CN113390849B - 一种现场即做即用的拉曼增强芯片试剂盒及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于医学检测技术领域，具体涉及一种现场即做即用的拉曼增强芯片试剂盒及其制备方法。所述试剂盒包含：硝酸银溶液储存瓶，双氧水溶液储存瓶，氯金酸溶液储存瓶，喷镀Pt的硅片，干净的玻片，以及镊子，纯净水储存瓶。本发明实现拉曼增强基底现场检测按需即时制备。在具备“使用耗时短，适用范围广”等基本特点的同时，无需化学合成辅助设备，2分钟内完成单一SERS增强芯片制备，5分钟内完成特异性检测芯片制备，真正使得用户实现便捷，快速，高效稳定的检测结果。

Description

一种现场即做即用的拉曼增强芯片试剂盒及其制备方法
技术领域
本发明属于医学检测技术领域，具体涉及一种现场即做即用的拉曼增强芯片试剂盒及其制备方法。
背景技术
试剂盒是目前国内外检测食品安全，生物分析，环境污染的重要手段。诊断试剂盒是经过原材料采购、生产过程转化过后的最终产品。由于其试剂稳定、易保存，操作简便等因素，试剂盒已广泛应用至各领域检测中。目前，实际生产的试剂盒主要包括核酸提纯类和蛋白检测类等，不仅具备简便操作，高效稳定等特点。同时，结合体外诊断技术，通过对人体的血液、体液、组织等离体样本进行检测可获取较为准确的临床诊断信息产品和服务，使得讨论试剂盒技术仍占据有着主流方位。此外，制备出稳定性好、高灵敏度SERS基底模型是拉曼增强芯片制备的关键技术，常用的SERS基底制备有化学制备方法和物理制备方法两种，在化学方法制备SERS基底中，通过湿化学方法合成单金属纳米结构诸如金、银及铜纳米溶胶是最为典型的纳米结构制备方法，采用湿化学方法可以较容易控制金属纳米颗粒的粒径和形状。金属纳米颗粒的形状、粒径大小、表面形貌以及表面化学性质都会影响其SERS性能。
截至目前，大多数试剂盒是在特定的反应体系中，使得样本中的目标物质与试剂的功能组分特异性地结合，该反应依照抗原-抗体反应原理，并最终形成(可能是好几种不同的)抗原-抗体免疫复合物进行检测，这类试剂盒往往应用单一，无法通过一种试剂盒实现多样本多指标检测，缺乏高通量检测芯片装备的集成。同时，作为拉曼增强芯片核心部分的增强基底的稳定性及其可靠性仍存在较大问题，对于低浓度分子检测问题，吸附在纳米颗粒表面的活性剂或杂质分子产生干扰信号的同时，也可能对检测分子与纳米金属的接触起到阻碍作用，因而SERS芯片表面的洁净度直接影响拉曼检测结果。此外，目前试剂盒成本的实际控制存在较大问题，尤其是基于微纳米加工技术制备的一次性投入较高以及生产成本大等实际控制问题，造成其生产的拉曼增强芯片的价格无法满足市场对快速检测技术的便捷性和低价格要求。因此，开发一种即做即用多指标低成本检测的试剂盒显得极为重要。
发明内容
为了使实验人员能够摆脱繁重的试剂配制及优化过程，本发明开发了一种“即用即做”的超洁净表面的新型拉曼增强基底探针作为核心技术的便携式试剂盒。实现拉曼增强基底现场检测按需即时制备。在具备“使用耗时短，适用范围广”等基本特点的同时，无需化学合成辅助设备，2分钟内完成单一SERS增强芯片制备，5分钟内完成特异性检测芯片制备，真正使得用户实现便捷，快速，高效稳定的检测结果。
本发明提供了一种现场即做即用的拉曼增强芯片试剂盒，试剂盒包含：硝酸银溶液储存瓶，双氧水溶液储存瓶，氯金酸溶液储存瓶，喷镀Pt的硅片，干净的玻片，以及镊子，纯净水储存瓶。
作为本发明一种可实施方案，试剂盒中各部件可以按照不同的顺序和位置配置，例如，喷镀Pt的硅片，硝酸银溶液储存瓶，氯金酸溶液储存瓶，双氧水溶液储存瓶，纯净水储存瓶，镊子，干净的玻片依次配置。
作为本发明一种可实施方案，试剂盒内附有详细的使用说明书及操作视频，方便操作人员使用，提升产品的用户体验感。
本发明进一步提供了一种检测方法，采用前述的一种现场即做即用的拉曼增强芯片试剂盒，用户在获得该试剂盒中，取出硅片，依次加入20μL硝酸银(硝酸银水溶液，浓度20mM)，10μL氯金酸(氯金酸水溶液，浓度50mM)，以及20μL双氧水(体积比30％双氧水水溶液)，待反应20-30s时，使用纯净水冲洗表面，即可获得表面超洁净的检测芯片，然后进行相关物质检测。
用户可根据个人需要，进行相关物质检测。作为本发明一种可实施方案，可配备小型便携式拉曼设备。
具体的检测方法包括，配置不同浓度的罗丹明6G，结晶紫，以及芽孢杆菌的生物标志物吡啶二羧酸(DPA)，首先制备表面洁净的检测芯片，后加入10-20μL不同浓度的待测液，静置30s,利用拉曼设备进行检测。
除另有说明外，本发明的组成物质可以通过市售购得。
本发明相对于现有技术的优势在于：
本发明提出拉曼增强芯片“即做即用”的检测试剂盒解决方案，通过现场快速制备超清洁表面的纳米刺结构SERS基底，解决拉曼增强基底纳米结构制备难、工艺复杂、表面稳定性低、易污染等长期困扰拉曼增强基底POCT应用的难题。
与此同时，试剂盒内材料稳定，易保存，操作简便，可同时进行多指标现场快速检测。此外，此试剂盒成本较低，价格便宜，满足市场大规模需求的同时，简便高效的检测对“居家自测”具有实质性推动作用，不仅为广大群众提供较为准确可靠的检测结果，同时也可指导临床检测工作，包括辅助诊断、鉴别诊断、疗效观察、复发监测以及预后评估等具有一定的意义和价值。
附图说明
图1，本发明的“即做即用”检测试剂盒；
图2，本发明的“即做即用”检测试剂盒操作流程图；
图3，本发明试剂盒检测罗丹明6G，结晶紫光谱及强度分析图；
图4，本发明试剂盒分别在水溶液及人体血清中检测DPA光谱及强度分析图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例1一种现场即做即用的拉曼增强芯片试剂盒
参照图1所示，所述试剂盒包含：硝酸银溶液储存瓶，双氧水溶液储存瓶，氯金酸溶液储存瓶，喷镀Pt的硅片，干净的玻片，以及镊子，纯净水储存瓶。
喷镀Pt的硅片，硝酸银溶液储存瓶，氯金酸溶液储存瓶，双氧水溶液储存瓶，纯净水储存瓶，镊子，干净的玻片依次配置。
实施例2
参照图1和2所示，采用前述的一种现场即做即用的拉曼增强芯片试剂盒，用户在获得该试剂盒中，取出硅片，依次加入20μL硝酸银(硝酸银水溶液，浓度20mM)，10μL氯金酸(氯金酸水溶液，浓度50mM)，以及20μL双氧水(体积比30％双氧水水溶液)，待反应20-30s时，使用纯净水冲洗表面，即可获得表面超洁净的检测芯片，然后进行相关物质检测。
具体地：
采用本试剂盒可用于检测多种物质，包括不同浓度的罗丹明6G，结晶紫，以及芽孢杆菌的生物标志物吡啶二羧酸(DPA)，首先制备表面洁净的检测芯片，后加入10-20μL不同浓度的待测液，静置30s,利用拉曼设备进行检测，其结果如图3和图4所示。从图中可见，本发明的检测效果优异。
本领域的技术人员容易理解，以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种检测方法，其特征在于，采用一种现场即做即用的拉曼增强芯片试剂盒，试剂盒包含：硝酸银溶液储存瓶，双氧水溶液储存瓶，氯金酸溶液储存瓶，喷镀Pt的硅片，干净的玻片，以及镊子，纯净水储存瓶，
待测物选自：罗丹明6G，结晶紫，以及吡啶二羧酸(DPA)，
检测步骤为：用户在获得该试剂盒中，取出硅片，依次加入20μL浓度为20mM硝酸银水溶液，10μL浓度为50mM氯金酸水溶液，以及20μL体积比为30％双氧水水溶液，待反应20-30s时，使用纯净水冲洗表面，即可获得表面超洁净的检测芯片，加入10-20μL不同浓度的待测物溶液，静置30s，利用拉曼设备进行检测。
2.根据权利要求1所述的一种检测方法，其特征在于，试剂盒中各部件可以按照不同的顺序和位置配置。
3.根据权利要求1所述的一种检测方法，其特征在于，喷镀Pt的硅片，硝酸银溶液储存瓶，氯金酸溶液储存瓶，双氧水溶液储存瓶，纯净水储存瓶，镊子，干净的玻片依次配置。
4.根据权利要求1所述的一种检测方法，其特征在于，试剂盒内附有详细的使用说明书及操作视频，方便操作人员使用，提升产品的用户体验感。
5.根据权利要求1所述的一种检测方法，其特征在于，可配备小型便携式拉曼设备，用于检测。
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