/kg和20mg/kg。

一个方面，使用固定单位剂量，任选地超过体重等级。在一个实例中，使用了相当于大约7mg/kg的固定单位剂量。因此，在一个实例中，本发明还提供了在有此需要的人中治疗或预防重症肌无力(MG)的方法，该方法包括向所述人施用至少3剂，优选至少6剂抗-FcRn抗体或其抗原结合片段，其中对于小于50kg的体重，剂量为280mg，对于等于或大于50kg但小于70kg的体重，剂量为420mg，对于等于或大于70kg但小于100kg的体重，剂量为560mg，对于等于或大于100kg的体重，剂量为840mg。

在一个实例中，使用了相当于大约10mg/kg的固定单位剂量。因此，在一个实例中，本发明还提供了在有此需要的人中治疗或预防重症肌无力(MG)的方法，所述方法包括向所述人施用至少3剂，优选至少6剂的抗-FcRn抗体或其抗原结合片段，其中对于小于50kg的体重，剂量为420mg，对于等于或大于50kg但小于70kg的体重，剂量为560mg，对于等于或大于70kg但小于100kg的体重，剂量为840mg，对于等于或大于100kg的体重，剂量为1120mg。

在一个实例中，所述抗FcRn抗体或其抗原结合片段包含:

a.具有可变区的重链或重链片段，其中所述可变区包含三个CDR，所述3个CDR具有SEQ ID NO:1中给出的CDR H1的序列，SEQ ID NO:2中给出的CDR H2的序列和SEQ ID NO:中给出的CDR H3的序列，以及

b.具有可变区的轻链或轻链片段，其中所述可变区包含三个CDR，所述3个CDR具有SEQ ID NO:4中给出的CDR L1的序列，SEQ ID NO:5中给出的CDR L2的序列和SEQ ID NO:6中给出的CDR L3的序列。

另一方面，提供了用于在有此需要的人中治疗或预防重症肌无力(MG)的抗FcRn抗体或其抗原结合片段，包括向所述人施用至少3剂抗FcRn抗体或其抗原结合片段，其中每剂独立地选自4mg/kg、7mg/kg、10mg/kg、15mg/kg和20mg/kg。

在另一方面，提供了抗FcRn抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含：

具有可变区的重链或重链片段，其中所述可变区包含三个CDR，所述3个CDR具有SEQ ID NO:1中给出的CDR H1的序列，SEQ ID NO:2中给出的CDR H2的序列和SEQ ID NO:3中给出的CDR H3的序列，以及

具有可变区的轻链或轻链片段，其中所述可变区包含三个CDR，所述3个CDR具有SEQ ID NO:4中给出的CDR L1的序列，SEQ ID NO:5中给出的CDR L2的序列和SEQ ID NO:6中给出的CDR L3的序列，

用于在有此需要的人中治疗或预防重症肌无力(MG)，包括向所述人施用至少3剂抗FcRn抗体或其抗原结合片段，其中每剂独立地选自4mg/kg、7mg/kg、10mg/kg、15mg/kg和20mg/kg。

另一个方面，提供了抗-FcRn抗体或其结合片段用于制备治疗或预防重症肌无力(MG)的药物的用途，所述抗-FcRn抗体或其结合片段包含：

i.具有可变区的重链或重链片段，其中所述可变区包含三个CDR，所述3个CDR具有SEQ ID NO:1中给出的CDR H1的序列，SEQ ID NO:2中给出的CDR H2的序列和SEQ ID NO:3中给出的CDR H3的序列，以及

ii.具有可变区的轻链或其轻链片段，所述可变区包含三个CDR，所述三个CDR具有SEQ ID NO:4中给出的CDR L1的序列，SEQ ID NO:5中给出的CDR L2的序列和SEQ ID NO:6中给出的CDR L3的序列，

所述治疗或预防包括向所述人施用至少3剂抗FcRn抗体或其FcRn结合片段，其中每剂独立地选自4mg/kg、7mg/kg、10mg/kg、15mg/kg和20mg/kg。

重要的是，本发明的抗体能够在pH6和pH7.4下以相当的并且高的结合亲和力结合人FcRn。因此，有利的是，所述抗体即使在内体中也能继续结合FcRn，从而最大限度地阻断FcRn与IgG的结合。

在一个实例中，用于本发明的抗FcRn抗体或其结合片段结合人FcRn的表位，所述表位包含至少一个选自SEQ ID NO:94的残基V105、P106、T107、A108和K109的氨基酸和至少一个(例如至少2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个)选自SEQ ID NO:94的P100、E115、E116、F117、M118、N119、F120、D121、L122、K123、Q124、G128、G129、D130、W131、P132和E133的残基。

在一个实施方案中，根据本公开的抗体或结合片段包含重链或重链片段，所述重链或重链片段具有可变区，例如包含一个、两个或三个独立选自SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3的CDR，特别是其中CDR H1是SEQ ID NO:1，CDR H2是SEQ ID NO:2以及CDRH3是SEQ ID NO:3。

在一个实施方案中，根据本公开的抗体或结合片段包含轻链或轻链片段，所述轻链或轻链片段具有可变区，例如包含一个、两个或三个独立选自SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6的CDR，特别是其中CDR L1是SEQ ID NO:4，CDR L2是SEQ ID NO:5以及CDRL3是SEQ ID NO:6。

在一个实施方案中，根据本公开的抗体或结合片段包含SEQ ID NO:1至6的CDR序列，例如其中CDR H1是SEQ ID NO:1，CDR H2是SEQ ID NO:2、CDR H3是SEQ ID NO:3、CDR L1是SEQ ID NO:4，CDR L2是SEQ ID NO:5以及CDR L3是SEQ ID NO:6。

本公开还涉及包含所述抗体和片段的药物组合物。

附图说明

图1显示了某些氨基酸和多核苷酸序列。

图2MG0002研究设计(SubQ；UCB7665)

图3相对于基线的MG-ADL评分的变化

图4相对于基线的QMG、MG-复合物、MG-ADL评分、血清IgG浓度和抗AChR抗体的变化(罗扎诺昔单抗7mg/kg/罗扎诺昔单抗7mg/kg)

图5定量重症肌无力测试表

图6重症肌无力综合评分

图7重症肌无力日常生活活动(MG-ADL)评分

具体实施方式

重症肌无力(MG)是使人虚弱且潜在致命的自身免疫性疾病，其特征在于针对突触后肌膜的表位(包括烟碱乙酰胆碱受体(AChR)和肌肉特异性酪氨酸激酶受体(MuSK))的自身抗体，以及补体介导的连接后膜(post-junctional membrane)的破坏。临床表现包括眼部、延髓、呼吸和四肢肌肉的波动性无力。目前MG的长期疗法包括胸腺切除术(THX)、胆碱酯酶抑制剂和免疫抑制剂或免疫调节剂。恶化通常用诸如静脉内或皮下免疫球蛋白(IVIg或SCIg)和血浆置换(PLEX)等疗法进行治疗。

在大多数患者中，首先受累的肌肉是那些控制眼睛和眼睑运动的肌肉。在一些患者中，重症肌无力只累及眼肌(眼肌型重症肌无力)，而在大多数患者中，还累及其它肌肉(全身型重症肌无力)。因此，如本文所用的全身型重症肌无力是指不仅仅影响眼肌还影响其它肌肉的重症肌无力。

一个方面，本发明提供了在有此需要的人中治疗或预防重症肌无力(MG)的方法，该方法包括向所述人施用至少6剂抗FcRn抗体或其抗原结合片段，其中每剂独立地选自4mg/kg、7mg/kg、10mg/kg、15mg/kg和20mg/kg，优选7mg/kg或10mg/kg。

在一个实例中，可以使用固定单位给药，任选地使用如本文以下所述的基于重量的等级。

任何合适的抗FcRn抗体或其抗原结合片段可用于本发明，包括本文所述的那些。

在一个实例中，所述抗FcRn抗体或其抗原结合片段包含:

a.具有可变区的重链或重链片段，其中所述可变区包含三个CDR，所述3个CDR具有SEQ ID NO:1中给出的CDR H1的序列，SEQ ID NO:2中给出的CDR H2的序列和SEQ ID NO:3中给出的CDR H3的序列，以及

b.具有可变区的轻链或轻链片段，其中所述可变区包含三个CDR，所述3个CDR具有SEQ ID NO:4中给出的CDR L1的序列，SEQ ID NO:5中给出的CDR L2的序列和SEQ ID NO:6中给出的CDR L3的序列。

本文使用的FcRn是指人IgG受体α链(也称为新生儿Fc受体，其氨基酸序列存在于UniProt中，编号为P55899)与β2微球蛋白(β2M)(其氨基酸序列存在于UniProt中，编号为P61769)之间的非共价复合物。

本文采用的抗体分子是指抗体或抗原结合片段。

如本文中所用，术语“抗体”通常涉及完整(整个)抗体，即包含两个全长重链和轻链的元件。所述抗体可以进一步包含例如根据WO2007/024715中公开的分子DVD-Ig或WO2011/030107中所述的所谓(FabFv)₂Fc的额外的结合结构域。因此，本文采用的抗体包括二价、三价或四价全长抗体。

如本文以上所述，用于该方法的抗体包括具有全长重链和轻链的完整抗体分子。或者，该方法使用抗原结合片段。抗原结合片段可包括常规抗体片段结构，例如Fab片段、经修饰的Fab、Fab’或F(ab’)₂片段。抗体可被酶诸如木瓜蛋白酶(产生两个Fab片段和一个Fc片段)和胃蛋白酶(产生F(ab')₂片段和pFc’片段)切割成片段。抗原结合片段还可包含非常规结构(即，包含呈替代形式的抗体的抗原结合部分，其包括通过保留抗原结合能力来模拟抗体片段活性的多肽)。在这方面，抗原结合片段包括结构域抗体或纳米体(nanobodies)，例如基于VH、VL、V_HH和V_NAR的结构、单链抗体(scFv)、肽抗体或肽-Fc融合物，以及二聚和多聚抗体样分子，如双聚抗体(diabodies)、三聚抗体(triabodies)和四聚抗体(tetrabodies)，或微型抗体(miniAb)，其包含不同形式，由连接至寡聚结构域的scFv组成。多特异性抗原结合片段的实例包括分别在国际专利申请公布第WO2009040562号、第WO2010035012号、第WO2011/08609号、第WO2011/030107号和第WO2011/061492号中描述的Fab-Fv、Fab-dsFv、Fab-Fv-Fv、Fab-scFv-scFv、Fab-Fv-Fc和Fab-dsFv-PEG片段，所有这些国际专利申请公布中关于它们的对抗原结合部分的论述据此通过引用并入。多特异性抗原结合片段的另外的实例包括串联连接的V_HH片段。可选的抗原结合片段包含连接至两个scFv或dsscFv的Fab，每个scFv或dsscFv结合相同或不同的靶标(例如，一个scFv或dsscFv结合治疗性靶标，一个scFv或dsscFv通过结合例如白蛋白延长半衰期)。此类抗体片段描述于国际专利申请公布第WO2015/197772号中，所述国际专利申请公布据此通过引用以其整体，特别是关于抗体片段的论述并入。抗体片段及其产生方法在本领域是公知的，参见例如Verma等人，1998,Journal of Immunological Methods,216,165-181；Adair和Lawson,2005.Therapeuticantibodies.Drug Design Reviews—Online2(3):209-217。多特异性抗体或其抗原结合片段的实例(也被设想用于本公开的说明书中)包括二价、三价或四价抗体、双-scFv、双聚抗体、三聚抗体、四聚抗体、双抗体(bibody)和三抗体(tribody)(参见例如Holliger和Hudson,2005,Nature Biotech 23(9):1126-1136；Schoonjans等人2001,BiomolecularEngineering,17(6),193-202)。

本文关于抗体，特别是关于表位、结合亲和力和特异性以及活性的的公开内容，也适用于抗体片段和抗体样分子。应当理解，抗体片段也可以被表征为单克隆的、嵌合的、人源化的、完全人的、多特异性的、双特异性的等，并且下文对这些术语论述也涉及抗原结合片段。

上述抗体和抗原结合片段仅出于参考和举例的目的进行描述，并不限制本发明的范围。

在一个实施方案中，所述抗体或抗原结合片段包含结合结构域。结合结构域通常包含6个CDR，3个来自重链，3个来自轻链。在一个实施方案中，所述CDR在一个框架中，并一起形成可变区。因此，在一个实施方案中，抗体或抗原结合片段包含对抗原特异的结合结构域，所述结合结构域包含轻链可变区和重链可变区。

应当理解，可以对本发明提供的CDR或其它序列(例如可变结构域)进行一个或多个(例如1个、2个、3个或4个)氨基酸取代、添加和/或缺失，而不会显著改变抗体与FcRn结合的能力。本领域技术人员可以例如通过使用WO2014/019727中描述的测定FcRn结合和阻断的方法，容易地测试任何氨基酸取代、添加和/或缺失的效果。

在一个实例中，可以对本发明提供的抗体或片段中使用的框架区进行一个或多个(例如1个、2个、3个或4个)氨基酸取代、添加和/或缺失，其中与FcRn的结合亲和力被保留或增强。

抗体可变结构域中的残基通常根据Kabat等人设计的系统进行编号。该系统阐述于Kabat等人，1987,in Sequences of Proteins of Immunological Interest,USDepartment of Health and Human Services,NIH,USA(下文中为“Kabat等人(同上)")中。除非另有说明，否则在本说明书中使用该编号系统。

Kabat残基名称并不总是与氨基酸残基的线性编号直接对应。实际的线性氨基酸序列可包含比严格的Kabat编号更少或更多的氨基酸，对应于基本可变结构域结构的结构组件(无论是框架还是互补决定区(CDR))的缩短或插入。通过将抗体序列与“标准”Kabat编号的序列中的具有同源性的残基进行比对，可以确定给定抗体的残基的正确Kabat编号。

根据Kabat编号系统，重链可变结构域的CDR位于残基31-35(CDR-H1)、残基50-65(CDR-H12)和残基95-102(CDR-H13)。然而，根据Chothia(Chothia,C.和Lesk,A.M.J.Mol.Biol.,196,901-917(1987))，等价于CDR-H1的环从残基26延伸到残基32。因此，除非另有说明，本文采用的“CDR-H1”旨在指残基26至35，如Kabat编号系统和Chothia拓扑环定义的组合所述。

根据Kabat编号系统，轻链可变结构域的CDR位于残基24-34(CDR-L1)、残基50-56(CDR-L2)和残基89-97(CDR-L3)。

本公开的抗体和抗原结合片段阻断了FcRn，并因此可能阻止其在IgG的再循环中发挥作用。本文采用的阻断是指物理阻断，诸如阻断受体，但也包括抗体或片段结合表位的情况，所述表位导致例如构象变化，这意味着受体的天然配体不再结合。本发明的抗体分子与FcRn结合，从而减少或防止(例如抑制)FcRn与抗体恒定区的结合。

在一个实施方案中，所述抗体或抗原结合片段与IgG竞争结合FcRn。

在一个实例中，所述抗体或抗原结合片段作为人FcRn与人IgG结合的竞争性抑制剂。在一个实例中，所述抗体或抗原结合片段与FcRn上的IgG结合位点结合。在一个实例中，所述抗体或抗原结合片段不结合β2M。

用于本公开的抗体可以使用本领域已知的任何合适的方法获得。包括融合蛋白在内的FcRn多肽/蛋白质、表达(重组地或天然地)所述多肽的细胞(诸如活化的T细胞)可用于产生特异性识别FcRn的抗体。所述多肽可以是“成熟”多肽或其生物活性片段或衍生物。所述人蛋白质以编号P55899注册在Swiss-Prot中。在SEQ ID NO:94中提供了人FcRnα链的细胞外结构域。在SEQ ID NO:95中提供了β2M的序列。

在一个实施方案中，抗原是FcRn的突变形式，其被工程化以在细胞表面上呈现FcRn，使得在FcRn被细胞内化的情况下几乎没有或者没有动态处理，例如，这可通过在FcRnα链的细胞质尾部进行突变来实现，其中如Ober等人 2001Int.Immunol.13,1551–1559中所述，将二亮氨酸突变为二丙氨酸。

用于免疫宿主的多肽可以通过本领域公知的方法从包含表达系统的基因工程宿主细胞中制备，或者可以从天然生物来源中回收它们。在本申请中，术语“多肽”包括肽、多肽和蛋白质。除非另有说明，否则这些术语可互换使用。在一些情况下，FcRn多肽可以是更大的蛋白质诸如融合蛋白(例如与亲和标签或类似物融合的)的一部分。

在需要对动物进行免疫的情况下，可以通过使用公知和常规方案向动物(优选非人动物)施用所述多肽来获得针对所述FcRn多肽产生的抗体，参见例如Handbook ofExperimental Immunology,D.M.Weir(编辑)，第4卷，Blackwell Scientific Publishers,Oxford,England,1986)。许多温血动物，诸如兔、小鼠、大鼠、绵羊、牛、骆驼或猪，都可被免疫。然而，小鼠、兔、猪和大鼠通常最适合。

单克隆抗体可通过本领域已知的任何方法，诸如杂交瘤技术(Kohler&Milstein,1975,Nature,256:495-497)、三瘤技术、人B细胞杂交瘤技术(Kozbor等人，1983,Immunology Today,4:72)和EBV杂交瘤技术(Cole等人，Monoclonal Antibodies andCancer Therapy，第77-96页,Alan RLiss,Inc.,1985)制备。

用于本发明的抗体也可使用单淋巴细胞抗体方法，通过克隆和表达从单淋巴细胞产生的免疫球蛋白可变区cDNA来产生，所述单淋巴细胞被选择用于通过例如Babcook,J.等人，1996,Proc.Natl.Acad.Sci.USA93(15):7843-7848l；WO92/02551；WO2004/051268和国际专利申请第WO2004/106377号描述的方法产生特异性抗体。

抗体的筛选可使用测量与人FcRn的结合的测定和/或测量阻断IgG与受体结合的能力的测定来进行。结合试验的一个实例是ELISA，特别是使用固定在板上的人FcRn和人Fc的融合蛋白，并使用二级抗体来检测结合至融合蛋白的抗FcRn抗体。合适的拮抗和阻断试验的实例在本领域是公知的，并描述于WO2014/019727中。

本文所用的特异性旨在指仅识别其特异性抗原的抗体，或与对其非特异性抗原的结合相比，对其特异性抗原的结合亲和力显著更高(例如结合亲和力高至少5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍)的抗体。结合亲和力可通过如本文和WO2014/019727中所述的技术诸如BIAcore来测量。在一个实例中，本发明的抗体不结合β2微球蛋白(β2M)。在一个实例中，本发明的抗体结合食蟹猴FcRn。在一个实例中，本发明的抗体不结合大鼠或小鼠FcRn。

附图中提供了根据本公开的某些抗体的氨基酸序列和多核苷酸序列。

可用于本发明的其它抗体描述于WO2009/131702、WO2007/087289、WO2006/118772、WO2015/071330、WO2015/167293和WO2016/123521中,所述国际专利公布通过引用并入本文。实例还包括Momenta Pharmaceuticals的M281和Syntimmune的SYNT0001。

在一个实施方案中，根据本公开的抗体或片段是人源化的。

如本文中所用，术语“人源化的抗体分子”是指其中重链和/或轻链包含一个或多个CDR(如果需要，包括一个或多个经修饰的CDR)的抗体分子，所述CDR来自供体抗体(例如非人抗体，诸如鼠单克隆抗体)，被移植到接受者抗体(例如人抗体)的重链和/或轻链可变区框架中。有关综述请参见Vaughan等人，Nature Biotechnology,16,535-539,1998。在一个实施方案中，不是转移整个CDR，而是仅将本文以上所述的CDR中的任一个中的一个或多个特异性决定残基转移到人抗体框架中(参见，例如，Kashmiri等人，2005,Methods,36,25-34)。在一个实施方案中，仅将本文以上所述的CDR中的一个或多个的特异性决定残基转移到人抗体框架中。在另一个实施方案中，仅将本文以上所述的每个CDR的特异性决定残基转移到人抗体框架中。

当CDR或特异性决定残基被移植时，在考虑了CDR所源自的供体抗体的种类/类型的情况下，可使用任何合适的接受者可变区框架序列，包括小鼠、灵长类动物和人框架区。

合适地，根据本发明的人源化抗体具有包含人接受者框架区以及本文特别地提供的一个或多个CDR的可变结构域。因此，在一个实施方案中，提供了阻断结合人FcRn的人源化抗体，其中可变结构域包含人接受者框架区和非人供体CDR。

可用于本发明的人框架的实例为KOL、NEWM、REI、EU、TUR、TEI、LAY和POM(Kabat等人，同上)。例如，KOL和NEWM可用于重链，REI可用于轻链，EU、LAY和POM可用于重链和轻链。或者，可使用人种系序列；这些可从以下网站获得：http://vbase.mrc-cpe.cam.ac.uk/

在本发明的人源化抗体中，接受者重链和轻链不一定需要来源于相同的抗体，并且如果需要，可以包含具有源自不同链的框架区的复合链。

本发明人源化抗体的重链的一个这样的合适框架区与JH4(SEQ ID NO:56)一起源自人亚组VH3序列1-3 3-07。

因此，在一个实例中，提供了包含SEQ ID NO:1中给出的CDR-H1的序列、SEQ IDNO:2中给出的CDR-H2的序列和SEQ ID NO:3中给出的CDRH3的序列的人源化抗体，其中重链框架区与JH4一起来源自人亚组VH3序列1-3 3-07。

人JH4的序列如下：(YFDY)WGQGTLVTVS(Seq ID No:70)。YFDY基序是CDR-H3的一部分，而不是框架4的一部分(Ravetch,JV.等人，1981,Cell,27,583-591)。

在一个实例中，抗体的重链可变结构域包含SEQ ID NO:29中给出的序列。

本发明的人源化抗体轻链的合适框架区源自人种系亚组VK1序列2-1-(1)A30以及JK2(SEQ ID NO:54)。

因此，在一个实例中，提供了包含SEQ ID NO:4中给出的CDR-L1的序列、SEQ IDNO:5中给出的CDR-L2的序列和SEQ ID NO:6中给出的CDR-L3的序列的人源化抗体，其中轻链框架区与JK2一起源自人亚组VK1序列2-1-(1)A30。

JK2序列如下：(YT)FGQGTKLEIK(Seq ID No:71)。YT基序是CDR-L3的一部分，而不是框架4的一部分(Hieter,PA.等人，1982,J.Biol.Chem.,257,1516-1522)。

在一个实例中，抗体的轻链可变结构域包含SEQ ID NO:15中给出的序列。

在本发明的人源化抗体中，框架区不需要具有与接受者抗体完全相同的序列。例如，罕见残基可被改变为对于该接受者链类别或类型而言更频繁出现的残基。或者，可以改变接受者框架区中的选定残基，使得它们对应于供体抗体中相同位置处存在的残基(参见Reichmann等人，1998,Nature,332,323-324)。此类变化应保持在恢复供体抗体亲和力所需的最低限度。WO91/09967中阐述了选择接受者框架区中可能需要改变的残基的方案。

因此，在一个实施方案中，框架中的1个、2个、3个、4个或5个残基被变通的氨基酸残基取代。

因此，在一个实例中，提供了人源化抗体，其中至少重链可变结构域(Kabat编号)的位置3、位置24、位置76、位置93和位置94中的每一个位置处的残基是供体残基，参见例如SEQ ID NO:29中给出的序列。

在一个实施方案中，重链可变结构域的残基3被变通的氨基酸例如谷氨酰胺替代。

在一个实施方案中，重链可变结构域的残基24被变通的氨基酸例如丙氨酸替代。

在一个实施方案中，重链可变结构域的残基76被变通的氨基酸例如天冬酰胺替代。

在一个实施方案中，重链的残基93被变通的氨基酸例如丙氨酸替代。

在一个实施方案中，重链的残基94被变通的氨基酸例如精氨酸替代。

在一个实施方案中，根据本公开，在人源化重链可变区中，残基3是谷氨酰胺，残基24是丙氨酸，残基76是天冬酰胺，残基93是丙氨酸，残基94是精氨酸。

因此，在一个实例中，提供了人源化抗体，其中至少轻链可变结构域(Kabat编号)的位置36、位置37和位置58中的每一个位置处的残基是供体残基，参见例如SEQ ID NO:15中给出的序列。

在一个实施方案中，轻链可变结构域的残基36被变通的氨基酸例如酪氨酸替代。

在一个实施方案中，轻链可变结构域的残基37被变通的氨基酸例如谷氨酰胺替代。

在一个实施方案中，轻链可变结构域的残基58被变通的氨基酸例如缬氨酸替代。

在一个实施方案中，在根据本公开的人源化重链可变区中，残基36是酪氨酸，残基37是谷氨酰胺，残基58是缬氨酸。

在一个实施方案中，本公开提供了抗体序列，所述抗体序列与本文公开的序列在相关序列例如可变结构域序列、CDR序列或不包括CDR的可变结构域序列的部分或整个序列上具有80％相似性或同一性，例如具有85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相似性或同一性。在一个实施方案中，相关序列是SEQ ID NO:15。在一个实施方案中，相关序列是SEQ ID NO:29。

在一个实施方案中，本发明提供了结合包含重链的人FcRn的抗体分子，其中所述重链的可变结构域包含与SEQ ID NO:29中给出的序列具有至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性或相似性的序列。

在一个实施方案中，本发明提供了结合包含轻链的人FcRn的抗体分子，其中所述轻链的可变结构域包含与SEQ ID NO:15中给出的序列具有至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性或相似性的序列。

在一个实施方案中，本发明提供了结合人FcRn的抗体分子，其中所述抗体具有重链可变结构域，所述重链可变结构域与SEQ ID NO:29中给出的序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相似性或同一性，但其中所述抗体分子具有SEQ ID NO:1中给出的CDR-H1的序列、SEQ ID NO:2中给出的CDR-H2的序列和SEQ ID NO:3中给出的CDR-H3的序列。

在一个实施方案中，本发明提供了结合人FcRn的抗体分子，其中所述抗体具有与SEQ ID NO:15中给出的序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的相似性或同一性的轻链可变结构域，但其中所述抗体分子具有SEQ ID NO:4中给出的CDR-L1的序列、SEQ ID NO:5中给出的CDR-L2的序列和SEQ ID NO:6中给出的CDR-L3的序列。

在一个实施方案中，本发明提供了结合人FcRn的抗体分子，其中所述抗体具有重链可变结构域和轻链可变结构域，所述重链可变结构域与SEQ ID NO:29中给出的序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相似性或同一性，所述轻链可变结构域与SEQ ID NO:15中给出的序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％相似性或同一性，但其中所述抗体分子具有SEQ ID NO:1中给出的CDR-H1的序列、SEQ ID NO:2中给出的CDR-H2的序列、SEQ ID NO:3中给出的CDR-H3的序列、SEQ ID NO:4中给出的CDR-L1的序列、SEQ ID NO:5中给出的CDR-L2的序列和SEQ ID NO:6中给出的CDR-L3的序列。

如本文中所用，“同一性”表示在比对的序列中的任何特定位置，序列之间的氨基酸残基是相同的。如本文中所用，“相似性”表示在比对的序列中的任何特定位置，序列之间的氨基酸残基属于相似的类型。例如，亮氨酸可取代异亮氨酸或缬氨酸。经常可以相互取代的其它氨基酸包括但不限于：

-苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸(具有芳族侧链的氨基酸)；

-赖氨酸、精氨酸和组氨酸(具有碱性侧链的氨基酸)；

-天冬氨酸和谷氨酸(具有酸性侧链的氨基酸)；

-天冬酰胺和谷氨酰胺(具有酰胺侧链的氨基酸)；和

-半胱氨酸和甲硫氨酸(具有含硫侧链的氨基酸)。

可以容易地计算同一性和相似性的程度(Computational Molecular Biology,Lesk,A.M.，编辑，Oxford University Press,New York,1988；Biocomputing.Informaticsand Genome Projects,Smith,D.W.，编辑，Academic Press,New York,1993；ComputerAnalysis of Sequence Data，第1部分，Griffin,A.M.和Griffin,H.G.，编辑，HumanaPress,New Jersey,1994；Sequence Analysis in Molecular Biology,von Heinje,G.,Academic Press,1987,Sequence Analysis Primer,Gribskov,M.和Devereux,J.，编辑，MStockton Press,New York,1991,the BLASTTMsoftware available from NCBI(Altschul,S.F.等人，1990,J.Mol.Biol.215:403-410；Gish,W.&States,D.J.1993,NatureGenet.3:266-272.Madden,T.L.等人，1996,Meth.Enzymol.266:131-141；Altschul,S.F.等人，1997,Nucleic Acids Res.25:3389-3402；Zhang,J.&Madden,T.L.1997,Genome Res.7:649-656)。

本发明的抗体分子可包含具有全长重链和轻链的完整抗体分子或其片段，可以是但不限于Fab、经修饰的Fab、Fab’、经修饰的Fab’、F(ab’)₂、Fv、单结构域抗体(例如VH或VL或VHH)、scFv、二价、三价或四价抗体、双-scFv、双聚抗体、三聚抗体、四聚抗体和上述任何抗体的表位结合片段(参见例如Holliger和Hudson,2005,Nature Biotech.23(9):1126-1136；Adair和Lawson,2005,Drug Design Reviews-Online 2(3),209-217)。用于产生和制备这些抗体片段的方法在本领域公知的(参见例如Verma等人，1998,Journal ofImmunological Methods,216,165-181)。用于本发明的其它抗体片段包括国际专利申请WO2005/003169、WO2005/003170和WO2005/003171中描述的Fab和Fab’片段。多价抗体可包含多种特异性，例如双特异性的，或者可以是单特异性的(参见例如WO 92/22853、WO05/113605、WO2009/040562和WO2010/035012)。

在一个实施方案中，本公开的抗体分子是抗体Fab’片段，其包含例如对于轻链和重链分别如SEQ ID NO:15和29所示的可变区。在一个实施方案中，抗体分子具有包含SEQID NO:22中给出的序列的轻链和包含SEQ ID NO:36中给出的序列的重链。

在一个实施方案中，本公开的抗体分子是全长IgG1抗体，其包含例如对于轻链和重链分别如SEQ ID NO:15和29所示的可变区。在一个实施方案中，抗体分子具有包含SEQID NO:22中给出的序列的轻链和包含SEQ ID NO:72中给出的序列的重链。

在一个实施方案中，本公开的抗体分子是全长的IgG4形式，其包含例如对于轻链和重链分别如SEQ ID NO:15和29所示的可变区。在一个实施方案中，抗体分子具有包含SEQID NO:22中给出的序列的轻链和包含SEQ ID NO:87中给出的序列的重链。

在一个实施方案中，本公开的抗体分子是全长IgG4P形式，其包含例如对于轻链和重链分别如SEQ ID NO:15和29所示的可变区。在一个实施方案中，抗体分子具有包含SEQID NO:22中给出的序列的轻链和包含SEQ ID NO:43中给出的序列的重链。

如本文中所用，IgG4P是野生型IgG4同种型的突变，其中氨基酸241被脯氨酸替代，参见例如如Angal等人，Molecular Immunology,1993,30(1),105-108中所述，位置241处的丝氨酸已被改变为脯氨酸。

在一个实施方案中，根据本公开的抗体作为FcRn结合抗体融合蛋白提供，所述FcRn结合抗体融合蛋白包含免疫球蛋白部分，例如Fab或Fab’片段，和一个或两个与其直接或间接连接的单结构域抗体(dAb)，例如如WO2009/040562、WO2010035012、WO2011/030107、WO2011/061492和WO2011/086091中所述，所有所述文献均通过引用并入本文。

在一个实施方案中，融合蛋白包含两个结构域抗体，例如作为可变重链(VH)和可变轻链(VL)配对，任选通过二硫键连接。

在一个实施方案中，融合蛋白的Fab或Fab’元件对所述单结构域抗体具有相同或相似的特异性。在一个实施方案中，Fab或Fab’对所述单结构域抗体具有不同的特异性，也就是说融合蛋白是多价的。在一个实施方案中，根据本发明的多价融合蛋白具有白蛋白结合位点，例如其中的VH/VL对提供白蛋白结合位点。在一个这样的实施方案中，重链包含SEQID NO:50中给出的序列，轻链包含SEQ ID NO:46或SEQ ID NO:78中给出的序列。

在一个实施方案中，根据本公开的Fab或Fab’与PEG分子或人血清白蛋白缀合。

CA170_01519g57和1519以及1519.g57在本文中可变化地使用，用于指抗体可变区的特定对，其可以以多种不同的形式使用。这些可变区是SEQ ID NO:29中给出的重链序列和SEQ ID NO:15中给出的轻链序列(图1)。

本发明的抗体分子的恒定区结构域，如果存在的话，可在考虑抗体分子的推荐功能，特别是可能需要的效应子功能的情况下来选择。例如，恒定区结构域可以是人IgA、IgD、IgE、IgG或IgM结构域。特别地，当抗体分子旨在用于治疗性用途并且需要抗体效应子功能时，可以使用人IgG恒定区结构域，尤其是IgG1和IgG3同种型的恒定区结构域。或者，当抗体分子旨在用于治疗目的且不需要抗体效应子功能时，可以使用IgG2和IgG4同种型。应当理解，还可使用这些恒定区结构域的序列变体。例如，可使用其中如Angal等人，MolecularImmunology,1993,30(1),105-108中所述已将位置241处的丝氨酸改变为脯氨酸的IgG4分子。本领域技术人员还将理解，抗体可以经历多种翻译后修饰。这些修饰的类型和程度通常取决于用于表达抗体的宿主细胞系以及培养条件。此类修饰可包括糖基化、甲硫氨酸氧化、二酮哌嗪形成、天冬氨酸异构化和天冬酰胺脱酰胺化的变化。常见的修饰是由于羧肽酶的作用(如Harris,RJ.Journal of Chromatography 705:129-134,1995中所述)而导致的羧基末端碱性残基(诸如赖氨酸或精氨酸)的丢失。因此，抗体重链的C末端赖氨酸可能不存在。

在一个实施方案中，抗体重链包含CH1结构域，抗体轻链包含CL结构域(κ或λ)。

在一个实施方案中，轻链具有SEQ ID NO:22中给出的序列，重链具有SEQ ID NO:43中给出的序列。

在一个实施方案中，轻链具有SEQ ID NO:22中给出的序列，重链具有SEQ ID NO:72中给出的序列。

在一个实施方案中，来自抗体分子的C末端氨基酸在翻译后修饰期间被切割。

在一个实施方案中，来自抗体分子的N末端氨基酸在翻译后修饰期间被切割。

本公开还提供了可被本发明提供的抗体、特别是包含重链序列gH20(SEQ ID NO:29)和/或轻链序列gL20(SEQ ID NO:15)的抗体结合的人FcRn的特定区域或表位。

人FcRn多肽的这种特定区域或表位可通过本领域已知的任何合适的表位作图方法结合本发明提供的任何一种抗体来鉴定。此类方法的实例包括对源自FcRn的不同长度的肽筛选对本发明的抗体的结合，以确定能够与本发明的抗体特异性结合、包含与被所述抗体识别的表位的序列的最小片段。FcRn肽可以合成产生或通过FcRn多肽的蛋白水解消化产生。结合抗体的肽可以通过例如质谱分析来鉴定。在另一个实例中，NMR波谱或X射线晶体学可用于鉴定被本公开的抗体结合的表位。一旦被鉴定，如果需要，结合本公开的抗体的表位片段可以用作免疫原，以获得结合相同表位的另外的抗体。

在一个实施方案中，本公开的抗体结合如下所示的人FcRnα链细胞外序列：

加以下划线的残基是已知对人FcRn与人IgG的Fc区的相互作用至关重要的那些残基，以粗体突出显示的那些残基是参与FcRn与本公开的1519抗体的相互作用的残基，所述1519抗体包含重链序列gH20(SEQ ID NO:29)和轻链序列gL20(SEQ ID NO:15)。

在一个实例中，用于本发明的抗体是结合人FcRn的表位的抗FcRn抗体分子，所述表位包含选自SEQ ID NO:94的残基V105、P106、T107、A108和K109的至少一个氨基酸和选自SEQ ID NO:94的P100、E115、E116、F117、M118、N119、F120、D121、L122、K123、Q124、G128、G129、D130、W131、P132和E133的至少一个(例如至少2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个)残基。

在一个实施例中，如本文实施例中所述，使用与β2M复合的FcRnα链细胞外序列(SEQ ID NO:94)，通过X射线晶体学确定抗体分子的表位。

在一个实例中，用于本发明的抗体是结合人FcRn的表位的抗FcRn抗体分子，所述表位包含选自SEQ ID NO:94的残基V105、P106、T107、A108和K109的至少一个氨基酸和选自SEQ ID NO:94的E115、E116、F117、M118、N119、F120、D121、L122、K123和Q124的至少一个，例如至少2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个残基。

在一个实例中，用于本发明的抗体是结合人FcRn的表位的抗FcRn抗体分子，所述表位包含选自SEQ ID NO:94的残基V105、P106、T107、A108和K109的至少两个、三个、四个或五个氨基酸，和选自SEQ ID NO:94的E115、E116、F117、M118、N119、F120、D121、L122、K123和Q124的至少一个残基。

在一个实例中，用于本发明的抗体是结合人FcRn的表位的抗FcRn抗体分子，所述表位包含选自SEQ ID NO:94的残基V105、P106、T107、A108和K109的至少一个氨基酸和选自SEQ ID NO:94的P100、E115、E116、F117、M118、N119、F120、D121、L122、K123、Q124、G128、G128、G129、D130、W131、P132和E133的至少一个残基。

在一个实施例中，用于本发明的抗体是结合人FcRn的表位的抗FcRn抗体分子，所述表位包含选自SEQ ID NO:94的残基V105、P106、T107、A108和K109的至少一个氨基酸和选自SEQ ID NO:94的P100、M118、N119、F120、D121、L122、K123、Q124和G128的至少一个残基。

在一个实例中，用于本发明的抗体是结合人FcRn的表位的抗FcRn抗体分子，所述表位包含SEQ ID NO:94的残基V105、P106、T107、A108和K109和选自SEQ ID NO:94的P100、M118、N119、F120、D121、L122、K123、Q124和G128的至少一个残基。

在一个实例中，用于本发明的抗体是结合人FcRn的表位的抗FcRn抗体分子，所述表位包含SEQ ID NO:94的残基V105、P106、T107、A108和K109以及选自SEQ ID NO:94的P100、E115、E116、F117、M118、N119、F120、D121、L122、K123、Q124、G128、G129、D130、W131、P132和E133的至少一个残基。

在一个实例中，用于本发明的抗体是结合人FcRn的表位的抗FcRn抗体分子，所述表位包含SEQ ID NO:94的残基P100、V105、P106、T107、A108和K109以及选自SEQ ID NO:94的E115、E116、F117、M118、N119、F120、D121、L122、K123、Q124、G128、G129、D130、W131、P132和E133的至少一个残基。

在一个实例中，“至少一个残基”可以是1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个或16个残基。

在一个实例中，用于本发明的抗体是结合人FcRn的表位的抗FcRn抗体分子，所述表位包含SEQ ID NO:94的残基100、105至109、115至124和129至133或由所述残基组成。

交叉阻断根据本公开的抗体分子，特别是包含SEQ ID NO:29中给出的重链序列和SEQ ID NO:15中给出的轻链序列的抗体分子的结合的抗体可以类似地用于阻断FcRn的活性。因此，本公开还提供了用于本发明的抗FcRn抗体分子，其交叉阻断本文以上所述的任一种抗体分子与人FcRn的结合并且/或者被这些抗体中的任一种交叉阻断与人FcRn的结合。在一个实施方案中，这种抗体与如本文以上所述的抗体结合相同的表位。在另一个实施方案中，所述交叉阻断的中和抗体与这样的表位结合，所述表位与本文以上所述的抗体所结合的表位相邻并且/或者与本文以上所述的抗体所结合的表位重叠。

交叉阻断抗体可使用本领域中任何合适的方法来鉴定，例如通过使用其中交叉阻断抗体与人FcRn的结合阻止本发明抗体的结合(反之亦然)的竞争性ELISA或BIAcore测定来鉴定。此类交叉阻断测定可使用分离的天然或重组FcRn或合适的融合蛋白/多肽。在一个实例中，使用重组人细胞外结构域((SEQ ID NO:94)测量结合和交叉阻断。在一个实例中，重组人FcRnα链细胞外结构域以与β2微球蛋白(β2M)(SEQ ID NO:95)的复合物形式使用

在一个实施方案中，提供了用于本发明的抗FcRn抗体分子，其阻断FcRn与IgG的结合，并交叉阻断其重链包含SEQ ID NO:2中给出的序列并且其轻链包含SEQ ID NO:15中给出的序列的抗体与人FcRn的结合。在一个实施方案中，本发明提供的交叉阻断抗体抑制包含SEQ ID NO:29中给出的重链序列和SEQ ID NO:15中给出的轻链序列的抗体的结合大于80％，例如大于85％，诸如大于90％，特别地大于95％。

可选地或另外地，根据本发明这一方面的抗FcRn抗体可被包含SEQ ID NO:29中给出的重链序列和SEQ ID NO:15中给出的轻链序列的抗体交叉阻断与人FcRn的结合。因此，还提供了抗FcRn抗体分子，其阻断FcRn与IgG的结合，并被包含SEQ ID NO:29中给出的重链序列和SEQ ID NO:15中给出的轻链序列的抗体交叉阻断与人FcRn的结合。在一个实施方案中，由本发明的这一方面提供的抗FcRn抗体与人FcRn的结合被包含SEQ ID NO:29中给出的重链序列和SEQ ID NO:15中给出的轻链序列的抗体抑制大于80％，例如大于85％，诸如大于90％，特别地大于95％。

在一个实施方案中，本公开提供的交叉阻断抗体是完全人的。在一个实施方案中，本公开提供的交叉阻断抗体是人源化的。在一个实施方案中，本公开提供的交叉阻断抗体对人FcRn的亲和力为100pM或更低。在一个实施方案中，本公开提供的交叉阻断抗体对人FcRn的亲和力为50pM或更低。亲和力可以使用本文以下描述的方法来测量。

生物分子，诸如抗体或片段，含有酸性和/或碱性官能团，从而赋予分子以净正电荷或负电荷。总的“观察到的”电荷数量将取决于该实体的绝对氨基酸序列、3D结构中带电基团的局部环境和分子的环境条件。等电点(pI)是特定分子或其溶剂可及表面不带净电荷时的pH值。在一个实例中，本发明的FcRn抗体和片段可被工程化成具有合适的等电点。这可导致抗体和/或片段具有更强大的性质，特别是合适的溶解度和/或稳定性特征谱和/或改善的纯化特性。

因此，一方面，本公开提供了经工程化以具有与最初鉴定的抗体的等电点不同的等电点的人源化FcRn抗体。例如，可通过替换氨基酸残基，诸如用一个或多个碱性氨基酸残基替换酸性氨基酸残基，来工程化抗体。或者，可引入碱性氨基酸残基或可去除酸性氨基酸残基。或者，如果分子具有不可接受的高pI值，则可以根据需要引入酸性残基来降低pI。重要的是，在操作pI时，必须注意保持抗体或片段的理想活性。因此，在一个实施方案中，工程化的抗体或片段具有与“未修饰的”抗体或片段相同或基本相同的活性。

程序，诸如**ExPASY http://www.expasy.ch/tools/pi_tool.html,和http:// www.iut-arles.up.univ-mrs.fr/w3bb/d_abim/compo-p.html，可用于预测抗体或片段的等电点。

用于本发明的抗体分子适合地具有高结合亲和力(特别地在纳摩尔浓度范围内)。可使用本领域已知的任何合适的方法(包括如本文实施例中所述的BIAcore)，使用分离的天然或重组FcRn或合适的融合蛋白/多肽来测量亲和力。在一个实例中，使用本文实施例(SEQ ID NO:94)和WO2014/019727中描述的重组人FcRn细胞外结构域来测量亲和力。在一个实例中，使用与β2微球蛋白(β2M)(SEQ ID NO:95)缔合的重组人FcRnα链细胞外结构域(SEQ ID NO:94)来测量亲和力。适用于本发明的抗体分子对分离的人FcRn的结合亲和力约为1nM或更低。在一个实施方案中，本发明的抗体分子具有约500pM或更低(即更高的亲和力)的结合亲和力。在一个实施方案中，本发明的抗体分子具有约250pM或更低的结合亲和力。在一个实施方案中，本发明的抗体分子具有约200pM或更低的结合亲和力。在一个实施方案中，本发明提供了结合亲和力约为100pM或更低的抗FcRn抗体。在一个实施方案中，本发明提供了结合亲和力约为100pM或更低的人源化抗FcRn抗体。在一个实施方案中，本发明提供了结合亲和力为50pM或更低的抗FcRn抗体。

重要的是，用于本发明的抗体能够在pH6和pH7.4下以相当的结合亲和力结合人FcRn。因此，有利的是，所述抗体即使在内体中也能继续结合FcRn，从而最大限度地阻断FcRn与IgG的结合。

在一个实例中，当在pH6和pH7.4下测量时，本公开提供了结合亲和力为100pM或更低的抗FcRn抗体。在一个实例中，当在pH6和pH7.4下测量时，用于本发明的抗体是在pH6和pH7.4下测量时结合亲和力为50pM或更低的抗FcRn抗体。

本发明的抗体或结合片段的亲和力，以及结合剂(诸如抗体)抑制结合的程度，可由本领域普通技术人员使用常规技术，例如由Scatchard等人(Ann.KY.Acad.Sci.51:660-672(1949))描述的那些技术或使用诸如BIAcore等的系统通过表面等离子共振(SPR)来测定。对于表面等离子共振，靶分子被固定在固相上，并暴露于沿流动池流动的流动相中的配体。如果配体结合到固定的靶标上，局部折射率会发生变化，导致SPR角的变化，这可通过检测反射光强度的变化来实时监测。可以分析SPR信号的变化速率，以产生结合反应的缔合和解离阶段的表观速率常数。这些值的比率给出了表观平衡常数(亲和力)(参见，例如，Wolff等人，Cancer Res.53:2560-65(1993))。

在本发明中，通常如下使用SPR来测定测试抗体分子的亲和力。在固相上捕获测试抗体分子，在流动相中，在捕获的抗体上方运行与β2M非共价复合的人FcRnα链细胞外结构域，并测定测试抗体分子对人FcRn的亲和力。可使用任何合适的方法，例如使用抗Fc或抗Fab’特异性捕获剂将测试抗体分子捕获在固相芯片表面上。在一个实例中，在pH6下测定亲和力。在一个实例中，在pH7.4下测定亲和力。

应当理解，可使用本领域已知的任何合适的方法来改变本发明提供的抗体的亲和力。因此，本发明还涉及本发明抗体分子的变体，其具有改善的对FcRn的亲和力。此类变体可通过许多亲和成熟方案获得，包括突变CDR((Yang等人，J.Mol.Biol.,254,392-403,1995)、链改组(Marks等人，BBio/Technology,10,779-783,1992)、大肠杆菌增变株的使用(Low等人，J.Mol.Biol.,250,359-368,1996)、DNA改组(Patten等人，Curr.Opin.Biotechnol.,8,724-733,1997)、噬菌体展示(Thompson等人，J.Mol.Biol.,256,77-88,1996)和有性PCR(Cramer等人，Nature,391,288-291,1998)。Vaughan等人(同上)论述了这些亲和成熟方法。

在一个实施方案中，用于本发明的抗体分子阻断人FcRn活性。WO2014/019727中描述了适用于测定抗体阻断FcRn的能力的测定法。WO2014/019727中也描述了用于确定抗体是否阻断FcRn与循环IgG分子的相互作用的合适测定法，以及用于体外确定抗体分子阻断IgG再循环的能力的合适测定法。

如果需要，用于本发明的抗体可以与一种或多种效应分子缀合。应当理解，效应分子可以包含单个效应分子或者两个或更多个这样的分子，它们被如此连接以形成可以附接于本发明抗体的单个部分。当需要获得与效应分子连接的抗体片段时，这可以通过标准的化学或重组DNA方法制备，其中抗体片段直接或通过偶联剂与效应分子连接。将此类效应分子与抗体缀合的技术在本领域中是公知的(参见，Hellstrom等人，Controlled DrugDelivery，第2版，Robinson等人，编辑，1987，第623-53页；Thorpe等人，1982,Immunol.Rev.,62:119-58和Dubowchik等人，1999,Pharmacology and Therapeutics,83,67-123)。特定的化学过程包括例如WO 93/06231、WO 92/22583、WO 89/00195、WO 89/01476和WO 03/031581中描述的那些过程。或者，当效应分子是蛋白质或多肽时，可使用重组DNA程序(例如WO 86/01533和EP0392745中所述的)实现键联。

如本文中所用，术语效应分子包括例如抗肿瘤剂、药物、毒素、生物活性蛋白质，例如酶、其它抗体或抗体片段、合成或天然存在的聚合物、核酸及其片段，例如DNA、RNA及其片段，放射性核素，特别是放射性碘、放射性同位素，螯合金属、纳米颗粒和报告基团，诸如荧光化合物或可通过NMR或ESR光谱检测的化合物。

效应分子的实例可包括细胞毒素或细胞毒性剂，包括任何对细胞有害(例如杀死)的剂。实例包括补体抑素(combrestatins)、多拉司他汀(dolastatins)、埃博霉素(epothilones)、星形孢菌素、美登木素生物碱、海绵抑素、力索新(rhizoxin)、软海绵素(halichondrins)、杆孢菌素(roridins)、hemiasterlins、紫杉醇、细胞松弛素B、短杆菌肽D、溴化乙锭、依米丁、丝裂霉素、依托泊苷、替诺泊苷、长春新碱、长春碱、秋水仙碱、多柔比星、柔红霉素、二羟基炭疽菌素二酮、米托蒽醌、光辉霉素、放线菌素D、1-脱氢睾酮、糖皮质激素、普鲁卡因、丁卡因、利多卡因、普萘洛尔和嘌呤霉素及其类似物或同源物。

效应分子还包括，但不限于，抗代谢药(例如甲氨蝶呤、6-巯基嘌呤、6-硫鸟嘌呤、阿糖胞苷、5-氟尿嘧啶、达卡巴嗪)、烷化剂(例如双氯乙基甲胺、噻替哌(thioepa)、苯丁酸氮芥、美法仑、卡莫司汀(BSNU)和洛莫司汀(CCNU)、环磷酰胺、白消安、二溴甘露醇、链脲霉素、丝裂霉素C和顺二氯二胺铂(II)(DDP)顺铂)、蒽环类(例如柔红霉素(原道诺霉素)和多柔比星)、抗生素(例如更生霉素(原放线菌素)、博莱霉素、光辉霉素、氨茴霉素(AMC)、加利车霉素或多卡霉素(duocarmycins))和抗有丝分裂剂(例如长春新碱和长春碱)。

其它效应分子可包括螯合放射性核素，诸如¹¹¹In和⁹⁰Y、Lu¹⁷⁷、铋²¹³、锎²⁵²、铱¹⁹²和钨¹⁸⁸/铼¹⁸⁸；或药物，诸如但不限于烷基磷酸胆碱、拓扑异构酶I抑制剂、紫杉烷类和舒拉明。

其它效应分子包括蛋白质、肽和酶。目标酶包括但不限于蛋白水解酶、水解酶、裂解酶、异构酶、转移酶。目标蛋白质、多肽和肽包括但不限于免疫球蛋白、毒素诸如相思子豆毒蛋白、蓖麻毒素A、假单胞菌属(pseudomonas)外毒素或白喉毒素、蛋白质诸如胰岛素、肿瘤坏死因子、α-干扰素、β-干扰素、神经生长因子、血小板衍生生长因子或组织纤溶酶原激活剂、血栓形成剂或抗血管生成剂例如血管生长抑素(angiostatin)或内皮抑素、或生物反应调节剂诸如淋巴因子、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-2(IL-2)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、神经生长因子(NGF)或其它生长因子和免疫球蛋白。

其它效应分子可以包括在诊断中有用的可检测物质。可检测物质的实例包括各种酶、辅基、荧光材料、发光材料、生物发光材料、放射性核素、正电子发射金属(用于正电子发射断层摄影)和非放射性顺磁性金属离子。关于可与抗体缀合以用作诊断剂的金属离子，通常参见美国专利第4,741,900号。合适的酶包括辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、β-半乳糖苷酶或乙酰胆碱酯酶；合适的辅基包括链霉抗生物素蛋白、抗生物素蛋白和生物素；合适的荧光材料包括伞形酮、荧光素、异硫氰酸荧光素、罗丹明、二氯三嗪胺荧光素、丹磺酰氯和藻红蛋白；合适的发光材料包括鲁米诺；合适的生物发光材料包括萤光素酶、荧光素和水母发光蛋白；合适的放射性核素包括¹²⁵I、¹³¹I、¹¹¹In和⁹⁹Tc。

在另一个实例中，效应分子可以延长抗体在体内的半衰期，并且/或者降低抗体的免疫原性并且/或者增强抗体穿过上皮屏障向免疫系统的递送。这种类型的合适效应分子的实例包括聚合物、白蛋白、白蛋白结合蛋白或白蛋白结合化合物诸如WO05/117984中描述的那些。

当效应分子是聚合物时，其通常可以是合成的或天然存在的聚合物，例如任选取代的直链或支链聚亚烷基、聚亚烯基或聚氧化烯聚合物，或支链或无支链多糖，例如均聚或杂聚多糖。

可以存在于上述合成聚合物上的特定任选取代基包括一个或多个羟基、甲基或甲氧基。

合成聚合物的具体实例包括任选地取代的直链或支链聚(乙二醇)、聚(丙二醇)、聚(乙烯醇)或其衍生物，特别是任选地取代的聚(乙二醇)，诸如甲氧基聚(乙二醇)或其衍生物。

具体的天然存在的聚合物包括乳糖、直链淀粉、葡聚糖、糖原或其衍生物。

在一个实施方案中，聚合物是白蛋白或其片段，诸如人血清白蛋白或其片段。

如本文中所用，“衍生物”旨在包括反应性衍生物，例如硫醇选择性反应性基团，诸如马来酰亚胺等。反应性基团可与聚合物直接连接或通过接头片段与聚合物连接。应当理解，在一些情况下，这种基团的残基将作为抗体片段与聚合物之间的连接基团形成产物的一部分。

聚合物的大小可根据需要而变化，但通常平均分子量范围为500Da至50000Da，例如5000Da至40000Da，诸如20000Da至40000Da。具体来说，可以根据产品的预期用途(例如定位于某些组织如肿瘤或延长循环半衰期的能力)来选择聚合物的大小(关于综述，参见Chapman,2002,Advanced Drug Delivery Reviews,54,531-545)。因此，例如，当产品旨在离开循环并穿透组织，例如用于肿瘤治疗时，使用小分子量聚合物(例如分子量约为5000Da)可以是有利的。对于产品保持在循环中的应用，使用较高分子量(例如分子量在20000Da至40000Da的范围内)的聚合物可以是有利的。

合适的聚合物包括聚亚烷基聚合物，诸如聚(乙二醇)或特别是甲氧基聚(乙二醇)或其衍生物，特别是分子量在约15000Da至约40000Da范围内的聚合物。

在一个实例中，将用于本发明的抗体附接至聚(乙二醇)(PEG)部分。在一个具体实例中，抗体是抗体片段，可以通过位于抗体片段中的任何可用氨基酸侧链或末端氨基酸官能团(例如任何游离氨基、亚氨基、巯基、羟基或羧基)附接PEG分子。此类氨基酸可以天然存在于抗体片段中，或者可以使用重组DNA方法工程化到片段中(参见例如US 5,219,996；US5,667,425；WO98/25971,WO2008/038024)。在一个实例中，本发明的抗体分子是经修饰的Fab片段，其中所述修饰是在其重链的C末端添加一个或多个氨基酸，以允许效应分子的附接。合适地，额外的氨基酸形成经修饰的铰链区，该铰链区包含一个或多个半胱氨酸残基，效应器分子可以附接其上。多个位点可用来连接两个或更多个PEG分子。

合适地，PEG分子通过位于抗体片段中的至少一个半胱氨酸残基的巯基基团共价连接。附接至经修饰的抗体片段上的每个聚合物分子可以共价连接至位于片段中的半胱氨酸残基的硫原子。共价键联通常是二硫键，或者特别是硫-碳键。当巯基基团用作附接点时，可使用适当活化的效应分子，例如巯基选择性衍生物，诸如马来酰亚胺和半胱氨酸衍生物。如上所述，活化的聚合物可用作制备聚合物修饰的抗体片段的起始材料。活化的聚合物可以是任何含有硫醇反应性基团(诸如α-卤代羧酸或酯，例如碘乙酰胺、酰亚胺，例如马来酰亚胺、乙烯基砜或二硫化物)的聚合物。此类起始材料可以从商业上(例如从Nektar，前身为Shearwater Polymers Inc.,Huntsville,AL,USA)获得，或者可使用常规化学方法从商购可得的起始材料制备。特定的PEG分子包括20K甲氧基-PEG-胺(可从Nektar(原为Shearwater)、Rapp Polymere和SunBio获得)和M-PEG-SPA(可从Nektar(原为Shearwater)获得)。

在一个实施方案中，抗体是例如根据EP 0948544或EP1090037中公开的方法PEG化的，即具有PEG(聚(乙二醇))共价附接至其上的经修饰的Fab片段、Fab’片段或diFab[另参见"Poly(ethyleneglycol)Chemistry,Biotechnical and Biomedical Applications",1992,J.Milton Harris(编辑),Plenum Press,New York,"Poly(ethyleneglycol)Chemistry and Biological Applications",1997,J.Milton Harris和S.Zalipsky(编辑),American Chemical Society,Washington DC and"Bioconjugation ProteinCoupling Techniques for the Biomedical Sciences",1998,M.Aslam和A.Dent,GrovePublishers,New York；Chapman,A.2002,Advanced Drug Delivery Reviews 2002,54:531-545]。在一个实例中，PEG附接至铰链区的半胱氨酸。在一个实例中，PEG修饰的Fab片段具有共价连接至经修饰的铰链区中的单个硫醇基团的马来酰亚胺基团。赖氨酸残基可以共价连接至马来酰亚胺基团，并且赖氨酸残基上的每个胺基团可以附接至分子量约为20,000Da的甲氧基聚(乙二醇)聚合物。因此，附接至Fab片段的PEG的总分子量约为40,000Da。

特定的PEG分子包括N,N’-双(甲氧基聚(乙二醇)(MW 20,000)修饰的赖氨酸的2-[3-(N-马来酰亚胺基)丙酰氨基]乙基酰胺，也称为PEG2MAL40K(可从Nektar(原为Shearwater)获得)。

PEG接头的替代来源包括NOF，其提供GL2-400MA3(其中在下面的结构中的m为5)和GL2-400 MAA(其中m为2)，n约为450:

也就是说，每个PEG都约为20,000Da。

因此，在一个实施方案中，PEG是2,3-双(甲基聚氧乙烯-氧基)-1-{[3-(6-马来酰亚胺基-1-氧代己基)氨基]丙氧基}己烷(2臂支化PEG,-CH₂)₃NHCO(CH₂)₅-MAL，Mw 40,000，被称为SUBRIT GL2-400 MA3。

以下类型的其它替代PEG效应分子：

可以从Dr Reddy,NOF和Jenkem获得。

在一个实施方案中，提供了PEG化(例如利用本文所述的PEG)的抗体，其中PEG通过链中氨基酸226(例如重链的氨基酸226(通过顺序编号)，例如SEQ ID NO:36的氨基酸226)处或其附近的半胱氨酸残基附接。

在一个实施方案中，本公开提供了包含一个或多个PEG聚合物，例如1或2个聚合物诸如一个或多个40kDa的聚合物的Fab’PEG。

在一个实施方案中，提供了与聚合物诸如PEG分子、淀粉分子或白蛋白分子缀合的Fab’。

在一个实施方案中，所述抗体或片段与淀粉分子缀合，例如以延长半衰期。将淀粉与蛋白质缀合的方法是如US 8,017,739(通过引用并入)中所述的。

本公开还提供了编码本发明抗体分子的重链和/或轻链的分离的DNA序列。合适地，所述DNA序列编码本发明抗体分子的重链或轻链。本发明的DNA序列可包含合成DNA，例如通过化学处理产生的合成DNA、cDNA、基因组DNA或其任意组合。

编码本发明抗体分子的DNA序列可通过本领域技术人员公知的方法获得。例如，编码部分或全部抗体重链和轻链的DNA序列可以根据需要从确定的DNA序列或基于相应的氨基酸序列合成。

编码接受者框架序列的DNA对本领域技术人员来说是广泛可用的，并且可以基于它们已知的氨基酸序列容易地合成。

分子生物学的标准技术可用于制备编码本发明抗体分子的DNA序列。可使用寡核苷酸合成技术完全或部分合成所需的DNA序列。可酌情使用定点诱变和聚合酶链反应(PCR)技术。

本文中提供了合适的DNA序列的实例。

在SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17和SEQ ID No:90中提供了编码1519轻链可变区的合适的DNA序列的实例。在SEQ ID NO:30、SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:92中提供了编码1519重链可变区的合适的DNA序列的实例。

在SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:75和SEQ ID NO:91中提供了编码1519轻链(可变和恒定)的合适的DNA序列的实例。

在SEQ ID NO:37、38和76(Fab’)、SEQ ID NO:72或85(IgG1)、SEQ ID NO:44或93(IgG4P)和SEQ ID NO:88(IgG4)中提供了编码1519重链(可变和恒定，取决于形式)的合适的DNA序列的实例。

本公开还涉及包含一个或多个本发明的DNA序列的克隆性载体或表达载体。因此，提供了包含编码本发明抗体的一个或多个DNA序列的克隆性载体或表达载体。合适地，克隆性载体或表达载体包含两个DNA序列，分别编码本发明抗体分子的轻链和重链，以及合适的信号序列。在一个实例中，所述载体包含重链与轻链之间的基因间序列(参见WO03/048208)。

籍以构建载体的一般方法、转染方法和培养方法是本领域技术人员所公知的。在这方面，可参考“Current Protocols in Molecular Biology”,1999,F.M.Ausubel(编辑),Wiley Interscience,New York和由Cold Spring Harbor出版社出版的Maniatis Manual。

还提供了包含一种或多种克隆性载体或表达载体的宿主细胞，所述载体包含编码本发明抗体的一种或多种DNA序列。任何合适的宿主细胞/载体系统可用于表达编码本发明抗体分子的DNA序列。可使用细菌(例如大肠杆菌(E.coli))和其它微生物系统，或者也可以使用真核(例如哺乳动物)宿主细胞表达系统。合适的哺乳动物宿主细胞包括CHO、骨髓瘤或杂交瘤细胞。

用于本发明的合适类型的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞可包括CHO和CHO-K1细胞，包括dhfr-CHO细胞，诸如CHO-DG44细胞和CHO-DXB11细(可以与DHFR选择标记一起使用)或CHO-K1-SV细胞(可与谷氨酰胺合成酶选择标记一起使用)。用于表达抗体的其它细胞类型包括淋巴细胞系，例如NSO骨髓瘤细胞和SP2细胞、COS细胞。

本公开还提供了用于产生根据本发明的抗体分子的方法，其包括在适于导致从编码本发明抗体分子的DNA表达蛋白质的条件下培养含有本发明载体的宿主细胞，以及分离所述抗体分子。

抗体分子可以仅包含重链或轻链多肽，在这种情况下，仅需要使用重链或轻链多肽编码序列来转染宿主细胞。为了产生包含重链和轻链两者的产物，可以用两种载体转染细胞系，第一载体编码轻链多肽，第二载体编码重链多肽。或者，可以使用单一载体，所述载体包含编码轻链和重链多肽的序列。

用于本发明的抗体可以以药物或诊断组合物的形式提供，所述组合物包含本公开的抗体分子与一种或多种药学上可接受的赋形剂、稀释剂或载体的组合。所述组合物通常作为无菌药物组合物的一部分提供，所述药物组合物通常包含药学上可接受的载体。本发明的药物组合物可以另外包含药学上可接受的赋形剂。

本公开还提供了制备药物或诊断组合物的方法，其包括将本发明的抗体分子与一种或多种药学上可接受的赋形剂、稀释剂或载体一起添加和混合。

抗体分子可以是药物或诊断组合物中的唯一活性成分，或者可以伴有其它活性成分，包括其它抗体成分或非抗体成分，诸如类固醇或其它药物分子，在一个实例中，这些是其半衰期独立于FcRn结合的药物分子。

药物组合物可以方便地以单位剂量形式呈现，每剂含有预定量的本发明活性剂。

根据本公开的抗体的治疗剂量在体内没有表现出明显的毒理学效应。

组合物可被单独施用于患者，也可以与其它药剂、药物或激素组合施用(例如同时、依次或单独施用)。在一个实施方案中，根据本公开的抗体或抗原结合片段与胆碱酯酶抑制剂、免疫抑制剂或免疫调节剂一起使用。

在一个实施方案中，根据本公开的抗体或抗原结合片段与免疫抑制剂疗法(诸如类固醇，特别是泼尼松)一起使用。在一个实施方案中，根据本公开的抗体或抗原结合片段与胆碱酯酶抑制剂诸如吡啶斯的明(pyridostigmine)一起使用。

在一个实施方案中，根据本公开的抗体或抗原结合片段与免疫抑制剂诸如环孢霉素或他克莫司一起使用。

在一个实施方案中，根据本公开的抗体或片段与利妥昔单抗或其它B细胞疗法一起使用。

在一个实施方案中，根据本公开的抗体或片段与任何B细胞或T细胞调节剂或免疫调节剂一起使用。实例包括甲氨蝶呤、麦考酚酯(microphenyolate)和硫唑嘌呤。

合适的伴随疗法(concomitant therapy)的实例描述于本文的实施例中。在一个实例中，生物制品不允许作为伴随疗法。

药学上可接受的载体本身不应诱导对接受该组合物的个体有害的抗体产生，并且不应有毒。合适的载体可以是大的、缓慢代谢的大分子，诸如蛋白质、多肽、脂质体、多糖、聚乳酸、聚乙醇酸、多聚氨基酸、氨基酸共聚物和无活性病毒颗粒。

可使用药学上可接受的盐，例如无机酸盐，诸如盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐和硫酸盐，或有机酸盐，诸如乙酸盐、丙酸盐、丙二酸盐和苯甲酸盐。

治疗性组合物中的药学上可接受的载体可以另外包含液体，诸如水、盐水、甘油和乙醇。另外，辅助物质，诸如润湿剂或乳化剂或pH缓冲物质，可以存在于此类组合物中。此类载体使得药物组合物能够被配制成片剂、丸剂、锭剂、胶囊剂、液体、凝胶、糖浆剂、浆液和悬浮液，以供患者摄取。

合适的施用形式包括适于肠胃外施用的形式，例如通过注射或输注，例如通过推注注射或连续输注。当产品用于注射或输注时，其可采取在油性或水性载体中的悬浮液、溶液或乳液的形式，并且其可包含配制剂，诸如助悬剂、防腐剂、稳定剂和/或分散剂。或者，抗体分子可呈无水形式，以便在与适当的无菌液体一起使用之前进行复原。

一旦配制，本发明的组合物可以直接施用于受试者。待治疗的受试者可以是动物。然而，在一个或多个实施方案中，所述组合物适于对人受试者施用。

合适地，在根据本发明的制剂中，最终制剂的pH值与抗体或片段的等电点值不相似，例如，如果蛋白质的pI值在8至9或更高的范围内，则制剂的pH值为7可能是合适的。虽然不希望被理论所束缚，但认为这最终可以提供具有改善的稳定性的最终制剂，例如抗体或片段保留在溶液中。

本发明的药物组合物可以通过多种途径施用，包括但不限于口服、静脉内、肌内、动脉内、髓内、鞘内、脑室内、透肤、经皮(例如，参见WO98/20734)、皮下、腹膜内、鼻内、肠内、局部、舌下、阴道内或直肠途径。无针注射器(Hypospray)也可用于施用本发明的药物组合物。通常，治疗性组合物可以制成可注射的液体溶液或悬浮液。还可以制备适于注射前在液体媒介物中溶解或悬浮的固体形式。

组合物的直接递送通常通过注射、皮下、腹膜内、静脉内或肌内完成，或者被递送至组织的间隙。剂量治疗可以是单剂量方案或多剂量方案。优选地，递送是皮下递送。在一个实例中，递送是通过皮下输注进行的。在一个实例中，递送不是静脉内递送。

应当理解，组合物中的活性成分将是抗体分子。因此，其在胃肠道中易于降解。因此，如果组合物通过使用胃肠道的途径施用，则组合物将需要含有保护抗体免受降解、但一旦抗体被从胃肠道吸收就释放抗体的药剂。

可在Remington's Pharmaceutical Sciences(Mack Publishing Company,N.J.1991)中获得对药学上可接受的载体的全面论述。

本发明的抗体可以分散在溶剂(例如，呈溶液或悬浮液形式)中递送。其可悬浮在适当的生理溶液，例如盐水或其它药理学上可接受的溶剂或缓冲溶液中。悬浮液可使用例如冻干抗体。

治疗性悬浮液或溶液制剂还可包含一种或多种赋形剂。赋形剂是本领域公知的，包括缓冲剂(例如，柠檬酸盐缓冲剂、磷酸盐缓冲剂、乙酸盐缓冲剂和碳酸氢盐缓冲剂)、氨基酸、尿素、醇、抗坏血酸、磷脂、蛋白质(例如，血清白蛋白)、EDTA、氯化钠、脂质体、甘露醇、山梨醇和甘油。溶液或悬浮液可以封装在脂质体或可生物降解的微球中。所述制剂通常采用无菌制造工艺以基本无菌的形式提供。

这可包括通过过滤用于制剂的缓冲溶剂/溶液进行生产和灭菌，将抗体无菌悬浮在无菌缓冲溶剂溶液中，以及通过本领域普通技术人员熟悉的方法将制剂分配到无菌容器中。

一旦配制好，本公开的组合物可以直接施用于人受试者，尽管本公开也设想该方法可以用于非人受试者。在本公开中，所述人患有重症肌无力(MG)，在一个实例中为全身性重症肌无力，在一个实例中为中度至重度MG，在一个实例中为中度至重度全身性MG。下面展示了MG的临床分类工具，称为美国MG基金会(MGFA)临床分类(Jaretzki等人，2000)。这是一个5级分类(I至V)，其中较高的等级表示更严重的疾病。通常中度至重度被归类为II类至IVa类。

MGFA临床分类

I类：任何眼肌无力；可能有眼闭合虚弱。所有其它肌肉力量都正常。

II类：影响除眼肌以外的肌肉的轻度无力；也可能有任何严重度的眼肌无力。

A.IIa.主要影响肢体、轴肌(axial muscle)或两者。也可能较少累及口咽肌。

B.IIb.主要影响口咽肌、呼吸肌或两者。也可能较少或同等程度地累及肢体、轴肌或两者。

III类：影响除眼肌以外的肌肉的中度无力；也可能有任何严重度的眼肌无力。

A.IIIa.主要影响肢体、轴肌或两者。也可能较少累及口咽肌。

B.IIIb.主要影响口咽肌、呼吸肌或两者。也可能较少或同等程度地累及肢体、轴肌或两者。

IV类：影响除眼肌以外的肌肉的严重无力；也可能有任何严重度的眼肌无力。

A.IVa.主要影响肢体、轴肌或两者。也可能较少累及口咽肌。

B.IVb.主要影响口咽肌、呼吸肌或两者。也可能较少或同等程度地累及肢体、轴肌或两者。

V类：定义为插管，用或不用机械通气，除了在常规术后管理中使用之外。不带插管的进食管的使用将患者置于IVb类。

导致MG的主要病理生理学是针对烟碱乙酰胆碱受体(AChR)或肌肉特异性激酶(MuSK)蛋白的IgG自身抗体的异常产生，这两者都可使用本领域已知的标准方法，例如放射免疫沉淀、ELISA和基于细胞的测定进行测量。

因此，在一个实例中，所述人是抗AChR和/或抗MuSK自身抗体阳性的。在本公开的一个实例中，所述人患有中度至重度全身性MG，并且呈抗AChR和/或抗MuSK自身抗体阳性。在一个实例中，所述人患有中度至重度全身性MG，呈抗AChR和/或抗MuSK自身抗体阳性，并且正在考虑用IVIg或血浆置换(PLEX)进行治疗。

临床研究标准的正式建议确定了对经验证的疾病特异性措施的需求，以评估MG临床试验中的治疗反应，包括患者报告的生活措施的功能和生活质量的质量。这些建议导致了对定量MG评分(QMG)、MG-日常生活活动概况(MG-ADL)和MG综合评分(MG-C)的验证研究。本文以及图5、图6和图7中提供的这些量度为评估临床反应提供了一致的方法，并且包括以患者为中心的结果。这些结果量度(outcome measures)，特别是QMG和MG-ADL，被用作新MG疗法临床试验的主要终点。

因此，在一个实例中，人被诊断为中度至重度全身性重症肌无力，为抗AChR和/或抗MuSK自身抗体阳性并且/或者重症肌无力-日常生活活动(MG-ADL)评分至少为3和/或定量重症肌无力(QMG)评分至少为11。

在一个实例中，人被诊断为全身性重症肌无力，为抗AChR和/或抗MuSK自身抗体阳性，患有美国重症肌无力基金会(MGFA)II级至IVa级，并且/或者重症肌无力-日常生活活动(MG-ADL)评分至少为3和/或定量重症肌无力(QMG)评分至少为11。

MG的治疗仍然是困难的临床问题，需要长期单独使用大剂量皮质类固醇或与细胞毒性剂组合使用。许多被认为对MG有效的疗法没有足够的数据来明确支持它们的使用，并不是对所有的患者和疾患都有效，并且具有广泛的免疫抑制作用，导致相当大的毒性和治疗相关发病率。此外，由于疾病过程中的自然波动，许多患者需要对需要紧急治疗的急性情况的有效治疗。

在需要长期间歇性治疗的情况下PLEX和IVIg目前都用作改善症状的护理标准；然而，这两种治疗在美国均未被批准用于MG，而且所述治疗过程对患者来说是一种负担。因此，在这一患者群体中，对为全身性MG患者提供了更多的便利的有效的长期间歇性治疗存在显著的未满足的医疗需求。

在一个实例中，此类患者不再对其它疗法例如免疫抑制剂有反应。

因此，MG的治疗目标是提供长期间歇性治疗(针对疾病发作)和/或长期维持治疗。

因此，在一个实例中，本发明的治疗方法可用于MG的长期间歇性治疗。

因此，在一个实例中，本发明的治疗方法可用于MG的长期维持治疗。

在一个实例中，本发明的治疗方法可用于MG的长期间歇性治疗和长期维持治疗。

施用方案

所述组合物优选包含治疗有效量的抗体(或其抗原结合片段)。如本文中所用，术语“治疗有效量”是指治疗、改善或预防目标疾病或病症，或展示出可检测的治疗或预防效果所需的治疗药剂的量。“施用方案”包括施用的抗体或其片段的量(剂量)以及施用的时间安排(如果提供多剂的话)。

存在几种表征MG和治疗效果的方法，所述方法适合于检测受试者中的积极生物反应，在本文的实施例中进一步描述了这些方法。

一个评估是定量重症肌无力评分(QMG)分数(图5)。QMG是经验证的评估(Barnett等人，2012年)，分数越高，表明疾病越严重。每项的评分范围从无无力(0)至严重无力(3)，总评分的范围为0至39。总评分的3点变化被认为是临床相关的。

一项评估是重症肌无力日常生活活动(MG-ADL)评分(图7)。MGADL是在QMG基础上开发的8项PRO仪器(Wolfe等人，1999)。MGADL针对横跨眼部、延髓、呼吸道和轴向症状的症状和失能。在最近的研究中，进一步评估了MGADL的可靠性、有效性和反应性，并证明了2-点的改善表明临床改善(Muppidi,2012；Muppidi等人，2011)。MGADL总分的范围为0至24，分数越高表示失能越严重。

一项评估是MG综合评分(图6)。MG-综合量表是一项经过验证的评估(Burns等人，2010MG Composite and MG-QOL15 Study Group.The MGComposite:A valid andreliable outcome measure for myasthenia gravis.Neurology.2010年5月4日；74(18):1434-40.)，分数越高表示疾病越严重，3点的变化具有临床相关性。所述量表测试了10个项目，每个项目的权重不同。总分的范围为0至50。

如本文实施例所述，MG治疗的疗效可通过重症肌无力日常生活活动(MG-ADL)评分的降低(与基线相比)和/或定量重症肌无力定量评分(QMG)的降低和/或MG综合评分的降低来确定。

通过测量相对于基线的变化来确定治疗效果(临床反应)。例如，QMG应答者显示出相对于基线≥3.0点的改善。

在一个实例中，MG综合应答者显示出相对于基线≥3.0点的改善。

在一个实例中，MG综合应答者显示出相对于基线≥5.0点的改善。

在一个实例中，MG-ADL应答者显示出相对于基线≥3.0点的改善。

在一个实例中，MG-ADL应答者显示出相对于基线≥2.0点的改善。

其它评估包括测量IgG血清水平的降低和/或血清中MG特异性自身抗体(抗MuSK和/或抗AChR抗体)水平的降低。

如本文中所用，“治疗/处理(treating)”和“治疗/处理(treatment)”是指MG严重度的任何减轻，“预防(preventing)”或“防止(prevention)”是指MG症状发作的任何减轻或延迟。本领域普通技术人员将会理解，对MG或与其相关的症状的任何程度的免除或改善对受试者诸如人患者是有益的。通过在任何程度上降低受试者症状的严重度和/或延迟症状的出现来改善患者的生活质量。因此，在一个方面，在已经确定受试者患有MG(特别是全身性MG)或有患所述MG的风险后，尽快实施该方法。

在各个方面，所述抗体或其片段通过与治疗前(基线)相比在QMG评分、MG综合评分或MG-ADL评分方面获得改善的施用方案施用。评分的改善可以在例如初次施用抗体或其抗原结合片段后的1周、2周、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周或12周观察到。在一个实例中，在初次施用抗体或其抗原结合片段后的第29天或第43天或第50天观察到与基线相比的评分的改善。

改善是如上文针对临床反应所述的，例如，改善可以是相对于基线评分有≥3.0点的改善，诸如相对于基线QMG评分、MG综合评分和/或MG-ADL评分的≥3.0点的改善。

在一个实例中，改善可以是相对于基线评分的≥3.0点的改善，例如相对于基线QMG评分和/或MG综合评分和/或MG-ADL评分的≥3.0点的改善。

在一个实例中，改善可以是相对于基线评分≥3.0点的改善，例如相对于基线QMG评分≥3.0点的改善和/或相对于基线MG综合评分≥3.0点的改善和/或相对于基线MG-ADL评分≥2.0点的改善。

在一个实例中，与第43天的基线相比，MG-ADL评分得到改善，即MG-ADL评分降低至少2点，例如至少3点。

在一个实例中，与第43天的基线相比，MG综合评分得到改善，即MG综合评分降低至少3点。在一个实例中，MG综合评分降低了至少4点、5点或6点。

在一个实例中，与第43天的基线相比，QMG评分得到改善，即QMG评分降低了至少2点，例如至少3点。

可选地或另外地，所述抗体或其片段是通过这样的施用方案施用的，所述施用方案实现了与治疗前(基线)相比，IgG血清水平的降低和/或MG特异性自身抗体(抗MuSK和/或抗AChR抗体)血清水平的降低。在初次施用所述抗体或其抗原结合片段后的1周、2周、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周或12周，可观察到水平的降低。在一个实例中，在初次施用所述抗体或其抗原结合片段后的第29天或第43天或第50天观察到血清水平的降低。特别是与基线相比，IgG血清水平和/或MG特异性自身抗体(抗MuSK和/或抗AChR抗体)血清水平可降低至少50％、至少55％、至少60％、至少65％或至少70％。

人受试者的精确治疗有效量将取决于疾病状态的严重度、受试者的一般健康状况、受试者的年龄、体重和性别、饮食、施用的时间和频率、药物组合、反应敏感性和对疗法的耐受性/反应。通常，治疗有效量为4mg/kg至50mg/kg(例如，4mg/kg至25mg/kg，例如约7mg/kg、10mg/kg、15mg/kg或20mg/kg)。组合物可以方便地以单位剂量形式存在，每剂包含预定量的本公开的活性剂。本文所述的任何实施方案的剂量范围和方案包括但不限于范围在1mg-1000mg内的单位剂量(诸如每1-10周给予(通过任何施用途径，例如皮下或静脉内施用)100mg、140mg、160mg单位剂量)的剂量。另外合适的单位剂量可以是在250至1250mg范围内的剂量，例如选自280mg、420mg、560mg、840mg和1120mg的剂量。其它合适的单位剂量的实例可以是选自80mg、315mg、350mg、385mg、420mg、455mg、490mg、525mg、560mg、595mg、630mg、665mg、700mg、735mg、770mg、805mg、840mg、875mg、910mg、945mg、980mg、1015mg、1050mg、1085mg和1120mg。

因此，本发明提供了在有此需要的人中治疗或预防重症肌无力(MG)的方法，所述方法包括向所述人施用至少3剂，优选至少6剂抗FcRn抗体或其抗原结合片段，其中每剂独立地选自4mg/kg、7mg/kg、10mg/kg、15mg/kg和20mg/kg。

如上所述，也可以使用固定单位给药。在一个实例中，本发明还提供了在有此需要的人中治疗或预防重症肌无力(MG)的方法，所述方法包括向所述人施用至少3剂，优选至少6剂抗FcRn抗体或其抗原结合片段，其中每剂独立地选自280mg、420mg、560mg、840mg和1120mg，并且其中所述剂量任选地基于患者的体重来选择。

在一个实施例中，本发明还提供了在有此需要的人中治疗或预防重症肌无力(MG)的方法，所述方法包括向所述人施用至少3剂，优选至少6剂的抗FcRn抗体或其抗原结合片段，其中每剂选自280mg、315mg、350mg、385mg、420mg、455mg、490mg、525mg、560mg、595mg、630mg、665mg、700mg、735mg、770mg、805mg、840mg、875mg、910mg、945mg、980mg、1015mg、1050mg、1085mg和1120mg，并且其中所述抗FcRn抗体或其抗原结合片段任选地包含含有SEDID NO:29中给出的序列的重链和含有SED ID NO:15中给出的序列的轻链。同样，可以基于患者的体重来选择剂量。

在一个实例中，可使用跨越体重等级的固定单位剂量。

例如以1周的间隔皮下施用6剂(相当于大约7mg/kg)

·体重<50kg：施用的剂量为280mg，

·体重≥50kg并且<70kg：施用的剂量为420mg，

·体重≥70kg并且<100kg：施用的剂量为560mg，

·体重≥100kg；施用的剂量为840mg；

或者

例如以1周的间隔皮下施用6剂(相当于大约10mg/kg)，

·体重<50kg：施用的剂量为420mg，

·体重≥50kg并且<70kg：施用的剂量为560mg，

·体重≥70kg并且<100kg：施用的剂量为840mg，

·体重≥100kg：施用的剂量为1120mg。

在一个实例中，使用了相当于大约7mg/kg的固定单位剂量，在一个实例中，对于小于50kg的体重，剂量为280mg。在一个实例中，对于等于或大于50kg但小于70kg的体重，剂量为420mg。在一个实例中，对于等于或大于70kg但小于100kg的体重，剂量为560mg。在一个实例中，对于等于或大于100kg的体重，剂量为840mg。

因此，在一个实例中，本发明还提供了在有此需要的人中治疗或预防重症肌无力(MG)的方法，该方法包括向所述人施用至少3剂，优选至少6剂抗-FcRn抗体或其抗原结合片段，其中对于小于50kg的体重，剂量为280mg，对于等于或大于50kg但小于70kg的体重，剂量为420mg，对于等于或大于70kg但小于100kg的体重，剂量为560mg，对于等于或大于100kg的体重，剂量为840mg。

在一个实例中，使用了相当于大约10mg/kg的固定单位剂量，在一个实例中，对于小于50kg的体重，剂量为420mg。在一个实例中，对于等于或大于50kg但小于70kg的体重，剂量为560mg。在一个实例中，对于等于或大于70kg但小于100kg的体重，剂量为840mg。在一个实例中，对于等于或大于100kg的体重，剂量为1120mg。

因此，在一个实例中，本发明还提供了在有此需要的人中治疗或预防重症肌无力(MG)的方法，所述方法包括向所述人施用至少3剂，优选至少6剂抗-FcRn抗体或其抗原结合片段，其中对于小于50kg的体重，剂量为420mg，对于等于或大于50kg但小于70kg的体重，剂量为560mg，对于等于或大于70kg但小于100kg的体重，剂量为840mg，对于等于或大于100kg的体重，剂量为1120mg。

在一个实例中，对于高于或低于100kg的单个体重等级，使用固定单位剂量。在一个实例中，对于小于100kg的体重，固定单位剂量选自280mg、315mg、350mg、385mg、420mg、455mg、490mg、525mg、560mg、595mg、630mg、665mg、700mg、735mg、770mg、805mg、840mg、875mg、910mg、945mg、980mg、1015mg、1050mg、1085mg和1120mg。在一个实例中，对于小于100kg的体重，固定单位剂量为420mg或560mg或840mg。

因此，在一个实例中，本发明还提供了在有此需要的人中治疗或预防重症肌无力(MG)的方法，所述方法包括向所述人施用至少3剂，优选至少6剂抗FcRn抗体或其抗原结合片段，其中对于小于100kg的体重，所述剂量选自280mg、315mg、350mg、385mg、420mg、455mg、490mg、525mg、560mg、595mg、630mg、665mg、700mg、735mg、770mg、805mg、840mg、875mg、910mg、945mg、980mg、1015mg、1050mg、1085mg和1120mg。

在一个实例中，对于等于或大于100kg的体重，固定单位剂量选自280mg、315mg、350mg、385mg、420mg、455mg、490mg、525mg、560mg、595mg、630mg、665mg、700mg、735mg、770mg、805mg、840mg、875mg、910mg、945mg、980mg、1015mg、1050mg、1085mg和1120mg。

在一个实例中，对于等于或大于100kg的体重，固定单位剂量为840mg或1120mg。

因此，在一个实施例中，本发明还提供了在有此需要的人中治疗或预防重症肌无力(MG)的方法，所述方法包括向所述人施用至少3剂，优选至少6剂抗FcRn抗体或其抗原结合片段，其中对于等于或大于100kg的体重，所述剂量选自280mg、315mg、350mg、385mg、420mg、455mg、490mg、525mg、560mg、595mg、630mg、665mg、700mg、735mg、770mg、805mg、840mg、875mg、910mg、945mg、980mg、1015mg、1050mg、1085mg和1120mg。

在一个实例中，本发明还提供了在有此需要的人中治疗或预防重症肌无力(MG)的方法，所述方法包括向所述人施用至少3剂，优选至少6剂抗FcRn抗体或其抗原结合片段，其中对于小于100kg的体重，剂量为420mg或560mg或840mg，对于等于或大于100kg的体重，剂量为840mg或1120mg。

在一个实例中，本发明还提供了在有此需要的人中治疗或预防重症肌无力(MG)的方法，所述方法包括向所述人施用至少3剂，优选至少6剂抗FcRn抗体或其抗原结合片段，其中对于小于100kg的体重，剂量为420mg或560mg，对于等于或大于100kg的体重，剂量为840mg或1120mg。

在一个实例中，每周施用一定剂量的抗体或其抗原结合片段，例如每周施用一定剂量，持续至少3周。在一个实例中，每周施用一剂抗体，持续至少五或六周。治疗期(即，向受试者施用一剂或多剂抗体的时间段)可包括至少三周、至少四周、至少五周、至少六周、至少七周、至少八周或更长时间。在治疗期间可以施用任何合适数量的剂量，诸如本文所述的剂量和施用间隔时间。例如，可以在例如5周的治疗期(第0周、第1周、第2周、第3周、第4周和第5周)内向受试者施用6剂抗体。

因此，在一个方面，提供了在有此需要的人中治疗或预防重症肌无力(MG)的方法，所述方法包括向所述人施用至少3剂抗FcRn抗体或其抗原结合片段，其中每剂独立地选自4mg/kg、7mg/kg、10mg/kg、15mg/kg和20mg/kg。

在一个实例中，每剂为4mg/kg，例如以单独的六剂，特别是连续六周内单独的六剂施用。

在一个实例中，每个剂量为7mg/kg，例如以单独的六剂，特别是连续六周内单独的六剂施用。

在一个实例中，每个剂量为10mg/kg，例如以单独的六剂，特别是连续六周内单独的六剂施用。

在一个实例中，每个剂量为15mg/kg，例如以单独的六剂，特别是连续六周内单独的六剂施用。

在一个实例中，每个剂量为20mg/kg，例如以单独的六剂，特别是连续六周内单独的六剂施用。

如上所述，也可以采用固定单位给药，例如每剂可以是选自280mg、315mg、350mg、385mg、420mg、455mg、490mg、525mg、560mg、595mg、630mg、665mg、700mg、735mg、770mg、805mg、840mg、875mg、910mg、945mg、980mg、1015mg、1050mg、1085mg和1120mg的剂量，以单独的六剂，特别是连续六周内单独的六剂施用。

在一个实例中，每剂为280mg，例如以单独的六剂，特别是在连续六周内单独的六剂施用。

在一个实例中，每剂为420mg，例如以单独的六剂，特别是在连续六周内单独的六剂施用。

在一个实例中，每剂为560mg，例如以单独的六剂，特别是在连续六周内单独的六剂施用。

在一个实例中，每剂为840mg，例如以单独的六剂，特别是在连续六周内单独的六剂施用。

在一个实例中，每剂为1120mg，例如以单独的六剂，特别是在连续六周内单独的六剂施用。

如本文以上所述，固定单位给药可以基于体重等级，例如每周施用基于体重等级的选定剂量，持续至少连续六周。如上所述，例如，对于小于50kg的重量，使用280mg的剂量。

在一个实例中，所述方法在第三剂量与第四剂量之间使用给药假期(dosingholiday)。在一个实例中，给药假期为1周。在一个实例中，给药假期为2周。

任选地，所述方法使用具有不同给药方案的重复剂量给药策略，所述给药方案包括较高的初始剂量(即“负荷剂量”)，随后是一个或多个较低的剂量(即，一个或多个低于初始剂量的第二或附加剂量(“维持剂量”)，尽管也设想了较低的负荷剂量和随后较高的维持剂量。在一个实施方案中，维持剂量可以是负荷剂量的四分之一、三分之一、二分之一、三分之二、四分之三、相同、一又四分之一、一又三分之一、一又二分之一、一又三分之二、一又四分之三、两倍或更多倍。不含负荷剂量的多剂量方案也被设想为本公开的一部分。

在一个实施方案中，在施用负荷剂量后的间隔中施用一个或多个维持剂量。每个剂量的该间隔可以是一致的，也可以是不同的。该间隔可以是1天、1周、2周、3周、4周、每月、6周、8周、每隔一个月或以任何其它间隔。

