CN113577161B - 一种分段式发酵制备畜禽抗病毒中草药制剂的方法 - Google Patents
一种分段式发酵制备畜禽抗病毒中草药制剂的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113577161B CN113577161B CN202110997627.9A CN202110997627A CN113577161B CN 113577161 B CN113577161 B CN 113577161B CN 202110997627 A CN202110997627 A CN 202110997627A CN 113577161 B CN113577161 B CN 113577161B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fermentation
- liquid
- livestock
- culture
- poultry
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 title claims abstract description 63
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 title claims abstract description 63
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 title claims abstract description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 244000144972 livestock Species 0.000 title claims abstract description 18
- 244000144977 poultry Species 0.000 title claims abstract description 18
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 title claims abstract description 16
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 52
- 241000193749 Bacillus coagulans Species 0.000 claims abstract description 19
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 claims abstract description 19
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 claims abstract description 19
- 229940054340 bacillus coagulans Drugs 0.000 claims abstract description 19
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 claims abstract description 19
- 241000194108 Bacillus licheniformis Species 0.000 claims abstract description 18
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 15
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 14
- 239000002131 composite material Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 24
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 24
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims description 9
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims description 9
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 claims description 9
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 9
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims description 9
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 9
- 240000004534 Scutellaria baicalensis Species 0.000 claims description 7
- 235000017089 Scutellaria baicalensis Nutrition 0.000 claims description 7
- 230000003321 amplification Effects 0.000 claims description 6
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 6
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 claims description 6
- 241000037740 Coptis chinensis Species 0.000 claims description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 5
- 241000972673 Phellodendron amurense Species 0.000 claims description 4
