CN113336799B

CN113336799B - 一种含双氰基铱配合物及其制备方法和应用

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Publication number: CN113336799B
Application number: CN202110602755.9A
Authority: CN
Inventors: 吴勇权; 吴洁; 郭维; 李亿保; 范小林
Original assignee: Gannan Normal University
Current assignee: Gannan Normal University
Priority date: 2021-05-31
Filing date: 2021-05-31
Publication date: 2022-04-12
Anticipated expiration: 2041-05-31
Also published as: CN113336799A

Abstract

本发明提供了一种含双氰基铱配合物及其制备方法和应用，属于光敏剂技术领域。本发明基于金属铱配合物因其中心铱原子是重原子，通过在N^N配体中引入双氰基结构调控金属铱配合物的长寿命的三重态激发态，有利于诱导产生活性氧物种(如单线态氧和羟基自由基)，增加了金属铱配合物产生活性氧的能力；在光照条件下，所述含双氰基铱配合物在溶液与肿瘤细胞中均能产生单线态氧与羟基自由基等活性氧物种，并且具有光动力杀伤肿瘤癌细胞的能力，为构建含双氰基的铱配合物用于光动力学治疗提供了可能。

Description

一种含双氰基铱配合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及光动力治疗技术领域，尤其涉及一种含双氰基铱配合物及其制备方法和应用。

背景技术

金属铱配合物依赖于金属中心和配体使得其被激发，铱配合物中强烈的自旋轨道耦合导致了单线态三态混合，这使得其具有优异的光物理性质，包括良好的光稳定性、高量子产率、大的斯托克斯位移和长寿命。近年来，金属铱配合物因其中心铱原子是重原子，具有长寿命的三重态激发态，有利于其与氧气充分接触产生¹O₂，铱配合物的光动力学效应在光动力学治疗领域潜在的应用价值引起了人们的广泛关注。

兼具单线态氧与羟基自由基活性氧物种的产生能力的光敏剂，将极大的提高光动力学治疗效果。近年来，金属铱配合物因其中心铱原子是重原子，具有长寿命的三重态激发态，有利于其与氧气充分接触产生¹O₂，铱配合物的光动力学效应在光动力学治疗领域潜在的应用价值引起了人们的广泛关注。然而，目前用于光动力学治疗的光敏剂产生¹O₂的能力较低。

发明内容

本发明的目的在于提供一种含双氰基铱配合物及其制备方法和应用，所述含双氰基铱配合物产生¹O₂的能力强。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种含双氰基铱配合物，具有式I所示结构：

本发明提供了上述技术方案所述含双氰基铱配合物的制备方法，包括以下步骤：

将2-氯异喹啉、苯并噻吩-2-硼酸、碳酸钾、四(三苯基膦)钯和第一溶剂混合，进行偶联反应，得到式II所示结构的配体；

将所述式II所示结构的配体、三水合三氯化铱和第二溶剂混合，进行第一配位反应，得到式III所示结构的配体；

将所述式III所示结构的配体、4,4'-二氰基-2,2'-联吡啶和第三溶剂混合，进行第二配位反应，将所得含氯离子的铱配合物与六氟磷酸钾混合，进行离子交换反应，得到式I所示结构的含双氰基铱配合物；

优选的，所述2-氯异喹啉、苯并噻吩-2-硼酸、碳酸钾、四(三苯基膦)钯和第一溶剂的用量比为163.6mg:195.8mg:414.6mg:92.4mg:20mL。

