CN113481096A - 一种检测芯片及其使用方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种检测芯片及其使用方法，所述检测芯片包括检测层，所述检测层包括依次连接的进样区段、反应区段和出样区段，所述进样区段设置有蛇形通道。本发明提供的检测芯片可以实现对于细胞的分泌活动的检测，同时本发明提供了一种检测胰岛分泌功能的方法，本发明提供的检测胰岛分泌功能的方法可以实现对单胰岛分泌功能的评价，并且能够实现多个单胰岛样品的并行检测，还可以评价有效功能胰岛的数量百分比及个体功能差异性，从而为胰岛分化研究及临床胰岛移植提供重要的参考作用。

Description

一种检测芯片及其使用方法
技术领域
本发明属于生物检测领域。具体地，本发明涉及检测芯片，及其检测细胞的分泌功能中的应用和检测胰岛分泌功能的方法。
背景技术
胰岛或胰岛移植替代β细胞是胰岛素依赖型糖尿病患者唯一的长期治疗选择。作为胰岛移植前的治疗效果评价，一般先要对从供体或干细胞分化的胰岛进行功能评价。
胰岛功能检测芯片是用于评价离体胰岛功能的试验设备，具体来说，胰岛功能检测芯片可以用于研究不同物种离体胰岛或干细胞分化来的胰岛在不同的刺激条件下的分泌功能(如胰岛素及前体，胰高血糖素分泌等)，以及揭示胰岛中不同种类细胞的相互偶联关系的机制(如α细胞、β细胞、δ细胞等)，同时还可以用于糖尿病药物筛选和胰岛移植前的质量控制等。
CN203672881A公开了一种胰岛灌流成像系统，该系统包括多个注射泵、灌流芯片和收集装置，多个所述注射泵分别与所述灌流芯片连接，所述灌流芯片与所述收集装置连接，所述灌流芯片包括相互可拆卸连接的盖子和反应池，所述盖子设有支撑骨；该专利提供的系统可以从多方面保护胰岛不受损伤，使胰岛的特定分泌活动有效进行。Glieberman AL,Pope B D,Zimmerman J F,et al.Synchronized stimulation and continuousinsulin sensing in a microfluidic human Islet on a Chip designed for scalablemanufacturing[J].Lab on a Chip,2019,19(18):2993-3010公开了一种PMMA基的胰岛功能检测平台，该平台可以在动态葡萄糖刺激下实现胰岛素分泌的实时检测。上述专利和文献公开的胰岛功能评价系统的检测需要大量的胰岛样品，其结果反应了一群混合的胰岛的功能，无法对其中的单个胰岛的功能进行评价，并且也无法对多个样品进行同时评价。
实现单个胰岛水平上的实时功能检测可以准确获得样品中的有效功能胰岛的数量百分比及个体间的功能差异性，对胰岛分化研究及临床胰岛移植有重要的参考指导意义。
因此，想要提供一种可以实现单个胰岛水平的实时功能评价的检测芯片。
发明内容
针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种检测芯片及其使用方法，同时本发明提供了一种检测胰岛功能的方法，所述方法利用本发明提供的检测芯片进行，利用本发明提供的检测芯片可以减少胰岛的用量，实现对单胰岛的功能检测，同时检测芯片包括的多个进样口可以添加不同种类或不同浓度溶液实现对不同刺激条件下的单个胰岛功能的实时检测研究。
为达此目的，本发明采用以下技术方案：
第一方面，本发明提供了一种检测芯片，所述检测芯片包括检测层，所述检测层包括：
所述检测层包括依次连接的进样区段、反应区段和出样区段，所述进样区段设置有蛇形通道。
本发明所述连接包括液体连通，即可以依次流过进样区段、反应区段和出样区段。
本发明所述反应区段包括至少一个反应池，所述反应池与所述进样区段连接，优选所述反应池的直径为2-2.5mm，例如2.2mm、2.4mm等。