- -1 18-22 g/L Substances 0.000 claims description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 3
- 241000218202 Coptis Species 0.000 claims description 3
- 235000002991 Coptis groenlandica Nutrition 0.000 claims description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 3
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims description 3
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 3
- WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L magnesium sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Mg+2].[O-]S([O-])(=O)=O WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 229940061634 magnesium sulfate heptahydrate Drugs 0.000 claims description 3
- 229940099596 manganese sulfate Drugs 0.000 claims description 3
- 235000007079 manganese sulphate Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000011702 manganese sulphate Substances 0.000 claims description 3
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 3
- 235000015497 potassium bicarbonate Nutrition 0.000 claims description 3
- 229910000028 potassium bicarbonate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000011736 potassium bicarbonate Substances 0.000 claims description 3
- TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M potassium hydrogencarbonate Chemical compound [K+].OC([O-])=O TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims description 3
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 3
- 239000008247 solid mixture Substances 0.000 claims description 3
- 238000010563 solid-state fermentation Methods 0.000 claims description 3
- YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N triammonium citrate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[NH4+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000001393 triammonium citrate Substances 0.000 claims description 3
- 235000011046 triammonium citrate Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 3
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 3
- 241000972672 Phellodendron Species 0.000 claims description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 claims description 2
- 241000555682 Forsythia x intermedia Species 0.000 claims 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- 238000009395 breeding Methods 0.000 abstract description 4
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 abstract description 4
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 abstract description 4
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 abstract description 4
- 230000036528 appetite Effects 0.000 abstract description 3
- 235000019789 appetite Nutrition 0.000 abstract description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 3
