CN113354490A - 一种利用电子束辐照提高头孢菌素发酵菌渣好氧堆肥效果的方法 - Google Patents

一种利用电子束辐照提高头孢菌素发酵菌渣好氧堆肥效果的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN113354490A
CN113354490A CN202110822078.1A CN202110822078A CN113354490A CN 113354490 A CN113354490 A CN 113354490A CN 202110822078 A CN202110822078 A CN 202110822078A CN 113354490 A CN113354490 A CN 113354490A
Authority
CN
China
Prior art keywords
electron beam
cephalosporin
beam irradiation
residues
fermentation
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202110822078.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113354490B (zh
Inventor
王建龙
初里冰
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Tsinghua University
Original Assignee
Tsinghua University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Tsinghua University filed Critical Tsinghua University
Priority to CN202110822078.1A priority Critical patent/CN113354490B/zh
Publication of CN113354490A publication Critical patent/CN113354490A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113354490B publication Critical patent/CN113354490B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C05FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05FORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
    • C05F3/00Fertilisers from human or animal excrements, e.g. manure
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C05FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05FORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
    • C05F17/00Preparation of fertilisers characterised by biological or biochemical treatment steps, e.g. composting or fermentation
    • C05F17/30Preparation of fertilisers characterised by biological or biochemical treatment steps, e.g. composting or fermentation using irradiation, e.g. solar or nuclear radiation; using electric or magnetic fields
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C05FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05GMIXTURES OF FERTILISERS COVERED INDIVIDUALLY BY DIFFERENT SUBCLASSES OF CLASS C05; MIXTURES OF ONE OR MORE FERTILISERS WITH MATERIALS NOT HAVING A SPECIFIC FERTILISING ACTIVITY, e.g. PESTICIDES, SOIL-CONDITIONERS, WETTING AGENTS; FERTILISERS CHARACTERISED BY THEIR FORM
    • C05G3/00Mixtures of one or more fertilisers with additives not having a specially fertilising activity
    • C05G3/80Soil conditioners