在目前现有的对于检测样品的分泌活动的检测中，例如对于胰岛分泌胰岛素的检测中，若检测样品量较少，则会导致分泌的胰岛素的量无法满足检测要求。本发明通过在进样区段设置蛇形通道，一方面蛇形通道可以增加进样通道的长度，使进样溶液充分混合均匀，实现检测芯片的实时功能检测，另一方面，蛇形通道的设置还可以使进样溶液的流速足够缓慢，进样量足够小的流入反应区段，同时本发明的检测芯片包括多个反应池，可以实现多个反应池的同时出样，即蛇形通道以及多个反应池的设计，能够确保本发明提供的检测芯片在检测样品量极小的情况下，可以在出样区段收集到样品分泌物足够多的反应液，能够满足后续的检测。
本发明包括多个反应池，多个反应池之间呈并联连接状态，可以实现多个检测样品的分泌功能的并行检测，提高检测效率，同一外界刺激条件(进样溶液)通过进样区段分别流入不同反应池中，多个反应池中放置的检测样品同时进行分泌活动，多个出样口同时出样，收集的反应液既可以分别进行检测，也可以混合进行后续的检测分析，本发明提供的检测芯片可以减少检测样品的用量，避免了检测样品量较大而无法对单个样品的功能进行评价。
本发明设置多个反应池可以实现对单个样品的功能监测的同时还可以获得有效功能样品的数量百分比以及个体样品之间的功能差异性。
作为本发明的一种优选技术方案，所述进样区段包括第一渐变通道、蛇形通道和第二渐变通道，所述蛇形通道一端连接所述第一渐变通道，另一端连接所述第二渐变通道，所述第二渐变通道与所述反应区段连接；优选所述第一渐变通道的直径沿溶液流动方向逐渐减小，和/或，优选所述第二渐变通道的直径沿溶液流动方向逐渐增大。
本发明为了使在进样口添加的溶液在进样通道组件中顺利流动，将与进样口连接的进样通道部分设计为由宽变窄的渐变式结构，可以有效消除微量体积下由于表面张力引起的液体流动停滞，增加溶液的分流进入。同时进样通道与反应池连接的部分同样为渐变式结构，相当于反应池的进口通道由窄变宽，此种设计有利于溶液进入反应池。
作为本发明的一种优选技术方案，所述蛇形通道的直径为0.05-0.15mm，例如0.08mm、0.1mm、0.12mm等。
作为本发明的一种优选技术方案，所述进样区段包括与所述反应池数目相同的第二渐变通道，所述第二渐变通道与所述反应池一一对应连接。
作为本发明的一种优选技术方案，所述进样区段还设置有气体存储腔，所述蛇形通道一端连接所述第一渐变通道，另一端连接所述气体存储腔，优选所述进样区段还设置有多条分进样通道，所述分进样通道一端连接所述气体存储腔，另一端与所述第二渐变通道一一对应连接。
作为本发明的一种优选技术方案，所述进样区段包括至少一个进样口，所述进样口与所述第一渐变通道一一对应连接。在本发明中，所有的进样口之间为并联连接的方式。
作为本发明的一种优选技术方案，任意两个或两个以上的进样口对应连接的第一渐变通道的另一端汇流并与所述蛇形通道连接。
本发明在检测芯片上设置多个进样口，在同一组进样口中，可以灌流不同浓度的溶液来达到需要的目标浓度，即时实现浓度依赖性实验。不同组的进样口可以设置不同种类的溶液，实现对不同刺激条件下的单个胰岛功能的实时检测研究。
作为本发明的一种优选技术方案，所述进样口的直径为1-2mm，例如1.2mm、1.4mm、1.6mm、1.8mm等。
作为本发明的一种优选技术方案，所述出样区段包括出样通道和出样口，所述出样通道一端连接所述反应区段，另一端连接所述出样口。
作为本发明的一种优选技术方案，所述出样通道和出样口的数量均与所述反应池的数量相等，所述出样通道一一对应连接所述反应池和出样口。
作为本发明的一种优选技术方案，所述出样通道呈哑铃型，进一步优选所述出样通道的最小直径小于等于0.08mm，例如0.075mm。出样通道最窄处的直径在0.08mm以下，可以防止胰岛随着反应液从反应池中流出。同时，反应池的出口通道直径由宽变窄(出样通道呈哑铃型)，这样的设计可以有效提高反应液流出反应池。
作为本发明的一种优选技术方案，所述出样口为半圆形结构。
本发明的出样口通道宽度由窄逐渐变宽，呈喇叭形状，并与半圆形设计的出样口相连，整个出样口呈现类似水滴的形状，有利于反应液的流出和收集。
作为本发明的一种优选技术方案，所述检测芯片还包括载板，所述载板用于密封所述检测层。
优选地，在所述检测层中，所述进样口、反应池和出样口均为通孔结构。将所述检测层“扣”在载板上，载板对进样通道和出样通道进行密封，试剂可以通过检测层上设置的进样通孔流入进样通道，然后通过出样通孔收集。