- 208000035240 Disease Resistance Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 abstract description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 abstract description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 abstract 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 25
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 24
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 10
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 9
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 6
- 208000010359 Newcastle Disease Diseases 0.000 description 4
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 210000003746 feather Anatomy 0.000 description 3
- 229940126680 traditional chinese medicines Drugs 0.000 description 3
- 241000218691 Cupressaceae Species 0.000 description 2
- 241000555712 Forsythia Species 0.000 description 2
- 241000576429 Forsythia suspensa Species 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 235000008216 herbs Nutrition 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006996 mental state Effects 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 241000561734 Celosia cristata Species 0.000 description 1
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 1
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 1
- 241001417516 Haemulidae Species 0.000 description 1
- IPQKDIRUZHOIOM-UHFFFAOYSA-N Oroxin A Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC(C(=C1O)O)=CC2=C1C(=O)C=C(C=1C=CC=CC=1)O2 IPQKDIRUZHOIOM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000207929 Scutellaria Species 0.000 description 1
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 description 1
- IKIIZLYTISPENI-ZFORQUDYSA-N baicalin Chemical compound O1[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1OC(C(=C1O)O)=CC2=C1C(=O)C=C(C=1C=CC=CC=1)O2 IKIIZLYTISPENI-ZFORQUDYSA-N 0.000 description 1
- 229960003321 baicalin Drugs 0.000 description 1
- AQHDANHUMGXSJZ-UHFFFAOYSA-N baicalin Natural products OC1C(O)C(C(O)CO)OC1OC(C(=C1O)O)=CC2=C1C(=O)C=C(C=1C=CC=CC=1)O2 AQHDANHUMGXSJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 210000001520 comb Anatomy 0.000 description 1
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 1
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 235000021050 feed intake Nutrition 0.000 description 1
- 230000000762 glandular Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 210000002741 palatine tonsil Anatomy 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 235000015096 spirit Nutrition 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 210000003437 trachea Anatomy 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/71—Ranunculaceae (Buttercup family), e.g. larkspur, hepatica, hydrastis, columbine or goldenseal
- A61K36/718—Coptis (goldthread)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/53—Lamiaceae or Labiatae (Mint family), e.g. thyme, rosemary or lavender
- A61K36/539—Scutellaria (skullcap)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/63—Oleaceae (Olive family), e.g. jasmine, lilac or ash tree
- A61K36/634—Forsythia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/75—Rutaceae (Rue family)
- A61K36/756—Phellodendron, e.g. corktree
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/14—Prodigestives, e.g. acids, enzymes, appetite stimulants, antidyspeptics, tonics, antiflatulents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
- A61P39/02—Antidotes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/10—Preparation or pretreatment of starting material
- A61K2236/19—Preparation or pretreatment of starting material involving fermentation using yeast, bacteria or both; enzymatic treatment
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P60/00—Technologies relating to agriculture, livestock or agroalimentary industries
- Y02P60/80—Food processing, e.g. use of renewable energies or variable speed drives in handling, conveying or stacking
- Y02P60/87—Re-use of by-products of food processing for fodder production
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Botany (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Mycology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明属于畜禽抗病毒制剂技术领域，具体公开一种分段式发酵制备畜禽抗病毒中草药制剂的方法。将黄连20‑25份、黄芩10‑15份、黄柏15‑20份和连翘10‑15分别粉碎；将黄芩和连翘进行提取，得提取液；将提取液和凝结芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和植物乳杆菌三种益生菌的发酵培养液进行混合发酵；将黄芩、连翘提取后的药渣与黄连、黄柏粉混合，用复合发酵液进行拌料并发酵，即得。本发明制备的中草药制剂具有清热解毒、补气益气、巩固根本和增强食欲的功效，可增强提高养殖动物抗病能力，提高养殖动物机体免疫力。本发明制备的微生态制剂还具有绿色无残留的特点，有效提高畜禽养殖效益和养殖质量。
Description
技术领域
本发明属于畜禽抗病毒制剂技术领域，具体涉及一种分段式发酵制备畜禽抗病毒中草药制剂的方法。
背景技术
发酵中药是一种绿色的饲料添加剂，利用益生菌对中草药进行发酵，将中草药中的大分子物质分解转化为小分子物质，可直接被动物消化道吸收利用，从而提高中草药药效，增强其作用效果，是一种极具应用潜力的健康安全的抗生素替代物。
中草药中的有效成分经过提纯后，其中还含有大量不易降解的成分，如果不加以利用，将会对生态环境的污染造成一定的影响。因此，中草药通过合理有效的利用，不仅可以提高资源利用率，节约资源，减少浪费，还可以减少对生态环境造成的污染，中药与益生菌相结合，可以为解决环境污染问题和资源再利用提供一种新的方法。
发明内容
针对上述现有技术的缺陷与不足，本发明的目的在于提供一种分段式发酵制备畜禽抗病毒中草药制剂的方法。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案如下：
一种分段式发酵制备畜禽抗病毒中草药制剂的方法，制备步骤如下：
（1）、以重量份计，称取黄连20-25份、黄芩10-15份、黄柏15-20份、连翘10-15份，分别粉碎，备用；
（2）、发酵液制备：
（2.1）、将凝结芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和植物乳杆菌分别活化后扩大培养，获得对应的菌液；
（2.2）、将凝结芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液、植物乳杆菌菌液按照（8.5-9.5）∶（1.8-2.2）∶1的体积比混合，获得发酵培养液；
（3）、液态发酵：
（3.1）、提取工艺：将步骤（1）所得的黄芩粉和连翘粉放入水中浸润至少30 min，随后煮沸搅拌提取至少1 h，再离心过滤，获得中药提取液和药渣；
（3.2）、将步骤（2.2）所得发酵培养液和步骤（3.1）所得中药提取液按照1∶（3-5）的体积比加入发酵罐中，再向发酵罐中加入复合培养基，发酵培养液和中药提取液的总量与复合培养基的体积比为（0.5-1.5）∶100，在搅拌速率50-80 rpm、通气量1.5-2.5 vvm条件下发酵48-72 h，获得液体发酵液；所述复培养基的组成为：牛肉膏0.8-1.2 g/L、蛋白胨8-12g/L、酵母浸出物4-6 g/L、葡萄糖18-22 g/L、NaCl 4-6 g/L、柠檬酸三铵4-6 g/L、碳酸氢钾1-3 g/L、吐温-80 0.5-1.5 g/L、七水硫酸镁0.1-0.3 g/L、硫酸锰0.04-0.06 g/L，余量为水；
（4）、固态发酵：
（4.1）、将步骤（3.1）所得药渣与步骤（1）所得黄连粉、黄柏粉混合；
（4.2）、将步骤（3.2）所得液体发酵液和步骤（4.1）所得固体混合物按照1∶（3-5）的质量比进行混合，均匀混合后分装到带有单向排气阀的发酵袋中密封，30-32 ℃发酵48-72h，即得目标产物--畜禽抗病毒中草药制剂。
较好地，步骤（1）中，粉碎至40-80目。
较好地，步骤（2.1）中，凝结芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液和植物乳杆菌菌液分别按照下述过程制备获得：
凝结芽孢杆菌菌液和地衣芽孢杆菌菌液的制备：将保存的凝结芽孢杆菌/地衣芽孢杆菌接种到种子斜面培养基中，35-37 ℃活化培养24-48 h ；然后将活化的培养液按体积比（0.5-1.5）∶100接种到基础发酵培养基中，35-37 ℃、150-200 r/min震荡扩大培养24-48 h后，制得凝结芽孢杆菌菌液/地衣芽孢杆菌菌液；所述种子斜面培养基的组成为：蛋白胨8-12 g/L、牛肉膏14-16 g/L、氯化钠14-16 g/L、琼脂16-20 g/L，余量为水；基础发酵培养基的组成为：蛋白胨8-12 g/L、牛肉膏14-16 g/L、氯化钠14-16 g/L，余量为水；
植物乳杆菌菌液的制备：将保存的植物乳杆菌接种到MRS培养基中，35-37 ℃、150-200 r/min震荡活化培养24-48 h；然后将活化的培养液按体积比（0.5-1.5）∶100接种到MRS培养基中，35-37 ℃、150-200 r/min震荡扩大培养24-48 h后，制得植物乳杆菌菌液。
由于液态发酵和固态发酵时所用到的培养基和培养条件不一样，同一种中药液态发酵和固态发酵的产物不一样，pH产量也不一样，有些中药成分在固态发酵过程中pH出现变化或者某些代谢产物下会发生降解，失去功效，因此不是所有的中药都能利用固态发酵处理。本发明在发酵过程中采用分段式发酵，黄芩、连翘先经过提取，然后再将提取液和益生菌进行混合液体发酵，提取后的药渣和黄连、黄柏混合，再与液体发酵液进行混合发酵。
本发明制备的中草药制剂具有清热解毒、补气益气、巩固根本和增强食欲的功效，可增强提高养殖动物抗病能力，提高养殖动物机体免疫力；本发明制备的微生态制剂还具有绿色无残留的特点，有效提高畜禽养殖效益和养殖质量。
具体实施方式
为使本发明更加清楚、明确，以下对本发明进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
一种分段式发酵制备畜禽抗病毒中草药制剂的方法，制备步骤如下：
（1）、以重量份计，称取黄连20份、黄芩15份、黄柏15份、连翘10份，分别粉碎至60目，备用；
（2）、发酵液制备：
（2.1）、凝结芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液和植物乳杆菌菌液分别按照下述过程制备获得：
凝结芽孢杆菌菌液和地衣芽孢杆菌菌液的制备：将保存的凝结芽孢杆菌/地衣芽孢杆菌接种到种子斜面培养基中，37 ℃活化培养24 h ；然后将活化的培养液按体积比1∶100接种到基础发酵培养基中，37 ℃、180 r/min震荡扩大培养48 h后，制得凝结芽孢杆菌菌液/地衣芽孢杆菌菌液；所述种子斜面培养基的组成为：蛋白胨10 g/L、牛肉膏15 g/L、氯化钠15 g/L、琼脂18 g/L，余量为水；基础发酵培养基的组成为：蛋白胨10 g/L、牛肉膏15g/L、氯化钠15 g/L，余量为水；
植物乳杆菌菌液的制备：将保存的植物乳杆菌接种到MRS培养基中，37 ℃、180 r/min震荡活化培养24 h；然后将活化的培养液按体积比1∶100接种到MRS培养基中，37 ℃、180 r/min震荡扩大培养48 h后，制得植物乳杆菌菌液；
（2.2）、将凝结芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液、植物乳杆菌菌液按照9∶2∶1的体积比混合，获得发酵培养液；
（3）、液态发酵：
（3.1）、提取工艺：将步骤（1）所得的黄芩粉和连翘粉放入常温水中浸润30 min，随后煮沸搅拌提取1 h，再离心过滤，获得中药提取液和药渣；
（3.2）、将步骤（2.2）所得发酵培养液和步骤（3.1）所得中药提取液按照1∶4的体积比加入发酵罐中，再向发酵罐中加入复合培养基，发酵培养液和中药提取液的总量与复合培养基的体积比为1∶100，在搅拌速率60 rpm、通气量2.0 vvm条件下发酵48 h，获得液体发酵液；所述复培养基的组成为：牛肉膏1.0 g/L、蛋白胨10 g/L、酵母浸出物5 g/L、葡萄糖20g/L、NaCl 5 g/L、柠檬酸三铵5 g/L、碳酸氢钾2 g/L、吐温-80 1.0 g/L、七水硫酸镁0.2 g/L、硫酸锰0.05 g/L，余量为水；
（4）、固态发酵：
（4.1）、将步骤（3.1）所得药渣与步骤（1）所得黄连粉、黄柏粉混合；
（4.2）、将步骤（3.2）所得液体发酵液和步骤（4.1）所得固体混合物按照1∶4的质量比进行混合，均匀混合后分装到带有单向排气阀的发酵袋中密封，30 ℃发酵72 h，即得目标产物--畜禽抗病毒中草药制剂。
对照例1
与实施例1的区别在于：步骤（2.2）中，将凝结芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液、植物乳杆菌菌液按照9∶5∶1的体积比混合，获得发酵培养液。其它均同实施例1。
对照例2
与实施例1的区别在于：步骤（2.2）中，将凝结芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液、植物乳杆菌菌液按照9∶1∶1的体积比混合，获得发酵培养液。其它均同实施例1。
对实施例1以及对照例1-2所得目标产物中的凝结芽孢杆菌数量、乳酸含量、小肽含量及有效成分黄芩苷含量进行检测，结果见表1，表明：实施例1的菌种比例具有非常优异的发酵效果。
动物实验
1.1试验药品
复方中药：实施例1步骤（1）中黄连、黄芩、黄柏、连翘四味中药按所述比例分别粉碎后混合均匀所得。
发酵中药：实施例1利用分段式发酵制备的畜禽抗病毒中草药制剂。
1.2试验动物
依据鸡感染新城疫的诊断标准，收集临床病鸡8200只。
1.2.1鸡新城疫诊断标准
1.2.1.1临床症状
鸡群精神不振，羽毛松乱，采食量和饮水量减少，羽毛蓬松，缩头扎堆并呈点头啄食状；鸡冠和肉髯呈暗红色或黑紫色；呼吸困难，张口伸颈，常有“咕噜”、“咯咯”的叫声，口鼻之中有粘液流出；粪便呈绿色或黄绿色，稀薄且恶臭。
1.2.1.2病例剖检
病死鸡的各处粘膜和浆膜出血，尤其腺胃乳头呈明显的针尖样出血点；半数死亡鸡的气管发现环状出血，盲肠扁桃体肿胀出血，肠道有出血斑，心冠脂肪有出血点。
1.3 病鸡的分组方法和给药方案
将感染鸡只随机分为3组，对照组200只，复方中药组和发酵中药组各4000只。各组给药方案见表2。试验期间所有试验鸡只统一给予常规肉鸡全价料和日常常规管理。
1.4 疗效观察及死亡情况
试验期间每天观察各试验组鸡的精神状态、平均采食情况、粪便性状等指标。试验期间按照疗效判定标准，观察和记录各组的临床治愈鸡数、有效鸡数及试验期间各组的死亡鸡数；疗效判定标准如下：
治愈：各种临床症状消失，食欲、精神状态良好，粪便正常；
无效：各种临床症状没有效果或效果不明显；
死亡：用药后死亡。
1.5.试验结果
本次试验周期共七天，具体试验效果如下：
试验组：试验开始时，200只鸡均具有不同程度的临床症状，其中重度临床症状16只；试验结束后，临床治愈140只，治愈率为70%；无效鸡只40只，无效率20%；死亡鸡只20只，死亡率10%；
复方中药组：试验开始时，4000只鸡均具有不同程度的临床症状，其中重度临床症状830只；试验结束后，临床治愈3360只，治愈率为84%；无效鸡只535只，无效率13.38%；死亡鸡只105只，死亡率2.62%；
发酵中药组：试验开始时，4000只鸡均具有不同程度的临床症状，其中重度临床症状835只；试验结束后，临床治愈3680只，治愈率为92%；无效鸡只275只，无效率6.87%；死亡鸡只45只，死亡率1.13%。
对比结果见表3。
1.6.小结
通过试验表明：本发明制备的发酵中药在治疗鸡新城疫时，可有效降低染病鸡死亡率，提高染病鸡治愈率效果，对防治新城疫等病毒性疾病有较高的临床应用价值。
Claims (3)
1.一种分段式发酵制备畜禽抗病毒中草药制剂的方法，其特征在于，制备步骤如下：
（1）、以重量份计，称取黄连20-25份、黄芩10-15份、黄柏15-20份、连翘10-15份，分别粉碎，备用；
（2）、发酵液制备：
（2.1）、将凝结芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和植物乳杆菌分别活化后扩大培养，获得对应的菌液；
（2.2）、将凝结芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液、植物乳杆菌菌液按照（8.5-9.5）∶（1.8-2.2）∶1的体积比混合，获得发酵培养液；
（3）、液态发酵：
（3.1）、提取工艺：将步骤（1）所得的黄芩粉和连翘粉放入水中浸润至少30 min，随后煮沸搅拌提取至少1 h，再离心过滤，获得中药提取液和药渣；
（3.2）、将步骤（2.2）所得发酵培养液和步骤（3.1）所得中药提取液按照1∶（3-5）的体积比加入发酵罐中，再向发酵罐中加入复合培养基，发酵培养液和中药提取液的总量与复合培养基的体积比为（0.5-1.5）∶100，在搅拌速率50-80 rpm、通气量1.5-2.5 vvm条件下发酵48-72 h，获得液体发酵液；所述复合培养基的组成为：牛肉膏0.8-1.2 g/L、蛋白胨8-12 g/L、酵母浸出物4-6 g/L、葡萄糖18-22 g/L、NaCl 4-6 g/L、柠檬酸三铵4-6 g/L、碳酸氢钾1-3 g/L、吐温-80 0.5-1.5 g/L、七水硫酸镁0.1-0.3 g/L、硫酸锰0.04-0.06 g/L，余量为水；
（4）、固态发酵：
（4.1）、将步骤（3.1）所得药渣与步骤（1）所得黄连粉、黄柏粉混合；
（4.2）、将步骤（3.2）所得液体发酵液和步骤（4.1）所得固体混合物按照1∶（3-5）的质量比进行混合，均匀混合后分装到带有单向排气阀的发酵袋中密封，30-32 ℃发酵48-72 h，即得目标产物--畜禽抗病毒中草药制剂。
2.如权利要求1所述的分段式发酵制备畜禽抗病毒中草药制剂的方法，其特征在于：步骤（1）中，粉碎至40-80目。
3.如权利要求1所述的分段式发酵制备畜禽抗病毒中草药制剂的方法，其特征在于：步骤（2.1）中，凝结芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液和植物乳杆菌菌液分别按照下述过程制备获得：
凝结芽孢杆菌菌液和地衣芽孢杆菌菌液的制备：将保存的凝结芽孢杆菌/地衣芽孢杆菌接种到种子斜面培养基中，35-37 ℃活化培养24-48 h ；然后将活化的培养液按体积比（0.5-1.5）∶100接种到基础发酵培养基中，35-37 ℃、150-200 r/min震荡扩大培养24-48 h后，制得凝结芽孢杆菌菌液/地衣芽孢杆菌菌液；所述种子斜面培养基的组成为：蛋白胨8-12 g/L、牛肉膏14-16 g/L、氯化钠14-16 g/L、琼脂16-20 g/L，余量为水；基础发酵培养基的组成为：蛋白胨8-12 g/L、牛肉膏14-16 g/L、氯化钠14-16 g/L，余量为水；
植物乳杆菌菌液的制备：将保存的植物乳杆菌接种到MRS培养基中，35-37 ℃、150-200r/min震荡活化培养24-48 h；然后将活化的培养液按体积比（0.5-1.5）∶100接种到MRS培养基中，35-37 ℃、150-200 r/min震荡扩大培养24-48 h后，制得植物乳杆菌菌液。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110997627.9A CN113577161B (zh) | 2021-08-27 | 2021-08-27 | 一种分段式发酵制备畜禽抗病毒中草药制剂的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110997627.9A CN113577161B (zh) | 2021-08-27 | 2021-08-27 | 一种分段式发酵制备畜禽抗病毒中草药制剂的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113577161A CN113577161A (zh) | 2021-11-02 |
| CN113577161B true CN113577161B (zh) | 2022-08-19 |
Family
ID=78239929
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110997627.9A Active CN113577161B (zh) | 2021-08-27 | 2021-08-27 | 一种分段式发酵制备畜禽抗病毒中草药制剂的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN113577161B (zh) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112877257B (zh) * | 2021-03-18 | 2023-04-07 | 昆明理工大学 | 一株地衣芽孢杆菌及其应用 |
| CN116549347A (zh) * | 2022-01-28 | 2023-08-08 | 北京工商大学 | 一种连翘果发酵物及其制备方法及应用 |
| CN117257865B (zh) * | 2023-11-27 | 2024-04-12 | 广东省农业科学院动物科学研究所 | 一种用于提高禽畜免疫力的发酵型中药组合物的制备方法及其应用 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108813098B (zh) * | 2018-06-07 | 2022-05-31 | 吉林仟客莱科技集团股份有限公司 | 含天然抗菌组分的微生物发酵复合无抗饲料 |
| CN109601699A (zh) * | 2018-12-28 | 2019-04-12 | 沈阳博善英胜生物技术有限公司 | 一种功能性微生物发酵饲料及生产方法和应用 |
-
2021
- 2021-08-27 CN CN202110997627.9A patent/CN113577161B/zh active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN113577161A (zh) | 2021-11-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN113577161B (zh) | 一种分段式发酵制备畜禽抗病毒中草药制剂的方法 | |
| CN106798862B (zh) | 一种用于提高雏鸡免疫力的中药微生态制剂、制备方法及其用法 | |
| CN100581378C (zh) | 饲用酵解中草药制剂的制备方法 | |
| CN104605178A (zh) | 一种生产优质鸡肉的饲养方法 | |
| CN105166459A (zh) | 一种猪饲料 | |
| CN110787247B (zh) | 一种防治畜禽腹泻的中药微生态制剂及其制备方法 | |
| CN104604793A (zh) | 一种生产优质猪肉的饲养方法 | |
| CN108450656A (zh) | 一种中草药渣定向发酵制备功能性饲料添加剂的方法 | |
| CN109350655B (zh) | 一种提高猪生长和繁殖性能的发酵中药及其制备方法 | |
| CN105685476A (zh) | 一种石斑鱼饲料及其制备方法 | |
| CN106343256A (zh) | 一种促进南美白对虾蜕皮的饲料及制备方法 | |
| CN108991261A (zh) | 一种发酵猪饲料的制备方法 | |
| CN105250406A (zh) | 一种防治淡水鱼病毒性疾病的中草药发酵提取液及其制备方法 | |
| CN105104863A (zh) | 一种易于促进猪生长的猪饲料 | |
| CN104855705B (zh) | 一种肉鸡用生物发酵饲料及其制备方法 | |
| CN111248347A (zh) | 一种用于畜禽脱霉解毒的复合饲料添加剂及其制备方法 | |
| CN104839426B (zh) | 一种生物发酵饲料及其制备方法 | |
| CN110279037A (zh) | 一种猪用番茄粉黄芪益生菌保健液及其制备方法 | |
| CN106177133A (zh) | 一种抗病毒的中药发酵液及其制备方法 | |
| CN1857698A (zh) | 治疗禽流感生物制剂的生产方法 | |
| CN110448637B (zh) | 一种扶正解毒、增加免疫力的组方发酵中药及其制备方法 | |
| CN113854401A (zh) | 一种发酵中药饲料添加剂及其制备方法 | |
| CN112544812A (zh) | 一种产蛋后期蛋鸡用混菌发酵型中草药添加剂及其制备方法和应用 | |
| CN105724831A (zh) | 一种石斑鱼饲料及其制备方法 | |
| CN105112328A (zh) | 一种白术多糖-芽孢杆菌发酵液的制备方法与应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CP03 | Change of name, title or address | ||
| CP03 | Change of name, title or address |
Address after: No. 9, Yugang Road, Airport Economic Comprehensive Experimental Zone, Zhengzhou City, Henan Province, 451162 Patentee after: Henan Muxiang Biotechnology Co.,Ltd. Country or region after: China Address before: 451162 airport road five, Zhengzhou, Henan Patentee before: HENAN SOAR VETERINARY PHARMACEUTICAL Co.,Ltd. Country or region before: China Patentee before: HENAN MUXIANG BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd. |