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02WCLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES RELATED TO WASTEWATER TREATMENT OR WASTE MANAGEMENT
    • Y02W30/00Technologies for solid waste management
    • Y02W30/40Bio-organic fraction processing; Production of fertilisers from the organic fraction of waste or refuse

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • High Energy & Nuclear Physics (AREA)
  • Soil Sciences (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Fertilizers (AREA)
  • Processing Of Solid Wastes (AREA)

Abstract

本发明公开了属于固体废弃物处理处置技术领域的一种利用电子束辐照提高头孢菌素发酵菌渣好氧堆肥效果的方法。所述方法先对头孢菌素发酵菌渣进行电子束辐照预处理;然后与固体废弃物混合,并加入微生物菌剂,混合均匀后,进行好氧堆肥发酵,制成肥料;电子束辐照过程降低头孢菌素发酵菌渣中耐药菌以及头孢类抗性基因的丰度的同时;抑制并杀灭堆肥过程中抗性基因的增殖。预处理后的好氧堆肥能缩短堆肥时间,堆肥产品中无抗生素残留,抗性基因丰度显著降低,无耐药菌检出,能作为肥料进行安全再利用。

Description

一种利用电子束辐照提高头孢菌素发酵菌渣好氧堆肥效果的 方法
技术领域
本发明属于固体废弃物处理处置技术领域,尤其涉及一种利用电子束辐照提高头孢菌素发酵菌渣好氧堆肥效果的方法。
背景技术
我国是世界上最大的抗生素原料药生产国,占全球市场量的70%以上。大部分抗生素(包括头孢、青霉素等β-内酰胺类,四环素、土霉素等四环素类,链霉素、庆大霉素等氨基糖苷类以及红霉素、阿奇霉素等大环内酯类抗生素)的原料药均通过微生物发酵的方式生产,产生大量的抗生素发酵菌渣。在抗生素原料药产品结构中,头孢和青霉素类β-内酰胺类抗生素占据绝大多数。据报道,2015年我国β-内酰胺类抗生素产量在所有抗生素产品中占比68%左右,相应的,β-内酰胺类抗生素发酵菌渣占比达77.8%左右(刘园园,我国抗生素菌渣处置技术现状,中国环保产业,2017,8:66-68)。
抗生素菌渣为粘稠的固液混合物,含水率一般在80%以上。抗生素发酵菌渣的主要成分为菌丝体、剩余培养基、以及提取不完全残留的抗生素。菌渣中残留的抗生素会诱导抗性基因的产生,使细菌产生耐药性,并随生物链富集危害人类健康。耐药菌引发的生态安全问题逐渐引起人们的迫切关注。2002年后,我国已明令禁止将未经处理的抗生素菌渣直接生产饲料或者饲料添加剂。2008年将发酵类制药残渣列入《危险废物名录》。抗生素菌渣的安全处置和有效利用已成为制约抗生素生产企业发展的瓶颈,是急需解决的难题。
抗生素菌渣富含多糖、蛋白质、多种氨基酸和微量元素,营养丰富。其中优质蛋白含量在30%以上。粗脂肪含量在10%以上。若能去除菌渣中残留的抗生素,将菌渣从危险废物中脱除,无害化处理后菌渣可制成肥料变为资源再利用,从而彻底解决抗生素菌渣处理处置难题。该问题的解决不仅有利于抗生素生产企业的可持续发展,而且可有效降低菌渣排放引起的抗性传播、保护生态环境。另外,随着我国农业绿色发展理念不断深化,有机肥替代化肥是大势所趋,抗生素菌渣制成有机肥料具有广阔的应用前景。
头孢类抗生素具有抗菌谱广、抗菌活性强、毒性低等特点,其杀菌机制是抑制细菌细胞壁的合成,而人类和其他哺乳动物的细胞无细胞壁,因此对人畜无害,头孢类抗生素是目前使用最为广泛的抗生素药物之一。头孢菌素,包括头孢菌素C(CPC)和去乙酰氧头孢菌素C(DOCPC)是合成头孢类抗生素的重要前驱体,其分子中二氢噻嗪环与β-内酰胺环相连,结构比青霉素更为稳定。其发酵菌种为顶头孢霉菌(Cephalosporium acremonium),发酵培养基包括玉米浆、花生饼粉、糊精、蛋氨酸、豆油、无机盐等。目前,头孢菌素发酵菌渣的处理主要采用高温热水解(温度>150℃,压力>8atm)的方法,不仅能耗高,而且存在安全隐患,本领域需要一种安全高效去除头孢菌素菌渣中残留抗生素的无害化处理技术。
电子束辐照技术是通过电子加速器产生的电子束(Electron beam)对污染物进行处理。电子束辐照是一种独特的高级氧化-还原技术,其作用原理包括高能电子束直接辐射作用、以及电子束激发水分子产生·OH、eaq -、·H等活性粒子的氧化-还原作用。受辐射时,体系会产生化学效应(如有机污染物降解和矿化)和生物学效应(如消毒灭菌),达到同时去除毒性有机物和杀灭微生物的作用效果。电离辐照尤其可有效破坏微生物细胞DNA,杀灭微生物后不复活。电子束辐照这些特殊的性能既可降解菌渣中的抗生素,又可杀灭耐药菌和消除抗性基因污染。电子束辐照降解效率高、适用面广;设备在常温常压下运行,操作简单安全,是一种清洁、可持续利用的技术。而且,电子束辐照可有效保留菌渣中多糖、蛋白质等营养物质不流失,不会影响菌渣的资源化再利用。
