CN113329769A - 具有反应性精氨酸的抗体化合物及相关的抗体药物缀合物 - Google Patents
具有反应性精氨酸的抗体化合物及相关的抗体药物缀合物 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113329769A CN113329769A CN201980081369.0A CN201980081369A CN113329769A CN 113329769 A CN113329769 A CN 113329769A CN 201980081369 A CN201980081369 A CN 201980081369A CN 113329769 A CN113329769 A CN 113329769A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- antibody
- compound
- dvd
- arg
- antigen
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 154
- 229940049595 antibody-drug conjugate Drugs 0.000 title claims abstract description 143
- 239000000611 antibody drug conjugate Substances 0.000 title claims abstract description 141
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 title claims abstract description 17
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 17
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims abstract description 26
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims abstract description 14
- 125000000637 arginyl group Chemical class N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 claims abstract description 12
- 239000011800 void material Substances 0.000 claims abstract description 6
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims description 133
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims description 133
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 109
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 105
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 93
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 89
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 89
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 89
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 claims description 65
- OJUGVDODNPJEEC-UHFFFAOYSA-N phenylglyoxal Chemical compound O=CC(=O)C1=CC=CC=C1 OJUGVDODNPJEEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 63
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 claims description 61
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 52
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 50
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 46
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 43
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 33
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 claims description 29
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 claims description 29
- MFRNYXJJRJQHNW-DEMKXPNLSA-N (2s)-2-[[(2r,3r)-3-methoxy-3-[(2s)-1-[(3r,4s,5s)-3-methoxy-5-methyl-4-[methyl-[(2s)-3-methyl-2-[[(2s)-3-methyl-2-(methylamino)butanoyl]amino]butanoyl]amino]heptanoyl]pyrrolidin-2-yl]-2-methylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoic acid Chemical group CN[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 MFRNYXJJRJQHNW-DEMKXPNLSA-N 0.000 claims description 24
- 108010059074 monomethylauristatin F Proteins 0.000 claims description 23
- 102220640185 Mitochondrial 2-oxoglutarate/malate carrier protein_K99R_mutation Human genes 0.000 claims description 22
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 22
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 claims description 22
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 20
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 claims description 14
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 claims description 14
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 claims description 13
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims description 13
- AIJULSRZWUXGPQ-UHFFFAOYSA-N Methylglyoxal Chemical compound CC(=O)C=O AIJULSRZWUXGPQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- LEQAOMBKQFMDFZ-UHFFFAOYSA-N glyoxal Chemical compound O=CC=O LEQAOMBKQFMDFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 11
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 11
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 10
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 claims description 10
- 101710160107 Outer membrane protein A Proteins 0.000 claims description 9
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 claims description 9
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 8
- 101001103036 Homo sapiens Nuclear receptor ROR-alpha Proteins 0.000 claims description 7
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 claims description 7
- 108091008680 RAR-related orphan receptors Proteins 0.000 claims description 6
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 claims description 6
- 229940015043 glyoxal Drugs 0.000 claims description 6
- BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 2-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-n-[3-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-(dimethylamino)phenyl]-1-n,1-n-dimethylbenzene-1,4-diamine Chemical compound C1=C(C(C=2C=CC(Cl)=CC=2)C=2C=CC(Cl)=CC=2)C(N(C)C)=CC=C1NC(C=1)=CC=C(N(C)C)C=1C(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=C(Cl)C=C1 BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 102100031585 ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Human genes 0.000 claims description 5
- 108010008014 B-Cell Maturation Antigen Proteins 0.000 claims description 5
- 102000006942 B-Cell Maturation Antigen Human genes 0.000 claims description 5
- 102100027203 B-cell antigen receptor complex-associated protein beta chain Human genes 0.000 claims description 5
- 102100025221 CD70 antigen Human genes 0.000 claims description 5
- 102100035139 Folate receptor alpha Human genes 0.000 claims description 5
- 102100041003 Glutamate carboxypeptidase 2 Human genes 0.000 claims description 5
- 101000777636 Homo sapiens ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Proteins 0.000 claims description 5
- 101000914491 Homo sapiens B-cell antigen receptor complex-associated protein beta chain Proteins 0.000 claims description 5
- 101000934356 Homo sapiens CD70 antigen Proteins 0.000 claims description 5
- 101001023230 Homo sapiens Folate receptor alpha Proteins 0.000 claims description 5
- 101000892862 Homo sapiens Glutamate carboxypeptidase 2 Proteins 0.000 claims description 5
- 101001103039 Homo sapiens Inactive tyrosine-protein kinase transmembrane receptor ROR1 Proteins 0.000 claims description 5
- 101000633784 Homo sapiens SLAM family member 7 Proteins 0.000 claims description 5
- 101000874179 Homo sapiens Syndecan-1 Proteins 0.000 claims description 5
- 102100039615 Inactive tyrosine-protein kinase transmembrane receptor ROR1 Human genes 0.000 claims description 5
- 102100029198 SLAM family member 7 Human genes 0.000 claims description 5
- 102100035721 Syndecan-1 Human genes 0.000 claims description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 5
- 229920001481 poly(stearyl methacrylate) Polymers 0.000 claims description 5
- UHPQGESRYTWQJW-UHFFFAOYSA-N C(C=C1)=CC2=C1NC1=C2C(C2=NNC=CC=C2)=CC=C1 Chemical class C(C=C1)=CC2=C1NC1=C2C(C2=NNC=CC=C2)=CC=C1 UHPQGESRYTWQJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 101100314454 Caenorhabditis elegans tra-1 gene Proteins 0.000 claims description 4
- 102100037815 Fas apoptotic inhibitory molecule 3 Human genes 0.000 claims description 4
- 101000878510 Homo sapiens Fas apoptotic inhibitory molecule 3 Proteins 0.000 claims description 4
- 101000863880 Homo sapiens Sialic acid-binding Ig-like lectin 6 Proteins 0.000 claims description 4
- 102100029947 Sialic acid-binding Ig-like lectin 6 Human genes 0.000 claims description 4
- 239000006096 absorbing agent Substances 0.000 claims description 4
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims description 4
- 108010044540 auristatin Proteins 0.000 claims description 4
- 229930188854 dolastatin Natural products 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 4
- 239000003053 toxin Substances 0.000 claims description 4
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 claims description 4
- AMRJKAQTDDKMCE-UHFFFAOYSA-N dolastatin Chemical compound CC(C)C(N(C)C)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)N(C)C(C(C)C)C(OC)CC(=O)N1CCCC1C(OC)C(C)C(=O)NC(C=1SC=CN=1)CC1=CC=CC=C1 AMRJKAQTDDKMCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 230000001293 nucleolytic effect Effects 0.000 claims description 3
- YUOCYTRGANSSRY-UHFFFAOYSA-N pyrrolo[2,3-i][1,2]benzodiazepine Chemical class C1=CN=NC2=C3C=CN=C3C=CC2=C1 YUOCYTRGANSSRY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- KLWPJMFMVPTNCC-UHFFFAOYSA-N Camptothecin Natural products CCC1(O)C(=O)OCC2=C1C=C3C4Nc5ccccc5C=C4CN3C2=O KLWPJMFMVPTNCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229940127093 camptothecin Drugs 0.000 claims description 2
- VSJKWCGYPAHWDS-FQEVSTJZSA-N camptothecin Chemical compound C1=CC=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 VSJKWCGYPAHWDS-FQEVSTJZSA-N 0.000 claims description 2
- VSJKWCGYPAHWDS-UHFFFAOYSA-N dl-camptothecin Natural products C1=CC=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)C5(O)CC)C4=NC2=C1 VSJKWCGYPAHWDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 abstract description 13
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 11
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 79
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 57
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 40
- 125000002059 L-arginyl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])C(=N[H])N([H])[H] 0.000 description 34
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 29
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 28
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 28
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 27
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 25
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 25
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 25
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 25
- -1 Axup et al Chemical class 0.000 description 24
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 24
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 23
- 239000000047 product Substances 0.000 description 23
- ABZLKHKQJHEPAX-UHFFFAOYSA-N tetramethylrhodamine Chemical class C=12C=CC(N(C)C)=CC2=[O+]C2=CC(N(C)C)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C([O-])=O ABZLKHKQJHEPAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 20
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 18
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 17
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 17
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 16
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 16
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 15
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 15
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 15
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 15
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 229910001868 water Inorganic materials 0.000 description 15
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 14
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 13
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 description 13
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 13
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 13
- 150000003952 β-lactams Chemical class 0.000 description 13
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 12
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 12
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 11
- 125000001176 L-lysyl group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(N([H])[H])([H])[H] 0.000 description 11
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 229940125898 compound 5 Drugs 0.000 description 11
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 11
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 11
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 11
- 229960000575 trastuzumab Drugs 0.000 description 11
- 238000011161 development Methods 0.000 description 10
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 10
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 10
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 10
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 description 10
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 9
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 9
- 230000006870 function Effects 0.000 description 9
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 9
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 9
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 9
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 9
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 9
- 238000005580 one pot reaction Methods 0.000 description 9
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 9
- 241000176030 Nanna Species 0.000 description 8
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 8
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 8
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 8
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 8
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 7
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 7
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 7
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 7
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 7
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 7
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 6
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 6
- 101000882584 Homo sapiens Estrogen receptor Proteins 0.000 description 6
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 6
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 6
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 125000002795 guanidino group Chemical group C(N)(=N)N* 0.000 description 6
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 6
- 102000028416 insulin-like growth factor binding Human genes 0.000 description 6
- 108091022911 insulin-like growth factor binding Proteins 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 6
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 6
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 5
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 5
- 108010092160 Dactinomycin Proteins 0.000 description 5
- 101001002634 Homo sapiens Interleukin-1 alpha Proteins 0.000 description 5
- 102100020881 Interleukin-1 alpha Human genes 0.000 description 5
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 5
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 5
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 5
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 5
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 5
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 5
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 5
- 230000005888 antibody-dependent cellular phagocytosis Effects 0.000 description 5
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 5
- 230000004540 complement-dependent cytotoxicity Effects 0.000 description 5
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 5
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 5
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 5
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 description 5
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 5
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 5
- 239000000710 homodimer Substances 0.000 description 5
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 5
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 5
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 5
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 241000894007 species Species 0.000 description 5
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 5
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 5
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic acid Substances OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 5
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 4
- AICIYIDUYNFPRY-UHFFFAOYSA-N 1,3-dihydro-2H-imidazol-2-one Chemical group O=C1NC=CN1 AICIYIDUYNFPRY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VAKXPQHQQNOUEZ-UHFFFAOYSA-N 3-[4-[[bis[[1-(3-hydroxypropyl)triazol-4-yl]methyl]amino]methyl]triazol-1-yl]propan-1-ol Chemical compound N1=NN(CCCO)C=C1CN(CC=1N=NN(CCCO)C=1)CC1=CN(CCCO)N=N1 VAKXPQHQQNOUEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HSJKGGMUJITCBW-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxybutanal Chemical compound CC(O)CC=O HSJKGGMUJITCBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 4
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101150021185 FGF gene Proteins 0.000 description 4
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 4
- 239000007832 Na2SO4 Substances 0.000 description 4
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 4
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 4
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 description 4
- RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N actinomycin D Natural products CC1OC(=O)C(C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)C2CCCN2C(=O)C(C(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)NC4C(=O)NC(C(N5CCCC5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)C(C(C)C)C(=O)OC4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 4
- OWMVSZAMULFTJU-UHFFFAOYSA-N bis-tris Chemical compound OCCN(CCO)C(CO)(CO)CO OWMVSZAMULFTJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 4
- 229960004630 chlorambucil Drugs 0.000 description 4
- JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N chlorambucil Chemical compound OC(=O)CCCC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960002173 citrulline Drugs 0.000 description 4
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 229910000366 copper(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 4
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 4
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 description 4
- 238000013461 design Methods 0.000 description 4
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 4
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 4
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 4
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 4
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 4
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-VMNATFBRSA-N methanol-d1 Chemical compound [2H]OC OKKJLVBELUTLKV-VMNATFBRSA-N 0.000 description 4
- CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N mithramycin Chemical compound O([C@@H]1C[C@@H](O[C@H](C)[C@H]1O)OC=1C=C2C=C3C[C@H]([C@@H](C(=O)C3=C(O)C2=C(O)C=1C)O[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2O[C@H](C)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]3O[C@H](C)[C@@H](O)[C@@](C)(O)C3)C2)C1)[C@H](OC)C(=O)[C@@H](O)[C@@H](C)O)[C@H]1C[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O1 CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N 0.000 description 4
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 4
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 4
- 229960003171 plicamycin Drugs 0.000 description 4
- 229920002857 polybutadiene Polymers 0.000 description 4
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- 235000010378 sodium ascorbate Nutrition 0.000 description 4
- PPASLZSBLFJQEF-RKJRWTFHSA-M sodium ascorbate Substances [Na+].OC[C@@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1[O-] PPASLZSBLFJQEF-RKJRWTFHSA-M 0.000 description 4
- 229960005055 sodium ascorbate Drugs 0.000 description 4
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 4
- PPASLZSBLFJQEF-RXSVEWSESA-M sodium-L-ascorbate Chemical compound [Na+].OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1[O-] PPASLZSBLFJQEF-RXSVEWSESA-M 0.000 description 4
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000012192 staining solution Substances 0.000 description 4
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 4
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 4
- RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphine Chemical compound C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 description 4
- JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N vincaleukoblastine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 4
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 4
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 4
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IAKHMKGGTNLKSZ-INIZCTEOSA-N (S)-colchicine Chemical compound C1([C@@H](NC(C)=O)CC2)=CC(=O)C(OC)=CC=C1C1=C2C=C(OC)C(OC)=C1OC IAKHMKGGTNLKSZ-INIZCTEOSA-N 0.000 description 3
- ZJNLYGOUHDJHMG-UHFFFAOYSA-N 1-n,4-n-bis(5-methylhexan-2-yl)benzene-1,4-diamine Chemical compound CC(C)CCC(C)NC1=CC=C(NC(C)CCC(C)C)C=C1 ZJNLYGOUHDJHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000024893 Acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 description 3
- 208000014697 Acute lymphocytic leukaemia Diseases 0.000 description 3
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 3
- 101100520152 Arabidopsis thaliana PIR gene Proteins 0.000 description 3
- 208000010839 B-cell chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 3
- 102100023995 Beta-nerve growth factor Human genes 0.000 description 3
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 description 3
- 108091007914 CDKs Proteins 0.000 description 3
- 102000003780 Clusterin Human genes 0.000 description 3
- 108090000197 Clusterin Proteins 0.000 description 3
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000001390 Fructose-Bisphosphate Aldolase Human genes 0.000 description 3
- 108010068561 Fructose-Bisphosphate Aldolase Proteins 0.000 description 3
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 3
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 3
- 101001024703 Homo sapiens Nck-associated protein 5 Proteins 0.000 description 3
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 3
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 3
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 3
- 208000031422 Lymphocytic Chronic B-Cell Leukemia Diseases 0.000 description 3
- 108700011259 MicroRNAs Proteins 0.000 description 3
- 229930192392 Mitomycin Natural products 0.000 description 3
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 description 3
- 102100036946 Nck-associated protein 5 Human genes 0.000 description 3