因此，在一个实例中，本发明的治疗方法还包括施用一个或多个低于初始剂量的第二或附加剂量。

应当理解，这些额外剂量可以在较高“负荷剂量”的初始治疗期之后施用。

因此，在一个实例中，在优选4-6周的治疗期内初始给药之后，可以以较低的剂量和/或较低的给药频率进行进一步的维持给药治疗期。

在一个实例中，每个剂量为7mg/kg，例如在连续六周内以单独六剂施用，任选地随后再施用一个附加剂量。

在一个实例中，每个剂量为10mg/kg，例如在连续六周内以单独六剂施用，任选地随后再施用一个附加剂量。

在一个实例中，附加剂量是较低的“维持”剂量。在一个实例中，每个较低的(“维持”)剂量在4mg/kg与10mg/kg之间，优选为4mg/kg或7mg/kg。

在一个实例中，每个较低的(“维持”)剂量在4mg/kg至20mg/kg之间，优选为7mg/kg或10mg/kg，给药频率低于初始“负荷”剂量，例如低于每周一次，例如每2或4周或每月一次。

如上所述，这些维持剂量可以以任何合适的间隔(诸如1周、2周、3周、4周、每月、6周、8周、每隔一个月或以任何其它间隔)给药。

在一个实例中，维持剂量以每周一次的间隔给药。

在一个实例中，维持剂量以每2周一次的间隔给药。

在一个实例中，维持剂量以每4周一次的间隔给药。

在一个实例中，维持剂量以每月一次给药。

在一个实例中，较高的初始剂量(负荷剂量)包括在第一治疗期内以每周间隔用4mg/kg或7mg/kg或10mg/kg或15mg/kg或20mg/kg的6剂进行治疗，维持给药可包括以合适的间隔，诸如每2周、每3周、每4周、每月、每6周、每8周、每隔一个月或以任何其它间隔以4mg/kg或7mg/kg给药。

在一个实例中，较高的初始剂量(负荷剂量)包括在第一治疗期内以每周间隔用4mg/kg或7mg/kg或10mg/kg或15mg/kg或20mg/kg的6剂进行治疗，并且维持给药可包括以合适的间隔，诸如每2周、每3周、每4周、每月、每6周、每8周、每隔一个月或以任何其它间隔以4mg/kg或7mg/kg给药。

在一个实例中，较高的初始剂量(负荷剂量)包括在6周的第一治疗期内以每周间隔用10mg/kg的6剂进行治疗，并且维持给药可包括以合适的间隔，诸如每周、每2周、每3周、每4周、每月、每6周、每8周、每隔一个月或以任何其它间隔以7mg/kg给药。

在一个实例中，较高的初始剂量(负荷剂量)包括在6周的第一治疗期内以每周间隔用10mg/kg的6剂进行治疗，并且维持给药可包括以合适的不太频繁的间隔，诸如每2周、每3周、每4周、每月、每6周、每8周、每隔一个月或以任何其它间隔以10mg/kg给药。

如上所述，固定单位剂量也可用于本发明，任选地基于如本文以上所述的体重等级。在一个实例中，较高的初始剂量(负荷剂量)包括在第一治疗期内以每周间隔用280mg或420mg或560mg或840mg或1120mg的6剂进行治疗，并且维持给药可以包括(i)以合适的间隔诸如每周、每2周、每3周、每4周、每月、每6周、每8周、每隔一个月或以任何其它间隔以较低剂量给药，或者(ii)以较低频率以相同剂量给药。

本发明的治疗方法可适用于长期间歇性治疗和/或维持疗法两者。

应当理解，给药的频率可以由疾病的严重程度来确定，例如通过疾病生物标志物监测和/或通过监测患者的MG特异性自身抗体(抗MuSK和/或抗AChR抗体)血清水平和/或血清IgG水平来确定。

随着病情的改善，施用之间的时间安排可能会减少，如果病情恶化，施用之间的时间安排可能会增加，并根据急性发作的需要恢复到较高的剂量。

施用的时间安排也可通过监测患者抗AChR抗体滴度和/或抗MuSK滴度和/或血清IgG水平来确定。

牵涉MG发病机制的自身抗体可包括IgG和非IgG同种型。在一个实例中，本公开的治疗方法可用于治疗其中确定IgG为显性同种型的MG患者。

在本说明书的上下文中，包含旨在指包括。

在技术上合适之处，本发明的实施方案可以组合。

在本文中将实施方案描述为包含某些特征/要素。本公开还扩展至由所述特征/元件组成或基本上由所述特征/元件组成的单独实施方案。

诸如专利和申请等技术参考文献据此通过引用并入本文。

参考附图，在以下实施例中仅通过举例的方式进一步描述本发明，其中：

图1显示了某些氨基酸和多核苷酸序列。

图2MG0002研究设计(SubQ；UCB7665)

图3与基线相比，MG-ADL评分的变化(罗扎诺昔单抗7mg/kg/罗扎诺昔单抗4mg/kg)和(罗扎诺昔单抗7mg/kg/罗扎诺昔单抗7mg/kg)

图4QMG、MG-复合物、MG-ADL评分、血清IgG浓度和抗AChR抗体相对于基线的变化(罗扎诺昔单抗7mg/kg/罗扎诺昔单抗7mg/kg)

图5定量重症肌无力测试表

图6重症肌无力综合评分

图7重症肌无力日常生活活动(MG-ADL)评分

实施例

实施例1:

UCB7665最早描述于WO2014019727中，包含在本文中于SEQ ID NO 1-6中提供的CDR序列。其包含SEQ ID NO:22的轻链和SEQ ID NO:43的重链。

UCB7665具有INN罗扎诺昔单抗。

UCB 7665对hFcRn结合的亲和力(从WO2014019727复制的)

使用表面等离子体共振技术(SPR)在Biacore T200系统(GE Healthcare)上进行生物分子相互作用分析，并确定与人FcRn的细胞外结构域的结合。将人FcRn细胞外结构域作为人FcRnα链细胞外结构域(SEQ ID NO:94)与β2微球蛋白(β2M)(SEQ ID NO:95)之间的非共价复合物提供。使用HBS-EP⁺(GE Healthcare)作为运行缓冲液，将10mM NaAc,pH 5缓冲液中的Affinipure F(ab’)₂片段山羊抗人IgG(F(ab’)₂片段特异性的(用于Fab’-PEG捕获)或Fc片段特异性的(用于IgG1或IgG4捕获)(Jackson ImmunoResearch Lab,Inc.))通过胺偶联化学固定在CM5传感器芯片上，达到4000至5000响应单元(RU)的捕获水平。将50mM磷酸盐，pH6+150mM NaCl+0.05％P20或HBS-P,pH7.4(GE Healthcare)用作亲和测定的运行缓冲液。将抗体在运行缓冲液中稀释至4μg/ml(IgG4)。以10μl/min的速度进行60s的IgG4注射，用于被固定的抗人IgG F(ab’)₂捕获。以30μl/min的速度在捕获的抗人FcRn抗体上方将人FcRn细胞外结构域从20nM滴定至1.25nM，持续300s，然后解离1200s。以10μl/min的速度用2x 60s 50mM HCl再生表面。

使用T200评估软件(1.0版)分析数据。

pH7.4

pH6

pH7.4和pH6下的抗hFcRn 1519.g57 IgG4P的亲和力数据(三次实验的平均值)

UCB7665的晶体学和结合表位(从WO2014019727复制的)

测定了1519g57 Fab’和去糖基化的人FcRn细胞外结构域(与β2微球蛋白(SEQ IDNO:95)缔合的α链细胞外结构域(SEQ ID NO:94))的晶体结构，排除了FcRn寡糖以促进结晶。1519.g57 Fab’与10倍摩尔浓度过量的N-乙基马来酰亚胺反应，以防止diFab’的形成，并通过SEC(Akta FPLC上的S200)除去任何现有的DiFab’。人FcRn细胞外结构域经PNG酶F处理以除去N-连接的糖。为此，使用PBS(pH7.4)将FcRn样品浓度调节至5mg/ml，总体积为1ml。将200单位的PNG酶F(Roche)加入到该人FcRn溶液中。将其在37℃孵育约18小时，然后使用SDS PAGE检查去糖基化程度。反应完成后，将去糖基化的FcRn更换缓冲液至50mM乙酸钠,125mM NaCl,pH6.0中。

通过将试剂的混合物(Fab':FcRn::1.2:1，w/w)在室温下孵育60分钟形成复合物，然后使用SEC(使用Akta FPLC的S200)进行纯化。使用可从Qiagen获得的各种条件(约2000种条件)进行筛选。通过Formulatrix Rock Imager 1000进行孵育和成像(总孵育期为21天)。

与1519g57 Fab’结合时，FcRn结构没有明显变化(将该复合物与已公布的FcRn结构进行比较)。从晶体结构计算其二级结构含量为：α-螺旋9.4％；β-折叠片45.2％；3-10转角2.5％。

与1519g57 Fab’相互作用的残基全部在FcRnα链(而非β2M)中，并在下面用粗体显示。相关残基涵盖所有(除1个外)对结合Fc至关重要的残基。1519g57在覆盖Fc结合区的区域中结合，表明1519g57 Fab’对FcRn的阻断是通过简单的竞争实现的，抗FcRn因其优良的亲和力而有效。

AESHLSLLYH LTAVSSPAPG TPAFWVSGWL GPQQYLSYNS LRGEAEPCGA WVWENQVSWYWEKETTDLRI KEKLFLEAFK ALGGKGPYTL QGLLGCELGP DNTSVPTAKF ALNGEEFMNF DLKQGTWGGD WPEALAISQR WQQQDKAANK ELTFLLFSCP HRLREHLERG RGNLEWKEPP SMRLKARPSSPGFSVLTCSAFSFYPPELQL RFLRNGLAAG TGQGDFGPNS DGSFHASSSL TVKSGDEHHYCCIVQHAGLAQPLRVELESPAKSS

FcRnα链序列，显示参与与1519g57 Fab'相互作用的残基(粗体)和对与IgG的Fc相互作用至关重要的残基(加以下划线的)。除了1个以外，后者的所有残基都包含在前者中。

实施例2:

MG0002研究是一项2a期、多中心、随机化、研究者和受试者盲、有安慰剂对照、2-臂、重复剂量、有关治疗顺序的研究，其将评估采用UCB7665长期间歇性治疗中度至重度全身性重症肌无力(MG)患者的疗效、安全性和耐受性。在年龄≥18岁的受试者中，将UCB7665以4mg/kg或7mg/kg的皮下(sc)剂量施用。

这项研究计划在美利坚合众国(USA)、加拿大和欧洲的大约30个地点进行，可能扩展到其它地区和国家。总共42名受试者计划进入研究的治疗期。单个受试者的最大研究持续时间约为18周。

该研究将由以下3个时期组成：筛查、治疗和观察。筛查后，受试者将进入治疗期，治疗期将由第1给药期和之后的第2给药期组成。受试者将如下在每个给药期期间以每周间隔接受3剂的研究药品(IMP):

第1给药期为4周，采用2个平行臂(UCB7665 7mg/kg或安慰剂)。

给药期2将为2周，采用2个并行治疗方案(UCB7665 7mg/kg或UCB7665 4mg/kg)。

观察期将在最后一剂UCB7665后持续8周，并在第20次访视时安排最后一次访视(FV)。sc输注将持续约30分钟，并且每次输液后，受试者需要在医院/诊所停留至少4小时以进行安全监测。

主要疗效变量将为第9次访视(第29天)的定量MG(QMG)评分相对于基线的变化。次要疗效变量将为第9次访视(第29天)的MG-综合评分相对于基线的变化以及第9次访视(第29天)的MG-日常生活活动(MGADL)评分相对于基线的变化。其它疗效变量如下：

在治疗和观察期期间的每次预定评估时的QMG的值和相对于基线的变化；在治疗和观察期期间每次预定评估时的QMG响应者(相对于基线≥3.0点的改善)；在治疗和观察期期间每次预定评估时的MG-综合评分的值和相对于基线的变化；

在治疗和观察期期间每次预定评估时的MG综合响应者(相对于基线≥3.0点的改善)；在治疗和观察期期间每次预定评估时的MGADL的值和相对于基线的变化；在治疗和观察期期间每次预定评估时的MGADL响应者(相对于基线的≥3.0点的改善)；在治疗和观察期期间每次预定评估时的美国重症肌无力基金会(MGFA)分类；在治疗和观察期期间每次预定评估时的MG肌无力严重程度、疲劳程度和重症肌无力损害指数(MGII)评分的值和相对于基线的变化；

以及从基线到第9次访视，同意在参与地点进行该测量的受试者的抖动(单纤维肌电图[SFEMG])研究的平均连续差值(MCD)的变化。

其它变量和探索性变量包括：安全性和耐受性变量、药代动力学(PK)、药效学(PD)和免疫学变量。

安全性和耐受性变量包括以下内容：治疗突发不良事件的发生(TEAE)；生命体征值和相对于基线的变化(收缩血压和舒张血压[BP]、体温、脉搏率、呼吸率和体重)；12导联心电图(ECG)值和相对于基线的变化；实验室值(血液学、临床化学和尿液分析)和相对于基线的变化；经历严重头痛和/或中度至重度胃肠(GI)扰动的受试者中的探索性安全性生物标志物(可包括但不限于S100钙结合蛋白B[S100B]、神经元特异性烯醇化酶、前列腺素和/或其代谢物、血清素和类胰蛋白酶)相对于基线的变化；以及导致IMP退出的TEAE。

UCB7665随时间推移的血浆浓度将作为PK变量进行评估。主要PD变量将是血清总免疫球蛋白G(IgG)浓度相对于基线的最大下降；在治疗和观察期期间每次预定评估时的总血清IgG浓度的值和相对于基线的变化；在治疗和观察期期间每次预定评估时的血清IgG亚类浓度的值和相对于基线的变化；以及在治疗和观察期期间每次预定评估时的血清中MG特异性自身抗体(抗MuSK/抗AChR体)水平相对于基线的变化。另外，将评估治疗和观察期期间其它免疫学变量和其它探索性生物标志物相对于基线的变化。

研究变量

1 疗效变量

1.1 主要疗效变量

主要疗效变量是：

第9次访视(第29天)的QMG评分相对于基线的变化

1.2次要疗效变量

次要疗效变量为：

第9次访视(第29天)的MG综合评分相对于基线的变化

第9次访视(第29天)的MGADL评分相对于基线的变化

1.3其它疗效变量

另外的疗效变量为：

在治疗和观察期期间每次预定估时的QMG的值和相对于基线的变化

在治疗和观察期期间每次预定评估时的QMG响应者(相对于基线≥3.0点的改善)

在治疗和观察期期间每次预定评估时的MG综合评分的值和相对于基线的变化

在治疗和观察期期间每次预定评估时的MG综合响应者(相对于基线≥3.0点的改善)

在治疗和观察期期间每次预定评估时的MGADL的值和相对于基线的变化

在治疗和观察期期间每次预定评估时的MGADL响应者(相对于基线≥3.0点的改善)

在治疗和观察期期间每次预定评估时的MGFA分类

时期

在治疗和观察期期间每次预定评估时的MG肌肉无力和易疲劳性的值和相对于基线的变化

在治疗和观察期期间每次预定评估时的疲劳的值和相对于基线的变化

在治疗和观察期期间的每次预定评估时的MGII评分的值和相对于基线的变化

从基线到第9次访视，同意在参与地点进行该测量的受试者的抖动(SFEMG)研究的正常纤维对的百分比的变化。

从基线到第9次访视，同意在参与地点进行该测量的受试者的抖动(SFEMG)研究的电位间隔(interpotential interval，IPI)的MCD的变化。

研究设计

研究描述

这是一项2a期、多中心、随机化、研究者和受试者盲、有安慰剂对照、2-臂、重复剂量、治疗顺序的研究，其评估UCB7665作为患有中度至重度全身性MG的受试者的长期间歇性治疗的安全性和有效性。

约42名随机化的受试者将在来自美国、加拿大和欧洲的的大约30个地点被招募，以获得40个可评估的受试者的目标数量。

每个受试者的研究最长持续时间约为18周，由筛查期(1至28天)、治疗期(6周)和观察期(8周)组成。

筛查期:筛查期的目的是评估和确认受试者的资格。在筛查访视(第1次访视)期间，受试者将在进行任何研究相关程序之前签署书面知情同意书。将讨论研究期间合并用药的使用，并根据纳入/排除标准确定受试者的资格。筛查期总共不应超过28天。

治疗期:治疗期包括第1给药期和之后的第2给药期(参见图2)。受试者将如下在每个给药期期间以每周间隔接受3剂IMP。

第1给药期为4周，采用2个并行治疗组(UCB7665 7mg/kg或安慰剂)。

第2给药期为2周，采用2个并行治疗组(UCB7665 7mg/kg或UCB7665 4mg/kg)。

在接受IMP输注之前，将在治疗期中的每次访视时对受试者进行疗效评估。对于所有的安全性和有效性测量，建议使用《研究程序手册》中规定的顺序作为指南。

第1给药期：第1给药期将持续大约4周(第1天至第28天)并且包括第2次访视、第3次访视、第4次访视、第5次访视、第6次访视、第7次访视和8次访视。筛查期结束后，合格的受试者将在诊所/医院登记以进行随机访视(第2次访视)。继续符合资格要求的受试者将以1:1被随机分配接受7mg/kgUCB7665或安慰剂，通过以每周间隔进行约30分钟的sc输注持续3周(第2次访视、第4次访视和第6次访视)来进行施用，然后在第4周(访视8)进行评估。在第1给药期的第1次访视、第4次访视和第6次访视时，受试者需要在诊所/医院停留至少4小时，以便在输注后进行安全监测。一旦安全监测用药期结束后，受试者可以离开诊所/医院，而研究者或指定人员无需担心安全性。给药后24小时将进行后续电话访视，以评估受试者的状态(第3次、第5次和第7次访视)。受试者将在第8次访视时返回诊所/医院进行安全性和有效性评估。主要疗效终点，即将在第2给药期开始时，在重新随机化之前的第9次访视(第29天)时评估QMG评分相对于基线的变化。因此，在第9次访视时进行的疗效评估将在第1给药期中的最后一剂研究药物之后2周进行。

第2给药期：第2给药期将持续大约2周(第29天至第43天)，包括第9次、第10次、第11次、第12次、第13次和第14次访视。受试者将返回诊所进行第9次、第11次和第13次访视，以进行安全性和有效性评估。

在第9次访视时，在施用安全性和有效性评估后，最初在基线时随机分配到安慰剂或7mg/kg UCB7665的受试者将被以1:1重新随机分配，以每周间隔(第9次、第11次和第13次访视)接受通过30分钟sc输注施用的3剂的7mg/kg或3剂的4mg/kg。交互式响应技术(interactive response technology，IRT)将根据第1给药期f中接受的治疗对重新随机化进行分层。在第2给药期中，每次每周诊所访视(第9次、第11次和第13次访视)时，将要求受试者在确定的服药后期间留在诊所/医院至少4个小时以进行安全监测。一旦服药后期间安全监测结束且研究者或指定人员没有安全顾虑，则受试者可离开诊所/医院。后续电话访视将在服药后24小时进行以评估受试者的状态(第10次、第12次和第14次访视)。

观察期：所有的受试者必须在施用IMP的最终剂量后随访8周。对于第15、16、18和20次随访，受试者将返回诊所以进行功效和安全性评估。受试者或者将返回诊所/医院，或者对于第17和19次访视，如果可能并得到研究者和受试者的同意，则由经过认证的医疗保健专业人员进行家庭访视。观察期开始于IMP最终剂量后的那天(即第13次访视，第43天)；第15次访视(第50天)是观察期中的首次访视。

入选标准

要符合参加这项研究的条件，必须满足以下所有标准：

1.机构审查委员会(IRB)/独立道德委员会(IEC)批准的书面知情同意书由受试者签名并注明日期。

2.受试者在第1次访视(筛查)时的年龄≥18岁。

3.根据受试者的情况，受试者在第1次访视(筛查)时有确诊的MG诊断，并得到先前评估的支持。

4.研究者目前将考虑对该受试者进行免疫治疗(例如IVIG/PLEX)。

5.受试者在第1次访视(筛选)之前具有抗AChR或MuSK的自身抗体的确诊记录。

6.具有生育潜力的女性受试者必须在筛查访视时进行阴性血清妊娠测试，在第1周(第2次访视)时服用第一剂研究药物之前以及之后每次研究访视时进一步给药之前，通过尿液检测确认为阴性。有生育能力的女性受试者必须同意在研究期间和服用最后一剂研究药物后的2个月内使用高效的节育方法。

根据国际协调委员会(ICH)M3(R2)的说法，高效的节育形式是在一致且正确地使用时每年的失败率低于1％的方法。高效的节育方法包括：与抑制排卵相关的联合(含雌激素和孕酮)激素避孕(口服、植入、注射)，(在筛查前[第1次访视]必须稳定至少1个足月，并应在研究期间保持稳定)。

与抑制排卵相关的纯孕酮激素避孕药(口服、植入、注射)(在筛查前[第1次访视]必须稳定至少1个足月，并且在研究期间应保持稳定)。

释放孕酮的子宫内系统或TCu 380A子宫内节育器。

切除了输精管的伴侣(前提是唯一的伴侣并且伴侣有手术成功的医学证明)。

当符合人们的优选和通常的生活方式时，真正的异性性节制是可接受的避孕形式。定期禁欲(例如，日历、排卵、症状热(symptothermal)、排卵后方法)、在研究期间宣布禁欲和停药都是不可接受的避孕方法。

不同意使用节育措施的妇女必须是无生育能力的，其被定义为：绝经后(筛查访视前持续至少2年)，在筛查访视时通过血清卵泡刺激素水平>40mIU/mL验证的，或永久性绝育(例如，双侧输卵管闭塞、子宫切除术、双侧输卵管切除术)，或先天性不育

7.男性受试者及其女性伴侣的避孕方法：

在研究期间和最后一次IMP施用后3个月内性行为活跃时，有生育能力的男性必须愿意使用避孕套。

另外，男性受试者的有生育能力的女性伴侣必须愿意在研究期间和最后一次施用IMP后的3个月内使用高效避孕方法(如上)。

6.2排除标准

如果符合以下任一标准，受试者不得参加本研究:

1.受试者以前在本研究中接受过治疗，或者受试者以前接触过UCB7665。

2.受试者在筛查的前30天内参与了IMP(或医疗器械)的另一项研究，或目前正在参与IMP(或医疗器械)的另一项研究。

3.受试者已知对IMP的任何成分过敏。

4.受试者有高脯氨酸血症史，因为L-脯氨酸是UCB7665 IMP的成分。

伴随用药/治疗

允许的合并用药

研究过程中允许的稳定剂量的合并用药是

剂量注释

口服皮质类固醇(例如，泼尼松龙)

-基线前稳定2周

先前用≤30mg/周的甲氨蝶呤治疗6个月，并且在基线之前以稳定的剂量进行2个月

先前用≤3g/天的霉酚酸酯治疗6个月，并且在基线之前以稳定的剂量进行2个月

对于未改性的，环孢菌素≤5mg/kg/天

对于改性的(微乳液)≤4mg/kg/天

先前治疗6个月，并且基线之前以稳定的剂量进行2个月

先用≤3mg/kg/天的硫唑嘌呤治疗6个月，并且在基线之前以稳定的剂量进行2个月

胆碱酯酶抑制剂≤600mg吡啶斯的明/天

不需要稳定剂量—在疗效结果日保持剂量

先用≤5mg/天的他克莫司治疗6个月，并且在基线之前以稳定的剂量进行2个月

a如果谷水平≤300ng/L，则允许高于所列的剂量

b如果每日基于体重的总剂量>5mg，则应检查血浆谷水平，以确保受试者不超过推荐的治疗范围。

受试者不应从测试前的午夜开始服用吡啶斯的明(或任何乙酰胆碱酯酶抑制剂药物)(如果这样做医学上安全的话)，以确保测试标准化，但如果医学上不适当，则可以继续治疗，但对于研究期间的每一次评估，测试应尽可能在任何最后一次乙酰胆碱酯酶抑制剂药物抑制剂给药后的相同时间范围内进行。

疗效评估

1.定量重症肌无力量表

对于QMG量表的评估，研究人员将遵循MGFA的QMG手册的说明，如下文根据定量重症肌无力测试表所述(参见图5)。临床人员必须完成强制性培训并获得资格，以评估受试者的QMG评分(详细信息在研究程序手册中提供)。

受试者不应从测试前的午夜开始服用吡啶斯的明(或任何AChE抑制剂药物)(如果这样做医学上安全的话)，以确保测试标准化，但如果医学上不适当，则可以继续治疗，但对于研究期间的每一个评估，测试应尽可能在任何最后一次AChE抑制剂给药后的相同时间范围内进行。

该量表测试了13个项目，包括眼部和面部受累、吞咽、言语、肢体力量和用力肺活量(FVC)。为了评估FVC，每次测试受试者时都应使用相同的肺活量计，如果可能，应由同一个人进行评估。FVC的参数和正常值将在研究地点之间决定，以便所有地点使用相同的信息。QMG是经验证的评估((Barnett等人，2012)，得分越高，表明疾病越严重。每个项目的评分范围为无无力(0)至严重无力(3)，总得分范围为0至39。总分的3点变化被认为是临床相关的。测试大约需要30分钟才能完成。

一般说明

1.患者必须在测试前十二(12)小时停用吡啶斯的明(或任何乙酰胆碱酯酶抑制剂药物)(如果这样做在医学上安全的话)。

2.按照本手册中给出并在录像带上显示的顺序进行测试。

3.在测试开始前，根据制造商的说明，在测试当天校准呼吸设备。将校准记录放在可接近的文件夹中。

4.对于所有测量，记录实际数字和等级，即如果患者需要30秒才能看到双份，则在最右边的30/1框中记录30秒，等级为1。

5.患者必须坐着进行呼吸测试。

6.在评分表的末尾，将该患者的评分相加，得出总QMG评分。

定量MG评分

I.双重视觉(DOUBLE VISION)：

患者准备:患者坐着。询问病人是否正经历向前看的双重视觉。如果是，在评分表上记录0/3(实际时间/等级)。如果没有，让患者向右看一会儿，然后向左看，不要移动他们的头。如果患者仅在一个方向上看到双重视觉，则记录侧面，并将结果记录为0/3。如果没有眼球运动，记录为0/3。如果患者看不到双重视觉，或者在两个方向上都看到双重视觉，则让他们按照下面描述的方式向右凝视进行测试。

向患者解释：“我需要你面向前方。当我问的时候，不要转头看你的右边(左边)。如果你开始看到双面，请告诉我。"

检查者须知：患者的头通常会开始转向凝视的方向。尽量保持头部向前。记录时间和等级。例如：在15秒钟内可以明显看到双重视觉。在评分部分，记录15/1。

II.上睑下垂(向上凝视):

患者准备:患者坐着。让患者直视前方。如果上盖接触瞳孔，记录为0/3。让患者抬头看天花板，不要移动头部。

向患者解释：“我需要你面向前方。当我问的时候，抬头看天花板，不要移动你的头。一直抬头，直到我叫你放轻松。"

检查者须知：患者的头通常会开始向上移动。尽量保持头部向前。记录你看到任一眼睑(睫毛)开始下垂时的时间和等级。例如：右眼皮在9秒时开始下垂，记录9/2。如果两个眼睑都不接触瞳孔，记录60/0。

III.面部肌肉：

患者准备:患者面朝前坐着。

向患者解释：“闭紧眼睛。不要让我睁开你的眼睛。"

检查者须知：如果患者不能完全闭上任何一只眼睛，将等级记录为3。这次测试不需要时间分数。记录弱眼的等级。

IV.吞咽：

患者准备：患者坐着。将四盎司水(不加冰)倒入杯中。水不应该比饮水机冷。

向患者解释:"我需要你像平常一样喝这水."

检查者须知：在测试过程中倾听咳嗽和/或清咽声，并在测试后立即进行。不要让患者喝得比他们觉得舒服的给药还快。

V.言语：

患者准备：患者坐着。

向患者解释:"以舒适的速度大声从1数到50。"

检查者须知：由于口音不同，这是最难得分的测试之一。

当你注意到说话有鼻音或口齿不清时，记下数字。

VI.右臂和左臂伸出：

患者准备：患者需要坐在椅子上，双脚放在地板上。他们必须坐着，不能靠在椅背上。同时测试双臂。

手臂需要以90度向外，手掌向下。(演示这个姿势)。如果患者因肩部问题而无法将手臂抬高至90°，则不要测试该手臂。将肘部在整个机械范围内伸展。

向患者解释：“我需要你像这样向侧面伸出双臂。尽可能长时间保持手臂伸直。如果一只手臂比另一只更累，你可以放下那只手臂，保持另一只手臂向上。"

检查者须知：手臂开始下垂并不罕见。如果手臂从起始位置下降超过10°，提醒患者将手臂向上拉。如果患者可以向上拉手臂，但不能保持该姿势超过两秒，则停止该测试。如果一只手臂被放下，注意不要让患者开始向放下手臂的一侧倾斜，这样会给人一种他/她保持90度的表象。记录时间/等级(例如：右臂45秒是45/2；而左臂100秒是100/1)。

VII：用力肺活量：

患者准备:患者必须保持坐着进行这项测试。

向患者解释：“我在测试总肺活量。我要请你把这个管嘴(mouthpiece)拿离你的脸。然后我会把鼻夹放在你的鼻子上。我会告诉你深呼吸，然后把管嘴放进你的嘴里。你将尽可能快地向外吹气。一直吹，直到我叫你停下来。

检查者须知：我们只是在测试FVC。将至少进行三次试验，最多进行五次试验。目标是获得彼此相差在5％的范围内的最好的两个试验。给予很多鼓励。在表上记录最佳FVC(升数和百分比)和等级，(例如：2.55-60％/2)。

“正常的”FVC值，和因此预测的百分比计算可以随着所使用的肺活量计而变化。有些肺活量计带有规定的正常值。这就是为什么每次测试受试者时都应该使用相同的肺活量计。对于多地点研究，应确定参数和正常值，以便所有地点使用相同的信息。

VIII：右手和左手握紧：

患者准备:病人正坐在椅子上。肘部应该在90度。支撑应在前臂内侧下方和测力计下方。

向患者解释：“我在测试握力。我需要你尽可能用力挤压。什么都不会动，但其在测量你挤压的力度。"

检查者须知：给予口头鼓励。将两次试验(kg)记录在栏中并评分(例如：如果测试女性，结果分别为10kg和8kg，则记录为10/1。)

IX.抬头(HEAD LIFTED)：

患者准备:患者会在没有枕头的情况下躺下。枕头可以放在膝盖下面，或者膝盖弯曲，这样脚就可以平放在床上。

向患者解释：“我需要你把头从桌子上抬起来。尽可能保持下去。”

检查者须知：将你的手放在他们的头下(不要触摸)，这样可以在他们的头后仰时提供一些缓冲。头部应该向上向前，而不仅仅是向上朝向天花板。如果头部下降到中性线10°以内，停止测试。

X.右腿和左腿伸直：

患者准备:患者仰卧，头下枕着枕头。双腿必须伸直，脱鞋。

向患者解释：“我需要你抬起你的右腿。将腿尽可能长时间保持该姿势。"

检查者须知：腿必须保持在髋关节屈曲的45-50％。如果腿开始下垂，让病人抬起腿。如果患者抬起腿，但无法保持该姿势2秒钟，则停止测试。注意臀部以下的手和/或腿的旋转。

2.MG综合量表

为了评估MG综合量表，研究者将对受试者进行检查，以对所有项目进行评分，除受试者将自我评估的讲话、咀嚼和吞咽外。MG综合量表是经验证的评估(Burns等人，2010MGComposite and MG-QOL15 Study Group.The MGComposite:A valid and reliableoutcome measure for myasthenia gravis.Neurology.2010年5月4日；74(18):1434-40.)，其中得分较高表示更严重的疾病(参见图6)，并且3点的变化表示临床相关。该量表测试了10个项目，每个项目的权重不同。总得分从0到50不等。临床人员必须完成强制性培训，并经认证以评估受试者的MG综合评分(详细信息在研究程序手册中提供)。

3.患者报告的结果

受试者将完成4项患者报告的结果(PRO)，其中一个是MGADL，并根据研究评估时间表中提到的时间点，参加1次受试者退出面谈。

治疗医师以外的研究人员应管理PRO。PRO应该由受试者自己在安静的地方完成。

PRO和受试者退出面谈应按以下顺序完成：MG肌无力和易疲劳性、疲劳、MGADL和MGII，然后是受试者退出面谈(仅在FV时进行)。仅应检查PRO的完整性。在给药日，PRO将在给药前完成。

MG-日常生活活动(MGADL)

MGADL是基于QMG(Wolfe等人，1999)开发的8项PRO仪器，见图7。MGADL针对眼部、眼球、呼吸和眼轴症状的症状和失能。在最近的研究中，进一步评估了MGADL的可靠性、有效性和反应性。当针对MG-综合以及针对MG-QOL15进行评估时，问卷显示出很强的构想效度，在1周的时间间隔内有很高的测试重测可靠信，并且证明2点的改善表明临床改善(Muppidi,2012；Muppidi等人，2011)。MGADL总分从0到24分不等，分数越高表示失能越多。受试者将如PRO的标准化管理中的描述自行完成MGADL。

实施例3

MG002研究的结果

研究设计

MG0002(NCT03052751)(实施例2中提供的方案)是一项2期随机化的、有安慰剂对照、概念验证性试验，所述试验招募了43名来自北美和欧洲的MG患者，所述患者患有全身性肌无力，且总定量重症肌无力评分(QMG)至少为11分。MG0002比较了在第1天、第8天、第15天三个每周一次皮下注射安慰剂(N＝22)与7mg/kg罗扎诺昔单抗(N＝21)的结果，在四周期间(第1给药期)进行了比较。

在第1给药期后，参与者被重新随机分配，以在第29天、第36天和第43天(第2给药期)接受7mg/kg or 4mg/kg的罗扎诺昔单抗，并持续观察直至第99天(参见图2)。允许进行常规疗法，并且其包括皮质类固醇和/或免疫调节剂和/或胆碱酯酶抑制剂。对两个给药期的安全性和有效性的预先指定的分析是在六次皮下输注罗扎诺昔单抗后观察数据。

研究结果:

在第1给药期结束时：定量重症肌无力(QMG)应答率为38.1％，相比之下安慰剂组为22.7％(p＝0.223)，重症肌无力综合(Myasthenia Gravis Composite)(MGC)应答率为47.6％，相比之下安慰剂组为27.3％(p＝0.144)。对于重症肌无力-日常生活活动(MG-ADL)，应答率为47.6％，而安慰剂组为13.6％(p＝0.017)。相对于基线的3点或更多点的减少被定义为QMG、MGC和MG-ADL的反应。

相对于基线的重症肌无力-日常生活活动(MG-ADL)评分(一个既定的注册终点)的变化与安慰剂相比有显著改善(p＝0.036)。

在第2给药期期间，观察到临床上有意义的评分降低，并且在最后一次给药后直至第99天，效果持续存在。一般来说，在罗扎诺昔单抗7mg/kg/罗扎诺昔单抗7mg/kg组中，观察到相对于基线的QMG、MG-Composite和MG-ADL评分的最大下降(参见图3和图4)。

横跨两个给药期间(即在六次皮下输注罗扎诺昔单抗后)的预先指定的分析显示，横跨几个疾病特异性终点(包括QMG、MGC和MG-ADL)，患者始终获得有临床意义的益处。积极治疗的参与者显示总IgG水平和IgG自身抗体水平显著降低。经两周的罗扎诺昔单抗治疗后，血清IgG浓度降低了55％。在两个给药期接受罗扎诺昔单抗7mg/kg的参与者中，总IgG和抗乙酰胆碱受体(抗AChR)抗体在第2给药期期间相对于基线下降了近70％。具有抗MuSK抗体的患者符合MG0002标准，然而由于患者数量少(n＝1，罗扎诺昔单抗7mg/kg/罗扎诺昔单抗7mg/kg组)，因此未对抗MuSK抗体进行评估。

实施例4:评估在成人全身性重症肌无力患者中的疗效和安全性的3期、随机、双盲、有安慰剂对照的研究(MG0003ClinicalTrials.gov标识符：NCT03971422)

这是一项针对抗AChR或抗MuSK自身抗体阳性的全身性重症肌无力患者的3期研究，所述患者出现中度至重度症状，正被考虑使用IVIg或PLEX进行治疗。本研究的主要目的是证明罗扎诺昔单抗对全身性MG患者的临床疗效。

该研究由最多4周的筛查期、随后6周的双盲治疗期和8周的观察期组成。

来自MG0002的结果显示皮下(sc)施用罗扎诺昔单抗导致血清IgG浓度快速降低，这也显示了6剂后(第50天)，QMG、MG-综合和MG-ADL相对于基线的最大降低。

因此，为MG0003选择了6周的治疗持续时间。确定了8周的观察期，以便跟踪IgG以及AChR和MuSK抗体的恢复，以及监测停药后临床效果的可持续性。

参与者人数

该研究的总样本量在150至240名研究参与者之间。

治疗组和持续时间

每位研究参与者的研究最长持续时间为18周，由筛查期(1至28天为中心实验室周转时间)、治疗期(6周)和观察期(8周)组成。

将采用跨体重等级和研究臂的固定单位剂量。

安慰剂臂为0.9％氯化钠水溶液(生理盐水，不含防腐剂)，用于皮下(sc)施用。

两个sc治疗臂将采用固定单位剂量，如下所述按体重等级分层：

治疗臂1(罗扎诺昔单抗)-6次sc剂量，间隔为1周(相当于约7mg/kg)

·体重<50kg：待施用的剂量为280mg

·体重≥50kg且<70kg：待施用的剂量为420mg

·体重≥70kg且<100kg：待施用的剂量为560mg

·体重≥100kg；待施用的剂量为840mg

治疗臂2(罗扎诺昔单抗)-6次sc剂量，间隔为1周(相当于约10mg/kg)

·体重<50kg：待施用的剂量为420mg

·体重≥50kg且<70kg：待施用的剂量为560mg

·体重≥70kg且<100kg：待施用的剂量为840mg

·体重≥100kg:待施用的剂量为1120mg

通过模拟，表征剂量-暴露-IgG关系的群体PKPD模型被用于指导每个体重等级(weight bracket)的固定单位剂量的选择，所述固定单位剂量实现了与先前研究的基于体重(mg/kg)的给药方案相当的IgG减少(平均值和90％的预测区间)。这些基于模型的模拟表明，连续6周的建议的罗扎诺昔单抗的每周一次剂量预计可产生≥75％的平均最大IgG减少量。

衡量指标

主要衡量指标：

1.重症肌无力-日常生活活动(MG-ADL)评分从基线到第10次访视的变化[时间范围:基线和第10次访视(第43天)]

通过将对每个单项(8项；等级:0,1,2,3)的反应求和获得总

MG-ADL评分。分数范围为0至24，分数越高表示失能越多。

次要衡量指标：

1.在第10次访视时出现重症肌无力-日常生活活动(MG-ADL)反应的参与者百分比[时间范围:第10次访视(第43天)]

2.重症肌无力综合评分从基线至第10次访视的变化[时间范围：基线和第10次访视(第43天)]

通过将对每个单独项目(10项；等级：0-9，视项目而定)的反应求和获得总重症肌无力(MG)-综合评分。分数范围为0至50，分数越低表示疾病活跃性越低。

3.定量重症肌无力(QMG)评分从基线至第10次访视的变化[时间范围：基线和第10次访视(第43天)]

通过将对每个单项(13项；反应：无＝0，轻度＝1，中度＝2，重度＝3)的反应求和获得总QMG评分。分数范围为0至39，分数越低表示疾病活跃性越低。

4.重症肌无力(MG)症状患者报告的结果(PRO)易疲劳性评分从基线至第10次访视的变化[时间范围：基线和第10次访视(第43天)]

MG症状PRO量表由5个量表的42个项目组成：眼部症状(项目1-5)；延髓症状(项目6-15)；呼吸系统症状(项目16-18)；身体疲劳(项目19-33)和肌肉无力易疲劳性(项目34-42)。

研究参与者将被要求选择反应选项，所述反应选项分别地最能描述(使用4点Likert量表(“无”至“严重”))过去7天眼部、延髓和呼吸系统症状严重程度的反应选项，以及最能描述(使用5点Likert量表(“无时间”至“所有时间”))他们在过去7天中经历身体疲劳和肌肉无力疲劳的频率。

5.重症肌无力(MG)症状患者报告的结果(PRO)“身体疲劳、肢体和轴向无力(AxialWeakness)”评分从基线到第10次访视的变化[时间范围：基线和第10次访视(第43天)]

MG症状PRO量表由5个量表的42个项目组成：眼部症状(项目1-5)；延髓症状(项目6-15)；呼吸系统症状(项目16-18)；身体疲劳(项目19-33)和肌肉无力易疲劳性(项目34-42)。

研究参与者将被要求选择反应选项，所述反应选项分别地最能描述(使用4点Likert量表(“无”至“严重”))过去7天眼部、延髓和呼吸系统症状严重程度的反应选项，以及最能描述(使用5点Likert量表(“无时间”至“所有时间”))他们在过去7天中经历身体疲劳和肌肉无力疲劳的频率。

6.重症肌无力(MG)症状患者报告结果(PRO)“延髓”评分从基线至第10次访视的变化[时间范围：基线和第10次访视(第43天)]

MG症状PRO量表由5个量表的42个项目组成：眼部症状(项目1-5)；延髓症状(项目6-15)；呼吸系统症状(项目16-18)；身体疲劳(项目19-33)和肌肉无力易疲劳性(项目34-42)。

研究参与者将被要求选择反应选项，所述反应选项分别地最能描述(使用4点Likert量表(“无”至“严重”))过去7天眼部、延髓和呼吸系统症状严重程度的反应选项，以及最能描述(使用5点Likert量表(“无时间”至“所有时间”))他们在过去7天中经历身体疲劳和肌肉无力疲劳的频率。

7.治疗突发不良事件(TEAE)的发生[时间范围：从基线至研究访视结束(直到第14周)]

不良事件(AE)是指患者或临床研究受试者服用药品后发生的任何不利医疗事件，其不一定与该治疗有因果关系。因此，AE可能是与使用药物(研究)产品暂时相关的任何不利和意外的体征、症状或疾病，无论是否与药物(研究)产品相关。

治疗突发不良事件(TEAE)被定义为在首次施用IMP之前不存在的任何事件，或在首次施用IMP之前已经存在的任何未解决的事件，所述事件在暴露于治疗后强度恶化。

8.导致研究药品(IMP)的停药的治疗突发不良事件(TEAE)[时间框架:从基线至研究访视结束(直到第14周)]

次要衡量指标之一是评估IMP在MG患者中的安全性和耐受性。这可通过导致IMP的停药的治疗突发不良事件(TEAE)来测量。

TEAE被定义为在首次施用IMP之前不存在的任何事件，或在首次施用IMP之前已经存在的任何未解决的事件，所述事件在暴露于治疗后强度恶化。

资格标准

标准

纳入标准：

签署知情同意书时，研究参与者必须年满18岁

研究参与者在第1次访视时已确诊全身性重症肌无力(gMG)，该诊断基于研究参与者的病史，并得到先前评估的支持

研究参与者在第1次访视前已确认针对乙酰胆碱受体(AChR)或肌肉特异性激酶(MuSK)的自身抗体呈阳性的记录

研究参与者在第1次访视时患有美国重症肌无力基金会(MGFA)II级至IV级

研究参与者在第1次访视时和基线时的重症肌无力-日常生活活动(MG-ADL)评分至少为3，并且定量重症肌无力(QMG)评分至少为11

排除标准：

研究参与者在服用第一剂研究药物(IMP)之前6周内被研究人员认为出现临床相关的活动性感染(例如，败血症、肺炎或脓肿)，或者出现严重感染(导致住院或需要胃肠外抗生素治疗)

研究参与者在接触其它抗新生儿Fc受体(FcRn)药物后出现过敏反应

研究参与者患有影响口咽或呼吸肌的严重(根据MG-ADL量表定义为3级)无力，或在第1次访视时患有肌无力危象或即将发生危象

允许的伴随治疗

允许的药物

剂量注释

口服皮质类固醇(例如，泼尼松龙)

-基线前稳定2周

先前用≤30mg/周的甲氨蝶呤治疗6个月，并且在基线之前以稳定的剂量进行2个月

先前用≤3g/天的霉酚酸酯治疗6个月，并且在基线之前以稳定的剂量进行2个月

对于未改性的环孢菌素≤5mg/kg/天

对于改性的(微乳液)≤4mg/kg/天

先前治疗6个月，并且基线之前以稳定的剂量进行2个月

先用≤3mg/kg/天的硫唑嘌呤治疗6个月，并且在基线之前以稳定的剂量进行2个月

胆碱酯酶抑制剂≤600mg吡啶斯的明/天

不需要稳定剂量—在疗效结果日保持剂量

先用≤5mg/天的他克莫司治疗6个月，并且在基线之前以稳定的剂量进行2个月

a如果谷水平≤300ng/L，则允许高于所列的剂量

b如果每日基于体重的总剂量>5mg，则应检查血浆谷值水平，以确保研究参与者不高于推荐的治疗范围。

禁止的伴随治疗(药物和疗法)

研究期间禁止使用以下合并用药:

所有生物制品，包括利妥昔单抗

环磷酰胺

吡美莫司

IPP-201101(Lupuzor^TM)

免疫吸附

参考文献

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本文引用的所有参考文献据此通过引用以其整体并入。前述实施例旨在说明本发明，而不是以任何方式限制本发明。包括本文公开的在本发明的精神和范围内的修改。

序列表

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<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> CA170_1519 CDRH1

<400> 1

Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Gly Met Val

1 5 10

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<213> 人工的

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<223> CA170_1519 CDRH2

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Tyr Ile Asp Ser Asp Gly Asp Asn Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val Lys

1 5 10 15

Gly

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<213> 人工的

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<223> CA170_1519 CDRH3

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Gly Ile Val Arg Pro Phe Leu Tyr

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Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val Gly Ala Ser Gly Lys Thr Tyr Leu Tyr

1 5 10 15

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Leu Val Ser Thr Leu Asp Ser

1 5

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Leu Gln Gly Thr His Phe Pro His Thr

1 5

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<223> 大鼠 Ab 1519 VL 区

<400> 7

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Ala Leu Gly

1 5 10 15

Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val Gly Ala

20 25 30

Ser Gly Lys Thr Tyr Leu Tyr Trp Leu Phe Gln Arg Ser Gly Gln Ser

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Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Thr Leu Asp Ser Gly Ile Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Glu Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Arg Arg Val Glu Ala Asp Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly

85 90 95

Thr His Phe Pro His Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys

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<211> 336

<212> DNA

<213> 人工的

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<223> 大鼠 Ab 1519 VL 区

<400> 8

gatgttgtga tgacccagac tccactgtct ttgtcggttg cccttggaca accagcctcc 60

atctcttgca agtcaagtca gagcctcgta ggtgctagtg gaaagacata tttgtattgg 120

ttatttcaga ggtccggcca gtctccaaag cgactaatct atctggtgtc cacactggac 180

tctggaattc ctgataggtt cagtggcagt ggagcagaga cagattttac tcttaaaatc 240

cgcagagtgg aagccgatga tttgggagtt tattactgct tgcaaggtac acattttcct 300

cacacgtttg gagctgggac caagctggaa ttgaaa 336

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<223> 具有信号序列的 大鼠 Ab 1519 VL 区

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Met Met Ser Pro Ala Gln Phe Leu Phe Leu Leu Met Leu Trp Ile Gln

1 5 10 15

Gly Thr Ser Gly Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser

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Val Ala Leu Gly Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser

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Ser Gly Gln Ser Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Thr Leu Asp

65 70 75 80

Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Glu Thr Asp Phe

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Thr Leu Lys Ile Arg Arg Val Glu Ala Asp Asp Leu Gly Val Tyr Tyr

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Cys Leu Gln Gly Thr His Phe Pro His Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys

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Leu Glu Leu Lys

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<223> 具有信号序列的大鼠 Ab 1519 VL 区

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atgatgagtc ctgcccagtt cctgtttctg ctgatgctct ggattcaggg aaccagtggt 60

gatgttgtga tgacccagac tccactgtct ttgtcggttg cccttggaca accagcctcc 120

atctcttgca agtcaagtca gagcctcgta ggtgctagtg gaaagacata tttgtattgg 180

ttatttcaga ggtccggcca gtctccaaag cgactaatct atctggtgtc cacactggac 240

tctggaattc ctgataggtt cagtggcagt ggagcagaga cagattttac tcttaaaatc 300

cgcagagtgg aagccgatga tttgggagtt tattactgct tgcaaggtac acattttcct 360

cacacgtttg gagctgggac caagctggaa ttgaaa 396

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<211> 116

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 大鼠 Ab 1519 VH 区

<400> 11

Glu Val Pro Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Met Lys Leu Ser Cys Val Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Val Trp Val Arg Gln Ala Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val

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Ala Tyr Ile Asp Ser Asp Gly Asp Asn Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val

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Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asn Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr

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<223> 大鼠 Ab 1519 VH 区

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<223> 具有信号序列的大鼠 Ab 1519 VH 区

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Met Asp Ile Ser Leu Ser Leu Ala Phe Leu Val Leu Phe Ile Lys Gly

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Val Arg Cys Glu Val Pro Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln

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<223> 具有信号序列的大鼠 Ab 1519 VH 区

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atggacatca gtctcagctt ggctttcctt gtccttttca taaaaggtgt ccggtgtgag 60

gtgccgctgg tggagtctgg gggcggctca gtgcagcctg ggaggtccat gaaactctcc 120

tgtgtagtct caggattcac tttcagtaat tatggcatgg tctgggtccg ccaggctcca 180

aagaagggtc tggagtgggt cgcatatatt gattctgatg gtgataatac ttactaccga 240

gattccgtga agggccgatt cactatctcc agaaataatg caaaaagcac cctatatttg 300

caaatggaca gtctgaggtc tgaggacacg gccacttatt actgtacaac agggattgtc 360

cggccctttc tctattgggg ccaaggaacc acggtcaccg tctcg 405

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<223> 1519 gL20 V-区

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Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

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Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val Gly Ala

20 25 30

Ser Gly Lys Thr Tyr Leu Tyr Trp Leu Phe Gln Lys Pro Gly Lys Ala

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Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Thr Leu Asp Ser Gly Ile Pro

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Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile

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Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly

85 90 95

Thr His Phe Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

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gatatccaga tgacccagag tccaagcagt ctctccgcca gcgtaggcga tcgtgtgact 60

attacctgta aaagctccca gtccctggtg ggtgcaagcg gcaaaaccta cctgtactgg 120

ctcttccaga aaccgggcaa agctccgaaa cgcctgatct atctggtgtc taccctggat 180

agcggtattc cgtctcgttt ctccggtagc ggtagcggta ccgaattcac gctgaccatt 240

agctccctcc agccggagga ctttgctacc tattactgcc tccagggcac tcattttccg 300

cacactttcg gccagggtac caaactggaa atcaaa 336

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<213> 人工的

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<223> 1519 gL20 V-区 (哺乳动物表达)

<400> 17

gatatccaga tgacccagag cccatctagc ttatccgctt ccgttggtga tcgcgtgaca 60

attacgtgta agagctccca atctctcgtg ggtgcaagtg gcaagaccta tctgtactgg 120

ctctttcaga agcctggcaa ggcaccaaaa cggctgatct atctggtgtc tacccttgac 180

tctgggatac cgtcacgatt ttccggatct gggagcggaa ctgagttcac actcacgatt 240

tcatcgctgc aacccgagga ctttgctacc tactactgcc tgcaaggcac tcatttccct 300

cacactttcg gccaggggac aaaactcgaa atcaaa 336

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<213> 人工的

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<223> 具有信号序列的1519 gL20 V-区 (大肠杆菌表达)

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Met Lys Lys Thr Ala Ile Ala Ile Ala Val Ala Leu Ala Gly Phe Ala

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Thr Val Ala Gln Ala Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu

20 25 30

Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ser Ser Gln

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Ser Leu Val Gly Ala Ser Gly Lys Thr Tyr Leu Tyr Trp Leu Phe Gln

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Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Thr Leu

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Asp Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu

85 90 95

Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr

100 105 110

Tyr Cys Leu Gln Gly Thr His Phe Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr

115 120 125

Lys Leu Glu Ile Lys

130

<210> 19

<211> 399

<212> DNA

<213> 人工的

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<223> 具有信号序列的1519 gL20 V-区 (大肠杆菌表达)

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atgaaaaaga cagctatcgc aattgcagtg gccttggctg gtttcgctac cgtagcgcaa 60

gctgatatcc agatgaccca gagtccaagc agtctctccg ccagcgtagg cgatcgtgtg 120

actattacct gtaaaagctc ccagtccctg gtgggtgcaa gcggcaaaac ctacctgtac 180

tggctcttcc agaaaccggg caaagctccg aaacgcctga tctatctggt gtctaccctg 240

gatagcggta ttccgtctcg tttctccggt agcggtagcg gtaccgaatt cacgctgacc 300

attagctccc tccagccgga ggactttgct acctattact gcctccaggg cactcatttt 360

ccgcacactt tcggccaggg taccaaactg gaaatcaaa 399

<210> 20

<211> 132

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 具有信号序列的1519 gL20 V-区 (哺乳动物表达)

<400> 20

Met Ser Val Pro Thr Gln Val Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp Leu Thr

1 5 10 15

Asp Ala Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser

20 25 30

Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ser Ser Gln Ser

35 40 45

Leu Val Gly Ala Ser Gly Lys Thr Tyr Leu Tyr Trp Leu Phe Gln Lys

50 55 60

Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Thr Leu Asp

65 70 75 80

Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe

85 90 95

Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr

100 105 110

Cys Leu Gln Gly Thr His Phe Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys

115 120 125

Leu Glu Ile Lys

130

<210> 21

<211> 396

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 具有信号序列的1519 gL20 V-区 (哺乳动物表达)

<400> 21

atgtctgtcc ccacccaagt cctcggactc ctgctactct ggcttacaga tgccagatgc 60

gatatccaga tgacccagag cccatctagc ttatccgctt ccgttggtga tcgcgtgaca 120

attacgtgta agagctccca atctctcgtg ggtgcaagtg gcaagaccta tctgtactgg 180

ctctttcaga agcctggcaa ggcaccaaaa cggctgatct atctggtgtc tacccttgac 240

tctgggatac cgtcacgatt ttccggatct gggagcggaa ctgagttcac actcacgatt 300

tcatcgctgc aacccgagga ctttgctacc tactactgcc tgcaaggcac tcatttccct 360

cacactttcg gccaggggac aaaactcgaa atcaaa 396

<210> 22

<211> 219

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 1519 gL20轻链 (V + 恒定区)

<400> 22

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val Gly Ala

20 25 30

Ser Gly Lys Thr Tyr Leu Tyr Trp Leu Phe Gln Lys Pro Gly Lys Ala

35 40 45

Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Thr Leu Asp Ser Gly Ile Pro

50 55 60

Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile

65 70 75 80

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly

85 90 95

Thr His Phe Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 23

<211> 657

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 1519 gL20轻链 (V + 恒定区, 大肠杆菌表达)

<400> 23

gatatccaga tgacccagag tccaagcagt ctctccgcca gcgtaggcga tcgtgtgact 60

attacctgta aaagctccca gtccctggtg ggtgcaagcg gcaaaaccta cctgtactgg 120

ctcttccaga aaccgggcaa agctccgaaa cgcctgatct atctggtgtc taccctggat 180

agcggtattc cgtctcgttt ctccggtagc ggtagcggta ccgaattcac gctgaccatt 240

agctccctcc agccggagga ctttgctacc tattactgcc tccagggcac tcattttccg 300

cacactttcg gccagggtac caaactggaa atcaaacgta cggtagcggc cccatctgtc 360

ttcatcttcc cgccatctga tgagcagttg aaatctggaa ctgcctctgt tgtgtgcctg 420

ctgaataact tctatcccag agaggccaaa gtacagtgga aggtggataa cgccctccaa 480

tcgggtaact cccaggagag tgtcacagag caggacagca aggacagcac ctacagcctc 540

agcagcaccc tgacgctgag caaagcagac tacgagaaac acaaagtcta cgcctgcgaa 600

gtcacccatc agggcctgag ctcaccagta acaaaaagtt ttaatagagg ggagtgt 657

<210> 24

<211> 657

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 1519 gL20轻链 (V + 恒定区, 哺乳动物表达)

<400> 24

gatatccaga tgacccagag tccaagcagt ctctccgcca gcgtaggcga tcgtgtgact 60

attacctgta aaagctccca gtccctggtg ggtgcaagcg gcaaaaccta cctgtactgg 120

ctcttccaga aaccgggcaa agctccgaaa cgcctgatct atctggtgtc taccctggat 180

agcggtattc cgtctcgttt ctccggtagc ggtagcggta ccgaattcac gctgaccatt 240

agctccctcc agccggagga ctttgctacc tattactgcc tccagggcac tcattttccg 300

cacactttcg gccagggtac caaactggaa atcaaacgta cggtagcggc cccatctgtc 360

ttcatcttcc cgccatctga tgagcagttg aaatctggaa ctgcctctgt tgtgtgcctg 420

ctgaataact tctatcccag agaggccaaa gtacagtgga aggtggataa cgccctccaa 480

tcgggtaact cccaggagag tgtcacagag caggacagca aggacagcac ctacagcctc 540

agcagcaccc tgacgctgag caaagcagac tacgagaaac acaaagtcta cgcctgcgaa 600

gtcacccatc agggcctgag ctcgcccgtc acaaagagct tcaacagggg agagtgt 657

<210> 25

<211> 240

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 具有信号序列的1519 gL20轻链 (大肠杆菌表达)

<400> 25

Met Lys Lys Thr Ala Ile Ala Ile Ala Val Ala Leu Ala Gly Phe Ala

1 5 10 15

Thr Val Ala Gln Ala Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu

20 25 30

Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ser Ser Gln

35 40 45

Ser Leu Val Gly Ala Ser Gly Lys Thr Tyr Leu Tyr Trp Leu Phe Gln

50 55 60

Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Thr Leu

65 70 75 80

Asp Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu

85 90 95

Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr

100 105 110

Tyr Cys Leu Gln Gly Thr His Phe Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr

115 120 125

Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe

130 135 140

Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys

145 150 155 160

Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val

165 170 175

Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln

180 185 190

Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser

195 200 205

Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His

210 215 220

Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

225 230 235 240

<210> 26

<211> 720

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 具有信号序列的1519 gL20轻链 (大肠杆菌表达)

<400> 26

atgaaaaaga cagctatcgc aattgcagtg gccttggctg gtttcgctac cgtagcgcaa 60

gctgatatcc agatgaccca gagtccaagc agtctctccg ccagcgtagg cgatcgtgtg 120

actattacct gtaaaagctc ccagtccctg gtgggtgcaa gcggcaaaac ctacctgtac 180

tggctcttcc agaaaccggg caaagctccg aaacgcctga tctatctggt gtctaccctg 240

gatagcggta ttccgtctcg tttctccggt agcggtagcg gtaccgaatt cacgctgacc 300

attagctccc tccagccgga ggactttgct acctattact gcctccaggg cactcatttt 360

ccgcacactt tcggccaggg taccaaactg gaaatcaaac gtacggtagc ggccccatct 420

gtcttcatct tcccgccatc tgatgagcag ttgaaatctg gaactgcctc tgttgtgtgc 480

ctgctgaata acttctatcc cagagaggcc aaagtacagt ggaaggtgga taacgccctc 540

caatcgggta actcccagga gagtgtcaca gagcaggaca gcaaggacag cacctacagc 600

ctcagcagca ccctgacgct gagcaaagca gactacgaga aacacaaagt ctacgcctgc 660

gaagtcaccc atcagggcct gagctcacca gtaacaaaaa gttttaatag aggggagtgt 720

<210> 27

<211> 239

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 具有信号序列的1519 gL20轻链 (哺乳动物表达)

<400> 27

Met Ser Val Pro Thr Gln Val Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp Leu Thr

1 5 10 15

Asp Ala Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser

20 25 30

Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ser Ser Gln Ser

35 40 45

Leu Val Gly Ala Ser Gly Lys Thr Tyr Leu Tyr Trp Leu Phe Gln Lys

50 55 60

Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Thr Leu Asp

65 70 75 80

Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe

85 90 95

Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr

100 105 110

Cys Leu Gln Gly Thr His Phe Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys

115 120 125

Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro

130 135 140

Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu

145 150 155 160

Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp

165 170 175

Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp

180 185 190

Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys

195 200 205

Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln

210 215 220

Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

225 230 235

<210> 28

<211> 717

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 具有信号序列的1519 gL20轻链 (哺乳动物表达)

<400> 28

atgtctgtcc ccacccaagt cctcggactc ctgctactct ggcttacaga tgccagatgc 60

gatatccaga tgacccagag cccatctagc ttatccgctt ccgttggtga tcgcgtgaca 120

attacgtgta agagctccca atctctcgtg ggtgcaagtg gcaagaccta tctgtactgg 180

ctctttcaga agcctggcaa ggcaccaaaa cggctgatct atctggtgtc tacccttgac 240

tctgggatac cgtcacgatt ttccggatct gggagcggaa ctgagttcac actcacgatt 300

tcatcgctgc aacccgagga ctttgctacc tactactgcc tgcaaggcac tcatttccct 360

cacactttcg gccaggggac aaaactcgaa atcaaacgta cggtagcggc cccatctgtc 420

ttcatcttcc cgccatctga tgagcagttg aaatctggaa ctgcctctgt tgtgtgcctg 480

ctgaataact tctatcccag agaggccaaa gtacagtgga aggtggataa cgccctccaa 540

tcgggtaact cccaggagag tgtcacagag caggacagca aggacagcac ctacagcctc 600

agcagcaccc tgacgctgag caaagcagac tacgagaaac acaaagtcta cgcctgcgaa 660

gtcacccatc agggcctgag ctcgcccgtc acaaagagct tcaacagggg agagtgt 717

<210> 29

<211> 116

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 1519 gH20 V-区

<400> 29

Glu Val Pro Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Val Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Tyr Ile Asp Ser Asp Gly Asp Asn Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Thr Thr Gly Ile Val Arg Pro Phe Leu Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser

115

<210> 30

<211> 348

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 1519 gH20 V-区 (大肠杆菌表达)

<400> 30

gaggttccgc tggtcgagtc tggaggcggg cttgtccagc ctggagggag cctgcgtctc 60

tcttgtgcag tatctggctt cacgttctcc aactacggta tggtgtgggt tcgtcaggct 120

ccaggtaaag gtctggaatg ggtggcgtat attgactccg acggcgacaa cacctactat 180

cgcgactctg tgaaaggtcg cttcaccatt tcccgcgata acgccaaatc cagcctgtac 240

ctgcagatga acagcctgcg tgctgaagat actgcggtgt actattgcac cactggcatc 300

gtgcgtccgt ttctgtattg gggtcagggt accctcgtta ctgtctcg 348

<210> 31

<211> 348

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 1519 gH20 V-区 (哺乳动物表达)

<400> 31

gaggtaccac ttgtggaaag cggaggaggt cttgtgcagc ctggaggaag tttacgtctc 60

tcttgtgctg tgtctggctt caccttctcc aattacggaa tggtctgggt cagacaagca 120

cctggaaagg gtcttgaatg ggtggcctat attgactctg acggggacaa cacctactat 180

cgggattccg tgaaaggacg cttcacaatc tcccgagata acgccaagag ctcactgtac 240

ctgcagatga atagcctgag agccgaggat actgccgtgt actattgcac aacgggaatc 300

gttaggcctt ttctgtactg gggacagggc accttggtta ctgtctcg 348

<210> 32

<211> 137

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 1519 gH20 V-区 (大肠杆菌表达)

<400> 32

Met Lys Lys Thr Ala Ile Ala Ile Ala Val Ala Leu Ala Gly Phe Ala

1 5 10 15

Thr Val Ala Gln Ala Glu Val Pro Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu

20 25 30

Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe

35 40 45

Thr Phe Ser Asn Tyr Gly Met Val Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Val Ala Tyr Ile Asp Ser Asp Gly Asp Asn Thr Tyr

65 70 75 80

Tyr Arg Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala

85 90 95

Lys Ser Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr

100 105 110

Ala Val Tyr Tyr Cys Thr Thr Gly Ile Val Arg Pro Phe Leu Tyr Trp

115 120 125

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser

130 135

<210> 33

<211> 411

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 1519 gH20 V-区 (大肠杆菌表达)

<400> 33

atgaagaaga ctgctatagc aattgcagtg gcgctagctg gtttcgccac cgtggcgcaa 60

gctgaggttc cgctggtcga gtctggaggc gggcttgtcc agcctggagg gagcctgcgt 120

ctctcttgtg cagtatctgg cttcacgttc tccaactacg gtatggtgtg ggttcgtcag 180

gctccaggta aaggtctgga atgggtggcg tatattgact ccgacggcga caacacctac 240

tatcgcgact ctgtgaaagg tcgcttcacc atttcccgcg ataacgccaa atccagcctg 300

tacctgcaga tgaacagcct gcgtgctgaa gatactgcgg tgtactattg caccactggc 360

atcgtgcgtc cgtttctgta ttggggtcag ggtaccctcg ttactgtctc g 411

<210> 34

<211> 135

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 1519 gH20 V-区 (哺乳动物表达)

<400> 34

Met Glu Trp Ser Trp Val Phe Leu Phe Phe Leu Ser Val Thr Thr Gly

1 5 10 15

Val His Ser Glu Val Pro Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln

20 25 30

Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe

35 40 45

Ser Asn Tyr Gly Met Val Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu

50 55 60

Glu Trp Val Ala Tyr Ile Asp Ser Asp Gly Asp Asn Thr Tyr Tyr Arg

65 70 75 80

Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser

85 90 95

Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val

100 105 110

Tyr Tyr Cys Thr Thr Gly Ile Val Arg Pro Phe Leu Tyr Trp Gly Gln

115 120 125

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser

130 135

<210> 35

<211> 405

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 具有信号序列的1519 gH20 V-区(哺乳动物表达)

<400> 35

atggaatgga gctgggtctt tctcttcttc ctgtcagtaa ctacaggagt ccattctgag 60

gtaccacttg tggaaagcgg aggaggtctt gtgcagcctg gaggaagttt acgtctctct 120

tgtgctgtgt ctggcttcac cttctccaat tacggaatgg tctgggtcag acaagcacct 180

ggaaagggtc ttgaatgggt ggcctatatt gactctgacg gggacaacac ctactatcgg 240

gattccgtga aaggacgctt cacaatctcc cgagataacg ccaagagctc actgtacctg 300

cagatgaata gcctgagagc cgaggatact gccgtgtact attgcacaac gggaatcgtt 360

aggccttttc tgtactgggg acagggcacc ttggttactg tctcg 405

<210> 36

<211> 228

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 1519gH20 Fab' 重链 (V + 人 γ-1 CH1 + 铰链区)

<400> 36

Glu Val Pro Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Val Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Tyr Ile Asp Ser Asp Gly Asp Asn Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Thr Thr Gly Ile Val Arg Pro Phe Leu Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu

115 120 125

Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys

130 135 140

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser

145 150 155 160

Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser

165 170 175

Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser

180 185 190

Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn

195 200 205

Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His

210 215 220

Thr Cys Ala Ala

225

<210> 37

<211> 684

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 1519gH20 Fab' 重链 (V + 人 γ-1 CH1 + 铰链区, 大肠杆菌表达)

<400> 37

gaggttccgc tggtcgagtc tggaggcggg cttgtccagc ctggagggag cctgcgtctc 60

tcttgtgcag tatctggctt cacgttctcc aactacggta tggtgtgggt tcgtcaggct 120

ccaggtaaag gtctggaatg ggtggcgtat attgactccg acggcgacaa cacctactat 180

cgcgactctg tgaaaggtcg cttcaccatt tcccgcgata acgccaaatc cagcctgtac 240

ctgcagatga acagcctgcg tgctgaagat actgcggtgt actattgcac cactggcatc 300

gtgcgtccgt ttctgtattg gggtcagggt accctcgtta ctgtctcgag cgcttctaca 360

aagggcccat cggtcttccc cctggcaccc tcctccaaga gcacctctgg gggcacagcg 420

gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgaaccgg tgacggtgtc gtggaactca 480

ggcgccctga ccagcggcgt gcacaccttc ccggctgtcc tacagtcctc aggactctac 540

tccctcagca gcgtggtgac cgtgccctcc agcagcttgg gcacccagac ctacatctgc 600

aacgtgaatc acaagcccag caacaccaag gtcgacaaga aagttgagcc caaatcttgt 660

gacaaaactc acacatgcgc cgcg 684

<210> 38

<211> 684

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 1519gH20 Fab' 重链 (V + 人 γ-1 CH1 + 铰链区,

哺乳动物表达)

<400> 38

gaggtaccac ttgtggaaag cggaggaggt cttgtgcagc ctggaggaag tttacgtctc 60

tcttgtgctg tgtctggctt caccttctcc aattacggaa tggtctgggt cagacaagca 120

cctggaaagg gtcttgaatg ggtggcctat attgactctg acggggacaa cacctactat 180

cgggattccg tgaaaggacg cttcacaatc tcccgagata acgccaagag ctcactgtac 240

ctgcagatga atagcctgag agccgaggat actgccgtgt actattgcac aacgggaatc 300

gttaggcctt ttctgtactg gggacagggc accttggtta ctgtctcgag cgcttctaca 360

aagggcccat cggtcttccc cctggcaccc tcctccaaga gcacctctgg gggcacagcg 420

gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgaaccgg tgacggtgtc gtggaactca 480

ggcgccctga ccagcggcgt gcacaccttc ccggctgtcc tacagtcctc aggactctac 540

tccctcagca gcgtggtgac cgtgccctcc agcagcttgg gcacccagac ctacatctgc 600

aacgtgaatc acaagcccag caacaccaag gtcgacaaga aagttgagcc caaatcttgt 660

gacaaaactc acacatgcgc cgcg 684

<210> 39

<211> 249

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 具有信号序列的1519 gH20 Fab' 重链 (大肠杆菌表达)

<400> 39

Met Lys Lys Thr Ala Ile Ala Ile Ala Val Ala Leu Ala Gly Phe Ala

1 5 10 15

Thr Val Ala Gln Ala Glu Val Pro Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu

20 25 30

Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe

35 40 45

Thr Phe Ser Asn Tyr Gly Met Val Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Val Ala Tyr Ile Asp Ser Asp Gly Asp Asn Thr Tyr

65 70 75 80

Tyr Arg Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala

85 90 95

Lys Ser Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr

100 105 110

Ala Val Tyr Tyr Cys Thr Thr Gly Ile Val Arg Pro Phe Leu Tyr Trp

115 120 125

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro

130 135 140

Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr

145 150 155 160

Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr

165 170 175

Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro

180 185 190

Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr

195 200 205

Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn

210 215 220

His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser

225 230 235 240

Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Ala Ala

245

<210> 40

<211> 747

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 具有信号序列的1519 gH20 Fab' 重链 (大肠杆菌表达)

<400> 40

atgaagaaga ctgctatagc aattgcagtg gcgctagctg gtttcgccac cgtggcgcaa 60

gctgaggttc cgctggtcga gtctggaggc gggcttgtcc agcctggagg gagcctgcgt 120

ctctcttgtg cagtatctgg cttcacgttc tccaactacg gtatggtgtg ggttcgtcag 180

gctccaggta aaggtctgga atgggtggcg tatattgact ccgacggcga caacacctac 240

tatcgcgact ctgtgaaagg tcgcttcacc atttcccgcg ataacgccaa atccagcctg 300

tacctgcaga tgaacagcct gcgtgctgaa gatactgcgg tgtactattg caccactggc 360

atcgtgcgtc cgtttctgta ttggggtcag ggtaccctcg ttactgtctc gagcgcttct 420

acaaagggcc catcggtctt ccccctggca ccctcctcca agagcacctc tgggggcaca 480

gcggccctgg gctgcctggt caaggactac ttccccgaac cggtgacggt gtcgtggaac 540

tcaggcgccc tgaccagcgg cgtgcacacc ttcccggctg tcctacagtc ctcaggactc 600

tactccctca gcagcgtggt gaccgtgccc tccagcagct tgggcaccca gacctacatc 660

tgcaacgtga atcacaagcc cagcaacacc aaggtcgaca agaaagttga gcccaaatct 720

tgtgacaaaa ctcacacatg cgccgcg 747

<210> 41

<211> 247

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 具有信号序列的1519 gH20 Fab' 重链 (哺乳动物表达)

<400> 41

Met Glu Trp Ser Trp Val Phe Leu Phe Phe Leu Ser Val Thr Thr Gly

1 5 10 15

Val His Ser Glu Val Pro Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln

20 25 30

Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe

35 40 45

Ser Asn Tyr Gly Met Val Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu

50 55 60

Glu Trp Val Ala Tyr Ile Asp Ser Asp Gly Asp Asn Thr Tyr Tyr Arg

65 70 75 80

Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser

85 90 95

Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val

100 105 110

Tyr Tyr Cys Thr Thr Gly Ile Val Arg Pro Phe Leu Tyr Trp Gly Gln

115 120 125

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val

130 135 140

Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala

145 150 155 160

Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser

165 170 175

Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val

180 185 190

Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro

195 200 205

Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys

210 215 220

Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp

225 230 235 240

Lys Thr His Thr Cys Ala Ala

245

<210> 42

<211> 741

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 具有信号序列的1519 gH20 Fab' 重链(哺乳动物表达)

<400> 42

atggaatgga gctgggtctt tctcttcttc ctgtcagtaa ctacaggagt ccattctgag 60

gtaccacttg tggaaagcgg aggaggtctt gtgcagcctg gaggaagttt acgtctctct 120

tgtgctgtgt ctggcttcac cttctccaat tacggaatgg tctgggtcag acaagcacct 180

ggaaagggtc ttgaatgggt ggcctatatt gactctgacg gggacaacac ctactatcgg 240

gattccgtga aaggacgctt cacaatctcc cgagataacg ccaagagctc actgtacctg 300

cagatgaata gcctgagagc cgaggatact gccgtgtact attgcacaac gggaatcgtt 360

aggccttttc tgtactgggg acagggcacc ttggttactg tctcgagcgc ttctacaaag 420

ggcccatcgg tcttccccct ggcaccctcc tccaagagca cctctggggg cacagcggcc 480

ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggc 540

gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg gctgtcctac agtcctcagg actctactcc 600

ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc agcttgggca cccagaccta catctgcaac 660

gtgaatcaca agcccagcaa caccaaggtc gacaagaaag ttgagcccaa atcttgtgac 720

aaaactcaca catgcgccgc g 741

<210> 43

<211> 444

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 1519gH20 IgG4 重链 (V + 人 γ-4P 恒定区)

<400> 43

Glu Val Pro Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Val Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Tyr Ile Asp Ser Asp Gly Asp Asn Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Thr Thr Gly Ile Val Arg Pro Phe Leu Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu

115 120 125

Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys

130 135 140

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser

145 150 155 160

Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser

165 170 175

Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser

180 185 190

Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn

195 200 205

Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro

210 215 220

Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe

225 230 235 240

Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val

245 250 255

Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe

260 265 270

Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro

275 280 285

Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr

290 295 300

Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val

305 310 315 320

Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala

325 330 335

Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln

340 345 350

Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly

355 360 365

Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro

370 375 380

Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser

385 390 395 400

Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu

405 410 415

Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His

420 425 430

Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys

435 440

<210> 44

<211> 1939

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 1519gH20 IgG4 重链 (V + 人 γ-4P 恒定区，具有外显子)

<400> 44

gaggtaccac ttgtggaaag cggaggaggt cttgtgcagc ctggaggaag tttacgtctc 60

tcttgtgctg tgtctggctt caccttctcc aattacggaa tggtctgggt cagacaagca 120

cctggaaagg gtcttgaatg ggtggcctat attgactctg acggggacaa cacctactat 180

cgggattccg tgaaaggacg cttcacaatc tcccgagata acgccaagag ctcactgtac 240

ctgcagatga atagcctgag agccgaggat actgccgtgt actattgcac aacgggaatc 300

gttaggcctt ttctgtactg gggacagggc accttggtta ctgtctcgag cgcttctaca 360

aagggcccat ccgtcttccc cctggcgccc tgctccagga gcacctccga gagcacagcc 420

gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgaaccgg tgacggtgtc gtggaactca 480

ggcgccctga ccagcggcgt gcacaccttc ccggctgtcc tacagtcctc aggactctac 540

tccctcagca gcgtggtgac cgtgccctcc agcagcttgg gcacgaagac ctacacctgc 600

aacgtagatc acaagcccag caacaccaag gtggacaaga gagttggtga gaggccagca 660

cagggaggga gggtgtctgc tggaagccag gctcagccct cctgcctgga cgcaccccgg 720

ctgtgcagcc ccagcccagg gcagcaaggc atgccccatc tgtctcctca cccggaggcc 780

tctgaccacc ccactcatgc ccagggagag ggtcttctgg atttttccac caggctccgg 840

gcagccacag gctggatgcc cctaccccag gccctgcgca tacaggggca ggtgctgcgc 900

tcagacctgc caagagccat atccgggagg accctgcccc tgacctaagc ccaccccaaa 960

ggccaaactc tccactccct cagctcagac accttctctc ctcccagatc tgagtaactc 1020

ccaatcttct ctctgcagag tccaaatatg gtcccccatg cccaccatgc ccaggtaagc 1080

caacccaggc ctcgccctcc agctcaaggc gggacaggtg ccctagagta gcctgcatcc 1140

agggacaggc cccagccggg tgctgacgca tccacctcca tctcttcctc agcacctgag 1200

ttcctggggg gaccatcagt cttcctgttc cccccaaaac ccaaggacac tctcatgatc 1260

tcccggaccc ctgaggtcac gtgcgtggtg gtggacgtga gccaggaaga ccccgaggtc 1320

cagttcaact ggtacgtgga tggcgtggag gtgcataatg ccaagacaaa gccgcgggag 1380

gagcagttca acagcacgta ccgtgtggtc agcgtcctca ccgtcctgca ccaggactgg 1440

ctgaacggca aggagtacaa gtgcaaggtc tccaacaaag gcctcccgtc ctccatcgag 1500

aaaaccatct ccaaagccaa aggtgggacc cacggggtgc gagggccaca tggacagagg 1560

tcagctcggc ccaccctctg ccctgggagt gaccgctgtg ccaacctctg tccctacagg 1620

gcagccccga gagccacagg tgtacaccct gcccccatcc caggaggaga tgaccaagaa 1680

ccaggtcagc ctgacctgcc tggtcaaagg cttctacccc agcgacatcg ccgtggagtg 1740

ggagagcaat gggcagccgg agaacaacta caagaccacg cctcccgtgc tggactccga 1800

cggctccttc ttcctctaca gcaggctaac cgtggacaag agcaggtggc aggaggggaa 1860

tgtcttctca tgctccgtga tgcatgaggc tctgcacaac cactacacac agaagagcct 1920

ctccctgtct ctgggtaaa 1939

<210> 45

<211> 1996

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 具有信号序列的1519gH20 IgG4 重链 (V + 人 γ-4P 恒定区)

<400> 45

atggaatgga gctgggtctt tctcttcttc ctgtcagtaa ctacaggagt ccattctgag 60

gtaccacttg tggaaagcgg aggaggtctt gtgcagcctg gaggaagttt acgtctctct 120

tgtgctgtgt ctggcttcac cttctccaat tacggaatgg tctgggtcag acaagcacct 180

ggaaagggtc ttgaatgggt ggcctatatt gactctgacg gggacaacac ctactatcgg 240

gattccgtga aaggacgctt cacaatctcc cgagataacg ccaagagctc actgtacctg 300

cagatgaata gcctgagagc cgaggatact gccgtgtact attgcacaac gggaatcgtt 360

aggccttttc tgtactgggg acagggcacc ttggttactg tctcgagcgc ttctacaaag 420

ggcccatccg tcttccccct ggcgccctgc tccaggagca cctccgagag cacagccgcc 480

ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggc 540

gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg gctgtcctac agtcctcagg actctactcc 600

ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc agcttgggca cgaagaccta cacctgcaac 660

gtagatcaca agcccagcaa caccaaggtg gacaagagag ttggtgagag gccagcacag 720

ggagggaggg tgtctgctgg aagccaggct cagccctcct gcctggacgc accccggctg 780

tgcagcccca gcccagggca gcaaggcatg ccccatctgt ctcctcaccc ggaggcctct 840

gaccacccca ctcatgccca gggagagggt cttctggatt tttccaccag gctccgggca 900

gccacaggct ggatgcccct accccaggcc ctgcgcatac aggggcaggt gctgcgctca 960

gacctgccaa gagccatatc cgggaggacc ctgcccctga cctaagccca ccccaaaggc 1020

caaactctcc actccctcag ctcagacacc ttctctcctc ccagatctga gtaactccca 1080

atcttctctc tgcagagtcc aaatatggtc ccccatgccc accatgccca ggtaagccaa 1140

cccaggcctc gccctccagc tcaaggcggg acaggtgccc tagagtagcc tgcatccagg 1200

gacaggcccc agccgggtgc tgacgcatcc acctccatct cttcctcagc acctgagttc 1260

ctggggggac catcagtctt cctgttcccc ccaaaaccca aggacactct catgatctcc 1320

cggacccctg aggtcacgtg cgtggtggtg gacgtgagcc aggaagaccc cgaggtccag 1380

ttcaactggt acgtggatgg cgtggaggtg cataatgcca agacaaagcc gcgggaggag 1440

cagttcaaca gcacgtaccg tgtggtcagc gtcctcaccg tcctgcacca ggactggctg 1500

aacggcaagg agtacaagtg caaggtctcc aacaaaggcc tcccgtcctc catcgagaaa 1560

accatctcca aagccaaagg tgggacccac ggggtgcgag ggccacatgg acagaggtca 1620

gctcggccca ccctctgccc tgggagtgac cgctgtgcca acctctgtcc ctacagggca 1680

gccccgagag ccacaggtgt acaccctgcc cccatcccag gaggagatga ccaagaacca 1740

ggtcagcctg acctgcctgg tcaaaggctt ctaccccagc gacatcgccg tggagtggga 1800

gagcaatggg cagccggaga acaactacaa gaccacgcct cccgtgctgg actccgacgg 1860

ctccttcttc ctctacagca ggctaaccgt ggacaagagc aggtggcagg aggggaatgt 1920

cttctcatgc tccgtgatgc atgaggctct gcacaaccac tacacacaga agagcctctc 1980

cctgtctctg ggtaaa 1996

<210> 46

<211> 347

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 1519gL20 FabFv轻链

<400> 46

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val Gly Ala

20 25 30

Ser Gly Lys Thr Tyr Leu Tyr Trp Leu Phe Gln Lys Pro Gly Lys Ala

35 40 45

Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Thr Leu Asp Ser Gly Ile Pro

50 55 60

Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile

65 70 75 80

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly

85 90 95

Thr His Phe Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys Ser Gly Gly Gly Gly

210 215 220

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr

225 230 235 240

Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile

245 250 255

Thr Cys Gln Ser Ser Pro Ser Val Trp Ser Asn Phe Leu Ser Trp Tyr

260 265 270

Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Glu Ala Ser

275 280 285

Lys Leu Thr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly

290 295 300

Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala

305 310 315 320

Thr Tyr Tyr Cys Gly Gly Gly Tyr Ser Ser Ile Ser Asp Thr Thr Phe

325 330 335

Gly Cys Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr

340 345

<210> 47

<211> 1041

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 1519gL20 FabFv轻链

<400> 47

gatatccaga tgacccagag cccatctagc ttatccgctt ccgttggtga tcgcgtgaca 60

attacgtgta agagctccca atctctcgtg ggtgcaagtg gcaagaccta tctgtactgg 120

ctctttcaga agcctggcaa ggcaccaaaa cggctgatct atctggtgtc tacccttgac 180

tctgggatac cgtcacgatt ttccggatct gggagcggaa ctgagttcac actcacgatt 240

tcatcgctgc aacccgagga ctttgctacc tactactgcc tgcaaggcac tcatttccct 300

cacactttcg gccaggggac aaaactcgaa atcaaacgta cggtagcggc cccatctgtc 360

ttcatcttcc cgccatctga tgagcagttg aaatctggaa ctgcctctgt tgtgtgcctg 420

ctgaataact tctatcccag agaggccaaa gtacagtgga aggtggataa cgccctccaa 480

tcgggtaact cccaggagag tgtcacagag caggacagca aggacagcac ctacagcctg 540

agcagcaccc tgacgctgtc taaagcagac tacgagaaac acaaagtgta cgcctgcgaa 600

gtcacccatc agggcctgag ctcaccagta acaaaaagtt ttaatagagg ggagtgtagc 660

ggtggcggtg gcagtggtgg gggaggctcc ggaggtggcg gttcagacat acaaatgacc 720

cagagtcctt catcggtatc cgcgtccgtt ggcgataggg tgactattac atgtcaaagc 780

tctcctagcg tctggagcaa ttttctatcc tggtatcaac agaaaccggg gaaggctcca 840

aaacttctga tttatgaagc ctcgaaactc accagtggag ttccgtcaag attcagtggc 900

tctggatcag ggacagactt cacgttgaca atcagttcgc tgcaaccaga ggactttgcg 960

acctactatt gtggtggagg ttacagtagc ataagtgata cgacatttgg gtgcggtact 1020

aaggtggaaa tcaaacgtac c 1041

<210> 48

<211> 367

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 具有信号序列的1519gL20 FabFv轻链

<400> 48

Met Ser Val Pro Thr Gln Val Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp Leu Thr

1 5 10 15

Asp Ala Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser

20 25 30

Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ser Ser Gln Ser

35 40 45

Leu Val Gly Ala Ser Gly Lys Thr Tyr Leu Tyr Trp Leu Phe Gln Lys

50 55 60

Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Thr Leu Asp

65 70 75 80

Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe

85 90 95

Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr

100 105 110

Cys Leu Gln Gly Thr His Phe Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys

115 120 125

Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro

130 135 140

Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu

145 150 155 160

Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp

165 170 175

Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp

180 185 190

Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys

195 200 205

Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln

210 215 220

Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys Ser

225 230 235 240

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp

245 250 255

Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly Asp

260 265 270

Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ser Ser Pro Ser Val Trp Ser Asn Phe

275 280 285

Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

290 295 300

Tyr Glu Ala Ser Lys Leu Thr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

305 310 315 320

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

325 330 335

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gly Gly Gly Tyr Ser Ser Ile Ser

340 345 350

Asp Thr Thr Phe Gly Cys Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr

355 360 365

<210> 49

<211> 1101

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 具有信号序列的1519gL20 FabFv轻链

<400> 49

atgtctgtcc ccacccaagt cctcggactc ctgctactct ggcttacaga tgccagatgc 60

gatatccaga tgacccagag cccatctagc ttatccgctt ccgttggtga tcgcgtgaca 120

attacgtgta agagctccca atctctcgtg ggtgcaagtg gcaagaccta tctgtactgg 180

ctctttcaga agcctggcaa ggcaccaaaa cggctgatct atctggtgtc tacccttgac 240

tctgggatac cgtcacgatt ttccggatct gggagcggaa ctgagttcac actcacgatt 300

tcatcgctgc aacccgagga ctttgctacc tactactgcc tgcaaggcac tcatttccct 360

cacactttcg gccaggggac aaaactcgaa atcaaacgta cggtagcggc cccatctgtc 420

ttcatcttcc cgccatctga tgagcagttg aaatctggaa ctgcctctgt tgtgtgcctg 480

ctgaataact tctatcccag agaggccaaa gtacagtgga aggtggataa cgccctccaa 540

tcgggtaact cccaggagag tgtcacagag caggacagca aggacagcac ctacagcctg 600

agcagcaccc tgacgctgtc taaagcagac tacgagaaac acaaagtgta cgcctgcgaa 660

gtcacccatc agggcctgag ctcaccagta acaaaaagtt ttaatagagg ggagtgtagc 720

ggtggcggtg gcagtggtgg gggaggctcc ggaggtggcg gttcagacat acaaatgacc 780

cagagtcctt catcggtatc cgcgtccgtt ggcgataggg tgactattac atgtcaaagc 840

tctcctagcg tctggagcaa ttttctatcc tggtatcaac agaaaccggg gaaggctcca 900

aaacttctga tttatgaagc ctcgaaactc accagtggag ttccgtcaag attcagtggc 960

tctggatcag ggacagactt cacgttgaca atcagttcgc tgcaaccaga ggactttgcg 1020

acctactatt gtggtggagg ttacagtagc ataagtgata cgacatttgg gtgcggtact 1080

aaggtggaaa tcaaacgtac c 1101

<210> 50

<211> 357

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 1519gH20 FabFv 重链

<400> 50

Glu Val Pro Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Val Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Tyr Ile Asp Ser Asp Gly Asp Asn Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Thr Thr Gly Ile Val Arg Pro Phe Leu Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu

115 120 125

Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys

130 135 140

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser

145 150 155 160

Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser

165 170 175

Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser

180 185 190

Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn

195 200 205

Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Ser Gly Gly Gly

210 215 220

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Thr Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu

225 230 235 240

Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu

245 250 255

Ser Cys Ala Val Ser Gly Ile Asp Leu Ser Asn Tyr Ala Ile Asn Trp

260 265 270

Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu Trp Ile Gly Ile Ile Trp

275 280 285

Ala Ser Gly Thr Thr Phe Tyr Ala Thr Trp Ala Lys Gly Arg Phe Thr

290 295 300

Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser

305 310 315 320

Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Thr Val Pro

325 330 335

Gly Tyr Ser Thr Ala Pro Tyr Phe Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Leu

340 345 350

Val Thr Val Ser Ser

355

<210> 51

<211> 1071

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 1519gH20 FabFv 重链

<400> 51

gaggtaccac ttgtggaaag cggaggaggt cttgtgcagc ctggaggaag tttacgtctc 60

tcttgtgctg tgtctggctt caccttctcc aattacggaa tggtctgggt cagacaagca 120

cctggaaagg gtcttgaatg ggtggcctat attgactctg acggggacaa cacctactat 180

cgggattccg tgaaaggacg cttcacaatc tcccgagata acgccaagag ctcactgtac 240

ctgcagatga atagcctgag agccgaggat actgccgtgt actattgcac aacgggaatc 300

gttaggcctt ttctgtactg gggacagggc accttggtta ctgtctcgag cgcgtccaca 360

aagggcccat cggtcttccc cctggcaccc tcctccaaga gcacctctgg gggcacagcg 420

gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgaaccag tgacggtgtc gtggaactca 480

ggtgccctga ccagcggcgt tcacaccttc ccggctgtcc tacagtcttc aggactctac 540

tccctgagca gcgtggtgac cgtgccctcc agcagcttgg gcacccagac ctacatctgc 600

aacgtgaatc acaagcccag caacaccaag gtcgataaga aagttgagcc caaatcttgt 660

agtggaggtg ggggctcagg tggaggcggg accggtggag gtggcagcga ggttcaactg 720

cttgagtctg gaggaggcct agtccagcct ggagggagcc tgcgtctctc ttgtgcagta 780

agcggcatcg acctgagcaa ttacgccatc aactgggtga gacaagctcc ggggaagtgt 840

ttagaatgga tcggtataat atgggccagt gggacgacct tttatgctac atgggcgaaa 900

ggaaggttta caattagccg ggacaatagc aaaaacaccg tgtatctcca aatgaactcc 960

ttgcgagcag aggacacggc ggtgtactat tgtgctcgca ctgtcccagg ttatagcact 1020

gcaccctact tcgatctgtg gggacaaggg accctggtga ctgtttcaag t 1071

<210> 52

<211> 376

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 具有信号序列的1519gH20 FabFv 重链

<400> 52

Met Glu Trp Ser Trp Val Phe Leu Phe Phe Leu Ser Val Thr Thr Gly

1 5 10 15

Val His Ser Glu Val Pro Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln

20 25 30

Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe

35 40 45

Ser Asn Tyr Gly Met Val Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu

50 55 60

Glu Trp Val Ala Tyr Ile Asp Ser Asp Gly Asp Asn Thr Tyr Tyr Arg

65 70 75 80

Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser

85 90 95

Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val

100 105 110

Tyr Tyr Cys Thr Thr Gly Ile Val Arg Pro Phe Leu Tyr Trp Gly Gln

115 120 125

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val

130 135 140

Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala

145 150 155 160

Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser

165 170 175

Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val

180 185 190

Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro

195 200 205

Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys

210 215 220

Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Ser

225 230 235 240

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Thr Gly Gly Gly Gly Ser Glu

245 250 255

Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser

260 265 270

Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Ile Asp Leu Ser Asn Tyr Ala

275 280 285

Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Cys Leu Glu Trp Ile Gly

290 295 300

Ile Ile Trp Ala Ser Gly Thr Thr Phe Tyr Ala Thr Trp Ala Lys Gly

305 310 315 320

Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gln

325 330 335

Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg

340 345 350

Thr Val Pro Gly Tyr Ser Thr Ala Pro Tyr Phe Asp Leu Trp Gly Gln

355 360 365

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

370 375

<210> 53

<211> 1128

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 具有信号序列的1519gH20 FabFv 重链

<400> 53

atggaatgga gctgggtctt tctcttcttc ctgtcagtaa ctacaggagt ccattctgag 60

gtaccacttg tggaaagcgg aggaggtctt gtgcagcctg gaggaagttt acgtctctct 120

tgtgctgtgt ctggcttcac cttctccaat tacggaatgg tctgggtcag acaagcacct 180

ggaaagggtc ttgaatgggt ggcctatatt gactctgacg gggacaacac ctactatcgg 240

gattccgtga aaggacgctt cacaatctcc cgagataacg ccaagagctc actgtacctg 300

cagatgaata gcctgagagc cgaggatact gccgtgtact attgcacaac gggaatcgtt 360

aggccttttc tgtactgggg acagggcacc ttggttactg tctcgagcgc gtccacaaag 420

ggcccatcgg tcttccccct ggcaccctcc tccaagagca cctctggggg cacagcggcc 480

ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc gaaccagtga cggtgtcgtg gaactcaggt 540

gccctgacca gcggcgttca caccttcccg gctgtcctac agtcttcagg actctactcc 600

ctgagcagcg tggtgaccgt gccctccagc agcttgggca cccagaccta catctgcaac 660

gtgaatcaca agcccagcaa caccaaggtc gataagaaag ttgagcccaa atcttgtagt 720

ggaggtgggg gctcaggtgg aggcgggacc ggtggaggtg gcagcgaggt tcaactgctt 780

gagtctggag gaggcctagt ccagcctgga gggagcctgc gtctctcttg tgcagtaagc 840

ggcatcgacc tgagcaatta cgccatcaac tgggtgagac aagctccggg gaagtgttta 900

gaatggatcg gtataatatg ggccagtggg acgacctttt atgctacatg ggcgaaagga 960

aggtttacaa ttagccggga caatagcaaa aacaccgtgt atctccaaat gaactccttg 1020

cgagcagagg acacggcggt gtactattgt gctcgcactg tcccaggtta tagcactgca 1080

ccctacttcg atctgtgggg acaagggacc ctggtgactg tttcaagt 1128

<210> 54

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 人 VK1 2-1-(1) A30 JK2 接受者框架

<400> 54

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp

20 25 30

Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Ser Tyr Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 55

<211> 321

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 人 VK1 2-1-(1) A30 JK2 接受者框架

<400> 55

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcaagtca gggcattaga aatgatttag gctggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagcgcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagcg gcagtggatc tgggacagaa ttcactctca caatcagcag cctgcagcct 240

gaagattttg caacttatta ctgtctacag cataatagtt acccttacac ttttggccag 300

gggaccaagc tggagatcaa a 321

<210> 56

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 人 VH3 1-3 3-07 JH4 接受者框架

<400> 56

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Asn Ile Lys Gln Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser

100 105 110

<210> 57

<211> 336

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 人 VH3 1-3 3-07 JH4 接受者框架

<400> 57

gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt cacctttagt agctattgga tgagctgggt ccgccaggct 120

ccagggaagg ggctggagtg ggtggccaac ataaagcaag atggaagtga gaaatactat 180

gtggactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ctcactgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggctgtgt attactgtgc gagatacttt 300

gactactggg gccagggaac cctggtcacc gtctcc 336

<210> 58

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 大鼠 Ab 1548 VL 区

<400> 58

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Ala Leu Gly

1 5 10 15

Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val Gly Ala

20 25 30

Ser Gly Lys Thr Tyr Leu Tyr Trp Leu Phe Gln Arg Ser Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Thr Leu Asp Ser Gly Ile Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Glu Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Arg Arg Val Glu Ala Asp Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly

85 90 95

Thr His Phe Pro His Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 59

<211> 336

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 大鼠 Ab 1548 VL 区

<400> 59

gatgttgtga tgacccagac tccactgtct ttgtcggttg cccttggaca accagcctcc 60

atctcttgca agtcaagtca gagcctcgta ggtgctagtg gaaagacata tttgtattgg 120

ttatttcaga ggtccggcca gtctccaaag cgactaatct atctggtgtc cacactggac 180

tctggaattc ctgataggtt cagtggcagt ggagcagaga cagattttac tcttaaaatc 240

cgcagagtgg aagccgatga tttgggagtt tattactgct tgcaaggtac acattttcct 300

cacacgtttg gagctgggac caagctggaa ataaaa 336

<210> 60

<211> 116

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 大鼠 Ab 1548 VH 区

<400> 60

Glu Val Pro Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Met Lys Leu Ser Cys Val Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Val Trp Val Arg Gln Ala Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Tyr Ile Asp Ser Asp Gly Asp Asn Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asn Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys

85 90 95

Thr Thr Gly Ile Val Arg Pro Phe Leu Tyr Trp Gly Gln Gly Val Met

100 105 110

Val Thr Val Ser

115

<210> 61

<211> 348

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 大鼠 Ab 1548 VH 区

<400> 61

gaggtgccgc tggtggagtc tgggggcggc tcagtgcagc ctgggaggtc catgaaactc 60

tcctgtgtag tctcaggatt cactttcagt aattatggca tggtctgggt ccgccaggct 120

ccaaagaagg gtctggagtg ggtcgcatat attgattctg atggtgataa tacttactac 180

cgagattccg tgaagggccg attcactatc tccagaaata atgcaaaaag caccctatat 240

ttgcaaatgg acagtctgag gtctgaggac acggccactt attactgtac aacagggatt 300

gtccggccct ttctctattg gggccaagga gtcatggtca cagtctcg 348

<210> 62

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 大鼠 Ab 1644 VL 区

<400> 62

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Ala Ile Gly

1 5 10 15

Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val Gly Ala

20 25 30

Ser Gly Lys Thr Tyr Leu Tyr Trp Leu Phe Gln Arg Ser Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Thr Leu Asp Ser Gly Ile Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Glu Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Arg Arg Val Glu Ala Asp Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly

85 90 95

Thr His Phe Pro His Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys

100 105 110

<210> 63

<211> 336

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 大鼠 Ab 1644 VL 区

<400> 63

gatgttgtga tgacccagac tccactgtct ttgtcggttg ccattggaca accagcctcc 60

atctcttgca agtcaagtca gagcctcgta ggtgctagtg gaaagacata tttgtattgg 120

ttatttcaga ggtccggcca gtctccaaag cgactaatct atctggtgtc cacactggac 180

tctggaattc ctgataggtt cagtggcagt ggagcagaga cagattttac tcttaaaatc 240

cgcagagtgg aagccgatga tttgggagtt tattactgct tgcaaggtac acattttcct 300

cacacgtttg gagctgggac caagctggaa ctgaaa 336

<210> 64

<211> 116

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 大鼠 Ab 1644 VH 区

<400> 64

Glu Val Pro Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Thr Lys Leu Ser Cys Val Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Val Trp Val Arg Gln Ala Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Tyr Ile Gly Ser Asp Gly Asp Asn Ile Tyr Tyr Arg Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asn Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys

85 90 95

Thr Thr Gly Ile Val Arg Pro Phe Leu Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr

100 105 110

Val Thr Val Ser

115

<210> 65

<211> 348

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 大鼠 Ab 1644 VH 区

<400> 65

gaggtgccgc tggtggagtc tgggggcggc tcagtgcagc ctgggaggtc cacgaaactc 60

tcctgtgtag tctcaggatt cactttcagt aactatggca tggtctgggt ccgccaggct 120

ccaaagaagg gtctggagtg ggtcgcatat attggttctg atggtgataa tatttactac 180

cgagattccg tgaagggtcg attcactatc tccagaaata atgcaaaaag caccctatat 240

ttgcaaatgg acagtctgag gtctgaggac acggccactt attactgtac aacagggatt 300

gtccggccct ttctctactg gggccaagga accacggtca ccgtctcg 348

<210> 66

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 大鼠 Ab 1496 VK 区

<400> 66

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Ala Leu Gly

1 5 10 15

Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val Gly Ala

20 25 30

Ser Gly Lys Thr Tyr Leu Tyr Trp Leu Phe Gln Arg Ser Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Thr Leu Asp Ser Gly Ile Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Glu Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Arg Arg Val Glu Ala Asp Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly

85 90 95

Thr His Phe Pro His Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys

100 105 110

<210> 67

<211> 336

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 大鼠 Ab 1496 VK 区

<400> 67

gatgttgtga tgacccagac tccactgtct ttgtcggttg cccttggaca accagcctcc 60

atctcttgca agtcaagtca gagcctcgta ggtgctagtg gaaagacata tttgtattgg 120

ttatttcaga ggtccggcca gtctccaaag cgactaatct atctggtgtc cacactggac 180

tctggaattc ctgataggtt cagtggcagt ggagcagaga cagattttac tcttaaaatc 240

cgcagagtgg aagccgatga tttgggagtt tattactgct tgcaaggtac acattttcct 300

cacacgtttg gagctgggac caagctggaa ctgaaa 336

<210> 68

<211> 116

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 大鼠 Ab 1496 VH 区

<400> 68

Glu Val Leu Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Met Lys Leu Ser Cys Val Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Val Trp Val Arg Gln Ala Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Tyr Ile Asp Ser Asp Gly Asp Asn Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asn Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys

85 90 95

Thr Thr Gly Ile Val Arg Pro Phe Leu Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Met

100 105 110

Val Thr Val Ser

115

<210> 69

<211> 348

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 大鼠 Ab 1496 VH 区

<400> 69

gaggtgctgc tggtggagtc tgggggcggc tcagtgcagc ctgggaggtc catgaaactc 60

tcctgtgtag tctcaggatt cactttcagt aattatggca tggtctgggt ccgccaggct 120

ccaaagaagg gtctggagtg ggtcgcatat attgattctg atggtgataa tacttactac 180

cgagattccg tgaagggccg attcactatc tccagaaata atgcaaaaag caccctatat 240

ttgcaaatgg acagtctgag gtctgaggac acggccactt attactgtac aacagggatt 300

gtccggccct ttctctattg gggccaagga accatggtca ccgtctcg 348

<210> 70

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 框架

<400> 70

Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser

1 5 10

<210> 71

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 框架

<400> 71

Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

1 5 10

<210> 72

<211> 447

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 1519gH20 IgG1 重链 (V + 人 γ-1 恒定区)

<400> 72

Glu Val Pro Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Val Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Tyr Ile Asp Ser Asp Gly Asp Asn Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Thr Thr Gly Ile Val Arg Pro Phe Leu Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu

115 120 125

Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys

130 135 140

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser

145 150 155 160

Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser

165 170 175

Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser

180 185 190

Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn

195 200 205

Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His

210 215 220

Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val

225 230 235 240

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr

245 250 255

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu

260 265 270

Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys

275 280 285

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser

290 295 300

Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys

305 310 315 320

Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile

325 330 335

Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro

340 345 350

Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu

355 360 365

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn

370 375 380

Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser

385 390 395 400

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

405 410 415

Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu

420 425 430

His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 73

<211> 1947

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 1519gH20 IgG1 重链 (V + 人 γ-1 恒定区，具有外显子)

<400> 73

gaggtaccac ttgtggaaag cggaggaggt cttgtgcagc ctggaggaag tttacgtctc 60

tcttgtgctg tgtctggctt caccttctcc aattacggaa tggtctgggt cagacaagca 120

cctggaaagg gtcttgaatg ggtggcctat attgactctg acggggacaa cacctactat 180

cgggattccg tgaaaggacg cttcacaatc tcccgagata acgccaagag ctcactgtac 240

ctgcagatga atagcctgag agccgaggat actgccgtgt actattgcac aacgggaatc 300

gttaggcctt ttctgtactg gggacagggc accttggtta ctgtctcgag cgcttctaca 360

aagggcccat cggtcttccc cctggcaccc tcctccaaga gcacctctgg gggcacagcg 420

gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgaaccgg tgacggtgtc gtggaactca 480

ggcgccctga ccagcggcgt gcacaccttc ccggctgtcc tacagtcctc aggactctac 540

tccctcagca gcgtggtgac cgtgccctcc agcagcttgg gcacccagac ctacatctgc 600

aacgtgaatc acaagcccag caacaccaag gtcgacaaga aagttggtga gaggccagca 660

cagggaggga gggtgtctgc tggaagccag gctcagcgct cctgcctgga cgcatcccgg 720

ctatgcagcc ccagtccagg gcagcaaggc aggccccgtc tgcctcttca cccggaggcc 780

tctgcccgcc ccactcatgc tcagggagag ggtcttctgg ctttttcccc aggctctggg 840

caggcacagg ctaggtgccc ctaacccagg ccctgcacac aaaggggcag gtgctgggct 900

cagacctgcc aagagccata tccgggagga ccctgcccct gacctaagcc caccccaaag 960

gccaaactct ccactccctc agctcggaca ccttctctcc tcccagatct gagtaactcc 1020

caatcttctc tctgcagagc ccaaatcttg tgacaaaact cacacatgcc caccgtgccc 1080

aggtaagcca gcccaggcct cgccctccag ctcaaggcgg gacaggtgcc ctagagtagc 1140

ctgcatccag ggacaggccc cagccgggtg ctgacacgtc cacctccatc tcttcctcag 1200

cacctgaact cctgggggga ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc 1260

tcatgatctc ccggacccct gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc 1320

ctgaggtcaa gttcaactgg tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc 1380

cgcgggagga gcagtacaac agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc 1440

aggactggct gaatggcaag gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc 1500

ccatcgagaa aaccatctcc aaagccaaag gtgggacccg tggggtgcga gggccacatg 1560

gacagaggcc ggctcggccc accctctgcc ctgagagtga ccgctgtacc aacctctgtc 1620

cctacagggc agccccgaga accacaggtg tacaccctgc ccccatcccg ggatgagctg 1680

accaagaacc aggtcagcct gacctgcctg gtcaaaggct tctatcccag cgacatcgcc 1740

gtggagtggg agagcaatgg gcagccggag aacaactaca agaccacgcc tcccgtgctg 1800

gactccgacg gctccttctt cctctacagc aagctcaccg tggacaagag caggtggcag 1860

caggggaacg tcttctcatg ctccgtgatg catgaggctc tgcacaacca ctacacgcag 1920

aagagcctct ccctgtctcc gggtaaa 1947

<210> 74

<211> 2004

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 具有信号序列的1519gH20 IgG1 重链 (V + 人 γ-1 恒定区)

<400> 74

atggaatgga gctgggtctt tctcttcttc ctgtcagtaa ctacaggagt ccattctgag 60

gtaccacttg tggaaagcgg aggaggtctt gtgcagcctg gaggaagttt acgtctctct 120

tgtgctgtgt ctggcttcac cttctccaat tacggaatgg tctgggtcag acaagcacct 180

ggaaagggtc ttgaatgggt ggcctatatt gactctgacg gggacaacac ctactatcgg 240

gattccgtga aaggacgctt cacaatctcc cgagataacg ccaagagctc actgtacctg 300

cagatgaata gcctgagagc cgaggatact gccgtgtact attgcacaac gggaatcgtt 360

aggccttttc tgtactgggg acagggcacc ttggttactg tctcgagcgc ttctacaaag 420

ggcccatcgg tcttccccct ggcaccctcc tccaagagca cctctggggg cacagcggcc 480

ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggc 540

gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg gctgtcctac agtcctcagg actctactcc 600

ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc agcttgggca cccagaccta catctgcaac 660

gtgaatcaca agcccagcaa caccaaggtc gacaagaaag ttggtgagag gccagcacag 720

ggagggaggg tgtctgctgg aagccaggct cagcgctcct gcctggacgc atcccggcta 780

tgcagcccca gtccagggca gcaaggcagg ccccgtctgc ctcttcaccc ggaggcctct 840

gcccgcccca ctcatgctca gggagagggt cttctggctt tttccccagg ctctgggcag 900

gcacaggcta ggtgccccta acccaggccc tgcacacaaa ggggcaggtg ctgggctcag 960

acctgccaag agccatatcc gggaggaccc tgcccctgac ctaagcccac cccaaaggcc 1020

aaactctcca ctccctcagc tcggacacct tctctcctcc cagatctgag taactcccaa 1080

tcttctctct gcagagccca aatcttgtga caaaactcac acatgcccac cgtgcccagg 1140

taagccagcc caggcctcgc cctccagctc aaggcgggac aggtgcccta gagtagcctg 1200

catccaggga caggccccag ccgggtgctg acacgtccac ctccatctct tcctcagcac 1260

ctgaactcct ggggggaccg tcagtcttcc tcttcccccc aaaacccaag gacaccctca 1320

tgatctcccg gacccctgag gtcacatgcg tggtggtgga cgtgagccac gaagaccctg 1380

aggtcaagtt caactggtac gtggacggcg tggaggtgca taatgccaag acaaagccgc 1440

gggaggagca gtacaacagc acgtaccgtg tggtcagcgt cctcaccgtc ctgcaccagg 1500

actggctgaa tggcaaggag tacaagtgca aggtctccaa caaagccctc ccagccccca 1560

tcgagaaaac catctccaaa gccaaaggtg ggacccgtgg ggtgcgaggg ccacatggac 1620

agaggccggc tcggcccacc ctctgccctg agagtgaccg ctgtaccaac ctctgtccct 1680

acagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccggga tgagctgacc 1740

aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg 1800

gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgctggac 1860

tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag 1920

gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag 1980

agcctctccc tgtctccggg taaa 2004

<210> 75

<211> 657

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 1519 gL20轻链 (V + 恒定区, 哺乳动物表达，另外的 )

<400> 75

gatatccaga tgacccagag cccatctagc ttatccgctt ccgttggtga tcgcgtgaca 60

attacgtgta agagctccca atctctcgtg ggtgcaagtg gcaagaccta tctgtactgg 120

ctctttcaga agcctggcaa ggcaccaaaa cggctgatct atctggtgtc tacccttgac 180

tctgggatac cgtcacgatt ttccggatct gggagcggaa ctgagttcac actcacgatt 240

tcatcgctgc aacccgagga ctttgctacc tactactgcc tgcaaggcac tcatttccct 300

cacactttcg gccaggggac aaaactcgaa atcaaacgta cggtagcggc cccatctgtc 360

ttcatcttcc cgccatctga tgagcagttg aaatctggaa ctgcctctgt tgtgtgcctg 420

ctgaataact tctatcccag agaggccaaa gtacagtgga aggtggataa cgccctccaa 480

tcgggtaact cccaggagag tgtcacagag caggacagca aggacagcac ctacagcctc 540

agcagcaccc tgacgctgag caaagcagac tacgagaaac acaaagtcta cgcctgcgaa 600

gtcacccatc agggcctgag ctcgcccgtc acaaagagct tcaacagggg agagtgt 657

<210> 76

<211> 684

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 1519gH20 Fab' 重链 (V + 人 γ-1 CH1 + 铰链区,

哺乳动物表达，从SEQ ID NO: 38发生一个碱基变化)

<400> 76

gaggtaccac ttgtggaaag cggaggaggt cttgtgcagc ctggaggaag tttacgtctc 60

tcttgtgctg tgtctggctt caccttctcc aattacggaa tggtctgggt cagacaagca 120

cctggaaagg gtcttgaatg ggtggcctat attgactctg acggggacaa cacctactat 180

cgggattccg tgaaaggacg cttcacaatc tcccgagata acgccaagag ctcactgtac 240

ctgcagatga atagcctgag agccgaggat actgccgtgt actattgcac aacgggaatc 300

gttaggcctt ttctgtactg gggacagggc accttggtta ctgtctcgag cgcttctaca 360

aagggcccat cggtcttccc cctggcaccc tcctccaaga gcacctctgg gggcacagcg 420

gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgaaccgg tgacggtgtc gtggaactca 480

ggcgccctga ccagcggcgt gcacaccttc ccggctgtcc tacagtcctc aggactctac 540

tccctcagca gcgtggtgac cgtgccctcc agcagcttgg gcacccagac ctacatctgc 600

aacgtgaatc acaagcccag caacaccaag gtggacaaga aagttgagcc caaatcttgt 660

gacaaaactc acacatgcgc cgcg 684

<210> 77

<211> 741

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 具有信号序列的1519 gH20 Fab' 重链 (哺乳动物表达，

从SEQ ID NO: 42发生一个碱基变化)

<400> 77

atggaatgga gctgggtctt tctcttcttc ctgtcagtaa ctacaggagt ccattctgag 60

gtaccacttg tggaaagcgg aggaggtctt gtgcagcctg gaggaagttt acgtctctct 120

tgtgctgtgt ctggcttcac cttctccaat tacggaatgg tctgggtcag acaagcacct 180

ggaaagggtc ttgaatgggt ggcctatatt gactctgacg gggacaacac ctactatcgg 240

gattccgtga aaggacgctt cacaatctcc cgagataacg ccaagagctc actgtacctg 300

cagatgaata gcctgagagc cgaggatact gccgtgtact attgcacaac gggaatcgtt 360

aggccttttc tgtactgggg acagggcacc ttggttactg tctcgagcgc ttctacaaag 420

ggcccatcgg tcttccccct ggcaccctcc tccaagagca cctctggggg cacagcggcc 480

ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggc 540

gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg gctgtcctac agtcctcagg actctactcc 600

ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc agcttgggca cccagaccta catctgcaac 660

gtgaatcaca agcccagcaa caccaaggtg gacaagaaag ttgagcccaa atcttgtgac 720

aaaactcaca catgcgccgc g 741

<210> 78

<211> 346

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 1519gL20 FabFv轻链 ( SEQ ID NO: 46的变通序列)

<400> 78

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val Gly Ala

20 25 30

Ser Gly Lys Thr Tyr Leu Tyr Trp Leu Phe Gln Lys Pro Gly Lys Ala

35 40 45

Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Thr Leu Asp Ser Gly Ile Pro

50 55 60

Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile

65 70 75 80

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly

85 90 95

Thr His Phe Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys Gly Gly Gly Gly Ser

210 215 220

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln

225 230 235 240

Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr

245 250 255

Cys Gln Ser Ser Pro Ser Val Trp Ser Asn Phe Leu Ser Trp Tyr Gln

260 265 270

Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Glu Ala Ser Lys

275 280 285

Leu Thr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr

290 295 300

Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr

305 310 315 320

Tyr Tyr Cys Gly Gly Gly Tyr Ser Ser Ile Ser Asp Thr Thr Phe Gly

325 330 335

Cys Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr

340 345

<210> 79

<211> 1038

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 1519gL20 FabFv轻链 (SEQ ID NO: 47的变通序列)

<400> 79

gacatccaga tgacccagtc cccctccagc ctgtccgcct ccgtgggcga cagagtgacc 60

atcacatgca agtcctccca gtccctggtc ggagcctccg gcaagaccta cctgtactgg 120

ctgttccaga agcccggcaa ggcccccaag cggctgatct acctggtgtc taccctggac 180

tccggcatcc cctcccggtt ctccggctct ggctctggca ccgagttcac cctgaccatc 240

tccagcctgc agcccgagga cttcgccacc tactactgtc tgcaaggcac ccacttcccc 300

cacaccttcg gccagggcac caagctggaa atcaagcgga ccgtagcggc cccatctgtc 360

ttcatcttcc cgccatctga tgagcagttg aaatctggaa ctgcctctgt tgtgtgcctg 420

ctgaataact tctatcccag agaggccaaa gtacagtgga aggtggataa cgccctccaa 480

tcgggtaact cccaggagag tgtcacagag caggacagca aggacagcac ctacagcctc 540

agcagcaccc tgacgctgag caaagcagac tacgagaaac acaaagtcta cgcctgcgaa 600

gtcacccatc agggcctgag ctcgcccgtc acaaagagct tcaacagggg agagtgtggt 660

ggaggtggct ctggcggtgg tggctccgga ggcggaggaa gcgacatcca gatgacccag 720

agcccttcct ctgtaagcgc cagtgtcgga gacagagtga ctattacctg ccaaagctcc 780

ccttcagtct ggtccaattt tctatcctgg tatcagcaaa agcccggaaa ggctcctaaa 840

ttgctgatct acgaagcaag caaactcacc agcggcgtgc ccagcaggtt cagcggcagt 900

gggtctggaa ctgactttac cctgacaatc tcctcactcc agcccgagga cttcgccacc 960

tattactgcg gtggaggtta cagtagcata agtgatacga catttggatg cggcactaaa 1020

gtggaaatca agcgtacc 1038

<210> 80

<211> 1071

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 1519gH20 FabFv 重链 (SEQ ID NO: 51的变通序列)

<400> 80

gaggtgcccc tggtggaatc tggcggcgga ctggtgcagc ctggcggctc cctgagactg 60

tcttgcgccg tgtccggctt caccttctcc aactacggca tggtctgggt ccgacaggct 120

cctggcaagg gactggaatg ggtggcctac atcgactccg acggcgacaa cacctactac 180

cgggactccg tgaagggccg gttcaccatc tcccgggaca acgccaagtc ctccctgtac 240

ctgcagatga actccctgcg ggccgaggac accgccgtgt actactgcac caccggcatc 300

gtgcggccct ttctgtactg gggccagggc accctggtca ccgtgtcctc tgcttctaca 360

aagggcccat cggtcttccc cctggcaccc tcctccaaga gcacctctgg gggcacagcg 420

gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgaaccgg tgacggtgtc gtggaactca 480

ggcgccctga ccagcggcgt gcacaccttc ccggctgtcc tacagtcctc tggactctac 540

tccctcagca gcgtggtgac cgtgccctcc agcagcttgg gcacccagac ctacatctgc 600

aacgtgaatc acaagcccag caacaccaag gtggacaaga aagttgagcc caaatcttgt 660

tccggaggtg gcggttccgg aggtggcggt acaggtggcg gtgggtccga agtccagctg 720

cttgaatccg gaggcggact cgtgcagccc ggaggcagtc ttcgcttgtc ctgcgctgta 780

tctggaatcg acctgagcaa ttacgccatc aactgggtga gacaggcacc tgggaaatgc 840

ctcgaatgga tcggcattat atgggctagt gggacgacct tttatgctac atgggcgaag 900

ggtagattca caatctcacg ggataatagt aagaacacag tgtacctgca gatgaactcc 960

ctgcgagcag aggataccgc cgtttactat tgtgctcgca ctgtcccagg ttatagcact 1020

gcaccctact ttgatctgtg ggggcagggc actctggtca ccgtctcgtc c 1071

<210> 81

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 大鼠 Ab 1548 VL 区 (SEQ ID NO: 58的变通序列)

<400> 81

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Ala Ile Gly

1 5 10 15

Gln Pro Ala Ser Ile Ser Ser Lys Ser Ser Gln Ser Leu Val Gly Ala

20 25 30

Gly Gly Lys Thr Tyr Leu Tyr Trp Leu Leu Gln Arg Ser Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Thr Leu Asp Ser Gly Ile Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Glu Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Arg Arg Val Glu Ala Asp Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly

85 90 95

Thr His Phe Pro His Thr Phe Gly Ala Gly Thr Asn Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 82

<211> 336

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 大鼠 Ab 1548 VL 区 (SEQ ID NO: 59的变通序列)

<400> 82

gatgttgtga tgacccagac tccactgtct ttgtcggttg ccattggaca accagcctcc 60

atctcttcta agtcaagtca gagcctcgta ggtgctggtg gaaagacata tttgtattgg 120

ttattacaga ggtccggcca gtctccaaag cgactaatct atctggtgtc cacactggac 180

tctggaattc ctgataggtt cagtggcagt ggagcagaga cagattttac tcttaaaatc 240

cgcagagtgg aagccgatga tttgggagtt tattactgct tgcaaggtac acattttcct 300

cacacgtttg gagctgggac caacctggaa ataaaa 336

<210> 83

<211> 116

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 大鼠 Ab 1548 VH 区 (SEQ ID NO: 60的变通序列)

<400> 83

Glu Val Pro Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Met Lys Leu Ser Cys Val Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Val Trp Val Arg Gln Ala Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Tyr Ile Gly Ser Asp Gly Asp Asn Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asn Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys

85 90 95

Thr Thr Gly Ile Val Arg Pro Phe Leu Tyr Trp Gly Gln Gly Val Met

100 105 110

Val Thr Val Ser

115

<210> 84

<211> 348

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 大鼠 Ab 1548 VH 区 (SEQ ID NO: 61的变通序列)

<400> 84

gaggtgccgc tggtggagtc tgggggcggc tcagtgcagc ctgggaggtc catgaaactc 60

tcctgtgtag tctcaggatt cactttcagt aactatggca tggtctgggt ccgccaggct 120

ccaaagaagg gtctggagtg ggtcgcatat attggttctg atggtgataa tacttactac 180

cgagattccg tgaagggccg attcactatc tccagaaata atgcaaaaag caccctatat 240

ttgcaaatgg acagtctgag gtctgaggac acggccactt attactgtac aacagggatt 300

gtccggccct ttctctactg gggccaagga gtcatggtca cagtctcg 348

<210> 85

<211> 1947

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 1519gH20 IgG1 重链 (V + 人 γ-1 恒定区，具有外显子，

从SEQ ID NO: 71发生一个碱基变化)

<400> 85

gaggtaccac ttgtggaaag cggaggaggt cttgtgcagc ctggaggaag tttacgtctc 60

tcttgtgctg tgtctggctt caccttctcc aattacggaa tggtctgggt cagacaagca 120

cctggaaagg gtcttgaatg ggtggcctat attgactctg acggggacaa cacctactat 180

cgggattccg tgaaaggacg cttcacaatc tcccgagata acgccaagag ctcactgtac 240

ctgcagatga atagcctgag agccgaggat actgccgtgt actattgcac aacgggaatc 300

gttaggcctt ttctgtactg gggacagggc accttggtta ctgtctcgag cgcttctaca 360

aagggcccat cggtcttccc cctggcaccc tcctccaaga gcacctctgg gggcacagcg 420

gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgaaccgg tgacggtgtc gtggaactca 480

ggcgccctga ccagcggcgt gcacaccttc ccggctgtcc tacagtcctc aggactctac 540

tccctcagca gcgtggtgac cgtgccctcc agcagcttgg gcacccagac ctacatctgc 600

aacgtgaatc acaagcccag caacaccaag gtggacaaga aagttggtga gaggccagca 660

cagggaggga gggtgtctgc tggaagccag gctcagcgct cctgcctgga cgcatcccgg 720

ctatgcagcc ccagtccagg gcagcaaggc aggccccgtc tgcctcttca cccggaggcc 780

tctgcccgcc ccactcatgc tcagggagag ggtcttctgg ctttttcccc aggctctggg 840

caggcacagg ctaggtgccc ctaacccagg ccctgcacac aaaggggcag gtgctgggct 900

cagacctgcc aagagccata tccgggagga ccctgcccct gacctaagcc caccccaaag 960

gccaaactct ccactccctc agctcggaca ccttctctcc tcccagatct gagtaactcc 1020

caatcttctc tctgcagagc ccaaatcttg tgacaaaact cacacatgcc caccgtgccc 1080

aggtaagcca gcccaggcct cgccctccag ctcaaggcgg gacaggtgcc ctagagtagc 1140

ctgcatccag ggacaggccc cagccgggtg ctgacacgtc cacctccatc tcttcctcag 1200

cacctgaact cctgggggga ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc 1260

tcatgatctc ccggacccct gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc 1320

ctgaggtcaa gttcaactgg tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc 1380

cgcgggagga gcagtacaac agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc 1440

aggactggct gaatggcaag gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc 1500

ccatcgagaa aaccatctcc aaagccaaag gtgggacccg tggggtgcga gggccacatg 1560

gacagaggcc ggctcggccc accctctgcc ctgagagtga ccgctgtacc aacctctgtc 1620

cctacagggc agccccgaga accacaggtg tacaccctgc ccccatcccg ggatgagctg 1680

accaagaacc aggtcagcct gacctgcctg gtcaaaggct tctatcccag cgacatcgcc 1740

gtggagtggg agagcaatgg gcagccggag aacaactaca agaccacgcc tcccgtgctg 1800

gactccgacg gctccttctt cctctacagc aagctcaccg tggacaagag caggtggcag 1860

caggggaacg tcttctcatg ctccgtgatg catgaggctc tgcacaacca ctacacgcag 1920

aagagcctct ccctgtctcc gggtaaa 1947

<210> 86

<211> 2004

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 具有信号序列的1519gH20 IgG1 重链 (V + 人 γ-1 恒定区)

(从SEQ ID NO:72发生一个碱基变化)

<400> 86

atggaatgga gctgggtctt tctcttcttc ctgtcagtaa ctacaggagt ccattctgag 60

gtaccacttg tggaaagcgg aggaggtctt gtgcagcctg gaggaagttt acgtctctct 120

tgtgctgtgt ctggcttcac cttctccaat tacggaatgg tctgggtcag acaagcacct 180

ggaaagggtc ttgaatgggt ggcctatatt gactctgacg gggacaacac ctactatcgg 240

gattccgtga aaggacgctt cacaatctcc cgagataacg ccaagagctc actgtacctg 300

cagatgaata gcctgagagc cgaggatact gccgtgtact attgcacaac gggaatcgtt 360

aggccttttc tgtactgggg acagggcacc ttggttactg tctcgagcgc ttctacaaag 420

ggcccatcgg tcttccccct ggcaccctcc tccaagagca cctctggggg cacagcggcc 480

ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggc 540

gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg gctgtcctac agtcctcagg actctactcc 600

ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc agcttgggca cccagaccta catctgcaac 660

gtgaatcaca agcccagcaa caccaaggtg gacaagaaag ttggtgagag gccagcacag 720

ggagggaggg tgtctgctgg aagccaggct cagcgctcct gcctggacgc atcccggcta 780

tgcagcccca gtccagggca gcaaggcagg ccccgtctgc ctcttcaccc ggaggcctct 840

gcccgcccca ctcatgctca gggagagggt cttctggctt tttccccagg ctctgggcag 900

gcacaggcta ggtgccccta acccaggccc tgcacacaaa ggggcaggtg ctgggctcag 960

acctgccaag agccatatcc gggaggaccc tgcccctgac ctaagcccac cccaaaggcc 1020

aaactctcca ctccctcagc tcggacacct tctctcctcc cagatctgag taactcccaa 1080

tcttctctct gcagagccca aatcttgtga caaaactcac acatgcccac cgtgcccagg 1140

taagccagcc caggcctcgc cctccagctc aaggcgggac aggtgcccta gagtagcctg 1200

catccaggga caggccccag ccgggtgctg acacgtccac ctccatctct tcctcagcac 1260

ctgaactcct ggggggaccg tcagtcttcc tcttcccccc aaaacccaag gacaccctca 1320

tgatctcccg gacccctgag gtcacatgcg tggtggtgga cgtgagccac gaagaccctg 1380

aggtcaagtt caactggtac gtggacggcg tggaggtgca taatgccaag acaaagccgc 1440

gggaggagca gtacaacagc acgtaccgtg tggtcagcgt cctcaccgtc ctgcaccagg 1500

actggctgaa tggcaaggag tacaagtgca aggtctccaa caaagccctc ccagccccca 1560

tcgagaaaac catctccaaa gccaaaggtg ggacccgtgg ggtgcgaggg ccacatggac 1620

agaggccggc tcggcccacc ctctgccctg agagtgaccg ctgtaccaac ctctgtccct 1680

acagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccggga tgagctgacc 1740

aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg 1800

gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgctggac 1860

tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag 1920

gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag 1980

agcctctccc tgtctccggg taaa 2004

<210> 87

<211> 444

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> 1519gH20 IgG4 重链 (V + 人 γ-4 恒定区 ，无 P突变)

<400> 87

Glu Val Pro Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Gly Met Val Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Tyr Ile Asp Ser Asp Gly Asp Asn Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Thr Thr Gly Ile Val Arg Pro Phe Leu Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu

115 120 125

Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys

130 135 140

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser

145 150 155 160

Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser

165 170 175

Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser

180 185 190

Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn

195 200 205

Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro

210 215 220

Ser Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe

225 230 235 240

Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val

245 250 255

Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe

260 265 270

Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro

275 280 285

Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr

290 295 300

Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val

305 310 315 320

Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala

325 330 335

Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln

340 345 350

Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly

355 360 365

Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro

370 375 380

Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser

385 390 395 400

Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu

405 410 415

Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His

420 425 430

Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys

435 440

<210> 88

<211> 1939

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 1519gH20 IgG4 重链 (V + 人 γ-4 恒定区，具有外显子，

无P突变)

<400> 88

gaggtaccac ttgtggaaag cggaggaggt cttgtgcagc ctggaggaag tttacgtctc 60

tcttgtgctg tgtctggctt caccttctcc aattacggaa tggtctgggt cagacaagca 120

cctggaaagg gtcttgaatg ggtggcctat attgactctg acggggacaa cacctactat 180

cgggattccg tgaaaggacg cttcacaatc tcccgagata acgccaagag ctcactgtac 240

ctgcagatga atagcctgag agccgaggat actgccgtgt actattgcac aacgggaatc 300

gttaggcctt ttctgtactg gggacagggc accttggtta ctgtctcgag cgcttctaca 360

aagggcccat ccgtcttccc cctggcgccc tgctccagga gcacctccga gagcacagcc 420

gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgaaccgg tgacggtgtc gtggaactca 480

ggcgccctga ccagcggcgt gcacaccttc ccggctgtcc tacagtcctc aggactctac 540

tccctcagca gcgtggtgac cgtgccctcc agcagcttgg gcacgaagac ctacacctgc 600

aacgtagatc acaagcccag caacaccaag gtggacaaga gagttggtga gaggccagca 660

cagggaggga gggtgtctgc tggaagccag gctcagccct cctgcctgga cgcaccccgg 720

ctgtgcagcc ccagcccagg gcagcaaggc atgccccatc tgtctcctca cccggaggcc 780

tctgaccacc ccactcatgc ccagggagag ggtcttctgg atttttccac caggctccgg 840

gcagccacag gctggatgcc cctaccccag gccctgcgca tacaggggca ggtgctgcgc 900

tcagacctgc caagagccat atccgggagg accctgcccc tgacctaagc ccaccccaaa 960

ggccaaactc tccactccct cagctcagac accttctctc ctcccagatc tgagtaactc 1020

ccaatcttct ctctgcagag tccaaatatg gtcccccatg cccatcatgc ccaggtaagc 1080

caacccaggc ctcgccctcc agctcaaggc gggacaggtg ccctagagta gcctgcatcc 1140

agggacaggc cccagccggg tgctgacgca tccacctcca tctcttcctc agcacctgag 1200

ttcctggggg gaccatcagt cttcctgttc cccccaaaac ccaaggacac tctcatgatc 1260

tcccggaccc ctgaggtcac gtgcgtggtg gtggacgtga gccaggaaga ccccgaggtc 1320

cagttcaact ggtacgtgga tggcgtggag gtgcataatg ccaagacaaa gccgcgggag 1380

gagcagttca acagcacgta ccgtgtggtc agcgtcctca ccgtcctgca ccaggactgg 1440

ctgaacggca aggagtacaa gtgcaaggtc tccaacaaag gcctcccgtc ctccatcgag 1500

aaaaccatct ccaaagccaa aggtgggacc cacggggtgc gagggccaca tggacagagg 1560

tcagctcggc ccaccctctg ccctgggagt gaccgctgtg ccaacctctg tccctacagg 1620

gcagccccga gagccacagg tgtacaccct gcccccatcc caggaggaga tgaccaagaa 1680

ccaggtcagc ctgacctgcc tggtcaaagg cttctacccc agcgacatcg ccgtggagtg 1740

ggagagcaat gggcagccgg agaacaacta caagaccacg cctcccgtgc tggactccga 1800

cggctccttc ttcctctaca gcaggctaac cgtggacaag agcaggtggc aggaggggaa 1860

tgtcttctca tgctccgtga tgcatgaggc tctgcacaac cactacacac agaagagcct 1920

ctccctgtct ctgggtaaa 1939

<210> 89

<211> 1996

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 具有信号序列的1519gH20 IgG4 重链 (V + 人 γ-4 恒定区) - 无P突变

<400> 89

atggaatgga gctgggtctt tctcttcttc ctgtcagtaa ctacaggagt ccattctgag 60

gtaccacttg tggaaagcgg aggaggtctt gtgcagcctg gaggaagttt acgtctctct 120

tgtgctgtgt ctggcttcac cttctccaat tacggaatgg tctgggtcag acaagcacct 180

ggaaagggtc ttgaatgggt ggcctatatt gactctgacg gggacaacac ctactatcgg 240

gattccgtga aaggacgctt cacaatctcc cgagataacg ccaagagctc actgtacctg 300

cagatgaata gcctgagagc cgaggatact gccgtgtact attgcacaac gggaatcgtt 360

aggccttttc tgtactgggg acagggcacc ttggttactg tctcgagcgc ttctacaaag 420

ggcccatccg tcttccccct ggcgccctgc tccaggagca cctccgagag cacagccgcc 480

ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggc 540

gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg gctgtcctac agtcctcagg actctactcc 600

ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc agcttgggca cgaagaccta cacctgcaac 660

gtagatcaca agcccagcaa caccaaggtg gacaagagag ttggtgagag gccagcacag 720

ggagggaggg tgtctgctgg aagccaggct cagccctcct gcctggacgc accccggctg 780

tgcagcccca gcccagggca gcaaggcatg ccccatctgt ctcctcaccc ggaggcctct 840

gaccacccca ctcatgccca gggagagggt cttctggatt tttccaccag gctccgggca 900

gccacaggct ggatgcccct accccaggcc ctgcgcatac aggggcaggt gctgcgctca 960

gacctgccaa gagccatatc cgggaggacc ctgcccctga cctaagccca ccccaaaggc 1020

caaactctcc actccctcag ctcagacacc ttctctcctc ccagatctga gtaactccca 1080

atcttctctc tgcagagtcc aaatatggtc ccccatgccc atcatgccca ggtaagccaa 1140

cccaggcctc gccctccagc tcaaggcggg acaggtgccc tagagtagcc tgcatccagg 1200

gacaggcccc agccgggtgc tgacgcatcc acctccatct cttcctcagc acctgagttc 1260

ctggggggac catcagtctt cctgttcccc ccaaaaccca aggacactct catgatctcc 1320

cggacccctg aggtcacgtg cgtggtggtg gacgtgagcc aggaagaccc cgaggtccag 1380

ttcaactggt acgtggatgg cgtggaggtg cataatgcca agacaaagcc gcgggaggag 1440

cagttcaaca gcacgtaccg tgtggtcagc gtcctcaccg tcctgcacca ggactggctg 1500

aacggcaagg agtacaagtg caaggtctcc aacaaaggcc tcccgtcctc catcgagaaa 1560

accatctcca aagccaaagg tgggacccac ggggtgcgag ggccacatgg acagaggtca 1620

gctcggccca ccctctgccc tgggagtgac cgctgtgcca acctctgtcc ctacagggca 1680

gccccgagag ccacaggtgt acaccctgcc cccatcccag gaggagatga ccaagaacca 1740

ggtcagcctg acctgcctgg tcaaaggctt ctaccccagc gacatcgccg tggagtggga 1800

gagcaatggg cagccggaga acaactacaa gaccacgcct cccgtgctgg actccgacgg 1860

ctccttcttc ctctacagca ggctaaccgt ggacaagagc aggtggcagg aggggaatgt 1920

cttctcatgc tccgtgatgc atgaggctct gcacaaccac tacacacaga agagcctctc 1980

cctgtctctg ggtaaa 1996

<210> 90

<211> 336

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 1519 gL20 V-区 (哺乳动物表达，SEQ ID NO:17的变通序列)

<400> 90

gacatccaga tgacccagtc cccctccagc ctgtccgcct ccgtgggcga cagagtgacc 60

atcacatgca agtcctccca gtccctggtc ggagcctccg gcaagaccta cctgtactgg 120

ctgttccaga agcccggcaa ggcccccaag cggctgatct acctggtgtc taccctggac 180

tccggcatcc cctcccggtt ctccggctct ggctctggca ccgagttcac cctgaccatc 240

tccagcctgc agcccgagga cttcgccacc tactactgtc tgcaaggcac ccacttcccc 300

cacaccttcg gccagggcac caagctggaa atcaag 336

<210> 91

<211> 657

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 1519 gL20轻链 (V + 恒定区, 哺乳动物表达)

SEQ ID NO: 24的变通序列)

<400> 91

gacatccaga tgacccagtc cccctccagc ctgtccgcct ccgtgggcga cagagtgacc 60

atcacatgca agtcctccca gtccctggtc ggagcctccg gcaagaccta cctgtactgg 120

ctgttccaga agcccggcaa ggcccccaag cggctgatct acctggtgtc taccctggac 180

tccggcatcc cctcccggtt ctccggctct ggctctggca ccgagttcac cctgaccatc 240

tccagcctgc agcccgagga cttcgccacc tactactgtc tgcaaggcac ccacttcccc 300

cacaccttcg gccagggcac caagctggaa atcaagcgga ccgtggccgc tccctccgtg 360

ttcatcttcc caccctccga cgagcagctg aagtccggca ccgcctccgt cgtgtgcctg 420

ctgaacaact tctacccccg cgaggccaag gtgcagtgga aggtggacaa cgccctgcag 480

tccggcaact cccaggaatc cgtcaccgag caggactcca aggacagcac ctactccctg 540

tcctccaccc tgaccctgtc caaggccgac tacgagaagc acaaggtgta cgcctgcgaa 600

gtgacccacc agggcctgtc cagccccgtg accaagtcct tcaaccgggg cgagtgc 657

<210> 92

<211> 348

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 1519 gH20 V-区 (哺乳动物表达，SEQ ID NO: 31的变通序列)

<400> 92

gaggtgcccc tggtggaatc tggcggcgga ctggtgcagc ctggcggctc cctgagactg 60

tcttgcgccg tgtccggctt caccttctcc aactacggca tggtctgggt ccgacaggct 120

cctggcaagg gactggaatg ggtggcctac atcgactccg acggcgacaa cacctactac 180

cgggactccg tgaagggccg gttcaccatc tcccgggaca acgccaagtc ctccctgtac 240

ctgcagatga actccctgcg ggccgaggac accgccgtgt actactgcac caccggcatc 300

gtgcggccct ttctgtactg gggccagggc accctggtca ccgtgtcc 348

<210> 93

<211> 1332

<212> DNA

<213> 人工的

<220>

<223> 1519gH20 IgG4 重链 (V + 人 γ-4P 恒定区

SEQ ID NO: 44的变通序列)

<400> 93

gaggtgcccc tggtggaatc tggcggcgga ctggtgcagc ctggcggctc cctgagactg 60

tcttgcgccg tgtccggctt caccttctcc aactacggca tggtctgggt ccgacaggct 120

cctggcaagg gactggaatg ggtggcctac atcgactccg acggcgacaa cacctactac 180

cgggactccg tgaagggccg gttcaccatc tcccgggaca acgccaagtc ctccctgtac 240

ctgcagatga actccctgcg ggccgaggac accgccgtgt actactgcac caccggcatc 300

gtgcggccct ttctgtactg gggccagggc accctggtca ccgtgtcctc tgcctccacc 360

aagggcccct ccgtgttccc tctggcccct tgctcccggt ccacctccga gtctaccgcc 420

gctctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgagcccg tgacagtgtc ctggaactct 480

ggcgccctga cctccggcgt gcacaccttc cctgccgtgc tgcagtcctc cggcctgtac 540

tccctgtcct ccgtcgtgac cgtgccctcc tccagcctgg gcaccaagac ctacacctgt 600

aacgtggacc acaagccctc caacaccaag gtggacaagc gggtggaatc taagtacggc 660

cctccctgcc ccccctgccc tgcccctgaa tttctgggcg gaccttccgt gttcctgttc 720

cccccaaagc ccaaggacac cctgatgatc tcccggaccc ccgaagtgac ctgcgtggtg 780

gtggacgtgt cccaggaaga tcccgaggtc cagttcaatt ggtacgtgga cggcgtggaa 840

gtgcacaatg ccaagaccaa gcccagagag gaacagttca actccaccta ccgggtggtg 900

tccgtgctga ccgtgctgca ccaggactgg ctgaacggca aagagtacaa gtgcaaggtg 960

tccaacaagg gcctgccctc cagcatcgaa aagaccatct ccaaggccaa gggccagccc 1020

cgcgagcccc aggtgtacac cctgccccct agccaggaag agatgaccaa gaaccaggtg 1080

tccctgacct gtctggtcaa gggcttctac ccctccgaca ttgccgtgga atgggagtcc 1140

aacggccagc ccgagaacaa ctacaagacc accccccctg tgctggacag cgacggctcc 1200

ttcttcctgt actctcggct gaccgtggac aagtcccggt ggcaggaagg caacgtcttc 1260

tcctgctccg tgatgcacga ggccctgcac aaccactaca cccagaagtc cctgtccctg 1320

agcctgggca ag 1332

<210> 94

<211> 267

<212> PRT

<213> 人工的

<220>

<223> FcRn α链胞外序列

<400> 94

Ala Glu Ser His Leu Ser Leu Leu Tyr His Leu Thr Ala Val Ser Ser

1 5 10 15

Pro Ala Pro Gly Thr Pro Ala Phe Trp Val Ser Gly Trp Leu Gly Pro

20 25 30

Gln Gln Tyr Leu Ser Tyr Asn Ser Leu Arg Gly Glu Ala Glu Pro Cys

35 40 45

Gly Ala Trp Val Trp Glu Asn Gln Val Ser Trp Tyr Trp Glu Lys Glu

50 55 60

Thr Thr Asp Leu Arg Ile Lys Glu Lys Leu Phe Leu Glu Ala Phe Lys

65 70 75 80

Ala Leu Gly Gly Lys Gly Pro Tyr Thr Leu Gln Gly Leu Leu Gly Cys

85 90 95

Glu Leu Gly Pro Asp Asn Thr Ser Val Pro Thr Ala Lys Phe Ala Leu

100 105 110

Asn Gly Glu Glu Phe Met Asn Phe Asp Leu Lys Gln Gly Thr Trp Gly

115 120 125

Gly Asp Trp Pro Glu Ala Leu Ala Ile Ser Gln Arg Trp Gln Gln Gln

130 135 140

Asp Lys Ala Ala Asn Lys Glu Leu Thr Phe Leu Leu Phe Ser Cys Pro

145 150 155 160

His Arg Leu Arg Glu His Leu Glu Arg Gly Arg Gly Asn Leu Glu Trp

165 170 175

Lys Glu Pro Pro Ser Met Arg Leu Lys Ala Arg Pro Ser Ser Pro Gly

180 185 190

Phe Ser Val Leu Thr Cys Ser Ala Phe Ser Phe Tyr Pro Pro Glu Leu

195 200 205

Gln Leu Arg Phe Leu Arg Asn Gly Leu Ala Ala Gly Thr Gly Gln Gly

210 215 220

Asp Phe Gly Pro Asn Ser Asp Gly Ser Phe His Ala Ser Ser Ser Leu

225 230 235 240

Thr Val Lys Ser Gly Asp Glu His His Tyr Cys Cys Ile Val Gln His

245 250 255

Ala Gly Leu Ala Gln Pro Leu Arg Val Glu Leu Glu Ser Pro Ala Lys

260 265 270

Ser Ser

<210> 95

<211> 99

<212> PRT

<213> 人

<400> 95

Ile Gln Lys Thr Pro Gln Ile Gln Val Tyr Ser Arg His Pro Pro Glu

1 5 10 15

Asn Gly Lys Pro Asn Phe Leu Asn Cys Tyr Val Ser Gln Phe His Pro

20 25 30

Pro Gln Ile Glu Ile Glu Leu Leu Lys Asn Gly Lys Lys Ile Pro Asn

35 40 45

Ile Glu Met Ser Asp Leu Ser Phe Ser Lys Asp Trp Ser Phe Tyr Ile

50 55 60

Leu Ala His Thr Glu Phe Thr Pro Thr Glu Thr Asp Val Tyr Ala Cys

65 70 75 80

Arg Val Lys His Val Thr Leu Lys Glu Pro Lys Thr Val Thr Trp Asp

85 90 95

Arg Asp Met

Claims (33)

1.一种用于在有此需要的人中治疗或预防重症肌无力(MG)的方法，所述方法包括向所述人施用至少3剂抗FcRn抗体或其抗原结合片段，其中每剂独立地选自4mg/kg、7mg/kg、10mg/kg、15mg/kg和20mg/kg。

2.抗FcRn抗体或其抗原结合片段用于在有此需要的人中治疗或预防重症肌无力(MG)，包括向所述人施用至少3剂所述抗体或抗原结合片段，其中每个剂量独立地选自4mg/kg、7mg/kg、10mg/kg、15mg/kg和20mg/kg。

3.抗FcRn抗体或其抗原结合片段用于制备用于治疗或预防重症肌无力(MG)的药物中的用途，包括施用至少3剂所述抗体或其结合片段，其中每剂独立地选自4mg/kg、7mg/kg、10mg/kg、15mg/kg和20mg/kg。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法、抗FcRn抗体或其抗原结合片段或用途，其中所述抗体或其结合片段包含：

a)具有可变区的重链或重链片段，其中所述可变区包含三个CDR，所述3个CDR具有SEQID NO:1中给出的CDR H1的序列，SEQ ID NO:2中给出的CDR H2的序列和SEQ ID NO:3中给出的CDR H3的序列，以及

b)具有可变区的轻链或轻链片段，其中所述可变区包含三个CDR，所述3个CDR具有SEQID NO:4中给出的CDR L1的序列，SEQ ID NO:5中给出的CDR L2的序列和SEQ ID NO:6中给出的CDR L3的序列，

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法、抗FcRn抗体或其抗原结合片段或用途，其中所述抗体或其抗原结合片段是人源化的。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法、抗FcRn抗体或其抗原结合片段或用途，其中所述抗FcRn抗体或其结合片段包含含有SEQ ID NO:29中给出的序列或与其具有至少80％同一性的对FcRn特异的序列的重链。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法、抗FcRn抗体或其抗原结合片段或用途，其中所述抗FcRn抗体或其结合片段包含含有SEQ ID NO:15中给出的序列或与其具有至少80％同一性的对FcRn特异的序列的轻链。

8.根据权利要求6或7所述的方法、抗FcRn抗体或其抗原结合片段或用途，其中所述抗FcRn抗体或其结合片段包含具有SEQ ID NO:29中给出的序列的重链可变结构域序列和具有SEQ ID NO:15中给出的序列的轻链可变结构域序列。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法、抗FcRn抗体或用途，其中所述抗体是全长抗体。

10.根据权利要求9所述的方法、抗FcRn抗体或用途，其中所述全长抗体选自IgG1、IgG4和IgG4P。

11.根据权利要求9或权利要求10所述的方法、抗FcRn抗体或用途，其中所述抗FcRn抗体具有包含SEQ ID NO:72或SEQ ID NO:87或SEQ ID NO:43中给出的序列的重链和包含SEQID NO:22中给出的序列的轻链。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法、抗FcRn抗体或用途，其中所述抗FcRn抗体是UCB7665(罗扎诺昔单抗)。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法、抗FcRn抗体或其抗原结合片段或用途，其对人FcRn的结合亲和力为100pM或更低。

14.根据权利要求13所述的方法、抗FcRn抗体或其抗原结合片段或用途，其中当在pH6和pH7.4下测量时，对人FcRn的结合亲和力为100pM或更小。

15.根据权利要求1至14中任一项所述的方法、抗FcRn抗体或其抗原结合片段或用途，其中所述抗体或抗原结合片段作为包含药学上可接受的赋形剂、稀释剂或载体中的一种或多种的药物组合物提供。

16.根据权利要求15所述的方法、抗FcRn抗体或其抗原结合片段或用途，其中所述药物组合物还包含一种或多种其它活性成分。

17.根据权利要求1至16中任一项所述的方法、抗FcRn抗体或其抗原结合片段或用途，其中每剂为4mg/kg或7mg/kg或10mg/kg或15mg/kg或20mg/kg。

18.根据权利要求1至16中任一项所述的方法、抗FcRn抗体或其抗原结合片段或用途，其中每剂为7mg/kg或10mg/kg。

19.根据权利要求1至18中任一项所述的方法、抗FcRn抗体或其抗原结合片段或用途，其中每周一次施用每剂。

20.根据权利要求1至19中任一项所述的方法、抗FcRn抗体或其抗原结合片段或用途，其中每周一次施用至少4、5或6剂，任选地在第三剂与第四剂之间具有给药假期。

21.根据权利要求1至20中任一项所述的方法、抗FcRn抗体或其抗原结合片段或用途，其中每周一次施用至少6剂的抗体或抗原结合片段，并且每剂在4mg/kg至30mg/kg的范围内，例如为7mg/kg或10mg/kg。

22.根据权利要求1至21中任一项所述的方法、抗FcRn抗体或其抗原结合片段或用途，其中所述抗FcRn抗体或其抗原结合片段通过皮下或静脉内施用。

23.根据权利要求1至22中任一项所述的方法、抗FcRn抗体或其抗原结合片段或用途，其中所述抗FcRn抗体或其抗原结合片段阻断人IgG与人FcRn的结合。

24.根据权利要求1至23中任一项所述的方法、抗FcRn抗体或其抗原结合片段或用途，其中所述抗FcRn抗体或其抗原结合片段不结合β2微球蛋白。

25.根据权利要求1至24中任一项所述的方法、抗FcRn抗体或其抗原结合片段或用途，其中每周一次施用4、5或6剂，随后以比最初的4、5或6剂更少的量和/或更低的频率施用额外的一或多剂。

26.根据权利要求1-25中任一项所述的方法、抗FcRn抗体或其抗原结合片段或用途，其中所述抗FcRn抗体或其抗原结合片段与人FcRn的表位结合，所述表位包含选自SEQ ID NO:94的残基V105、P106、T107、A108和K109中的至少一个氨基酸和选自SEQ ID NO:94的P100、E115、E116、F117、M118、N119、F120、D121、L122、K123、Q124、G128、G129、D130、W131、P132和E133中的至少一个、例如至少2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个残基。

27.根据权利要求1-26中任一项所述的方法、抗FcRn抗体或其抗原结合片段或用途，其中所述人患有被分类为中度至重度的全身性MG。

28.根据权利要求1-27中任一项所述的方法、抗FcRn抗体或其抗原结合片段或用途，其中所述人呈抗AChR和/或抗MuSK自身抗体阳性，并且任选地被考虑用IVIg或血浆置换进行治疗。

29.根据权利要求1-28中任一项所述的方法、抗FcRn抗体其抗原结合片段或用途，其中每剂以选自280mg、420mg、560mg、840mg和1120mg的固定单位剂量提供。

30.一种在有此需要的人中治疗或预防重症肌无力(MG)的方法，所述方法包括向所述人施用至少3剂，优选至少6剂的抗FcRn抗体或其抗原结合片段，其中每剂选自280mg、315mg、350mg、385mg、420mg、455mg、490mg、525mg、560mg、595mg、630mg、665mg、700mg、735mg、770mg、805mg、840mg、875mg、910mg、945mg、980mg、1015mg、1050mg、1085mg和1120mg，并且其中所述抗FcRn抗体或其抗原结合片段包含含有SED ID NO:29中给出的序列的重链和含有SED ID NO:15中给出的序列的轻链。

31.一种在有此需要的人中治疗或预防重症肌无力(MG)的方法，所述方法包括向所述人施用至少6剂抗FcRn抗体或其抗原结合片段，其中对于体重小于50kg，一剂为280mg，对于体重等于或大于50kg但小于70kg，一剂为420mg，对于体重等于或大于70kg但小于100kg，一剂为560mg，以及对于体重等于或大于100kg，一剂为840mg。

32.一种在有此需要的人中治疗或预防重症肌无力(MG)的方法，所述方法包括向所述人施用至少6剂抗FcRn抗体或其抗原结合片段，其中对于小于50kg的体重，一剂为420mg，对于等于或大于50kg但小于70kg的体重，一剂为560mg，对于体重等于或大于70kg但小于100kg，一剂为840mg，以及对于体重等于或大于100kg，一剂为1120mg。

33.根据权利要求30-32中任一项所述的方法，其中每周一次施用每一剂。

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