好氧堆肥是微生物利用有机质的好氧发酵过程。堆肥过程不需要添加其它的热源,微生物利用堆体中易降解有机物进行生化反应,释放热量,使堆体温度上升,一般达50℃~60℃。堆肥过程将畜禽粪便、菌渣等固体废弃物转化为腐殖质,进一步腐熟为有机肥料。好氧堆肥是一种有效的固体废弃物资源化处理方法。抗生素菌渣好氧堆肥目前面临的主要问题有以下两点:一是菌渣中残留的抗生素对微生物有抑制毒害作用,使堆肥时间延长,抗生素降解缓慢;二是菌渣中存在的抗生素耐药菌会促进抗性基因的增殖,最终堆肥产品的抗生素和耐药菌残留影响其作为肥料资源化利用的安全性。综合上述内容可知,亟待提出一种方法提高头孢菌素发酵菌渣好氧堆肥的效果,使得头孢菌素发酵菌渣残留的抗生素完全去除,并实现有害废物转化为有机肥料的废物利用过程。
发明内容
为了解决上述问题,本发明提出了一种利用电子束辐照提高头孢菌素发酵菌渣好氧堆肥效果的方法,包括以下步骤:
1)对头孢菌素发酵菌渣进行电子束辐照预处理,显著降低菌渣中残留抗生素浓度和抗性基因丰度以及杀灭耐药菌;
2)预处理后的头孢菌素发酵菌渣与固体废弃物混合均匀后,进行好氧堆肥发酵,制成肥料;
电子束辐照过程降低头孢菌素发酵菌渣中耐药菌以及头孢类抗性基因的丰度的同时;抑制并杀灭堆肥过程中抗性基因的增殖。
所述头孢菌素发酵菌渣包括头孢菌素C生产菌渣(CPC生产菌渣)或去乙酰氧头孢菌素C生产菌渣(DOCPC生产菌渣)。所述头孢菌素发酵菌渣的含水率为90%-95%,C/N比值为4.5-5.5,pH值为3.5-4.0,挥发性悬浮固体(VSS)/总悬浮固体(TSS)比值为85%-95%,蛋白质和多糖含量分别为10g/kg-25g/kg和15g/kg-35g/kg。
好氧堆肥过程中曝气量为0.06L/min·kg,曝气频率为5min/h;堆肥时间为25-30天。
堆肥过程保持每天翻堆,至少一次,并检测温度,定期检测DOCPC浓度、有机质、pH值、溶解性有机物等指标。
预处理后的头孢菌素发酵菌渣低温干化至含水率65%-75%。
固体废弃物与预处理后的头孢菌素发酵菌渣的加入量比例为(4~4.5):(6~5.5)
加入固体废弃物混合后,控制混合物中含水率为61%-70%,pH值为6.1-6.8。
所述辐照吸收剂量为1-50kGy,具体的,所述辐照吸收剂量为25kGy或50kGy。
固体废弃物包括动物粪便、农作物副产品或脱水污泥;具体的,包括牛粪、鸡粪或秸秆。
高能电子束由电子加速器产生。
所述电子束辐照过程对温度没有限制,并且电子束辐照降解效率高、适用面广、有效保留菌渣中多糖、蛋白质营养物质不流失;设备在常温常压下运行,操作简单安全。电子束辐照与好氧堆肥结合实现头孢菌素菌渣无害化处置和资源再利用。
堆肥完成后,抗生素被完全降解无法检出,抗性基因丰度显著降低,无耐药菌检出,堆肥产品能直接作为有机肥料安全再利用。
本发明的有益效果在于:
1.电子束辐照预处理头孢菌素发酵菌渣,能提高后续好氧堆肥过程中环境温度的提升,是温度快速达到好氧堆肥的适宜温度,促进好氧堆肥的进程。
2.经过电子束辐照预处理后的头孢菌素发酵菌渣,在进行好氧堆肥处理的过程中,微生物通过利用并降解菌渣混合物中的蛋白类物质和溶解性微生物产物,生成富里酸类物质和腐殖酸类物质,降低堆体腐熟化时间,缩短堆肥时间。
3.电子束辐照过程不仅能降低头孢菌素发酵菌渣中耐药菌以及头孢类抗性基因的丰度;而且,经过电子束辐照预处理操作,能抑制并杀灭,堆肥过程中抗性基因的增殖。
4.本发明处理方法,先经过电子束辐照预处理后,抗生素的去除率为70%-90%;进而通过好氧堆肥能有效降解堆体中的抗生素,实现抗生素的完全去除。
5.经电子束辐照预处理后,通过好氧堆肥得到的头孢菌素发酵菌渣产品,其pH、含水率、有机质、粪大肠菌群数以及蛔虫卵死亡率指标均满足《中华人民共和国农业行业标准》中对于有机肥料的国家标准NY525-2012,其中,粪大肠菌群数量得到显著降低,其含量<3个/g,堆肥产品中无抗生素残留,无耐药菌污染,堆肥后产物能直接作为有机肥料进行应用,表明电子束辐照预处理能有效提高堆肥产品的质量,实现制药行业危险固体废弃物头孢菌素发酵菌渣的无害化处理和资源化利用。
附图说明
图1为实施例1堆肥过程中两个反应器堆体温度变化和抗生素CPC浓度对比;
图2为3D-EEM荧光谱图区域对应的有机物类型;
图3为1号堆体不同反应时间(0d、10d、20d、25d、30d和35d)的3D-EEM谱图(稀释100倍);
图4为2号堆体不同反应时间(0d、5d、10d、15d、20d和25d)的3D-EEM谱图(稀释100倍);
图5为实施例2堆肥过程中两个反应器温度变化和抗生素DOCPC浓度对比。
具体实施方式
以下结合附图和具体实施例对本发明作进一步的详细说明:
实施例1
头孢菌素C发酵菌渣取自新疆某抗生素生产企业,其含水率为90%、C/N比值为4.7、pH值为3.5、挥发性悬浮固体(VSS/总悬浮固体(TSS)比值为94%,蛋白质和多糖含量分别为10g/kg和31g/kg。
对头孢菌素发酵菌渣原始样品-I号和电子束辐照后的堆肥样品-II号分别进行测试。
先用磷酸盐缓冲溶液(PBS)分别提取CPC,采用液相色谱检测。其中,所用液相色谱仪为美国安捷伦公司的高效液相色谱仪(Agilent 1200),色谱柱为XDB-C18反相柱,柱温:30℃。检测器为紫外检测器,检测波长:260nm;流动相为乙腈和0.1%甲酸水溶液,混合比例为10:90。
采用三维荧光光谱(3D-EEM)分析了好氧堆肥过程中堆体溶解性有机物组成和含量的变化。堆肥产品各项指标,包括pH、含水率、有机质、粪大肠菌群数以及蛔虫卵死亡率的检测方法遵照《中华人民共和国农业行业标准》中对于有机肥料的国家标准NY525-2012。
1)将CPC发酵菌渣首先采用电子束辐照处理,具体过程为:
取5kgCPC发酵菌渣放到样品袋中,铺展成薄层,然后用传送带送至电子加速器的辐照室进行辐照,通过控制束流强度和传输速度,改变辐照吸收剂量;分别测定辐照前(即,辐照吸收剂量为0kGy时,)以及辐照吸收剂量分别为:25kGy、50kGy和100kGy时,菌渣中CPC、蛋白质和多糖浓度。