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 108091007412 Piwi-interacting RNA Proteins 0.000 description 3
- 208000006664 Precursor Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma Diseases 0.000 description 3
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 3
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 3
- 229930183665 actinomycin Natural products 0.000 description 3
- 239000004037 angiogenesis inhibitor Substances 0.000 description 3
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 3
- 229960000397 bevacizumab Drugs 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 description 3
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 description 3
- 208000032852 chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 3
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 3
- 238000001218 confocal laser scanning microscopy Methods 0.000 description 3
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 3
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 3
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 3
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 3
- 239000002619 cytotoxin Substances 0.000 description 3
- VQNATVDKACXKTF-XELLLNAOSA-N duocarmycin Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=C2NC(C(=O)N3C4=CC(=O)C5=C([C@@]64C[C@@H]6C3)C=C(N5)C(=O)OC)=CC2=C1 VQNATVDKACXKTF-XELLLNAOSA-N 0.000 description 3
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 3
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000005734 heterodimerization reaction Methods 0.000 description 3
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 3
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 3
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 3
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 3
- 238000001840 matrix-assisted laser desorption--ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 3
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 3
- 229940051022 radioimmunoconjugate Drugs 0.000 description 3
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 3
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 3
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 3
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 3
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 3
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 3
- 238000002424 x-ray crystallography Methods 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- ALBODLTZUXKBGZ-JUUVMNCLSA-N (2s)-2-amino-3-phenylpropanoic acid;(2s)-2,6-diaminohexanoic acid Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 ALBODLTZUXKBGZ-JUUVMNCLSA-N 0.000 description 2
- FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N (E)-dacarbazine Chemical compound CN(C)\N=N\c1[nH]cnc1C(N)=O FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N 0.000 description 2
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CBYYPIYKJZCKGK-UHFFFAOYSA-N 2-(4-azidophenyl)-2-oxoacetaldehyde;hydrate Chemical compound O.[N-]=[N+]=NC1=CC=C(C(=O)C=O)C=C1 CBYYPIYKJZCKGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KZMAWJRXKGLWGS-UHFFFAOYSA-N 2-chloro-n-[4-(4-methoxyphenyl)-1,3-thiazol-2-yl]-n-(3-methoxypropyl)acetamide Chemical compound S1C(N(C(=O)CCl)CCCOC)=NC(C=2C=CC(OC)=CC=2)=C1 KZMAWJRXKGLWGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NDMPLJNOPCLANR-UHFFFAOYSA-N 3,4-dihydroxy-15-(4-hydroxy-18-methoxycarbonyl-5,18-seco-ibogamin-18-yl)-16-methoxy-1-methyl-6,7-didehydro-aspidospermidine-3-carboxylic acid methyl ester Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 NDMPLJNOPCLANR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AOJJSUZBOXZQNB-VTZDEGQISA-N 4'-epidoxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-VTZDEGQISA-N 0.000 description 2
- BWGRDBSNKQABCB-UHFFFAOYSA-N 4,4-difluoro-N-[3-[3-(3-methyl-5-propan-2-yl-1,2,4-triazol-4-yl)-8-azabicyclo[3.2.1]octan-8-yl]-1-thiophen-2-ylpropyl]cyclohexane-1-carboxamide Chemical compound CC(C)C1=NN=C(C)N1C1CC2CCC(C1)N2CCC(NC(=O)C1CCC(F)(F)CC1)C1=CC=CS1 BWGRDBSNKQABCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YYROPELSRYBVMQ-UHFFFAOYSA-N 4-toluenesulfonyl chloride Chemical compound CC1=CC=C(S(Cl)(=O)=O)C=C1 YYROPELSRYBVMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YMZMTOFQCVHHFB-UHFFFAOYSA-N 5-carboxytetramethylrhodamine Chemical compound C=12C=CC(N(C)C)=CC2=[O+]C2=CC(N(C)C)=CC=C2C=1C1=CC=C(C(O)=O)C=C1C([O-])=O YMZMTOFQCVHHFB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 description 2
- 238000000035 BCA protein assay Methods 0.000 description 2
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 description 2
- 108010059108 CD18 Antigens Proteins 0.000 description 2
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 2
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 2
- 102100036239 Cyclin-dependent kinase 2 Human genes 0.000 description 2
- 239000012624 DNA alkylating agent Substances 0.000 description 2
- 102100024746 Dihydrofolate reductase Human genes 0.000 description 2
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 2
- 101100536692 Drosophila melanogaster Ten-m gene Proteins 0.000 description 2
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 description 2
- MBYXEBXZARTUSS-QLWBXOBMSA-N Emetamine Natural products O(C)c1c(OC)cc2c(c(C[C@@H]3[C@H](CC)CN4[C@H](c5c(cc(OC)c(OC)c5)CC4)C3)ncc2)c1 MBYXEBXZARTUSS-QLWBXOBMSA-N 0.000 description 2
- HTIJFSOGRVMCQR-UHFFFAOYSA-N Epirubicin Natural products COc1cccc2C(=O)c3c(O)c4CC(O)(CC(OC5CC(N)C(=O)C(C)O5)c4c(O)c3C(=O)c12)C(=O)CO HTIJFSOGRVMCQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 2
- 108020005004 Guide RNA Proteins 0.000 description 2
- 239000007821 HATU Substances 0.000 description 2
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 2
- 208000021519 Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 description 2
- 101001111439 Homo sapiens Beta-nerve growth factor Proteins 0.000 description 2
- 101000599951 Homo sapiens Insulin-like growth factor I Proteins 0.000 description 2
- 101000878605 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Proteins 0.000 description 2
- 101000655540 Homo sapiens Protransforming growth factor alpha Proteins 0.000 description 2
- 101000832225 Homo sapiens Stabilin-1 Proteins 0.000 description 2
- 101000659879 Homo sapiens Thrombospondin-1 Proteins 0.000 description 2
- 101000830568 Homo sapiens Tumor necrosis factor alpha-induced protein 2 Proteins 0.000 description 2
- 101000679857 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 3 Proteins 0.000 description 2
- 101001103033 Homo sapiens Tyrosine-protein kinase transmembrane receptor ROR2 Proteins 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N Idarubicin Chemical compound C1[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2C[C@@](O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N 0.000 description 2
- XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N Idarubicin Natural products C1C(N)C(O)C(C)OC1OC1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2CC(O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100037852 Insulin-like growth factor I Human genes 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 2
- 239000005517 L01XE01 - Imatinib Substances 0.000 description 2
- 239000005411 L01XE02 - Gefitinib Substances 0.000 description 2
- 239000005551 L01XE03 - Erlotinib Substances 0.000 description 2
- 239000002177 L01XE27 - Ibrutinib Substances 0.000 description 2
- GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N Lomustine Chemical compound ClCCN(N=O)C(=O)NC1CCCCC1 GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100038007 Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Human genes 0.000 description 2
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 2
- 102100037273 Mammaglobin-A Human genes 0.000 description 2
- 102100037267 Mammaglobin-B Human genes 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 101710181812 Methionine aminopeptidase Proteins 0.000 description 2
- 102000029749 Microtubule Human genes 0.000 description 2
- 108091022875 Microtubule Proteins 0.000 description 2
- 101100127662 Mus musculus Lama1 gene Proteins 0.000 description 2
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 description 2
- 102100025243 Myeloid cell surface antigen CD33 Human genes 0.000 description 2
- ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N N-debenzoyl-N-(tert-butoxycarbonyl)-10-deacetyltaxol Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=4C=CC=CC=4)C[C@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N 0.000 description 2
- 108091008640 NR2F Proteins 0.000 description 2
- 108091008638 NR4A Proteins 0.000 description 2
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 2
- 108090000772 Neuropilin-1 Proteins 0.000 description 2
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 2
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 2
- 102100033237 Pro-epidermal growth factor Human genes 0.000 description 2
- 101710098940 Pro-epidermal growth factor Proteins 0.000 description 2
- 102100038280 Prostaglandin G/H synthase 2 Human genes 0.000 description 2
- 102100024952 Protein CBFA2T1 Human genes 0.000 description 2
- 102100023068 Protein kinase C-binding protein NELL1 Human genes 0.000 description 2
- 102100032350 Protransforming growth factor alpha Human genes 0.000 description 2
- AUVVAXYIELKVAI-UHFFFAOYSA-N SJ000285215 Natural products N1CCC2=CC(OC)=C(OC)C=C2C1CC1CC2C3=CC(OC)=C(OC)C=C3CCN2CC1CC AUVVAXYIELKVAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100024471 Stabilin-1 Human genes 0.000 description 2
- 239000012505 Superdex™ Substances 0.000 description 2
- WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N Tetraxetan Chemical group OC(=O)CN1CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100036034 Thrombospondin-1 Human genes 0.000 description 2
- 102100024595 Tumor necrosis factor alpha-induced protein 2 Human genes 0.000 description 2
- 102100022156 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 3 Human genes 0.000 description 2
- 102100039616 Tyrosine-protein kinase transmembrane receptor ROR2 Human genes 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N actinomycin D Chemical compound C[C@H]1OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)N[C@@H]4C(=O)N[C@@H](C(N5CCC[C@H]5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)O[C@@H]4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 2
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 2
- 229940045799 anthracyclines and related substance Drugs 0.000 description 2
- RWZYAGGXGHYGMB-UHFFFAOYSA-N anthranilic acid Chemical compound NC1=CC=CC=C1C(O)=O RWZYAGGXGHYGMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 2
- 229940125644 antibody drug Drugs 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 229940034982 antineoplastic agent Drugs 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 239000012300 argon atmosphere Substances 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N azanide;cyclobutane-1,1-dicarboxylic acid;platinum(2+) Chemical compound [NH2-].[NH2-].[Pt+2].OC(=O)C1(C(O)=O)CCC1 VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 238000006664 bond formation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N calicheamicin Chemical compound C1[C@H](OC)[C@@H](NCC)CO[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@@H]2C\3=C(NC(=O)OC)C(=O)C[C@](C/3=C/CSSSC)(O)C#C\C=C/C#C2)O[C@H](C)[C@@H](NO[C@@H]2O[C@H](C)[C@@H](SC(=O)C=3C(=C(OC)C(O[C@H]4[C@@H]([C@H](OC)[C@@H](O)[C@H](C)O4)O)=C(I)C=3C)OC)[C@@H](O)C2)[C@@H]1O HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N 0.000 description 2
- 229930195731 calicheamicin Natural products 0.000 description 2
- 229960004562 carboplatin Drugs 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 201000007455 central nervous system cancer Diseases 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 2
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 2
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 229960000640 dactinomycin Drugs 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- CFCUWKMKBJTWLW-UHFFFAOYSA-N deoliosyl-3C-alpha-L-digitoxosyl-MTM Natural products CC=1C(O)=C2C(O)=C3C(=O)C(OC4OC(C)C(O)C(OC5OC(C)C(O)C(OC6OC(C)C(O)C(C)(O)C6)C5)C4)C(C(OC)C(=O)C(O)C(C)O)CC3=CC2=CC=1OC(OC(C)C1O)CC1OC1CC(O)C(O)C(C)O1 CFCUWKMKBJTWLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 2
- 108020001096 dihydrofolate reductase Proteins 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 2
- 229960003668 docetaxel Drugs 0.000 description 2
- 229960005501 duocarmycin Drugs 0.000 description 2
- 229930184221 duocarmycin Natural products 0.000 description 2
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 2
- 229960002694 emetine Drugs 0.000 description 2
- AUVVAXYIELKVAI-CKBKHPSWSA-N emetine Chemical compound N1CCC2=CC(OC)=C(OC)C=C2[C@H]1C[C@H]1C[C@H]2C3=CC(OC)=C(OC)C=C3CCN2C[C@@H]1CC AUVVAXYIELKVAI-CKBKHPSWSA-N 0.000 description 2
- AUVVAXYIELKVAI-UWBTVBNJSA-N emetine Natural products N1CCC2=CC(OC)=C(OC)C=C2[C@H]1C[C@H]1C[C@H]2C3=CC(OC)=C(OC)C=C3CCN2C[C@H]1CC AUVVAXYIELKVAI-UWBTVBNJSA-N 0.000 description 2
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 2
- 210000001163 endosome Anatomy 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 229960001904 epirubicin Drugs 0.000 description 2
- AAKJLRGGTJKAMG-UHFFFAOYSA-N erlotinib Chemical compound C=12C=C(OCCOC)C(OCCOC)=CC2=NC=NC=1NC1=CC=CC(C#C)=C1 AAKJLRGGTJKAMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001433 erlotinib Drugs 0.000 description 2
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 2
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- XGALLCVXEZPNRQ-UHFFFAOYSA-N gefitinib Chemical compound C=12C=C(OCCCN3CCOCC3)C(OC)=CC2=NC=NC=1NC1=CC=C(F)C(Cl)=C1 XGALLCVXEZPNRQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002584 gefitinib Drugs 0.000 description 2
- 229960003297 gemtuzumab ozogamicin Drugs 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N glycyl-glycyl-glycine Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 238000000589 high-performance liquid chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XYFPWWZEPKGCCK-GOSISDBHSA-N ibrutinib Chemical compound C1=2C(N)=NC=NC=2N([C@H]2CN(CCC2)C(=O)C=C)N=C1C(C=C1)=CC=C1OC1=CC=CC=C1 XYFPWWZEPKGCCK-GOSISDBHSA-N 0.000 description 2
- 229960001507 ibrutinib Drugs 0.000 description 2
- 229960000908 idarubicin Drugs 0.000 description 2
- IFSDAJWBUCMOAH-HNNXBMFYSA-N idelalisib Chemical compound C1([C@@H](NC=2C=3N=CNC=3N=CN=2)CC)=NC2=CC=CC(F)=C2C(=O)N1C1=CC=CC=C1 IFSDAJWBUCMOAH-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 2
- 229960001101 ifosfamide Drugs 0.000 description 2
- HOMGKSMUEGBAAB-UHFFFAOYSA-N ifosfamide Chemical compound ClCCNP1(=O)OCCCN1CCCl HOMGKSMUEGBAAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002411 imatinib Drugs 0.000 description 2
- KTUFNOKKBVMGRW-UHFFFAOYSA-N imatinib Chemical compound C1CN(C)CCN1CC1=CC=C(C(=O)NC=2C=C(NC=3N=C(C=CN=3)C=3C=NC=CC=3)C(C)=CC=2)C=C1 KTUFNOKKBVMGRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940125721 immunosuppressive agent Drugs 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- GOTYRUGSSMKFNF-UHFFFAOYSA-N lenalidomide Chemical compound C1C=2C(N)=CC=CC=2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O GOTYRUGSSMKFNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004942 lenalidomide Drugs 0.000 description 2
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 239000012263 liquid product Substances 0.000 description 2
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 2
- 229960001924 melphalan Drugs 0.000 description 2
- SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N melphalan Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N mercaptopurine Chemical compound S=C1NC=NC2=C1NC=N2 GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 2
- 210000004688 microtubule Anatomy 0.000 description 2
- 108091005601 modified peptides Proteins 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 2
- UFVHVURXVBHPDA-UHFFFAOYSA-N n-(dichloromethyl)-n-ethylethanamine Chemical compound CCN(CC)C(Cl)Cl UFVHVURXVBHPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical class CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 2
- 229960000470 omalizumab Drugs 0.000 description 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 2
- DWAFYCQODLXJNR-BNTLRKBRSA-L oxaliplatin Chemical compound O1C(=O)C(=O)O[Pt]11N[C@@H]2CCCC[C@H]2N1 DWAFYCQODLXJNR-BNTLRKBRSA-L 0.000 description 2
- 229960001756 oxaliplatin Drugs 0.000 description 2
- AICOOMRHRUFYCM-ZRRPKQBOSA-N oxazine, 1 Chemical compound C([C@@H]1[C@H](C(C[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)N(C)C)[C@H](O)C[C@]21C)=O)CC1=CC2)C[C@H]1[C@@]1(C)[C@H]2N=C(C(C)C)OC1 AICOOMRHRUFYCM-ZRRPKQBOSA-N 0.000 description 2
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 2
- 229960002087 pertuzumab Drugs 0.000 description 2
- DHRLEVQXOMLTIM-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;trioxomolybdenum Chemical compound O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.OP(O)(O)=O DHRLEVQXOMLTIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 239000012286 potassium permanganate Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000012746 preparative thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 108090000468 progesterone receptors Proteins 0.000 description 2
- YORCIIVHUBAYBQ-UHFFFAOYSA-N propargyl bromide Chemical compound BrCC#C YORCIIVHUBAYBQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- AQHHHDLHHXJYJD-UHFFFAOYSA-N propranolol Chemical compound C1=CC=C2C(OCC(O)CNC(C)C)=CC=CC2=C1 AQHHHDLHHXJYJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N puromycin Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C[C@H](N)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)[C@H](N2C3=NC=NC(=C3N=C2)N(C)C)O[C@@H]1CO RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N 0.000 description 2
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 2
- 230000000171 quenching effect Effects 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- 238000009877 rendering Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M sodium bicarbonate Substances [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012312 sodium hydride Substances 0.000 description 2
- 229910000104 sodium hydride Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 2
- NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N teniposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@@H](OC[C@H]4O3)C=3SC=CC=3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N 0.000 description 2
- 229960001278 teniposide Drugs 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N tioguanine Chemical compound N1C(N)=NC(=S)C2=C1N=CN2 WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 2
- 229960000653 valrubicin Drugs 0.000 description 2
- ZOCKGBMQLCSHFP-KQRAQHLDSA-N valrubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@](CC2=C(O)C=3C(=O)C4=CC=CC(OC)=C4C(=O)C=3C(O)=C21)(O)C(=O)COC(=O)CCCC)[C@H]1C[C@H](NC(=O)C(F)(F)F)[C@H](O)[C@H](C)O1 ZOCKGBMQLCSHFP-KQRAQHLDSA-N 0.000 description 2
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 2
- 229960004355 vindesine Drugs 0.000 description 2
- UGGWPQSBPIFKDZ-KOTLKJBCSA-N vindesine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(N)=O)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1N=C1[C]2C=CC=C1 UGGWPQSBPIFKDZ-KOTLKJBCSA-N 0.000 description 2
- GBABOYUKABKIAF-GHYRFKGUSA-N vinorelbine Chemical compound C1N(CC=2C3=CC=CC=C3NC=22)CC(CC)=C[C@H]1C[C@]2(C(=O)OC)C1=CC([C@]23[C@H]([C@]([C@H](OC(C)=O)[C@]4(CC)C=CCN([C@H]34)CC2)(O)C(=O)OC)N2C)=C2C=C1OC GBABOYUKABKIAF-GHYRFKGUSA-N 0.000 description 2
- 229960002066 vinorelbine Drugs 0.000 description 2
- LGNCNVVZCUVPOT-FUVGGWJZSA-N (2s)-2-[[(2r,3r)-3-[(2s)-1-[(3r,4s,5s)-4-[[(2s)-2-[[(2s)-2-(dimethylamino)-3-methylbutanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]-methylamino]-3-methoxy-5-methylheptanoyl]pyrrolidin-2-yl]-3-methoxy-2-methylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound CC(C)[C@H](N(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 LGNCNVVZCUVPOT-FUVGGWJZSA-N 0.000 description 1
- WOWDZACBATWTAU-FEFUEGSOSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-(dimethylamino)-3-methylbutanoyl]amino]-n-[(3r,4s,5s)-1-[(2s)-2-[(1r,2r)-3-[[(1s,2r)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-n,3-dimethylbutanamide Chemical compound CC(C)[C@H](N(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)C1=CC=CC=C1 WOWDZACBATWTAU-FEFUEGSOSA-N 0.000 description 1
- AGGWFDNPHKLBBV-YUMQZZPRSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-amino-3-methylbutanoyl]amino]-5-(carbamoylamino)pentanoic acid Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=O AGGWFDNPHKLBBV-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- DLKUYSQUHXBYPB-NSSHGSRYSA-N (2s,4r)-4-[[2-[(1r,3r)-1-acetyloxy-4-methyl-3-[3-methylbutanoyloxymethyl-[(2s,3s)-3-methyl-2-[[(2r)-1-methylpiperidine-2-carbonyl]amino]pentanoyl]amino]pentyl]-1,3-thiazole-4-carbonyl]amino]-2-methyl-5-(4-methylphenyl)pentanoic acid Chemical class N([C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N(COC(=O)CC(C)C)[C@H](C[C@@H](OC(C)=O)C=1SC=C(N=1)C(=O)N[C@H](C[C@H](C)C(O)=O)CC=1C=CC(C)=CC=1)C(C)C)C(=O)[C@H]1CCCCN1C DLKUYSQUHXBYPB-NSSHGSRYSA-N 0.000 description 1
- PNECWWUOUHGWQG-UHFFFAOYSA-N (3-chloro-4-methylphenyl)-[4-(4-nitrophenyl)piperazin-1-yl]methanone Chemical compound C1=C(Cl)C(C)=CC=C1C(=O)N1CCN(C=2C=CC(=CC=2)[N+]([O-])=O)CC1 PNECWWUOUHGWQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SLURUCSFDHKXFR-WWMWMSKMSA-N (7s,9s)-7-[[(1s,3r,4as,9s,9ar,10as)-9-methoxy-1-methyl-3,4,4a,6,7,9,9a,10a-octahydro-1h-pyrano[1,2][1,3]oxazolo[3,4-b][1,4]oxazin-3-yl]oxy]-6,9,11-trihydroxy-9-(2-hydroxyacetyl)-4-methoxy-8,10-dihydro-7h-tetracene-5,12-dione Chemical compound O=C1C2=CC=CC(OC)=C2C(=O)C(C(O)=C23)=C1C(O)=C3C[C@@](O)(C(=O)CO)C[C@@H]2O[C@H]1C[C@@H]2N3CCO[C@H](OC)[C@H]3O[C@@H]2[C@H](C)O1 SLURUCSFDHKXFR-WWMWMSKMSA-N 0.000 description 1
- HWFKCAFKXZFOQT-UHFFFAOYSA-N 1-(3,6-dibromocarbazol-9-yl)-3-piperazin-1-ylpropan-2-ol;dihydrochloride Chemical compound Cl.Cl.C12=CC=C(Br)C=C2C2=CC(Br)=CC=C2N1CC(O)CN1CCNCC1 HWFKCAFKXZFOQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-HVTJNCQCSA-N 10043-66-0 Chemical compound [131I][131I] PNDPGZBMCMUPRI-HVTJNCQCSA-N 0.000 description 1
- KGLPWQKSKUVKMJ-UHFFFAOYSA-N 2,3-dihydrophthalazine-1,4-dione Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NNC(=O)C2=C1 KGLPWQKSKUVKMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LSYXXLMBRSSBGS-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-tris(hydroxymethyl)phenol Chemical compound OCC1=CC(CO)=C(O)C(CO)=C1 LSYXXLMBRSSBGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KUMMBDBTERQYCG-UHFFFAOYSA-N 2,6-bis(hydroxymethyl)-4-methylphenol Chemical compound CC1=CC(CO)=C(O)C(CO)=C1 KUMMBDBTERQYCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CALIYGMVBZRBLV-UHFFFAOYSA-N 2-(4-azidophenyl)-2-oxoacetaldehyde Chemical compound [N-]=[N+]=NC1=CC=C(C(=O)C=O)C=C1 CALIYGMVBZRBLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IVLXQGJVBGMLRR-UHFFFAOYSA-N 2-aminoacetic acid;hydron;chloride Chemical compound Cl.NCC(O)=O IVLXQGJVBGMLRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020004021 3-ketosteroid receptors Proteins 0.000 description 1
- WDBQJSCPCGTAFG-QHCPKHFHSA-N 4,4-difluoro-N-[(1S)-3-[4-(3-methyl-5-propan-2-yl-1,2,4-triazol-4-yl)piperidin-1-yl]-1-pyridin-3-ylpropyl]cyclohexane-1-carboxamide Chemical compound FC1(CCC(CC1)C(=O)N[C@@H](CCN1CCC(CC1)N1C(=NN=C1C)C(C)C)C=1C=NC=CC=1)F WDBQJSCPCGTAFG-QHCPKHFHSA-N 0.000 description 1
- CNJLMVZFWLNOEP-UHFFFAOYSA-N 4,7,7-trimethylbicyclo[4.1.0]heptan-5-one Chemical compound O=C1C(C)CCC2C(C)(C)C12 CNJLMVZFWLNOEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CSDQQAQKBAQLLE-UHFFFAOYSA-N 4-(4-chlorophenyl)-4,5,6,7-tetrahydrothieno[3,2-c]pyridine Chemical compound C1=CC(Cl)=CC=C1C1C(C=CS2)=C2CCN1 CSDQQAQKBAQLLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QFVHZQCOUORWEI-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-anilino-5-sulfonaphthalen-1-yl)diazenyl]-5-hydroxynaphthalene-2,7-disulfonic acid Chemical compound C=12C(O)=CC(S(O)(=O)=O)=CC2=CC(S(O)(=O)=O)=CC=1N=NC(C1=CC=CC(=C11)S(O)(=O)=O)=CC=C1NC1=CC=CC=C1 QFVHZQCOUORWEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OFNXOACBUMGOPC-HZYVHMACSA-N 5'-hydroxystreptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O OFNXOACBUMGOPC-HZYVHMACSA-N 0.000 description 1
- MJZJYWCQPMNPRM-UHFFFAOYSA-N 6,6-dimethyl-1-[3-(2,4,5-trichlorophenoxy)propoxy]-1,6-dihydro-1,3,5-triazine-2,4-diamine Chemical compound CC1(C)N=C(N)N=C(N)N1OCCCOC1=CC(Cl)=C(Cl)C=C1Cl MJZJYWCQPMNPRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100031126 6-phosphogluconolactonase Human genes 0.000 description 1
- 108010029731 6-phosphogluconolactonase Proteins 0.000 description 1
- CJIJXIFQYOPWTF-UHFFFAOYSA-N 7-hydroxycoumarin Natural products O1C(=O)C=CC2=CC(O)=CC=C21 CJIJXIFQYOPWTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZKRFOXLVOKTUTA-KQYNXXCUSA-N 9-(5-phosphoribofuranosyl)-6-mercaptopurine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(NC=NC2=S)=C2N=C1 ZKRFOXLVOKTUTA-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 108010066676 Abrin Proteins 0.000 description 1
- 102100028249 Acetyl-coenzyme A transporter 1 Human genes 0.000 description 1
- 206010069754 Acquired gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 102100032605 Adhesion G protein-coupled receptor B1 Human genes 0.000 description 1
- OMNVYXHOSHNURL-WPRPVWTQSA-N Ala-Phe Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 OMNVYXHOSHNURL-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 101800002638 Alpha-amanitin Proteins 0.000 description 1
- 102100022749 Aminopeptidase N Human genes 0.000 description 1
- 206010073478 Anaplastic large-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 102100034594 Angiopoietin-1 Human genes 0.000 description 1
- 102100034608 Angiopoietin-2 Human genes 0.000 description 1
- 201000003076 Angiosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 101100004408 Arabidopsis thaliana BIG gene Proteins 0.000 description 1
- 101001005269 Arabidopsis thaliana Ceramide synthase 1 LOH3 Proteins 0.000 description 1
- 101001005312 Arabidopsis thaliana Ceramide synthase LOH1 Proteins 0.000 description 1
- 101100455868 Arabidopsis thaliana MKK2 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000002109 Argyria Diseases 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 102100027205 B-cell antigen receptor complex-associated protein alpha chain Human genes 0.000 description 1
- 102100038080 B-cell receptor CD22 Human genes 0.000 description 1
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 description 1
- 239000012664 BCL-2-inhibitor Substances 0.000 description 1
- 108090000363 Bacterial Luciferases Proteins 0.000 description 1
- 108091032955 Bacterial small RNA Proteins 0.000 description 1
- 229940123711 Bcl2 inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102100026189 Beta-galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100024217 CAMPATH-1 antigen Human genes 0.000 description 1
- 108010049990 CD13 Antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000017420 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Human genes 0.000 description 1
- 108050005493 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Proteins 0.000 description 1
- 102100032912 CD44 antigen Human genes 0.000 description 1
- 108010065524 CD52 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 102000000905 Cadherin Human genes 0.000 description 1
- 108050007957 Cadherin Proteins 0.000 description 1
- 101100355949 Caenorhabditis elegans spr-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101001110283 Canis lupus familiaris Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1 Proteins 0.000 description 1
- 101710128063 Carbohydrate oxidase Proteins 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Chemical group 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N Carmustine Chemical compound ClCCNC(=O)N(N=O)CCCl DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000712 Cathepsin B Proteins 0.000 description 1
- 102000004225 Cathepsin B Human genes 0.000 description 1
- 102000003902 Cathepsin C Human genes 0.000 description 1
- 108090000267 Cathepsin C Proteins 0.000 description 1
- 102000003908 Cathepsin D Human genes 0.000 description 1
- 108090000258 Cathepsin D Proteins 0.000 description 1
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100034231 Cell surface A33 antigen Human genes 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 102000004003 Chemokine CCL11 Human genes 0.000 description 1
- 108010082548 Chemokine CCL11 Proteins 0.000 description 1
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 description 1
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 description 1
- 208000005243 Chondrosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 108010038447 Chromogranin A Proteins 0.000 description 1
- 102100031186 Chromogranin-A Human genes 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 102100032768 Complement receptor type 2 Human genes 0.000 description 1
- 108010026206 Conalbumin Proteins 0.000 description 1
- 241000759568 Corixa Species 0.000 description 1
- 102100030291 Cornifin-B Human genes 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 108010024986 Cyclin-Dependent Kinase 2 Proteins 0.000 description 1
- 108010009392 Cyclin-Dependent Kinase Inhibitor p16 Proteins 0.000 description 1
- 108010016788 Cyclin-Dependent Kinase Inhibitor p21 Proteins 0.000 description 1
- 102100024457 Cyclin-dependent kinase 9 Human genes 0.000 description 1
- 102100033270 Cyclin-dependent kinase inhibitor 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010037462 Cyclooxygenase 2 Proteins 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 101710112752 Cytotoxin Proteins 0.000 description 1
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- 101150074155 DHFR gene Proteins 0.000 description 1
- 239000012623 DNA damaging agent Substances 0.000 description 1
- 102100033587 DNA topoisomerase 2-alpha Human genes 0.000 description 1
- 101100481404 Danio rerio tie1 gene Proteins 0.000 description 1
- WEAHRLBPCANXCN-UHFFFAOYSA-N Daunomycin Natural products CCC1(O)CC(OC2CC(N)C(O)C(C)O2)c3cc4C(=O)c5c(OC)cccc5C(=O)c4c(O)c3C1 WEAHRLBPCANXCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N Deuterated methanol Chemical compound [2H]OC([2H])([2H])[2H] OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 description 1
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 description 1
- 101100485279 Drosophila melanogaster emb gene Proteins 0.000 description 1
- 101100136092 Drosophila melanogaster peng gene Proteins 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 102100036254 E3 SUMO-protein ligase PIAS2 Human genes 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 description 1
- 206010014733 Endometrial cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000006168 Ewing Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 108091029865 Exogenous DNA Proteins 0.000 description 1
- 102100029095 Exportin-1 Human genes 0.000 description 1
- 102000015212 Fas Ligand Protein Human genes 0.000 description 1
- 108010039471 Fas Ligand Protein Proteins 0.000 description 1
- 102000008857 Ferritin Human genes 0.000 description 1
- 108050000784 Ferritin Proteins 0.000 description 1
- 238000008416 Ferritin Methods 0.000 description 1
- 108010088842 Fibrinolysin Proteins 0.000 description 1
- 102000003971 Fibroblast Growth Factor 1 Human genes 0.000 description 1
- 108090000386 Fibroblast Growth Factor 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100027842 Fibroblast growth factor receptor 3 Human genes 0.000 description 1
- 101710182396 Fibroblast growth factor receptor 3 Proteins 0.000 description 1
- 102100037362 Fibronectin Human genes 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- 201000008808 Fibrosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 239000004606 Fillers/Extenders Substances 0.000 description 1
- 108090000331 Firefly luciferases Proteins 0.000 description 1
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100035144 Folate receptor beta Human genes 0.000 description 1
- 238000005033 Fourier transform infrared spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 102000017700 GABRP Human genes 0.000 description 1
- 108010015133 Galactose oxidase Proteins 0.000 description 1
- 102100025614 Galectin-related protein Human genes 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 206010051066 Gastrointestinal stromal tumour Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 1
- 108010073178 Glucan 1,4-alpha-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- 102100022624 Glucoamylase Human genes 0.000 description 1
- 102000058058 Glucose Transporter Type 2 Human genes 0.000 description 1
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 1
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 1
- 108010018962 Glucosephosphate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 102100022631 Glutamate receptor ionotropic, NMDA 2C Human genes 0.000 description 1
- 108010026389 Gramicidin Proteins 0.000 description 1
- 102000009465 Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010009202 Growth Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 208000017891 HER2 positive breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000001258 Hemangiosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000796780 Homo sapiens Adhesion G protein-coupled receptor B1 Proteins 0.000 description 1
- 101000924552 Homo sapiens Angiopoietin-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000924533 Homo sapiens Angiopoietin-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000914489 Homo sapiens B-cell antigen receptor complex-associated protein alpha chain Proteins 0.000 description 1
- 101000884305 Homo sapiens B-cell receptor CD22 Proteins 0.000 description 1
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 description 1
- 101000868273 Homo sapiens CD44 antigen Proteins 0.000 description 1
- 101100273730 Homo sapiens CD5 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000996823 Homo sapiens Cell surface A33 antigen Proteins 0.000 description 1
- 101000941929 Homo sapiens Complement receptor type 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000702152 Homo sapiens Cornifin-B Proteins 0.000 description 1
- 101000980930 Homo sapiens Cyclin-dependent kinase 9 Proteins 0.000 description 1
- 101000801505 Homo sapiens DNA topoisomerase 2-alpha Proteins 0.000 description 1
- 101001074629 Homo sapiens E3 SUMO-protein ligase PIAS2 Proteins 0.000 description 1
- 101000851181 Homo sapiens Epidermal growth factor receptor Proteins 0.000 description 1
- 101001023204 Homo sapiens Folate receptor beta Proteins 0.000 description 1
- 101000822394 Homo sapiens Gamma-aminobutyric acid receptor subunit pi Proteins 0.000 description 1
- 101001056180 Homo sapiens Induced myeloid leukemia cell differentiation protein Mcl-1 Proteins 0.000 description 1
- 101001015006 Homo sapiens Integrin beta-4 Proteins 0.000 description 1
- 101000739159 Homo sapiens Mammaglobin-A Proteins 0.000 description 1
- 101000739168 Homo sapiens Mammaglobin-B Proteins 0.000 description 1
- 101000576802 Homo sapiens Mesothelin Proteins 0.000 description 1
- 101000669513 Homo sapiens Metalloproteinase inhibitor 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000628535 Homo sapiens Metalloreductase STEAP2 Proteins 0.000 description 1
- 101001133056 Homo sapiens Mucin-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000934338 Homo sapiens Myeloid cell surface antigen CD33 Proteins 0.000 description 1
- 101000581981 Homo sapiens Neural cell adhesion molecule 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000613565 Homo sapiens PRKC apoptosis WT1 regulator protein Proteins 0.000 description 1
- 101001095231 Homo sapiens Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase D Proteins 0.000 description 1
- 101000595751 Homo sapiens Phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate 3-kinase catalytic subunit gamma isoform Proteins 0.000 description 1
- 101001073422 Homo sapiens Pigment epithelium-derived factor Proteins 0.000 description 1
- 101000595923 Homo sapiens Placenta growth factor Proteins 0.000 description 1
- 101000605403 Homo sapiens Plasminogen Proteins 0.000 description 1
- 101001116302 Homo sapiens Platelet endothelial cell adhesion molecule Proteins 0.000 description 1
- 101001096065 Homo sapiens Plexin domain-containing protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001056707 Homo sapiens Proepiregulin Proteins 0.000 description 1
- 101000904173 Homo sapiens Progonadoliberin-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000684208 Homo sapiens Prolyl endopeptidase FAP Proteins 0.000 description 1
- 101001136592 Homo sapiens Prostate stem cell antigen Proteins 0.000 description 1
- 101000994437 Homo sapiens Protein jagged-1 Proteins 0.000 description 1
- 101001110313 Homo sapiens Ras-related C3 botulinum toxin substrate 2 Proteins 0.000 description 1
- 101001132698 Homo sapiens Retinoic acid receptor beta Proteins 0.000 description 1
- 101000739195 Homo sapiens Secretoglobin family 1D member 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000716809 Homo sapiens Secretogranin-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000863882 Homo sapiens Sialic acid-binding Ig-like lectin 7 Proteins 0.000 description 1
- 101000863884 Homo sapiens Sialic acid-binding Ig-like lectin 8 Proteins 0.000 description 1
- 101000863883 Homo sapiens Sialic acid-binding Ig-like lectin 9 Proteins 0.000 description 1
- 101001133085 Homo sapiens Sialomucin core protein 24 Proteins 0.000 description 1
- 101000716102 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD4 Proteins 0.000 description 1
- 101000934341 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD5 Proteins 0.000 description 1
- 101000946843 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Proteins 0.000 description 1
- 101000633605 Homo sapiens Thrombospondin-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000633617 Homo sapiens Thrombospondin-4 Proteins 0.000 description 1
- 101000796134 Homo sapiens Thymidine phosphorylase Proteins 0.000 description 1
- 101001050288 Homo sapiens Transcription factor Jun Proteins 0.000 description 1
- 101000635938 Homo sapiens Transforming growth factor beta-1 proprotein Proteins 0.000 description 1
- 101000801701 Homo sapiens Tropomyosin alpha-1 chain Proteins 0.000 description 1
- 101000851892 Homo sapiens Tropomyosin beta chain Proteins 0.000 description 1
- 101000851376 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Proteins 0.000 description 1
- 101000742596 Homo sapiens Vascular endothelial growth factor C Proteins 0.000 description 1
- 101000851018 Homo sapiens Vascular endothelial growth factor receptor 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000868549 Homo sapiens Voltage-dependent calcium channel gamma-like subunit Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 102000009786 Immunoglobulin Constant Regions Human genes 0.000 description 1
- 108010009817 Immunoglobulin Constant Regions Proteins 0.000 description 1
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 description 1
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 1
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 1
- 102100026539 Induced myeloid leukemia cell differentiation protein Mcl-1 Human genes 0.000 description 1
- 101000668058 Infectious salmon anemia virus (isolate Atlantic salmon/Norway/810/9/99) RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit Proteins 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 102000003781 Inhibitor of growth protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 108090000191 Inhibitor of growth protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 108010008212 Integrin alpha4beta1 Proteins 0.000 description 1
- 102100033000 Integrin beta-4 Human genes 0.000 description 1
- 108010022222 Integrin beta1 Proteins 0.000 description 1
- 102000012355 Integrin beta1 Human genes 0.000 description 1
- 108010020950 Integrin beta3 Proteins 0.000 description 1
- 102000008607 Integrin beta3 Human genes 0.000 description 1
- 108010064593 Intercellular Adhesion Molecule-1 Proteins 0.000 description 1
- 102100037877 Intercellular adhesion molecule 1 Human genes 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 description 1
- 102000003996 Interferon-beta Human genes 0.000 description 1
- 208000007766 Kaposi sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 108010076876 Keratins Proteins 0.000 description 1
- 102000011782 Keratins Human genes 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 102000010638 Kinesin Human genes 0.000 description 1
- 108010063296 Kinesin Proteins 0.000 description 1
- FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N L-Phenylalanyl-L-lysin Natural products NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N L-citrulline Chemical compound NC(=O)NCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 101000844802 Lacticaseibacillus rhamnosus Teichoic acid D-alanyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 102100038609 Lactoperoxidase Human genes 0.000 description 1
- 108010023244 Lactoperoxidase Proteins 0.000 description 1
- 102100038269 Large neutral amino acids transporter small subunit 3 Human genes 0.000 description 1
- 208000032004 Large-Cell Anaplastic Lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000018142 Leiomyosarcoma Diseases 0.000 description 1
- NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N Lidocaine Chemical compound CCN(CC)CC(=O)NC1=C(C)C=CC=C1C NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 description 1
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 description 1
- 108010031030 Mammaglobin A Proteins 0.000 description 1
- 108010031029 Mammaglobin B Proteins 0.000 description 1
- 229930126263 Maytansine Natural products 0.000 description 1
- 102100025096 Mesothelin Human genes 0.000 description 1
- 102100039364 Metalloproteinase inhibitor 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100026711 Metalloreductase STEAP2 Human genes 0.000 description 1
- 101000726683 Metarhizium anisopliae Cuticle-degrading protease Proteins 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- VFKZTMPDYBFSTM-KVTDHHQDSA-N Mitobronitol Chemical compound BrC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CBr VFKZTMPDYBFSTM-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 102100034256 Mucin-1 Human genes 0.000 description 1
- 108010063954 Mucins Proteins 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 101100481406 Mus musculus Tie1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100026784 Myelin proteolipid protein Human genes 0.000 description 1
- 101710094913 Myelin proteolipid protein Proteins 0.000 description 1
- 108010013731 Myelin-Associated Glycoprotein Proteins 0.000 description 1
- 102000017099 Myelin-Associated Glycoprotein Human genes 0.000 description 1
- 201000003793 Myelodysplastic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- LFZAGIJXANFPFN-UHFFFAOYSA-N N-[3-[4-(3-methyl-5-propan-2-yl-1,2,4-triazol-4-yl)piperidin-1-yl]-1-thiophen-2-ylpropyl]acetamide Chemical compound C(C)(C)C1=NN=C(N1C1CCN(CC1)CCC(C=1SC=CC=1)NC(C)=O)C LFZAGIJXANFPFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N N-methyl-guanidine Natural products CNC(N)=N CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 108091008637 NR5A Proteins 0.000 description 1
- 108091008642 NR6A Proteins 0.000 description 1
- 208000001894 Nasopharyngeal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010061306 Nasopharyngeal cancer Diseases 0.000 description 1
- RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N Ndelta-carbamoyl-DL-ornithine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=O RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 108010032605 Nerve Growth Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100027347 Neural cell adhesion molecule 1 Human genes 0.000 description 1
- 208000005890 Neuroma Diseases 0.000 description 1
- 101100030361 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) pph-3 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 108091033411 PCA3 Proteins 0.000 description 1
- 102100040853 PRKC apoptosis WT1 regulator protein Human genes 0.000 description 1
- 102000014160 PTEN Phosphohydrolase Human genes 0.000 description 1
- 108010011536 PTEN Phosphohydrolase Proteins 0.000 description 1
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 108010055817 Peptide-N4-(N-acetyl-beta-glucosaminyl) Asparagine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 102000000447 Peptide-N4-(N-acetyl-beta-glucosaminyl) Asparagine Amidase Human genes 0.000 description 1
- 102100037827 Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase D Human genes 0.000 description 1
- 208000031839 Peripheral nerve sheath tumour malignant Diseases 0.000 description 1
- 102100036052 Phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate 3-kinase catalytic subunit gamma isoform Human genes 0.000 description 1
- 102100035846 Pigment epithelium-derived factor Human genes 0.000 description 1
- 102100035194 Placenta growth factor Human genes 0.000 description 1
- 102100038124 Plasminogen Human genes 0.000 description 1
- 102100024616 Platelet endothelial cell adhesion molecule Human genes 0.000 description 1
- 108010038512 Platelet-Derived Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000010780 Platelet-Derived Growth Factor Human genes 0.000 description 1
- 102100037891 Plexin domain-containing protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 229920002562 Polyethylene Glycol 3350 Polymers 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 102100025067 Potassium voltage-gated channel subfamily H member 4 Human genes 0.000 description 1
- 101710163352 Potassium voltage-gated channel subfamily H member 4 Proteins 0.000 description 1
- 102100025498 Proepiregulin Human genes 0.000 description 1
- 102100024028 Progonadoliberin-1 Human genes 0.000 description 1
- 102100023832 Prolyl endopeptidase FAP Human genes 0.000 description 1
- 108050003267 Prostaglandin G/H synthase 2 Proteins 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 102100036735 Prostate stem cell antigen Human genes 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 229940079156 Proteasome inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 101710151715 Protein 7 Proteins 0.000 description 1
- 102100032702 Protein jagged-1 Human genes 0.000 description 1
- 101000762949 Pseudomonas aeruginosa (strain ATCC 15692 / DSM 22644 / CIP 104116 / JCM 14847 / LMG 12228 / 1C / PRS 101 / PAO1) Exotoxin A Proteins 0.000 description 1
- 102100022129 Ras-related C3 botulinum toxin substrate 2 Human genes 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 108010081750 Reticulin Proteins 0.000 description 1
- 102100033909 Retinoic acid receptor beta Human genes 0.000 description 1
- 108091008771 Rev-ErbA proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010039491 Ricin Proteins 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 108091006299 SLC2A2 Proteins 0.000 description 1
- 108091006570 SLC33A1 Proteins 0.000 description 1
- 108091006993 SLC43A1 Proteins 0.000 description 1
- 101100485284 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) CRM1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100037279 Secretoglobin family 1D member 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100020867 Secretogranin-1 Human genes 0.000 description 1
- 108010089417 Sex Hormone-Binding Globulin Proteins 0.000 description 1
- 102100030758 Sex hormone-binding globulin Human genes 0.000 description 1
- 108010029176 Sialic Acid Binding Ig-like Lectin 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100029957 Sialic acid-binding Ig-like lectin 5 Human genes 0.000 description 1
- 101710110535 Sialic acid-binding Ig-like lectin 5 Proteins 0.000 description 1
- 102100029946 Sialic acid-binding Ig-like lectin 7 Human genes 0.000 description 1
- 102100029964 Sialic acid-binding Ig-like lectin 8 Human genes 0.000 description 1
- 102100029965 Sialic acid-binding Ig-like lectin 9 Human genes 0.000 description 1
- 102100032855 Sialoadhesin Human genes 0.000 description 1
- 102100034258 Sialomucin core protein 24 Human genes 0.000 description 1
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 101000668858 Spinacia oleracea 30S ribosomal protein S1, chloroplastic Proteins 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 101000898746 Streptomyces clavuligerus Clavaminate synthase 1 Proteins 0.000 description 1
- ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N Streptozotocin Natural products O=NN(C)C(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 108091027544 Subgenomic mRNA Proteins 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 102100036011 T-cell surface glycoprotein CD4 Human genes 0.000 description 1
- 102100025244 T-cell surface glycoprotein CD5 Human genes 0.000 description 1
- 102100034922 T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Human genes 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108091008645 TLX/PNR Proteins 0.000 description 1
- 102000003623 TRPC6 Human genes 0.000 description 1
- 229940123237 Taxane Drugs 0.000 description 1
- FOCVUCIESVLUNU-UHFFFAOYSA-N Thiotepa Chemical compound C1CN1P(N1CC1)(=S)N1CC1 FOCVUCIESVLUNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100029529 Thrombospondin-2 Human genes 0.000 description 1
- 102100029219 Thrombospondin-4 Human genes 0.000 description 1
- 102100031372 Thymidine phosphorylase Human genes 0.000 description 1
- 102000003978 Tissue Plasminogen Activator Human genes 0.000 description 1
- 108090000373 Tissue Plasminogen Activator Proteins 0.000 description 1
- 101710183280 Topoisomerase Proteins 0.000 description 1
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 description 1
- 102100023132 Transcription factor Jun Human genes 0.000 description 1
- 102100030742 Transforming growth factor beta-1 proprotein Human genes 0.000 description 1
- 108050001421 Transient receptor potential channel, canonical 6 Proteins 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 102100033632 Tropomyosin alpha-1 chain Human genes 0.000 description 1
- 102100036471 Tropomyosin beta chain Human genes 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 108060008683 Tumor Necrosis Factor Receptor Proteins 0.000 description 1
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 102100033725 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 16 Human genes 0.000 description 1
- 102100036857 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Human genes 0.000 description 1
- GBOGMAARMMDZGR-UHFFFAOYSA-N UNPD149280 Natural products N1C(=O)C23OC(=O)C=CC(O)CCCC(C)CC=CC3C(O)C(=C)C(C)C2C1CC1=CC=CC=C1 GBOGMAARMMDZGR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010092464 Urate Oxidase Proteins 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108010073919 Vascular Endothelial Growth Factor D Proteins 0.000 description 1
- 102000009519 Vascular Endothelial Growth Factor D Human genes 0.000 description 1
- 108010053099 Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-2 Proteins 0.000 description 1
- 102100038232 Vascular endothelial growth factor C Human genes 0.000 description 1
- 102100033178 Vascular endothelial growth factor receptor 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100033177 Vascular endothelial growth factor receptor 2 Human genes 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 102100032336 Voltage-dependent calcium channel gamma-like subunit Human genes 0.000 description 1
- 101150094313 XPO1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100033220 Xanthine oxidase Human genes 0.000 description 1
- 108010093894 Xanthine oxidase Proteins 0.000 description 1
- VWQVUPCCIRVNHF-OUBTZVSYSA-N Yttrium-90 Chemical compound [90Y] VWQVUPCCIRVNHF-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N [4-[[(2S)-5-(carbamoylamino)-2-[[(2S)-2-[6-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)hexanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]pentanoyl]amino]phenyl]methyl N-[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-3-[[(1S,2R)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-methylamino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]-N-methylcarbamate Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H]([C@@H](CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)c1ccccc1)OC)N(C)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)OCc1ccc(NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCCN2C(=O)CCC2=O)C(C)C)cc1)C(C)C IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N 0.000 description 1
- IKWTVSLWAPBBKU-UHFFFAOYSA-N a1010_sial Chemical compound O=[As]O[As]=O IKWTVSLWAPBBKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000446 abciximab Drugs 0.000 description 1
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 238000011374 additional therapy Methods 0.000 description 1
- 239000000362 adenosine triphosphatase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 108010011559 alanylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 229960002459 alefacept Drugs 0.000 description 1
- 150000001345 alkine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- CIORWBWIBBPXCG-SXZCQOKQSA-N alpha-amanitin Chemical compound O=C1N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N2C[C@H](O)C[C@H]2C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)[C@@H](O)CO)C(=O)N[C@@H](C2)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@H]1C[S@@](=O)C1=C2C2=CC=C(O)C=C2N1 CIORWBWIBBPXCG-SXZCQOKQSA-N 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N anhydrous guanidine Natural products NC(N)=N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003092 anti-cytokine Effects 0.000 description 1
- 230000000340 anti-metabolite Effects 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 229940100197 antimetabolite Drugs 0.000 description 1
- 239000002256 antimetabolite Substances 0.000 description 1
- 239000003080 antimitotic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- 229910052785 arsenic Inorganic materials 0.000 description 1
- RQNWIZPPADIBDY-UHFFFAOYSA-N arsenic atom Chemical compound [As] RQNWIZPPADIBDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000413 arsenic oxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960002594 arsenic trioxide Drugs 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- RYXHOMYVWAEKHL-OUBTZVSYSA-N astatine-211 Chemical compound [211At] RYXHOMYVWAEKHL-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 102000012740 beta Adrenergic Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010079452 beta Adrenergic Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 230000008512 biological response Effects 0.000 description 1
- 230000008276 biophysical mechanism Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- JCXGWMGPZLAOME-RNFDNDRNSA-N bismuth-213 Chemical compound [213Bi] JCXGWMGPZLAOME-RNFDNDRNSA-N 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- RSIHSRDYCUFFLA-DYKIIFRCSA-N boldenone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 RSIHSRDYCUFFLA-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 229960000455 brentuximab vedotin Drugs 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 229960002092 busulfan Drugs 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- FAKRSMQSSFJEIM-RQJHMYQMSA-N captopril Chemical compound SC[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O FAKRSMQSSFJEIM-RQJHMYQMSA-N 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 238000001460 carbon-13 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 229960005243 carmustine Drugs 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 230000001925 catabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- 229960005395 cetuximab Drugs 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- NDAYQJDHGXTBJL-MWWSRJDJSA-N chembl557217 Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC=O)C(C)C)CC(C)C)C(=O)NCCO)=CNC2=C1 NDAYQJDHGXTBJL-MWWSRJDJSA-N 0.000 description 1
- 238000012412 chemical coupling Methods 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 1
- 235000013477 citrulline Nutrition 0.000 description 1
- 229950002334 clenoliximab Drugs 0.000 description 1
- 230000008045 co-localization Effects 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 229960001338 colchicine Drugs 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000011443 conventional therapy Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 238000002447 crystallographic data Methods 0.000 description 1
- GICLSALZHXCILJ-UHFFFAOYSA-N ctk5a5089 Chemical compound NCC(O)=O.NCC(O)=O GICLSALZHXCILJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000684 cytarabine Drugs 0.000 description 1
- GBOGMAARMMDZGR-JREHFAHYSA-N cytochalasin B Natural products C[C@H]1CCC[C@@H](O)C=CC(=O)O[C@@]23[C@H](C=CC1)[C@H](O)C(=C)[C@@H](C)[C@@H]2[C@H](Cc4ccccc4)NC3=O GBOGMAARMMDZGR-JREHFAHYSA-N 0.000 description 1
- GBOGMAARMMDZGR-TYHYBEHESA-N cytochalasin B Chemical compound C([C@H]1[C@@H]2[C@@H](C([C@@H](O)[C@@H]3/C=C/C[C@H](C)CCC[C@@H](O)/C=C/C(=O)O[C@@]23C(=O)N1)=C)C)C1=CC=CC=C1 GBOGMAARMMDZGR-TYHYBEHESA-N 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 1
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 229960003901 dacarbazine Drugs 0.000 description 1
- 125000001295 dansyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(N(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])=C2C([H])=C([H])C([H])=C(C2=C1[H])S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 238000013480 data collection Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- RSIHSRDYCUFFLA-UHFFFAOYSA-N dehydrotestosterone Natural products O=C1C=CC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)O)C4C3CCC2=C1 RSIHSRDYCUFFLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000412 dendrimer Substances 0.000 description 1
- 239000002274 desiccant Substances 0.000 description 1
- 230000000368 destabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000011903 deuterated solvents Substances 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K dihydroxy(stearato)aluminium Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[Al](O)O UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 125000005594 diketone group Chemical group 0.000 description 1
- SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N dimethylaminoamidine Natural products CN(C)C(N)=N SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 238000000132 electrospray ionisation Methods 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- RDYMFSUJUZBWLH-UHFFFAOYSA-N endosulfan Chemical compound C12COS(=O)OCC2C2(Cl)C(Cl)=C(Cl)C1(Cl)C2(Cl)Cl RDYMFSUJUZBWLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 229950009760 epratuzumab Drugs 0.000 description 1
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 description 1
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 1
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 1
- 229960005420 etoposide Drugs 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 108700002148 exportin 1 Proteins 0.000 description 1
- 229940126864 fibroblast growth factor Drugs 0.000 description 1
- 239000010408 film Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 229940044627 gamma-interferon Drugs 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000011243 gastrointestinal stromal tumor Diseases 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 229960000578 gemtuzumab Drugs 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 1
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 1
- 125000003827 glycol group Chemical group 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 108010067216 glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 229960001743 golimumab Drugs 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 239000003481 heat shock protein 90 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000003276 histone deacetylase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 150000007857 hydrazones Chemical class 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Chemical group 0.000 description 1
- OFNXOACBUMGOPC-UHFFFAOYSA-N hydroxystreptomycin Natural products CNC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(C=O)(O)C(CO)OC1OC1C(N=C(N)N)C(O)C(N=C(N)N)C(O)C1O OFNXOACBUMGOPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003445 idelalisib Drugs 0.000 description 1
- YKLIKGKUANLGSB-HNNXBMFYSA-N idelalisib Chemical compound C1([C@@H](NC=2[C]3N=CN=C3N=CN=2)CC)=NC2=CC=CC(F)=C2C(=O)N1C1=CC=CC=C1 YKLIKGKUANLGSB-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 239000000367 immunologic factor Substances 0.000 description 1
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001861 immunosuppressant effect Effects 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 229940055742 indium-111 Drugs 0.000 description 1
- APFVFJFRJDLVQX-AHCXROLUSA-N indium-111 Chemical compound [111In] APFVFJFRJDLVQX-AHCXROLUSA-N 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 108010021518 integrin beta5 Proteins 0.000 description 1
- 108010021315 integrin beta7 Proteins 0.000 description 1
- 239000000138 intercalating agent Substances 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 229960001388 interferon-beta Drugs 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- PGLTVOMIXTUURA-UHFFFAOYSA-N iodoacetamide Chemical compound NC(=O)CI PGLTVOMIXTUURA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 229960005386 ipilimumab Drugs 0.000 description 1
- OKPOKMCPHKVCPP-UHFFFAOYSA-N isoorientaline Natural products C1=C(O)C(OC)=CC(CC2C3=CC(OC)=C(O)C=C3CCN2C)=C1 OKPOKMCPHKVCPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 1
- 229940043355 kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 229940057428 lactoperoxidase Drugs 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 229960004194 lidocaine Drugs 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 206010024627 liposarcoma Diseases 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 108091008780 liver X receptor-like Proteins 0.000 description 1
- 102000027528 liver X receptor-like Human genes 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229960002247 lomustine Drugs 0.000 description 1
- WLHQHAUOOXYABV-UHFFFAOYSA-N lornoxicam Chemical compound OC=1C=2SC(Cl)=CC=2S(=O)(=O)N(C)C=1C(=O)NC1=CC=CC=N1 WLHQHAUOOXYABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- OHSVLFRHMCKCQY-NJFSPNSNSA-N lutetium-177 Chemical compound [177Lu] OHSVLFRHMCKCQY-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 230000006674 lysosomal degradation Effects 0.000 description 1
- 230000002132 lysosomal effect Effects 0.000 description 1
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 229940124302 mTOR inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 201000009020 malignant peripheral nerve sheath tumor Diseases 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 239000003628 mammalian target of rapamycin inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229950008001 matuzumab Drugs 0.000 description 1
- 231100000682 maximum tolerated dose Toxicity 0.000 description 1
- WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N maytansine Chemical compound CO[C@@H]([C@@]1(O)C[C@](OC(=O)N1)([C@H]([C@@H]1O[C@@]1(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](C)N(C)C(C)=O)CC(=O)N1C)C)[H])\C=C\C=C(C)\CC2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 229960004961 mechlorethamine Drugs 0.000 description 1
- HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N mechlorethamine Chemical compound ClCCN(C)CCCl HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010027191 meningioma Diseases 0.000 description 1
- 229960001428 mercaptopurine Drugs 0.000 description 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 108010029942 microperoxidase Proteins 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 229960005485 mitobronitol Drugs 0.000 description 1
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 1
- KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N mitoxantrone Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C(NCCNCCO)=CC=C2NCCNCCO KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001156 mitoxantrone Drugs 0.000 description 1
- 229950003063 mitumomab Drugs 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- 238000001823 molecular biology technique Methods 0.000 description 1
- 230000004001 molecular interaction Effects 0.000 description 1
- 108010093470 monomethyl auristatin E Proteins 0.000 description 1
- 229960005027 natalizumab Drugs 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 229940053128 nerve growth factor Drugs 0.000 description 1
- 208000029974 neurofibrosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 229950010203 nimotuzumab Drugs 0.000 description 1
- 210000004882 non-tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000030147 nuclear export Effects 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 230000008266 oncogenic mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000000399 optical microscopy Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 201000008968 osteosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 229950007318 ozogamicin Drugs 0.000 description 1
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229960001972 panitumumab Drugs 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 230000006320 pegylation Effects 0.000 description 1
- 229960002621 pembrolizumab Drugs 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 230000008823 permeabilization Effects 0.000 description 1
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 229960003742 phenol Drugs 0.000 description 1
- LFGREXWGYUGZLY-UHFFFAOYSA-N phosphoryl Chemical group [P]=O LFGREXWGYUGZLY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003757 phosphotransferase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N potassium tert-butoxide Chemical compound [K+].CC(C)(C)[O-] LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000004262 preparative liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000000861 pro-apoptotic effect Effects 0.000 description 1
- 229960004919 procaine Drugs 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 229960003712 propranolol Drugs 0.000 description 1
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 1
- 239000003207 proteasome inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000005588 protonation Effects 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 229950010131 puromycin Drugs 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- 239000000700 radioactive tracer Substances 0.000 description 1
- 239000012217 radiopharmaceutical Substances 0.000 description 1
- 229940121896 radiopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 230000002799 radiopharmaceutical effect Effects 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 231100001258 radiotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000002708 random mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 229910052761 rare earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002910 rare earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- QEVHRUUCFGRFIF-MDEJGZGSSA-N reserpine Chemical compound O([C@H]1[C@@H]([C@H]([C@H]2C[C@@H]3C4=C(C5=CC=C(OC)C=C5N4)CCN3C[C@H]2C1)C(=O)OC)OC)C(=O)C1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 QEVHRUUCFGRFIF-MDEJGZGSSA-N 0.000 description 1
- 229960003147 reserpine Drugs 0.000 description 1
- 239000013557 residual solvent Substances 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- JTQHYPFKHZLTSH-UHFFFAOYSA-N reticulin Natural products COC1CC(OC2C(CO)OC(OC3C(O)CC(OC4C(C)OC(CC4OC)OC5CCC6(C)C7CCC8(C)C(CCC8(O)C7CC=C6C5)C(C)O)OC3C)C(O)C2OC)OC(C)C1O JTQHYPFKHZLTSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 201000009410 rhabdomyosarcoma Diseases 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 description 1
- 102220094017 rs876659369 Human genes 0.000 description 1
- 239000012146 running buffer Substances 0.000 description 1
- HNMATTJJEPZZMM-BPKVFSPJSA-N s-[(2r,3s,4s,6s)-6-[[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-[(2s,4s,5s)-5-[acetyl(ethyl)amino]-4-methoxyoxan-2-yl]oxy-6-[[(2s,5z,9r,13e)-13-[2-[[4-[(2e)-2-[1-[4-(4-amino-4-oxobutoxy)phenyl]ethylidene]hydrazinyl]-2-methyl-4-oxobutan-2-yl]disulfanyl]ethylidene]-9-hydroxy-12-(m Chemical compound C1[C@H](OC)[C@@H](N(CC)C(C)=O)CO[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@@H]2C\3=C(NC(=O)OC)C(=O)C[C@@](C/3=C/CSSC(C)(C)CC(=O)N\N=C(/C)C=3C=CC(OCCCC(N)=O)=CC=3)(O)C#C\C=C/C#C2)O[C@H](C)[C@@H](NO[C@@H]2O[C@H](C)[C@@H](SC(=O)C=3C(=C(OC)C(O[C@H]4[C@@H]([C@H](OC)[C@@H](O)[C@H](C)O4)O)=C(I)C=3C)OC)[C@@H](O)C2)[C@@H]1O HNMATTJJEPZZMM-BPKVFSPJSA-N 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 238000003998 size exclusion chromatography high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 230000037439 somatic mutation Effects 0.000 description 1
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000012414 sterilization procedure Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 229960001052 streptozocin Drugs 0.000 description 1
- ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N streptozocin Chemical compound O=NN(C)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 230000008093 supporting effect Effects 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 206010042863 synovial sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 229940037128 systemic glucocorticoids Drugs 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- ISXSCDLOGDJUNJ-UHFFFAOYSA-N tert-butyl prop-2-enoate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)C=C ISXSCDLOGDJUNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091008646 testicular receptors Proteins 0.000 description 1
- 229960002372 tetracaine Drugs 0.000 description 1
- GKCBAIGFKIBETG-UHFFFAOYSA-N tetracaine Chemical compound CCCCNC1=CC=C(C(=O)OCCN(C)C)C=C1 GKCBAIGFKIBETG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UWHCKJMYHZGTIT-UHFFFAOYSA-N tetraethylene glycol Chemical compound OCCOCCOCCOCCO UWHCKJMYHZGTIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100001274 therapeutic index Toxicity 0.000 description 1
- 230000004797 therapeutic response Effects 0.000 description 1
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 229960001196 thiotepa Drugs 0.000 description 1
- 208000013077 thyroid gland carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229960003087 tioguanine Drugs 0.000 description 1
- 238000012090 tissue culture technique Methods 0.000 description 1
- 229960000187 tissue plasminogen activator Drugs 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000006276 transfer reaction Methods 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N triammonium citrate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[NH4+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZIBGPFATKBEMQZ-UHFFFAOYSA-N triethylene glycol Chemical compound OCCOCCOCCO ZIBGPFATKBEMQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 102000003298 tumor necrosis factor receptor Human genes 0.000 description 1
- ORHBXUUXSCNDEV-UHFFFAOYSA-N umbelliferone Chemical compound C1=CC(=O)OC2=CC(O)=CC=C21 ORHBXUUXSCNDEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HFTAFOQKODTIJY-UHFFFAOYSA-N umbelliferone Natural products Cc1cc2C=CC(=O)Oc2cc1OCC=CC(C)(C)O HFTAFOQKODTIJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 229960003824 ustekinumab Drugs 0.000 description 1
- 108091008781 vitamin D receptor-like Proteins 0.000 description 1
- 102000027529 vitamin D receptor-like Human genes 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
- 229950004899 yttrium (90y) tacatuzumab tetraxetan Drugs 0.000 description 1
- GRTBAGCGDOYUBE-OUBTZVSYSA-N yttrium-90(3+) Chemical compound [90Y+3] GRTBAGCGDOYUBE-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/44—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material not provided for elsewhere, e.g. haptens, metals, DNA, RNA, amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/32—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against translation products of oncogenes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
- A61K47/542—Carboxylic acids, e.g. a fatty acid or an amino acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
- A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
- A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/0002—Antibodies with enzymatic activity, e.g. abzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/88—Lyases (4.)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/55—Fab or Fab'
Abstract
本发明提供了在疏水空隙中包含以精氨酸对反应性赖氨酸残基(Lys99)之替换(38C2_Arg)的抗体化合物。本发明还提供了包含与38C2_Arg变体抗体中经改造的精氨酸残基位点特异性缀合的载物部分的抗体药物缀合物化合物(ADC)。本发明中还提供了所述化合物的治疗性应用。
Description
相关申请的交叉引用
本专利申请要求美国临时专利申请号62/744,339(2018年10月11日提交)的优先权权益。优先权申请的全部公开内容出于所有目的通过引用整体并入本文。
背景技术
抗体药物缀合物(antibody drug conjugate,ADC)由通过接头与强效细胞毒性载荷连接的单克隆抗体组成。ADC的概念是靶向递送用于选择性(与全身作用(systemic)相反)化学治疗的高细胞毒性药物,导致针对恶性细胞的更高活性和对健康细胞和组织的更低毒性。随着食品和药物管理局(Food and Drug Administration,FDA)批准本妥昔单抗(brentuximab vedotin)用于治疗霍奇金淋巴瘤(Hodgkin’s lymphoma)和间变性大细胞淋巴瘤、曲妥珠单抗依酯(trastuzumab emtansine)用于HER2阳性乳腺癌、奥英妥珠单抗(inotouzumab ozogamicin)用于急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia)以及吉妥单抗奥佐米星(gemtuzumabozogamicin)用于急性髓细胞白血病,该领域已取得了巨大进展。除这四种FDA批准的ADC之外,超过60种ADC目前在临床试验中进行研究。不断增加的ADC传递途径也面临挑战。尽管与化学治疗相比,ADC的治疗指数(即最大耐受剂量与最小有效剂量之比)通常更高(Panowski等.,MAbs 6:34-45,2014),但是ADC也遇到了靶上(on-target)和脱靶(off-target)毒性(Donaghy,MAbs 8:659-671,2016)。四种FDA批准的ADC以及临床中和临床前传递途径的绝大多数ADC将药物与抗体的表面赖氨酸(Lys)或铰链半胱氨酸(Cys)残基随机缀合,从而产生具有不同药物与抗体比(drug-to-antibody ratio,DAR)、药代动力学和药效学的分子物质的复杂混合物。
ADC领域正在朝均质ADC发展,理想情况下,其由具有确定药理学特性的单一分子物质组成。均质ADC是mAb、接头和药物的高度限定的组合物,并且通常具有2或4种DAR。在多个位点特异性缀合策略(包括改造半胱氨酸残基(例如,Junutula等.,Nat.Biotechnol.26:925,2008)、非天然氨基酸(例如,Axup等.,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.109:16101,2012)和酶促结合(例如,Strop等.,Chem.Biol.20:161,2013))中,化学可编程抗体(h38C2)已被用于在一步缀合中产生位点特异性ADC,如Nanna等.,Nat.Commun.8:1112,2017中报道。h38C2是在疏水口袋底部的独特反应性赖氨酸处与1,3-二酮或β-内酰胺结合的人源化抗半抗原抗体。疏水口袋内衬的氨基酸残基包围反应性赖氨酸残基,并导致其pKa异常低,为6.3(Barbas等.,Science 278:2085,1997)。
然而,在本领域中仍需要以化学限定的方式更有效产生具有单个和多个载荷的ADC。本发明针对这一需求和其他未满足的需求。
发明内容
在一个方面中,本发明提供了包含催化性抗体38C2的变体(38C2_Arg)或其抗原结合片段的抗体化合物。相对于抗体38C2,38C2_Arg变体抗体在疏水空隙中包含以精氨酸对反应性赖氨酸残基(Lys99)的替换。在本发明的一些抗体化合物中,催化性抗体是人源化的38C2(h38C2)的变体。
在一些实施方案中,38C2_Arg变体抗体或其抗原结合片段包含分别在SEQ ID NO:1和2中示出的重链可变结构域序列和轻链可变结构域序列。本发明的一些抗体化合物是双可变结构域(dual variable domain,DVD)抗体化合物或其抗原结合片段,其包含(i)38C2_Arg变体或其抗原结合片段,以及(ii)识别目的靶标的第二抗体可变结构域。在这些实施方案的一些中,38C2_Arg变体被定位成比第二可变结构域更靠近抗体化合物中的C端。这些DVD抗体化合物中的一些是在两个抗体臂中均包含Lys99Arg替换的同二聚体分子。一些其他本发明的这些DVD抗体化合物中的一些是仅在一个抗体臂中包含Lys99Arg替换的异二聚体分子。在一些实施方案中,DVD抗体化合物包含双特异性免疫球蛋白分子。本发明的一些DVD抗体化合物包含作为以下的双可变结构域(DVD)化合物抗原结合片段:Fab、Fab’、F(ab’)2、Fv或scFv。这些DVD抗体化合物中的一些是DVD-Fab。
在一些实施方案中,DVD抗体化合物包含嵌合免疫球蛋白序列或人源化免疫球蛋白序列。在一些DVD抗体化合物中,被第二抗体可变结构域识别的目的靶标是肿瘤细胞表面抗原。在这些实施方案的一些中,肿瘤细胞表面抗原可以是HER2、FOLR1、FCMR、CD138、CD79B、PSMA、BCMA、CD38、SLAMF7、Siglec-6、CD70、ROR1或ROR2。
在另一个方面中,本发明提供了抗体药物缀合物(ADC),其包含通过抗体化合物中的反应性精氨酸残基与抗体化合物缀合的至少一个药物部分。在这些ADC中,抗体化合物包含催化性抗体38C2的变体(38C2_Arg)或其抗原结合片段,所述变体在疏水空隙中具有以精氨酸对反应性赖氨酸残基的替换。在一些实施方案中,ADC中的催化性抗体是人源化的38C2(h38C2)的变体。在本发明的一些ADC中,抗体化合物是包含以下的双可变结构域(DVD)化合物或其抗原结合片段:(i)38C2_Arg或其抗原结合片段,以及(ii)识别目的靶标的第二抗体可变结构域。在本发明的一些ADC中,药物部分通过接头部分与抗体化合物缀合。在这些实施方案的一些中,药物部分在与抗体化合物缀合之前用接头部分衍生化。本发明的一些ADC可利用可切割接头使药物部分衍生化。在一些具体实施方案中,所使用的接头可以是苯乙二醛(phenylglyoxal,PGO)、乙二醛(glyoxal,GO)或甲基乙二醛(methylglyoxal,MGO)。
在本发明的一些ADC中,DVD化合物或其抗原结合片段是在两个抗体臂中均包含Lys99Arg替换的同二聚体分子。在一些其他实施方案中,DVD化合物或其抗原结合片段是仅在一个抗体臂中包含Lys99Arg替换的异二聚体分子。在一些ADC中,所使用的抗体化合物是以下的双可变结构域(DVD)抗体化合物抗原结合片段:Fab、Fab’、F(ab’)2、Fv或scFv。在这些实施方案的一些中,所使用的抗体化合物是DVD-Fab。在一些实施方案中,被DVD抗体化合物的第二抗体可变结构域识别的目的靶标是肿瘤细胞表面抗原。在多个实施方案中,肿瘤细胞表面抗原可以是HER2、FOLR1、FCMR、CD138、CD79B、PSMA、BCMA、CD38、SLAMF7、Siglec-6、CD70、ROR1或ROR2。
在本发明的一些ADC中,缀合的药物部分包含细胞毒性剂或siRNA。在这些实施方案的一些中,所使用的细胞毒性剂可以是选自以下中的一种:毒素、化学治疗剂、光吸收剂、抗生素、放射性同位素、经螯合的放射性同位素和溶核酶。在多个实施方案中,缀合的药物部分可包含奥瑞他汀、多拉司他汀、西马多丁、喜树碱、鹅膏蕈碱、美登木素生物碱、吡咯并苯并二氮杂吲哚并苯二氮杂倍癌霉素、endiyne、多柔比星或Fleximer。在一些实施方案中,至少一种缀合的药物部分是单甲基奥瑞他汀F(monomethyl auristatin F,MMAF)。
在本发明的一些ADC中,38C2_Arg或其抗原结合片段包含分别在SEQ ID NO:1和2中示出的重链可变结构域序列和轻链可变结构域序列,并且目的靶标是HER2。在本发明的一些ADC中,抗体化合物是分别包含SEQ ID NO:5和7中所示的重链和轻链序列的DVD-Fab。在本发明的一些ADC中,抗体化合物是分别包含SEQ ID NO:6和7中所示的重链和轻链序列的DVD-IgG1。在一些实施方案中,ADC中的DVD-IgG1化合物是在两个抗体臂中均包含Lys99Arg替换的同二聚体分子。在一些其他实施方案中,DVD-IgG1是仅在一个抗体臂中包含Lys99Arg替换的异二聚体分子。在这些ADC中的一些中,两个不同的药物部分与异二聚体DVD-IgG1分子的两个抗体臂缀合。
在另一个方面中,本发明提供了药物组合物,其包含有效量的本文中所述的抗体药物缀合物和任选地可药用载体。在另一个方面中,本发明提供了用于在对象中治疗癌症的方法。所述方法需要向需要治疗的对象施用本文中所公开的药物组合物。
通过参考说明书和权利要求书的其余部分,可实现对本发明的本质和优点的进一步理解。
附图说明
图1.Lys与Arg的共价缀合。(a)β-内酰胺-半抗原衍生物与mAbh38C2_Lys的反应性Lys残基的半抗原驱动的共价缀合。侧翼Cys和Thr残基的侧链分别显示为R1和R2。(b)苯乙二醛-三唑衍生物与mAb38C2_Arg的反应性Arg残基的半抗原驱动的共价缀合。
图2.h38C2_Arg Fab的晶体结构。(a)Fab形式的h38C2的Lys99Arg突变体的三维结构通过X射线晶体学在分辨率下确定。在该带状图中,轻链可变结构域(Vκ)和重链可变结构域(VH)分别以浅灰色和深灰色显示,并且恒定结构域(Cκ和CH1)以灰色显示。VH的Arg99(箭头)位于Vκ和VH之间的深口袋的底部。(b)h38C2_Arg Fab的口袋的表面渲染模型。Arg99及其胍基的侧链在底部显示。(c)h38C2_Arg(PDB:6DZR)和33F12 Fab(灰色;PDB ID1AXT)的带状图的顶视图叠加。口袋中硫酸根离子的存在(图3a)将h38C2_Arg Fab的VH的β链G’拉向口袋。与33F12的约相比,这种结构上的变化使空腔体积降低至约
图3.h38C2_ArgFab的晶体结构和pH缀合速率曲线。(a)h38C2_Arg Fab的晶体结构。h38C2_Arg Fab的表面渲染模型显示Vκ(浅灰色)与VH(深灰色)之间的深口袋和口袋底部的Arg99胍(质子化的胍基)基团形成了具有游离硫酸根离子的盐桥(品红色)。Vκ(Asn39、Tyr41和Ser94)和VH(Ser106)的口袋内衬残基与硫酸根离子形成了氢键(浅蓝色)。除硫酸根离子之外,袋还填充有八个水分子(未显示)。(b)左:h38C2_Arg上的Arg99的pH缀合速率(表观pKa)图显示了在pH 5.2(pKa)时的转折点。右:六肽(Ac-Tyr-Cys(S-乙酰胺)-Arg99-Thr-Tyr-Phe-OH)上的Arg99的pH缀合速率(表观pKa)图表明该转折点高于11.9(pKa>11.9)。
图4.基于h38C2_Arg的DVD-Fab的产生和表征。(a)DVD-Fab由曲妥珠单抗的可变结构域(外部Fv)和h38C2突变体Lys99Arg(内部Fv,以浅灰色圆圈)以及恒定结构域构成。轻链片段(白色)和重链片段(灰色)二者的内部和外部可变结构域通过短间隔物(ASTKGP)(SEQID NO:3)连接。在通过蛋白A亲和色谱从瞬时转染的Expi293F细胞的上清液中纯化之后,通过非还原(nonreducing,NR)SDS-PAGE和考马斯染色DVD-Fab揭示了预期为约70kDa条带并通过还原(reducing,R)SDS-PAGE和考马斯染色揭示了预期为约35kDa条带。(b)使用方法学的逆醇醛转化测量1μM和2μM时亲本(h38C2_Lys)和突变的(h38C2_Arg)DVD-Fab的催化活性以可检测荧光醛(RFU(relative fluorescent unit),相对荧光单位)和丙酮。绘制一式三份的平均值(±)SD值。(c)将具有h38C2_Arg或h38C2_Lys的DVD-Fab与1、5和10当量的TAMRA的苯乙二醛衍生物(化合物1;图5)或TAMRA的β-内酰胺-半抗原衍生物(化合物2;图5)孵育,并通过SDS-PAGE随后是荧光成像和考马斯染色进行分析。(d)将具有h38C2_Arg或h38C2_Lys的DVD-Fab与10当量的β-内酰胺-半抗原叠氮化物(化合物3;图5)预孵育,随后与1和5当量的化合物1孵育。
图5.苯乙二醛和β-内酰胺衍生物。化合物1和2分别是红色荧光染料TAMRA的苯乙二醛和β-内酰胺-半抗原衍生物。化合物3是β-内酰胺-半抗原一叠氮化物衍生物。化合物4和5分别是细胞毒性药物MMAF的苯乙二醛和β-内酰胺-半抗原衍生物。化合物6是近红外荧光染料Cy7的β-内酰胺-半抗原衍生物。
图6.在缀合之前和之后,基于h38C2_Arg的DVD-Fab的质谱。(a)通过ESI-TOF对具有h38C2_Arg的DVD-Fab进行的分析。未缀合的DVD-Fab的预期质量为73820Da。对于(b)和(c),分别将5和10当量的苯乙二醛-TAMRA(化合物1;★)与DVD-Fab缀合。具有一种和两种缀合化合物的DVD-Fab的预期质量分别为74623Da和75426Da。
图7.基于h38C2_Arg的DVD-Fab缀合物的人血浆稳定性。(a)将与苯乙二醛-TAMRA(化合物1)缀合的基于h38C2_Arg的DVD-Fab与人血浆在37℃下孵育指定的时间,并通过SDS-PAGE随后是考马斯染色(左)和荧光成像(右)进行分析。(b)通过NIH ImageJ软件对来自“0小时”和“240小时”时间点处的荧光成像的条带强度进行定量,并通过将在“0小时”时间点处的条带强度限定为每个独立实验的100%来绘制三个独立实验的平均值±SD值。t检验用于计算p。
图8.基于h38C2_Arg的抗HER2 DVD-Fab ADC的表征。(a)通过ESI-TOF对与苯乙二醛-MMAF(化合物4)缀合的基于h38C2_Arg的DVD-Fab进行的分析。未缀合和缀合的DVD-Fab的预期质量分别为73820和74950Da。(b)标准(左;F:440kDa;A:158kDa;C:75kDa;O:44kDa)、基于h38C2_Arg的DVD-Fab(中间)和与苯乙二醛-MMAF(化合物4)缀合的基于h38C2_Arg的DVD-Fab(右)的SEC曲线。(c)与β-内酰胺-半抗原-MMAF(化合物5)缀合的基于h38C2_Lys的DVD-Fab(●)、与苯乙二醛-MMAF(化合物4)缀合的基于h38C2_Arg的DVD-Fab(■)和对应的未缀合的DVD-Fab(分别为▲和)在与HER2+SK-BR-3和HER2-MDA-MB-231细胞在37℃下孵育72小时之后的细胞毒性。
图9.通过SPR比较基于h38C2_Arg的抗HER2 DVD-Fab ADC和基于h38C2_Lys的抗HER2 DVD-Fab ADC。针对在瞬时背景耗竭之后指定的未缀合(a、c)和缀合的(b、d)DVD-Fab与由固定在CM5芯片上的抗人Fcγ mAb捕获的HER2-Fc的结合获得的Biacore X100传感图。h38C2_Arg(a、b)和h38C2_Lys DVD-Fab(c、d)的反应性Arg和Lys残基分别绘制成浅灰色圆圈和深灰色圆圈。DVD-Fab以五种不同浓度(12.5、25、50、100和200nM)注射。
图10.同二聚体和异二聚体DVD-IgG1的产生和表征。(a)与DVD-Fab类似,同二聚体DVD-IgG1(左)由曲妥珠单抗的可变结构域(外部Fv)和亲本h38C2或h38C2突变体Lys99Arg(内部Fv,以浅灰色圆圈)以及恒定结构域构成。轻链片段(白色)和重链片段(灰色)二者的内部和外部可变结构域通过短间隔物(ASTKGP)连接。异二聚体DVD-IgG1(右)组合一个臂中的亲本h38C2内部Fv与另一臂中的h38C2突变体Lys99Arg,并利用结进孔(knobs-into-hole)突变以用于重链异二聚化。在通过蛋白A亲和色谱从瞬时转染的Expi293F细胞的上清液中纯化之后,基于h38C2_Arg的DVD-IgG1(“Arg/Arg”)与先前所述的基于h38C2_Lys的DVD-IgG1(“Lys/Lys”)是不可区分的,通过非还原(NR)SDS-PAGE和考马斯染色揭示了预期的约200kDa条带,并且通过还原(R)SDS-PAGE和考马斯染色揭示了预期的约65kDa和约35kDa条带。异二聚体DVD-IgG1(“Arg/Lys”)揭示了相同的条带。(b)使用方法学的逆醛醇转化测量1μM时同二聚体Lys/Lys和异二聚体Arg/Lys DVD-IgG1的催化活性以可检测荧光醛(RFU,相对荧光单位)和丙酮。绘制一式三份的平均值(±)SD值。(c至d)在与β-内酰胺-半抗原-MMAF(化合物5)或苯乙二醛-MMAF(化合物4)缀合之后随后与HER2+SK-BR-3、HER2+KPL4、HER2+BT-474和HER2-MDA-MB-231细胞在37℃下孵育72小时之后的两种不同的同二聚体Lys/Lys和Arg/Arg以及异二聚体Arg/Lys DVD-IgG1的细胞毒性。
图11.在缀合之前和之后,基于h38C2_Arg的DVD-IgG1的质谱。(a)通过ESI-TOF对具有h38C2_Arg的还原和去糖基化的DVD-IgG1进行的分析。轻链和重链的预期质量分别为36161Da和63151。对于(b),将5当量的苯乙二醛-MMAF(化合物4)与DVD-IgG1缀合。具有一种缀合化合物的重链的预期质量为64282Da。
图12.具有两个不同载荷的异二聚体DVD-IgG1的一锅式(one-pot)组装。(a)对具有苯乙二醛-TAMRA(化合物1,★)和β-内酰胺-半抗原-Cy7(化合物6,)的异二聚体DVD-IgG1进行正交标记的方案(深灰色圆圈,Arg;浅灰色圆圈,Lys;三角形,结进孔突变)。在没有间歇性纯化或缓冲液交换步骤的情况下进行在指定条件下的红色和红外荧光染料的依次缀合。(b)通过还原SDS-PAGE随后是红色(中间)和红外(右)荧光成像以及考马斯染色(左),分析未缀合的异二聚体DVD-IgG1①和缀合物②、③、④和⑤。
图13.在与两个不同载荷缀合之前和之后的异二聚体DVD-IgG1的质谱。(a)通过MALDI-TOF对去糖基化异二聚体DVD-IgG1进行的分析。预期质量为198546Da。(b)在TAMRA的苯乙二醛衍生物(化合物1)和MMAF的β-内酰胺半抗原衍生物(化合物5)的依次一锅式缀合之后,对去糖基化异二聚体DVD-IgG1进行的MALDI-TOF分析。具有一个TAMRA和一个MMAF载荷的去糖基化异二聚体DVD-IgG1的预期质量为200408Da。仅具有MMAF载荷的去糖基化异二聚体DVD-IgG1的预期质量为199605Da。(c)在同时进行一锅式缀合之后进行的对应MALDI-TOF分析。
图14.具有两个不同载荷的异二聚体DVD-IgG1的内化和运输。将HER2阳性SK-BR-3细胞(a)和HER2阴性MDA-MB-231细胞(b)与MMAF(通过Lys)和TAMRA(通过Arg)标记的HER2靶向的异二聚DVD-IgG1在不存在(上图)和存在(中图)胞吞抑制剂氧化苯砷(phenylarsineoxide,PAO)的情况下,在37℃下孵育4小时。同种型对照(下图)是与TAMRA(通过Lys)缀合的ROR2靶向的同二聚体DVD-IgG1。在孵育之后,将细胞洗涤、固定、封闭、透化、与FITC缀合的山羊抗人IgG F(ab’)2多克隆抗体孵育、洗涤、用DAPI染色,并且在通过共聚焦荧光显微术对其进行分析之前再次洗涤。
图15.具有两个不同载荷的异二聚体DVD-IgG1的内化和运输。将HER2阳性SK-BR-3细胞(a)和HER2阴性MDA-MB-231细胞(b)与MMAF(通过Lys)和TAMRA(通过Arg)标记的HER2靶向的异二聚DVD-IgG1在37℃下孵育4小时。在孵育之后,将细胞洗涤、固定、封闭、透化、与FITC缀合的山羊抗人IgG F(ab’)2多克隆抗体孵育、洗涤、用DAPI染色,并且在通过共聚焦荧光显微术对其进行分析之前再次洗涤。
图16.在与苯乙二醛缀合之前和之后,胃蛋白酶消化的h38C2_Arg Fab的质谱分析。为了绘制缀合位点,将未处理(a、c)和苯乙二醛处理的(b、d)的h38C2_Arg Fab用胃蛋白酶消化,并通过LC-MS/MS进行分析。在经苯乙二醛处理的样品(b)中检测到一种主要的苯乙二醛修饰的肽(YCRTYFT)。针对未标记的肽(c)和苯乙二醛修饰的肽(d)二者给出了检测到的MS/MS谱以及预测的b和y离子。Arg残基上的+116-Da修饰r(+116.03)表明形成了羟基咪唑环,如补充图1b中所示。由于在胃蛋白酶消化之前使用碘乙酰胺来阻断变性和还原蛋白质中的二硫键形成,因此Cys残基上的+57-Da修饰c(+57.02)是脲基甲基基团。
具体实施方式
I.概述
本发明涉及包含药物部分与包含催化性抗体38C2的变体的抗体化合物的位点特异性精氨酸缀合的ADC。在本领域中已知的是精氨酸缀合由于许多限制不适合用于位点特异性生物缀合。例如,精氨酸是极性且带电荷的氨基酸,其优先存在于分子表面以与溶剂形成氢键。此外,精氨酸的胍基代表高pKa(约12.5),并且其在生理pH下显示出低亲核性(deGruyter等.,Biochem.56:3863-3873,2017)。
本发明部分基于本发明人进行的研究,以产生用于与h38C2的疏水口袋内部的精氨酸残基位点特异性缀合的独特的环境。这些研究首次证明了位点特异性精氨酸缀合可用于开发新的化学程序化抗体和新的抗体-药物缀合物。通过示例的方式,本发明人将h38C2的反应性赖氨酸残基突变为精氨酸残基,并通过X射线晶体学确定了所得单克隆抗体h38C2_Arg的结构完整性。表明在h38C2_Arg中引入的精氨酸残基具有独特的反应性,从而允许其与苯乙二醛衍生物选择性和稳定缀合。另外,将MMAF的苯乙二醛衍生物与包含h38C2_Arg的HER2靶向的DVD选择性缀合。该ADC化合物与对应的HER2靶向的DVD-ADC表现出相同的效力,后者基于MMAF的β-内酰胺衍生物与野生型h38C2的反应性赖氨酸的选择性缀合。此外,通过组合掩埋的Lys残基和掩埋的Arg残基,本发明人产生了具有野生型h38C2臂和h38C2_Arg臂的DVD-IgG1,提供了具有两个不同载荷的高度均质的ADC的正交一锅式组装。
根据这些示例性研究,本发明提供了新的位点特异性精氨酸缀合的抗体药物和相关用途。如本文中所述,本发明的ADC包含通过抗体化合物中的反应性精氨酸残基与抗体化合物缀合的至少一个药物部分。优选地,本发明的ADC中的抗体化合物包含催化性抗体38C2的变体或其抗原结合片段,所述变体在疏水空隙中包含以精氨酸对反应性赖氨酸残基的替换(38C2_Arg)。在多个实施方案中,ADC的抗体化合物是双可变结构域(DVD)化合物或其抗原结合片段,其包含(i)38C2_Arg或其抗原结合片段,以及(ii)识别目的靶标的第二抗体可变结构域。
在更详细地描述本发明之前,应理解,本发明不限于所描述的特定方面,因为这样的特定方面当然可以变化。还应理解,本文中使用的术语仅出于描述特定实施方面的目的,而不旨在进行限制,因为本发明的范围将仅由所附权利要求书限制。
当提供值的范围时,应理解,除非上下文另外明确指出,否则在该范围的上限和下限之间的每个中间值,直至下限单位的十分之一,以及在该规定范围内的任何其他规定值或中间值,涵盖在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包含在较小范围内,并且也涵盖在本发明内,受到所规定范围中的任何明确排除的限制。当所规定范围包含一个或两个限制时,排除那些被包含的限制之一或二者的范围也包含在本发明中。
在本文中给出了某些范围,其在数值之前带有术语“约”。本文中使用术语“约”以对其之前的精确数字以及与该术语之前的数字接近或近似的数字提供文字支持。在确定该数字是否接近或近似于具体列举的数字时,接近或近似的未列举数字可以是这样的数字,在呈现该数字的上下文中,该数字提供了具体列举的数字的基本等同物。
在本说明书中引用的所有出版物和专利均通过引用并入本文,如同每个单独的出版物或专利被具体地和单独地指出通过引用并入以及通过引用并入本文以公开和描述与所引用的出版物相关的方法和/或材料。对任何出版物的引用均是为了其在申请日之前的公开内容,并且不应被解释承认本发明无权由于在先发明而早于这样的出版物。此外,提供的公布日期可能与实际公布日期有所不同,所述实际公布日期可能需要独立确认。
除非另外指出,否则本发明的实践可使用在本技术领域内的分子生物学(包括重组技术)、微生物学、细胞生物学、生物化学和免疫学的常规技术。这样的技术在文献中进行了充分的说明。参见,例如,Methods in Enzymology,第289卷:Solid-Phase PeptideSynthesis,J.N.Abelson,M.I.Simon,G.B.Fields(编辑),Academic Press;第1版(1997)(ISBN-13:978-0121821906);美国专利No.4,965,343和5,849,954;Sambrook等.,Molecular Cloning:A Laboratory Manual,Cold Spring Harbor Press,N.Y.,(第3版,2000);Brent等.,Current Protocols in Molecular Biology,John Wiley&Sons,Inc.(ringbou编辑,2003);Barbas等.,Phage Display:A Laboratory Manual,CSHL Press(2004);Davis等.,Basic Methods in Molecular Biology,Elsevier SciencePublishing,Inc.,New York,USA(1986);Methods in Enzymology:Guide to MolecularCloning Techniques,第152卷,S.L.Berger和A.R.Kimmerl编辑,Academic Press Inc.,San Diego,USA(1987);Current Protocols in Protein Science(CPPS)(JohnE.Coligan,et.al.,编辑,John Wiley and Sons,Inc.);Current Protocols in CellBiology(CPCB)(Juan S.Bonifacino et.al.编辑,John Wiley and Sons,Inc.);Cultureof Animal Cells:A Manual of Basic Technique and Specialized Applications,R.Ian Freshney,Wiley Blackwell(第7版,2015);和Animal Cell Culture Methods,Jennie P.Mather和David Barnes编辑,Academic Press(第1版,1998)。以下部分提供了用于实施本发明的组合物和方法的另外的指导。
对本领域技术人员而言,在阅读本公开内容之后将明显的是,本文中所描述和举例说明的每个单独方面具有可容易地与其他数个方面中的任一个特征分离或组合的离散的组件和特征,而不脱离本发明的范围或精神。任何列举的方法均可按照列举事件的顺序或者以在逻辑上可能的任何其他顺序进行。尽管类似于或等同于本文中描述的方法和材料的任何方法和材料也可用于本发明的实践或测试中,但是现在描述一些代表性的说明性方法和材料。
II.定义
除非另外限定,否则本文中使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的含义相同的含义。以下参考文献为技术人员提供了本发明中使用的许多术语的一般定义:Academic Press Dictionary of Science and Technology,Morris(编辑),Academic Press(第1版,1992);Oxford Dictionary of Biochemistry andMolecular Biology,Smith等.(编辑),Oxford University Press(修订版,2000);Encyclopaedic Dictionary of Chemistry,Kumar(编辑),Anmol Publications Pvt.Ltd.(2002);Dictionary of Microbiology and Molecular Biology,Singleton等.(编辑),John Wiley&Sons(第3版,2002);Dictionary of Chemistry,Hunt(编辑),Routledge(第1版,1999);Dictionary of Pharmaceutical Medicine,Nahler(编辑),Springer-VerlagTelos(1994);Dictionary of Organic Chemistry,Kumar和Anandand(编辑),AnmolPublications Pvt.Ltd.(2002);和A Dictionary of Biology(Oxford PaperbackReference),Martin和Hine(编辑),Oxford University Press(第4版,2000)。本文中提供了当这些术语中的一些具体应用于本发明时的进一步说明。
应注意的是,除非上下文另外明确指出,否则本文中和所附权利要求书中使用的没有数量词修饰的名词包括一个/种或更多个/种。还应注意的是,权利要求书可被制定为排除任何任选要素。同样地,该陈述旨在用作与权利要求要素的记载相关联的排他性术语例如“仅仅”、“仅”等的使用,或者“负”限制的使用的先行基础。
在本文中可互换使用的术语“免疫球蛋白”或“抗体”是指由两条相同的轻(L)链和两条相同的重(H)链构成的基础4-链异四聚体糖蛋白。每条L链通过一个共价二硫键与H链连接,而两条H链则根据H链同种型通过一个或更多个二硫键互相连接。每条H和L链均具有N端和C端,并且还具有规则间隔的链内二硫桥。每条H链具有在N端的可变结构域(VH),随后是三个恒定结构域(CH1、CH2和CH3)。每条L链具有在N端的可变结构域(VL),随后是一个恒定结构域(CL)。VL与VH对齐并且CL与重链的第一恒定结构域(the first constant domain ofthe heavy chain,CH1)对齐。认为特定的氨基酸残基在L链可变结构域和H链可变结构域之间形成界面。VH和VL的配对一起形成单个抗原结合位点。
来自任何脊椎动物物种的L链可基于其恒定结构域的氨基酸序列分配为两种明显不同的类型(称为κ和λ)之一。根据其重链的恒定结构域(CH)的氨基酸序列,免疫球蛋白可分配为不同类别或同种型。免疫球蛋白有五种类别:具有分别命名为α、δ、ε、γ和μ的重链的IgA、IgD、IgE、IgG和IgM。基于CH序列中相对较小差异和功能,γ和α类别进一步分为亚类,例如,人表达以下亚类:IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2。
免疫球蛋白的“可变区”或“可变结构域”是指免疫球蛋白的H或L链的N端结构域。H链的可变结构域可被称为“VH”。轻链的可变结构域可被称为“VL”。这些结构域通常是免疫球蛋白最可变的部分并且包含抗原结合位点。
术语“可变”是指可变结构域的某些区段在免疫球蛋白之间的序列差异很大的事实。V结构域介导抗原结合并限定特定免疫球蛋白对其特定抗原的特异性。然而,可变性不是均匀分布于大多数可变结构域的110个氨基酸跨度中。相反,V区由15至30个氨基酸的被称为框架区(framework region,FR)的相对不变的段(strench)组成,所述相对不变的段被每个长度为9至12个氨基酸的被称为“高变区”的极度可变的较短区域分隔。天然H和L链的可变结构域各自包含通过形成环连接的三个高变区连接的四个FR,所述四个FR主要采用β-片层构型并且在一些情况下形成β-片层结构的一部分。每条链中的高变区通过FR紧密地保持在一起,并且与其他链的高变区一起促进免疫球蛋白的抗原结合位点的形成(参见Kabat等.,Sequences of Proteins of Immunological Interest,第5版.Public HealthService,National Institutes of Health,Bethesda,MD.(1991))。恒定结构域不直接参与免疫球蛋白与抗原的结合,但表现出多种效应物功能,例如使免疫球蛋白参与抗体依赖性细胞毒性(antibody dependent cellular cytotoxicity,ADCC)、抗体依赖性细胞吞噬(antibody-dependent cellular phagocytosis,ADCP)和补体依赖性细胞毒性(complement-dependent cytotoxicity,CDC)。
“完整”免疫球蛋白是包含抗原结合位点以及CL和至少H链恒定结构域CH1、CH2和CH3的免疫球蛋白。恒定结构域可以是天然序列恒定结构域(例如,人天然序列恒定结构域)或其氨基酸序列变体。完整免疫球蛋白可具有一种或更多种效应物功能。
出于本文目的“裸免疫球蛋白”是不与药物部分缀合的免疫球蛋白。
“免疫球蛋白片段”包含完整免疫球蛋白的一部分,优选完整免疫球蛋白的抗原结合区或可变区。免疫球蛋白片段的一些实例包括但不限于Fab、Fab’、F(ab’)2和Fv片段;双抗体;线性免疫球蛋白(参见美国专利No.5,641,870,实施例2;Zapata等.,Protein Eng.8(10):1057-1062[1995]);单链免疫球蛋白分子;和由免疫球蛋白片段形成的多特异性免疫球蛋白。在一些实施方案中,免疫球蛋白片段包含所有可能的替代片段形式。在一些实施方案中,免疫球蛋白片段可以是双特异性的。在一些实施方案中,免疫球蛋白片段可以是双互补位的。在一些实施方案中,免疫球蛋白片段可以是三特异性的。在一些实施方案中,免疫球蛋白片段可以是多聚体的。在一些实施方案中,免疫球蛋白片段包含完整免疫球蛋白的抗原结合位点,并且因此保留了与抗原结合的能力。在一些实施方案中,免疫球蛋白片段包含具有结合抗原的能力的单个可变结构域。在一些实施方案中,免疫球蛋白片段被进一步修饰(不限于肽添加、聚乙二醇化、羟乙基化(hesylated)、糖基化)以调节活性、特性、药代动力学行为和体内效力。
免疫球蛋白的木瓜蛋白酶消化产生两个相同的抗原结合片段,称为“Fab”片段和剩余的“Fc”片段,该命名反映了易于结晶的能力。Fab片段由整条L链以及H链的可变区结构域(VH)和一条重链的第一恒定结构域(CH1)组成。每个Fab片段就抗原结合而言是单价的,即它具有单个抗原结合位点。免疫球蛋白的胃蛋白酶处理产生单个大的F(ab’)2片段,所述片段大致对应于具有二价抗原结合活性并且仍能够交联抗原的两个二硫化物连接的Fab片段。Fab’片段与Fab片段的不同之处在于,其在CH1结构域的羧基端具有另外的数个残基,包括来自免疫球蛋白铰链区的一个或更多个半胱氨酸。Fab’-SH是本文中对Fab’的命名,其中恒定结构域的一个或更多个半胱氨酸残基带有游离的巯基。F(ab’)2免疫球蛋白片段最初是作为之间具有铰链半胱氨酸的Fab’片段对产生的。免疫球蛋白片段的其他化学偶联也是已知的。
Fc片段包含通过二硫化物保持在一起的两条H链的羧基端部分。免疫球蛋白的效应物功能由Fc区中的序列决定,该区也是在某些细胞类型上存在的通过Fc受体(Fcreceptor,FcR)识别的部分。
“Fv”是包含完整抗原识别位点和结合位点的最小免疫球蛋白片段。该片段由紧密非共价缔合的一条重链和一条轻链可变区结构域的二聚体组成。在单链Fv(single-chainFv,scFv)种类中,一个重链可变结构域和一个轻链可变结构域可通过柔性肽接头共价连接,使得轻链和重链可以以类似于双链Fv种类中的“二聚体”结构缔合。从这两个结构域的折叠中,产生为抗原结合贡献氨基酸残基并赋予免疫球蛋白抗原结合特异性的六个高变环(来自H和L链的各3个环)。然而,即使单个可变结构域(或仅包含对抗原具有特异性的三个CDR的Fv的一半)也具有识别和结合抗原的能力,尽管通常亲和力低于整个结合位点。当在本文中用于指DVD免疫球蛋白分子时,术语“Fv”是指包含重链和轻链的第一和第二可变结构域二者的结合片段。
还缩写为“sFv”或“scFv”的“单链Fv”是包含连接到单个多肽链中的VH和VL免疫球蛋白结构域的免疫球蛋白片段。优选地,sFv多肽还包含VH和VL结构域之间的多肽接头,其使得sFv能够形成抗原结合所期望的结构。有关sFv的综述,参见Plückthun in ThePharmacology of Monoclonal Antibodies,第113卷,Rosenburg和Moore编辑,Springer-Verlag,New York,第269至315页(1994);和Antibody Engineering,Borrebaeck编辑,Oxford University Press(1995)。当在本文用于指DVD免疫球蛋白分子时,术语“scFv”是指包含重链和轻链的第一和第二可变结构域二者的结合片段。
本文中使用的“双可变结构域(DVD)化合物”或“双可变结构域(DVD)免疫缀合物”是指具有免疫球蛋白的第一和第二可变结构域(包含Ig的抗原结合片段例如Fab)以及通过接头与第二可变结构域共价缀合的药物部分的化合物。本文中使用的术语“双可变结构域免疫球蛋白”或“DVD-Ig”是指其H和L链二者均包含位置邻近于第一可变结构域的第二可变结构域的免疫球蛋白分子。因此,DVD-Ig的L链从N端至C端包含以下结构域:VL1-VL2-CL。因此,DVD-Ig的H链从N端至C端包含以下结构域:VH1-VH2-CH1-CH2-CH3。VL1和VH1的配对一起形成第一抗原结合位点。VL2和VH2的配对一起形成第二抗原结合位点。在一些实施方案中,本发明的DVD化合物是DVD-Fab,其包含作为Ig的抗原结合片段(例如本文中所示例的Fab片段)的免疫球蛋白组分。本领域中描述了制备本发明的多种DVD化合物的一般方法,例如,Nanna等.,Nat.Commun.8:1112,2017。
除非另有说明,否则术语“免疫球蛋白”或“抗体”具体包括包含天然存在的变体的天然人和非人IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgE、IgA1、IgA2、IgD和IgM抗体。
关于多肽(例如,抗体或免疫球蛋白)的术语“天然的”在本文中用于是指具有自然界中存在的序列的多肽,而不管其制备方式如何。关于多肽(例如,抗体或免疫球蛋白)的术语“非天然的”在本文中用于是指具有然界中不存在的序列的多肽。
术语“多肽”在本文中以最广泛的含义使用并且包含肽序列。术语“肽”通常描述氨基酸的线性分子链,所述线性分子链包含多至约30个,优选多至约60个通过肽键共价连接的氨基酸。
本文中使用的术语“单克隆”是指从基本上均质的免疫球蛋白群体获得的抗体或免疫球蛋白分子(例如,DVD Ig分子),即除可能少量存在可能天然发生的突变之外,构成该群体的单独的免疫球蛋白是相同的。单克隆免疫球蛋白是高度特异性的,针对单个抗原位点。此外,与通常包含针对不同决定簇(表位)的不同抗体的常规(多克隆)抗体制备物相反,每种单克隆免疫球蛋白针对抗原上的单一决定簇。修饰语“单克隆”表示免疫球蛋白从基本上均质的免疫球蛋白群体获得的特征,并且不被解释为要求通过任何特定方法产生抗体。例如,根据本发明的单克隆免疫球蛋白可通过由and Milstein(1975)Nature 256:495首次描述的杂交瘤方法制备,或者可通过重组DNA方法(参见,例如美国专利No.4,816,567)制备。
本文中的单克隆免疫球蛋白具体包含“嵌合”免疫球蛋白,其中重链和/或轻链的一部分与来源于特定物种的抗体中的对应序列相同或同源,而所述链的其余部分与来源于另一物种的抗体以及这样的抗体的片段中的对应序列相同或同源,只要它们表现出所期望的生物活性即可(美国专利No.4,816,567;和Morrison等.(1984)Proc.Natl.Acad.Sci.USA81:6851-6855)。
“人源化”形式的非人(例如,啮齿动物(例如鼠或兔))免疫球蛋白是包含来源于非人免疫球蛋白的最小序列的免疫球蛋白。大多数情况下,人源化免疫球蛋白是人免疫球蛋白(接纳体抗体),其中来自接纳体的高变区的残基被来自非人物种(供体抗体)的高变区的残基替代,所述非人物种例如具有期望的特异性、亲和力和能力的小鼠、大鼠、仓鼠、兔、鸡、牛或非人灵长类。在一些情况下,人免疫球蛋白的Fv构架区(FR)残基也被对应的非人残基替代。此外,人源化抗体可包含不存在于接纳体抗体或供体抗体中的残基。进行这些修饰以进一步改善抗体性能。一般来说,人源化免疫球蛋白将包含至少一个且通常是两个可变结构域的基本上全部,其中高变环的全部或基本上全部对应于非人免疫球蛋白的高变环,并且FR区的全部或基本上全部是人免疫球蛋白序列的FR区。人源化免疫球蛋白任选地还将包含免疫球蛋白恒定区(Fc)(通常是人免疫球蛋白的恒定区)的至少一部分。有关进一步详细说明,参见Jones等.(1986)Nature 321:522-525;Riechmann等.(1988)Nature 332:323-329;和Presta(1992)Curr.Op.Struct.Biol.2:593-596。
本文中使用的术语“人免疫球蛋白”旨在包含具有来源于人种系免疫球蛋白序列的可变区和恒定区的免疫球蛋白。本发明的人免疫球蛋白可例如在CDR中,并且特别是在CDR3中包含不由人种系免疫球蛋白序列编码的氨基酸残基(例如,通过体外随机或位点特异性诱变或通过体内体细胞突变引入的突变)。然而,本文中使用的术语“人免疫球蛋白”不旨在包含其中已将来源于另一哺乳动物物种(例如小鼠)的种系的CDR序列接枝至人框架序列上的免疫球蛋白。
本文中的“分离的”免疫球蛋白是已在重组宿主细胞中从其天然环境的组分中鉴定和分离和/或回收的免疫球蛋白。其天然环境的污染物组分是会干扰免疫球蛋白的诊断或治疗性用途的物质,并且可包含酶、激素和其他蛋白质性或非蛋白质性溶质,以及产物的不期望副产物。在一些实施方案中,本文中分离的免疫球蛋白将被纯化至:(1)如通过SDS-PAGE或SEC-HPLC方法确定的按重量计大于95%、或按重量计大于98%、或按重量计大于99%;(2)通过使用氨基酸测序仪足以获得N端或内部氨基酸序列的至少15个残基的程度;或者(3)使用考马斯蓝或优选地银染在还原或非还原条件下通过SDS-PAGE使其均质。通常来说,分离的免疫球蛋白将通过至少一个纯化步骤来制备。
术语“特异性结合”或“与……特异性结合”或“对……具有特异性”是指结合部分与结合靶标的结合,例如免疫球蛋白与靶抗原例如,特定多肽上的表位、肽或其他靶标(例如糖蛋白靶标)的结合,并且意指与非特异性相互作用(例如,非特异性相互作用可以是与牛血清白蛋白或酪蛋白的结合)明显不同的结合。特异性结合可被测定,例如通过确定与与对照分子的结合相比结合部分或免疫球蛋白与靶分子的结合。例如,特异性结合可通过与类似于靶标的对照分子(例如过量的未标记靶标)竞争来确定。在该情况下,如果标记的靶标与探针的结合被过量未标记的靶标竞争性抑制,则表明是特异性结合。本文中使用的术语“特异性结合”特定多肽或特定多肽靶标上的表位或“与其特异性结合”或“对其具有特异性”可例如通过靶标Kd为以下的分子来表现:至少约200nM、或者至少约150nM、或者至少约100nM、或者至少约60nM、或者至少约50nM、或者至少约40nM、或者至少约30nM、或者至少约20nM、或者至少约10nM、或者至少约8nM、或者至少约6nM、或者至少约4nM、或者至少约2nM、或者至少约1nM或者更大。在某些情况下,术语“特异性结合”是指其中在基本上不与任何其他多肽或多肽表位结合的情况下,分子与特定多肽或特定多肽上的表位的结合。
“结合亲和力”是指分子(例如,免疫球蛋白)的单个结合位点与其结合配偶体(例如,抗原)之间的非共价相互作用的总和的强度。除非另外指出,否则本文中使用的“结合亲和力”是指内在结合亲和力,其反映结合对的成员(例如,免疫球蛋白和抗原)之间的1∶1相互作用。分子X对其配偶体Y的亲和力通常可由解离常数(Kd)表示。例如,Kd可以是约200nM、150nM、100nM、60nM、50nM、40nM、30nM、20nM、10nM、8nM、6nM、4nM、2nM、1nM或更强。亲和力可通过本领域已知的常规方法(包括本文中所述的那些)来测量。低亲和力抗体通常缓慢地结合抗原并倾向于解离,而高亲和力抗体通常更快地结合抗原并倾向于保持结合更长时间。测量结合亲和力的多种方法是本领域已知的。
本文中使用的“Kd”或“Kd值”是指通过适用于免疫球蛋白和靶标对的技术(例如使用表面等离子体共振测定,例如在25℃下使用具有固定的抗原CM5芯片的Biacore X100或Biacore T200(GE Healthcare,Piscataway,N.J.))测量的解离常数。
术语“缀合物”、“缀合的”和“缀合”是指共价或非共价连接的任何和全部形式,并且包括但不限于直接遗传或化学融合、通过接头或交联剂偶联和非共价缔合。
本文使用的术语“融合”是指一条多肽链中的不同来源的氨基酸序列通过其编码核苷酸序列的框内组合进行的组合。术语“融合”明确涵盖内部融合,即除与其一个末端融合之外,还在多肽链内插入不同来源的序列。本文使用的术语“融合”是指不同来源的氨基酸序列的组合。
术语“表位”包含能够与免疫球蛋白特异性结合的任何分子决定簇。在某些方面中,表位决定簇包含分子的化学活性表面基团,例如氨基酸、糖侧链、磷酰基或磺酰基,并且在某些方面中,可具有特定的三维结构特征和/或特定的电荷特征。表位是被免疫球蛋白结合的抗原的区域。“结合区域”是被结合分子结合的结合靶标上的区域。
术语“靶标”或“结合靶标”以最广泛的含义使用并且具体包含多肽但不限于核酸、碳水化合物、脂质、细胞和当其天然存在时具有或不具有生物学功能的其他分子。
术语“抗原”是指可与免疫球蛋白结合或触发细胞免疫应答的实体或其片段。免疫原是指可在生物体,特别是动物,更特别是哺乳动物(包括人)中引发免疫应答的抗原。术语抗原包含如上所限定的称为抗原决定簇或表位的区域。
本发明的免疫球蛋白的“抗原结合位点”或“抗原结合区”通常在每个可变结构域内包含六个互补决定区(complementarity determining region,CDR),并且它们在不同程度上促进结合位点对抗原的亲和力。在每个可变结构域中,存在三个重链可变结构域CDR(CDRH1、CDRH2和CDRH3)和三个轻链可变结构域CDR(CDRL1、CDRL2和CDRL3)。通过与氨基酸序列的编译数据库比较来确定CDR和框架区(FR)的程度,其中已根据序列之间的可变性和/或来自抗体/抗原复合物的结构信息限定了那些区域。还包括在本发明范围内的是由较少的CDR构成的功能性抗原结合位点(即其中结合特异性由三个、四个或五个CDR确定)。少于6个CDR的完整组可足以与一些结合靶标结合。因此,在一些情况下,仅VH或VL结构域的CDR就足够了。此外,某些抗体可具有针对抗原的非CDR相关结合位点。这样的结合位点特别地包括在本定义内。
本申请中使用的术语“宿主细胞”表示可被改造以产生根据本发明的免疫球蛋白的任何种类的细胞系统。在一个方面中,中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞用作宿主细胞。在一些实施方案中,大肠杆菌(E.coli)可用作宿主细胞。
本文中使用的表述“细胞”、“细胞系”和“细胞培养物”可互换使用,并且所有这样的命名均包含后代。因此,词语“转化体”和“转化细胞”包含原代对象细胞和从其衍生的培养物,而与转移次数无关。还应理解,由于有意或无意的突变,所有后代的DNA含量可能不完全相同。包含具有与在原始转化细胞中筛选的相同功能或生物活性的变体后代。
当核酸与另一核酸序列处于功能性关系时,其被“可操作地连接”。例如,如果前序列或分泌性前导的DNA表达为参与多肽分泌的前蛋白,则其与对多肽的DNA可操作地连接;如果启动子或增强子影响序列的转录,则其与编码序列可操作地连接;或者如果核糖体结合位点被定位成促进翻译,则与编码序列可操作地连接。一般来说,“可操作地连接”意指连接的DNA序列是连续的,并且在分泌性前导的情况下是连续的并且在阅读框内。然而,增强子不一定是连续的。通过在方便的限制性酶切位点连接来完成连接。如果不存在这样的位点,则根据常规实践使用合成的寡核苷酸衔接子或接头。
关于肽或多肽序列,即本文中确定的h38C2抗体多肽序列的“百分比(%)氨基酸序列同一性”被定义为在比对序列并引入缺口(如果必要的话)以实现最大百分比序列同一性之后并且不考虑作为序列同一性的一部分的任何保守替换的情况下,候选序列中与特定肽或多肽序列中的氨基酸残基相同的氨基酸残基的百分比。出于确定氨基酸序列同一性百分比的目的,可以以本领域技术范围内的多种方式来实现比对,例如,使用可公开获得的计算机软件例如BLAST、BLAST-2、ALIGN或Megalign(DNASTAR)软件。本领域技术人员可确定用于测量比对的合适参数,包括在所比较的序列的全长上实现最大比对所需的任何算法。
“治疗”是指治疗性治疗和预防或防范措施二者,其中目的是预防或减慢(减轻)目标病理病症或障碍。需要治疗的那些包括已患有病症的那些,以及易患病症的那些,或要预防该病症的那些。例如,如果在根据本发明的方法接受治疗量的主题免疫缀合物之后,对象显示出以下一种或更多种的可观察和/或可测量的降低或不存在,则对象或哺乳动物成功“治疗”了癌症:癌细胞数目降低或不存在癌细胞;肿瘤尺寸降低;抑制(即,在一定程度上减缓,优选停止)癌细胞浸润到外周器官中,包括癌症扩散到软组织和骨中;抑制(即,在一定程度上减缓,优选停止)肿瘤转移;在一定程度上抑制肿瘤生长;和/或在一定程度上缓解了与特定癌症相关的一种或更多种症状;降低发病率和/或死亡率,并改善生活质量问题。
III.具有反应性Arg残基的抗体化合物
本发明提供了包含催化性抗体38C2的变体或其抗原结合片段的抗体化合物。38C2催化性抗体是本领域公知的,并且已在例如美国专利No.8,252,902中良好地表征。38C2抗体的重链可变区包含可与接头反应的单个独特地反应性赖氨酸残基(Lys99),从而提供了用于与药物部分缀合的连接点。因此,包含38C2抗体的可变结构域的免疫球蛋白分子包含可用于与药物部分缀合的两个这样的连接点(每条重链上一个)。一旦反应性赖氨酸残基与接头缀合,则38C2可变结构域的结合功能丧失,这意味着该可变结构域不再表现出催化活性。
本发明的38C2变体抗体在疏水空隙中包含以精氨酸对该反应性赖氨酸残基的替换,这为药物缀合提供了不同于反应性赖氨酸残基的连接点。对于全长抗体(例如,IgG)或二聚体抗体片段(例如F(ab’)2),替换可存在于一个或两个抗体臂或抗原结合位点中。使用合适的接头部分,38C2变体(38C2_Arg)中的经改造Arg残基能够与药物部分反应以形成ADC。因此,在一些实施方案中,抗体的两个变体结构域均具有被Arg替代的反应性Lys残基。在一些实施方案中,38C2_Arg变体抗体可在其两个结合臂之一中包含反应性Arg残基并且在另一个结合臂中包含反应性Lys残基。在一些实施方案中,本发明的ADC中使用的38C2_Arg变体是嵌合抗体。在一些其他实施方案中,本发明中使用的38C2_Arg变体是人源化抗体(h38C2_Arg)。在多个实施方案中,38C2_Arg变体可包含人源化轻链序列、人源化重链序列或者二者。由于与反应性Arg和Lys残基的位点特异性缀合,本发明的ADC是均质的。
包含具有被Arg替代的反应性Lys残基的变体38C2抗体的抗体化合物可通过常规实践方法(例如,本文中所示例的重组表达)容易地产生。作为具体示例,适用于本发明的人源化38C2_Arg变体(h38C2_Arg)的重链和轻链变体结构域序列分别在SEQ ID NO:1和2中示出。在第99位的替换的Arg残基在重链序列(SEQ ID NO:1)中加下划线。应注意的是,该变体的轻链可变结构域序列与本领域已知的人源化38C2抗体(h38C2)的轻链可变结构域序列相同。
h38C2_Arg的VH(SEQ ID NO:1)
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSNYWMSWVRQSPEKGLEWVSEIRLRSDNYATHYAESVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTGIYYCRTYFYSFSYWGQGTLVTVSS
h38C2_Arg的Vκ(SEQ ID NO:2)
ELQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSQSLLHTYGSPYLNWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFAVYFCSQGTHLPYTFGGGTKVEIK
在多个实施方案中,本发明的抗体化合物可包含一个或两个上述反应性Arg残基,并且具有与示例序列基本相同的重链和/或轻链序列。例如,除存在一个或更多个反应性Arg残基之外,本发明的抗体化合物的重链和轻链可变结构域氨基酸序列可分别与SEQ IDNO:1和2具有至少约80%同一性,或者至少约81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性。
IV.具有位点特异性Arg缀合的抗体缀合药物
本发明还提供了包含通过经改造精氨酸残基与抗体化合物位点特异性缀合的至少一个药物部分的抗体缀合药物(ADC)。优选地,抗体化合物是来源于上述催化性抗体38C2的变体。在一些实施方案中,抗体化合物是在两个抗体臂中均包含Lys99Arg替换的同二聚体分子。在这些实施方案中,ADC可包含与抗体化合物的两个臂中的经改造Arg残基缀合的相同药物部分。在一些实施方案中,抗体化合物是仅在一个抗体臂中包含Lys99Arg替换的异二聚体分子。这样的分子的重链异二聚化可例如通过如本文中所示例的结进孔突变来实现。在这些实施方案中,ADC可包含与一个抗体臂中的经改造Arg残基缀合的第一药物部分和与另一抗体臂中的反应性Lys残基缀合的第二药物部分。在一些实施方案中,ADC中的抗体化合物是单独的人源化38C2_Arg抗体(h38C2_Arg)或其抗原结合片段。在一些其他实施方案中,抗体化合物是双可变结构域(DVD)化合物(如本文中所示例的DVD-Fab或DVD-Ig)或具有38C2_Arg的双特异性抗体。因此,本发明的一些ADC中的抗体化合物是DVD-Ig,其包含与靶抗原(例如,肿瘤细胞表面抗原或受体)结合的第一可变结构域和允许接头分子或接头衍生的药物部分的位点特异性连接的第二可变结构域(38C2_Arg)。
一旦产生了包含反应性Arg的变体38C2抗体,就可根据文献中已报道的方法来产生包含38C2_Arg抗体的DVD-Ig抗体化合物。参见,例如Nanna等.,Nat.Commun.8:1112,2017;和WO2017/049139。与药物部分缀合的DVD-Ig包含用于连接药物部分的第一可变结构域38C2变体和及用于与目的靶标结合的第二可变结构域。当ADC的抗体组分具有完整抗体结构时,DVD-Ig通常包含各自由轻链和重链组成的两个臂。每条轻链和每条重链均包含N端和C端。在一些实施方案中,DVD-Ig的两个臂是相同的,即其中轻链相同且重链相同。例如,这些实施方案中的一些针对具有包含两个h38C2_Arg臂的变体38C2抗体的同二聚体DVD化合物(例如,如本文中所示例的同二聚体HER2靶向的DVD-Ig分子)。在一些其他实施方案中,DVD-Ig的两个臂可以是不同的。例如,一些DVD化合物(例如,如本文中所示例的异二聚体HER2靶向的DVD-Ig)可以是异二聚体,因为DVD化合物的变体38C2抗体组分包含一个h38C2_Lys臂和一个h38C2_Arg臂。在一些实施方案中,38C2变体结构域可被定位成比第二可变结构域更靠近DVD-Ig的C端。在一些其他实施方案中,38C2变体结构域可被定位成比第二可变结构域更靠近DVD-Ig的N端。
在一些实施方案中,DVD-Ig包含38C2_Arg作为用于缀合药物部分的第一可变结构域和与目的靶标(例如,靶抗原或受体)结合的第二可变结构域。在这些ADC中的一些中,反应性Arg存在于38C2_Arg变体的两个臂中,并且相同的药物部分与抗体化合物的两个臂缀合。在一些其他ADC中,仅38C2变体抗体的一个臂中的反应性赖氨酸残基被精氨酸残基替代。如本文中所示例的,这些ADC在两个臂中包含2种不同的药物部分通过适当的接头分别与其缀合的反应性Arg和反应性Lys二者。
变体类型或亚型的免疫球蛋白可用于本发明的DVD-Ig抗体化合物的构建中。例如,轻链可以是κ轻链或λ轻链。根据Fc结构域,重链可以是来自IgG(例如IgG1、IgG2、IgG3或IgG4)、IgA(例如IgA1或IgA2)、IgM、IgE或IgD抗体的重链。例如,在一些方面中,免疫球蛋白属于IgG类,并且重链包含γ重链。在一些实施方案中,免疫球蛋白属于IgG1类,并且重链包含γ1重链。在一些实施方案中,免疫球蛋白属于IgG2类,并且重链包含γ2重链。在一些实施方案中,免疫球蛋白属于IgG3类,并且重链包含γ3重链。在一些实施方案中,免疫球蛋白属于IgG4类,并且重链包含γ4重链。在一些实施方案中,免疫球蛋白属于IgA类,并且重链包含α重链。在一些实施方案中,免疫球蛋白属于IgA1类,并且重链包含α1重链。在一些实施方案中,免疫球蛋白属于IgA2类,并且重链包含α2重链。在一些实施方案中,免疫球蛋白属于IgD类,并且重链包含δ重链。在一些实施方案中,免疫球蛋白属于IgE类,并且重链包含ε重链。在一些实施方案中,免疫球蛋白属于IgM类,并且重链包含μ重链。
在多个实施方案中,DVD-Ig抗体化合物的第一和第二可变结构域通过肽接头序列沿其轻链或重链连接。肽接头序列可以是单个氨基酸或多肽序列。本领域中描述了可用于本发明的许多接头,例如WO2017/049139和美国专利No.7,612,181。合适的接头的一些具体实例包括ASTKGP(SEQ ID NO:3)和TVAAPSVFIFPP(SEQ ID NO:4)。
本发明ADC中的DVD-Ig的第二可变结构域可以是特异性识别目的靶标多肽或靶抗原的任何抗体或抗原结合片段。例如,它可以是识别肿瘤细胞上的抗原的抗体、抗体结构域或抗原结合片段。免疫球蛋白可通过诱导凋亡、重定向细胞毒性、干扰配体-受体相互作用或阻止对肿瘤表型至关重要的蛋白质的表达来发挥抗肿瘤作用。另外,免疫球蛋白可靶向肿瘤微环境的组分从而扰动重要结构例如肿瘤相关血管的形成。免疫球蛋白还可靶向配体是生长因子的受体(例如表皮生长因子受体),从而抑制刺激细胞与靶向肿瘤细胞的天然配体的结合。或者,免疫球蛋白可诱导ADCC、ADCP或CDC。
本领域技术人员将认识到,肿瘤相关抗原对于几乎任何类型的癌症均是已知的。可由主题DVD免疫球蛋白分子的第二可变结构域靶向的特异性肿瘤相关结合靶标包含本文中所示例的HER2(ERBB2)。另一些实例包括但不限于FOLR1、FOLR2、CD138、CD19、CD79A、CD79B、ROR1、ROR2、FCMR、CS1、GPA33、MSLN、CD52、CD20、CD3、CD4、CD5、CD8、CD20、CD21、CD22、CD23、CD30、CD33、CD38、CD44、CD56、CD70、BCMA、Siglec-1、Siglec-4、Siglec-5、Siglec-6、Siglec-7、Siglec-8、Siglec-9。PSMA、BMP6、IL12A、IL1A、IL1B、IL2、IL24、INHA、TNF、TNFSF10、BMP6、EGF、FGF1、FGF10、FGF11、FGF12、FGF13、FGF14、FGF16、FGF17、FGF18、FGF19、FGF2、FGF20、FGF21、FGF22、FGF23、FGF3、FGF4、FGF5、FGF6、FGF7、FGF8、FGF9、GRP、IGF1、IGF2、IL12A、IL1A、IL1B、IL2、INHA、TGFA、TGFB1、TGFB2、TGFB3、VEGF、CDK2、EGF、FGF10、FGF18、FGF2、FGF4、FGF7、IGF1、IGF1R、IL2、VEGF、BCL2、CD164、CDKN1A、CDKN1B、CDKN1C、CDKN2A、CDKN2B、CDKN2C、CDKN3、GNRH1、IGFBP6、IL1A、IL1B、ODZ1、PAWR、PLG、TGFB1I1、AR、BRCA1、CDK3、CDK4、CDK5、CDK6、CDK7、CDK9、E2F1、EGFR(ERBB1)、HER3(ERBB3)、HER4(ERBB4)、ENO1、ESR1、ESR2、IGFBP3、IGFBP6、IL2、INSL4、MYC、NOX5、NR6A1、PAP、PCNA、PRKCQ、PRKD1、PRL、TP53、FGF22、FGF23、FGF9、IGFBP3、IL2、INHA、KLK6、TP53、CHGB、GNRH1、IGF1、IGF2、INHA、INSL3、INSL4、PRL、KLK6、SHBG、NR1D1、NR1H3、NR1I3、NR2F6、NR4A3、ESR1、ESR2、NROB1、NROB2、NR1D2、NR1H2、NR1H4、NR1I2、NR2C1、NR2C2、NR2E1、NR2E3、NR2F1、NR2F2、NR3C1、NR3C2、NR4A1、NR4A2、NR5A1、NR5A2、NR6A1、PGR、RARB、FGF1、FGF2、FGF6、KLK3、KRT1、APOC1、BRCA1、CHGA、CHGB、CLU、COL1A1、COL6A1、IGFBP3、IGFBP6、IL12A、IL1A、IL1B、IL2、IL24、INHA、INSL3、INSL4、KLK10、KLK12、KLK13、KLK14、KLK15、KLK3、KLK4、KLK5、KLK6、KLK9、MMP2、MMP9、MSMB、NTN4、ODZ1、PAP、PLAU、PRL、PSAP、SERPINA3、SHBG、TGFA、TIMP3、CD44、CDH1、CDH10、CDH19、CDH20、CDH7、CDH9、CDH1、CDH10、CDH13、CDH18、CDH19、CDH20、CDH7、CDH8、CDH9、ROBO2、CD44、ILK、ITGA1、APC、CD164、COL6A1、MTSS1、PAP、TGFB1I1、AGR2、AIG1、AKAP1、AKAP2、CANT1、CAV1、CDH12、CLDN3、CLN3、CYB5、CYC1、DAB21P、DES、DNCL1、ELAC2、ENO2、ENO3、FASN、FLJ12584、FLJ25530、GAGEB1、GAGEC1、GGT1、GSTP1、HIP1、HUMCYT2A、IL29、K6HF、KAI1、KRT2A、MIB1、PART1、PATE、PCA3、PIAS2、PIK3CG、PPID、PR1、PSCA、SLC2A2、SLC33A1、SLC43A1、STEAP、STEAP2、TPM1、TPM2、TRPC6、ANGPT1、ANGPT2、ANPEP、ECGF1、EREG、FGF1、FGF2、FIGF、FLT1、JAG1、KDR、LAMA5、NRP1、NRP2、PGF、PLXDC1、STAB1、VEGF、VEGFC、ANGPTL3、BAI1、COL4A3、IL8、LAMA5、NRP1、NRP2、STAB1、ANGPTL4、PECAM1、PF4、PROK2、SERPINF1、TNFAIP2、CCL11、CCL2、CXCL1、CXCL10、CXCL3、CXCL5、CXCL6、CXCL9、IFNA1、IFNB1、IFNG、IL1B、IL6、MDK、EDG1、EFNA1、EFNA3、EFNB2、EGF、EPHB4、FGFR3、HGF、IGF1、ITGB3、PDGFA、TEK、TGEA、TGFB1、TGFB2、TGFBR1、CCL2、CDH5、COL18A1、EDG1、ENG、ITGAV、ITGB3、THBS1、THBS2、BAD、BAG1、BCL2、CCNA1、CCNA2、CCND1、CCNE1、CCNE2、CDH1(E-钙黏蛋白)、CDKN1B(p27Kip1)、CDKN2A(p16INK4a)、COL6A1、CTNNB1(b-连环蛋白)、CTSB(组织蛋白酶B)、ESR1、ESR2、F3(TF)、FOSL1(FRA-1)、GATA3、GSN(凝溶胶蛋白)、IGFBP2、IL2RA、IL6、IL6R、IL6ST(糖蛋白130)、ITGA6(a6整联蛋白)、JUN、KLK5、KRT19、MAP2K7(c-Jun)、MKI67(Ki-67)、NGFB(NGF)、NGFR、NME1(NM23A)、PGR、PLAU(uPA)、PTEN、SERPINB5(丝抑蛋白)、SERPINE1(PAI-1)、TGFA、THBS1(血小板应答蛋白-1)、TIE(Tie-1)、TNFRSF6(Fas)、TNFSF6(FasL)、TOP2A(拓扑异构酶Iia)、TP53、AZGP1(锌a-糖蛋白)、BPAG1(网蛋白)、CDKN1A(p21Wap1/Cip1)、CLDN7(密封蛋白-7)、CLU(簇集素)、FGF1、FLRT1(纤连蛋白)、GABRP(GABAa)、GNAS1、ID2、ITGA6(a6整联蛋白)、ITGB4(b 4整联蛋白)、KLF5(GC Box BP)、KRT19(角蛋白19)、KRTHB6(毛发特异性的II型角蛋白)、MACMARCKS、MT3(金属硫蛋白-III)、MUC1(黏蛋白)、PTGS2(COX-2)、RAC2(p21Rac2)、S100A2、SCGB1D2(亲脂素B)、SCGB2A1(乳腺珠蛋白2)、SCGB2A2(乳腺珠蛋白1)、SPRR1B(Spr1)、THBS1、THBS2、THBS4和TNFAIP2(B94)。
本发明ADC中的DVD-Ig的第二可变结构域的氨基酸序列可包含嵌合的、人源化的或人氨基酸序列。这样的序列的任何合适的组合均可并入本发明DVD-Ig抗体化合物的第二可变结构域。
抗原结合可变区序列可选自能够结合特异性靶标并且是本领域公知的多种单克隆抗体。这些包括但不限于抗TNF抗体(美国专利No.6,258,562)、抗IL-12和或抗IL-12p40抗体(美国专利No.6,914,128);抗IL-18抗体(US 2005/0147610 A1)、抗C5、抗CBL、抗CD147、抗gp120、抗VLA4、抗CD11a、抗CD18、抗VEGF、抗CD40L、抗Id、抗ICAM-1、抗CXCL13、抗CD2、抗EGFR、抗TGF-β2、抗E-选择素、抗Fact VII、抗Her2/neu、抗Fgp、抗CD11/18、抗CD14、抗ICAM-3、抗CD80、抗CD4、抗CD3、抗CD23、抗β2整联蛋白、抗α4β7整联蛋白、抗α4β1整联蛋白、αvβ3整联蛋白、抗αvβ5整联蛋白、抗CD52、抗HLA DR、抗CD22、抗Siglec-1、抗Siglec-4、抗Siglec-5、抗Siglec-6、抗Siglec-7、抗Siglec-8、抗Siglec-9、抗PSMA、抗BCMA、抗ROR1、抗ROR2、抗DLL3、抗FOLR1、抗FOLR2、抗CD5、抗SLAMF7、抗FCMR、抗CD20、抗MIF、抗CD64(FcμR1)、抗TCR αβ、抗CD2、抗Hep B、抗CA 125、抗EpCAM、抗gp120、抗CMV、抗gpIIbIIIa、抗IgE、抗CD25、抗CD33、抗HLA、抗VNR整联蛋白、抗IL-1α、抗IL-1β、抗IL-1受体、抗IL-2受体、抗IL-4、抗IL4受体、抗IL5、抗IL-5受体、抗IL-6、抗IL-8、抗IL-9、抗IL-13、抗-IL-13受体、抗IL-17和抗IL-23。参见,例如Beck等.,Nat Rev Drug Discov.2017,16:315-337;Carter andLazar,Nat Rev Drug Discov.2018,17:197-223;Kaplon and Reichert,MAbs.2018,10:183-203;Reichert,MAbs.2017,9:167-181;Reichert,MAbs.2016,8:197-204;和PrestaLG,J.Allergy Clin.Immunol.2005,116:731-6。
抗原结合可变区序列也可选自批准用于临床试验或用于临床用途的开发的多种治疗性抗体。这样的治疗性抗体包括但不限于IDEC/Genentech/Roche(参见例如美国专利No.5,736,137),被批准治疗非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma)的嵌合抗CD20抗体;由Genmab开发的抗CD20;在美国专利No.5,500,362中描述的抗CD20抗体;AME-133(Applied Molecular Evolution);hA20(Immunomedics,Inc.);HumaLYM(Intracel)和PRO70769(PCT/US2003/040426,标题为“ImmunoglobulinVariants and Uses Thereof”);曲妥珠单抗(Genentech)(参见例如美国专利No.5,677,171),被批准治疗乳腺癌的人源化抗HER2抗体;由Genentech开发的帕妥珠单抗(rhuMab-2C4,);在美国专利No.4,753,894中描述的抗HER2抗体;西妥昔单抗(Imclone)(美国专利No.4,943,533;PCT WO 96/40210),嵌合抗EGFR抗体;由Abgenix-Immunex-Amgen开发的ABX-EGF(美国专利No.6,235,883);由Genmab开发的HUMAX-EGFRTM(美国序列号10/172,317);425、EMD55900、EMD62000和EMD72000(Merck KGaA)(美国专利No.5,558,864;Murthy等.1987,Arch Biochem Biophys.252(2):549-60;Rodeck等.,1987,J Cell Biochem.35(4):315-20;Kettleborough等.,1991,Protein Eng.4(7):773-83);ICR62(癌症研究所)(PCT WO 95/20045;Modjtahedi等.,1993,J.Cell Biophys.1993,22(1-3):129-46;Modjtahedi等.,1993,Br J Cancer.1993,67(2):247-53;Modjtahedi等,1996,Br J Cancer,73(2):228-35;Modjtahedi等,2003,IntJ Cancer,105(2):273-80);TheraCIM hR3(YM Biosciences,Canada and Centro deImmunologia Molecula,Cuba(美国专利No.5,891,996;美国专利No.6,506,883;Mateo等,1997,Immunotechnology,3(1):71-81);mAb-806(路德维格癌症研究所,斯隆-凯特琳纪念馆(Ludwig Institute for Cancer Research,Memorial Sloan-Kettering))(Jungbluth等.2003,Proc Natl Acad Sci USA.100(2):639-44);KSB-102(KS Biomedix);MR1-1(IVAX,国家癌症研究所(PCT WO 0162931A2);和SC100(Scancell)(PCT WO 01/88138);阿仑单抗(Millennium),先前被批准用于治疗B细胞慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia)的人源化单克隆抗体;莫罗莫那-CD3(Orthoclone),由Ortho Biotech/Johnson&Johnson开发的抗CD3抗体;替伊莫单抗由IDEC/Schering AG开发的抗CD20抗体;吉妥珠单抗奥佐米星由Celltech/Wyeth开发的抗CD33(p67蛋白)抗体;阿法赛特(alefacept)由Biogen开发的抗LFA-3Fc融合体);由Centocor/Lilly开发的阿昔单抗由Novartis开发的巴利昔单抗(basiliximab)由Medimmune开发的帕利珠单抗英夫利昔单抗由Centocor开发的抗TNFα抗体;阿达木单抗由Abbott开发的抗TNFα抗体;由Celltech开发的抗TNFα抗体;依那西普由Immunex/Amgen开发的抗TNFα Fc融合体;ABX-CBL,由Abgenix开发的抗CD147抗体;ABX-IL8,由Abgenix开发的抗IL8抗体;ABX-MA1,由Abgenix开发的抗MUC18抗体;培马单抗(pemtumomab)(R1549,90Y-muHMFG1),正在由Antisoma开发的抗MUC1;Therex(R1550),正在由Antisoma开发的抗MUC1抗体;正在由Antisoma开发的AngioMab(AS1405);正在由Antisoma开发的HuBC-1;正在由Antisoma开发的Thioplatin(AS1407);(那他珠单抗),正在由Biogen开发的抗α-4-β-1(VLA4)和α-4-β-7抗体;VLA-1mAb,正在由Biogen开发的抗VLA-1整联蛋白抗体;LTBR mAb,正在由Biogen开发的抗淋巴毒素β受体(1ymphotoxin beta receptor,LTBR)抗体;CAT-152,正在由CambridgeAntibody Technology开发的抗TGF-β2抗体;J695,正在由Cambridge AntibodyTechnology和Abbott开发的抗IL-12抗体;CAT-192,正在由Cambridge AntibodyTechnology和Genzyme开发的抗TGFβ1抗体;CAT-213,正在由Cambridge AntibodyTechnology开发的抗嗜酸性粒细胞趋化蛋白1(Eotaxin1)抗体;正在由Cambridge Antibody Technology和Human Genome Sciences Inc.开发的抗Blys抗体;TRAIL-R1mAb,正在由Cambridge Antibody Technology和Human Genome Sciences,Inc.开发的抗TRAIL-R1抗体;贝伐单抗,rhuMAb-VEGF),正在由Genentech开发的抗VEGF抗体;正在由Genentech开发的抗HER受体家族抗体;抗组织因子(Anti-TissueFactor,ATF),正在由Genentech开发的抗组织因子抗体;(奥马珠单抗),正在由Genentech开发的抗IgE抗体;(依法珠单抗),正在由Genentech和Xoma开发的抗CD11a抗体;正在由Genentech和Millennium Pharmaceuticals开发的MLN-02抗体(原名LDP-02);正在由Genmab开发的抗CD4抗体;HUMAXTM-IL15,正在由Genmab和Amgen开发的抗IL15抗体;正在由Genmab和Medarex开发的HUMAXTM-炎症;HUMAXTM-癌症,正在由Genmab和Medarex以及Oxford GlycoSciences开发的抗乙酰肝素酶I抗体;正在由Genmab和Amgen开发的HUMAXTM-淋巴瘤;正在由Genmab开发的HUMAXTM-TAC;IDEC-131,正在由IDEC Pharmaceuticals开发的抗CD40L抗体;IDEC-151(克立昔单抗(Clenoliximab)),正在由IDEC Pharmaceuticals开发的抗CD4抗体;IDEC-114,正在由IDECPharmaceuticals开发的抗CD80抗体;IDEC-152,正在由IDEC Pharmaceuticals开发的抗CD23;正在由IDEC Pharmaceuticals开发的抗巨噬细胞迁移因子(macrophage migrationfactor,MIF)抗体;BEC2,正在由Imclone开发的抗独特型抗体;IMC-1C11,正在由Imclone开发的抗KDR抗体;DC101,正在由Imclone开发的抗flk-1抗体;正在由Imclone开发的抗VE钙黏蛋白抗体;(拉贝珠单抗),正在由Immunomedics开发的抗癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)抗体;(依帕珠单抗),正在由Immunomedics开发的抗CD22抗体;正在由Immunomedics开发的AFP-Cide;正在由Immunomedics开发的MelomaCide;正在由Immunomedics开发的LkoCide;正在由Immunomedics开发的ProstaCide;MDX-010,正在由Medarex开发的抗CTLA4抗体;MDX-060,正在由Medarex开发的抗CD30抗体;正在由Medarex开发的MDX-070;正在由Medarex开发的MDX-018;正在由Medarex和Immuno-Designed Molecules开发的(IDM-1)和抗Her2抗体;正在由Medarex和Genmab开发的抗CD4抗体;HuMax-IL15,正在由Medarex和Genmab开发的抗IL15抗体;CNTO148,正在由Medarex和Centocor/J&J开发的抗TNFa抗体;CNTO 1275,正在由Centocor/J&J开发的抗细胞因子抗体;MOR101和MOR102,正在由MorphoSys开发的抗细胞间黏附分子1(intercellular adhesionmolecule-1,ICAM-1)(CD54)抗体;MOR201,正在由MorphoSys开发的抗成纤维细胞生长因子受体3(fibroblast growth factor receptor 3,FGFR-3)抗体;(维西珠单抗),正在由Protein Design Labs开发的抗CD3抗体;正在由Protein DesignLabs开发的抗γ干扰素抗体;正在由Protein Design Labs开发的抗a 5β1整联蛋白;正在由Protein Design Labs开发的抗-IL-12;ING-1,正在由Xoma开发的抗Ep-CAM抗体;(奥马珠单抗),由Genentech和Novartis开发的人源化抗IgE抗体;以及MLN01,正在由Xoma开发的抗β2整联蛋白抗体。在一些实施方案中,抗原结合可变区序列可来源于已在多种治疗中批准的任何抗体药物,如表1中所示。
表1.FDA批准并销售的基于抗体的癌症治疗
ADC中的DVD-Ig抗体化合物可涵盖嵌合的、人源化的和人免疫球蛋白序列,并且在一些方面中,可包含其任何混合物。在一些实施方案中,可针对效应物功能对其进行修饰,例如,以便增强免疫球蛋白的ADCC、ADCP或CDC。这可通过在免疫球蛋白的Fc区中引入一个或更多个氨基酸替换来实现。作为替代或补充,可在Fc区域中引入一个或更多个半胱氨酸残基,从而允许该区域中链间二硫键形成。由此产生的免疫球蛋白可具有改善的内化能力和/或提高的ADCC、ADCP或CDC。参见Caron等.,J.Exp Med.176:1191-1195(1992)和Shopes,B.J.Immunol.148:2918-2922(1992)。例如,为了提高免疫球蛋白的血清半衰期,可将挽救受体结合表位并入免疫球蛋白(特别是免疫球蛋白片段)中,如美国专利5,739,277中所述。本文中使用的术语“挽救受体结合表位”是指负责提高IgG分子的体内血清半衰期的IgG分子(例如,IgG1、IgG2、IgG3或IgG4)的Fc区的表位。
作为示例,本发明提供了用于特异性靶向肿瘤抗原HER2的包含38C2_Arg的DVD-Ig和DVD-Fab。这些DVD化合物包含与HER2结合的可变结构域和作为第二可变结构域的人源化38C2_Arg可变结构域。可变结构域可在每条轻链和重链上与肽接头序列例如ASTKGP(SEQID NO:3)连接。为了促进重组蛋白产生,可将信号肽序列例如MDWTWRILFLVAAATGAHS(SEQID NO:8)放置在重链和轻链序列的N端。本文中示例的DVD-Ig和DVD-Fab分子的轻链氨基酸序列(曲妥珠单抗Vκ/ASTKGP/h38C2_Arg Vκ/Cκ)减去信号肽在SEQ ID NO:7中示出。DVD-Fab分子的重链氨基酸序列(曲妥珠单抗VH/ASTKGP/h38C2_Arg VH/Cγ11)减去信号肽在SEQ IDNO:5中示出。示例DVD-Ig分子的重链氨基酸序列(曲妥珠单抗VH/ASTKGP/h38C2_Arg VH/Cγ 11-铰链γ1-Cγ12-Cγ13)减去信号肽在SEQ ID NO:6中示出。在这些序列中对将两个可变结构域分开的接头序列加下划线。恒定区序列在序列中是斜体。
HER2靶向的DVD-Fab的重链(SEQ ID NO:5)
HER2靶向的DVD-IgG1的重链(SEQ ID NO:6)
HER2靶向的DVD-Fab和DVD-IgG1的轻链(SEQ ID NO:7)
在多个实施方案中,除在38C2组分的一个或两个臂中具有针对反应性Lys残基的Arg替换之外,本发明的HER2靶向的DVD化合物还可包含与SEQ ID NO:7基本上类似的轻链氨基酸序列,例如与SEQ ID NO:7具有至少约80%氨基酸序列同一性,或者具有至少约81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%氨基酸序列同一性。作为替代或补充,HER2靶向的DVD化合物可包含与SEQ ID NO:6或7基本上类似的重链氨基酸序列,例如,与SEQ ID NO:6或7具有至少约80%氨基酸序列同一性,或者具有至少约81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%氨基酸序列同一性。
V.用于缀合药物的接头部分
本发明的抗体缀合药物(ADC)中的药物部分通常通过合适的接头序列或接头部分以位点特异性方式与38C2_Arg抗体缀合。接头用于连接载物部分(例如,药物部分)与DVD-Ig,并且可使用任何合适的化学过程。多种类型的接头功能可包含在本发明的ADC中,包括但不限于可切割接头和不可切割接头,以及可逆接头和不可逆接头。
可切割接头是依赖靶细胞内的过程(例如细胞质的降低、在溶酶体或内体中暴露于酸性条件,或被细胞内的特定酶(例如蛋白酶)切割)来释放药物部分的那些。因此,免疫缀合物在靶细胞内被内化和加工之后,可切割接头允许附着的药物部分以其原始形式释放。可切割接头包括但不限于其键可被酶(例如,肽接头);还原条件(例如,二硫化物接头);或酸性条件(例如,腙和碳酸盐)切割的那些。不可切割接头利用免疫缀合物的分解代谢降解用于释放药物部分。释放的药物部分通常保留接头以及与接头缀合的免疫球蛋白的氨基酸残基。不可切割接头包括但不限于PEG接头、烃接头和硫醚接头。
可逆接头利用可使用合适的试剂容易地断裂或逆转的化学键。因此,在形成可逆接头之后,可通过用试剂处理使接头在期望的位置断裂,从而从接头释放免疫球蛋白分子。不可逆接头利用在其形成之后不易断裂或逆转的化学键。因此,在形成不可逆接头之后,免疫球蛋白分子不能轻易地释放。
为了与本发明的ADC中的反应性Arg残基进行位点特异性缀合,可使用本领域已知与该残基具有反应性的任何化学部分。例如,合适的接头的一些非限制性实例包括例如苯乙二醛(PGO)、乙二醛(GO)和甲基乙二醛(MGO)。参见例如Takahashi,J.Biochem.81:395-402,1977。如上所述,本发明的一些ADC除经改造的精氨酸残基之外,还包含与38C2中的反应性赖氨酸残基缀合的药物部分。多种其他接头部分可用于位点特异性Lys缀合。参见,例如WO2017/049139。例如,用于位点特异性赖氨酸缀合的可逆接头的非限制性实例包括例如二酮部分。用于位点特异性赖氨酸缀合的不可逆接头的非限制性实例包括例如β-内酰胺部分。
在一些实施方案中,用于连接药物部分的接头可包含氨基酸单元。氨基酸单元允许通过蛋白酶切割接头,从而在暴露于胞内蛋白酶(例如溶酶体酶)时促进药物从免疫缀合物的释放。参见,例如Doronina等.(2003)Nat.Biotechnol.21:778-784。氨基酸单元的一些非限制性实例包括但不限于二肽、三肽、四肽和五肽。二肽的一些非限制性实例包括:缬氨酸-瓜氨酸(vc或val-cit)、丙氨酸-苯丙氨酸(af或ala-phe);苯丙氨酸-赖氨酸(fk或phe-lys);或N-甲基-缬氨酸-瓜氨酸(Me-val-cit)。三肽的一些非限制性实例包括:甘氨酸-缬氨酸-瓜氨酸(gly-val-cit)和甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸(gly-gly-gly)。氨基酸单元可包含天然存在的氨基酸残基,以及次要氨基酸和非天然存在的氨基酸类似物,例如瓜氨酸。可对氨基酸单元的选择性进行设计和优化用于通过特定的酶(例如,肿瘤相关蛋白酶、组织蛋白酶B、C和D或纤溶酶蛋白酶)进行酶促切割。
在一些实施方案中,接头可以是支化或树突型接头部分,用于通过支化多功能接头部分共价连接多于一个药物部分与免疫球蛋白(Sun等(2002)Bioorganic&MedicinalChemistry Letters 12:2213-2215;Sun等(2003)Bioorganic&Medicinal Chemistry 11:1761-1768)。支化树突接头的一些非限制性实例包括2,6-双(羟甲基)-对甲酚和2,4,6-三(羟甲基)-苯酚树枝状单元(WO 2004/01993;Szalai等(2003)J.Amer.Chem.Soc.125:15688-15689;Shamis等(2004)J.Amer.Chem.Soc.126:1726-1731;Amir等(2003)Angew.Chem.Int.Ed.42:4494-4499)。支化接头可提高药物与免疫球蛋白的摩尔比,即载荷,这与ADC的效力相关。因此,例如,在免疫球蛋白仅带有一个用于缀合的反应性氨基酸残基的情况下,多个药物部分可通过支化接头连接。
适合在本发明的ADC中使用的接头(包括延伸物、间隔物和氨基酸单元),可通过本领域已知的方法,例如美国专利公开No.2005/0238649 A1中描述的那些合成。
VI.载荷或载物部分
本发明的ADC旨在将载荷或载物部分(例如,药物)递送至特定的目的靶标。载荷广泛地包括但不限于生物活性部分,例如药物部分和表达修饰部分,以及非生物活性部分,例如可检测部分(例如,可检测标记)。药物部分的非限制性实例包括能够杀伤靶细胞或阻止靶细胞生长的细胞毒性剂和细胞生长抑制剂。在一些实施方案中,所使用的药物部分是毒素、化学治疗剂、抗生素、放射性同位素、经螯合的放射性同位素和溶核酶。在一些实施方案中,用于本发明的ADC的药物部分可以是由聚合物药物组成的聚合药物。例如,ADC中的载荷可以是通过由Mersana Therapeutics(Cambridge,MA)开发的Fleximer技术产生的聚合药物。参见,例如Yurkovetskiy等.,Cancer Res.2015,75:3365-72。
在一些实施方案中,本发明的ADC中的载荷是选自以下的药物部分:奥瑞他汀;多拉司他汀;西马多丁;鹅膏蕈碱(包括但不限于α-鹅膏蕈碱);单甲基奥瑞他汀F(MMAF);单甲基奥瑞他汀E(MMAE);美登木素生物碱(包括但不限于DM1、DM3和DM4);吡咯并苯并二氮杂(PBD,包括但不限于单体PBD和二聚PBD);吲哚并苯二氮杂(包括但不限于二聚吲哚并苯二氮杂);烯二炔类(包括但不限于加利车霉素和tiancimycins);喜树碱类(包括但不限于SN-38);多柔比星(包括但不限于MMDX或其生物活性产物,例如如PNU-159682);倍癌霉素。在一些实施方案中,本发明的ADC中的药物部分选自:V-ATP酶抑制剂、促凋亡剂、Bcl2抑制剂、MCL1抑制剂、HSP90抑制剂、IAP抑制剂、mTor抑制剂、微管稳定剂、微管去稳定剂、奥瑞他汀、多拉司他汀、美登木素生物碱、MetAP(甲硫氨酸氨基肽酶)、蛋白质CRM1的核输出抑制剂、DPPIV抑制剂、蛋白酶体抑制剂、线粒体中磷酰基转移反应的抑制剂、蛋白质合成抑制剂、激酶抑制剂、CDK2抑制剂、CDK9抑制剂、驱动蛋白抑制剂、HDAC抑制剂、DNA损伤剂、DNA烷基化剂、DNA嵌入剂、DNA小沟结合剂和DHFR抑制剂。
在一些实施方案中,本发明的ADC可包含修饰给定生物响应的药物部分。药物部分不应被解释为限于经典的化学治疗剂。例如,药物部分可以是具有期望的生物活性的蛋白质、肽或多肽。这样的蛋白质可包括例如毒素,例如相思豆毒素、蓖麻毒素A、假单胞菌外毒素、霍乱毒素或白喉毒素;蛋白质,例如肿瘤坏死因子、α-干扰素、β-干扰素、神经生长因子、血小板来源的生长因子、组织纤溶酶原激活剂、细胞因子、凋亡剂、抗血管生成剂或生物响应调节剂,例如如淋巴因子。在一些实施方案中,药物部分可以是细胞毒素、药物(例如,免疫抑制剂)或放射性毒素。细胞毒素的一些实例包括但不限于紫杉烷类、DNA烷化剂类(例如,CC-1065类似物)、蒽环类、微管溶素类似物、倍癌霉素类似物、奥瑞他汀E、奥瑞他汀F、美登木素生物碱类和包含反应性聚乙二醇部分的细胞毒性剂、taxon、细胞松弛素B、短杆菌肽D、溴化乙锭、依米丁(emetine)、丝裂霉素、依托泊苷、替尼泊苷(tenoposide)、长春新碱、长春碱、秋水仙碱(colchicin)、多柔比星、柔红霉素、二羟基炭疽菌素二酮、米托蒽醌、光辉霉素、放线菌素D、1-去氢睾酮、糖皮质激素、普鲁卡因、丁卡因、利多卡因、普萘洛尔和嘌呤霉素,及其类似物或同源物。
药物部分还可包含例如抗代谢物(例如,甲氨蝶呤、6-巯基嘌呤、6-硫代鸟嘌呤、阿糖胞苷、5-氟尿嘧啶达卡巴嗪(decarbazine))、消融剂(ablating agent)(例如,氮芥(mechlorethamine)、塞替派苯丁酸氮芥(thioepa chlorambucil)、美法仑(melphalan)、卡莫司汀(BSNU)和洛莫司汀(CCNU)、环磷酰胺、白消安、二溴甘露醇、链脲霉素、丝裂霉素C和顺式-二氯二胺铂(II)(DDP)顺铂)、蒽环类(例如,柔红霉素(原名道诺霉素)和多柔比星)、抗生素类(例如,更生霉素(dactinomycin)(原名放线菌素)、博来霉素、光辉霉素和氨茴霉素(anthramycin,AMC))和抗有丝分裂剂(例如,长春新碱和长春碱)。参见,例如美国专利公开No.20090304721,其通过引入整体并入本文。可与本发明的抗体、抗体片段(抗原结合片段)或功能性等同物缀合的细胞毒素的其他非限制性实例包括倍癌霉素、加利车霉素、美登素和奥瑞他汀及其衍生物。
本发明的ADC中的载物部分也可以是放射性同位素或经螯合的放射性同位素,以产生细胞毒性放射性药物,称为放射性免疫缀合物。可与抗体缀合用于诊断或治疗的放射性同位素的一些实例包括但不限于碘-131、铟-111、钇-90、镥-177、铋-213和砹-211。在本领域中建立了用于制备放射性免疫缀合物的方法。放射性免疫缀合物的实例是市售的,包括ZevalinTM(DEC Pharmaceuticals)和BexxarTM(Corixa Pharmaceuticals),并且可使用本发明的抗体使用类似的方法来制备放射性免疫缀合物。在一些实施方案中,大环螯合剂是1,4,7,10-四氮杂环十二烷-N,N’,N”,N”’-四乙酸(DOTA),其可通过接头分子与免疫球蛋白连接。
在一些实施方案中,本发明的ADC的载荷可以是用于近红外(near infrared,NIR)光免疫治疗(photoimmunotherapy,PIT)的光吸收剂。PIT是可诱导肿瘤的快速且特异性破坏的新的肿瘤靶向的抗癌平台。治疗由药物(癌症靶向的光活化抗体缀合物)和在肿瘤部位施加光的装置系统组成。PIT的独特之处在于,它组合了癌细胞的分子靶向以实现高的肿瘤特异性,以及导致广谱抗癌活性的癌细胞破坏的生物物理机制,而不管患者肿瘤的致癌机制如何。参见,例如Mitsunaga等.,Nat.Med.17:1685-92,2011。例如,本发明的DVD化合物可包含NIR PIT光吸收剂(例如,IR700)和靶向肿瘤细胞的抗原结合可变结构域。
在多个实施方案中,本发明的ADC的载荷可以是单个药物单元或多个相同的药物单元,例如同一药物部分上的2、3、4、5、6、7、8、9或10个药物单位。在一些实施方案中,药物部分包含在相同药物部分上的两个不同药物单元。例如,在一些方面中,单个药物部分可包含MMAF药物单元和PBD单体药物单元二者。此外,在某些方面中,主题免疫缀合物可包含与免疫缀合物的第一臂缀合的第一药物部分和与免疫缀合物的第二臂缀合的第二药物部分。因此,药物部分的多种组合中的任一种均可通过接头与主题DVD-Ig缀合。作为示例,ADC可在其两个臂上包含位点特异性Arg缀合的羧基四甲基罗丹明(TAMRA)和位点特异性Lys缀合的MMAF。
在一些实施方案中,本发明的ADC中的载物部分是表达修饰部分。表达修饰部分包括但不限于非蛋白质编码RNA(“non-protein-coding RNA,npcRNA”)。在一些实施方案中,npcRNA可以是例如微RNA(microRNA,miRNA)、miRNA前体、小干扰RNA(small interferingRNA,siRNA)、小RNA及其编码前体、异染色质siRNA(heterochromatic siRNA,hc-siRNA)、Piwi-相互作用RNA(Piwi-interacting RNA,piRNA)、发夹双链RNA(发夹dsRNA)、反式作用siRNA(trans-acting siRNA,ta-siRNA)、天然存在的反义siRNA(nat-siRNA)、示踪剂RNA(tracer RNA,tcRNA)、指导RNA(gRNA)和单指导RNA(single-guide RNA,sgRNA)。
在一些实施方案中,本发明的ADC中的载物部分是可检测部分。可检测部分包括但不限于直接检测的标记或部分(例如荧光标记、发色标记、电子致密标记、化学发光标记和放射性标记)以及间接检测(例如,通过酶促反应或分子相互作用)的部分(例如酶或配体)。示例性的标记包括但不限于放射性同位素32P、14C、125I、3H和131I、荧光团例如稀土螯合物或荧光素及其衍生物、罗丹明及其衍生物包括羧四甲基罗丹明(TAMRA)、丹酰、伞形酮、荧光素酶例如萤火虫萤光素酶和细菌萤光素酶(美国专利No.4,737,456)、萤光素、2,3-二氢酞嗪二酮、辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)、碱性磷酸酶、β-半乳糖苷酶、葡糖淀粉酶、溶菌酶、糖氧化酶(例如葡萄糖氧化酶、半乳糖氧化酶和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶)、杂环氧化酶(例如尿酸酶和黄嘌呤氧化酶),其使用过氧化氢氧化染料前体(例如HRP)与酶偶联、乳过氧化物酶或微过氧化物酶、生物素/亲和素、自旋标记物、噬菌体标记物、稳定自由基等。
VII.位点特异性Arg缀合的ADC的产生
本发明的位点特异性精氨酸缀合的抗体药物缀合物(ADC)可用本领域已知的任何方法和本文中所示例的特定技术来产生。例如,来自宿主细胞的表达,其中编码DVD重链和/或DVD轻链的一种或更多种表达载体通过标准技术被转染到宿主细胞中。术语“转染”的多种形式旨在涵盖通常用于将外源DNA引入到原核或真核宿主细胞中的广泛多种技术,例如电穿孔、磷酸钙沉淀、DEAE-右旋糖酐转染等。尽管可在原核或真核宿主细胞中表达本发明的DVD免疫球蛋白,但优选在真核细胞中并且最优选在哺乳动物宿主细胞中表达DVD免疫球蛋白,因为这样的真核细胞(并且特别是哺乳动物细胞)比原核细胞更可能组装和分泌适当折叠且具有免疫活性的DVD免疫球蛋白。
用于表达本发明的重组免疫球蛋白的优选的哺乳动物宿主细胞包括中国仓鼠卵巢(CHO细胞)(包括与DHFR选择性标志物(例如如R.J.Kaufman and P.A.Sharp(1982)Mol.Biol.159:601-621中所述)一起使用的dhfr-CHO细胞,其在Urlaub and Chasin,(1980)Proc.Natl.Acad.Sci.USA77:4216-4220中进行了描述)、人胚肾(Human EmbryonicKidney,HEK)细胞、NS0骨髓瘤细胞、COS细胞和SP2细胞。当将编码DVD免疫球蛋白的重组表达载体引入到哺乳动物宿主细胞时,通过将宿主细胞培养足以使DVD免疫球蛋白在宿主细胞中表达或者更优选地使DVD免疫球蛋白分泌到其中生长宿主细胞的培养基中的时间来产生DVD免疫球蛋白。可使用标准蛋白质纯化方法从培养基中回收DVD免疫球蛋白。
在用于重组表达本发明的DVD免疫球蛋白的优选系统中,通过磷酸钙介导的转染将编码DVD重链和DVD轻链二者的重组表达载体引入到dhfr-CHO细胞中。在重组表达载体中,DVD重链和轻链基因各自与CMV增强子/AdMLP启动子调控元件可操作地连接,以驱动基因的高水平转录。重组表达载体还带有DHFR基因,该基因允许使用甲氨蝶呤选择/扩增用于选择已用该载体转染的CHO细胞。培养选择的转化宿主细胞以允许表达DVD重链和轻链,并从培养基回收完整的DVD免疫球蛋白。使用标准的分子生物学和组织培养技术制备重组表达载体、转染宿主细胞、选择转化体、培养宿主细胞并从培养基回收DVD免疫球蛋白。另外,本发明的一些方面包括合成本发明的DVD免疫球蛋白的方法,其通过在合适的培养基中培养本发明的宿主细胞直至合成本发明的DVD免疫球蛋白。一种方法还可包括从培养基中分离DVD免疫球蛋白以产生分离的免疫球蛋白。
主题DVD免疫球蛋白的特征在于它们可以以类似于常规抗体的方式产生和纯化。DVD免疫球蛋白的产生可在不进行恒定区的任何序列修饰或任何种类的化学修饰的情况下,导致具有期望活性的均质单一主要产物。
VIII.治疗性应用和药物组合
本发明的位点特异性Arg缀合的ADC可用于多种预防性、治疗性和诊断性应用。本发明的ADC的具体应用将取决于与抗体化合物缀合的载荷或药物部分。当使用基于DVD的ADC时,具体应用还取决于由DVD中的第二可变结构域识别的靶分子。因此,本文中所述的抗体化合物和ADC可用于治疗多种肿瘤。本发明的化合物可容易地应用于许多特定的癌症治疗。这样的治疗性应用包括,例如,通过已知的肿瘤靶向抗体或如本文中所示例的抗原结合可变结构域将药物部分递送至肿瘤。它们还包括不直接靶向肿瘤细胞的治疗,例如,用于靶向T细胞、其他免疫细胞和肿瘤支持细胞的抗体-siRNA缀合物。它们还包括其他非常规癌症治疗,例如,使用近红外(NIR)光免疫治疗(PIT)用于治疗肿瘤(以及非肿瘤细胞)。本发明的化合物(例如,基于DVD的ADC)也可用于治疗非肿瘤适应证,例如感染性疾病、自身免疫病、心血管疾病、代谢性疾病。参见,例如Beck等.,Nat Rev Drug Discov.2017,16:315-337。
作为示例,本发明的一些ADC(包括包含本文中所示例的HER2靶向的DVD化合物的ADC)可通过靶向和杀伤表达特定肿瘤抗原的细胞用于多种癌症和其他疾病的治疗。合适的癌症类型包括但不限于血液系统癌症、癌、肉瘤、黑素瘤和中枢神经系统癌症。可用本发明的ADC治疗的血液系统癌症的一些非限制性实例包括:白血病、急性髓性白血病(acutemyeloid leukemia)、急性淋巴细胞白血病、慢性髓细胞性白血病(chronic myelogenousleukemia)、慢性淋巴细胞白血病、淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、骨髓瘤和骨髓增生异常综合征。可用本发明的ADC治疗的癌的一些非限制性实例包括皮肤癌、头颈癌、甲状腺癌、肺癌、鼻咽癌、结直肠癌、肝癌、膀胱癌、卵巢癌、宫颈癌、子宫内膜癌、前列腺癌、胃癌、食管癌、胰腺癌、肾癌和乳腺癌。可用本发明的ADC治疗的肉瘤的一些非限制性实例包括血管肉瘤、软骨肉瘤、尤因肉瘤(Ewing’s sarcoma)、纤维肉瘤、胃肠道间质瘤、平滑肌肉瘤、脂肪肉瘤、恶性外周神经鞘瘤、骨肉瘤、多形性肉瘤、横纹肌肉瘤、卡波西肉瘤(Kaposi’ssarcoma)和滑膜肉瘤。可用本发明的ADC治疗的中枢神经系统癌症的一些非限制性实例包括神经胶质瘤、脑膜瘤和神经瘤。可用本发明的ADC治疗的其他癌症的非限制性实例包括黑素瘤。
在一些实施方案中,本发明的ADC可与一种或更多种另外的治疗联合使用以治疗特定的癌症。例如,本发明的ADC可与其他药物例如抗肿瘤剂、细胞毒性剂、抗血管生成剂或免疫抑制剂组合使用或作为常规治疗的辅助。另外的治疗剂的一些非限制性实例包括顺铂、卡铂、奥沙利铂、二氯甲基二乙胺(mechlorethamine)、环磷酰胺、苯丁酸氮芥、异环磷酰胺、多柔比星、柔红霉素、戊柔比星、伊达比星、表柔比星、放线菌素、博来霉素、普卡霉素、丝裂霉素、贝伐单抗、伊马替尼、厄洛替尼、吉非替尼、依鲁替尼、艾代拉里斯(idelalisib)、来那度胺、长春新碱、长春碱、长春瑞滨、长春地辛、紫杉醇和多西他赛。任何抗肿瘤剂均可用于这样的组合治疗。这些包括常规和/或实验性化学治疗剂、放射治疗等。
对于治疗性用途,可将本发明的ADC配制成药物组合物。所述药物组合物通常包含有效量的免疫缀合物和可药用载体。本发明的药物组合物可通过本领域已知的多种方法施用。如本领域技术人员将理解的,施用途径和/或方式将取决于目标疾病或病症和所期望的结果而变化。为了通过某些施用途径施用本发明的化合物,可能有必要用防止其失活的材料包被化合物或与该化合物共施用。例如,可在合适的载体例如脂质体或稀释剂中将化合物施用于对象。可药用稀释剂包括盐水和水性缓冲溶液。药物载体包括无菌水溶液或分散体和用于临时制备无菌可注射溶液或分散体的无菌粉末。这样的介质和药剂用于药物活性物质的用途是本领域己知的。
本发明的药物组合物还可包含佐剂,例如防腐剂、湿润剂、乳化剂和/或分散剂。可通过灭菌程序并通过包含多种细抗菌和抗真菌剂(例如对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸等)二者来确保阻止微生物的存在。还期望在组合物中包含等张剂,例如糖、氯化钠等。另外,通过包含延迟吸收的药剂(例如单硬脂酸铝和明胶)可实现可注射药物形式的延长吸收。
可改变本发明药物组合物中活性成分的实际剂量水平,以便获得有效实现特定患者之所期望的治疗响应的活性成分的量、组合物和施用方式而对患者无毒。所选的剂量水平将取决于多种药代动力学因素,包括所用的本发明的特定组合物的活性、施用途径、施用时间、所用特定化合物的排泄率、治疗持续时间、与所用特定组合物组合使用的其他药物、化合物和/或材料、所治疗患者的年龄、性别、体重、病情、总体健康状况和既往病史,以及医学领域公知的因素。药物组合物必须是无菌的并且流动至所述组合物可通过注射器递送的程度。除水之外,载体优选为等张的缓冲盐溶液。
本发明的药物组合物还可包含有效量的第二治疗剂。在一些实施方案中,第二治疗剂是抗体、抗肿瘤剂、细胞毒性剂、抗血管生成剂或免疫抑制剂。在一些实施方案中,第二治疗剂选自:顺铂、卡铂、奥沙利铂、二氯甲基二乙胺、环磷酰胺、苯丁酸氮芥、异环磷酰胺、多柔比星、柔红霉素、戊柔比星、伊达比星、表柔比星、放线菌素、博来霉素、普卡霉素、丝裂霉素、贝伐单抗、伊马替尼、厄洛替尼、吉非替尼、依鲁替尼、艾代拉里斯、来那度胺、长春新碱、长春碱、长春瑞滨、长春地辛、紫杉醇和多西他赛。
提供以下实施例、序列和附图以帮助理解本发明,其真实范围在所附权利要求中阐明。应理解,在不脱离本发明的精神的情况下,可对所阐述的方法进行修改。
实施例
提供以下实施例以举例说明而非限制本发明。
实施例1:h38C2_Arg Fab的产生和结晶
催化性抗体38C2,其通过使用具有β-二酮功能的芳族半抗原进行小鼠反应性免疫产生,并且其人源化形式h38C2在可变重链结构域(VH)的第99位(按Kabat编号为第93位)处包含高度反应性的掩埋赖氨酸残基。(Karlstrom等.,Proc Natl Acad Sci USA 97,3878-3883,2000)。由于其位于深疏水口袋的底部,Lys99的ε-氨基的质子化是不利的,由此降低了其pKa并提高了其亲核性。Lys99的独特反应性对于mAb 38C2和h38C2的醛缩酶活性至关重要,并且已被用于分别与β-二酮半抗原和β-内酰胺半抗原衍生物的可逆和不可逆共价缀合,以提供高度均质的化学程序化抗体和ADC(图1a)。假设用其他亲核氨基酸残基替换Lys99将提供正交缀合化学过程,我们以Fab形式克隆、表达并纯化h38C2的Lys99Arg突变体(称为h38C2_Arg)并通过X射线晶体学在分辨率下确定其三维结构(图2a和表2)。与亲本抗体中的Lys99类似,Arg99位于填充有一个硫酸根离子和八个水分子的深口袋的底部(图2b和图3a)。与38C2紧密相关的催化性抗体33F12的晶体结构的重叠证实三维结构是高度保守的,其中差异仅限于Lys99Arg突变和口袋边缘处Tyr101的略微倾斜(图2c)。
接下来,我们确定了Arg99的pKa,以检验我们的假设:Arg99的异常反应性来源于缀合酸的基本扰动pKa。我们使用动力学方法(pH-速率曲线)来确定Arg99的表观pKa(Reijenga等.,Anal Chem Insights 8,ACLS12304,2013)。用不同pH水平的MMAF-TPG处理h38C2_Arg,并通过RP-HPLC确定反应速率。然后将速率绘制为反应pH的函数。pH-缀合速率曲线在图3b-左中示出,并且在约5.2处显示出转折点,表明Arg99的表观pKa。Arg缀合酸的参考pKa值通常为约12至12.5,尽管也报道了高至13.8的值(Fitch等.,Protein Sci 24,752-761,2015)。尽管胍基侧链的pKa高,但报道扰动pKa低至8.0或9.1(Niemeyer等.,ProcNatl Acad Sci104,666-671,2007和Wells等.,Biochemistry 33,5777-5782,1994)。然而,据我们所知,从未报道异常低的pKa为5.2,其比正常参考值低约7个数量级。为了确定观察到的Arg99的pKa为5.2是由于h38C2疏水口袋引起的,我们模拟Arg99周围的氨基酸合成并评估了六肽Ac-Tyr-Cys(S-乙酰胺)-Arg99-Thr-Tyr-Phe-OH的pKa(图3b-右)。将六肽用苯乙二醛处理,以确定h38C2疏水口袋外部的Arg残基的表观pKa。由于肽在pH>12.5下的不稳定性,我们不能够获得六肽中精氨酸残基的确定pKa值。另外,在pH≥11.6下,肽与苯乙二醛之间的反应速率变得非常快,因此阻止我们在HPLC时间范围内确定Arg残基的pKa。然而,对pH≥11.6下的反应速率进行监测得到图3b-右中所示的pH-缀合速率图,其表明基于肽的Arg残基的表观pKa>11.9。即使认为获得的pKa是粗略的估计,但这些数据也证实了h38C2口袋外部的Arg99的pKa比5.2高数个数量级。蛋白上和蛋白外的pKa测定二者均证实了我们的假设:h38C2中疏水口袋的微环境扰动Arg99的pKa。h38C2的Arg99的极低pKa(5.2)使该残基对亲电子苯乙二醛具有异常亲核性。在弱酸条件下(pH 6.6),预计Arg99的未质子化胍基可比平均pKa值约为12的表面精氨酸高约25倍。
实施例2:h38C2_Arg的正交缀合化学过程
保留深口袋表明,与掩埋的Lys99类似,掩埋的Arg99将具有可用于位点特异性缀合的独特反应性。为了对此进行测试,我们首先克隆、表达和纯化具有来源于人源化抗人HER2 mAb曲妥珠单抗的外部Fv和来源于h38C2_Arg的内部Fv的DVD-Fab(图4a)。出于比较产生了具有来源于亲本h38C2的内部Fv(即我们先前报道的DVD-IgG1的Fab片段)(Nanna等.,Nat Commun,8:1112,2017)的对应DVD-Fab。尽管两种DVD-Fab在产率和纯度方面是不可区分的,但它们却揭示了预期的催化活性的显著差异。基于h38C2_Arg的DVD-Fab已完全丧失了典型醛缩酶抗体33F12、38C2和h38C2的逆醛缩酶活性,并由Lys99介导(图4b)。为了探索Arg99的位点特异性缀合,我们合成了四甲基罗丹明(TAMRA)的苯乙二醛衍生物(化合物1;图5)。已知苯乙二醛在温和条件下与Arg残基的胍基反应,导致形成稳定的羟基咪唑环(图1b)。最近,该反应已被用于使用市售4-叠氮基-苯乙二醛的点击化学生物缀合。化合物1与h38C2_Arg DVD-Fab在37℃下在50mM HEPES、50mM NaHCO3(pH6.0)中以不同摩尔比孵育3小时之后的共价缀合通过SDS-PAGE随后是观察蓝光进行分析(图4c)。在5倍和10倍摩尔过量的化合物1下,检测到在70kDa处的强荧光条带,而等摩尔量仅导致弱的染色。尽管亲本h38C2_Lys DVD-Fab仅在相同条件下微弱地染色表明化合物1与Arg99优先共价缀合,但在与5倍和10倍摩尔过量的TAMRA的β-内酰胺半抗原衍生物(化合物2;图5)孵育之后,在70kDa处揭示了强荧光条带。此外,h38C2_Arg DVD-Fab与非荧光β-内酰胺半抗原(化合物3;图5)以10倍摩尔过量的预孵育,没有阻断化合物1的共价缀合,证明了Arg99和Lys99的正交缀合化学过程(图4d)。
表2.h38C2_Arg Fab结晶的数据收集和细化统计
1括号中的值是指对最高分辨率壳的统计。
2Rfree是用在细化之前剔除5%的数据作为测试集计算的。
接下来,我们通过质谱(mass spectrometry,MS)分析了h38C2_Arg DVD-Fab。与预期的MW 73,820Da相比,未缀合的抗体揭示了观察到的分子量(molecular weight,MW)为73,836Da(图6)。在与5倍摩尔过量的化合物1孵育之后,观察到的MW提高了803Da,这对应于在Arg99处形成稳定羟基咪唑环的预期MW提高。缀合抗体与未缀合抗体的比为约8.5∶1.5。当化合物1的摩尔过量提高至10倍时,未缀合抗体的信号降低。然而,对应于具有两个经修饰Arg残基的抗体缀合物的新信号以单缀合抗体与双缀合抗体的比为约8.3∶1.7出现。
为了确认Arg99为缀合位点,用胃蛋白酶消化未处理和经苯乙二醛处理的h38C2_Arg Fab,并通过LC-MS/MS进行分析。我们实现了轻链序列和重链序列二者>90%氨基酸序列覆盖。对于缀合的h38C2_Arg Fab但不是未缀合的h38C2_Arg Fab,检测到在Arg上具有116-Da修饰的六肽Tyr-Cys-Arg-Thr-Tyr-Phe(图16)。该六肽与Arg99周围的氨基酸序列匹配,并且是唯一可检测到的经修饰的肽,其中相对丰度高于对应的未经修饰的肽,从而验证了位点特异性Arg99修饰。Arg残基上的116Da质荷比(m/z)移位与Arg的胍基和苯乙二醛之间羟基咪唑环的形成相一致(图1b)。尽管在该实验中可检测到另外的经修饰重链肽和轻链肽,但它们的相对丰度比对应的未经修饰的肽低得多。
为了评估Arg:苯乙二醛加合物的稳定性,使h38C2_Arg DVD-Fab与化合物1缀合,并在37℃下与人血浆一起孵育多至10天。在0、6、12、24、48、96、144、192和240小时之后的分析揭示了缀合物的高稳定性,其中在10天之后累积衰减为约15%(图7)。
实施例3基于h38C2_Arg的ADC的产生和表征
在建立缀合效率、选择性和稳定性的情况下,我们接下来研究了Arg:苯乙二醛加合物对于组装均质ADC的适用性。为此,我们合成了MMAF的苯乙二醛衍生物(化合物4;图5),类似于MMAF的β-内酰胺半抗原衍生物(化合物5;图5),我们用于组装基于亲本h38C2_Lys的均质ADC。使用与化合物1相同的条件,使h38C2_Arg DVD-Fab与化合物4反应,并通过MS确定缀合物,揭示了在约8.5∶1.5比下缀合和未缀合抗体的观察质量分别为74,970Da和73,837Da,并接近于DAR为1的预期质量(图8a)。尺寸排阻色谱(size exclusionchromatography,SEC)进一步显示,MMAF缀合的h38C2_Lys99Arg DVD-Fab不含聚集体(图8b)。
DVD-Fab形式的ADC在亚纳摩尔浓度下揭示了对HER2阳性人SK-BR-3乳腺癌细胞的细胞毒性,而在100nM、最高测试浓度下揭示了对HER2阴性人MDA-MB-231乳腺癌细胞是无活性的(图8c)。重要的是,当与由亲本h38C2_Lys DVD-Fab和化合物5组装的基于Lys99的ADC(IC50=0.64nM)相比时,基于Arg99的ADC(IC50=0.85nM)揭示了类似的效力和选择性。基于Arg99的ADC与基于Lys99的ADC一样有效地根除靶细胞的能力表明结合、内化、内体运输、溶酶体降解和药物释放以类似的效率进行或至少给出相同的净结果。通过表面等离子体共振比较未缀合和MMAF缀合的h38C2_Arg以及h38C2_Lys DVD-Fab与HER2的结合,揭示了高度保守的动力学和热力学参数(图9),证实Arg99Lys突变或与内部Fv的药物缀合均不干扰由外部Fv介导的靶向。
MMAF缀合的h38C2_Arg99 DVD-Fab的效力促使我们产生以DVD-IgG1形式的对应ADC(图10a)。通过MS对ADC的分析揭示了两个主峰,一个对应于未缀合的轻链并且另一个对应于具有单个MMAF载荷的重链(图11)。还检测到对应于未缀合重链(重链主峰的15%)和具有两个MMAF载荷的重链(0.5%)的次峰,表明总DAR为约1.7。如预期的那样,以DVD-IgG1形式的基于Arg99的ADC揭示了与以DVD-IgG1形式的基于Lys99的ADC的基本相同的效力和选择性(图10c)。
实施例4:组合h38C2_Lys和h38C2_Arg的异二聚体DVD-IgG1的产生和表征
我们接下来开始通过将h38C2_Arg和h38C2_Lys组合到一个DVD-IgG1中来利用Arg::苯乙二醛和Lys::β-内酰胺缀合的正交性。值得注意的是,该组装涉及两条不同的重链和两条相同的轻链,使得能够利用结进孔突变用于重链异二聚体化(图10a)(参见,例如Merchant等.,Nat Biotechnol 16,677-681,1998)。以与基于Arg99的异二聚体DVD-IgG1相当的质量和数量表达和纯化异二聚体DVD-IgG1(图10a),并揭示了与基于Lys99的DVD-IgG1相比催化活性预期降低约50%(图10b)。MMAF的苯乙二醛或β-内酰胺半抗原衍生物(分别为化合物4和5)与异二聚体DVD-IgG1的缀合产生DAR约为1倍的具有高效力和选择性的ADC,尽管IC50值略高于DAR约为2倍的基于对应的同二聚体DVD-IgG1的ADC。(在SK-BR-3细胞的情况下,分别为0.53nM相对于0.39nM和0.60nM相对于0.37nM)(图10c)。
为了测试h38C2_Arg和h38C2_Lys的正交缀合化学是否允许一锅式标记具有两个不同载荷的异二聚体DVD-IgG1,我们将TAMRA的苯乙二醛衍生物(化合物1)与近红外荧光染料Cy7的β-内酰胺半抗原衍生物(化合物6;图5)进行组合。在没有间歇性纯化或缓冲液交换步骤的情况下将两种染料依次与异二聚体DVD-IgG1缀合(图12a)。不论缀合顺序如何,一锅式反应均产生相同质量和数量的双标记异二聚体DVD-IgG1。使用还原性SDS-PAGE,发现TAMRA和Cy7荧光二者均局限于重链,如预期那样分别用于与h38C2_Arg和h38C2_Lys进行位点特异性缀合(图12b)。接下来,我们使用相同的一锅式组装用于依次缀合TAMRA的苯乙二醛衍生物(化合物1)和MMAF的β-内酰胺半抗原衍生物(化合物5)。MS证实了具有单个TAMRA和单个MMAF载荷的双标记异二聚体DVD-IgG1作为主要产物,尽管没有TAMRA载荷的MMAF标记的异二聚体DVD-IgG1也是突出的(图13a和b)。值得注意的是,根据MS,化合物1和化合物5的同时而非依次缀合以类似的缀合效率递送双标记的异二聚体DVD-IgG1(图13c)。
双标记使得能够产生可在内化和运输期间直接追踪的荧光ADC。为了研究该效用,我们在不存在和存在胞吞抑制剂氧化苯砷(PAO)的情况下,将HER2阳性SK-BR-3(图14a和图15a)和HER2阴性MDA-MB-231细胞(图14b和图15b)与MMAF/TAMRA标记的异二聚体DVD-IgG1在37℃下孵育4小时,并随后通过共聚焦荧光显微术分析细胞。仅观察到SK-BR-3细胞的内体TAMRA荧光并且在不存在PAO的情况下,这表明HER2介导的内化和运输。用FITC缀合的山羊抗人IgG F(ab’)2多克隆抗体对异二聚体DVD-IgG1载体进行同时染色揭示了与TAMRA荧光的严格共定位,表明内体包含完整的荧光ADC。用基于h38C2_Lys的且化合物2标记的同二聚体DVD-IgG1未检测到TAMRA和FITC荧光,其中来源于曲妥珠单抗的外部Fv被同种型对照外部Fv替代。
实施例5:材料和方法
细胞系:乳腺癌细胞系SK-BR-3和MDA-MB-231购自ATCC,并且在补充有10%(v/v)热灭活的FBS和1×青霉素-链霉素(含100U/mL青霉素和100mg/mL链霉素;全部均来自Thermo Fisher)的DMEM中培养。Expi293F细胞在补充有1×青霉素-链霉素(全部均来自Thermo Fisher)的Expi293表达培养基中培养。
h38C2_Arg Fab、DVD-Fab和DVD-IgG1的克隆、表达和纯化:
Fab.h38C2 Fab(Rader等.,J Mol Biol 332,889-899,2003)的轻链(Vκ-Cκ;LC)和重链片段(VH-CH1;Fd)编码序列在VH中具有Lys99Arg突变,并且N端人CD5信号肽(MPMGSLQPLATLYLLGMLVASVLA)编码序列通过NheI/XhoI(New England Biolabs)分别克隆到哺乳动物表达载体pCEP4中。使用ExpiFectamine 293转染试剂盒(Thermo Fisher)根据制造商的说明将编码LC和Fd的经纯化(Qiagen)的质粒共转染到已在300mL Expi293表达培养基中生长至密度为3×106个细胞/mL的Expi293F细胞中。在37℃,5%CO2下在300mLExpi293表达培养基中连续培养5天之后,收集培养物上清液,并通过具有1-mL HiTrapKappaSelect柱连同FPLC仪器(二者均来自GE Healthcare)的亲和色谱纯化。如通过Pierce BCA蛋白测定试剂盒(Thermo Fisher)确定的,Fab的产率为约15mg/L。使用与FPLC仪器连接的Superdex 200 10/300 GL柱(GE Healthcare),通过尺寸排阻色谱进一步纯化Fab。Fab峰级分通过Amicon Ultra 0.5-mL离心过滤器(MilliporeSigma)浓缩,并放入到0.1M乙酸钠(pH 5.5)中。
DVD-Fab.如在Nanna等.,Nat Commun,8:1112,2017中所述,克隆与分别由曲妥珠单抗的Vκ和VH外部结构域编码序列延伸的Fab相同的LC和Fd表达组件,以产生HER2靶向的h38C2_Arg,所述Vκ和VH外部结构域与内部结构域通过ASTKGP(SEQ ID NO:3)编码序列隔开。在上述Expi293F系统中表达之后,收集培养物上清液,并通过具有1-mL蛋白AHP柱(GEHealthcare)连同FPLC仪器的亲和色谱进行纯化。如通过Pierce BCA蛋白测定试剂盒确定的,DVD-Fab的产率为约18mg/L,并且通过使用10孔NuPAGE 4%至12%Bis-Tris蛋白凝胶的SDS-PAGE随后是用PageBlue蛋白质染色溶液(全部均来自Thermo Fisher)进行染色来确定其纯度。使用相同的程序克隆、表达和纯化含亲本h38C2_Lys的DVD-Fab。
DVD-IgG1.如在Nanna等.,Nat Commun,8:1112,2017中所述,使用与DVD-Fab相同的内部(h38C2_Arg)和外部结构域(抗-HER2)编码序列,将DVD-IgG1克隆到pCEP4中。组合h38C2_Arg重链与亲本h38C2_Lys重链的异二聚体DVD-IgG1基于CH3中的结进孔突变(参见,例如Merchant等.,Nat Biotechnol 16,677-681,1998;和Qi等.,Proc Natl Acad Sci USA115,E5467-E5476,2018)。同二聚体和异二聚体DVD-IgG1的表达、纯化和分析与上述DVD-Fab的相同。产率为约19mg/L。
h38C2_Arg Fab的结晶和结构确定:在室温(room temperature,RT)下从包含20%(w/v)PEG 3350、40mM硫酸铵和200mM柠檬酸铵(pH4.8)的沉淀剂条件通过蒸汽扩散获得晶体。在高级光源同步加速器设备(Advanced Light Source synchrotron facility)(劳伦斯伯克利国家实验室,Lawrence Berkeley National Laboratory)上在5.0.1光束线上的Pilatus3 6M检测器上收集布拉格间距(Bragg spacing)为的衍射数据集。使用PDBID 3FO9作为PHASER中的检索模型获得分子替代溶液。使用PHENIX 1.12和BUSTER 2.9的组合进行晶体学细化。使用图形程序COOT完成手动重建、模型调整和真实空间细化。使用PYMOL创建模型图。最终模型的坐标和结构因子以ID 6DZR形式存放在在PDB中。
催化活性测定:使用方法学(List等.,Proc Natl Acad Sci U S A 95,15351-15355,1998)分析催化活性,并完全如Nanna等.(上文)中所述进行。
苯乙二醛和β-内酰胺衍生物的合成:化合物1(苯乙二醛-TAMRA)、2(β-内酰胺-半抗原-TAMRA)、3(β-内酰胺-半抗原-叠氮化物)、4(苯乙二醛-MMAF)和6(β-内酰胺-半抗原-Cy7)的合成及其通过1H-NMR、13C-NMR、HRMS和LC-MS的表征在本文的实施例6中提供。化合物5(β-内酰胺-半抗原-MMAF)的合成先前已在Nanna等.(上文)进行了描述。
抗体缀台:DVD-Fab与苯乙二醛和β-内酰胺-半抗原衍生物的缀合。将10μM h38C2_Arg和h38C2_Lys DVD-Fab与在50mM HEPES、50mM NaHCO3(pH 6.0)中的三种不同浓度(10μM、50μM、100μM)的苯乙二醛-TAMRA(化合物1)在37℃下孵育3小时。作为阳性对照,将10μMh38C2_Lys DVD-Fab与PBS(pH 7.4)中的β-内酰胺-半抗原-TAMRA(化合物2)在RT下并行孵育3小时。将7.5μg每种缀合混合物上样至10孔NuPAGE 4%至12%Bis-Tris蛋白凝胶上。通过E-凝胶成像仪(Thermo Fisher)上的蓝光观察荧光条带,并随后通过PageBlue蛋白染色溶液对凝胶进行染色。为了测试DVD-Fab与苯乙二醛的缀合是否可用β-内酰胺-半抗原衍生物阻断,将10μM h38C2_Arg和h38C2_Lys DVD-Fab与100μM β-内酰胺-半抗原-叠氮化物(化合物3)在RT下预孵育3小时并随后如上所述进行处理和分析。为了产生以DVD-Fab形式的ADC,将10μM h38C2_Arg DVD-Fab与50mM HEPES、50mM NaHCO3(pH 6.0)中的50μM苯乙二醛-MMAF(化合物4)在37℃下孵育3小时。并行地,将10μM h38C2_Lys DVD-Fab与50μMβ-内酰胺-半抗原-MMAF(化合物5)在RT下孵育4小时。在孵育之后,使用illustra NAP-5柱(GEHealthcare)去除游离化合物,并用Amicon Ultra 0.5-mL离心过滤器将ADC浓缩至在PBS(pH 7.4)中为1mg/mL。
DVD-IgG1与苯乙二醛和β-内酰胺-半抗原衍生物的缀合。为了产生DVD-IgG1形式的ADC,将10μM同二聚体h38C2_Arg DVD-IgG1或异二聚体h38C2_Arg/h38C2_Lys DVD-IgG1与在PBS(pH 6.6)中的50μM苯乙二醛-MMAF(化合物4)在37℃下孵育3小时。并行地,将10μM同二聚体h38C2_Lys DVD-IgG1或异二聚体h38C2_Arg/h38C2_Lys DVD-IgG1与50μMβ-内酰胺-半抗原-MMAF(化合物5)在RT下孵育4小时。在孵育之后,使用illustra NAP-5柱(GEHealthcare)去除游离化合物,并用Amicon Ultra 0.5-mL离心过滤器将ADC浓缩至在PBS(pH 7.4)中为2mg/mL。
异二聚体DVD-IgG1与苯乙二醛和β-内酰胺-半抗原衍生物的依次和同时一锅式缀合。将PBS(pH 6.6)中的10μM异二聚体h38C2_Arg/h38C2_Lys DVD-IgG1依次与50μM苯乙二醛-TAMRA(化合物1)在37℃下孵育3小时,并随后不经纯化即与β-内酰胺-半抗原-Cy7(化合物6)在37℃下孵育3小时。并行进行相反的顺序(首先是化合物6,然后是化合物1)。将5μg每种缀合混合物上样至10孔NuPAGE 4%至12%Bis-Tris蛋白凝胶上。通过E-凝胶成像仪上的蓝光观察TAMRA缀合并且使用Odyssey CLx成像系统(LI-COR)观察Cy7缀合。通过PageBlue蛋白质染色溶液依次对凝胶进行染色。使用相同的顺序程序,产生与化合物1和化合物5缀合的异二聚体h38C2_Arg/h38C2_Lys DVD-IgG1。对于瞬时缀合,将PBS(pH 6.6)中的10μM异二聚体h38C2_Arg/h38C2_Lys DVD-IgG1同时与50μM化合物1和化合物6在37℃下孵育3小时。
质谱:DVD-Fab.如上所述在将5和10当量的苯乙二醛-TAMRA(化合物1)或5当量的苯乙二醛-MMAF(化合物4)与h38C2_Arg DVD-Fab缀合之后,使用illustra NAP-5柱去除游离化合物并用Amicon Ultra 0.5-mL离心过滤器将缀合的DVD-Fab浓缩至在PBS(pH 7.4)中为1mg/mL。在稀释到水中之后,在Agilent电喷雾电离飞行时间(Electrospray IonizationTime of Flight,ESI-TOF)质谱仪上获得数据。使用Agilent BioConfirm软件获得去卷积质量。
DVD-IgG1.如上所述在将5当量的苯乙二醛-MMAF(化合物4)与h38C2_Arg DVD-IgG1缀合,去除游离化合物并进行浓缩之后,将缀合的DVD-IgG1在RT下用PBS中的50mM DTT还原10分钟,并随后在37℃下通过PNGase F(New England Biolabs)酶促去糖基化过夜。根据制造商的说明,通过蛋白G HP SpinTrap(GE Healthcare)去除该酶。用Amicon Ultra0.5-mL离心过滤器将缀合的DVD-IgG1浓缩至在PBS(pH 7.4)中为2mg/mL。在稀释到水中之后,如上所述获取ESI-TOF数据。在不进行还原的情况下,将与苯乙二醛-TAMRA(化合物1)和β-内酰胺-半抗原-MMAF(化合物5)缀合的异二聚体h38C2_Arg/h38C2_Lys DVD-IgG1去糖基化,并如上所述处理用于ESI-TOF数据获取。
人血浆稳定性测定:为了评估其在人血浆中的稳定性,将PBS中的1mg/mL与苯乙二醛-TAMRA(化合物1)缀合的基于h38C2_Arg的DVD-Fab与等体积的人血浆(Sigma-Aldrich)混合,并在37℃下孵育。在0、6、12、24、48、96、122、196和240小时之后,将2μL等分试样冷冻并储存在-80℃下。在收集所有时间点的等分试样之后,在还原条件下使用10孔NuPAGE 4%至12%Bis-Tris蛋白凝胶通过SDS-PAGE对其进行分析。通过E-凝胶成像仪(ThermoFisher)上的蓝光观察荧光条带,并随后通过PageBlue蛋白质染色溶液对凝胶进行染色。该实验独立进行三次。通过NIH ImageJ软件对0和240小时的条带强度进行定量,并绘制为平均值±SD值。
细胞毒性测定:将SK-BR-3和MDA-MB-231细胞以5×103和3×103个细胞/孔接种在96孔组织培养板上。将十倍系列稀释的ADC及其对应的未缀合的DVD-Fab(0.01至100nM)或DVD-IgG1(0.001至10nM)添加至细胞,并将板在37℃下在5%CO2的气氛中孵育72小时。随后,根据制造商的说明,使用CellTiter 96 Aqueous One Solution(Promega)测量细胞生存力,并绘制为未处理细胞的百分比。通过GraphPad Prism软件计算IC50值(平均值±SD)。
尺寸排阻色谱:使用与FPLC系统连接的Superdex 200 10/300GL柱(GEHealthcare),通过SEC分析基于未缀合的h38C2_Arg的DVD-Fab和基于苯乙二醛-MMAF(化合物4)缀合的h38C2_Arg的DVD-Fab。使用50mM磷酸钠、150mM NaCl(pH 7.0)作为流动相并且流速为0.5mL/分钟将样品(在50μL PBS中的30μg)上样至柱上。聚集体的百分比由280nm处的峰面积的积分确定。使用用于高分子量范围的凝胶过滤校准试剂盒(GE Healthcare)作为标准并包含铁蛋白(F;440kDa)、醛缩酶(A;158kDa)、伴清蛋白(C;75kDa)和卵清蛋白(O;44kDa)。
表面等离子体共振:使用Biacore试剂和软件(GE Healthcare)在Biacore X100仪器上进行SPR,用于测量未缀合和缀合的DVD-Fab与HER2结合的动力学和热力学参数。使用人抗体捕获试剂盒(GE Healthcare)提供的试剂和说明,将小鼠抗人IgG CH2 mAb固定在CM5传感器芯片上。人HER2-Fc融合蛋白(R&D Systems)以不超过300RU的密度捕获。每个传感器芯片均包含用于瞬时背景耗竭的空的流动池。所有结合测定均使用1×HBS-EP+运行缓冲液(10mM HEPES、150mM NaCl、3mM EDTA(pH 7.4)和0.05%(v/v)表面活性剂P20)和30μL/分钟的流速。对于亲和力测量,所有DVD-Fab均以五种不同浓度注射。对于每个样品至少进行两次独立实验。传感器芯片用来自人抗体捕获试剂盒的3M MgCl2再生,而没有任何结合能力的损失。缔合(kon)和解离(koff)速率常数的计算基于1∶1朗缪尔结合模型。由koff/kon计算平衡解离常数(KD)。
共聚焦荧光显微术:将SK-BR-3和MDA-MB-231细胞以5×104个细胞/皿接种在35-mm Nunc玻璃底皿(Thermo Fisher)中。在存在或不存在10μM PAO(Sigma-Aldrich)的情况下,将TAMRA(化合物1)/MMAF(化合物5)标记的异二聚体h38C2_Arg/h38C2_Lys DVD-IgG1添加至终浓度为5μg/mL。TAMRA(化合物2)标记的同二聚体h38C2_Lys DVD-IgG1(其中来源于曲妥珠单抗的外部Fv被兔抗人ROR2 mAb XBR2-401的人源化形式的外部Fv替代)(Peng等.,J Mol Biol 429,2954-2973,2017)用作阴性对照。(SK-BR-3和MDA-MB-231细胞不表达ROR2)。在孵育4小时之后,将细胞用冷PBS洗涤3次以停止内化,并在RT下用4%(w/v)多聚甲醛(Alfa Aesar)固定15分钟。然后,添加0.2M甘氨酸-HCl(pH 2.0)持续5分钟以去除胞外结合的抗体。将样品在RT下用0.2%(v/v)Triton X-100透化15分钟之后,用PBS中的2%(w/v)BSA封闭1小时。在用冷PBS洗涤3次之后,将样品与FITC缀合的山羊抗人IgG F(ab’)2多克隆抗体(Thermo Fisher)孵育1小时,所述多克隆抗体以在PBS中的2%(w/v)BSA稀释。在用冷PBS洗涤3次之后,将样品用在PBS中稀释的4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI,ThermoFisher)染色10分钟,并再次用冷PBS洗涤3次。图像是在马克斯·普朗克佛罗里达神经科学研究所(Jupiter,FL)的光学显微镜设备上的Zeiss LSM 880共聚焦系统上捕获的。
实施例6:示例性实施方案的另外技术信息
一般信息:所有非水性反应均在氩气气氛下在烘箱干燥或火焰干燥的玻璃器皿中进行。除非另有说明,否则所有试剂均购自商业供应商并且无需进一步纯化即可使用。二氯甲烷、四氢呋喃和N,N-二甲基甲酰胺通过干燥剂(活化的A1-氧化铝)的溶剂柱纯化。购买甲醇作为试剂级溶剂。在氩气气氛下,从氢化钙蒸馏二异丙基乙胺和三乙胺。所有反应均通过薄层色谱或分析型LCMS进行监测。薄层色谱是在预先涂有0.25mm厚度的Merck TLC硅胶60F254玻璃板上进行的。通过UV光(254nm)、KMnO4染色、磷钼酸(phosphomolybdic acid,PMA)染色、三苯基膦溶液和/或茚三酮染色进行观察。在Analtech UNIPLATE硅胶GF UV 254 20×20cm,2000微米厚度上进行通过制备型薄层色谱的纯化。在SiliFlash F60(40至63μm,230至400网格)上进行硅胶柱色谱的纯化。在Shimadzu LC-8A制备型液相色谱上进行制备型HPLC纯化,其中流动相A H2O+0.1%TFA/流动相B 1∶1 CH3OH∶CH3CN或者流动相A H2O/流动相B:CH3CN。在适当的氘代溶剂中,1H-NMR谱记录在Bruker 400MHz、600MHz或700MHz光谱仪上。在100MHz、150MHz或175MHz下记录13C-NMR谱。根据残留溶剂峰的δ标度,化学位移以百万分比(parts per million,ppm)报道。NMR描述:s,单峰;d,双重峰;t,三重峰;q,四重峰;m,多重峰;br,宽峰。耦合常数J以赫兹(Hertz,Hz)报道。红外光谱(infrared spectra,IR)记录在具有通用ATR采样附件的PerkinElmer Spectrum One FT-IR光谱仪上作为薄膜(净相)。从伊利诺伊大学厄巴纳-香槟分校质谱实验室的光谱仪(ESI)获得高分辨率质谱图。通过分析型LCMS确定,生物实验中使用的任何材料的纯度均>95%。
方案1.TAMRA-TPG(1)的合成
化合物S1的合成。将四乙二醇(6.0ml,34.8mmol)在THF(17ml)中的溶液冷却至0℃,并添加氢化钠(0.903g,22.59mmol)。将反应在0℃下搅拌1小时。然后将炔丙基溴(1.5ml,16.83mmol)添加至冷却溶液中。使反应升温至室温并搅拌16小时。将反应用冰冷的水淬灭。将混合物用CH2Cl2萃取,用盐水洗涤,经无水Na2SO4干燥,过滤并浓缩。将粗混合物用硅胶柱色谱(用KMnO4染色观察TLC)纯化。获得作为澄清无色黏性液体的产物(2.37g,61%)。
1H-NMR(400MHz,氯仿-d)δ4.18(d,J=2.4Hz,2H),3.72-3.55(m,17H),2.77(s,1H),2.42(t,J=2.4Hz,1H).IR(净相)3448.93,3249.92,2920.77,2856.78,2113.97.C11H20O5Na[M+Na]+的HRMS的计算值:255.1209,实测值:255.1207。
化合物S2的合成。将S1(0.8g,3.44mmol)和三乙胺(1.440ml,10.33mmol)溶解在CH2Cl2(6mL)中并冷却至0℃。然后将甲苯磺酰氯(0.788g,4.13mmol)在CH2Cl2(3mL)中的溶液添加至冷却溶液。然后使反应升温至室温并搅拌16小时。将反应用饱和NH4Cl水溶液淬灭。将混合物用CH2Cl2萃取,分别用1M HCl、水和盐水洗涤。然后将有机相经无水Na2SO4干燥,过滤并浓缩至干燥。将粗混合物用硅胶柱色谱纯化。获得作为澄清无色黏性液体的产物(1.01g,76%)。
1H-NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.79(d,J=8.3Hz,2H),7.33(dt,J=7.9,0.7Hz,2H),4.18(d,J=2.4Hz,2H),4.16-4.12(m,2H),3.71-3.60(m,10H),3.57(s,4H),2.44(s,3H),2.42(t,J=2.4Hz,1H).C18H27O7S[M+H]+的HPLC-MS的计算值:387.15,实测值:387.37。
化合物S3的合成。将S2(986mg,2.55mmol)溶解在DMF(5mL)中并随后添加叠氮化钠(415mg,6.38mmol)。将反应混悬液在50℃油浴中搅拌16小时。然后蒸发DMF。将黄色残留物混悬在二乙醚中。通过装有一小块脱脂棉的注射器过滤掉淡黄色沉淀物。将获得的澄清黄色溶液在减压下干燥。将残留物用硅胶柱色谱(50%EtOAc/己烷至100%EtOAc,用10%PPh-3溶液观察TLC随后是茚三酮染色)纯化。获得作为澄清淡黄色黏性液体的产物(0.37g,57%)。
1H-NMR(400MHz,氯仿-d)δ4.20(d,J=2.4Hz,2H),3.74-3.61(m,14H),3.42-3.34(m,2H),2.43(t,J=2.4Hz,1H).IR(净相)3254.23,2867.67,2098.15.
化合物S4的合成。将S3(370mg,1.438mmol)溶解在THF(3.0ml)中,并添加三苯基膦(754mg,2.88mmol)随后添加水(0.026ml,1.438mmol)。将反应在室温下搅拌6小时。然后将反应物在真空下干燥。将黏性黄色残留物通过硅胶柱色谱(2%至10%CH3OH/CH2Cl2随后是10%CH3OH/CH2Cl2+1%Et3N,用茚三酮或KMnO4染色观察)纯化。获得作为浅黄色黏性液体的产物(0.3 3g,100%)。
1H-NMR(400MHz,氯仿-d)δ4.22(d,J=2.4Hz,2H),3.64(s,14H),2.99(d,J=5.3Hz,2H),2.47(t,J=2.4Hz,1H).IR(净相)3363.42,3244.98,2868.66,2111.92.C11H22NO4[M+H]+的HRMS的计算值:232.1549,实测值:232.1557。
化合物S5的合成。将5-TAMRA(20.0mg,0.046mmol)和HATU(17.67mg,0.046mmol)溶解在DMF(250μL)中。向混合物溶液添加DIPEA(40μl,0.229mmol)并在室温下搅拌10分钟。然后将S4(11.82mg,0.051mmol)在DMF(150μl)中的溶液添加至活化的TAMRA溶液。将反应在室温下搅拌1小时(反应的LCMS显示5-TAMRA的完全消耗)。将反应物在真空下干燥并将剩余的残留物通过制备型薄层色谱(5%、7.5%和10%CH3OH/CH2Cl2)纯化。刮下产物带并混悬在10%CH3OH/CH2Cl2中。使硅胶混悬液通过短硅胶塞,通过10%CH3OH/CH2Cl2+0.05%TFA洗掉。蒸发过滤物并随后在高真空下干燥以产生深紫色黏性残留物。将残留物溶解在10%iPrOH/CH2Cl2中,并用水∶饱和NaHCO3的1∶1混合物洗涤。将水层用10%iPrOH/CH2Cl2萃取直至有机相不再是粉红色。将合并的有机相用盐水洗涤,并蒸发至干燥以产生作为深紫色固体的产物(30.6mg,102%)。
1H-NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.77(d,J=1.8Hz,1H),8.26(dd,J=7.9,1.8Hz,1H),7.52(d,J=7.9Hz,1H),7.12(d,J=9.5Hz,2H),7.04(dd,J=9.5,2.4Hz,2H),6.95(d,J=2.4Hz,2H),4.12(d,J=2.4Hz,2H),3.77-3.69(m,2H),3.69-3.58(m,14H),3.28(s,12H),2.80(t,J=2.4Hz,1H).13C-NMR(101MHz,甲醇-d4)δ168.24,167.34,160.66,158.94,138.11,137.69,132.82,131.94,131.38,115.57,114.72,97.46,80.58,75.98,71.60,71.54,71.49,71.32,70.46,70.07,59.01,41.25,40.95.C36H42N3O8[M+H]+的HRMS的计算值:644.2972,实测值:644.2977。
化合物1的合成。在室温下向S5(7.8mg,0.012mmol)和水合4-叠氮苯基乙二醛(3.51mg,0.018mmol)在CH3OH(544μl)中的溶液添加50mM THPTA(60.6μl,3.03μmol)、50mM硫酸铜(II)(60.6μl,3.03μmol)和100mM抗坏血酸钠(6.06μl,6.06μmol)的水性溶液。将反应在室温下搅拌1小时并随后在减压下蒸发以除去甲醇。将水性残留物与200mg Quadra纯TU树脂(在THF中预溶胀30分钟)搅拌3小时。使反应物通过0.2μM PFTE过滤器进行过滤并用制备型HPLC(254nm)纯化。蒸发包含产物的级分以去除乙腈。将剩余的水性溶液冻干以得到作为深紫色粉末的产物(7.3mg,72%)。
1H-NMR(700MHz,甲醇-d4)δ8.69(d,J=1.9Hz,1H),8.51(s,1H),8.20(d,J=8.8Hz,2H),8.17(dd,J=7.8,1.8Hz,1H),7.93(d,J=8.8Hz,2H),7.42(d,J=7.8Hz,1H),7.11(dd,J=9.5,3.3Hz,2H),6.95(ddd,J=9.5,3.9,2.5Hz,2H),6.80(dd,J=3.9,2.5Hz,2H),5.50(s,1H),4.64(s,2H),3.72(dd,J=5.8,4.7Hz,2H),3.69-3.61(m,12H),3.26(d,J=1.2Hz,12H).13C NMR(176MHz,甲醇-d4)δ194.52,168.55,160.99,158.82,158.70,147.33,141.48,137.68,137.45,134.79,132.52,132.09,131.52,131.29,130.76,123.04,120.63,120.39,115.33,115.31,114.62,97.35,97.25,71.61,71.60,71.51,71.38,71.01,70.43,65.00,41.26,40.88.C44H49N6O11[M+H]+的HRMS的计算值:837.3459,实测值:837.3440。
方案2.叠氮化物-β-内酰胺(2)和TAMRA-β-内酰胺(3)的合成
S6是根据由Magano J.等.(Org.Process Res.Dev.,2014,18:142-151)报道的程序合成的。
1H-NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.43(s,1H),7.50-7.46(m,2H),7.23-7.19(m,2H),4.64(s,2H),4.28(s,2H),3.56(t,J=5.5Hz,2H),3.05-2.93(m,6H).
S7是根据由Smith B.D.等.(J.Org.Chem.2008,73,第6053至6058页)报道的程序合成的。
1H-NMR(400MHz,氯仿-d)δ3.33(t,J=6.7Hz,2H),2.75(t,J=6.8Hz,2H),1.68(p,J=6.8Hz,2H).IR(净相)3371.92,2936.85,2869.87,2089.28.
化合物2的合成。向200μL无水DMF中的S6(15.0mg,0.030mmol)添加S7(6.00mg,0.060mmol)在120μL无水DMF中的溶液。将反应在室温下搅拌1小时。用硅胶柱色谱纯化产物(8.2mg,66%)。
1H-NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.35(s,1H),7.47(d,J=8.5Hz,2H),7.21(d,J=8.5Hz,2H),6.77(s,1H),4.16(s,2H),4.12(s,2H),3.56(t,J=5.3Hz,2H),3.47-3.38(m,4H),3.08-2.91(m,6H),1.84(p,J=6.6Hz,2H).13C-NMR(101MHz,CDCl3)δ170.20,168.69,166.58,165.14,137.13,135.20,129.29,120.44,71.61,71.40,49.74,38.15,37.17,36.65,36.00,29.54,28.75.C19H26N6O54Na[M+H]+的HRMS的计算值:417.1886,实测值417.1883。
化合物3的合成。向2(9.32mg,0.022mmol)和5(6)-TAMRA-PEG4-炔丙基(7.2mg,0.011mmol)在CH3OH(502μl)中的溶液添加50mM THPTA(55.9μl,2.80μmol)、50mM硫酸铜(II)(55.9μl,2.80μmol)和100mM抗坏血酸钠(55.9μl,2.80μmol)。将反应在室温下搅拌2小时。将反应物通过0.2μM PFTE过滤器进行过滤并用制备型HPLC(254nm)纯化。合并包含产物的级分并蒸发以去除乙腈。将剩余的水性溶液冻干以得到作为深紫色粉末的产物(12.8mg,89%,2TFA盐)。5和6异构体混合物
1H-NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.77(d,J=1.8Hz,0.5H),8.39(d,J=8.2Hz,0.5H),8.24(ddd,J=21.7,8.1,1.8Hz,1H),7.99(s,1H),7.84(d,J=1.8Hz,0.5H),7.49(dd,J=12.2,8.3Hz,2.5H),7.21-7.09(m,4H),7.02(dt,J=9.4,2.7Hz,2H),6.95(d,J=2.4Hz,2H),4.57(d,J=7.9Hz,2H),4.47-4.41(m,2H),4.17(d,J=3.2Hz,2H),4.08(d,J=3.9Hz,2H),3.66(m,22H),3.29(s,12H),3.03(t,J=5.3Hz,2H),2.92(m,4H),2.13(m,2H).C55H66N9O13[M+H]+的HRMS的计算值:1060.4780,实测值:1060.4779。
方案3.MMAF-TPG(4)的合成
化合物S8的合成。将三乙二醇(6ml,44.9mmol)在THF(22.45ml)中的溶液冷却至0℃,并添加氢化钠(1.167g,29.2mmol)。将反应在0℃下搅拌1小时。然后添加炔丙基溴(1.5ml,16.83mmol)。将反应在室温下搅拌16小时。将反应用冰冷的水淬灭,用CH2Cl2萃取,用盐水洗涤,经无水Na2SO4干燥,过滤并浓缩。将粗混合物用硅胶柱色谱纯化。获得作为澄清无色黏性液体的产物(1.71g,40%)。
1H-NMR(400MHz,氯仿-d)δ4.19(d,J=2.4Hz,2H),3.75-3.63(m,10H),3.62-3.56(m,2H),2.49(s,1H),2.43(t,J=2.4Hz,1H).IR(净相)3451.22,3250.90,2869.21,2112.49.C9H16O4Na[M+Na]+的HRMS的计算值:211.0946,实测值:211.0947。
化合物S9的合成。向S8(200mg,1.063mmol)在THF(0.5ml)中的溶液添加叔丁醇钾(5.96mg,0.053mmol)。然后向反应逐滴添加丙烯酸叔丁酯(177mg,1.381mmol)。将反应在室温下搅拌16小时。将反应用1M HCl中和,然后用CH2Cl2和盐水分配。萃取有机相,经无水Na2SO4干燥,过滤并在减压下浓缩。将粗混合物用硅胶柱色谱纯化。获得作为澄清无色黏性液体的产物(0.28g,83%)。
1H-NMR(400MHz,氯仿-d)δ4.20(d,J=2.4Hz,2H),3.77-3.53(m,14H),2.50(t,J=6.6Hz,2H),2.42(t,J=2.4Hz,1H),1.44(s,9H).IR(净相)3258.87,2976.71,2869.31,2114.65,1727.05.C16H29NaO6[M+H+Na]+的HPLC-MS的计算值:340.19,实测值:340.45。
化合物S10的合成。向S9(273.0mg,0.863mmol)在CH2Cl2(2.7ml)中的溶液添加三氟乙酸(1.4ml,18.17mmol)。将反应在室温下搅拌2小时。在TLC显示起始材料的完全消耗之后,将TFA与甲苯/CH2Cl2共蒸发3次。在高真空下干燥浅黄色澄清黏性液体产物并且无需进一步纯化即可使用。
1H-NMR(400MHz,氯仿-d)δ4.21(d,J=2.4Hz,2H),3.77(t,J=6.2Hz,2H),3.73-3.58(m,12H),2.64(t,J=6.1Hz,2H),2.43(t,J=2.4Hz,1H).IR(净相)~3500-2500(非常宽),3257.04,2876.00,2115.78,1716.74.C12H20O6Na[M+Na]+的HRMS的计算值:283.1158,实测值:283.1164。
化合物S11的合成。将S10(6.15mg,0.024mmol)、HATU(8.09mg,0.021mmol)用DMF(100μl)溶解。然后向溶液添加DIPEA(10.32μl,0.059mmol)。将混合物在室温下搅拌10分钟。然后将MMAF TFA盐(10mg,0.012mmol,Levena Biopharma)在DMF(100μl)中的溶液添加至活性酸溶液。将反应在室温下搅拌1小时。将反应物通过0.2μM PFTE进行过滤并用制备型HPLC(210nm)纯化。蒸发包含产物的级分并冻干以得到作为白色固体的产物。
1H-NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.33(d,J=8.3Hz,0.38H),8.16(dq,J=18.3,9.7,9.1Hz,0.47H),7.90(d,J=8.3Hz,0.27H),7.83(d,J=8.6Hz,0.36H),7.33-7.13(m,5.00H),4.78-4.53(m,2.8H),4.19(t,J=1.9Hz,2.09H),4.17-3.89(m,1.88H),3.88-3.74(m,2.77H),3.73-3.57(m,13.84H),3.46-3.33(m,5.94H),3.26-3.05(m,5.96H),3.01-2.62(m,5.53H),2.56-2.40(m,2.04H),2.39-2.19(m,2.25H),2.18-1.95(m,1.86H),1.95-1.69(m,3.11H),1.58(ddt,J=31.6,13.1,7.1Hz,1.09H),1.49-1.35(m,1.66H),1.34-1.25(m,1.11H),1.20(d,J=6.6Hz,1.47H),1.15(dd,J=6.5,3.3Hz,1.81H),1.12-0.75(m,20.88H).C51H84N5O13[M+H]+的HRMS的计算值:974.6065,实测值:974.6036。
化合物4的合成。将S11(7.5mg,7.70μmol)与水合4-叠氮基苯乙二醛(2.231mg,0.012mmol)在CH3OH(345μl)中的溶液混合。然后添加50mM THPTA(38.5μl,1.925μmol)、50mM硫酸铜(II)(38.5μl,1.925μmol)和100mM抗坏血酸钠(38.5μl,3.85μmol)的水性溶液。粗反应物的LCMS显示炔烃初始材料在2小时时完全消耗。蒸发反应以去除CH3OH。用水稀释水性残留物,并使其通过碱性活性管塞和0.2μM PFTE过滤器,用制备型HPLC(在210nm处监测)纯化以得到作为灰白色粉末的产物(8.5mg,94%)。
1H-NMR(600MHz,DMSO-d6)δ9.52(s,0.04H),8.93(s,0.86H),8.54(dd,J=9.0,5.5Hz,0.51H),8.35(dd,J=8.7,2.0Hz,0.35H),8.27(d,J=8.8Hz,1.62H),8.14(dd,J=14.7,8.1Hz,0.59H),8.08(d,J=8.9Hz,1.67H),7.95(s,0.08H),7.92-7.84(m,0.09H),7.76(d,J=8.3Hz,0.24H),7.66(d,J=8.5Hz,0.25H),7.27-7.11(m,5.00H),7.10(s,0.07H),7.02(s,0.07H),5.68(s,0.74H),4.64(s,2H),4.73-4.36(m,4H),3.64-3.60(m,5.05H),3.56(t,J=6.0,3.7Hz,2.88H),3.53-3.41(m,10.81H),3.32-3.12(m,8.80H),3.12-2.99(m,2.95H),2.95(d,J=6.1Hz,1.41H),2.92(d,J=9.0Hz,1.37H),2.88(s,0.34H),2.85-2.70(m,3.73H),2.67-2.52(m,1.61H),2.45-2.28(m,1.71H),2.26-1.84(m,4.56H),1.84-1.57(m,3.21H),1.48-1.17(m,2.79H),1.05(d,J=6.7Hz,1.05H),1.01(d,J=6.7Hz,1.06),0.97-0.61(m,20.04H).13C-NMR(151MHz,DMSO)δ195.61,189.15,187.05,173.90,173.86,173.82,173.71,173.60,173.47,173.00,172.93,171.66,171.62,171.12,171.09,170.15,170.07,170.03,169.44,169.29,169.16,162.79,159.02,158.78,158.54,158.30,145.95,140.03,138.19,137.94,133.64,131.79,131.77,131.53,129.59,129.41,129.38,129.17,129.10,128.59,128.57,128.49,126.75,126.68,122.89,122.81,120.25,120.00,119.98,90.21,90.20,85.82,81.84,67.51,67.25,64.69,63.85,63.80,61.49,61.41,61.25,61.14,60.66,58.98,58.65,57.59,57.54,56.24,55.57,54.62,54.55,54.44,53.47,53.20,52.36,47.71,47.56,46.72,46.61,43.87,43.55,43.37,36.82,33.91,33.62,33.59,32.08,32.05,31.74,31.24,31.08,30.67,30.64,30.44,30.38,28.92,28.88,27.90,26.86,26.75,26.18,25.75,25.71,25.66,25.04,24.73,23.57,19.64,19.60,19.37,19.23,19.20,19.11,18.98,18.92,18.86,18.72,18.64,16.10,16.04,15.87,15.83,15.65,15.56,15.49,15.32,10.87,10.68.C59H91N8O16[M+H]+的HRMS的计算值:1167.6553,实测值:1167.6531。
方案4.Cy7-β-内酰胺(3)的合成
化合物S12的合成。将S6(50.0mg,0.100mmol)溶解在200μLTHF中。然后将2-(2-(2-(2-叠氮乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙基-1-胺(36.0mg,0.165mmol)在200μL THF中的溶液添加至反应小瓶。将反应在室温下搅拌16小时。将反应物在减压下浓缩并通过硅胶柱色谱(1%CH3OH/CH2Cl2至10%CH3OH/CH2Cl2)纯化以得到作为澄清无色黏性液体的所期望的产物(53.0mg,99%)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.95(s,1H),8.14(t,J=5.7Hz,1H),7.53(d,J=8.5Hz,1H),7.18(d,J=8.5Hz,2H),4.13(s,2H),4.04(s,2H),3.62-3.55(m,3H),3.52(s,8H),3.46(td,J=5.6,3.7Hz,4H),3.38(dd,J=5.6,4.3Hz,2H),3.33-3.25(m,2H),3.04(t,J=5.3Hz,2H),2.85(d,J=43.2Hz,4H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ169.39,169.00,167.59,165.75,136.31,135.93,128.49,119.99,70.66,70.51,69.78,69.74,69.67,69.56,69.23,68.88,49.97.C24H35N6O8[M+H]+的HRMS的计算值:535.2516,实测值:535.2523。
化合物3的合成。将青色素7-炔烃(2.0mg,3.21μmol,Lumiprobe Corporation)和化合物3(2.062mg,3.86μmol)在CH3OH(144μl)中的溶液用50mM THPTA(16.07μl,0.803μmol)、50mM硫酸铜(II)(16.07μl,0.803μmol)和100mM抗坏血酸钠(16.07μl,1.607μmol)的水溶液处理。将反应在室温下搅拌2小时。将粗反应物通过0.2μM PFTE过滤器进行过滤并用制备型HPLC纯化。将包含产物的级分蒸发至干燥以得到涂覆在小瓶底部的作为蓝绿色膜的产物(2.54mg,59%,2TFA盐)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.96(s,1H),8.28(t,J=5.7Hz,1H),8.14(t,J=5.8Hz,1H),7.85(s,1H),7.73-7.63(m,3H),7.57(dd,J=7.6,3.5Hz,2H),7.56-7.49(m,2H),7.44-7.29(m,4H),7.27-7.13(m,4H),6.14(dd,J=14.2,5.0Hz,2H),4.47(t,J=5.2Hz,4H),4.25(d,J=5.6Hz,4H),4.12(s,2H),4.03(s,2H),3.77(t,J=5.2Hz,2H),3.61(s,3H),3.46(d,J=28.7Hz,12H),3.28(q,J=5.9Hz,2H),3.03(t,J=5.3Hz,2H),2.91-2.77(m,4H),2.14-2.05(m,2H),1.88-1.50(m,20H),1.42-1.30(m,2H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ172.12,171.66,170.49,169.58,169.23,167.77,165.95,158.56,158.36,158.16,157.97,147.99,147.46,144.88,143.01,142.34,140.97,140.93,136.36,136.14,134.99,132.08,131.91,130.34,128.64,124.70,124.48,123.21,122.47,122.37,120.17,117.23,115.54,110.97,110.86,100.28,99.64,70.72,70.57,69.72,69.65,69.63,68.95,68.85,49.42,48.70,48.65,43.25,38.33,37.55,36.56,35.68,35.05,34.18,31.18,28.87,27.31,27.13,26.59,25.91,24.96,23.47,21.20.C64H82N9O9[M]+的HRMS的计算值:1120.6236,实测值:1120.6211。
***
因此,已参考上述代表性实施方案对本发明进行了广泛地公开和举例说明。应理解,可在不脱离本发明的精神和范围的情况下对本发明进行多种修改。还应注意的是,本文中引用的所有出版物、专利和专利申请出于所有目的均在此通过引用明确地整体并入,如同每个被单独地如此表示一样。在与本公开内容中的定义冲突的程度上,排除包含在通过引用并入的文本中的定义。
Claims (38)
1.抗体化合物,其包含催化性抗体38C2的变体(38C2_Arg)或其抗原结合片段,所述变体在疏水空隙中包含以精氨酸对反应性酸残基(Lys99)的替换。
2.权利要求1所述的抗体化合物,其中所述催化性抗体是人源化的38C2(h38C2)。
3.权利要求1所述的抗体化合物,其中所述38C2_Arg或其抗原结合片段包含分别在SEQID NO:1和2中示出的重链可变结构域序列和轻链可变结构域序列。
4.权利要求1所述的抗体化合物,其是包含以下的双可变结构域(DVD)化合物或其抗原结合片段:(i)所述38C2_Arg或其抗原结合片段,以及(ii)识别目的靶标的第二抗体可变结构域。
5.权利要求4所述的抗体化合物,其中38C2_Arg被定位成比第二可变结构域更靠近所述抗体化合物中的C端。
6.权利要求4所述的抗体化合物,其是在两个抗体臂中均包含Lys99Arg替换的同二聚体分子。
7.权利要求4所述的抗体化合物,其是仅在一个抗体臂中包含Lys99Arg替换的异二聚体分子。
8.权利要求4所述的抗体化合物,其中所述双可变结构域化合物是双特异性免疫球蛋白分子。
9.权利要求4所述的抗体化合物,其包含作为以下的双可变结构域(DVD)化合物抗原结合片段:Fab、Fab’、F(ab’)2、Fv或scFv。
10.权利要求9所述的抗体化合物,其包含Fab。
11.权利要求4所述的抗体化合物,其包含嵌合免疫球蛋白序列或人源化免疫球蛋白序列。
12.权利要求4所述的抗体化合物,其中所述目的靶标是肿瘤细胞表面抗原。
13.权利要求12所述的抗体化合物,其中所述肿瘤细胞表面抗原是HER2、FOLR1、FCMR、CD138、CD79B、PSMA、BCMA、CD38、SLAMF7、Siglec-6、CD70、ROR1或ROR2。
14.抗体药物缀合物(ADC),其包含通过抗体化合物中的反应性精氨酸残基与所述抗体化合物缀合的至少一个药物部分,其中所述抗体化合物包含催化性抗体38C2的变体(38C2_Arg)或其抗原结合片段,所述变体在疏水空隙中包含以精氨酸对反应性氨酸基的替换。
15.权利要求14所述的抗体药物缀合物,其中所述催化性抗体是人源化的38C2(h38C2)。
16.权利要求14所述的抗体药物缀合物,其中所述抗体化合物是包含以下的双可变结构域(DVD)化合物或其抗原结合片段:(i)所述38C2_Arg或其抗原结合片段,以及(ii)识别目的靶标的第二抗体可变结构域。
17.权利要求14所述的抗体药物缀合物,其中所述药物部分通过接头部分与所述抗体化合物缀合。
18.权利要求17所述的抗体药物缀合物,其中所述药物部分在与所述抗体化合物缀合之前用所述接头部分衍生化。
19.权利要求17所述的抗体药物缀合物,其中所述接头部分是可切割接头。
20.权利要求17所述的抗体药物缀合物,其中所述连接物部分包含苯乙二醛(PGO)、乙二醛(GO)或甲基乙二醛(MGO)。
21.权利要求16所述的抗体药物缀合物,其中所述DVD化合物或其抗原结合片段是在两个抗体臂中均包含Lys99Arg替换的同二聚体分子。
22.权利要求16所述的抗体药物缀合物,其中所述DVD化合物或其抗原结合片段是仅在一个抗体臂中包含Lys99Arg替换的异二聚体分子。
23.权利要求16所述的抗体药物缀合物,其中所述抗体化合物包含作为以下的双可变结构域(DVD)化合物抗原结合片段:Fab、Fab’、F(ab’)2、Fv或scFv。
24.权利要求23所述的抗体药物缀合物,其中所述抗体化合物包含Fab。
25.权利要求16所述的抗体药物缀合物,其中所述目的靶标是肿瘤细胞表面抗原。
26.权利要求25所述的抗体药物缀合物,其中所述肿瘤细胞表面抗原是HER2、FOLR1、FCMR、CD138、CD79B、PSMA、BCMA、CD38、SLAMF7、Siglec-6、CD70、ROR1或ROR2。
27.权利要求14所述的抗体药物缀合物,其中所述药物部分是细胞毒性剂或siRNA。
28.权利要求27所述的抗体药物缀合物,其中所述细胞毒性剂选自毒素、化学治疗剂、光吸收剂、抗生素、放射性同位素、经螯合的放射性同位素和溶核酶。
29.权利要求16所述的抗体药物缀合物,其中所述38C2_Arg或其抗原结合片段包含分别在SEQ ID NO:1和2中示出的重链可变结构域序列和轻链可变结构域序列,并且所述目的靶标是HER2。
31.权利要求29所述的抗体药物缀合物,其中所述药物部分是单甲基奥瑞他汀F(MMAF)。
32.权利要求29所述的抗体药物缀合物,其中所述抗体化合物是包含分别在SEQ IDNO:5和7中示出的重链和轻链序列的DVD-Fab。
33.权利要求29所述的抗体药物缀合物,其中所述抗体化合物是包含分别在SEQ IDNO:6和7中示出的重链和轻链序列的DVD-IgG1。
34.权利要求33所述的抗体药物缀合物,其中所述DVD-IgG1是在两个抗体臂中均包含Lys99Arg替换的同二聚体分子。
35.权利要求33所述的抗体药物缀合物,其中所述DVD-IgG1是仅在一个抗体臂中包含Lys99Arg替换的异二聚体分子。
36.权利要求35所述的抗体药物缀合物,其中两个不同的药物部分与所述异二聚体DVD-IgG1分子的两个抗体臂缀合。
37.药物组合物,其包含有效量的权利要求16所述的抗体药物缀合物和任选地可药用载体。
38.用于在对象中治疗癌症的方法,其包括向需要治疗的所述对象施用权利要求37所述的药物组合物。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201862744339P | 2018-10-11 | 2018-10-11 | |
US62/744,339 | 2018-10-11 | ||
PCT/US2019/055224 WO2020076849A1 (en) | 2018-10-11 | 2019-10-08 | Antibody compounds with reactive arginine and related antibody drug conjugates |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN113329769A true CN113329769A (zh) | 2021-08-31 |
Family
ID=70164081
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201980081369.0A Pending CN113329769A (zh) | 2018-10-11 | 2019-10-08 | 具有反应性精氨酸的抗体化合物及相关的抗体药物缀合物 |
Country Status (4)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20210340277A1 (zh) |
EP (1) | EP3863672A4 (zh) |
CN (1) | CN113329769A (zh) |
WO (1) | WO2020076849A1 (zh) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2023212725A2 (en) * | 2022-04-29 | 2023-11-02 | University Of Florida Research Foundation, Incorporated | Antibody compounds with reactive cysteine and related antibody drug conjugates |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5733757A (en) * | 1995-12-15 | 1998-03-31 | The Scripps Research Institute | Aldolase catalytic antibody |
CN1968712A (zh) * | 2004-06-18 | 2007-05-23 | Ambrx公司 | 新颖抗原结合多肽和其用途 |
CN101965406A (zh) * | 2008-01-03 | 2011-02-02 | 斯克里普斯研究院 | 通过模块识别结构域的抗体靶向 |
US20120282279A1 (en) * | 2010-11-05 | 2012-11-08 | Covx Technologies Ireland Limited | Anti-Diabetic Compounds |
AR106453A1 (es) * | 2015-10-23 | 2018-01-17 | Sorrento Therapeutics Inc | Receptores celulares universales programables y métodos para usar los mismos |
CN108025071A (zh) * | 2015-09-17 | 2018-05-11 | 斯克利普斯研究院 | 双重可变结构域免疫缀合物及其用途 |
Family Cites Families (25)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CU22545A1 (es) | 1994-11-18 | 1999-03-31 | Centro Inmunologia Molecular | Obtención de un anticuerpo quimérico y humanizado contra el receptor del factor de crecimiento epidérmico para uso diagnóstico y terapéutico |
US4753894A (en) | 1984-02-08 | 1988-06-28 | Cetus Corporation | Monoclonal anti-human breast cancer antibodies |
US4943533A (en) | 1984-03-01 | 1990-07-24 | The Regents Of The University Of California | Hybrid cell lines that produce monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor |
US4737456A (en) | 1985-05-09 | 1988-04-12 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Reducing interference in ligand-receptor binding assays |
IL85035A0 (en) | 1987-01-08 | 1988-06-30 | Int Genetic Eng | Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same |
WO1989006692A1 (en) | 1988-01-12 | 1989-07-27 | Genentech, Inc. | Method of treating tumor cells by inhibiting growth factor receptor function |
US4965343A (en) | 1988-01-28 | 1990-10-23 | Hoffmann-La Roche Inc. | Method of peptide synthesis |
CZ333796A3 (cs) | 1991-03-06 | 1998-06-17 | MERCK Patent Gesellschaft mit beschränkter Haftung | Chimérická monoklonální protilátka, expresní vektory a farmaceutický prostředek |
US5736137A (en) | 1992-11-13 | 1998-04-07 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma |
GB9401182D0 (en) | 1994-01-21 | 1994-03-16 | Inst Of Cancer The Research | Antibodies to EGF receptor and their antitumour effect |
US5641870A (en) | 1995-04-20 | 1997-06-24 | Genentech, Inc. | Low pH hydrophobic interaction chromatography for antibody purification |
US5739277A (en) | 1995-04-14 | 1998-04-14 | Genentech Inc. | Altered polypeptides with increased half-life |
CA2222231A1 (en) | 1995-06-07 | 1996-12-19 | Imclone Systems Incorporated | Antibody and antibody fragments for inhibiting the growth of tumors |
US5849954A (en) | 1996-01-18 | 1998-12-15 | Research Corporation Technologies, Inc. | Method of peptide synthesis |
HU230515B1 (hu) | 1996-02-09 | 2016-10-28 | Abbvie Biotechnology Ltd | Humán TNFalfa-kötő antitestek alkalmazásai |
US6235883B1 (en) | 1997-05-05 | 2001-05-22 | Abgenix, Inc. | Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor |
US6914128B1 (en) | 1999-03-25 | 2005-07-05 | Abbott Gmbh & Co. Kg | Human antibodies that bind human IL-12 and methods for producing |
SK12232002A3 (sk) | 2000-02-25 | 2003-03-04 | The Government Of The United States, As Represented By The | Anti-ERGFRvIII scFv so zlepšenou cytotoxicitou a výťažkom, imunotoxíny a spôsoby ich použitia |
DE60116753T2 (de) | 2000-05-19 | 2006-09-14 | Scancell Ltd. | Humanisierte antikörper gegen den epidermalen wachstumsfaktorrezeptor |
ES2486269T3 (es) | 2001-10-22 | 2014-08-18 | The Scripps Research Institute | Compuestos que eligen anticuerpos como diana |
EP1947470A3 (en) | 2002-06-20 | 2011-09-28 | Snaptrack Inc. | Reducing cross-interference in a combined GPS receiver and communication system |
BR122018071808B8 (pt) | 2003-11-06 | 2020-06-30 | Seattle Genetics Inc | conjugado |
US7968684B2 (en) | 2003-11-12 | 2011-06-28 | Abbott Laboratories | IL-18 binding proteins |
US7612181B2 (en) | 2005-08-19 | 2009-11-03 | Abbott Laboratories | Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof |
EP1928912A4 (en) | 2005-09-07 | 2010-02-24 | Medimmune Inc | EPH ANTI-RECEPTOR ANTIBODIES CONJUGATED TO TOXINS |
-
2019
- 2019-10-08 CN CN201980081369.0A patent/CN113329769A/zh active Pending
- 2019-10-08 US US17/284,192 patent/US20210340277A1/en active Pending
- 2019-10-08 EP EP19871937.9A patent/EP3863672A4/en active Pending
- 2019-10-08 WO PCT/US2019/055224 patent/WO2020076849A1/en unknown
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5733757A (en) * | 1995-12-15 | 1998-03-31 | The Scripps Research Institute | Aldolase catalytic antibody |
CN1968712A (zh) * | 2004-06-18 | 2007-05-23 | Ambrx公司 | 新颖抗原结合多肽和其用途 |
CN101965406A (zh) * | 2008-01-03 | 2011-02-02 | 斯克里普斯研究院 | 通过模块识别结构域的抗体靶向 |
US20120282279A1 (en) * | 2010-11-05 | 2012-11-08 | Covx Technologies Ireland Limited | Anti-Diabetic Compounds |
CN108025071A (zh) * | 2015-09-17 | 2018-05-11 | 斯克利普斯研究院 | 双重可变结构域免疫缀合物及其用途 |
AR106453A1 (es) * | 2015-10-23 | 2018-01-17 | Sorrento Therapeutics Inc | Receptores celulares universales programables y métodos para usar los mismos |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
ALEX R. NANNA 等: "Harnessing a catalytic lysine residue for the one-step preparation of homogeneous antibody-drug conjugates", NATURE COMMUNICATIONS, vol. 8, no. 1112, 24 October 2017 (2017-10-24), pages 1 - 9 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP3863672A1 (en) | 2021-08-18 |
US20210340277A1 (en) | 2021-11-04 |
EP3863672A4 (en) | 2022-06-29 |
WO2020076849A1 (en) | 2020-04-16 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
TWI593707B (zh) | Cd33抗體類及彼等於治療癌症之用途 | |
JP2022064924A (ja) | 抗pd-1抗体、活性化可能抗pd-1抗体、およびその使用方法 | |
JP2018516539A (ja) | 抗c−Met抗体および抗c−Met抗体−細胞毒性薬物複合体ならびにそれらの医薬用途 | |
WO2014174111A1 (en) | Axl antibody-drug conjugate and its use for the treatment of cancer | |
WO2003057838A2 (en) | Antibodies against the muc18 antigen | |
MX2010011955A (es) | Inmunoglobulinas de dominio variable doble y usos de las mismas. | |
WO2022022508A1 (zh) | 抗cd79b抗体药物偶联物、其制备方法及其医药用途 | |
JP2022519273A (ja) | 抗cd228抗体及び抗体薬物コンジュゲート | |
JP2021176915A (ja) | 二重可変ドメインイムノコンジュゲートおよびその用途 | |
JP2019534267A (ja) | 抗c met抗体‐細胞傷害性薬物複合体の医学的使用 | |
TW202003585A (zh) | 抗her2雙互補位抗體-藥物結合物及使用方法 | |
CN113329769A (zh) | 具有反应性精氨酸的抗体化合物及相关的抗体药物缀合物 | |
TW202306995A (zh) | 治療具有可溶性FR-α之患者之癌症 | |
JP2023506805A (ja) | 抗cea抗体-エキサテカン類似体複合体及びその医薬用途 | |
WO2023212725A2 (en) | Antibody compounds with reactive cysteine and related antibody drug conjugates | |
RU2806049C2 (ru) | Конъюгаты анти-her2 бипаратопных антител-лекарственных веществ и способы их применения | |
RU2806049C9 (ru) | Конъюгаты анти-her2 бипаратопных антител-лекарственных веществ и способы их применения | |
TW202341984A (zh) | Her3抗體藥物偶聯物及其用途 | |
Kang | Engineering Anti-HER2 Antibodies for Enhanced Therapeutic Potency | |
TW202305008A (zh) | 三特異性抗體、其製備方法和用途 | |
AU2021388021A1 (en) | Anti-cd48 antibodies, antibody drug conjugates, and uses thereof | |
CA3225975A1 (en) | Drug conjugate of eribulin derivative | |
AU2020369479A1 (en) | Novel conjugation chemistry for catalytic antibody 38C2 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination |