CN113425787A - 一种用于痤疮防治的组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种用于痤疮防治的组合物，包括中药提取混合物粉末、菠萝皮提取物和多元醇；其中，中药提取混合物为蒲公英提取物、黄连提取物、黄岑提取物、黄柏提取物、大黄提取物、金盏花提取物和丹参提取物的混合物。本发明还包括所述组合物的制备方法和应用。本发明所述的用于痤疮防治的组合物各成分相互配合，可以抑制痤疮丙酸杆菌，抑制皮脂腺分泌，消炎止痛。

Description

一种用于痤疮防治的组合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及中药组合物领域，尤其涉及一种用于痤疮防治的组合物及其制备方法和应用。
背景技术
痤疮，又称青春痘，是毛囊皮脂腺单位的一种慢性炎症性皮肤病，因毛囊皮脂腺口阻塞、细菌感染、发炎而引起，多发生于面部和胸背部。青春期时期，人体内雄性激素水平剧增促进皮脂腺产生大量皮脂，而角化异常的皮脂腺阻塞导管，导致皮脂排出受阻因而产生粉刺。同时，毛囊中寄生的微生物，例如痤疮丙酸杆菌将诱导并加重炎症反应。痤疮的临床表现以好发于面部的粉刺、丘疹、脓疱、结节等多形性皮损为特点。遗传、饮食、胃肠功能、环境因素、化妆品及精神因素亦与本病的发病有关。初起皮损多为位于毛囊口的粉刺，分白头粉刺和黑头粉刺两种，在发展过程中可产生红色丘疹、脓疱、结节、脓肿、囊肿及疤痕。皮损好发颜面部，尤其是前额、颊部、颏部，其次为胸背部、肩部皮脂腺丰富区，对称性分布。偶尔也发生在其他部位。
痤疮临床发病于青春期，它将影响到个人外貌及自尊，甚至引发心里疾病，导致生活亚健康状态。痤疮发病率高，研发发现其普遍发生在16-19岁男孩和14-17岁女孩中，在不同种族12-24岁青少年发病率高达85％，虽然痤疮影响大多数是青少年，但它在成人中仍普遍存在，比如20-30岁范围内占40-50％，甚至报道10-20％的40岁以上人亦患有痤疮。国内外研究结果表明，痤疮会使患者产生情绪低落，焦虑，抑郁，精神紧张等不良的情绪，并因此产生严重的社会心理问题。最常见的是自尊心，自信心受损，产生尴尬，抑郁，紧张的心理，导致患者社交障碍和影响学习和工作，严重时甚至会导致患者产生自杀倾向。
目前，关于痤疮的治疗包括以下几种：(1)日常护理，包括常用温热水、肥皂洗涤患处；避免用手挤挖；避免使用含油脂较多的化妆品和长期使用碘化物、溴化物及皮质类固醇激素等药物；(2)饮食习惯，包括吃脂肪、糖类及刺激性食物，多吃蔬菜水果等；(3)局部治疗：包括使用外用药物如维A酸类、过氧化苯甲酰、抗生素类等药物；(4)物理治疗，包括囊肿开创引流、化学换肤治疗、红光、蓝光光疗、光动力治疗、微针治疗、点阵激光、光子嫩肤、黄金微针射频等。但目前对于采用纯中药制剂的外用药尚还不多。
随着中草药与现代科学技术研究手段结合的迅速发展，中药有效成分的分离鉴定更加细微，其药理作用更为明确，中草药的有效成分也被广泛应用于化妆品中。如何从中药中提取有效抑制痤疮、修复受损角质层的活性成分是现在和将来的研究重点和方向。现有技术，如CN106265264B中公开了菠萝蛋白酶可以温和消除皮脂腺的堵塞，防止细菌的过度增殖，但并没有任何文献提到利用菠萝皮的其他提取成分与中药提取物共同作用可以更好的实现对痤疮的治疗效果。
发明内容
参选以下本发明的优选实施方法的详述以及包括的实施例可更容易地理解本发明的内容。除非另有限定，本文使用的所有技术以及科学术语具有与本发明所属领域普通技术人员通常理解的相同的含义。当存在矛盾时，以本说明书中的定义为准。
如本文所用术语“由…制备”与“包括”同义。本文中所用的术语“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括。例如，包括所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素，而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。
连接词“由…组成”排除任何未指出的要素、步骤或组分。如果用于权利要求中，此短语将使权利要求为封闭式，使其不包括除那些描述的材料以外的材料，但与其相关的常规杂质除外。当短语“由…组成”出现在权利要求主体的子句中而不是紧接在主题之后时，其仅限定在该子句中描述的要素；其它要素并不被排除在作为整体的所述权利要求之外。
当量、浓度、或者其它值或参数以范围、优选范围、或一系列上限优选值和下限优选值限定的范围表示时，这应当被理解为具体公开了由任何范围上限或优选值与任何范围下限或优选值的任一配对所形成的所有范围，而不论该范围是否单独公开了。例如，当公开了范围“1至5”时，所描述的范围应被解释为包括范围“1至4”、“1至3”、“1至2”、“1至2和4至5”、“1至3和5”等。当数值范围在本文中被描述时，除非另外说明，否则该范围意图包括其端值和在该范围内的所有整数和分数。
单数形式包括复数讨论对象，除非上下文中另外清楚地指明。“任选的”或者“任意一种”是指其后描述的事项或事件可以发生或不发生，而且该描述包括事件发生的情形和事件不发生的情形。
说明书和权利要求书中的近似用语用来修饰数量，表示本发明并不限定于该具体数量，还包括与该数量接近的可接受的而不会导致相关基本功能性的改变的修正的部分。相应的，用“大约”、“约”等修饰一个数值，意为本发明不限于该精确数值。在某些例子中，近似用语可能对应于测量数值的仪器的精度。在本申请说明书和权利要求书中，范围限定可以组合和/或互换，如果没有另外说明这些范围包括其间所含有的所有子范围。
此外，本发明要素或组分前的不定冠词“一种”和“一个”对要素或组分的数量要求(即出现次数)无限制性。因此“一个”或“一种”应被解读为包括一个或至少一个，并且单数形式的要素或组分也包括复数形式，除非所述数量明显旨指单数形式。
本发明的药物组合物，其中各组分可以按照本领域常规的方法或者按照现有技术的方法从原药材中提取而获得，必要时可以进行适当的纯化。根据药材本身的性质，也可以将其中部分药材合并进行提取。这对于本技术领域的技术人员是可以理解的，也是很容易做到。当然，本发明的药物组合物，其中各组分也可以是从市场购买的。
以下的例子是本发明的组合物，其中各中药组分的制备的例子，这些例子只是为了更清楚地说明本发明，而不构成对本发明的限制：
蒲公英提取物可以用水、有机溶剂或有机溶剂的水溶液提取，优选采用乙醇溶液或水提取，提取方法可以是传统的提取方法，例如煎煮、回流、浸渍、渗漉等方法，也可以采用微波、超声、萃取等技术，或者将这些方法结合使用，优选乙醇回流提取；当然，必要时，也可以进一步纯化，例如可以采用大孔树脂来纯化。
黄连提取物可以用水、有机溶剂或有机溶剂的水溶液提取，优选采用乙醇溶液或水提取，提取方法可以是传统的提取方法，例如煎煮、回流、浸渍、渗漉等方法，也可以采用微波、超声、萃取等技术，或者将这些方法结合使用，优选乙醇回流提取；当然，必要时，也可以进一步纯化，例如可以采用大孔树脂来纯化。
黄岑提取物可以用水、有机溶剂或有机溶剂的水溶液提取，优选采用乙醇溶液或水提取，提取方法可以是传统的提取方法，例如煎煮、回流、浸渍、渗漉等方法，也可以采用微波、超声、萃取等技术，或者将这些方法结合使用，优选乙醇回流提取；当然，必要时，也可以进一步纯化，例如可以采用大孔树脂来纯化。
黄柏提取物可以用水、有机溶剂或有机溶剂的水溶液提取，优选采用乙醇溶液或水提取，提取方法可以是传统的提取方法，例如煎煮、回流、浸渍、渗漉等方法，也可以采用微波、超声、萃取等技术，或者将这些方法结合使用，优选乙醇回流提取；当然，必要时，也可以进一步纯化，例如可以采用大孔树脂来纯化。
大黄提取物可以用水、有机溶剂或有机溶剂的水溶液提取，优选采用乙醇溶液或水提取，提取方法可以是传统的提取方法，例如煎煮、回流、浸渍、渗漉等方法，也可以采用微波、超声、萃取等技术，或者将这些方法结合使用，优选乙醇回流提取；当然，必要时，也可以进一步纯化，例如可以采用大孔树脂来纯化。
金盏花提取物可以用水、有机溶剂或有机溶剂的水溶液提取，优选采用乙醇溶液或水提取，提取方法可以是传统的提取方法，例如煎煮、回流、浸渍、渗漉等方法，也可以采用微波、超声、萃取等技术，或者将这些方法结合使用，优选乙醇回流提取；当然，必要时，也可以进一步纯化，例如可以采用大孔树脂来纯化。
丹参提取物可以用水、有机溶剂或有机溶剂的水溶液提取，优选采用乙醇溶液或水提取，提取方法可以是传统的提取方法，例如煎煮、回流、浸渍、渗漉等方法，也可以采用微波、超声、萃取等技术，或者将这些方法结合使用，优选乙醇回流提取；当然，必要时，也可以进一步纯化，例如可以采用大孔树脂来纯化。
本发明所述的多元醇在本发明的组合物中其辅助作用，可以为丙二醇、丁二醇、甘油、辛甘醇等，优选为1,3-丙二醇。
本发明第一方面提供一种用于痤疮防治的组合物，包括中药提取混合物粉末、菠萝皮提取物和多元醇；其中，中药提取混合物由以下重量份的组分组成：蒲公英提取物6-8份，黄连提取物8-10份，黄岑提取物3-5份，黄柏提取物8-10份，大黄提取物8-10份，金盏花提取物8-10份和丹参提取物10-15份。
在一个或多个实施方案中，按重量份计，所述中药提取混合物中各组分的添加量为：蒲公英提取物7份，黄连提取物9份，黄岑提取物4份，黄柏提取物9份，大黄提取物9份，金盏花提取物9份和丹参提取物12份。
本发明第二方面提供所述用于痤疮防治的组合物的制备方法，包括以下步骤：
1)准备所述重量份的中药混合后进行粉碎，以水或乙醇水溶液为提取溶媒，经浸泡、煎煮、渗漉、超声或回流方法进行提取，提取液浓缩后加入乙醇沉淀多糖、鞣质，收集滤液，进一步浓缩滤液得到中药提取物；
优选为将药材粉碎到纳米级，采用10倍药材量、40％乙醇水溶液，低温真空萃取两次，每次1小时，过滤，合并滤液，滤液采用低温真空浓缩干燥，获得中药提取物；
2)选择非极性或弱极性大孔树脂对上述中药提取物进行分离纯化：将中药提取物上样到净化好的大孔树脂柱中，上样量为干树脂质量的4％～12％，吸附平衡后，用水洗脱至无色；然后用含30％～50％体积的乙醇水溶液洗脱至无色，得到精制的中药提取物；
3)将步骤2)中所述中药提取物搅拌均匀，然后进行喷雾干燥，得到中药提取混合物粉末；
4)将菠萝皮进行醇提、浓缩，得到菠萝皮提取物；
5)向菠萝皮提取物中加入10-15倍重量的水并搅拌均匀，然后加入纤维素酶和蛋白酶进行处理，得到菠萝皮提取液；
6)将中药提取混合物粉末加入到菠萝皮提取液中，并加入多元醇搅拌均匀，即为所述用于痤疮防治的组合物；其中，所述中药提取混合物粉末的添加量为菠萝皮提取液重量的10％-15％；所述多元醇的添加量为菠萝皮提取液体积的25％-35％。
在一个或多个实施方案中，所述步骤4)具体为：将新鲜菠萝皮用纯水洗净、切块；然后采用1:20的料液重量比，使用60-80重量％的乙醇水溶液在40-60℃下对菠萝皮搅拌100-120min，搅拌转速300-400r/min；接着趁热用100-200目纱布过滤，然后采用1-5μm聚丙烯膜进行二次过滤；滤液装入旋蒸瓶进行浓缩除去乙醇，旋蒸瓶内剩余物料即为菠萝皮提取物。
在一个或多个实施方案中，所述步骤5)具体为：向菠萝皮提取物中加入10-15倍重量的水并搅拌均匀，然后加入0.01％的纤维素酶45℃酶解30min，85℃灭活10min；降至室温后，再加入0.01％的中性蛋白酶和0.01％的碱性蛋白酶45℃酶解30min，85℃灭活10min，即得到菠萝皮提取液。
本发明第三方面提供所述组合物在抑制丙酸痤疮杆菌中的应用。
本发明第四方面提供所述组合物在制备治疗痤疮的药物中的应用。
在一个或多个实施方案中，所述组合物被制成散剂、片剂、块剂、颗粒剂、茶剂或胶囊剂。
本发明第五方面提供一种护肤品，其包含本发明所述的组合物，还包括或不包括本领域内公知的任意辅料。
在一个或多个实施方案中，所述护肤品的剂型为溶液、悬浮液、乳状液、霜剂、膏状、凝胶、奶液、护肤液、粉、香皂、油、干粉、粉底液、湿粉或喷剂。
与现有技术相比，本发明的优点在于：
(1)本发明所述的用于痤疮防治的组合物相互配合，可以抑制痤疮丙酸杆菌，抑制皮脂腺分泌，消炎止痛。
(2)本发明所述的中药提取混合物和菠萝皮提取物起到了协同作用，大大提高了对痤疮的防治效果。另外，对中药提取混合物进行喷雾干燥处理后，其防治效果有了进一步提升。
具体实施方式
应理解，在本发明范围中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成优选的技术方案。
本发明第一方面提供一种用于痤疮防治的组合物，包括中药提取混合物粉末、菠萝皮提取物和多元醇；其中，中药提取混合物由以下重量份的组分组成：蒲公英提取物6-8份，黄连提取物8-10份，黄岑提取物3-5份，黄柏提取物8-10份，大黄提取物8-10份，金盏花提取物8-10份和丹参提取物10-15份。
在一个或多个实施例中，按重量份计，所述中药提取混合物中各组分的添加量为：蒲公英提取物7份，黄连提取物9份，黄岑提取物4份，黄柏提取物9份，大黄提取物9份，金盏花提取物9份和丹参提取物12份。
本发明第二方面提供所述用于痤疮防治的组合物的制备方法，包括以下步骤：
1)准备所述重量份的中药混合后进行粉碎，以水或乙醇水溶液为提取溶媒，经浸泡、煎煮、渗漉、超声或回流方法进行提取，提取液浓缩后加入乙醇沉淀多糖、鞣质，收集滤液，进一步浓缩滤液得到中药提取物；
优选为将药材粉碎到纳米级，采用10倍药材量、40％乙醇水溶液，低温真空萃取两次，每次1小时，过滤，合并滤液，滤液采用低温真空浓缩干燥，获得中药提取物；
2)选择非极性或弱极性大孔树脂对上述中药提取物进行分离纯化：将中药提取物上样到净化好的大孔树脂柱中，上样量为干树脂质量的4％～12％，吸附平衡后，用水洗脱至无色；然后用含30％～50％体积的乙醇水溶液洗脱至无色，得到精制的中药提取物；
3)将步骤2)中所述中药提取混合物搅拌均匀，然后进行喷雾干燥，得到中药提取混合物粉末；
4)将菠萝皮进行醇提、浓缩，得到菠萝皮提取物；
5)向菠萝皮提取物中加入10-15倍重量的水并搅拌均匀，然后加入纤维素酶和蛋白酶进行处理，得到菠萝皮提取液；
6)将中药粉末加入到菠萝皮提取液中，并加入多元醇搅拌均匀，即为所述用于痤疮防治的组合物；其中，所述中药提取混合物粉末的添加量为菠萝皮提取液重量的10％-15％；所述多元醇的添加量为菠萝皮提取液体积的25％-35％。
在一个或多个实施例中，所述步骤4)具体为：将新鲜菠萝皮用纯水洗净、切块；然后采用1:20的料液重量比，使用60-80重量％的乙醇水溶液在40-60℃下对菠萝皮搅拌100-120min，搅拌转速300-400r/min；接着趁热用100-200目纱布过滤，然后采用1-5μm聚丙烯膜进行二次过滤；滤液装入旋蒸瓶进行浓缩除去乙醇，旋蒸瓶内剩余物料即为菠萝皮提取物。
在一个或多个实施例中，所述步骤5)具体为：向菠萝皮提取物中加入10-15倍重量的水并搅拌均匀，然后加入0.01％的纤维素酶45℃酶解30min，85℃灭活10min；降至室温后，再加入0.01％的中性蛋白酶和0.01％的碱性蛋白酶45℃酶解30min，85℃灭活10min，即得到菠萝皮提取液。
本发明第三方面提供所述组合物在抑制丙酸痤疮杆菌中的应用。
本发明第四方面提供所述组合物在制备治疗痤疮的药物中的应用。
在一个或多个实施例中，所述组合物被制成散剂、片剂、块剂、颗粒剂、茶剂或胶囊剂。
本发明第五方面提供一种护肤品，其包含本发明所述的组合物，还包括或不包括本领域内公知的任意辅料。
在一个或多个实施例中，所述护肤品的剂型为溶液、悬浮液、乳状液、霜剂、膏状、凝胶、奶液、护肤液、粉、香皂、油、干粉、粉底液、湿粉或喷剂。
实施例1
1、中药提取混合物粉末的制备：
1)准备以下重量份的中药：蒲公英600g、黄连800g、黄岑300g、黄柏800g、大黄800g、金盏花800g、丹参1000g；准备所述重量的中药混合后进行粉碎，以水或乙醇水溶液为提取溶媒，经浸泡、煎煮、渗漉、超声或回流方法进行提取，提取液浓缩后加入乙醇沉淀多糖、鞣质，收集滤液，进一步浓缩滤液得到中药提取物；
优选为将药材粉碎到纳米级，采用10倍药材量、40％乙醇水溶液，低温真空萃取两次，每次1小时，过滤，合并滤液，滤液采用低温真空浓缩干燥，获得中药提取物；
2)选择非极性或弱极性大孔树脂对上述中药提取物进行分离纯化：将中药提取物上样到净化好的大孔树脂柱中，上样量为干树脂质量的4％，吸附平衡后，用水洗脱至无色；然后用含30％体积的乙醇水溶液洗脱至无色，得到精制的中药提取物；
3)将步骤2)中得到的中药提取物进行喷雾干燥，即为所述中药提取混合物粉末。
2、菠萝提取物的制备：
(1)将5kg新鲜菠萝皮用纯水洗净、切块；然后采用1:20的料液重量比，使用60重量％的乙醇水溶液在40℃下对菠萝皮搅拌100min，搅拌转速300-400r/min；接着趁热用1000目纱布过滤，然后采用1μm聚丙烯膜进行二次过滤；滤液装入旋蒸瓶进行浓缩除去乙醇，旋蒸瓶内剩余物料即为菠萝皮提取物；
(2)在向菠萝皮提取物中加入10倍重量的水并搅拌均匀，然后加入0.01％的纤维素酶45℃酶解30min，85℃灭活10min；降至室温后，再加入0.01％的中性蛋白酶和0.01％的碱性蛋白酶45℃酶解30min，85℃灭活10min，即得到菠萝皮提取液。
3、用于痤疮防治的组合物的制备：
将上述中药提取混合物粉末加入到菠萝皮提取液中，并加入1,3-丙二醇搅拌均匀，即为所述用于痤疮防治的组合物；其中，所述中药提取混合物粉末的添加量为菠萝皮提取液重量的10％；所述1,3-丙二醇的添加量为菠萝皮提取液体积的35％。
实施例2
1、中药提取混合物粉末的制备：
(1)准备以下重量份的中药：蒲公英800g、黄连1000g、黄岑500g、黄柏1000g、大黄1000g、金盏花1000g、丹参1500g；准备所述重量的中药混合后进行粉碎，以水或乙醇水溶液为提取溶媒，经浸泡、煎煮、渗漉、超声或回流方法进行提取，提取液浓缩后加入乙醇沉淀多糖、鞣质，收集滤液，进一步浓缩滤液得到中药提取物；
优选为将药材粉碎到纳米级，采用10倍药材量、40％乙醇水溶液，低温真空萃取两次，每次1小时，过滤，合并滤液，滤液采用低温真空浓缩干燥，获得中药提取物；
2)选择非极性或弱极性大孔树脂对上述中药提取物进行分离纯化：将中药提取物上样到净化好的大孔树脂柱中，上样量为干树脂质量的12％，吸附平衡后，用水洗脱至无色；然后用含50％体积的乙醇水溶液洗脱至无色，得到精制的中药提取物；
3)将步骤2)中得到的中药提取物进行喷雾干燥，即为所述中药提取混合物粉末。
2、菠萝提取物的制备：
(1)将5kg新鲜菠萝皮用纯水洗净、切块；然后采用1:20的料液重量比，使用80重量％的乙醇水溶液在60℃下对菠萝皮搅拌120min，搅拌转速400r/min；接着趁热用200目纱布过滤，然后采用5μm聚丙烯膜进行二次过滤；滤液装入旋蒸瓶进行浓缩除去乙醇，旋蒸瓶内剩余物料即为菠萝皮提取物；
(2)在向菠萝皮提取物中加入15倍重量的水并搅拌均匀，然后加入0.01％的纤维素酶45℃酶解30min，85℃灭活10min；降至室温后，再加入0.01％的中性蛋白酶和0.01％的碱性蛋白酶45℃酶解30min，85℃灭活10min，即得到菠萝皮提取液。
3、用于痤疮防治的组合物的制备：
将上述中药提取混合物粉末加入到菠萝皮提取液中，并加入1,3-丙二醇搅拌均匀，即为所述用于痤疮防治的组合物；其中，所述中药提取混合物粉末的添加量为菠萝皮提取液重量的15％；所述1,3-丙二醇的添加量为菠萝皮提取液体积的35％。
实施例3
1、中药提取混合物粉末的制备：
(1)准备以下重量份的中药：蒲公英700g、黄连900g、黄岑400g、黄柏900g、大黄900g、金盏花900g、丹参1200g；准备所述重量的中药混合后进行粉碎，以水或乙醇水溶液为提取溶媒，经浸泡、煎煮、渗漉、超声或回流方法进行提取，提取液浓缩后加入乙醇沉淀多糖、鞣质，收集滤液，进一步浓缩滤液得到中药提取物；
优选为将药材粉碎到纳米级，采用10倍药材量、40％乙醇水溶液，低温真空萃取两次，每次1小时，过滤，合并滤液，滤液采用低温真空浓缩干燥，获得中药提取物；
2)选择非极性或弱极性大孔树脂对上述中药提取物进行分离纯化：将中药提取物上样到净化好的大孔树脂柱中，上样量为干树脂质量的8％，吸附平衡后，用水洗脱至无色；然后用含40％体积的乙醇水溶液洗脱至无色，得到精制的中药提取物；
3)将步骤2)中得到的中药提取物进行喷雾干燥，即为所述中药提取混合物粉末。
2、菠萝提取物的制备：
(1)将5kg新鲜菠萝皮用纯水洗净、切块；然后采用1:20的料液重量比，使用70重量％的乙醇水溶液在50℃下对菠萝皮搅拌110min，搅拌转速350r/min；接着趁热用150目纱布过滤，然后采用3μm聚丙烯膜进行二次过滤；滤液装入旋蒸瓶进行浓缩除去乙醇，旋蒸瓶内剩余物料即为菠萝皮提取物；
(2)在向菠萝皮提取物中加入12倍重量的水并搅拌均匀，然后加入0.01％的纤维素酶45℃酶解30min，85℃灭活10min；降至室温后，再加入0.01％的中性蛋白酶和0.01％的碱性蛋白酶45℃酶解30min，85℃灭活10min，即得到菠萝皮提取液。
3、用于痤疮防治的组合物的制备：
将上述中药提取混合物粉末加入到菠萝皮提取液中，并加入1,3-丙二醇搅拌均匀，即为所述用于痤疮防治的组合物；其中，所述中药提取混合物粉末的添加量为菠萝皮提取液重量的13％；所述1,3-丙二醇的添加量为菠萝皮提取液体积的30％。
对比例1
本对比例中的制备步骤与实施例3基本相同，不同之处在于，中药提取混合物不进行喷雾干燥。
对比例2
本对比例中的原料不包含菠萝皮提取物，具体步骤为：
(1)准备以下重量份的中药：蒲公英700g、黄连900g、黄岑400g、黄柏900g、大黄900g、金盏花900g、丹参1200g；准备所述重量的中药混合后进行粉碎，以水或乙醇水溶液为提取溶媒，经浸泡、煎煮、渗漉、超声或回流方法进行提取，提取液浓缩后加入乙醇沉淀多糖、鞣质，收集滤液，进一步浓缩滤液得到中药提取物；
优选为将药材粉碎到纳米级，采用10倍药材量、40％乙醇水溶液，低温真空萃取两次，每次1小时，过滤，合并滤液，滤液采用低温真空浓缩干燥，获得中药提取物；
2)选择非极性或弱极性大孔树脂对上述中药提取物进行分离纯化：将中药提取物上样到净化好的大孔树脂柱中，上样量为干树脂质量的4％～12％，吸附平衡后，用水洗脱至无色；然后用含30％～50％体积的乙醇水溶液洗脱至无色，得到精制的中药提取物；
3)将步骤2)中得到的中药提取物进行喷雾干燥，即为所述中药提取混合物粉末；
(4)向所属中药提取混合物粉末中加入重量为12倍的水，然后加入总体积30％的1,3-丙二醇，混合均匀。
对比例3
本对比例中的原料只包含菠萝皮提取物和1,3-丙二醇，具体步骤为：
(1)将5kg新鲜菠萝皮用纯水洗净、切块；然后采用1:20的料液重量比，使用70重量％的乙醇水溶液在50℃下对菠萝皮搅拌110min，搅拌转速350r/min；接着趁热用150目纱布过滤，然后采用3μm聚丙烯膜进行二次过滤；滤液装入旋蒸瓶进行浓缩除去乙醇，旋蒸瓶内剩余物料即为菠萝皮提取物；
(2)在向菠萝皮提取物中加入12倍重量的水并搅拌均匀，然后加入0.01％的纤维素酶45℃酶解30min，85℃灭活10min；降至室温后，再加入0.01％的中性蛋白酶和0.01％的碱性蛋白酶45℃酶解30min，85℃灭活10min，即得到菠萝皮提取液。
(3)向菠萝提取液中加入1,3-丙二醇搅拌均匀，所述1,3-丙二醇的添加量为菠萝皮提取液体积的30％。
抗痤疮丙酸杆菌效果
痤疮丙酸杆菌是引发痤疮的主要致病菌。抗菌实验方法参照“天然药物(中药)新药研究指导原则”进行：以痤疮丙酸杆菌为细菌模型，采用检测MIC，研究其抗菌活性：细菌培养以后，调节细菌浓度为1×108个/mL；在96孔板中每孔添加50微升细菌，然后分别加入实施例1-3和对比例1-3得到的组合物，培养24小时，观察细菌生长情况，判断其MIC，结果见表1。
表1抗菌效果比较
Figure BDA0003120837440000131
Figure BDA0003120837440000141
从表1中可以看到，实施例1-3得到的组合物有很好的抑制痤疮丙酸杆菌活性的功效；对比例1和对比例2的抗痤疮丙酸杆菌效果明显较差；对比例3的抗痤疮丙酸杆菌效果最差。因此说明，本发明所述的组合物中的菠萝皮提取物和中药提取混合物起协同作用，大大提高了抗痤疮丙酸杆菌效果；且对中药提取混合物进行喷雾干燥处理后取得了更好的抗痤疮丙酸杆菌效果。
动物临床试验
取新西兰兔48只，雌雄各半，按体重和性别随机均衡分成8组，即正常对照组、模型对照组、实施例1-3组、对比例1-3组，每组6只。分组后除正常对照组外，其余各组均于右耳内侧面耳管开口处3cm×3cm范围，每日涂浓煤焦油溶液1次，每次0.6ml，连续4周，正常对照组家兔于同一位置处涂抹橄榄油0.6ml。4周后，涂抹煤焦油者均有耳增厚、粗糙、黑角栓等改变。实施例1-3组和对比例1-3组开始按分别灌胃给药，给药体积为2g/kg，正常对照组、模型对照组同法灌胃给予蒸馏水5g/kg，每天1次，连续2周。给药同时按前述造模方法继续造模。每次除给药外，应肉眼观察兔耳造模处局部皮肤的变化，耳厚薄、硬度、粗燥程度、毛囊口有无黑角栓等。病理观察：各组家兔右耳片用10％甲醛固定，按病理检验程序进行修剪、包埋、切片、HE染色、封片等，最后镜检，部分标本显微照像，观察家兔右耳组织表皮、真皮浅层细胞间和细胞形态变化，炎细胞浸润等异常改变。
实验性座疮组织学判定标准：-为无痤疮；+为毛囊轻度角化，皮脂腺轻度增生或无明显增生；++为毛囊面积轻度扩大，漏斗部可见中等量的角化物质，皮脂腺轻度增生；+++为毛囊面积明显扩大，内有大量的角化物质，皮脂腺直径明显增大。
表2实施例和对比例制备得到的组合物对兔耳实验性痤疮病理组织学的影响
Figure BDA0003120837440000142
Figure BDA0003120837440000151
结果表明：实施例1-3对痤疮的治疗有显著的效果；对比例1-3的效果较差。从表2中的数据可知，本发明所述的中药提取混合物和菠萝皮提取物起到了协同作用，对痤疮的治疗有显著效果；且对中药提取物进行喷雾干燥处理后取得了更好的治疗效果。
本发明不局限于上述具体实施例，任何人应该得知在本发明启示下做出的剂量或配方，并且是本领域技术人员显而易见的变化，凡是与本发明具有相同或者相似成分的技术方案，均属于本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种用于痤疮防治的组合物，其特征在于，包括中药提取混合物粉末、菠萝皮提取物和多元醇；其中，中药提取混合物由以下重量份的组分组成：蒲公英提取物6-8份，黄连提取物8-10份，黄岑提取物3-5份，黄柏提取物8-10份，大黄提取物8-10份，金盏花提取物8-10份和丹参提取物10-15份。
2.根据权利要求1所述的用于痤疮防治的组合物，其特征在于，按重量份计，所述中药提取混合物中各组分的添加量为：蒲公英提取物7份，黄连提取物9份，黄岑提取物4份，黄柏提取物9份，大黄提取物9份，金盏花提取物9份和丹参提取物12份。
3.权利要求1或2所述用于痤疮防治的组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)准备所述重量份的中药混合后进行粉碎，以水或乙醇水溶液为提取溶媒，经浸泡、煎煮、渗漉、超声或回流方法进行提取，提取液浓缩后加入乙醇沉淀多糖、鞣质，收集滤液，进一步浓缩滤液得到中药提取物；
优选为将药材粉碎到纳米级，采用10倍药材量、40％乙醇水溶液，低温真空萃取两次，每次1小时，过滤，合并滤液，滤液采用低温真空浓缩干燥，获得中药提取物；
2)选择非极性或弱极性大孔树脂对上述中药提取物进行分离纯化：将中药提取物上样到净化好的大孔树脂柱中，上样量为干树脂质量的4％～12％，吸附平衡后，用水洗脱至无色；然后用含30％～50％体积的乙醇水溶液洗脱至无色，得到精制的中药提取物；
3)将步骤2)中所述中药提取物搅拌均匀，然后进行喷雾干燥，得到中药提取混合物粉末；
4)将菠萝皮进行醇提、浓缩，得到菠萝皮提取物；
5)向菠萝皮提取物中加入10-15倍重量的水并搅拌均匀，然后加入纤维素酶和蛋白酶进行处理，得到菠萝皮提取液；
6)将中药提取混合物粉末加入到菠萝皮提取液中，并加入多元醇搅拌均匀，即为所述用于痤疮防治的组合物；其中，所述中药粉末的添加量为菠萝皮提取液重量的10％-15％；所述多元醇的添加量为菠萝皮提取液体积的25％-35％。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤4)具体为：将新鲜菠萝皮用纯水洗净、切块；然后采用1:20的料液重量比，使用60-80重量％的乙醇水溶液在40-60℃下对菠萝皮搅拌100-120min，搅拌转速300-400r/min；接着趁热用100-200目纱布过滤，然后采用1-5μm聚丙烯膜进行二次过滤；滤液装入旋蒸瓶进行浓缩除去乙醇，旋蒸瓶内剩余物料即为菠萝皮提取物。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤5)具体为：向菠萝皮提取物中加入10-15倍重量的水并搅拌均匀，然后加入0.01％的纤维素酶45℃酶解30min，85℃灭活10min；降至室温后，再加入0.01％的中性蛋白酶和0.01％的碱性蛋白酶45℃酶解30min，85℃灭活10min，即得到菠萝皮提取液。
6.权利要求1或2所述的组合物，或权利要求3-5任一项所述制备方法得到的组合物在抑制丙酸痤疮杆菌中的应用。
7.权利要求1或2所述的组合物，或权利要求3-5任一项所述制备方法得到的组合物在制备治疗痤疮的药物中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述组合物被制成散剂、片剂、块剂、颗粒剂、茶剂或胶囊剂。
9.一种护肤品，其特征在于，包含权利要求1或2所述的组合物，或权利要求3-5任一项所述制备方法得到的组合物。
10.根据权利要求9所述的护肤品，其特征在于，所述护肤品的剂型为溶液、悬浮液、乳状液、霜剂、膏状、凝胶、奶液、护肤液、粉、香皂、油、干粉、粉底液、湿粉或喷剂。
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