结果表明,头孢菌素发酵菌渣原始样品-I号中检测出CPC浓度为289±35mg/kg,蛋白质和多糖含量分别为10g/kg和31g/kg。经电子束辐照预处理,当吸收剂量为25kGy、50kGy和100kGy时,电子束辐照后的堆肥样品-II号中CPC的浓度降为67.7mg/L、23.2mg/L和12.5mg/L,CPC的去除率为74%、90%和93%。
从上述实验数据能看出:吸收剂量在1-50kGy范围内,CPC的降解速率较快;当辐照剂量大于50kGy后,继续增加辐照吸收剂量,CPC的浓度降低缓慢。吸收剂量控制在50kGy以内电子束辐照的经济性较好。
选取50kGy作为CPC菌渣辐照预处理剂量,并进行后续好氧堆肥处理。在此剂量内,蛋白质和多糖浓度基本保持不变,分别为9.6g/kg和29g/kg。
2)好氧堆肥实验采用2个反应器平行进行,1号反应器的堆肥原料为未辐照过的CPC原始菌渣,2号反应器的堆肥原料为50kGy辐照后的菌渣,低温干化至含水率70%左右,加入鸡粪和秸秆作为调理剂,两个反应器三者的比例均为6:3:1(重量比)。鸡粪的C/N比值为7.5左右,含水率为30%;秸秆的C/N比值为37,含水率为9%。
将上述堆肥原料搅拌混合均匀后开始堆肥。曝气量控制在0.06L/min·kg,曝气频率为5min/h,每天翻堆一次,检测温度,定期检测CPC浓度、有机质、pH值、溶解性有机物等指标。
结论1
电子束辐照预处理头孢菌素发酵菌渣,能提高后续好氧堆肥过程中环境温度的提升,是温度快速达到好氧堆肥的适宜温度,促进好氧堆肥的进程。
堆肥过程中两个反应器中堆体温度变化如附图1所示。头孢菌渣采用电子束辐照预处理的2号反应器,其测量的堆体温度、温度上升速率以及高于55℃天数均大于采用未辐照头孢菌渣直接进行堆肥的1号反应器。
这是由于电子束辐照预处理显著降低了头孢菌素发酵菌渣原始样品中抗生素浓度,使其对好氧堆肥微生物的抑制作用显著减小。采用电子束辐照预处理的2号堆体从第2天开始温度显著增加,第3天就升至55℃,保持在55℃以上的高温天数达7天。而1号堆体由于抗生素的抑制作用,到第7天堆体温度才开始增加,上升较慢,并且1号堆体保持在55℃以上的高温天数较2号堆体减少2天,不利于后续堆体反应进行。
结论2
电子束辐照预处理能显著减小堆体腐熟化时间。三维荧光区域通常可分为4个区域,如附图2所示,区域I、II、III和IV荧光峰分别代表蛋白类物质、溶解性微生物产物(SMP)、富里酸类物质和腐殖酸类物质。
附图3和图4分别为1号和2号堆体不同时间取样的溶解性有机物荧光光谱谱图。图3为1号堆体中反应时间分别为0d、10d、20d、25d、30d和35d的3D-EEM谱图(稀释100倍);图4为2号堆体中反应时间分别为0d、5d、10d、15d、20d和25d的3D-EEM谱图(稀释100倍)。
堆肥开始时检测到两个荧光峰I和II,分别为蛋白类物质和SMP。随着堆肥过程的进行,这两类物质被微生物利用降解,其荧光峰强度逐渐降低,电子束辐照预处理的2号堆体从15天开始出现两个新的荧光峰III和IV,分别代表富里酸和腐殖酸,其中腐殖酸荧光峰的强度较高。随着堆肥时间的继续延长,荧光峰IV的强度不断增加,表明腐殖化程度逐渐增加,到第25天堆体完全腐熟化。而未经电子束辐照预处理的1号堆体,到25天才开始出现腐殖酸类物质荧光峰,且强度较低,时间延长到35天才实现完全腐熟,比2号堆体长10天。
结论3
1号和2号堆体中抗生素CPC浓度随运行时间变化如图1所示。好氧堆肥有效降解堆体中的抗生素CPC。采用电子束辐照预处理使2号堆体的CPC初始浓度显著降低,随着反应时间的增加,CPC浓度不断减小,到第8天可降至液相色谱无法检出。1号堆体的起始CPC浓度较高,堆肥过程中浓度缓慢降低,35天堆肥结束后仍可检出抗生素残留,无法实现安全再利用。
结论4
好氧堆肥结束后两个反应器堆体各项指标的对比如表1所示,可以看出,两个堆体的pH、含水率、有机质、粪大肠菌群数以及蛔虫卵死亡率指标均满足《中华人民共和国农业行业标准》中对于有机肥料的国家标准NY525-2012。2号堆体的有机质含量高于1号堆体,其堆肥产品中粪大肠菌群数小于3个/g,相比1号堆体中粪大肠菌群数量,降低幅度达32倍以上,显著低于1号堆体,表明电子束辐照预处理可有效提高堆肥产品的质量。
表1实施例1好氧堆肥结束后两个反应器堆体各项指标
Figure BDA0003172267760000071
实施例2
DOCPC发酵菌渣取自新疆某抗生素生产企业,其含水率为91%、C/N比为5.4、pH值为3.5-4.0、挥发性悬浮固体(VSS)/总悬浮固体(TSS)比值为87.7%,蛋白质和多糖含量分别为23.2g/kg和19.6g/kg。
1)将所述DOCPC发酵菌渣首先采用电子束辐照处理,其具体过程为:
取5kg左右菌渣放到样品袋中,铺展成薄层状,以扩大辐照面积,使辐照更均匀充分;然后用传送带送至电子加速器的辐照室进行辐照,通过控制束流强度和传输速度得到不同的辐照吸收剂量0、5kGy、10kGy、25kGy和50kGy。分别检测辐照前后菌渣中DOCPC、蛋白质和多糖浓度。
结果表明,初始菌渣中检测出DOCPC浓度较高,为830-920mg/kg。随着电子束辐照吸收剂量的增加,DOCPC浓度先快速降低,到25kGy以后下降速度趋于平缓。吸收剂量为5kGy、10kGy、25kGy和50kGy时,DOCPC的去除率分别为36.8%、46.1%、86.0%和97.7%。吸收剂量控制在25kGy以内电子束辐照的经济性较好,在下面的堆肥实验中,选取25kGy作为DOCPC菌渣辐照预处理剂量。在此剂量内,蛋白质和多糖浓度基本保持不变,分别为9.6g/kg和29g/kg。