作为本发明的一种具体实施方式，本发明提供的检测芯片包括检测层，检测层包括：
直径为1.4mm的四个进样口，与进样口一一对应四条第一渐变通道，第一渐变通道宽度由0.68mm逐渐减小至0.13mm，每两个进样口连接的第一渐变通道的另一端汇流并与直径为0.1mm蛇形通道连接，两条第一渐变通道之间的角度是120°；在蛇形通道的末端设置气体存储腔，气体存储腔同时与多条分进样通道连接，分进样通道之间夹角均为120°，分别一一对应连接四个直径为2.2mm的反应池，反应池的进样处通道宽度由窄变宽(第二渐变通道)，出样处的通道由宽变窄，最窄处为0.075mm，反应池与出样通道和出样口连接。
第二方面，本发明提供了第一方面所述的检测芯片在检测细胞的分泌功能中的应用。
作为本发明的一种优选技术方案，所述细胞的分泌功能包括单胰岛的分泌功能或回肠内分泌细胞的分泌功能，进一步优选在单胰岛分泌功能检测中的应用。
本发明所述的回肠内分泌细胞的分泌功能可以是回肠内分泌细胞分泌的胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1)。
本发明所述的单胰岛指的是从人或动物胰腺中分离提纯出来的单个胰岛细胞团，也可以是利用多功能干细胞诱导分化得到的单个胰岛细胞团。例如人的单个胰岛的直径在150μm左右，大约包括1500个细胞，其中包含60％的胰岛素分泌细胞(β细胞)和30％的胰高血糖素分泌细胞(α细胞)，其余10％主要由生长激素抑制素分泌细胞(δ细胞)，胰多肽分泌细胞(γ或PP细胞)和生长素释放肽分泌细胞(ε细胞)组成。
相比于目前现有的胰岛功能评价芯片必须需要大量的胰岛样品才能完成对于胰岛分泌功能的检测，本发明提供的检测芯片可以实现对单胰岛分泌功能的评价，并且能够实现多个单胰岛样品的并行检测，还可以评价有效功能胰岛的数量百分比及个体功能差异性，从而为胰岛分化研究及临床胰岛移植提供重要的参考作用。
第三方面，本发明提供了一种检测胰岛分泌功能的方法，所述方法包括：利用第一方面所述的检测芯片对胰岛进行刺激并收集含有所述胰岛分泌物的反应液，优选所述胰岛为单胰岛。
作为本发明的一种优选技术方案，所述方法包括：
(1)将所述胰岛放入所述反应区段中；
(2)将试剂通过所述进样区段进样，然后试剂流入反应区段，对所述胰岛进行刺激；
(3)收集由所述出样区段出样的含有所述胰岛分泌物的反应液；
(4)对收集的反应液进行检测。
本发明中单胰岛直接在反应池开口处进行滴加即可，可以避免利用注射泵对于单胰岛的伤害。
作为本发明的一种优选技术方案，所述试剂流入所述反应区段的流速为5-10μL/min，例如6μL/min、7μL/min、8μL/min、9μL/min等，优选10μL/min。
本发明中的试剂流速需要在本发明的限定范围内才能收集到足够的能够被试剂盒检测到的样品量，若试剂的流速过快，则待检测样品量偏低，无法被试剂盒检测到。
作为本发明的一种优选技术方案，所述方法还包括利用胰岛素检测试剂盒对收集的反应液进行检测，优选胰岛素ELISA试剂盒。
在本申请的一种具体实施方式中：
对于大鼠胰岛检测用的是Rat Ultrasensitive Insulin ELISA Jumbo(品牌：Alpco；货号：80-INSRTU-E10)。
对于人胰岛检测用的是Ultrasensitive Insulin ELISA Jumbo(品牌：Alpco；货号：80-INSHUU-E10)。
利用本发明第一方面提供的检测芯片，可以实现多个出样口同时出样，同时配合适当的试剂流速，使得得到的样品量足以进行后续的检测研究，同时设置的多个进样口可以添加不同浓度、不同种类的试剂，可以实现对单胰岛在不同刺激条件下的实时动态研究。
本发明提出的方法可以用于研究离体胰岛或干细胞分化的胰岛在不同的刺激条件下的功能(如胰岛素及前体，胰高血糖素分泌等)，以及揭示胰岛中不同种类细胞的相互偶联关系的机制(如α细胞、β细胞、δ细胞)，同时还可以用于糖尿病药物筛选和胰岛移植前的质量控制等。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
(1)本发明提供的检测芯片可以使充分混合均匀的进样溶液以足够慢的流速流入反应池中，同时本发明的检测芯片包括多个反应池，可以实现多个反应池的同时出样，即本发明提供的检测芯片的蛇形通道以及多个反应池的设计，可以确保在检测样品用量较小的前提下，在出样区段收集到检测样品分泌物足够多的反应液，能够满足后续的检测；
(2)本发明提供的检测芯片可以实现对单个样品的功能监测的同时还可以获得有效功能样品的数量百分比以及个体样品之间的功能差异性，本发明提供的检测芯片可以实现多个检测样品的分泌功能的并行检测，提高检测效率；
(3)本发明提供的检测芯片通过在进样通道、出样通道等地方设置渐变式结构，可以有效消除微量体积下由于表面张力引起的液体流动停滞，增加溶液的分流进入；
(4)本发明提供的检测胰岛分泌功能的方法可以实现对单胰岛分泌功能的评价，并且能够实现多个单胰岛样品的并行检测，还可以评价有效功能胰岛的数量百分比及个体功能差异性，从而为胰岛分化研究及临床胰岛移植提供重要的参考作用；
(5)本发明提供的检测胰岛分泌功能的方法可以实现多个出样口同时出样，同时配合适当的试剂流速，使得得到的样品量足以进行后续的检测研究，同时设置的多个进样口可以添加不同浓度、不同种类的试剂，可以实现对单胰岛在不同刺激条件下的实时动态研究。
附图说明
图1为本发明实施例1提供的检测芯片的检测层的结构示意图。
图2为本发明对比例1提供的检测芯片的检测层的结构示意图。
图3为本发明对比例2提供的检测芯片的检测层的结构示意图。
其中，1-进样区段；11-第一渐变通道；12-蛇形通道；121-直管状进样通道；13-第二渐变通道；14-气体存储腔；15-分进样通道；16-进样口；2-反应区段；21-反应池；3-出样区段；31-出样管道；32-出样口。
具体实施方式
下面结合附图并通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述具体实施方式仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
实施例1
本实施例提供了一种检测芯片，检测芯片由检测层和载板组成。
如图1所示，检测层包括依次连接的进样区段1、反应区段2和出样区段3，其中：
所述进样区段包括四个直径为1.4mm的进样口16，平均分为两组，四个进样口16一一对应连接的四条第一渐变通道11，第一渐变通道11宽度由0.68mm逐渐减小至0.13mm，每组进样口16对应连接的两条第一渐变通道11之间的角度是120°，第一渐变通道11汇合后为蛇形通道12，直径为0.1mm；在蛇形通道12末端设置气体存储腔14，气体存储腔14后连接多条夹角均为120°分进样通道15，分进样通道15分别一一对应连接四个第二渐变通道13；
所述反应区段2包括四个直径为2.2mm的反应池21，与四个第二渐变通道13分别一一对应连接；
所述出样区段3包括四条与反应池21一一对应连接的呈哑铃型的出样通道31，出样通道31的最小直径为0.075mm，还包括四个半圆形的出样口32，与所述出样通道31一一对应连接。
所有的进样口16、反应池21和出样口32均为通孔结构。
检测层“扣”在载板上，将检测层上除进样口16、反应池21和出样口32的其余部分进行密封。
对比例1
本对比例提供了一种检测芯片，检测芯片由检测层和载板组成。
如图2所示，与实施例1的区别在于，在本对比例中，进样区段不包括四条第二渐变通道，四条分进样通道15直接与四个反应池一一对应连接。
同时，所述出样区段3包括四条与反应池21一一对应连接的出样通道31，出样通道31的直径为0.075mm，还包括四个半圆形的出样口32，与所述出样通道31一一对应连接。
实施例2：实验对比芯片四个出样口能否出液及出液量的差别
对比实施例1提供的芯片和对比例1提供的芯片(管道没有渐变)的四个出样口在低流速下是否可以同时出液及出液量的差别，当通入进样口的流速分别800μL/min、400μL/min、200μL/min和40μL/min，理论上四个出样口中单个出样口的理论相应流速分别为200μL/min、100μL/min、50μL/min和10μL/min。
方法如下：分别在进样口以800μL/min、400μL/min、200μL/min和40μL/min的流速通入去离子水，进样量为400μL，检测四个出样口能否同时出样、出样流速和出样量，结果见表1和表2：
表1
Figure BDA0003101699660000101
表2
Figure BDA0003101699660000102
Figure BDA0003101699660000111
注：表1为出样口的出样流速，表2为出样口的出样量。
由表1和表2可知，当使用实施例1提供的芯片时，在不同的流速下，四个出样口都可以同时出样，且出样量差别在10％以内；当使用对比例1提供的芯片时，当流速分别为800μL/min和400μL/min，只有三个出样口出样，另外一个出样口不出样，且出液量差别较大，接近30％，当流速进一步降低为200μL/min和40μL/min时，仅有一个出样口出样。
对比例2
本对比例提供了一种检测芯片，检测芯片由检测层和载板组成。
如图3所示，与实施例1的区别在于，在本对比例中，将进样区段的蛇形通道替换为直管状进样通道121；
其中，直管状进样通道121一端连接第一渐变通道，一端连接气体存储腔，且直管状进样通道121不具有蛇形结构。
实施例3
本实施例提供了一种利用实施例1的检测芯片检测单胰岛分泌功能的方法。
(1)手工挑选干细胞分化的单个胰岛放入实施例1的分泌功能检测芯片的反应池中，并将反应池进行封口；
(2)先通入含有2mM葡萄糖的KRB溶液孵育一个小时，随后连续通入含有2mM葡萄糖的KRB溶液，含有20mM葡萄糖的KRB溶液，含有2mM葡萄糖的KRB溶液和含有2mM葡萄糖和30mM氯化钾的KRB溶液各30分钟，进样口流速均为10μL/min，每隔6分钟收集一次样品。
(3)样品通过出样口进行收集；
(4)利用人胰岛检测试剂盒(Ultrasensitive Insulin ELISA Jumbo，品牌：Alpco；货号：80-INSHUU-E10)对样品中的胰岛素浓度进行测定，测试结果如下：
孵育后，通入含有2mM葡萄糖的KRB溶液的30min内，5个时间点所取5个点值的测试结果基本没有变化，胰岛素平均浓度为0.64±0.15μIU/mL；通入含有20mM葡萄糖的KRB溶液的30min时间所取的五个点胰岛素浓度先升高后降低，最高值为2.34μIU/mL；再通入含有2mM葡萄糖的KRB溶液时，胰岛素浓度又缓慢趋于平稳状态；最后通入含有2mM葡萄糖和30mM氯化钾的KRB溶液时，胰岛素浓度快速上升至22.83μIU/mL，最后降至1.61μIU/mL。
对比例3
本对比例提供了一种利用实施例1的检测芯片检测单胰岛分泌功能的方法。
与实施例3的区别在于，在本对比例中，步骤(2)中，进样口流速为240μL/min(此时单个反应池的进样与出样流速理论上为60μL/min)。
对样品中的胰岛素浓度检测结果为：样品中的胰岛素浓度低于试剂盒的最低检测线，检测不到胰岛素数值。
对比例4
本对比例提供了一种利用对比例1的检测芯片检测单胰岛分泌功能的方法。
与实施例3的区别在于，在本对比例中，采用的芯片为对比例1提供的芯片。
对样品中的胰岛素浓度检测结果为：当进样口流速为40μL/min时，只有一个出样口出样，不能实现四个样本的同时检测，且收集的样品中的胰岛素浓度低于试剂盒的最低检测线，检测不到胰岛素数值。
对比例5
本对比例提供了一种利用对比例2的检测芯片检测单胰岛分泌功能的方法。
与实施例3的区别在于，在本对比例中，采用的芯片为对比例2提供的芯片。
对样品中的胰岛素浓度检测结果为：胰岛素浓度数值可以检测到，但所测的胰岛素浓度曲线与理论所得曲线相差较大。
在本发明中，蛇形通道的设置可以使不同的进样口通入不同浓度的溶液时，实现两种溶液的快速混合，由于对比例2提供的检测芯片没有设置蛇形通道，故无法实现浓度依赖性检测，也就无法实现对单胰岛在不同刺激条件下的实时动态研究。
实施例4
本实施例提供了一种利用实施例1的检测芯片实现对单胰岛分泌功能的实时浓度依赖性监测方法。
与实施例3的区别在于，在步骤(2)中，在两个进样口分别通入0mM葡萄糖溶液和100mM葡萄糖溶液，在不更换进样溶液的情况下通入0mM葡萄糖溶液和100mM葡萄糖溶液的流速分别设置为39.2μL/min和0.8μL/min，可获得葡萄糖浓度为2mM的进样液，胰岛素浓度测试结果为：数值基本保持平稳状态，平均值为0.52±0.13μIU/mL。
当需要的葡萄糖浓度为20mM时，通入0mM葡萄糖溶液和100mM葡萄糖溶液的流速可分别设置为32μL/min和8μL/min，胰岛素浓度测试结果为：胰岛素浓度从0.49μIU/mL上升至2.18μIU/mL，之后又下降至1.42μIU/mL。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (10)

1.一种检测芯片，其特征在于，所述检测芯片包括检测层，所述检测层包括依次连接的进样区段、反应区段和出样区段，所述进样区段设置有蛇形通道。
2.根据权利要求1所述的检测芯片，其特征在于，所述反应区段包括至少一个反应池，所述反应池与所述进样区段连接，优选所述反应池的直径为2-2.5mm；
和/或，所述进样区段包括第一渐变通道、蛇形通道和第二渐变通道，所述蛇形通道一端连接所述第一渐变通道，另一端连接所述第二渐变通道，所述第二渐变通道与所述反应区段连接；优选所述第一渐变通道的直径沿溶液流动方向逐渐减小，和/或，优选所述第二渐变通道的直径沿溶液流动方向逐渐增大；
和/或，所述蛇形通道的直径为0.05-0.15mm。
3.根据权利要求2所述的检测芯片，其特征在于，所述进样区段包括与所述反应池数目相同的第二渐变通道，所述第二渐变通道与所述反应池一一对应连接；
和/或，所述进样区段还设置有气体存储腔，所述蛇形通道一端连接所述第一渐变通道，另一端连接所述气体存储腔，优选所述进样区段还设置有多条分进样通道，所述分进样通道一端连接所述气体存储腔，另一端与所述第二渐变通道一一对应连接。
4.根据权利要求3所述的检测芯片，其特征在于，所述进样区段包括至少一个进样口，所述进样口与所述第一渐变通道一一对应连接；
优选地，任意两个或两个以上的进样口对应连接的第一渐变通道的另一端汇流并与所述蛇形通道连接；
优选地，所述进样口的直径为1-2mm。
5.根据权利要求1所述的检测芯片，其特征在于，所述出样区段包括出样通道和出样口，所述出样通道一端连接所述反应区段，另一端连接所述出样口；
优选地，所述出样通道和出样口的数量均与所述反应池的数量相等，所述出样通道一一对应连接所述反应池和出样口；
优选地，所述出样通道呈哑铃型，进一步优选所述出样通道的最小直径小于等于0.08mm；
优选地，所述出样口为半圆形结构。
6.根据权利要求1-5中的任一项所述的检测芯片，其特征在于，所述检测芯片还包括载板，所述载板用于密封所述检测层；
优选地，在所述检测层中，所述进样口、反应池和出样口均为通孔结构。
7.权利要求1-6中的任一项所述的检测芯片在检测细胞的分泌功能中的应用；
优选地，所述细胞的分泌功能包括单胰岛的分泌功能或回肠内分泌细胞的分泌功能，进一步优选在单胰岛分泌功能检测中的应用。
8.一种检测胰岛分泌功能的方法，其特征在于，所述方法包括：利用权利要求1-6中的任一项所述的检测芯片对所述胰岛进行刺激并收集含有所述胰岛分泌物的反应液；
优选地，所述胰岛为单胰岛。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述方法包括：
(1)将所述胰岛放入所述反应区段中；
(2)将试剂通过所述进样区段进样，然后试剂流入反应区段，对所述胰岛进行刺激；
(3)收集由所述出样区段出样的含有所述胰岛分泌物的反应液；
(4)对收集的反应液进行检测；
优选地，所述试剂流入所述反应区段的流速为5-10μL/min。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述方法还包括利用胰岛素检测试剂盒对收集的反应液进行检测。
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