CN113278082A - 一种白及提取物及其在制备抗氧化化妆品中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种白及提取物及其在制备抗氧化化妆品中的应用，包含以下步骤：S1、将白及块茎药材干燥，粉碎，得到白及块茎粉末；S2、将白及块茎粉末加入到乙醇溶液中，分散均匀，回流提取，弃红褐色液体，取药渣，烘干；S3、将药渣加入到纯水中，超声提取，重复操作1~2次，合并提取液，离心，取上清液；S4、将果胶酶加入到上清液中，酶解，再加入α‑淀粉酶，酶解，将酶灭活，离心，减压浓缩，得到浓缩液；S5、在浓缩液中滴加乙醇，离心，收集沉淀物，将沉淀物用纯水复溶，冷冻干燥，得到白及提取物。
Description
技术领域
本发明涉及化妆品技术领域，具体涉及一种白及提取物及其在制备抗氧化化妆品中的应用。
背景技术
白及（Bletilla striata）是兰科、白及属地生草本植物，分布华东、中南、西南及甘肃、陕西等地。以贵州产量最大，质量最好。是我国传统的中草药，在文献《神农本草经》、《本草纲目》均有记载，有很高的药用价值;具有收敛止血，保湿，延缓皮肤衰老，消肿生肌之功效.从白芨块茎中提取物中，多糖含量较高；白芨多糖具有抗肿瘤，降血糖，抗氧化，促进胃消化等作用，具有特殊的粘度特性。
目前市面上白及多糖提取物大多纯度不够，杂质多，这在化妆品配方应用上，导致实际添加的有效成分含量偏低，影响产品外观，且会引入其他可能对皮肤有健康影响的杂质；提取纯化较复杂，本发明对工艺进行研究优化，使得白及药材的有效成分能更加充分提取出，且经处理后，纯度提高很多，易于溶合到产品中，促进皮肤的吸收，提高了皮肤的抗氧化、抗衰老能力。
发明内容
本发明提供一种白及提取物及其在制备抗氧化化妆品中的应用，所述的白及提取物具有良好的抗氧化作用。
本发明解决其技术问题采用以下技术方案：
一种白及提取物的制备方法，包含以下步骤：
S1、称取白及块茎药材，干燥，粉碎至50~100目，得到白及块茎粉末；
S2、将白及块茎粉末加入到60~80%乙醇溶液中，分散均匀，回流提取，弃红褐色液体，取药渣，烘干；
S3、将药渣加入到纯水中，超声提取，重复操作1~2次，合并提取液，离心，取上清液；
S4、将果胶酶加入到上清液中，调节pH至3~4，在40~55℃下酶解25~35min，调节pH至6~6.8，加入α-淀粉酶，在50~65℃下酶解50~80min，将酶灭活，离心，减压浓缩，得到浓缩液；
S5、在浓缩液中滴加80~95%乙醇，滴加至浓缩液中乙醇溶度为50~65%，离心，收集沉淀物，将沉淀物用纯水复溶，冷冻干燥，得到白及提取物。
作为一种优选方案，所述S2中白及块茎粉末与乙醇溶液的料液比为1g：10~18ml。
作为一种优选方案，所述回流提取温度为65~80℃，回流提取时间为50~80min。
作为一种优选方案，所述S3中药渣与纯水的的料液比为1g：18~25ml。
作为一种优选方案，所述S3中超声提取在65~80℃下进行，所述超声提取功率为300~500W，提取时间为25~40min，所述离心速率为3000~5000rpm，离心时间为15~25min。
作为一种优选方案，所述S4中果胶酶的加入量为白及块茎药材重量的0.2~0.6%。
作为一种优选方案，所述S4中α-淀粉酶的加入量为白及块茎药材重量的0.2~0.6%。
作为一种优选方案，所述S4中离心速率为3000~5000rpm，离心时间为15~25min，所述S5中离心速率为3000~5000rpm，离心时间为15~25min。
作为一种优选方案，将白及提取物用纯水复溶，滴加80~95%乙醇，滴加至浓缩液中乙醇溶度为50~65%，离心，收集沉淀物，冷冻干燥，得到纯化的白及提取物。
本发明的发明人在大量的研究中发现，通过在醇沉之后再次用水复溶，再次醇沉，能够进一步提高具有抗氧化作用成分的含量以及纯度，从而显著提高抗氧化作用。
本发明还提供了一种抗氧化组合物，由白及提取物、苦杏仁提取物按照重量比1：0.5~2组成。
本发明还提供了一种白及提取物在制备抗氧化化妆品中的应用。
本发明的有益效果：本发明所述的白及提取物具有良好的抗氧化作用，通过利用乙醇进行了回流提取，可将药材中的大部分色素、非目标杂质成分先去除掉；利用超声辅助加热提取，利用超声波的空腔作用、产生微射流，加速了多糖等目标成分从细胞壁渗出，极大的提高了效率，也避免了长时间高温提取对有效物的破坏；采用酶法处理提取液，将水提出的淀粉快速进行水解成单糖，同时也使蛋白质杂质处于不稳定状态而析出沉淀，离心后去除，提高了具有抗氧化作用的多糖纯度；采用二次乙醇沉淀，也能进一步提高具有抗氧化作用的多糖纯度、含量；多糖沉淀经真空冷冻干燥成型，也能使白及多糖得到较好的保存；通过以上方案获得的白及提取物，白及多糖含量高，纯度高，具有良好的抗氧化、抗衰老效果。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种白及提取物的制备方法，包含以下步骤：
S1、称取白及块茎药材，干燥，粉碎至80目，得到白及块茎粉末；
S2、将白及块茎粉末加入到80%乙醇溶液中，分散均匀，70℃下回流提取60min，弃红褐色液体，取药渣，在55℃真空干燥箱中烘干；白及块茎粉末与乙醇溶液的料液比为1g：15ml；
S3、将药渣加入到纯水中，在75℃下，用400W超声提取30min，重复操作1次，合并提取液，以4000rpm转速离心20min，取上清液；所述药渣与纯水的的料液比为1g：20ml；
S4、将果胶酶加入到上清液中，调节pH至3.5，在50℃下酶解30min，调节pH至6.5，加入α-淀粉酶，在60℃下酶解60min，在95℃下水浴30min，将酶灭活，离心，减压浓缩至1/3体积，得到浓缩液；所述果胶酶的加入量为白及块茎药材重量的0.5%，所述α-淀粉酶的加入量为白及块茎药材重量的0.3%；
S5、在浓缩液中滴加95%乙醇，滴加至浓缩液中乙醇溶度为60%，以4000rpm转速离心20min，收集沉淀物，将沉淀物用纯水复溶，冷冻干燥，得到白及提取物。
实施例2
一种白及提取物的制备方法，包含以下步骤：
S1、称取白及块茎药材，干燥，粉碎至90目，得到白及块茎粉末；
S2、将白及块茎粉末加入到70%乙醇溶液中，分散均匀，65℃下回流提取60min，弃红褐色液体，取药渣，在55℃真空干燥箱中烘干；白及块茎粉末与乙醇溶液的料液比为1g：16ml；
S3、将药渣加入到纯水中，在70℃下，用400W超声提取35min，重复操作1次，合并提取液，以4000rpm转速离心20min，取上清液；所述药渣与纯水的的料液比为1g：18ml；
S4、将果胶酶加入到上清液中，调节pH至3.8，在50℃下酶解30min，调节pH至6.2，加入α-淀粉酶，在60℃下酶解60min，在95℃下水浴30min，将酶灭活，离心，减压浓缩至1/3体积，得到浓缩液；所述果胶酶的加入量为白及块茎药材重量的0.4%，所述α-淀粉酶的加入量为白及块茎药材重量的0.5%；
S5、在浓缩液中滴加95%乙醇，滴加至浓缩液中乙醇溶度为60%，以4000rpm转速离心20min，收集沉淀物，将沉淀物用纯水复溶，冷冻干燥，得到白及提取物。
实施例3
一种白及提取物的制备方法，包含以下步骤：
S1、称取白及块茎药材，干燥，粉碎至80目，得到白及块茎粉末；
S2、将白及块茎粉末加入到80%乙醇溶液中，分散均匀，70℃下回流提取60min，弃红褐色液体，取药渣，在55℃真空干燥箱中烘干；白及块茎粉末与乙醇溶液的料液比为1g：15ml；
S3、将药渣加入到纯水中，在75℃下，用400W超声提取30min，重复操作1次，合并提取液，以4000rpm转速离心20min，取上清液；所述药渣与纯水的的料液比为1g：20ml；
S4、将果胶酶加入到上清液中，调节pH至3.5，在50℃下酶解30min，调节pH至6.5，加入α-淀粉酶，在60℃下酶解60min，，在95℃下水浴30min，将酶灭活，离心，减压浓缩至1/3体积，得到浓缩液；所述果胶酶的加入量为白及块茎药材重量的0.5%，所述α-淀粉酶的加入量为白及块茎药材重量的0.3%；
S5、在浓缩液中滴加95%乙醇，滴加至浓缩液中乙醇溶度为60%，以4000rpm转速离心20min，收集沉淀物，将沉淀物用纯水复溶，冷冻干燥，得到白及提取物；
S6、将白及提取物用纯水复溶，滴加95%乙醇，滴加至浓缩液中乙醇溶度为60%，4000rpm转速离心20min，收集沉淀物，冷冻干燥，得到纯化的白及提取物。
实施例4
一种白及提取物的制备方法，包含以下步骤：
S1、称取白及块茎药材，干燥，粉碎至90目，得到白及块茎粉末；
S2、将白及块茎粉末加入到70%乙醇溶液中，分散均匀，65℃下回流提取60min，弃红褐色液体，取药渣，在55℃真空干燥箱中烘干；白及块茎粉末与乙醇溶液的料液比为1g：16ml；
S3、将药渣加入到纯水中，在70℃下，用400W超声提取35min，重复操作1次，合并提取液，以4000rpm转速离心20min，取上清液；所述药渣与纯水的的料液比为1g：18ml；
S4、将果胶酶加入到上清液中，调节pH至3.8，在50℃下酶解30min，调节pH至6.2，加入α-淀粉酶，在60℃下酶解60min，，在95℃下水浴30min，将酶灭活，离心，减压浓缩至1/3体积，得到浓缩液；所述果胶酶的加入量为白及块茎药材重量的0.4%，所述α-淀粉酶的加入量为白及块茎药材重量的0.5%；
S5、在浓缩液中滴加95%乙醇，滴加至浓缩液中乙醇溶度为60%，以4000rpm转速离心20min，收集沉淀物，将沉淀物用纯水复溶，冷冻干燥，得到白及提取物。
S6、将白及提取物用纯水复溶，滴加95%乙醇，滴加至浓缩液中乙醇溶度为60%，4000rpm转速离心20min，收集沉淀物，冷冻干燥，得到纯化的白及提取物。
一种抗氧化组合物，由白及提取物、苦杏仁提取物按照重量比1：1组成。
所述白及提取物的制备方法，包含以下步骤：
S1、称取白及块茎药材，干燥，粉碎至80目，得到白及块茎粉末；
S2、将白及块茎粉末加入到80%乙醇溶液中，分散均匀，70℃下回流提取60min，弃红褐色液体，取药渣，在55℃真空干燥箱中烘干；白及块茎粉末与乙醇溶液的料液比为1g：15ml；
S3、将药渣加入到纯水中，在75℃下，用400W超声提取30min，重复操作1次，合并提取液，以4000rpm转速离心20min，取上清液；所述药渣与纯水的的料液比为1g：20ml；
S4、将果胶酶加入到上清液中，调节pH至3.5，在50℃下酶解30min，调节pH至6.5，加入α-淀粉酶，在60℃下酶解60min，，在95℃下水浴30min，将酶灭活，离心，减压浓缩至1/3体积，得到浓缩液；所述果胶酶的加入量为白及块茎药材重量的0.5%，所述α-淀粉酶的加入量为白及块茎药材重量的0.3%；
S5、在浓缩液中滴加95%乙醇，滴加至浓缩液中乙醇溶度为60%，以4000rpm转速离心20min，收集沉淀物，将沉淀物用纯水复溶，冷冻干燥，得到白及提取物；
S6、将白及提取物用纯水复溶，滴加95%乙醇，滴加至浓缩液中乙醇溶度为60%，4000rpm转速离心20min，收集沉淀物，冷冻干燥，得到纯化的白及提取物。
所述苦杏仁提取物的制备方法为：
S11、将苦杏仁干燥，粉碎至70目，得苦杏仁粉末；
S12、将苦杏仁粉末、用于细泡破碎的破碎物、去离子水按照重量比1：0.03：5混合，在65℃下反应5h，得混合物；
S13、将混合物加入到微波提取装置中，加入5倍重量于混合物的70wt％乙醇溶液，加热至70℃，在600W的微波功率下提取20min，得到提取液；
S14、将提取液浓缩至含水量为10%，调节pH至6.2，以1BV/h上HPD-600大孔吸附树脂，洗脱速度为2BV/h，去离子水洗 1.5BV，60wt％乙醇溶液洗2BV，收集乙醇洗液，干燥，即得迷迭香提取物。
所述用于细胞破碎的破碎物由纤维素酶、果胶酶、CTAB按照重量比1：0.5：0.5组成。
对比例1
对比例1与实施例1不同之处在于，本对比例中不采用酶处理，其他都相同。
一种白及提取物的制备方法，包含以下步骤：
S1、称取白及块茎药材，干燥，粉碎至80目，得到白及块茎粉末；
S2、将白及块茎粉末加入到80%乙醇溶液中，分散均匀，70℃下回流提取60min，弃红褐色液体，取药渣，在55℃真空干燥箱中烘干；白及块茎粉末与乙醇溶液的料液比为1g：15ml；
S3、将药渣加入到纯水中，在75℃下，用400W超声提取30min，重复操作1次，合并提取液，以4000rpm转速离心20min，取上清液；所述药渣与纯水的的料液比为1g：20ml；
S4、在上清液中滴加95%乙醇，滴加至上清液中乙醇溶度为60%，以4000rpm转速离心20min，收集沉淀物，将沉淀物用纯水复溶，冷冻干燥，得到白及提取物。
对比例2
一种苦杏仁提取物制备方法，包括以下步骤：
S11、将苦杏仁干燥，粉碎至70目，得苦杏仁粉末；
S12、将苦杏仁粉末、用于细泡破碎的破碎物、去离子水按照重量比1：0.03：5混合，在65℃下反应5h，得混合物；
S13、将混合物加入到微波提取装置中，加入5倍重量于混合物的70wt％乙醇溶液，加热至70℃，在600W的微波功率下提取20min，得到提取液；
S14、将提取液浓缩至含水量为10%，调节pH至6.2，以1BV/h上HPD-600大孔吸附树脂，洗脱速度为2BV/h，去离子水洗 1.5BV，60wt％乙醇溶液洗2BV，收集乙醇洗液，干燥，即得迷迭香提取物。
所述用于细胞破碎的破碎物由纤维素酶、果胶酶、CTAB按照重量比1：0.5：0.5组成。
为了进一步证明本发明的效果，提供了以下测试方法：
1. DPPH· 清除能力测定：用无水乙醇配制1×10-4mol/L的DPPH· 溶液，避光保存备用。分别取0.2mL样品（实施例1~4所述的白及提取物、实施例5所述的组合物、对比例1所述的白及提取物、对比例2所述的苦杏仁提取物）于试管中，加入2mL所配制的DPPH溶液，混合均匀，室温30min后倒入光径为1cm的比色皿中在517nm处测定其吸光度，同时测定样品空白以及不加酶解液的空白样的吸光度。按下式计算其对DPPH· 的自由基清除率：清除率(％)＝(1-(Ai-Aj)/A0)× 100％其中：Ai＝2mL DPPH· 溶液+0.2mL样品的吸光度；Aj＝0.2mL样品+2mL乙醇的吸光度；A0＝2mL DPPH· 溶液+0.2mL样品的吸光度，测试结果见表1。
表1 测试结果
从表1可看出，本发明所述的白及提取物具有良好的白及提取物具有良好的抗氧化作用。
对比实施例1、3；实施例2、4可知，本发明在最后采取乙醇沉淀，能够提高具有抗氧化作用的成分的含量以及纯度，从而提高抗氧化效果。
对比实施例1与对比例1可知，采取两次酶处理，能够有效的去除杂质，提高具有抗氧化作用的成分的含量以及纯度，从而提高抗氧化效果。
对比实施例3、实施例5、对比例2可知，苦杏仁提取物和白及提取物二者在抗氧化方面具有显著的协同增效作用，在用量相同的情况下，二者联用比单一使用具有更好的抗氧化效果。
以上述依据本发明的理想实施例为启示，通过上述的说明内容，相关工作人员完全可以在不偏离本发明技术思想的范围内，进行多样的变更以及修改。本发明的技术性范围并不局限于说明书上的内容，必须要根据权利要求范围来确定其技术性范围。
Claims (10)
1.一种白及提取物的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：
S1、称取白及块茎药材，干燥，粉碎至50~100目，得到白及块茎粉末；
S2、将白及块茎粉末加入到60~80%乙醇溶液中，分散均匀，回流提取，弃红褐色液体，取药渣，烘干；
S3、将药渣加入到纯水中，超声提取，重复操作1~2次，合并提取液，离心，取上清液；
S4、将果胶酶加入到上清液中，调节pH至3~4，在40~55℃下酶解25~35min，调节pH至6~6.8，加入α-淀粉酶，在50~65℃下酶解50~80min，将酶灭活，离心，减压浓缩，得到浓缩液；
S5、在浓缩液中滴加80~95%乙醇，滴加至浓缩液中乙醇溶度为50~65%，离心，收集沉淀物，将沉淀物用纯水复溶，冷冻干燥，得到白及提取物。
2.根据权利要求1所述的白及提取物的制备方法，其特征在于，所述S2中白及块茎粉末与乙醇溶液的料液比为1g：10~18ml。
3.根据权利要求1所述的白及提取物的制备方法，其特征在于，所述回流提取温度为65~80℃，回流提取时间为50~80min。
4.根据权利要求1所述的白及提取物的制备方法，其特征在于，所述S3中药渣与纯水的的料液比为1g：18~25ml。
5.根据权利要求1所述的白及提取物的制备方法，其特征在于，所述S3中超声提取在65~80℃下进行，所述超声提取功率为300~500W，提取时间为25~40min，所述离心速率为3000~5000rpm，离心时间为15~25min。
6.根据权利要求1所述的白及提取物的制备方法，其特征在于，所述S4中果胶酶的加入量为白及块茎药材重量的0.2~0.6%。
7.根据权利要求1所述的白及提取物的制备方法，其特征在于，所述S4中α-淀粉酶的加入量为白及块茎药材重量的0.2~0.6%。
8.根据权利要求1所述的白及提取物的制备方法，其特征在于，所述S4中离心速率为3000~5000rpm，离心时间为15~25min，所述S5中离心速率为3000~5000rpm，离心时间为15~25min。
9.根据权利要求1所述的白及提取物的制备方法，其特征在于，将白及提取物用纯水复溶，滴加80~95%乙醇，滴加至浓缩液中乙醇溶度为50~65%，离心，收集沉淀物，冷冻干燥，得到纯化的白及提取物。
10.权利要求1~9任一所制备的白及提取物在制备抗氧化化妆品中的应用。
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| CN202110513032.1A CN113278082A (zh) | 2021-05-11 | 2021-05-11 | 一种白及提取物及其在制备抗氧化化妆品中的应用 |
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| CN202110513032.1A CN113278082A (zh) | 2021-05-11 | 2021-05-11 | 一种白及提取物及其在制备抗氧化化妆品中的应用 |
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