2)好氧堆肥实验采用2个反应器平行进行,1号反应器的堆肥原料为未辐照过的DOCPC原始菌渣,2号反应器的堆肥原料为25kGy辐照后的DOCPC菌渣,分别低温干化至含水率70%左右,加入鸡粪和秸秆作为调理剂,两个反应器三者的比例均为5.5:3.5:1(重量比)。鸡粪的C/N比值为7.5左右,含水率为30%;秸秆的C/N比值为37,含水率为9%。
将上述堆肥原料搅拌混合均匀后开始堆肥。曝气量控制在0.06L/min·kg,曝气频率为5min/h,每天翻堆一次,检测温度,定期检测DOCPC浓度、有机质、pH值、溶解性有机物等指标。检测初始菌渣、辐照25kGy后以及好氧堆肥前后两个堆体中头孢类抗性基因cphA丰度(copies/kg)和头孢菌素耐药菌丰度(CFU/kg)。
菌渣和堆肥样品中残留的DOCPC先用PBS提取,再采用液相色谱检测。其中,所用液相色谱仪为美国安捷伦公司的高效液相色谱仪(Agilent 1200),色谱柱为XDB-C18反相柱,柱温:30℃。检测器为紫外检测器,检测波长:260nm;流动相为乙腈和0.1%甲酸水溶液,混合比例为10:90。
采用荧光定量PCR分析头孢类抗性基因cphA丰度。具体地,采用GENEray DNA提取DNA,所用电泳仪为美国Major Science公司的Mini Pro 300V电泳仪。所用PCR仪为美国Applied Biosystems公司的ABI7500实时荧光定量PCR仪。PCR反应程序为预变性95℃3min;变性95℃30s,退火延伸60℃34s,72℃40s,循环次数35。所用引物探针序列如下(5’–3’):F:GCGAGCTGCACAAGCTGAT,R:CGGCCCAGTCGCTCTTC,序列长度为168bp。
DOCPC耐药菌的丰度采用平板计数法,LB培养基,加入DOCPC浓度为100μg/L。培养温度35℃,培养时间48h。
结论1
堆肥过程中两个反应器中堆体温度变化如附图5所示。头孢菌渣采用电子束辐照预处理后的2号反应器,其堆体温度上升的速率以及高于55℃天数均高于采用未辐照头孢菌渣直接进行堆肥的1号反应器,堆肥产品腐熟时间较小于1号反应器显著缩短。电子束辐照预处理显著降低了菌渣中抗生素浓度,使其对好氧堆肥微生物的抑制作用显著降低。2号反应器堆体腐熟化需要的时间为25d,而1号反应器为35d,较2号反应器长10d;2号堆体第2天温度开始迅速升高,温度大于55℃的高温天数可达7天;而1号堆体由于抗生素的抑制作用,到第8天温度开始升高,温度大于55℃的高温天数仅为4天,比1号堆体少3天。
结论2
1号和2号堆体中抗生素DOCPC浓度随运行时间变化如图3所示。好氧堆肥可有效降解堆体中的抗生素DOCPC。随着反应时间的增加,DOCPC浓度不断减小。采用电子束辐照预处理菌渣的2号堆体,其中DOCPC的浓度第10天可降至液相色谱无法检出。采用未辐照预处理菌渣的1号堆体,其中DOCPC浓度降低缓慢,到堆肥结束仍能检出4.5mg/kg的抗生素残留。
结论3
初始DOCPC菌渣中检测出cphA头孢类抗性基因,其平均丰度为5.1×103copies/mL,检出的耐药菌丰度1.9×106CFU/mL。电子束辐照吸收剂量为25kGy,cphA基因丰度降为2.3×103copies/mL,去除率为57%。耐药菌全部失活,无法检出。
1号堆体在第0天检出的cphA丰度为4.5×103copies/g,DOCPC耐药菌丰度为1.0×106CFU/mL。到第35天堆肥结束后检测出的cphA丰度为5.8×103copies/g,没有降低反而增加了29%。而且,堆体中依然可以检出耐药菌,丰度为1.5×104CFU/mL。
而电子束辐照预处理后2号反应器,在第0天和第25天检测出的cphA丰度为2.1×103copies/g和1.0×103copies/g,进一步下降了52%,这表明电子束辐照预处理杀灭耐药菌后能有效抑制堆肥过程中抗性基因的增殖。堆肥结束后堆体中没有检出耐药菌。
结论4
好氧堆肥结束后两个反应器堆体各项指标的对比如表2所示,两个堆体的pH、含水率、有机质、粪大肠菌群数以及蛔虫卵死亡率指标均满足《中华人民共和国农业行业标准》中对于有机肥料的国家标准NY525-2012。2号堆体的有机质含量高于1号堆体,其粪大肠菌群数低于1号堆体。表明电子束辐照预处理可有效提高堆肥产品的质量。
表2实施例2好氧堆肥结束后两个反应器各项指标
Figure BDA0003172267760000091

Claims (9)

1.一种利用电子束辐照提高头孢菌素发酵菌渣好氧堆肥效果的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)对头孢菌素发酵菌渣进行电子束辐照预处理;
2)预处理后的头孢菌素发酵菌渣与固体废弃物混合,混合均匀后,进行好氧堆肥发酵,制成肥料;
电子束辐照过程降低头孢菌素发酵菌渣中耐药菌以及头孢类抗性基因的丰度的同时;抑制并杀灭堆肥过程中抗性基因的增殖。
2.根据权利要求1所述一种利用电子束辐照提高头孢菌素发酵菌渣好氧堆肥效果的方法,其特征在于,所述头孢菌素发酵菌渣包括头孢菌素C生产菌渣或去乙酰氧头孢菌素C生产菌渣。
3.根据权利要求1所述一种利用电子束辐照提高头孢菌素发酵菌渣好氧堆肥效果的方法,其特征在于,好氧堆肥过程中曝气量为0.06L/min·kg,曝气频率为5min/h;堆肥时间为25-30天。
4.根据权利要求1所述一种利用电子束辐照提高头孢菌素发酵菌渣好氧堆肥效果的方法,其特征在于,预处理后的头孢菌素发酵菌渣低温干化至含水率65%-75%。
5.根据权利要求1所述一种利用电子束辐照提高头孢菌素发酵菌渣好氧堆肥效果的方法,其特征在于,固体废弃物与预处理后的头孢菌素发酵菌渣的加入量比例为(4~4.5):(6~5.5)。
6.根据权利要求1所述一种利用电子束辐照提高头孢菌素发酵菌渣好氧堆肥效果的方法,其特征在于,加入固体废弃物混合后,控制混合物中含水率为61-70%,pH值为6.1-6.8。
7.根据权利要求1所述一种利用电子束辐照提高头孢菌素发酵菌渣好氧堆肥效果的方法,其特征在于,所述辐照吸收剂量为1-50kGy,具体的,所述辐照吸收剂量为25kGy或50kGy。
8.根据权利要求1所述一种利用电子束辐照提高头孢菌素发酵菌渣好氧堆肥效果的方法,其特征在于,固体废弃物包括动物粪便、农作物副产品或脱水污泥;具体的,包括牛粪、鸡粪或秸秆。
9.根据权利要求1所述一种利用电子束辐照提高头孢菌素发酵菌渣好氧堆肥效果的方法,其特征在于,所述电子束由电子加速器产生。
CN202110822078.1A 2021-07-21 2021-07-21 一种利用电子束辐照提高头孢菌素发酵菌渣好氧堆肥效果的方法 Active CN113354490B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110822078.1A CN113354490B (zh) 2021-07-21 2021-07-21 一种利用电子束辐照提高头孢菌素发酵菌渣好氧堆肥效果的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110822078.1A CN113354490B (zh) 2021-07-21 2021-07-21 一种利用电子束辐照提高头孢菌素发酵菌渣好氧堆肥效果的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113354490A true CN113354490A (zh) 2021-09-07
CN113354490B CN113354490B (zh) 2022-10-04

Family

ID=77540035

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110822078.1A Active CN113354490B (zh) 2021-07-21 2021-07-21 一种利用电子束辐照提高头孢菌素发酵菌渣好氧堆肥效果的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN113354490B (zh)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114315441A (zh) * 2022-01-18 2022-04-12 哈尔滨工业大学 一种好氧堆肥中抗生素抗性基因强化去除方法
CN114436685A (zh) * 2022-02-24 2022-05-06 上海众择生物科技有限公司 降低湿垃圾生物转化过程中抗生素抗性基因丰度的方法
CN115197009A (zh) * 2022-06-15 2022-10-18 上海农乐生物制品股份有限公司 一种生物有机肥及其制备方法和用途
CN115626856A (zh) * 2022-10-27 2023-01-20 元碳环保科技(山东)有限公司 一种基于高能电子束辐照技术的秸秆基保水缓释肥料的制备方法

Citations (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20020106784A1 (en) * 1998-02-26 2002-08-08 Riccardo Reverso Method and apparatus for the biological conversion of organic waste into humic products
CN101704610A (zh) * 2009-11-03 2010-05-12 上海大学 一种经电子束辐照后处理医药中间体废水—左旋—苯甘氨酸废水的方法
CN102180713A (zh) * 2011-03-07 2011-09-14 李永亮 利用7-aca发酵药渣生产绿色有机钾专用肥的方法
CN102488997A (zh) * 2011-12-09 2012-06-13 天津市裕川环境科技有限公司 一种碱解工艺处理头孢菌素c发酵生产残渣的方法
CN103146761A (zh) * 2013-03-22 2013-06-12 华北制药集团环境保护研究所 头孢菌素菌渣的处理方法
CN103482733A (zh) * 2013-08-27 2014-01-01 清华大学 一种利用电离辐射技术去除水中磺胺类抗生素的方法
CN104560816A (zh) * 2014-12-16 2015-04-29 大地绿源环保科技(北京)有限公司 一种具有生物质水解酶活性的地衣芽孢杆菌及其应用
CN108046370A (zh) * 2017-12-13 2018-05-18 清华大学 采用电离辐照去除抗生素抗性基因的方法
CN108164292A (zh) * 2017-12-25 2018-06-15 伊犁川宁生物技术有限公司 一种利用抗生素菌渣制备有机肥的方法
CN207681162U (zh) * 2017-12-01 2018-08-03 焦作健康元生物制品有限公司 一种头孢菌素发酵菌渣无害处理装置
CN108500034A (zh) * 2018-03-27 2018-09-07 中广核达胜加速器技术有限公司 一种抗生素菌渣处理工艺
CN109678612A (zh) * 2019-02-26 2019-04-26 焦作健康元生物制品有限公司 一种头孢菌素菌渣制备有机肥的方法
CN110981563A (zh) * 2019-12-11 2020-04-10 同济大学 一种抗生素菌渣的处理方法及其应用
CN111115745A (zh) * 2019-11-21 2020-05-08 清华大学 一种电离辐照降解水中有机污染物的方法
US20200221739A1 (en) * 2016-03-28 2020-07-16 The King Abdulaziz City For Science And Technology Method for removal of antibiotic residues from food products
CN112759157A (zh) * 2021-01-05 2021-05-07 清华大学 电离辐射协同臭氧催化去除废水中抗生素的方法

Patent Citations (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20020106784A1 (en) * 1998-02-26 2002-08-08 Riccardo Reverso Method and apparatus for the biological conversion of organic waste into humic products
CN101704610A (zh) * 2009-11-03 2010-05-12 上海大学 一种经电子束辐照后处理医药中间体废水—左旋—苯甘氨酸废水的方法
CN102180713A (zh) * 2011-03-07 2011-09-14 李永亮 利用7-aca发酵药渣生产绿色有机钾专用肥的方法
CN102488997A (zh) * 2011-12-09 2012-06-13 天津市裕川环境科技有限公司 一种碱解工艺处理头孢菌素c发酵生产残渣的方法
CN103146761A (zh) * 2013-03-22 2013-06-12 华北制药集团环境保护研究所 头孢菌素菌渣的处理方法
CN103482733A (zh) * 2013-08-27 2014-01-01 清华大学 一种利用电离辐射技术去除水中磺胺类抗生素的方法
CN104560816A (zh) * 2014-12-16 2015-04-29 大地绿源环保科技(北京)有限公司 一种具有生物质水解酶活性的地衣芽孢杆菌及其应用
US20200221739A1 (en) * 2016-03-28 2020-07-16 The King Abdulaziz City For Science And Technology Method for removal of antibiotic residues from food products
CN207681162U (zh) * 2017-12-01 2018-08-03 焦作健康元生物制品有限公司 一种头孢菌素发酵菌渣无害处理装置
CN108046370A (zh) * 2017-12-13 2018-05-18 清华大学 采用电离辐照去除抗生素抗性基因的方法
CN108164292A (zh) * 2017-12-25 2018-06-15 伊犁川宁生物技术有限公司 一种利用抗生素菌渣制备有机肥的方法
CN108500034A (zh) * 2018-03-27 2018-09-07 中广核达胜加速器技术有限公司 一种抗生素菌渣处理工艺
CN109678612A (zh) * 2019-02-26 2019-04-26 焦作健康元生物制品有限公司 一种头孢菌素菌渣制备有机肥的方法
CN111115745A (zh) * 2019-11-21 2020-05-08 清华大学 一种电离辐照降解水中有机污染物的方法
CN110981563A (zh) * 2019-12-11 2020-04-10 同济大学 一种抗生素菌渣的处理方法及其应用
CN112759157A (zh) * 2021-01-05 2021-05-07 清华大学 电离辐射协同臭氧催化去除废水中抗生素的方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
LIBING CHU等: ""Degradation of antibiotics and inactivation of antibiotic resistance genes (ARGs) in Cephalosporin C fermentation residues using ionizing radiation,ozonation and thermal treatment"", 《JOURNAL OF HAZARDOUS MATERIALS》 *
曹志会: ""典型抗生素菌渣无害化堆肥及生物安全评价研究"", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库》 *
陈丹: ""电离辐照去除水体及抗生素发酵菌渣中抗生素的研究"", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114315441A (zh) * 2022-01-18 2022-04-12 哈尔滨工业大学 一种好氧堆肥中抗生素抗性基因强化去除方法
