CN113358620B - 一种利用石墨烯量子点检测叶绿素和类胡萝卜素含量的荧光分析方法 - Google Patents

一种利用石墨烯量子点检测叶绿素和类胡萝卜素含量的荧光分析方法 Download PDF

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Abstract

本发明属于光谱分析检测技术领域,公开了一种利用石墨烯量子点检测叶绿素和类胡萝卜素的含量。包含以下步骤:制备红色荧光和蓝色荧光的石墨烯量子点;将获得的石墨烯量子点与提取的叶绿素和类胡萝卜素结合后石墨烯量子点的荧光发生猝灭;利用叶绿素和类胡萝卜素的浓度与石墨烯量子点荧光强度猝灭效率之间的关系实现对叶绿素和类胡萝卜素浓度的检测。本发明的优点是成本低,操作简单,能够准确检测叶绿体中叶绿素的含量,具有较好的运用前景。

Description

一种利用石墨烯量子点检测叶绿素和类胡萝卜素含量的荧光 分析方法
技术领域
本发明属于荧光分析检测技术领域,具体涉及一种利用叶绿素和类胡萝卜素对石墨烯量子点荧光强度的猝灭效应来检测叶绿素和类胡萝卜素的含量。
背景技术
植物叶绿体中的色素是绿色植物进行光合作用的重要物质,在光合作用过程中参与光能的吸收、传递和转换等过程。高等植物叶绿体中的色素主要包括叶绿素和类类胡萝卜素,其中叶绿素主要分为叶绿素a和叶绿素b,类胡萝卜素主要分为胡萝卜素和叶黄素,叶绿素是植物吸收光能的主要色素,类胡萝卜素在光合作用中的作用是辅助性质的,它们吸收的光能只有传递给叶绿素之后才能在光合作用中发挥作用。叶片中光合色素含量不同,会影响植物光合效率,还引起叶片颜色的变化,因此叶绿素和类胡萝卜素含量的精确测定是农作物生长状况、植物病理诊断等的重要指标。
叶绿素分子是由两部分组成的:核心部分是一个中央有一个镁原子的卟啉环,其功能是光吸收;另一部分是一个很长的脂肪烃侧链,称为叶绿醇,其功能是叶绿素用这种侧链插入到类囊体膜。各种叶绿素之间的结构差别很小,叶绿素a的分子式为C55H72O5N4Mg,叶绿素b的分子式为C55H70O6N4Mg,两者仅在吡咯环Ⅱ上的附加基团上有差异:前者是甲基,后者是甲醛基。胡萝卜素是一种不饱和碳氢化合物,分子式为C40H56,叶黄素是胡萝卜素含氧的衍生物,分子式为C40H56O2
各种植物叶片中叶绿素和类胡萝卜素都可溶于丙酮、乙醇、石油醚、四氯化碳等溶剂,因此可以用有机溶剂研磨提取或浸泡提取。不同类型的色素对光的吸收也是不同的,叶绿素的吸收光谱主要分布在波长为640nm-660nm的红光部分和波长为430nm-450nm的蓝紫光部分,类胡萝卜素的吸收光谱主要分布在440nm-450nm。
石墨烯量子点具有可调谐的光致发光特性、优异的物理化学特性、高的光稳定性、生物相容性和体积小而具有巨大的生物医学应用潜力而受到广泛关注。石墨烯量子点表面可以修饰许多种官能团,能够通过电荷、化学键等相互作用和很多物质结合,因此石墨烯量子点常被用于制作荧光探针。
发明内容
本发明的目的在于为叶绿素和类胡萝卜素含量的检测提供一种新的简单测量方法,能够准确快速方便测定叶绿体中色素的含量。
本发明的技术方案为:一种利用石墨烯量子点来检测叶绿素和类胡萝卜素的含量的方法。具体技术方案如下:
(1)、制备发光波长在红光波段和蓝光波段的石墨烯量子点;
(2)、利用荧光分光光度计分别测得步骤(1)中的红色荧光、蓝色荧光石墨烯量子点溶液中加入叶绿素与类胡萝卜素待测混合溶液之前的荧光强度FR0、FB0和之后的荧光强度FR1,FB1
(3)、将步骤(2)中得到的(FR0-FR1)/FR0带入已知的叶绿素浓度与红色荧光石墨烯量子点荧光强度的标准关系曲线中得到待测混合溶液中叶绿素的浓度C1,并将C1带入已知的叶绿素浓度与蓝色荧光石墨烯量子点荧光强度的标准关系曲线中得到对应的蓝色荧光强度FB2
(4)、将从步骤(2)中和步骤(3)中得到的[FB0-(FB2-FB1)]/FB0带入已知的类胡萝卜素浓度与蓝色荧光石墨烯量子点荧光强度的标准关系曲线中得到待测混合溶液中类胡萝卜素的浓度C2
在步骤(1)中,红光波段在600nm-660nm范围,蓝光波段在400-500nm范围。
在步骤(1)中,红光波段和蓝光波段的光谱可以由一种石墨烯量子点同时发出,也可以由两种石墨烯量子点分别发出。
在步骤(2)中,提取的叶绿素和类胡萝卜素待测混合溶液中可以同时有叶绿素和类胡萝卜素,也可以只包含两者中的一种色素。
在步骤(2)中,红色石墨烯量子点的荧光只能被叶绿素猝灭,蓝色荧光石墨烯量子点的荧光即可以被叶绿素猝灭也可以被类胡萝卜素猝灭。
在步骤(3)中,叶绿素浓度与红色荧光石墨烯量子点荧光强度的关系以及与蓝色荧光石墨烯量子点荧光强度的标准关系曲线是利用标准浓度梯度的叶绿素分别猝灭红色荧光石墨烯量子点和蓝色荧光石墨烯量子点的荧光,通过浓度与荧光强度的关系得到的标准曲线。
在步骤(4)中,类胡萝卜素浓度与蓝色荧光石墨烯量子点荧光强度的标准关系曲线是利用标准浓度梯度的类胡萝卜素猝灭蓝色荧光石墨烯量子点的荧光,通过浓度与荧光强度的关系得到的标准曲线。
在步骤(4)中,FB2-FB1的值是从待测混合液中的叶绿素和类胡萝卜素共同对蓝色荧光石墨烯量子点的荧光猝灭中扣除叶绿素的影响,仅余下类胡萝卜素对蓝色荧光石墨烯量子点的荧光猝灭。
本发明提出了一种利用发光石墨烯量子点作为检测叶绿素和类胡萝卜素浓度的传感平台,为叶绿素和类胡萝卜素含量的确定提出了一种新的检测方法。当在紫外光或者可见光的激发下,石墨烯量子点发出的荧光能够被叶绿素和类胡萝卜素猝灭,并且荧光猝灭效率与叶绿素和类胡萝卜素的浓度有关,因此能够实现叶绿素和类胡萝卜素的微量检测。
本发明首次提出利用石墨烯量子点作为荧光探针来定量检测叶绿素与类胡萝卜素的含量,为叶绿素和类胡萝卜素含量的检测提供了一种新的检测手段。本发明拓展了石墨烯量子点在植物检测领域的应用,为植物生长过程中重要物质的监测提供了新思路。
附图说明
图1为叶绿素和类胡萝卜素的吸收光谱图。
具体实施方式
下面结合附图以及实施例对本发明作进一步描述。
实施例1
步骤1:将0.1g尿素和0.1g苯二胺溶于25mL水中,转移至50mL聚四氟乙烯内衬的不锈钢高压釜内在160℃温度下反应10小时,自然冷却到室温;将反应产物以乙酸乙酯和石油醚的混合物为洗脱剂,通过硅胶柱层析进行纯化,并在真空烘箱中进一步干燥,得到不同发光颜色的石墨烯量子点;将获得的红色荧光和蓝色荧光的石墨烯量子分别分散在一定量的丙酮溶液中得到红色石墨烯量子点溶液A和蓝色石墨烯量子点溶液B。
步骤2:取一定量步骤1中的溶液A和溶液B,分别向其中加入已知浓度梯度(Cx)的叶绿素标准液混合,并利用荧光分光光度计分别检测加入叶绿素前的荧光强度FR0、FB0,和加入叶绿素后的荧光强度FRX,FBX,得到以叶绿素浓度Cx为横坐标,溶液A、B的荧光猝灭强度(FR0-FRX)/FR0、(FB0-FBX)/FB0为纵坐标的标准曲线S1,S2
步骤3:取一定量步骤1中的溶液B,向其中加入已知浓度梯度(Cx)的类胡萝卜素标准液混合,并利用荧光分光光度计分别检测加入类胡萝卜素前的荧光强度FB0,和加入类胡萝卜素后的荧光强度FBX,得到以类胡萝卜素浓度Cx为横坐标,溶液B的荧光猝灭强度(FB0-FBX)/FB0为纵坐标的标准曲线S3
步骤4:取一定量步骤1中的溶液A和溶液B,分别向其中加入叶绿素与类胡萝卜素待测混合溶液,并利用荧光分光光度计分别检测加入待测混合溶液前的荧光强度FR0、FB0,和加入待测混合溶液后的荧光强度FR1,FB1
步骤5:将从步骤(4)中得到的(FR0-FR1)/FR0带入标准曲线S1中得到待测混合溶液中叶绿素的浓度C1,并将C1带入标准曲线S2中得到对应的蓝色荧光强度FB2
步骤6:将从步骤(4)和步骤(5)中得到的[FB0-(FB2-FB1)]/FB0带入标准曲线S3中得到待测混合溶液中类胡萝卜素的浓度C2
实施例2
步骤1:将5mmol柠檬酸和10mmol尿素溶于10ml N,N-二甲基甲酰胺溶液中,转移到50ml聚四氟乙烯内衬的不锈钢高压釜内在200℃温度下反应12h后,自然冷却到室温;将1mmol柠檬酸和10mmol尿素溶于10ml N,N-二甲基甲酰胺溶液中,转移到50ml聚四氟乙烯内衬的不锈钢高压釜内在140℃下反应12h后,自然冷却到室温;将两次产物分别在10000转/分钟的转速下离心10min,去除固体,收集上清液,加入石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂中得到固体,并将收集的固体溶解在丙酮溶液中得到红色石墨烯量子点溶液A和蓝色石墨烯量子点溶液B。
步骤2:取一定量步骤1中的溶液A和溶液B,分别向其中加入已知浓度梯度(Cx)的叶绿素标准液混合,并利用荧光分光光度计分别检测加入叶绿素前的荧光强度FR0、FB0,和加入叶绿素后的荧光强度FRX,FBX,得到以叶绿素浓度Cx为横坐标,溶液A、B的荧光猝灭强度(FR0-FRX)/FR0、(FB0-FBX)/FB0为纵坐标的标准曲线S1,S2
步骤3:取一定量步骤1中的溶液B,向其中加入已知浓度梯度(Cx)的类胡萝卜素标准液混合,并利用荧光分光光度计分别检测加入类胡萝卜素前的荧光强度FB0,和加入类胡萝卜素后的荧光强度FBX,得到以类胡萝卜素浓度Cx为横坐标,溶液B的荧光猝灭强度(FB0-FBX)/FB0为纵坐标的标准曲线S3
步骤4:取一定量步骤1中的溶液A和溶液B,分别向其中加入叶绿素与类胡萝卜素待测混合溶液,并利用荧光分光光度计分别检测加入待测混合溶液前的荧光强度FR0、FB0,和加入待测混合溶液后的荧光强度FR1,FB1
步骤5:将从步骤(4)中得到的(FR0-FR1)/FR0带入标准曲线S1中得到待测混合溶液中叶绿素的浓度C1,并将C1带入标准曲线S2中得到对应的蓝色荧光强度FB2
步骤6:将从步骤(4)和步骤(5)中得到的[FB0-(FB2-FB1)]/FB0带入标准曲线S3中得到待测混合溶液中类胡萝卜素的浓度C2
实施例3
步骤1:将0.45g的邻苯二胺和0.6g的2,3-二羟基丁二酸溶于25ml的乙醇中,转移聚四氟乙烯内衬的不锈钢高压釜内在180℃温度下反应12小时后,自然冷却到室温;将0.45g的间苯二胺溶于25ml的乙醇中,转移聚四氟乙烯内衬的不锈钢高压釜内在180℃下加热12小时后,自然冷却到室温;将两次产物分别用二氯甲烷和甲醇的混合液为洗脱剂,通过硅胶柱层析进行纯化,并在真空烘箱中进一步干燥,将干燥后的固体粉末分散在丙酮溶液中得到红色石墨烯量子点溶液A和蓝色石墨烯量子点溶液B。
步骤2:取一定量步骤1中的溶液A和溶液B,分别向其中加入已知浓度梯度(Cx)的叶绿素标准液混合,并利用荧光分光光度计分别检测加入叶绿素前的荧光强度FR0、FB0,和加入叶绿素后的荧光强度FRX,FBX,得到以叶绿素浓度Cx为横坐标,溶液A、B的荧光猝灭强度(FR0-FRX)/FR0、(FB0-FBX)/FB0为纵坐标的标准曲线S1,S2
步骤3:取一定量步骤1中的溶液B,向其中加入已知浓度梯度(Cx)的类胡萝卜素标准液混合,并利用荧光分光光度计分别检测加入类胡萝卜素前的荧光强度FB0,和加入类胡萝卜素后的荧光强度FBX,得到以类胡萝卜素浓度Cx为横坐标,溶液B的荧光猝灭强度(FB0-FBX)/FB0为纵坐标的标准曲线S3
步骤4:取一定量步骤1中的溶液A和溶液B,分别向其中加入叶绿素与类胡萝卜素待测混合溶液,并利用荧光分光光度计分别检测加入待测混合溶液前的荧光强度FR0、FB0,和加入待测混合溶液后的荧光强度FR1,FB1
步骤5:将从步骤(4)中得到的(FR0-FR1)/FR0带入标准曲线S1中得到待测混合溶液中叶绿素的浓度C1,并将C1带入标准曲线S2中得到对应的蓝色荧光强度FB2
步骤6:将从步骤(4)和步骤(5)中得到的[FB0-(FB2-FB1)]/FB0带入标准曲线S3中得到待测混合溶液中类胡萝卜素的浓度C2
实施例4
步骤1:将0.4g柠檬酸和0.7mL乙二胺溶于25ml N,N-二甲基甲酰胺溶液中,转移到50ml聚四氟乙烯内衬的不锈钢高压釜内在180℃下反应4h后,自然冷却到室温;将1.05g柠檬酸和1.52g硫脲溶于20ml蒸馏水中,转移到50ml聚四氟乙烯内衬的不锈钢高压釜内在160℃下反应6h后,自然冷却到室温;将两次产物分别用0.22μm的微孔过滤膜进行过滤,截留分子量为1000Da的透析袋进行透析,并在真空烘箱中进一步干燥,将干燥后的固体粉末分散在丙酮溶液中得到红色石墨烯量子点溶液A和蓝色石墨烯量子点溶液B。
步骤2:取一定量步骤1中的溶液A和溶液B,分别向其中加入已知浓度梯度(Cx)的叶绿素标准液混合,并利用荧光分光光度计分别检测加入叶绿素前的荧光强度FR0、FB0,和加入叶绿素后的荧光强度FRX,FBX,得到以叶绿素浓度Cx为横坐标,溶液A、B的荧光猝灭强度(FR0-FRX)/FR0、(FB0-FBX)/FB0为纵坐标的标准曲线S1,S2
步骤3:取一定量步骤1中的溶液B,向其中加入已知浓度梯度(Cx)的类胡萝卜素标准液混合,并利用荧光分光光度计分别检测加入类胡萝卜素前的荧光强度FB0,和加入类胡萝卜素后的荧光强度FBX,得到以类胡萝卜素浓度Cx为横坐标,溶液B的荧光猝灭强度(FB0-FBX)/FB0为纵坐标的标准曲线S3
步骤4:取一定量步骤1中的溶液A和溶液B,分别向其中加入叶绿素与类胡萝卜素待测混合溶液,并利用荧光分光光度计分别检测加入待测混合溶液前的荧光强度FR0、FB0,和加入待测混合溶液后的荧光强度FR1,FB1
步骤5:将从步骤(4)中得到的(FR0-FR1)/FR0带入标准曲线S1中得到待测混合溶液中叶绿素的浓度C1,并将C1带入标准曲线S2中得到对应的蓝色荧光强度FB2
步骤6:将从步骤(4)和步骤(5)中得到的[FB0-(FB2-FB1)]/FB0带入标准曲线S3中得到待测混合溶液中类胡萝卜素的浓度C2
实施例5
步骤1:将1g柠檬酸和2g尿素加入10ml N,N-二甲基甲酰胺溶液中,转移到50ml聚四氟乙烯内衬的不锈钢高压釜内在160℃下反应6h后,自然冷却到室温;将1.5g的葡萄糖和10mL浓硫酸加入10mL去离子水中,转移到50ml聚四氟乙烯内衬的不锈钢高压釜内在200℃下反应3h后,自然冷却到室温;将两次反应产物分别用0.22μm的微孔过滤膜进行过滤,再与1ml 50mg/mL NaOH水溶液和3ml乙醇混合,在8000rpm的离心机中纯化10min得到沉淀物,并在真空烘箱中进一步干燥,将干燥后的固体粉末分散在丙酮溶液中得到红色石墨烯量子点溶液A和蓝色石墨烯量子点溶液B。
步骤2:取一定量步骤1中的溶液A和溶液B,分别向其中加入已知浓度梯度(Cx)的叶绿素标准液混合,并利用荧光分光光度计分别检测加入叶绿素前的荧光强度FR0、FB0,和加入叶绿素后的荧光强度FRX,FBX,得到以叶绿素浓度Cx为横坐标,溶液A、B的荧光猝灭强度(FR0-FRX)/FR0、(FB0-FBX)/FB0为纵坐标的标准曲线S1,S2
步骤3:取一定量步骤1中的溶液B,向其中加入已知浓度梯度(Cx)的类胡萝卜素标准液混合,并利用荧光分光光度计分别检测加入类胡萝卜素前的荧光强度FB0,和加入类胡萝卜素后的荧光强度FBX,得到以类胡萝卜素浓度Cx为横坐标,溶液B的荧光猝灭强度(FB0-FBX)/FB0为纵坐标的标准曲线S3
步骤4:取一定量步骤1中的溶液A和溶液B,分别向其中加入叶绿素与类胡萝卜素待测混合溶液,并利用荧光分光光度计分别检测加入待测混合溶液前的荧光强度FR0、FB0,和加入待测混合溶液后的荧光强度FR1,FB1
步骤5:将从步骤(4)中得到的(FR0-FR1)/FR0带入标准曲线S1中得到待测混合溶液中叶绿素的浓度C1,并将C1带入标准曲线S2中得到对应的蓝色荧光强度FB2
步骤6:将从步骤(4)和步骤(5)中得到的[FB0-(FB2-FB1)]/FB0带入标准曲线S3中得到待测混合溶液中类胡萝卜素的浓度C2
实施例6
步骤1:将10mg的1,3-二羟基萘和40mg KIO4溶于10mL乙醇中,转移到50ml聚四氟乙烯内衬的不锈钢高压釜内在180℃下反应1h后,自然冷却到室温,用二氯甲烷和甲醇的混合液为洗脱剂,通过硅胶柱层析进行纯化,并在真空烘箱中进一步干燥;将1.5g的葡萄糖和10mL浓硫酸加入10mL去离子水中,转移到50ml聚四氟乙烯内衬的不锈钢高压釜内在200℃下反应3h后,自然冷却到室温,用0.22μm的微孔过滤膜进行过滤,再与1ml 50mg/mL NaOH水溶液和3ml乙醇混合,在8000rpm的离心机中纯化10min得到沉淀物,并在真空烘箱中进一步干燥;将获得的红色荧光和蓝色荧光的石墨烯量子分别分散在一定量的丙酮溶液中得到红色石墨烯量子点溶液A和蓝色石墨烯量子点溶液B。
步骤2:取一定量步骤1中的溶液A和溶液B,分别向其中加入已知浓度梯度(Cx)的叶绿素标准液混合,并利用荧光分光光度计分别检测加入叶绿素前的荧光强度FR0、FB0,和加入叶绿素后的荧光强度FRX,FBX,得到以叶绿素浓度Cx为横坐标,溶液A、B的荧光猝灭强度(FR0-FRX)/FR0、(FB0-FBX)/FB0为纵坐标的标准曲线S1,S2
步骤3:取一定量步骤1中的溶液B,向其中加入已知浓度梯度(Cx)的类胡萝卜素标准液混合,并利用荧光分光光度计分别检测加入类胡萝卜素前的荧光强度FB0,和加入类胡萝卜素后的荧光强度FBX,得到以类胡萝卜素浓度Cx为横坐标,溶液B的荧光猝灭强度(FB0-FBX)/FB0为纵坐标的标准曲线S3
步骤4:取一定量步骤1中的溶液A和溶液B,分别向其中加入叶绿素与类胡萝卜素待测混合溶液,并利用荧光分光光度计分别检测加入待测混合溶液前的荧光强度FR0、FB0,和加入待测混合溶液后的荧光强度FR1,FB1
步骤5:将从步骤(4)中得到的(FR0-FR1)/FR0带入标准曲线S1中得到待测混合溶液中叶绿素的浓度C1,并将C1带入标准曲线S2中得到对应的蓝色荧光强度FB2
步骤6:将从步骤(4)和步骤(5)中得到的[FB0-(FB2-FB1)]/FB0带入标准曲线S3中得到待测混合溶液中类胡萝卜素的浓度C2

Claims (8)

1.一种利用石墨烯量子点检测叶绿素和类胡萝卜素含量的荧光分析方法,其特征在于,包含以下步骤:
(1)、制备发光波长在红光波段的红色荧光石墨烯量子点溶液和发光波长在蓝光波段的蓝色荧光石墨烯量子点溶液;
(2)、利用荧光分光光度计分别测得步骤(1)中的红色荧光、蓝色荧光石墨烯量子点溶液中加入叶绿素与类胡萝卜素待测混合溶液之前的荧光强度FR0、FB0和之后的荧光强度FR1,FB1
(3)、将从步骤(2)中得到的(FR0-FR1)/FR0代入已知的叶绿素浓度与红色荧光石墨烯量子点荧光强度的标准关系曲线中得到待测混合溶液中叶绿素的浓度C1,并将C1代入已知的叶绿素浓度与蓝色荧光石墨烯量子点荧光强度的标准关系曲线中得到对应的蓝色荧光强度FB2
(4)、将从步骤(2)中和步骤(3)中得到的[FB0-(FB2-FB1)]/FB0代入已知的类胡萝卜素浓度与蓝色荧光石墨烯量子点荧光强度的标准关系曲线中得到待测混合溶液中类胡萝卜素的浓度C2
2.根据权利 要求1所述一种利用石墨烯量子点检测叶绿素和类胡萝卜素含量的荧光分析方法,其特征在于:在步骤(1)中,红光波段在600nm-660nm范围,蓝光波段在400-500nm范围。
3.根据权利 要求1所述一种利用石墨烯量子点检测叶绿素和类胡萝卜素含量的荧光分析方法,其特征在于:在步骤(1)中,红光波段和蓝光波段的光谱可以由一种石墨烯量子点同时发出,也可以由两种石墨烯量子点分别发出。
4.根据权利 要求1所述一种利用石墨烯量子点检测叶绿素和类胡萝卜素含量的荧光分析方法,其特征在于:在步骤(2)中,提取的叶绿素和类胡萝卜素待测混合溶液中可以同时有叶绿素和类胡萝卜素,也可以只包含两者中的一种色素。
5.根据权利 要求1所述一种利用石墨烯量子点检测叶绿素和类胡萝卜素含量的荧光分析方法,其特征在于:在步骤(2)中,红色荧光石墨烯量子点的荧光只能被叶绿素猝灭,蓝色荧光石墨烯量子点的荧光即可以被叶绿素猝灭也可以被类胡萝卜素猝灭。
6.根据权利 要求1所述一种利用石墨烯量子点检测叶绿素和类胡萝卜素含量的荧光分析方法,其特征在于:在步骤(3)中,叶绿素浓度与红色荧光石墨烯量子点荧光强度的关系以及与蓝色荧光石墨烯量子点荧光强度的标准关系曲线是利用标准浓度梯度的叶绿素分别猝灭红色荧光石墨烯量子点和蓝色荧光石墨烯量子点的荧光,通过浓度与荧光强度的关系得到的标准曲线。
7.根据权利 要求1所述一种利用石墨烯量子点检测叶绿素和类胡萝卜素含量的荧光分析方法,其特征在于:在步骤(4)中,类胡萝卜素浓度与蓝色荧光石墨烯量子点荧光强度的标准关系曲线是利用标准浓度梯度的类胡萝卜素猝灭蓝色荧光石墨烯量子点的荧光,通过浓度与荧光强度的关系得到的标准曲线。
8.根据权利 要求1所述一种利用石墨烯量子点检测叶绿素和类胡萝卜素含量的荧光分析方法,其特征在于:在步骤(4)中,待测混合溶液中类胡萝卜素浓度的检测是从待测混合液中的叶绿素和类胡萝卜素共同对蓝色荧光石墨烯量子点的荧光猝灭中扣除叶绿素的影响,仅余下类胡萝卜素对蓝色荧光石墨烯量子点的荧光猝灭。
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