优选的，所述偶联反应的温度为75℃，时间为24h；所述偶联反应在氮气保护气氛下进行。

优选的，所述式II所示结构的配体、三水合三氯化铱和第二溶剂混合的用量比为182.9mg:105.8mg:40mL；

所述第一配位反应的温度为110℃，时间为24h。

优选的，所述式III所示结构的配体、4,4'-二氰基-2,2'-联吡啶和第三溶剂的用量比为101.6mg:43.3mg:60mL。

优选的，所述第二配位反应的温度为70℃，时间为24h；所述第二配位反应在氮气保护气氛下进行。

优选的，所述六氟磷酸钾与含氯离子的铱配合物的摩尔比为(5～10):1。

优选的，所述离子交换反应的温度为室温，时间为2～4h。

本发明提供上述技术方案所述含双氰基铱配合物或上述技术方案所述制备方法制备得到的含双氰基铱配合物在制备光动力治疗光敏剂中的应用。

本发明提供了一种含双氰基铱配合物，具有式I所示结构：

本发明基于金属铱配合物因其中心铱原子是重原子，通过在N^N配体中引入双氰基结构调控金属铱配合物的长寿命三重激发态，能够提高铱配合物的单重态能级到三重态能级系间穿越能力，从而有利于诱导产生活性氧物种(如单线态氧和羟基自由基等)，增加了金属铱配合物产生活性氧的能力；在光照条件下，所述含双氰基铱配合物在溶液与肿瘤细胞中均能产生单线态氧与羟基自由基等活性氧物种，并且具有光动力杀伤肿瘤癌细胞的能力，为构建含双氰基的铱配合物用于光动力学治疗提供了可能。

本发明提供的铱配合物合成步骤简单。

附图说明

图1为实施例1制备的含双氰基铱配合物加DCFH-DA在不同光照时间下的发射光谱图；

图2为实施例1制备的含双氰基铱配合物测试光照下产生ROS的空白对照组谱图；

图3为实施例1制备的含双氰基铱配合物在不同条件下EPR测试单线态氧谱图；

图4为实施例1制备的含双氰基铱配合物在不同条件下EPR测试羟基自由基谱图；

图5为实施例1制备的含双氰基铱配合物加DCFH-DA试剂盒以及空白对照组和抑制对照组检测MCF-7细胞内ROS量的荧光成像图；

图6为实施例1制备的含双氰基铱配合物加Annexin V-FITC-PI试剂盒检测不同光照时间下MCF-7细胞活性的荧光成像图。

具体实施方式

本发明提供了一种含双氰基铱配合物，具有式I所示结构：

本发明提供的所述含双氰基铱配合物的化学式为[(btpq)₂-Ir-bpy-2CN)][PF₆]。

在本发明中，若无特殊说明，所需制备原料均为本领域技术人员熟知的市售商品。

本发明将2-氯异喹啉、苯并噻吩-2-硼酸、碳酸钾、四(三苯基膦)钯和第一溶剂混合，进行偶联反应，得到式II所示结构的配体。在本发明中，所述第一溶剂优选为四氢呋喃和水的混合溶剂；所述四氢呋喃和水的体积比优选为1:1。

在本发明中，所述2-氯异喹啉、苯并噻吩-2-硼酸、碳酸钾、四(三苯基膦)钯和第一溶剂的用量比优选为163.6mg:195.8mg:414.6mg:92.4mg:20mL。本发明对所述2-氯异喹啉、苯并噻吩-2-硼酸、碳酸钾、四(三苯基膦)钯(Pd(PPh₃)₄)和第一溶剂混合的过程没有特殊的限定，按照本领域熟知的过程能够将物料混合均匀即可。本发明利用碳酸钾提供碱性条件，利用四(三苯基膦)钯作为偶联反应的催化剂。

在本发明中，所述偶联反应的温度优选为75℃，时间优选为24h；所述偶联反应优选在氮气保护气氛及搅拌条件下进行；本发明对所述搅拌的过程没有特殊的限定，按照本领域熟知的过程能够保证反应顺利进行即可。在所述偶联反应过程中，通过苯并噻吩-2-硼酸和2-氯异喹啉发生碳碳偶联反应合成如式II所示的结构的铱配合物。

完成所述偶联反应后，本发明优选将所得物料自然冷却至室温，将所得混合物依次进行萃取、反萃取、干燥和纯化，得到式II所示结构的铱配合物。在本发明中，所述萃取所用试剂优选为CH₂Cl₂，所述萃取的次数优选为3次，所述反萃取所用试剂优选为水。完成所述萃取后，本发明优选将收集所得有机相用无水Na₂SO₄干燥并蒸发至干。在本发明中，所述纯化的方法优选为柱层析法，所述纯化所用洗脱剂优选为CH₂Cl₂和石油醚；所述CH₂Cl₂和石油醚的体积比优选为1:1。

得到式II所示结构的配体后，本发明将所述式II所示结构的配体、三水合三氯化铱和第二溶剂混合，进行第一配位反应，得到式III所示结构的配体。在本发明中，所述第二溶剂优选为乙二醇乙醚和水的混合溶剂，所述乙二醇乙醚和水的体积比优选为3:1。

在本发明中，所述式II所示结构的配体、三水合三氯化铱和第二溶剂的用量比优选为182.9mg:105.8mg:40mL；本发明对所述式II所示结构的配体、三水合三氯化铱和第二溶剂混合的过程没有特殊的限定，按照本领域熟知的过程能够将物料混合均匀即可。

在本发明中，所述第一配位反应的温度优选为110℃，时间优选为24h；所述第一配位反应优选在氮气保护及回流条件下进行；本发明对所述回流的过程没有特殊的限定，按照本领域熟知的过程进行即可。在所述第一配位反应过程中，式II所示结构的配体通过碳氮与三水合三氯化铱中的金属铱离子进行配位反应，形成含有氯桥键的式III所示的结构的铱配合物。

完成所述第一配位反应后，本发明优选将所得含有红褐色沉淀的物料依次进行减压抽滤和洗涤，得到式III所示结构的配体；本发明对所述减压抽滤的过程没有特殊的限定，按照本领域熟知的过程进行即可；所述洗涤的过程优选为依次用水和乙醇各洗涤3次。

得到式III所示结构的配体后，本发明将所述式III所示结构的配体、4,4'-二氰基-2,2'-联吡啶和第三溶剂混合，进行第二配位反应，将所得含氯离子的铱配合物与六氟磷酸钾混合，进行离子交换反应，得到式I所示结构的含双氰基铱配合物。在本发明中，所述第三溶剂优选为CH₃OH和CH₂Cl₂的混合溶剂，所述CH₃OH和CH₂Cl₂的体积比优选为1:1。本发明对所述式III所示结构的配体、4,4'-二氰基-2,2'-联吡啶和第三溶剂混合的过程没有特殊的限定，按照本领域熟知的过程能够将物料混合均匀即可。

在本发明中，所述式III所示结构的配体、4,4'-二氰基-2,2'-联吡啶和第三溶剂的用量比优选为101.6mg:43.3mg:60mL。

在本发明中，所述第二配位反应的温度优选为70℃，时间优选为24h；所述第二配位反应在氮气保护气氛和冷凝回流条件下进行；本发明对所述冷凝回流的过程没有特殊的限定，按照本领域熟知的过程进行即可。在所述第二配位反应过程中，4,4'-二氰基-2,2'-联吡啶与式III所示结构的配体中的金属铱离子通过氮氮配位，形成含氯离子的铱配合物。

完成所述第二配位反应后，本发明向所得产物中加入六氟磷酸钾，进行离子交换反应，得到式I所示结构的含双氰基铱配合物。在本发明中，所述六氟磷酸钾与含氯离子的铱配合物的摩尔比优选为(5～10):1，更优选为(6～8):1。在本发明中，所述离子交换反应优选在室温及搅拌条件下进行，所述离子交换反应的时间优选为2～4h；本发明对所述搅拌的速率没有特殊的限定，按照本领域熟知的过程能够保证反应顺利进行即可。在所述离子交换过程中，六氟磷酸根离子作为阴离子抗衡离子，六氟磷酸根取代含氯离子的铱配合物中的氯离子得到式I所示结构的含双氰基铱配合物。

完成所述配位后，本发明优选将所得物料进行减压抽滤，收集滤液后，柱层析分离，得到式I所示结构的含双氰基铱配合物。本发明对所述减压抽滤和收集滤液的过程没有特殊的限定，按照本领域熟知的过程进行即可。在本发明中，所述柱层析分离所用试剂优选为二氯甲烷和甲醇的混合物，所述二氯甲烷和甲醇的体积比优选为20:1。

本发明提供上述技术方案所述含双氰基铱配合物或上述技术方案所述制备方法制备得到的含双氰基铱配合物在制备光动力治疗光敏剂中的应用。本发明对所述应用的方法没有特殊的限定，按照本领域熟知的方法应用即可。

下面将结合本发明中的实施例，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

含双氰基铱配合物[(btpq)₂-Ir-bpy-2CN)][PF₆]的合成：

称取163.6mg 2-氯异喹啉、195.8mg苯并噻吩-2-硼酸、414.6mg的碳酸钾和92.4mg的Pd(PPh₃)₄溶解在10mLTHF和10mL水的混合溶剂中，在氮气保护条件下搅拌加热至75℃反应24h；反应结束后将所得物料冷却至室温，将所得混合物用CH₂Cl₂萃取3次后，用水反萃取，收集有机相，用无水硫酸钠干燥并蒸发至干，将所得粗产物以CH₂Cl₂/石油醚(1:1，v/v)作为洗脱剂进行纯化，得到式II所示结构的配体(btpq)；

将182.9mg所述式II所示结构的配体和105.8mg三水合三氯化铱加入到30mL乙二醇乙醚和10mL水混合溶剂中，将所得混合物在氮气保护条件下110℃回流24h，将反应所得红褐色沉淀减压抽滤，将所得固体依次用水和乙醇洗涤3次，得到式III所示结构的配体；

称取101.6mg式III所示结构的配体和43.3mg 4,4'-二氰基-2,2'-联吡啶溶于30mL CH₃OH和30mL CH₂Cl₂的混合溶剂中，在氮气保护70℃冷凝回流反应24h，向所得含氯离子的铱配合物体系中加入0.8mmol六氟磷酸钾，室温下搅拌2h，减压抽滤收集滤液，进行柱层析分离，得到式I所示结构的含双氰基铱配合物[(btpq)₂-Ir-bpy-2CN)][PF₆]。

表征

1)对实施例1制备的式II所示结构的配体进行核磁表征，所得核磁数据为：核磁表征数据：¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.16(t,J＝7.6Hz,2H),7.96(s,1H),7.91(dd,J＝8.8,6.1Hz,2H),7.86-7.82(m,1H),7.79(d,J＝8.0Hz,1H),7.73(dd,J＝11.3,4.2Hz,1H),7.52(t,J＝7.5Hz,1H),7.38(dd,J＝6.0,3.1Hz,2H)；质谱表征数据：HRMS(ESI)C17H11NS+[M+H]+calcd:262.0685,found:262.0694.

对实施例1制备的式I所示结构的含双氰基铱配合物进行核磁和质谱表征，所得核磁数据为¹HNMR(400MHz,MeOD)δ8.78(s,2H),8.70(d,J＝5.8Hz,2H),8.45(d,J＝8.6Hz,2H),8.11(d,J＝8.6Hz,2H),8.05(dd,J＝5.8,1.6Hz,2H),7.88(d,J＝8.1Hz,2H),7.84(d,J＝7.1Hz,2H),7.37-7.32(m,2H),7.18-7.10(m,2H),7.02(ddd,J＝8.3,6.8,1.4Hz,2H),6.96(d,J＝8.7Hz,2H),6.65-6.56(m,2H),6.28(d,J＝8.2Hz,2H).HRMS(ESI)C46H26N6S2Ir+[M]+calcd:984.17177,found:919.12838；质谱数据：HRMS(ESI)C₆₆H₄₂N₆S₃Ir⁺[M]⁺calcd:1207.2258,found:1207.2265.

测试例1

实施例1制备的含双氰基铱配合物在溶液中活性氧产生能力测试：

a)将实施例1制备的含双氰基铱配合物溶解于二甲基亚砜(DMSO)中，得到2mM的母液；

b)称取2.44mg DCFH-DA(2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐)加入5mL无水乙醇，配制成1mM DCFH-DA溶液，低温避光保存；取0.5mL 1mM DCFH-DA溶液加入2mL 10mM氢氧化钠水溶液均匀混匀后，避光室温保存30min，得到活化后的DCFH-DA/NaOH混合液；将所述活化后的DC FH-DA/NaOH混合液加入到10mL 25mM PBS溶液(pH 7.4)中和水解产物，得到40μM DCFH溶液；

c)向2mL 40μM的DCFH溶液中移入步骤a)中10μL 2mM实施例1制备的含双氰基铱配合物母液，用大于470nm波长的太阳能模拟器光照样品，每隔5s测试一次DCFH的产物DCF的发射，DCF以488nm激发，在0～120s时间范围内，收集490～610nm的发射光谱，所得结果如图1所示；由图1可知，在含双氰基铱配合物存在时，随着光照时间的增加，D CF的荧光强度明显上升，说明铱配合物[(btpq)₂-Ir-bpy-2CN)][PF₆]在光照下产生了活性氧，进一步说明了该配合物具有光动力学作用。

d)将步骤c)中的[(btpq)₂-Ir-bpy-2CN)][PF₆]替换成DMSO重复步骤c)，作为空白对照试验，所得结果如图2所示，由图2可知，在没有加入实施例1制备的含双氰基铱配合物的时候，荧光强度没有明显上升，说明实施例1制备的含双氰基铱配合物具有光动力学作用。

测试例2

实施例1制备的含双氰基铱配合物用电子顺磁共振法(EPR)测试单线态氧产生能力的方法：

a)在室温条件下CH₃CN与H₂O体积比为1:1的溶剂中进行，以TEMP(2,2,6,6-四甲基哌啶)为指示剂。

b)向3mL 20μM的含双氰基铱配合物的混合溶液(CH₃CN:H₂O＝1:1，v/v)中移入100μLTEMP水溶液(100μM)，黑暗条件下在电子顺磁共振仪上，观测其变化，所得结果如图3所示；

c)向3mL 20μM的含双氰基铱配合物的混合溶液(CH₃CN：H₂O＝1：1v/v)中移入100μLTEMP，用470nm-800nm的复合光照射3min，在电子顺磁共振仪上，观测其变化，所得结果如图3所示；由图3可知，光照3min时可以观察到在EPR谱中出现了TEMPO的三重峰信号，而未经光照时(即黑暗条件)检测不到信号，这表明光照条件下实施例1制备的含双氰基铱配合物能诱导产生¹O₂。

测试例3

实施例1制备的含双氰基铱配合物用电子顺磁共振法(EPR)测试羟基自由基产生能力的方法：

a)在室温条件下CH₃CN溶剂中进行，以DMPO(5,5-二甲基-1-吡咯啉-N-氧化物)为指示剂。

b)向3mL 20μM的含双氰基铱配合物的混合溶液(溶剂为CH₃CN)中移入100μLDMPO，黑暗条件下在电子顺磁共振仪上，观测其变化，所得结果如图4所示；

c)向3mL 20μM的含双氰基铱配合物的混合溶液(溶剂为CH₃CN)中移入100μLDMPO，用470nm～800nm的复合光照射3min，在电子顺磁共振仪上，观测其变化，所得结果如图4所示；由图4可知，光照3min时可以观察到在EPR谱中出现了信号强度为1:2:2:1的DMPO-OH的特征四重峰信号，而未经光照时(及黑暗条件)检测不到信号，这表明光照条件下实施例1制备的含双氰基配合物能诱导产生·OH。

测试例4

实施例1制备的含双氰基铱配合物在肿瘤细胞中活性氧产生能力测试步骤如下：

a)将MCF-7(乳腺癌细胞)与10μM(DMSO/H₂O＝1/99，体积比)的含双氰基铱配合物共同孵育2h，随后用PBS洗涤三次，得到复合有含双氰基铱配合物的细胞；

b)将所述复合有含双氰基铱配合物的细胞与2μM的活性氧检测试剂盒DCFH-DA共同孵育30min；

c)将孵育后的样品用太阳能模拟器氙灯(大于470nm)照射3min，使用共聚焦激光扫描显微镜进行共聚焦荧光成像，激发通道为488nm，收集通道为505～525nm，所得结果见图5中(D)、(E)和(F)_(DCFH-DA+(btpq)₂-Ir-bpy-2CN)组)；其中，(D)代表叠加场条件下的对比图，(E)代表荧光场条件下的成像图，(F)代表明场条件下的对比图；图5中(E)有明显的荧光产生，说明光照条件下该含双氰基铱配合物在细胞中能产生活性氧ROS；通过图5中(D)叠加场和图5中(F)明场确认荧光信号来自于细胞。

测试例5

实施例1制备的含双氰基铱配合物在肿瘤细胞中活性氧产生能力对照组的检测步骤如下：

a)将MCF-7与2μM的活性氧检测试剂盒DCFH-DA共同孵育30min，PBS冲洗三次后光照3min，作为空白对照组(DCFH-DA组)，所得结果见图5中(A)、(B)和(C)；其中，(A)代表叠加场条件下的对比图，(B)代表荧光场条件下的成像图，(C)代表明场条件下的对比图；图5中(B)没有荧光产生，说明只有光照条件没有含双氰基铱配合物在细胞中不能产生ROS。进一步，通过图5中(A)叠加场和图5中(C)明场确认细胞中未出现荧光。

b)将MCF-7细胞与10μM的含双氰基铱配合物(DMSO/H₂O＝1/99，体积比)共同孵育2h，随后用PBS洗涤三次，再将所得细胞与2μM的活性氧检测试剂盒DCFH-DA、50μM的抗坏血酸(溶剂为PBS，pH 7.4)共同孵育30min，然后将细胞置于太阳能模拟器氙灯(大于470nm)下照射3min，作为抑制对照组(DCFH-DA+(btpq)₂-Ir-bpy-2CN+抗坏血酸)，所得结果见图5中(G)、(H)和(I)；其中，(G)代表叠加场条件下的对比图，(H)代表荧光场条件下的成像图，(I)代表明场条件下的对比图；图5中(H)没有荧光产生，说明产生的ROS被抗坏血酸清除。进一步，通过图5中(G)叠加场和图5中(I)明场确认细胞中未出现荧光。

测试例6

实施例1制备的含双氰基铱配合物在光动力学治疗中的检测：

a)将MCF-7细胞与10μM的含双氰基铱配合物溶液(DMSO/H₂O＝1/99，体积比)共同孵育2h，随后用PBS洗涤三次，得到复合有含双氰基铱配合物的细胞；

b)向所述复合有含双氰基铱配合物的细胞中加入210μL液体Annexin V-FITC-PI试剂盒的溶液，室温避光孵化30min，PBS冲洗三次；

c)将步骤b)所得细胞置于黑暗或太阳能模拟器氙灯(大于470nm)下分别光照3min和6min，然后使用共聚焦激光扫描显微镜进行共聚焦荧光成像监测FITC(异硫氰酸荧光素)与PI(碘化丙啶)的荧光信号，激发通道为488nm，收集通道1为505～525nm，收集通道2为610～680nm，所得结果如图6所示；由图6可知，在黑暗条件下，细胞成像结果中既未显示出FITC的绿色荧光，也未显示出PI的红色荧光，这说明黑暗条件下含双氰基铱配合物不能致使MCF-7细胞发生细胞凋亡；而在光照3min的条件下细胞成像显示FITC的绿色荧光，说明含双氰基铱配合物在光照3min条件下已经使MCF-7细胞早期凋亡；在光照6min的条件下细胞成像既显示FITC的绿色荧光，也显示出PI的红色荧光，说明含双氰基铱配合物在光照6min条件下已经使MCF-7细胞晚期死亡，这进一步说明该含双氰基铱配合物具有光动力杀伤癌细胞的作用。同时，通过叠加场(荧光场和明场叠加)进一步确认荧光信号来自于细胞。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.一种含双氰基铱配合物，具有式I所示结构：

2.权利要求1所述含双氰基铱配合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述2-氯异喹啉、苯并噻吩-2-硼酸、碳酸钾、四(三苯基膦)钯和第一溶剂的用量比为163.6mg:195.8mg:414.6mg:92.4mg:20mL。

4.根据权利要求2或3所述的制备方法，其特征在于，所述偶联反应的温度为75℃，时间为24h；所述偶联反应在氮气保护气氛下进行。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述式II所示结构的配体、三水合三氯化铱和第二溶剂混合的用量比为182.9mg:105.8mg:40mL；

所述第一配位反应的温度为110℃，时间为24h。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述式III所示结构的配体、4,4'-二氰基-2,2'-联吡啶和第三溶剂的用量比为101.6mg:43.3mg:60mL。

7.根据权利要求2或6所述的制备方法，其特征在于，所述第二配位反应的温度为70℃，时间为24h；所述第二配位反应在氮气保护气氛下进行。

8.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述六氟磷酸钾与含氯离子的铱配合物的摩尔比为(5～10):1。

9.根据权利要求2或8所述的制备方法，其特征在于，所述离子交换反应的温度为室温，时间为2～4h。

10.权利要求1所述含双氰基铱配合物或权利要求2～9任一项所述制备方法制备得到的含双氰基铱配合物在制备光动力治疗光敏剂中的应用。