CN114436685A (zh) * 2022-02-24 2022-05-06 上海众择生物科技有限公司 降低湿垃圾生物转化过程中抗生素抗性基因丰度的方法
CN115197009A (zh) * 2022-06-15 2022-10-18 上海农乐生物制品股份有限公司 一种生物有机肥及其制备方法和用途
CN115626856A (zh) * 2022-10-27 2023-01-20 元碳环保科技(山东)有限公司 一种基于高能电子束辐照技术的秸秆基保水缓释肥料的制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN113354490B (zh) 2022-10-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN113354490B (zh) 一种利用电子束辐照提高头孢菌素发酵菌渣好氧堆肥效果的方法
Awasthi et al. Effect of biochar and bacterial inoculum additions on cow dung composting
Ezzariai et al. Human and veterinary antibiotics during composting of sludge or manure: Global perspectives on persistence, degradation, and resistance genes
Greff et al. Influence of microbial inoculants on co-composting of lignocellulosic crop residues with farm animal manure: A review
Awasthi et al. Co-composting of gelatin industry sludge combined with organic fraction of municipal solid waste and poultry waste employing zeolite mixed with enriched nitrifying bacterial consortium
Zhang et al. Oxytetracycline stress reconstruct the core microbial community related to nitrogen transformation during composting
Awasthi et al. Beneficial effect of mixture of additives amendment on enzymatic activities, organic matter degradation and humification during biosolids co-composting
CN101983952B (zh) 利用城市生活污泥生产有机肥的方法
CN101182247A (zh) 病死畜禽无害化处理和利用的新方法
Wang et al. Effect of distillery sewage sludge addition on performance and bacterial community dynamics during distilled grain waste composting
CN104672035A (zh) 一种生态氮肥及制备方法
CN1468203A (zh) 处理含氨有机废物的方法
KR100779757B1 (ko) 방사선조사기술을 이용한 축산분뇨에 함유된 항생물질,악취유발성물질과 병원성 미생물의 저감 및 이를 이용한부산물비료 제조방법
Qiu et al. Effects of conditioners on sulfonamides degradation during the aerobic composting of animal manures
CN1091753C (zh) 对城市人粪便进行处理和利用的一种方法
Xu et al. Mechanisms and effects of novel ammonifying microorganisms on nitrogen ammonification in cow manure waste composting
KR100753628B1 (ko) 유기성 슬러지 퇴비화 방법
Xu et al. Biodrying of biogas residue: Maturity and microbial diversity assessment
CN112934932B (zh) 一种抗生素菌渣无害化处理方法
KR101791565B1 (ko) 방사선을 이용한 축산액비 제조방법
Amanullah Nutrient release pattern during composting poultry manure
CN104108842A (zh) 一种外源化学品污染禽粪的处理方法
CN114317323A (zh) 一种快速降解餐厨垃圾有机质的微生物菌剂
Zhou et al. Introduction: Trends in composting and vermicomposting technologies
CN112679236A (zh) 一种利用地龙制造有机肥的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant