CN113462000A - 一种可吸收外科材料的表面抗菌处理方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种可吸收外科材料的表面抗菌处理方法，属于化学化工、生物医用材料领域。本发明方法包括以下步骤：配制单宁酸溶液，采用碱液调整其pH值为4～8；将待处理材料浸入所得单宁酸溶液中，静置不低于2小时；除去单宁酸溶液，冲洗，干燥得到具有抑菌效果的材料。本发明巧妙的利用了单宁酸聚合的pH依赖行为，可逆降解特性和单宁酸聚合物的高黏附特性，实现了外科可吸收材料表面的抗菌涂层制备以及病情依赖型抗菌成分释放。该方法高效绿色，过程简单，能有效赋予可吸收外科材料复杂的高抑菌性能，单宁酸溶液可回收且可通过pH调节反复使用，提供了一种实现可吸收外科材料高级抑菌功能的普适性产业化制备方法。

Description

一种可吸收外科材料的表面抗菌处理方法
技术领域
本发明属于化学化工、生物材料领域，具体涉及一种可吸收外科材料的表面抗菌处理方法。
背景技术
外科手术医用材料(如医用膜和缝合线等)主要是可体内降解并被吸收或代谢的聚合物特殊医用材料，在外科手术中，用于防组织粘连，伤口缝合止血以及组织缝合。可吸收外科材料的主要优点是：(1)无抗原性(只在吸收时产生轻微的组织反应)；(2)无致热性；(3)促进伤口愈合；(4)外科材料可体内降解吸收。该类材料术后在体内在一定时间内降解，无须手术取出，减轻了病人负担，降低了诱发感染的几率。由于可吸收外科材料的突出优势，已经在外科手术中得到了较为广泛应用，代表了未来该领域发展的趋势。但是，可吸收外科材料人体术后由于细菌残留等原因可能会产生细菌感染，在伤口容易发炎，其抑菌性能对术后恢复具有很大影响。细菌感染的过程常为细菌先期附着于植入材料表面,进而形成一层“生物膜”保护细菌,之后细菌繁殖、迁移感染周围组织。在这种情况下，注射或口服抗生素药物，不仅抗菌效果有限，而且全身性的药物使用会产生一定副作用，甚至产生细菌耐药性。采用可吸收外科材料表面负载小分子抗菌药，可以减小药物的作用范围，使药物直接作用于细菌，提升杀菌和抑菌的效果，并通过抑制“生物膜”的形成来抑制细菌感染的进一步发展，是直接的抑菌方式。但由于大部分抗菌药物很难和材料表面产生作用，外科可吸收材料表面吸附小分子抗菌药物很困难；而且即使粘附，由于小分子药物极易溶解扩散，在与体液接触会快速爆发性释放完全，存在毒副作用大、无法持续抑菌等问题。通过表面化学改性接枝抗菌药理论可行，但涉及复杂的制备过程，而且需要对现有外科可吸收材料组成进行彻底改变，造成研发周期长以及性能等方面的不确定性，实际可行性很低，而且一般术后初期易于感染，需要相对较高药量，术后后期仅需预防感染，此时仅需少量药物，化学接枝的办法也很难满足这个要求。现在也有将抗菌药物直接深埋在缝合线内部的尝试方式，虽然能得到持续抗菌效果，但一样存在释放行为无法匹配抗菌复杂要求的问题，而且这种办法极大影响可吸收外科材料的性能，例如破坏到聚合物材料的结晶和内聚力，造成材料强度显著下降、降解加速，材料均匀性下降，应力集中，产生空洞等问题。因此，开发简单的普适性办法赋予可吸收外科材料理想的抑菌功能，其重要性不言而喻。
单宁酸是一种在自然界广泛存在的多元酚酸，广泛用于食品，化妆品等领域，安全性高，其具有显著的抗菌特性，能够有效抑制许多如大肠杆菌、金葡萄球杆菌等耐药微生物的生物膜形成。而且，单宁酸具有抗氧化活性，能清除活性氧自由基(ROS)，这对于术后伤口炎症恢复也是有利的。单宁酸由于其特殊结构，尽管对材料表面具有普遍的粘附性，但其由于含有较多酚基，易溶于水，在水环境下无法形成单宁酸涂层。目前单宁酸涂层多采取金属络合和组装方法。金属络合通过金属—多酚配位键形成与基体粘附的超分子网络结构。组装方法依赖单宁酸特殊的多羟基结构可与高分子聚合物或者蛋白形成氢键或者静电相互作用。这些方法的缺点是会引入有毒的金属离子或者粘附性能较差。此外这些形式也很难满足术后抗炎对于药物释放行为的复杂要求。
发明内容
本发明的目的在于利用单宁酸pH依赖的氧化聚合行为和单宁酸聚合物对于基材的强黏附特性，提供一种简单高效方便产业化的技术方案，在可吸收外科材料表面黏附单宁酸聚合物/单宁酸抗菌层。
本发明解决上述技术问题所采用的方案是：
一种表面抗菌处理方法，包括如下步骤：
(1)配制单宁酸溶液，采用碱液快速调节其pH值为4～8，更加优选7～8；
(2)将待处理材料浸入所得单宁酸溶液中，静置不低于2小时；
(3)除去单宁酸溶液，冲洗，干燥得到具有抑菌效果的材料。
所有过程优选在常温下进行。
优选地，步骤(1)所述单宁酸溶液的溶剂为超纯水，浓度为10～80mg/mL，更加优选为40mg/mL。
优选地，步骤(1)用于调节单宁酸溶液pH值的碱液为1～2mol/mL的KOH溶液，更加优选2mol/mL的KOH溶液。
优选地，步骤(2)所述材料的静置时间优选为2h。
优选地，步骤(3)用于冲洗的洗液为pH值不低于步骤(1)所得单宁酸溶液pH值的水溶液，如纯水，生理盐水，PBS缓冲液等常见临床使用水溶液。
优选地，步骤(3)干燥方式包括自然干燥，烘干、减压真空干燥，更加优选减压真空干燥。
优选地，所得具有抑菌效果的材料表面附着有单宁酸聚合物/单宁酸抗菌层。
本发明的另一目的是提供一种抑菌涂层，采用上述的方法制备得到。
本发明的另一目的是提供一种具有抑菌效果的可吸收外科材料的制备方法，以可吸收外科材料为待处理材料，采用上述的方法进行处理，所述的可吸收外科材料包括医用膜、缝合线等，医用膜、缝合线。
本发明的另一目的是提供一种具有抑菌效果的可吸收外科材料，采用上述的方法制备得到。
本发明利用单宁酸在水溶液中发生pH依赖的自发氧化聚合，进而逐渐在材料表面上黏附形成不溶于水的单宁酸聚合物涂层。涂层形成过程还包含聚合物通过氢键和Π-Π作用吸附单宁酸小分子发生的复合黏附，最终可形成单宁酸聚合物/单宁酸的复合涂层。在植入体内后，和组织液接触，可以快速释放结合的自由单宁酸，在易感染期起到高效抑菌感染目的；如发生细菌感染，在炎症酸性条件下，该涂层中单宁酸聚合物发生可逆降解，加速释放单宁酸。而在伤口恢复后期，pH逐渐恢复到正常值7.4，此时单宁酸聚合物保持稳定，非常缓慢降解，仅起到预防目的。这种病情针对型抗菌涂层设计满足术后抵御初期易发感染，后期预防感染以及针对病情程序释放抗菌药物的复杂要求。
该发明的突出优点是原材料单一且来源丰富，价格低廉，具有优异的生物安全性。制备方式简单，常温操作，材料的表面抗菌处理在水相中进行，一步合成且过程无污染，简化了可吸收外科材料的抗菌处理过程，完全不影响可吸收材料原本加工过程和本身性能。单宁酸溶液可回收且可通过pH调节反复使用。所得复合材料可以满足可吸收材料植入术后复杂的抗菌要求，对医用外科材料的复杂抗菌要求给出了有效的对策，提供了一种实现可吸收外科材料抑菌功能的普适性规模化制备方法。
附图说明
图1为实施例3制备的FITC-TA-PLGA可吸收膜的材料表征结果图，其中图1(a)是材料在倒置显微镜明场下拍摄的图片、图1(b)是材料在倒置荧光显微镜于激发波长为490nm，发射波长为525nm条件下拍摄的荧光图片、图1(c)是图1(a)、(b)两图的重叠图；
图2为实施例1-5制备的TA-PLGA可吸收膜的抗菌性能表征结果图，其中图2(a)是材料共培养菌液在波长为600nm处的OD值测量结果、图2(b)是采用平板菌落计数法测量材料抗菌性能的结果、图2(c)对平板存活细菌进行荧光强度检测所拍摄的mBL21大肠杆菌的荧光照片，每组实验设置两个平行样；
图3为实施例6-8制备的TA-PLGA可吸收膜的抗菌性能表征结果图；其中图3(a)是材料共培养菌液在波长为600nm处的OD值测量结果、图3(b)是采用平板菌落计数法测量材料抗菌性能的结果、图3(c)是对平板存活细菌进行荧光强度检测所拍摄的mBL21大肠杆菌的荧光照片，每组实验设置三个平行样；
图4为实施例9制备的TA-PLGA可吸收膜抗菌材料持续性释放实验的性能表征结果图；
图5为实施例10制备的TA-PLGA可吸收缝合线的抗菌性能表征结果图，其中图5(a)是采用抑菌圈法测量溶出性TA-PLGA可吸收缝合线抗菌性能的空白对照组，图5(b)是采用抑菌圈法测量溶出性TA-PLGA可吸收缝合线抗菌性能的实验组。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的描述，其目的在于帮助更好地理解本发明的内容，但本发明的实施方式并不受到所述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均为等效的置换方式，均包含在本发明的保护范围之内。
(一)可吸收膜/线的制备
这里选择的原材料是常见的乳酸乙醇酸摩尔组成比为90:10，重均分子量为50000聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)作为实例。
1、聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)可吸收膜材料的制备
首先，称取90mg聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)溶解在15mL二氯甲烷溶剂中(所配置PLGA溶液浓度为6mg/mL)，磁力搅拌溶解1h，混合溶液分每份取1.5mL加至35mm规格玻璃培养皿，加盖静置2h，溶剂挥发后PLGA在皿底成膜，真空干燥处理得到PLGA膜。
2、聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)可吸收缝合线的制备
首先，称取2.5g聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)溶解在20mL二氯甲烷溶剂中(所配置的纺丝溶液：PLGA质量分数为12.5％)，磁力搅拌1h至充分溶解，用10mL注射器吸取混合溶液均匀的注射于50％甲醇溶液中进行PLGA拉丝处理，室温干燥，得到PLGA线。
(二)可吸收膜的材料涂层表征
采用在单宁酸(TA)酚羟基上接荧光染料异硫氰酸荧光素酯(FITC)，通过涂层制备粘附至PLGA膜或线的表面，得到抗菌FITC-TA-PLGA材料，拍摄材料表面的荧光成像图片，表征抗菌成分在可吸收膜表面的粘附，证明存在单宁酸粘附在PLGA膜的表面。FITC修饰的单宁酸(FITC-TA)制备操作如下：
1、FITC荧光染料溶液的配置：在避光条件下，称取10mg异硫氰酸荧光素酯(FITC)至10mL四氢呋喃溶剂中，超声至充分溶解后避光保存；
2、称取800mg单宁酸固体粉末至10mL四氢呋喃溶剂中，超声溶解后在单宁酸溶液中加入800μL上述FITC溶液，在避光条件下磁力搅拌反应过夜；
3、反应后的混合溶液在37℃下旋蒸15min，得到单宁酸-荧光染料(TA-FITC)固体粉末；
4、向所得TA-FITC固体粉末中加入水配置得到80mg/mL TA-FITC溶液。采用2mol/mL的高浓度KOH溶液快速调节溶液pH至7-8。在底面铺有一层PLGA膜的玻璃培养皿中加入该调节过后的TA-FITC溶液完全覆盖住膜材，避光静置12h。最后，将小皿上层液体倾除，加入纯水2mL充分润洗一遍，减压真空干燥后将制成FITC-TA-PLGA可吸收膜；
4、使用倒置荧光显微镜在激发波长为490nm，发射波长为525nm条件下对所制备的膜材料进行观察和拍摄。
(三)含TA涂层的PLGA(TA-PLGA)可吸收膜材料与缝合线抗菌性能评估
采用mCherry荧光蛋白抗氨苄大肠杆菌(mBL21大肠杆菌)，通过平板计数法与细菌荧光强度检测法评估TA-PLGA可吸收膜材料、抑菌圈法评估溶出性的TA-PLGA缝合线抗菌性能，分别将不含单宁酸的PLGA可吸收膜材料与缝合线作为对照组。
1、TA-PLGA可吸收膜材料的抗菌性能评估
1)将底部铺膜材料的玻璃培养皿放置在紫外灯光下照射30min，预先进行材料的灭菌处理；
2)在皿底加入3mL预先加100μg/mL氨苄西林的Luria-Bertani培养基，加入3μL平台期mCherry抗氨苄大肠杆菌(1/1000比例传代，37℃生长24h)，37℃常氧培养箱中抗菌膜与菌液共培养12h，取三组100μL共培养菌液平行样在波长600nm处测量OD值；
3)存留菌液用PBS重悬，梯度稀释105倍数，取50μL悬浮菌液涂布在预加100μg/mL氨苄西林的Luria-Bertani琼脂板上，密封后置于37℃常氧培养箱中生长12h；
4)对耐氨苄的mCherry大肠杆菌菌落进行抗菌分析，计数平板菌落数；
5)对存活细菌进行荧光强度检测，拍摄了mCherry荧光蛋白的大肠杆菌的荧光照片，并对菌落荧光的ROI荧光强度进行了评估计算。
2、TA-PLGA可吸收缝合线材料的抗菌性能评估
采用抑菌圈法测定溶出性TA-PLGA可吸收缝合线的抗菌性能。
1)将合成的抗菌TA-PLGA可吸收缝合线与PLGA缝合线剪成长度4.0cm样品(直径0.2cm)，放置在紫外灯光下照射30min，预先进行材料的灭菌处理；
2)复苏mCherry抗氨苄大肠杆菌(mBL21大肠杆菌)，千分之一传代，取5μL mBL21大肠杆菌加入至5mL预加100μg/mL氨苄西林的Luria-Bertani培养基中，密封后置于在37℃常氧振荡摇床培养12h；
3)取部分平台期mBL21大肠杆菌用PBS重悬梯度稀释102倍，取50μL悬浮菌液用玻璃涂布器涂在预加100μg/mL氨苄西林的Luria-Bertani琼脂板上，待琼脂板干燥后在中间放置预先灭菌处理的可吸收缝合线材料(PLGA可吸收缝合线、TA-PLGA可吸收缝合线)，密封后置于37℃常氧培养箱中生长12h；
4)为了比较抗菌可吸收缝合线在体外的抗菌效果，试验拍摄并计算了培养12h后各组可吸收缝合线对耐氨苄大肠杆菌菌落的抑菌圈大小。
(四)TA-PLGA可吸收膜抗菌材料持续性释放检验
将所得TA-PLGA产品分别浸泡在2mL 5.4、6.8、7.4三种不同pH的缓冲溶液中，将样品瓶置于温度为37℃，振荡速率为65rpm的摇床中。每隔一段时间间隔取出一定量溶液并补充相同体积的新鲜缓冲溶液。使用紫外分光光度计测量溶液中TA的释放。具体实施操作如下：
1、不同pH缓冲溶液的配置
首先，配置缓冲溶液母液：称取17.9g Na2HPO4·12H2O固体溶解于一定量水，定容至250mL容量瓶中配置0.2mol/mL Na2HPO4母液A；称取7.8g NaH2PO4·2H2O固体溶解于一定量水，定容至250mL容量瓶中配置0.2mol/mL NaH2PO4母液B。其次，配置不同pH的缓冲溶液：取20mL母液A配置pH＝5.4缓冲溶液；取10.2mL母液A与9.8mL母液B充分混合配置pH＝6.8缓冲溶液；取3.8mL母液A与16.2mL母液B充分混合配置pH＝7.4缓冲溶液。
2、抗菌材料TA的持续性释放实验
取三份TA-PLGA产品，在样品瓶底部沿壁缓慢分别加入2mL三种pH的缓冲溶液，将样品瓶置于温度为37℃，振荡速率为65rpm的摇床中，分别在30min、1h、2h、4h、6h、8h、12h、24h、60h后取出1mL溶液保留待检测，并补充相同体积的新鲜缓冲溶液至样品瓶中继续振荡。使用紫外分光光度计测量每个点溶液中TA的释放情况，不同pH的新鲜缓冲溶液作为空白对照组。
实施例1
聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)可吸收膜材料的制备方法如上具体实施方式，用单宁酸进行表面抗菌处理的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)可吸收膜材料(TA-PLGA可吸收膜)的制备方法如下所示：
首先，称取单宁酸粉末0.8g溶解至15mL管内，加入10mL超纯水，超声处理至单宁酸完全溶解，配置得80mg/mL高浓度单宁酸原溶液。然后，取1mL单宁酸原溶液稀释至7mL纯净水中，得到10mg/mL的单宁酸溶液，用单宁酸pH调节剂2mol/mL的高浓度KOH溶液快速调节单宁酸溶液pH至7。最后，在底面铺有一层PLGA膜的玻璃培养皿中加入该调节过后的单宁酸溶液完全覆盖住膜材，静置12h。最后，将小皿上层液体倾除，加入纯水2mL润洗一遍，减压真空干燥后将制成的TA-PLGA可吸收膜保存于干燥皿中。
实施例2
与实施例1的不同之处在于，调节pH前单宁酸溶液的浓度是20mg/ml。
实施例3
与实施例1的不同之处在于，调节pH前单宁酸溶液的浓度是40mg/ml。
为了表征单宁酸在膜材料表面的粘附，本实例进一步采用在单宁酸酚羟基上键接荧光染料FITC，共同沉降粘附至PLGA膜表面的方法，拍摄材料表面的荧光成像图片，证明存在涂层粘附在PLGA膜的表面。所得材料的表征图片附图1中，图1(a)是材料在倒置显微镜明场下拍摄的图片；图1(b)是材料在倒置显微镜荧光场于激发波长为490nm，发射波长为525nm条件下拍摄的荧光图片；图(c)是图1(a)、(b)两图的重叠图。在图1(c)中可明显看出产品图中绿色荧光区域膜表面存在含单宁酸的粘附层。
实施例4
与实施例1的不同之处在于，调节pH前单宁酸溶液的浓度是80mg/ml，用碱液调整单宁酸溶液的pH为4。
实施例5
与实施例1的不同之处在于，调节pH前单宁酸溶液的浓度是80mg/ml，用碱液调整单宁酸溶液的pH为5。
对比实施例1-5方式制备TA-PLGA可吸收膜的体外长期抗菌性能测试结果：说明书附图2为实施例1-5用单宁酸溶液pH调节剂2mol/L KOH处理制备的不同单宁酸浓度和不同pH的TA-PLGA可吸收膜的抗菌性能表征结果图，其中图2(a)是材料共培养菌液在波长为600nm处的OD值测量结果，以表征菌落密度，实验对象为表达mCherry荧光蛋白的抗氨苄大肠杆菌(mBL21大肠杆菌)；图2(b)是采用平板菌落计数法测量材料抗菌性能的结果，实验对象为mBL21大肠杆菌；图2(c)是对平板存活细菌进行荧光强度检测，拍摄了mBL21大肠杆菌的荧光照片并且对菌落荧光强度进行分析，表征了菌落密度与活性状态。可知，浓度在20mg/mL以下时，调节pH到7没有显现出明显抑菌效果。当单宁酸浓度在40mg/ml(pH＝7)和80mg/mL(pH＝5)时已表现出优秀的抗菌效果。可见，同等浸渍时间，采用更高浓度的单宁酸溶液在PLGA膜表面进行表面抗菌处理，更容易发生氧化聚合，所制备的材料共培养菌液菌浓度更低，表面抗菌性能更好。但考虑到原材料的浓度越大，成本越高，从应用角度，单宁酸浓度控制在40mg/mL时较为合适。与此同时发现，相同浸渍时间、相同原材料浓度的条件下，适当提高单宁酸溶液的pH值时，可提升抗菌效果，这是因为高pH促进单宁酸氧化聚合，所形成的单宁酸聚合物更容易结合单宁酸单体粘附在材料表面。需要注意的是，尽管调高pH会加速聚合反应，但pH越高，同时单宁酸溶液的浓度也较高时，80mg/ml调节到pH＝7以上，会很快出现絮状沉淀，破坏单宁酸的渐进黏附沉积过程，不利于之后与膜的致密结合，这可能导致应用中抗菌粘附涂层的掉落。
实施例6
与实施例1的不同之处在于，调节pH前单宁酸溶液的浓度是40mg/ml，用碱液调整单宁酸溶液的pH为8，培养皿静置的时间是2h。
实施例7
与实施例1的不同之处在于，调节pH前单宁酸溶液的浓度是40mg/ml，用碱液调整单宁酸溶液的pH为8，培养皿静置的时间是4h。
实施例8
与实施例1的不同之处在于，调节pH前单宁酸溶液的浓度是40mg/ml，用碱液调整单宁酸溶液的pH为8，培养皿静置的时间是6h。
附图3为实施例6-8制备不同合成时间的TA-PLGA可吸收膜的抗菌性能表征结果图。实验结果表明，采用40mg/mL的单宁酸溶液在PLGA膜表面进行表面抗菌处理，相同pH条件下，浸渍时间的延长有利于提高抗菌性能，浸渍时间控制在2-6h时，与空白对照组相比，TA-PLGA可吸收膜都表现出更优的抗菌效果。实施例3、6、7、8方式制备TA-PLGA可吸收膜的体外长期抗菌性能测试结果表明，在相同单宁酸溶液浓度条件下，适当提升单宁酸溶液的浸渍pH可以有效缩短材料浸渍时间。结合生产过程中的实际要求，可选择单宁酸溶液浸渍pH为8，时间为2h作为TA-PLGA可吸收抗菌膜的较优制备条件。
实施例9
聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)可吸收膜材料的制备方法如上具体实施方式，为了便于材料持续性释放实验的进行，选取10mL样品瓶替代玻璃培养皿作为膜器，用单宁酸进行表面抗菌处理的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)可吸收膜材料(TA-PLGA可吸收膜)的制备方法如下所示：
首先，称取单宁酸粉末0.8g溶解至15mL管内，加入10mL超纯水，超声处理至单宁酸完全溶解，配置得80mg/mL高浓度单宁酸原溶液。然后，取1mL单宁酸原溶液稀释至1mL纯净水中，得到40mg/mL的单宁酸溶液，用单宁酸pH调节剂2mol/mL的高浓度KOH溶液快速调节单宁酸溶液pH为8。最后，在底面铺有一层PLGA膜的样品瓶中加入该调节过后的单宁酸溶液完全覆盖住膜材，静置12h。最后，将样品瓶上层液体倾除，加入纯水2mL润洗一遍，减压真空干燥后将制成的TA-PLGA可吸收膜保存于干燥皿中。
实施例9制备的产品其抗菌材料在不同的pH环境下可持续性释放实验结果如说明书附图4。实验结果表明三种不同pH环境下，初期可吸收膜表面均在短时间内快速释放了较多单宁酸，这是因为涂层中吸附的单宁酸单体更易于扩散。满足了术后伤口更易感染所以需要高效预防的要求。后期在正常环境下(pH＝7.4)单宁酸释放行为进入平台期；当处于弱酸性环境时(pH＝5.4)单宁酸释放在后期存在二次释放加速行为，表明该抗菌粘附层中在酸性条件下由于聚单宁酸降解导致单宁酸加速释放，满足了一旦感染产生炎症酸性环境，自发调控单宁酸释放的要求，该病情依赖性涂层满足了外科材料复杂的抗菌要求。这些结果也证实了该抗菌粘附层由聚单宁酸-单宁酸单体共同组成。
实施例10
聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)可吸收线的制备方法如上具体实施方式，用单宁酸进行表面抗菌处理的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)可吸收线(TA-PLGA可吸收缝合线)的制备方法如下所示：
首先，称取单宁酸粉末0.8g溶解至15mL管内，加入10mL超纯水，超声处理至单宁酸完全溶解，配置80mg/mL高浓度单宁酸原溶液，取9mL单宁酸原溶液用2mol/mL的高浓度KOH溶液快速调节溶液pH至6，迅速加入至底部固定有PLGA线的玻璃培养皿中，轻微摇动小皿至单宁酸溶液与PLGA线充分接触，静置6h。最后，镊子取出表面附着单宁酸的PLGA线，用超纯水轻柔冲洗一遍，室温自然干燥处理，将制成的TA-PLGA可吸收缝合线保存于干燥皿中。
采用抑菌圈法测定溶出性TA-PLGA缝合线的抗菌性能，如图5所示，实验结果表明，从平板菌落照片可明显看出，与空白对照组相比较，TA-PLGA可吸收抗菌缝合线组在缝合线附近的菌落数量少、密度小，形成了较为明显的抑菌圈，说明该实施例10合成的TA-PLGA可吸收缝合线具有较好的抗菌性能。
以上所述是本发明的优选实施方式而已，当然不能以此来限定本发明之权利范围，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和变动，这些改进和变动也视为本发明的保护范围。

Claims (9)

1.一种表面抗菌处理方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)配制单宁酸溶液，采用碱液调整其pH值为4～8；
(2)将待处理的材料浸入所得单宁酸溶液中，静置不低于2小时；
(3)除去单宁酸溶液，冲洗，干燥得到具有抑菌效果的材料。
2.根据权利要求1所述的表面抗菌处理方法，其特征在于，步骤(1)所述单宁酸溶液的溶剂为超纯水，浓度为10～80mg/mL。
3.根据权利要求1所述的表面抗菌处理方法，其特征在于，步骤(1)用于调节单宁酸溶液pH值的碱液为1～2mol/mL的KOH溶液。
4.根据权利要求1所述的表面抗菌处理方法，其特征在于，步骤(3)用于冲洗的洗液为pH值不低于步骤(1)所得单宁酸溶液pH值的水溶液。
5.根据权利要求1所述的表面抗菌处理方法，其特征在于，步骤(3)干燥方式包括自然干燥，烘干、减压真空干燥。
6.根据权利要求1所述的表面抗菌处理方法，其特征在于，所得具有抑菌效果的材料表面附着有单宁酸聚合物/单宁酸抗菌层。
7.一种抑菌涂层，其特征在于，采用权利要求1～6任一项所述的方法制备得到。
8.一种具有抑菌效果的可吸收外科材料的制备方法，其特征在于，以可吸收外科材料为待处理材料，采用权利要求1～6任一项所述的方法进行处理。
9.一种具有抑菌效果的可吸收外科材料，其特征在于，采用权利要求8所述的方法制备得到。
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