CN113271933B - 抗癌组合物 - Google Patents

抗癌组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN113271933B
CN113271933B CN201980085555.1A CN201980085555A CN113271933B CN 113271933 B CN113271933 B CN 113271933B CN 201980085555 A CN201980085555 A CN 201980085555A CN 113271933 B CN113271933 B CN 113271933B
Authority
CN
China
Prior art keywords
cancer
pharmaceutically acceptable
acceptable salt
combination
inositol
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201980085555.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113271933A (zh
Inventor
徐万哲
郑毅恩
金恩志
郑在仁
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Noam Co
Original Assignee
Noam Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Noam Co filed Critical Noam Co
Publication of CN113271933A publication Critical patent/CN113271933A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113271933B publication Critical patent/CN113271933B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/155—Amidines (), e.g. guanidine (H2N—C(=NH)—NH2), isourea (N=C(OH)—NH2), isothiourea (—N=C(SH)—NH2)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7004—Monosaccharides having only carbon, hydrogen and oxygen atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/125—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives containing carbohydrate syrups; containing sugars; containing sugar alcohols; containing starch hydrolysates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/40—Complete food formulations for specific consumer groups or specific purposes, e.g. infant formula
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
    • A61K31/05—Phenols
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/661—Phosphorus acids or esters thereof not having P—C bonds, e.g. fosfosal, dichlorvos, malathion or mevinphos
    • A61K31/6615—Compounds having two or more esterified phosphorus acid groups, e.g. inositol triphosphate, phytic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/683—Diesters of a phosphorus acid with two hydroxy compounds, e.g. phosphatidylinositols
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Pediatric Medicine (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及一种组合物，其包含作为活性成分的：(1)双胍基化合物或其药学上可接受的盐、(2)2‑脱氧‑D‑葡萄糖和(3)肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐、肌醇或它们的混合物。根据本发明的组合物通过适当地组合有需要大量使用问题的特定药物而表现出协同抗癌作用，从而使其能够在少量使用的情况下，杀死癌细胞并有效治疗癌症。此外，本发明的组合物通过对癌细胞表现出特定的毒性作用而对正常细胞不表现出毒性，可以仅杀死癌细胞而没有副作用，因此可以有效地用作抗癌剂和用于预防或改善癌症。

Description

抗癌组合物
技术领域
本发明涉及一种用于预防或治疗癌症的药物组合物和一种用于预防或改善癌症的组合物，所述组合物均包含作为活性成分的：(1)双胍基化合物或其药学上可接受的盐、(2)2-脱氧-D-葡萄糖和(3)肌醇六磷酸(inositol hexaphosphate)或其药学上可接受的盐、肌醇或它们的混合物。
背景技术
化疗是一种使用抗癌药物抑制和改变恶性肿瘤生长的治疗方法，已被60-75％的癌症患者用作手术和放疗前后的首选治疗或辅助治疗，具体取决于肿瘤。
现今，当遭受癌症时，两种或更多种治疗的联合是癌症治疗的基石。虽然单一疗法仍被广泛用作各种类型癌症的治疗方法，但这些传统方法通常不如联合疗法有效。传统的单一疗法技术选择性地针对活跃增殖的细胞，最终导致健康细胞和癌细胞的破坏(Mokhtari等人，Oncotarget.2017；8:38022-38043)。
因此，化疗通过参与癌细胞代谢途径，以通过与DNA直接相互作用干扰DNA复制、转录和翻译过程，破坏核酸前体的合成，并抑制细胞分裂，从而对细胞产生毒性。因此，抗癌剂致命地损害正常细胞，导致各种副作用，例如由骨髓破坏引起的白细胞、血小板和红细胞的血细胞减少症等；毛囊破坏导致脱发；作为对卵巢和睾丸的副作用的月经不调和男性不育；作为消化系统粘膜细胞破坏产生的副作用的口腔炎、恶心、呕吐、吞咽困难和消化紊乱；腹泻症状；肾小管坏死引起的肾毒性；神经系统紊乱引起的周围神经炎和虚弱；血管疾病，如血管疼痛和皮疹等；以及皮肤和指甲变色等。因此，迫切需要进行研究以提高治疗效果，同时最小化由抗癌药物引起的副作用。
此外，化疗失败的一个主要原因是抗癌药最初有效，但逐渐表现出耐药性，免疫力极度恶化。因此，需要一种提高癌症治疗功效而不增加药物毒性的方法。抗癌剂的组合可以用作提高抗癌剂功效的一种方法，但是不幸的是，不能期望抗癌剂组合都是协同的，并且寻找具有协同作用的药物组合是非常困难的。因此，迫切需要开发能够最大化抗癌效果，同时最小化抗癌剂副作用的抗癌复合制剂。
最近，人们对开发针对细胞信号传递途径的抗癌疗法很感兴趣，这些途径对癌细胞的代谢和生长很重要，参与癌细胞代谢的代表性药物包括二甲双胍和2-脱氧-D-葡萄糖，它们是双胍基化合物(Wokoun等人，Oncol Rep.2017；37:2418-2424)。
作为一种抗高血糖药物，二甲双胍几十年来一直被用作2型糖尿病的第一种治疗药物。尽管二甲双胍被广泛用作抗糖尿病药物，但2001年首次报道了其对哺乳动物的潜在抗癌作用。此外，第一份关于在用二甲双胍治疗的2型糖尿病患者中降低癌症风险的报告就在10年前发表。从那以后，在许多论文中，二甲双胍在几种癌细胞系(包括卵巢癌、异种移植动物或转基因小鼠)中显示出一致的抗增殖活性。关于代谢，已经发现二甲双胍是一类新的复合物Ⅰ和ATP合成酶抑制剂，其直接作用于线粒体以限制呼吸并使能量无效，并且其通过柠檬酸循环降低葡萄糖代谢(Andrzejewski等人，2014；2:12-25)。
2-脱氧-D-葡萄糖被认为是一种潜在的抗癌剂，因为它依赖肿瘤细胞进行糖酵解。2-脱氧-D-葡萄糖是一种葡萄糖类似物，其易于被葡萄糖转运蛋白吸收，并作为糖酵解的竞争性抑制剂，从而通过激活实体肿瘤中的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)来减少ATP的产生以诱导细胞死亡(Zhang等人，Cancer Lett.2014；355:176-183)。
研究表明，与单独的传统化疗相比，针对两种主要细胞能源物的二甲双胍和2-脱氧-D-葡萄糖两种药物的组合可能具有显著的优势。即二甲双胍不仅降低血糖，还阻断线粒体中的呼吸链，这产生细胞活动所需的能量，并且2-脱氧-D-葡萄糖抑制葡萄糖降解，使两种药物的组合最终阻止细胞的能量传递过程。当这些代谢过程被激活时，癌细胞很容易受到外部攻击，因为即使能量消耗增加，供应的能量也会减少。
根据几种肿瘤类型的报告，已知二甲双胍和2-脱氧-D-葡萄糖的组合抑制细胞代谢并导致肿瘤细胞死亡，并且糖基化(如2-脱氧-D-葡萄糖)和氧化磷酸化(如二甲双胍)的同时代谢紊乱导致人类乳腺癌细胞存活率的剂量依赖性显著降低(Bizjak等人，SciRep.2017；7:1761-1774)。
然而，常用剂量的二甲双胍和2-脱氧-D-葡萄糖不足以充分治愈癌症，并且在高剂量治疗时可能发生不良反应，具有局限性(Raez等人，Cancer Chemother Pharmacol.2013；71:523-530)。Cheong等人研究的二甲双胍和2-脱氧-D-葡萄糖的组合治疗在乳腺癌细胞系中有效，但高于在人体中可耐受的浓度或在血浆中可给予的浓度(Cheong等人，Mol CabcerTger.2011；10:2350-2362)。在另一篇论文中，二甲双胍和2-脱氧-D-葡萄糖的组合已经成功地在前列腺癌细胞中进行了测试，使用的二甲双胍浓度高于人血浆中的浓度(Ben Sahra等人，Cancer Res.2010；70:2465-2475)。
这表明优选临床有效的抗癌剂二甲双胍和2-脱氧-D-葡萄糖在体内可合理实现的范围内降低其治疗浓度。
同时，肌醇六磷酸和肌醇是天然的有机磷化合物，其在大多数谷物、种子和豆类中大量存在，甚至在哺乳动物细胞中也存在，并且与低磷(low phosphate)的磷酸盐(phosphate)形式(IP1-5)一起存在。肌醇六磷酸在调节重要的细胞功能(如信号转导、细胞增殖和各种细胞的分化)中起重要作用，并且被认为是天然抗氧化剂(Shamsuddin等人，JNutr.2003；133:3778S-3784S)。
最近，据报道，肌醇六磷酸具有一些预防癌症和抑制实验性肿瘤的生长、进展和转移的作用(Vucenik等人，Nutr Cancer。2006；55:109-125)。
在初步临床研究中，据报道，肌醇六磷酸和肌醇给药联合化疗，以减少化疗的副作用，并改善患有乳腺癌或结直肠癌、患有肝转移的患者的生活质量。然而，仅使用肌醇六磷酸或肌醇六磷酸和肌醇的组合仍然难以有效抑制癌细胞生长。
发明内容
技术问题
因此，本发明人已经证实，当使用肌醇六磷酸、肌醇或它们的混合物作为复合制剂，同时将双胍基化合物二甲双胍或苯乙双胍和2-脱氧-D-葡萄糖降低到可以在体内合理实现的治疗浓度时，癌细胞生长抑制效果显著提高，并完成了本发明。由于本发明人证实了即使用低浓度化合物的组合，该复合制剂也能有效地杀死癌细胞，因此有望在将来广泛用于癌症治疗领域以及确保人体安全。
即，本发明的一个目的是提供一种用于预防或治疗癌症的药物组合物，其即使使用少量药物也能有效地治疗癌症，并且对特定癌细胞表现出毒性作用，从而减少副作用。
此外，本发明的另一个目的是提供一种用于预防或改善癌症的组合物。
解决问题的技术方案
作为实现所述目的的一个方面，本发明提供了一种用于预防或治疗癌症的药物组合物，其包含作为活性成分的：(1)双胍基化合物或其药学上可接受的盐、(2)2-脱氧-D-葡萄糖和(3)肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐、肌醇或它们的混合物。
作为另一方面，本发明提供了一种用于预防或治疗癌症的药物组合物，其包含：(1)双胍基化合物或其药学上可接受的盐、(2)2-脱氧-D-葡萄糖和(3)肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐、肌醇或它们的混合物。
另一方面，本发明提供了一种用于预防或改善癌症的组合物，其包含作为活性成分的：(1)双胍基化合物或其药学上可接受的盐、(2)2-脱氧-D-葡萄糖、和(3)肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐、肌醇或它们的混合物。
在下文中，将详细描述本发明。
一方面，本发明涉及一种用于预防或治疗癌症的药物组合物，其包含作为活性成分的：(1)双胍基化合物或其药学上可接受的盐、(2)2-脱氧-D-葡萄糖和(3)肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐、肌醇或它们的混合物。
在本发明中，通过制备包含作为活性成分的(1)双胍基化合物或其药学上可接受的盐、(2)2-脱氧-D-葡萄糖和(3)肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐、肌醇或它们的混合物的复合制剂，开发了一种即使在少量使用的情况下，也能有效治疗癌症且副作用较少的优异抗癌剂。
与用单一化合物治疗时相比，本发明的复合制剂可使用包含在复合制剂中的更少量的单一化合物，从而显著降低副作用的风险和/或严重性，并显著提高治疗的整体效果。
在本发明中，双胍基化合物为例如二甲双胍或苯乙双胍。具体而言，二甲双胍具有化学式1的结构式。
[化学式1]
具体而言，苯乙双胍具有化学式2的结构式。
[化学式2]
在本发明中， 当(1)双胍基化合物或其药学上可接受的盐、(2)2-脱氧-D-葡萄糖和(3)肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐、肌醇或其混合物用作复合制剂时，这些化合物即使在低浓度下也表现出高抗癌效果。
双胍基药物不限于此， 而是通过激活称为腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)的酶的作用机制具有抗癌作用，该酶在细胞内能量平衡和营养代谢调节中起着关键作用。
当向大鼠口服给予二甲双胍时，可以看出二甲双胍(其LD50值为1450 mg/kg)是一种非常安全的化合物，但是仍然存在二甲双胍需要高剂量使用的问题。与此同时，苯乙双胍在20世纪50年代末作为口服糖尿病治疗药物开发出来，且旨在用于治疗非胰岛素依赖型糖尿病(2型糖尿病)，但由于一种称为乳酸酸中毒的严重副作用，苯乙双胍的使用在20世纪70年代末被完全禁止。
在本发明中，使用(1)双胍基化合物或其药学上可接受的盐、(2)2-脱氧-D-葡萄糖和(3)肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐、肌醇或其混合物作为复合制剂制备了一种包含至少三种化合物的组合物。已经证实，该组合物甚至在比每种单一制剂或两种化合物组合的组合物低得多的浓度下也表现出高的抗癌效果，从而改善了高剂量给药的问题或二甲双胍或苯乙双胍的副作用的问题(见图1至4和图6至9)。
在本发明中，2-脱氧-D-葡萄糖具有由化学式3表示的结构。
[化学式3]
化学式3的化合物具有作为糖酵解抑制剂的作用效果。
在本发明中，当2-脱氧-D-葡萄糖和双胍基化合物或其药学上可接受的盐，以及肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐、肌醇或它们的混合物用作复合制剂时，其被证实即使在低浓度下也具有高抗癌效果。2-脱氧-D-葡萄糖(一种葡萄糖的衍生物)具有抑制葡萄糖代谢中糖酵解和抑制内质网中蛋白质糖基化以诱导囊泡应激的作用效果(vesicle stress)。因此，2-脱氧-D-葡萄糖(一种葡萄糖降解的抑制剂)本身没有表现出杀死癌细胞的作用，但是形成了具有优异的抗癌效果的本发明的复合制剂。
在本发明中，肌醇六磷酸和/或肌醇可以调节癌细胞中的几种重要路径。在本发明中，肌醇六磷酸具体具有化学式4的结构。
[化学式4]
在本发明中，肌醇具体具有化学式5的结构。
[化学式5]
在本发明中，证实了肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐、肌醇或它们的混合物与双胍基化合物或其药学上可接受的盐和2-脱氧-D-葡萄糖结合，从而即使在低浓度下也具有高抗癌效果。
在本发明中，双胍基化合物和肌醇六磷酸可以以药学上可接受的盐的形式存在。作为盐，与药学上可接受的游离酸形成的酸加成盐是有益的。本发明中使用的术语“药学上可接受的盐”是指任何有机或无机加成盐，其中在对患者具有相对无毒和无害作用的浓度下，由该盐引起的副作用不会降低双胍基化合物和肌醇六磷酸的有益效果。
此时，作为加成盐，盐酸、磷酸、硫酸、硝酸、酒石酸等可用作无机酸，以及甲磺酸、对甲苯磺酸、乙酸、三氟乙酸、马来酸、琥珀酸、草酸、苯甲酸、酒石酸、富马酸、扁桃酸、丙酸、柠檬酸、乳酸、乙醇酸、葡萄糖酸、半乳糖醛酸、谷氨酸、戊二酸、葡萄糖醛酸、天冬氨酸、抗坏血酸、碳酸、香草酸、氢碘酸等可以用作有机酸，但不限于此。
此外，碱也可用于制备药学上可接受的金属盐。碱金属盐或碱土金属盐可以例如通过将化合物溶解在大量碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物溶液中，过滤未溶解的化合物盐，然后蒸发并干燥滤液来获得。在这种情况下，金属盐在药学上适于制备特别是钠盐、钾盐、钙盐和镁盐或其混合盐，但不限于此。
除非另有说明，双胍基化合物(二甲双胍或苯乙双胍)和肌醇六磷酸各自的药学上可接受的盐包括可能存在于双胍基化合物(二甲双胍或苯乙双胍)和肌醇六磷酸各自中的酸或碱性基团的盐。例如，药学上可接受的盐可以包括羟基的钠盐、钾盐、钙盐或镁盐等，以及其他药学上可接受的氨基的盐包括氢溴酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸氢盐、磷酸二氢盐、醋酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、乳酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐(methanesulfonate(mesylate))和对甲苯磺酸盐(p-toluenesulfonate)(甲苯磺酸盐(tosylate))盐等，它们可以通过本领域已知的制备盐的方法来制备。
作为本发明的双胍基化合物(二甲双胍或苯乙双胍)的盐，作为药学上可接受的盐，可以使用表现出与二甲双胍或苯乙双胍等同的抗癌作用的任何二甲双胍盐或苯乙双胍盐。优选地，可以使用盐酸二甲双胍、琥珀酸二甲双胍、柠檬酸二甲双胍或盐酸苯乙双胍、琥珀酸苯乙双胍、柠檬酸苯乙双胍等，但不限于此。
作为本发明的肌醇六磷酸盐，可以使用任何表现出与肌醇六磷酸等同的抗癌作用的肌醇六磷酸盐作为药学上可接受的盐。优选地，可以使用肌醇六磷酸钠、肌醇六磷酸钾、肌醇六磷酸钙、肌醇六磷酸铵、肌醇六磷酸镁、肌醇六磷酸钙镁等，但不限于此。
本发明的双胍基化合物、2-脱氧-D-葡萄糖和肌醇六磷酸也包括其衍生物。术语“衍生物”是指通过化学改变化合物的一部分(例如引入、取代和删除官能团)而制备的化合物，只要该化合物的抗癌活性没有改变，其就可以不受限制地包括在本发明中。
在本发明中，肌醇可以各种异构体的形式存在。异构体包括对映异构体和非对映异构体。任何具有药理学抗癌作用的肌醇都可以使用，且优选地，可以使用选自以下中的至少一种：D-手性-肌醇(D-chiro-inositol)、L-手性-肌醇(L-chiro-inositol)、myo-肌醇(myo-inositol)和鲨肌醇(scyllo-inositol)，但不限于此。
即使将两种或更多种已知各自具有抗癌作用的药物组合，也不能预期组合的药物表现出协同作用，相反，药物的功能被组合抵消，因此很难找到具有协同作用的药物组合。在本发明中，通过使用最小浓度的抗癌药物，开发了能够最大化抗癌效果同时最小化副作用的抗癌复合制剂。
在本发明中，用于预防或治疗癌症的药物组合物的一个优选方面可以是一种包含双胍基化合物或其药学上可接受的盐、2-脱氧-D-葡萄糖和肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐的组合物；一种包含双胍基化合物或其药学上可接受的盐、2-脱氧-D-葡萄糖和肌醇的组合物；或者一种包含双胍基化合物或其药学上可接受的盐、2-脱氧-D-葡萄糖、肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐和肌醇的组合物。
在本发明中，双胍基化合物可以为二甲双胍或其药学上可接受的盐，或者苯乙双胍或其药学上可接受的盐。
当描述以作为双胍基化合物的二甲双胍为中心的组合物时，用于预防或治疗癌症的药物组合物可以为一种包含二甲双胍或其药学上可接受的盐、2-脱氧-D-葡萄糖和肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐的组合物；一种包含二甲双胍或其药学上可接受的盐、2-脱氧-D-葡萄糖和肌醇的组合物；或者一种包含二甲双胍或其药学上可接受的盐、2-脱氧-D-葡萄糖、肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐和肌醇的组合物。
当描述以作为另一种双胍基化合物的苯乙双胍为中心的组合物时，用于预防或治疗癌症的组合物可以为一种包含苯乙双胍或其药学上可接受的盐、2-脱氧-D-葡萄糖和肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐的组合物；一种包含苯乙双胍或其药学上可接受的盐、2-脱氧-D-葡萄糖和肌醇的组合物；或者一种包含苯乙双胍或其药学上可接受的盐、2-脱氧-D-葡萄糖、肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐和肌醇的组合物。
在本发明的一个实施方案中，证实了由双胍基化合物或其药学上可接受的盐、2-脱氧-D-葡萄糖和肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐组成的复合制剂可以抑制体外癌细胞系的细胞增殖(实施例1)。
此外，在使用由三种或更多种化合物组成的复合制剂的情况下，所述复合制剂由一种包含双胍基化合物或其药学上可接受的盐、2-脱氧-D-葡萄糖和肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐的组合物构成；由一种包含双胍基化合物或其药学上可接受的盐、2-脱氧-D-葡萄糖和肌醇的组合物构成；或由一种包含双胍基化合物或其药学上可接受的盐、2-脱氧-D-葡萄糖、肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐和肌醇的组合物构成，由于这些化合物的组合，证实在体内表现出预防或治疗癌症的协同作用，并且癌症抑制浓度显著降低(实施例5-9)。
也就是说，根据本发明，在单独使用双胍基化合物、2-脱氧-D-葡萄糖、肌醇六磷酸和肌醇中的每一种的情况下，由于抗癌效果不足，需要大量使用，但是当使用结合这些化合物的复合制剂时，证实即使以少量使用也可以有效地杀死癌细胞。
特别地，二甲双胍/2-脱氧-D-葡萄糖/肌醇六磷酸的复合制剂、二甲双胍/2-脱氧-D-葡萄糖/肌醇的复合制剂和二甲双胍/2-脱氧-D-葡萄糖/肌醇六磷酸/肌醇的复合制剂显示出比每种化合物的单一制剂或两种化合物(如二甲双胍/2-脱氧-D-葡萄糖)的复合制剂更高的降低癌症抑制浓度的效果。
在根据本发明的每种复合制剂中，每种化合物的组合的重量比没有特别限制。
例如，二甲双胍或其药学上可接受的盐:2-脱氧-D-葡萄糖:肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐的重量比可以为1:0.2:0.5至1:5:20，并且组合的相对量可以根据待治疗的癌症类型而变化。
在另一个实例中，苯乙双胍或其药学上可接受的盐:2-脱氧-D-葡萄糖:肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐的重量比可以为1:1:1至1:50:200，并且组合的相对量可以根据待治疗的癌症类型而变化。
在另一个实例中，二甲双胍或其药学上可接受的盐:2-脱氧-D-葡萄糖:肌醇的重量比可以为1:0.2:0.5至1:5:20，并且组合的相对量可以根据待治疗的癌症类型而变化。
在另一个实例中，苯乙双胍或其药学上可接受的盐:2-脱氧-D-葡萄糖:肌醇的重量比可以为1:1:1至1:50:200，并且组合的相对量可以根据待治疗的癌症类型而变化。
在另一个实例中，二甲双胍或其药学上可接受的盐:2-脱氧-D-葡萄糖:肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐:肌醇的重量比可以为1:0.2:0.5:0.5至1:5:20:20，并且组合的相对量可以根据待治疗的癌症类型而变化。
在另一个实例中，苯乙双胍或其药学上可接受的盐:2-脱氧-D-葡萄糖:肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐:肌醇的重量比可以为1:1:1:1至1:50:200:200，并且组合的相对量可以根据待治疗的癌症类型而变化。在本发明中，术语“癌症”是指与细胞死亡控制相关的疾病，并且是指当正常凋亡平衡被打破时由细胞过度增殖引起的疾病。这些异常过度增殖的细胞侵入周围组织器官，在某些情况下形成肿块，破坏或改变身体的正常结构，这称为癌症。一般而言，术语“肿瘤”是指由于身体组织自主过度生长而异常生长的肿块，可分为良性肿瘤和恶性肿瘤。恶性肿瘤比良性肿瘤生长快得多，并侵入周围组织，从而发生转移，危及生命。恶性肿瘤通常被称为“癌症”，癌症的类型包括脑脊髓瘤、脑癌、头颈癌、肺癌、乳腺癌、胸腺肿瘤、食道癌、胃癌、结肠癌、肝癌、胰腺癌、胆管癌、肾癌、膀胱癌、前列腺癌、睾丸癌、生殖细胞瘤、卵巢癌、宫颈癌、子宫内膜癌、淋巴瘤、急性白血病、慢性白血病、多发性骨髓瘤、肉瘤、恶性黑色素瘤和皮肤癌等。本发明的抗癌组合物可用于但不限于癌症类型，但可用于预防或治疗选自以下中的至少一种：肝癌、肺癌、胃癌、胰腺癌、结肠癌、宫颈癌、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、脑癌、骨肉瘤和膀胱癌。
本发明中使用的术语“预防或治疗”是指使用包含作为活性成分的：(1)双胍基化合物或其药学上可接受的盐、(2)2-脱氧-D-葡萄糖和(3)肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐、肌醇或其混合物的组合物抑制或延迟癌症发展的所有作用，并且特别地，“治疗”是指使用该组合物改善或有益地缓和癌症的所有作用。
因此，本发明提供了一种治疗癌症的方法，包括向需要其治疗的受试者给予治疗有效量的(1)双胍基化合物或其药学上可接受的盐、(2)2-脱氧-D-葡萄糖和(3)肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐、肌醇或它们的混合物。
本发明中使用的术语“给予/给药”是指以任何合适的方式向受试者提供本发明的组合物。此时，受试者指的是动物，并且可以是通常用本发明的组合物进行治疗，而表现出有益效果的哺乳动物。这种个体的优选实例可以包括灵长类动物，例如人类。
除了上述活性成分之外，如果需要，本发明的用于预防或治疗癌症的组合物可以进一步包含用于治疗癌症的化疗剂。
此外，本发明的用于预防或治疗癌症的组合物可以进一步包含药学上可接受的载体。根据使用目的，本发明的组合物可以根据一般方法按照口服制剂(例如粉剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、混悬剂、乳剂、糖浆剂和气雾剂等)、无菌注射剂、外部形式(例如药膏等)和栓剂等来配制和使用。可以包含在该组合物中的载体、赋形剂和稀释剂可以包含乳糖、右旋糖(dextrose)、蔗糖、山梨醇、甘露醇、木糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、淀粉、阿拉伯胶(acaciarubber)、藻酸盐、明胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羟基苯甲酸甲酯(methyl hydroxybenzoate)、羟基苯甲酸丙酯(propylhydroxybenzoate)、滑石粉、硬脂酸镁和矿物油等。
用于口服给药的固体制剂包括片剂、丸剂、粉剂、颗粒剂和胶囊剂等，并且这种固体制剂可以通过将至少一种赋形剂(例如淀粉、碳酸钙、蔗糖、乳糖、明胶等)与组合物混合来配制。此外，除了简单的赋形剂之外，还可以使用润滑剂，例如硬脂酸镁和滑石粉。用于口服给药的液体制剂可以对应于混悬剂、内部施用溶液、乳剂、糖浆剂等，并且除了通常用作简单稀释剂的水和液体石蜡之外，还可以包含各种赋形剂，例如润湿剂、甜味剂、芳香剂和防腐剂等。
一种胃肠外给药的制剂，包括无菌水溶液、非水溶液、混悬剂、乳剂、冻干剂和栓剂。作为非水溶液和混悬剂，可以使用丙二醇、聚乙二醇、植物油(例如橄榄油)、可注射的酯(例如如油酸乙酯)等。注射剂的基质可包含常规添加剂，例如增溶剂、等渗剂、悬浮剂、乳化剂、稳定剂和防腐剂。
本发明的组合物可以使用多种方法给药，例如口服、静脉内、皮下、皮内、鼻内、腹膜内、肌内和经皮给药等，并且剂量可以根据患者的年龄、性别和体重而变化，并且可以由本领域技术人员容易地确定。根据本发明的组合物的剂量可以根据给药途径、疾病的严重程度、性别、体重、年龄等而增加或减少。优选地，在四种化合物的复合制剂的情况下，作为双胍基化合物的二甲双胍可以以每天5至80mg/kg(体重)使用，苯乙双胍可以以每天0.1至10mg/kg(体重)使用，2-脱氧-D-葡萄糖可以以每天0.1至160mg/kg(体重)使用，肌醇六磷酸可以以每天2至600mg/kg(体重)使用，肌醇可以以每天2至600mg/kg(体重)使用。然而，本发明的范围不受剂量的限制。
另一方面，本发明涉及一种治疗癌症的方法，包括向受试者给予(1)双胍基化合物或其药学上可接受的盐、(2)2-脱氧-D-葡萄糖和(3)肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐、肌醇或它们的混合物。
作为又一方面，本发明涉及一种用于治疗癌症的组合物，其包含：(1)双胍基化合物或其药学上可接受的盐、(2)2-脱氧-D-葡萄糖和(3)肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐、肌醇或它们的混合物。
另一方面，本发明涉及一种包含(1)双胍基化合物或其药学上可接受的盐、(2)2-脱氧-D-葡萄糖和(3)肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐、肌醇或它们的混合物的组合物在制备用于预防或治疗癌症的药物中的用途。
又一方面，本发明涉及一种用于预防或改善癌症的组合物，其包含作为活性成分的：(1)双胍基化合物或其药学上可接受的盐、(2)2-脱氧-D-葡萄糖和(3)肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐、肌醇或它们的混合物。
双胍基化合物可以是二甲双胍或苯乙双胍。
本发明的组合物可以通过本领域常用的方法制备，并且可以通过在制备中加入本领域常添加的原料和成分来制备。本发明的组合物可以制备成各种类型的制剂，并且与普通药物不同，其具有这样的优点，即不存在当长期使用药物时可能发生的副作用，并且具有优异的便携性，并且本发明的组合物可以作为补充物来服用以增强抗癌药物的效果。
本发明的有益效果
本发明的组合物通过适当地组合有需要大量使用问题的特定药物而表现出协同抗癌效果，从而使得其能够在少量使用情况下，杀死癌细胞并有效治疗癌症。此外，本发明的组合物通过对癌细胞表现出特定的毒性作用而对正常细胞不表现出毒性，可以仅杀死癌细胞而没有副作用，因此可以有效地用作抗癌剂和用于预防或改善癌症。
附图说明
图1和图2示出了通过用二甲双胍(MET)、2-脱氧-D-葡萄糖(2DG)和肌醇六磷酸(IP6)的单一和复合制剂以人血浆中可使用的低浓度处理人源性癌细胞系48小时后，通过MTT检测法测定的以百分比表示的细胞存活率图。每条的竖条代表一个标准偏差。利用GraphPad Prism 6.0软件进行Tukey的多重比较后分析，通过单向方差分析测试进行统计分析。
图1A是检测作为源自人肝脏的癌细胞的HepG2细胞系的图。图1B是检查作为源自人肺的癌细胞的A549细胞系的图。图1C是检测作为源自人胃的癌细胞的AGS细胞系的图。图1D是检测作为源自人胰腺的癌细胞的PANC-1细胞系的图。图1E是检测作为源自人结肠的癌细胞的DLD-1细胞系的图。图1F是检测作为源自人宫颈的癌细胞的HeLa细胞系的图。图2A是检测作为源自人乳腺的癌细胞的MDA-MB-231细胞系的图。图2B是检测作为源自人前列腺的癌细胞的PC-3细胞系的图。图2C是检测作为源自人卵巢的癌细胞的SK-OV-3细胞系的图。图2D是检测作为源自人膀胱的癌细胞的T24细胞系的图。图2E是检测作为源自人脑的癌细胞的U-87MG细胞系的图。图2F是检测源自人骨骼的癌细胞的Saos-2细胞系的图。****p<0.0001。
图3和图4示出了通过苯乙双胍(PHE)、2DG和IP6的单一和复合制剂以人血浆中可使用的低浓度处理人源癌细胞48小时后，通过MTT检测法测定的作为百分比的细胞存活率的图。每条竖条代表一个标准偏差。使利用GraphPad Prism 6.0软件进行Tukey的多重比较后分析，，通过单向方差分析测试进行统计分析。
图3A是检测作为源自人肝脏的癌细胞的HepG2细胞系的图。图3B是检测作为源自人肺的癌细胞的A549细胞系的图。图3C是检测作为源自人胃的癌细胞的AGS细胞系的图。图3D是检测作为源自人胰腺的癌细胞的PANC-1细胞系的图。图3E是检测作为源自人结肠的癌细胞的DFD-1细胞系的图。图3F是检测作为源自人宫颈的癌细胞的HeFa细胞系的图。图4A是检测作为源自人乳腺的癌细胞的MDA-MB-231细胞系的图。图4B是检测作为源自人前列腺的癌细胞的PC-3细胞系的图。图4C是检测作为源自人卵巢的癌细胞的SK-OV-3细胞系的图。图4D是检测作为源自人膀胱的癌细胞的T24细胞系的图。图4E是检测作为源自人脑的癌细胞的U-87MG细胞系的图。图4F是检测作为源自人骨骼的癌细胞的Saos-2细胞系的图。****p<0.0001。
图5示出了通过MET、2DG和IP6的复合制剂以人血浆中可使用的低浓度处理人源性正常细胞系48小时后，通过MTT检测法测定的以百分比表示的细胞存活率图。****p<0.0001。
图6示出了使用MET、2DG和IP6的单一和复合制剂在4T1细胞中的细胞存活率和蛋白质表达图。*p<0.05。****p<0.0001。
图7是MET、2DG和IP6的单一和复合制剂对4T1细胞的ATP合成抑制图。*p<0.05。****p<0.0001。
图8是在测试动物中，根据MET、2DG、IP6和Ins的单一和复合制剂的给药，每隔三天测量的肿瘤体积图。**p<0.05，***p<0.0001。
图9是在测试动物中，给药MET、2DG、IP6和Ins的单一和复合制剂后第19天测量的肿瘤重量图。*p<0.05，**p<0.01，***p<0.0001。
图10是在测试动物中，给药MET、2DG、IP6和Ins的单一和复合制剂后第18天测量的重量图。NS(无显著性差异)。
图11是检测MET、2DG、IP6和Ins的单一和复合制剂的肺转移发生率的图。
图12是苏木精&伊红染色图，用于检测MET、2DG、IP6和Ins的单一和复合制剂对肿瘤组织的组织形态学变化的影响。
具体实施方式
参考下面详细描述的实施方案，本发明的优点和特征以及实现它们的方法将是显而易见的。然而，本发明不限于以下示例性实施方案，而是可以以各种不同的形式实现。提供示例性实施方案仅仅是为了完成本发明的公开，并向本发明所属领域的普通技术人员充分提供本发明的范畴，并且本发明将仅由所附权利要求来限定。
在下面的实施例中，在作为双胍基化合物的二甲双胍或苯乙双胍的各种药学上可接受的盐形式中，使用盐酸二甲双胍(盐酸二甲双胍(Metformin HCl))和盐酸苯乙双胍(盐酸苯乙双胍(Phenformin HCl))。这些盐的形式不受实施例的限制。
在下面的实施例中，在几种药学上可接受的肌醇六磷酸的盐形式中，使用了肌醇六磷酸(植酸)。这些盐的形式不受实施例的限制。
在下面的实施例中，使用myo-肌醇作为肌醇的异构体。这些异构体不受实例的限制。
细胞培养
测试中使用以下细胞作为肿瘤细胞：肝癌(HepG2)、肺癌(A549)、胃癌(AGS)、胰腺癌(PANC-1)、结肠癌(DLD-1)、宫颈癌(HeLa)、乳腺癌(MDA-MB-231)、前列腺癌(PC-3)、卵巢癌(SK-OV-3)、膀胱癌(T24)、胶质母细胞瘤(U-87MG)、骨肉瘤(Saos-2)和源自小鼠的乳腺癌细胞；以下细胞作为非肿瘤细胞：前列腺细胞系(PZ-HPV-7)、结肠细胞系(CCD-10)和肺细胞系(MRC5)。所有细胞系均购自韩国细胞系银行或美国模式培养物保藏所(ATCC)(Rockville，MD)。
使用通过将10％胎牛血清(FBS，Hyclone)和1％青霉素/链霉素(P/S，Hyclone)添加到罗斯韦尔公园纪念研究所1640培养基(RPMI1640，Hyclone，Logan，UT，USA)中获得的细胞培养液，将细胞在37℃的培养箱(5％CO2/95％空气)中培养和维持。当将细胞填充到培养皿的约80％时，用磷酸盐缓冲盐水(PBS，Hyclone)洗涤单层细胞，并用0.25％胰蛋白酶-2.65mM EDTA(Hyclone)进行传代培养，每两天更换一次培养基。
使用的药物
盐酸二甲双胍(以下简称MET)、盐酸苯乙双胍(以下简称PHE)、2-脱氧-D-葡萄糖(以下简称2DG)、肌醇六磷酸(植酸，以下简称IP6)和myo-肌醇(以下简称Ins)购自Sigma(美国圣路易斯)。在本发明中，总结通过试验获得的结果的表和附图中使用的所有药物被表示为缩写。
参考例1:体外细胞生长抑制试验
通过MTT检测法[3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(3-(4,5-dimethyl thiazolyl-2)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide)检测法]证实了MET或PHE、2DG和IP6的细胞毒性。在将细胞(3至4×105个细胞/孔)分配到96孔培养板中并稳定12小时或更长时间后，取出每个孔的培养基，将每个细胞的MET或PHE、2DG和IP6按每种浓度混合，并用无血清培养基处理。对于对照细胞，在培养基中加入PBS。在37℃下用CO2培养48小时后，将含有对照和混合物的培养基完全除去，并用MTT(美国密苏里州圣路易斯西格玛奥德里奇)试剂(0.5mg/mL)在37℃下培养4小时。此后，将含MTT试剂的培养基完全除去，由活细胞形成的MTT甲瓒晶体(formazan crystal)被留下，并通过加入DMSO(Sigma)在室温下溶解15分钟或更长时间。使用微板读数器在560nm的波长下测量吸光度(美国佛蒙特州威诺斯基仪器公司)。
参考例2:单一制剂和复合制剂的测试方法
将细胞(3至4×105个细胞/孔)接种在96孔板中，并用每种浓度的作为单一制剂的各MET或PHE、2DG和IP6处理，以确认细胞增殖抑制率。
处理复合制剂药物，以具有对应于包含选自MET或PHE、2DG和IP6的两种或更多种化合物的复合制剂的IC50的药物浓度。所有细胞系在单一或复合制剂的浓度下培养48小时，并通过MTT检测法测量生长抑制效果。
参考例3：蛋白质印迹分析
为了分离细胞中的蛋白质，加入总溶解缓冲液(total lysis buffer)(50mMTris、150mM NaCl、5mM乙二胺四乙酸(EDTA)、1mM二硫苏糖醇(DTT)、0.5％诺纳德P-40(nonidet P-40)、100mM苯甲基磺酰氟(PMSF)、20mM抑肽酶、20mM亮抑酶酞，pH 8.0)，在4℃下溶解30分钟，然后离心(12000rmp，10分钟)得到上清液。
此外，为了分离细胞质/细胞核中的蛋白质，向细胞中加入缓冲溶液A(10mM Hepes(pH 7.9)、1.5mM MgCl2、10mM KCl、0.5mM DTT、300mM蔗糖、0.1％NP-10、0.5mM PMSF)，并在4℃下溶解5分钟，离心(1000rmp，1分钟)以分离颗粒(pellet)(核蛋白)。将分离的颗粒用缓冲溶液B(20mM Hepes(pH 7.9)、20％甘油、100mM KCl、100mM NaCl2、0.2mM EDTA、0.5mMDTT、0.5mM PMSF)在4℃下溶解15分钟，离心(10000rmp，5分钟)分离细胞核中的蛋白质。
将上述方法提取的蛋白质电泳到十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶上，和将蛋白质电泳到硝酸纤维素膜上(美国康涅狄格州费尔菲尔德的沃尔曼通用电气医疗集团(Whatman,GE Health Care Gorp.))。为了寻找一种特定的蛋白质，含有5％的脱脂牛奶的TBS-T(美国纽约州格兰德岛的GIBCO-BRL，Invitrogen Co.)反应1小时以阻断非特异性蛋白质，然后稀释特异性蛋白质的抗体pAMPKa、ACCpS79和b-actin(美国德克萨斯州达拉斯的圣克鲁斯生物技术公司(Santa Cruz Biotechnology Inc.))，并以1:1000在含2.5％脱脂牛奶的TBS-T中进行反应。
反应后的膜用特异性抗体的二级抗体处理，然后用增强的化学发光在x射线胶片上光敏化(美国伊利诺伊州阿灵顿高地的阿默舍姆生命科学公司ECL(ECL，Amersham LifeScience Corp.))来分析特异性蛋白质的表达。
参考例4:测试动物
五周大的雌性无特定病原体的BALB/c裸鼠是从Orient Bio Co.,Ltd购买和使用的。经过一周的检疫和适应后，选择健康无体重下降的动物用于测试。测试动物在温度为23±3℃，相对湿度为50±10％，通风次数为10-15次/小时，光照时间为12小时(08:00-20:00)，照度为150-300Lux的养殖环境中饲养。在预测试期间，允许测试动物自由食用测试动物的固体饲料(CargillAgripurina Co.,Ltd)和饮用水。
参考例5:肿瘤细胞移植和测试物质给药
经过一周的适应期后，在BALB/c裸鼠中，将4T1细胞(1×105细胞/小鼠)(乳腺癌细胞)注射到测试动物的左乳房脂肪组织中，然后目测观察肿瘤组织。当测试动物的肿瘤组织大小为约100mm3时，根据随机区组设计将测试动物分成9个测试组。即将9个测试组分为对照组、MET组(MET 250mg/kg)、2DG组(2DG 500mg/kg)、Ins组(Ins 500mg/kg)、IP6组(IP6500mg/kg)、MET+2DG组(MET 250mg/kg+2DG 500mg/kg)、MET+2DG+Ins组(MET 250mg/kg+2DG500mg/kg+Ins 500mg/kg)、MET+2DG+IP6组(MET 250mg/kg+2DG 500mg/kg+IP6500mg/kg)、MET+2DG+IP6+Ins组(MET 250mg/kg+2DG 500mg/kg+IP6250mg/kg+Ins 250mg/kg)，并且每个测试组使用10只测试动物。将测试物质溶解在蒸馏水中，并在固定时间腹膜内给药18天。
参考例6：测试动物的体重和肿瘤体积的测量
从测试物质给药之日起，每周一次在固定时间测量测试期间测试动物的体重。通过每三天使用数显卡尺(digital caliper)测量肿瘤体积，测量了肿瘤的长度和宽度，并且通过代入以下方程式来计算肿瘤体积。
肿瘤体积(mm3)＝(宽度2×长度)/2
参考例7：肿瘤重量的测量
测试物质给药14天后，使用通过叔戊醇稀释三溴乙醇制成的麻醉剂麻醉测试动物，并从眼眶收集血液。将血液置于血清分离管(Becton Dickinson)中，在室温下放置30分钟，并以3000rpm离心20分钟以分离血清，并将分离的血清储存在-70℃直至分析。从测试动物身上取血后，提取肿瘤并称重。称重肿瘤，并将一些肿瘤固定在10％中性缓冲福尔马林中(NBF，Sigma-奥尔德里奇公司)，并包埋在石蜡中以进行组织免疫染色。将肺用Bouin氏液固定(Sigma-奥尔德里奇公司)，观察转移到肺的肿瘤结节并检查肺转移率。
参考例8：肿瘤组织的苏木精&伊红染色
用10％中性缓冲福尔马林固定的肿瘤组织包埋在石蜡中，由包埋的组织制备5mm的组织切片。去除石蜡后，将组织通过依次降低乙醇百分含量来水合，从100％乙醇开始到0％乙醇(H2O)。根据肿瘤组织组织形态学观察的一般方法进行H&E染色，并且通过光学显微镜(Carl Zeiss)观察肿瘤组织的组织形态学变化。
参考例9:统计处理
所有分析值均表示为平均±标准差(SD)。为了比较对照组和测试物质处理组之间的差异，利用GraphPad Prism 6.0软件进行Tukey的多重比较后分析，通过单向方差分析测试或双向方差分析测试来验证显著性。确定只有当p<0.05或更多时才有统计学意义。
实施例1.MET(或PHE)、2DG、IP6单一制剂和复合制剂的细胞增殖抑制试验
使用12种类型的癌细胞比较了MET(或PHE)、2DG和IP6的单一制剂和复合制剂的细胞增殖抑制效果。
实施例1-1：单独或组合给予MET、2DG和IP6后的细胞存活率
图1和图2是向人癌细胞系如肝癌(HepG2)、肺癌(A549)、胃癌(AGS)、胰腺癌(PANC-1)、结肠癌(DLD-1)、宫颈癌(HeLa)、乳腺癌(MDA-MB-231)、前列腺癌(PC-3)、卵巢癌(SK-OV-3)、膀胱癌(T24)、胶质母细胞瘤(U-87MG)和骨肉瘤(Saos-2)单独或组合给予MET、2DG和IP6后检测细胞存活率的图。
图1A示出了用4mM的MET、1mM的2DG和1mM的IP6单独或组合处理的肝癌细胞系(HepG2)的细胞存活率。组合处理制剂的存活率明显低于包括对照在内的单一处理(P<0.0001)的存活率。在组合处理组之间进行比较，MET+2DG+IP6组合的细胞存活率为17.44±4.8，其明显比MET+2DG组合的细胞存活率45.40±4.2(P<0.0001)低2.6倍。
图1B示出了用4mM的MET、1mM的2DG和1mM的IP6单独或组合处理肺癌(A549)细胞系的细胞存活率。组合处理制剂的存活率明显低于包括对照组在内的单一处理(P<0.0001)的存活率。在组合处理组之间进行比较，MET+2DG+IP6组合的细胞存活率为19.43±5.2，其明显比MET+2DG组合的细胞存活率48.84±5.3(P<0.0001)低2.5倍。
图1C示出用2mM的MET、0.7mM的2DG和1mM的IP6单独或组合处理的胃癌(AGS)细胞系的细胞存活率。组合处理制剂的存活率明显低于包括对照组在内的单一处理(P<0.0001)的存活率。在组合处理组之间进行比较，MET+2DG+IP6组合的细胞存活率为15.20±4.2，其明显比MET+2DG组合的细胞存活率53.00±3.8(P<0.0001)低3.5倍。
图1D示出了5mM的MET、0.7mM的2DG和1mM的IP6单独和组合处理胰腺癌(PANC-1)细胞系的细胞存活率。组合处理制剂的存活率明显低于包括对照在内的单一处理(P<0.0001)的存活率。在组合处理组之间进行比较，MET+2DG+IP6组合的细胞存活率为25.27±5.2，其明显比MET+2DG组合的细胞存活率65.40±4.3(P<0.0001)低2.6倍。
图1E示出了用5mM的MET、0.4mM的2DG和1mM的IP6单独和组合处理结肠癌(DLD-1)细胞系的细胞存活率。组合处理制剂的存活率明显低于包括对照在内的单一处理(P<0.0001)的存活率。在组合处理组之间进行比较，MET+2DG+IP6组合的细胞存活率为26.70±4.7，其明显比MET+2DG组合的细胞存活率65.40±4.6(P<0.0001)低2.4倍。
图1F示出了用6mM的MET、0.5mM的2DG和1mM的IP6单独和组合处理的宫颈癌(HeLa)细胞系的细胞存活率。组合处理制剂的存活率明显低于包括对照在内的单一处理(P<0.0001)的存活率。在组合处理组之间进行比较，MET+2DG+IP6组合的细胞存活率为24.67±3.6，其明显比MET+2DG组合的细胞存活率52.89±4.6(P<0.0001)低2.1倍。
图2A示出了用6mM的MET、1mM的2DG和1mM的IP6单独和组合处理的乳腺癌(MDA-MB-231)细胞系的细胞存活率。组合处理制剂的存活率明显低于包括对照在内的单一处理(P<0.0001)的存活率。在组合处理组之间进行比较，MET+2DG+IP6组合的细胞存活率为26.37±5.3，其明显比MET+2DG组合的细胞存活率55.15±4.5(P<0.0001)低2.1倍。
图2B示出了用5mM的MET、1mM的2DG和1mM的IP6单独和组合处理的前列腺癌(PC-3)细胞系的细胞的存活率。组合处理制剂的存活率明显低于包括对照在内的单一处理(P<0.0001)的存活率。在组合处理组之间进行比较，MET+2DG+IP6组合的细胞存活率为19.51±5.6，其明显比MET+2DG组合的细胞存活率66.70±4.6(P<0.0001)低3.4倍。
图2C示出了用5mM的MET、0.5mM的2DG和1mM的IP6单独和组合处理的卵巢癌(SK-OV-3)细胞系的细胞存活率。组合处理制剂的存活率明显低于包括对照在内的单一处理(P<0.0001)的存活率。在组合处理组之间进行比较，MET+2DG+IP6组合的细胞存活率为22.80±5.2％，其明显比MET+2DG组合的细胞存活率66.80±3.6％(P<0.0001)低2.9倍。
图2D示出了用4mM的MET、1mM的2DG和1mM的IP6单独和组合处理的膀胱癌(T24)细胞系的细胞存活率。组合处理制剂的存活率明显低于包括对照在内的单一处理(P<0.0001)的存活率。在组合处理组之间进行比较，MET+2DG+IP6组合的细胞存活率为26.42±4.8，其明显比MET+2DG组合的细胞存活率63.30±4.2(P<0.0001)低2.4倍。
图2E示出了用5mM的MET、0.4mM的2DG和1mM的IP6单独和组合处理的胶质母细胞瘤(U-87MG)细胞系的细胞存活率。组合处理制剂的存活率明显低于包括对照在内的单一处理(P<0.0001)的存活率。在组合处理组之间进行比较，MET+2DG+IP6组合的细胞存活率为20.80±5.7，其明显比MET+2DG组合的细胞存活率61.32±4.8(P<0.0001)低2.9倍。
图2F示出了用5mM的MET、0.7mM的2DG和1mM的IP6单独和组合处理的骨肉瘤(Saos-2)细胞系的细胞存活率。组合处理制剂的存活率明显低于包括对照在内的单一处理(P<0.0001)的存活率。在组合处理组之间进行比较，MET+2DG+IP6组合的细胞存活率为24.52±5.7，其明显比MET+2DG组合细胞存活率64.33±4.9(P<0.0001)低2.6倍。
这些结果证实了MET、2DG和IP6的三重复合制剂比单一或双重复合制剂具有更好的癌细胞增殖抑制效果。
实施例1-2：单独和组合给予PHE、2DG和IP6后的细胞存活率
图3和图4是检测向人类癌细胞系(如肝癌(HepG2)、肺癌(A549)、胃癌(AGS)、胰腺癌(PANC-1)、结肠癌(DLD-1)、宫颈癌(HeLa)、乳腺癌(MDA-MB-231)、前列腺癌(PC-3)、卵巢癌(SK-OV-3)、膀胱癌(T24)、胶质母细胞瘤(U-87MG)和骨肉瘤(Saos-2))单独或组合给予PHE、2DG和IP6后的细胞存活率的图。
图3A示出了用0.3mM的PHE、1mM的2DG和1mM的IP6单独和组合处理的肝癌(HepG2)细胞系的细胞存活率。组合处理制剂的存活率明显低于包括对照在内的单一处理(P<0.0001)的存活率。在组合处理组之间进行比较，PHE+2DG+IP6组合的细胞存活率为20.21±4.1，其明显比PHE+2DG组合的细胞存活率49.55±4.8(P<0.0001)低2.5倍。
图3B示出了用0.3mM的PHE、1mM的2DG和1mM的IP6单独和组合处理的肺癌(A549)细胞系的细胞存活率。组合处理制剂的存活率明显低于包括对照在内的单一处理(P<0.0001)的存活率。在组合处理组之间进行比较，PHE+2DG+IP6组合的细胞存活率为22.41±5.2，其明显比PHE+2DG组合的细胞存活率54.77±5.8(P<0.0001)低2.4倍。
图3C示出了用0.3mM的PHE、0.7mM的2DG和1mM的IP6单独和组合处理的胃癌(AGS)细胞系的细胞存活率。组合处理制剂的存活率明显低于包括对照在内的单一处理(P<0.0001)的存活率。在组合处理组之间进行比较，PHE+2DG+IP6组合的细胞存活率为17.38±3.8，其明显比PHE+2DG组合的细胞存活率50.45±3.9(P<0.0001)低2.9倍。
图3D示出了用0.2mM的PHE、0.7mM的2DG和1mM的IP6组合处理的胰腺癌(PANC-1)细胞系的细胞存活率。组合处理制剂的存活率明显低于包括对照在内的单一处理(P<0.0001)的存活率。在组合处理组之间进行比较，PHE+2DG+IP6组合的细胞存活率为25.27±5.2，其明显比PHE+2DG组合的细胞存活率65.40±4.3(P<0.0001)低2.6倍。
图3E示出了用0.3mM的PHE、0.4mM的2DG和1mM的IP6单独和组合处理的结肠癌(DLD-1)细胞系的细胞存活率。组合处理制剂的存活率明显低于包括对照在内的单一处理(P<0.0001)的存活率。在组合处理组之间进行比较，PHE+2DG+IP6组合的细胞存活率为22.21±4.8，其明显比PHE+2DG组合的细胞存活率60.98±4.7(P<0.0001)低2.7倍。
图3F示出了用0.2mM的PHE、0.5mM的2DG和1mM的IP6单独和组合处理的宫颈癌(HeLa)细胞系的细胞存活率。组合处理制剂的存活率明显低于包括对照在内的单一处理(P<0.0001)的存活率。在组合处理组之间进行比较，PHE+2DG+IP6组合的细胞存活率为25.65±3.9，其明显比PHE+2DG组合的细胞存活率54.67±4.6(P<0.0001)低2.1倍。
图4A示出了用0.2mM的PHE、1mM的2DG和1mM的IP6单独和组合处理的乳腺癌(MDA-MB-231)细胞系的细胞存活率。组合处理制剂的存活率明显低于包括对照在内的单一处理(P<0.0001)的存活率。在组合处理组之间进行比较，PHE+2DG+IP6组合的细胞存活率为20.76±4.2，其明显比PHE+2DG组合的细胞存活率48.54±4.5(P<0.0001)低2.3倍。
图4B示出了用0.3mM的PHE、1mM的2DG和1mM的IP6单独和组合处理的前列腺癌(PC-3)细胞系的细胞存活率。组合处理制剂的存活率明显低于包括对照在内的单一处理(P<0.0001)的存活率。在组合处理组之间进行比较，PHE+2DG+IP6组合的细胞存活率为20.77±4.3，其明显比PHE+2DG组合的细胞存活率59.66±4.6(P<0.0001)低2.9倍。
图4C示出了用0.4mM的PHE、0.5mM的2DG和1mM的IP6单独和组合处理的卵巢癌(SK-OV-3)细胞系的细胞存活率。组合处理制剂的存活率明显低于包括对照在内的单一处理(P<0.0001)的存活率。在组合处理组之间进行比较，PHE+2DG+IP6组合的细胞存活率为20.44±4.2，其明显比PHE+2DG组合的细胞存活率60.54±5.1(P<0.0001)低3.0倍。
图4D示出了用0.4mM的PHE、1mM的2DG和1mM的IP6单独和组合处理的膀胱癌(T24)细胞系的细胞存活率。组合处理制剂的存活率明显低于包括对照在内的单一处理(P<0.0001)的存活率。在组合处理组之间进行比较，PHE+2DG+IP6组合的细胞存活率为21.45±4.2，其明显比PHE+2DG组合的细胞存活率58.70±4.5(P<0.0001)低2.7倍。
图4E示出了用0.2mM的PHE、0.4mM的2DG和2mM的IP6单独和组合处理的胶质母细胞瘤(U-87MG)细胞系的细胞存活率。组合处理制剂的存活率明显低于包括对照在内的单一处理(P<0.0001)的存活率。在组合处理组之间进行比较，PHE+2DG+IP6组合的细胞存活率为15.76±4.2，其明显比PHE+2DG组合的细胞存活率54.32±4.8(P<0.0001)低3.4倍。
图4F示出了用0.2mM的PHE、0.7mM的2DG和1mM的IP6单独和组合处理的骨肉瘤(Saos-2)细胞系的细胞存活率。组合处理制剂的存活率明显低于包括对照在内的单一处理(P<0.0001)的存活率。在组合处理组之间进行比较，PHE+2DG+IP6组合的细胞存活率为22.76±4.2，其明显比PHE+2DG组合的细胞存活率61.93±4.7(P<0.0001)低2.7倍。
这些结果证实了PHE、2DG和IP6的三重复合制剂比单一或双重复合制剂具有更好的癌细胞增殖抑制效果。
实施例2：MET、2DG和IP6的复合制剂对正常细胞的影响
图5是为了观察MET、2DG和IP6的复合制剂对正常细胞的影响，用三种组合制剂处理作为肿瘤细胞的前列腺癌(PC-3)细胞系、结肠癌(DLD-1)细胞系和肺癌(A549)细胞系以及作为非肿瘤细胞的前列腺(PZ-HPV-7)细胞系、结肠(CCD-18Co)细胞系和肺(MRC5)细胞系48小时后，通过MTT检测法检测细胞毒性的图。
结果，在用5mM的MET、1mM的2DG和1mM的IP6的复合制剂处理的PC-3和PZ-HPV-7细胞系中，作为肿瘤细胞的PC-3细胞系的细胞存活率显著降低，而作为非肿瘤细胞的PZ-HPV-7细胞系的细胞存活率不受影响(P<0.0001)。
结果，在用5mM的MET、0.4mM的2DG和1mM的IP6的复合制剂处理的DLD-1细胞系和CCD-18C0细胞系中，作为肿瘤细胞的DLD-1细胞系的细胞存活率显著降低，而作为非肿瘤细胞的CCD-18C0细胞系的细胞存活率不受影响(P<0.0001)。
结果，在用4mM的MET、1mM的2DG和1mM的IP6的复合制剂处理的A549细胞系和MRC5细胞系中，作为肿瘤细胞的A549细胞系的细胞存活率显著降低，而作为非肿瘤细胞的MRC5细胞系的细胞存活率不受影响(P<0.0001)。
三种组合制剂处理的每种非肿瘤细胞的凋亡显示出不同于肿瘤细胞的模式，并且三种组合制剂被证实是体内安全的药物。
实施例3：通过MET、2DG和IP6的单一和复合制剂处理的4T1细胞的细胞存活率和蛋 白质表达
活细胞的代谢利用ATP和ADP作为能量来源，并产生AMP。AMP激活的蛋白激酶(AMPK)是一种丝氨酸/苏氨酸激酶，被称为脂质和葡萄糖代谢的调节剂，并且在眼科糖尿病中起着重要的调节作用。AMPK被AMP激活以抑制ATP的功能，其中AMP在细胞能量消耗时增加，并通过诱导分解代谢在维持体内平衡中起关键作用。AMPK激活抑制癌细胞的增殖，并抑制乙酰辅酶A羧化酶(ACC)(一种在脂肪代谢方面诱导脂肪酸合成的酶)。
图6A示出了用5mM MET、2mM 2DG和1mM IP6单独和组合处理源于小鼠的乳腺癌(4T1)细胞系的细胞存活率。组合处理制剂的存活率明显低于包括对照在内的单一处理(P<0.0001)的存活率。在组合处理组中进行比较，(MET+2DG+IP6)组的细胞存活率为23.04±4.0，其明显比(MET+2DG)组的细胞存活率50.03±4.0(P<0.0001)低2.2倍。
在图6B和6C中，与(MET+2DG)组相比，(MET+2DG+IP6)组的AMPK被显著激活(P<0.0001)，并且ACC的磷酸化降低(P<0.05)。
实施例4.MET、2DG和IP6的单一和复合制剂对4T1细胞的ATP合成抑制
ATP(三磷酸腺苷)是生物体的一种能量来源，并且当细胞内ATP合成受到抑制时，能量代谢活性降低。在实施例3的源自小鼠的乳腺癌细胞系4T1中证实了MET、2DG和IP6的ATP合成抑制作用。
4T1的每个细胞(103-104个细胞)在60mm培养皿中培养24小时，并用4mM的MET、1mM的2DG和1mM的IP6单独和组合处理，并进一步培养48小时。此后，收集细胞并计数，在100mL含有10体积％FBS的RPMI培养液中稀释，并转移到96孔板的每个孔中。将100mL PromegaATP检测试剂盒(美国北卡罗来纳州达勒姆Promega公司，G7572)的检测缓冲液(rL/L试剂+重建缓冲液)添加到含有细胞的孔中，并在560nm处测量荧光发射。结果如图7所示。
如图7所示，测试结果表明，在用于测试的4T1细胞系中的单一和组合处理中，ATP合成在组合处理中受到抑制，而在单独处理中未受到抑制(P<0.0001)。与MET+2DG组(P<0.05)相比，MET+2DG+IP6组显著抑制ATP合成。结果，可以看出MET+2DG+IP6组的复合制剂最有效地降低了癌细胞中的能量水平。
实施例5.MET、2DG和IP6的单一和复合制剂对肿瘤体积变化的影响
当肿瘤组织的大小为约100mm3时，对测试组进行分类并开始给予测试物质，并且从给予测试物质的开始日期起每隔3天测量肿瘤体积。测试的结果如图8所示，从给予测试物质的第3天起，与对照组相比，单一治疗组和组合治疗组的肿瘤体积减少。在给予测试物质的第18天，与肿瘤体积为1486.8±67.0mm3的对照组相比，单一给药组(MET组为1400.5±58.6mm3，2DG组为1350.3±55.2mm3，IP6组为1108.5±66.3mm3，Ins组为1190.1±67.3mm3)的肿瘤体积略有减少，但无显著性差异。而MET+2DG组为820.1±67.0mm3，显示出高于对照组和单一给药组的显著性差异(P<0.0001)。复合制剂中的肿瘤体积(MET+2DG+IP6组为515.02±54.9mm3，MET+2DG+IP6+Ins组为350.03±33.0mm3)显示出高于MET+2DG组的显著性差异(P<0.0001)。与MET+2DG+IP6+Ins组相比，MET+2DG+IP6组和MET+2DG+Ins组显示出了显著性差异(P<0.05)，MET+2DG+IP6+Ins组具有最高的降低率和较高的肿瘤生长抑制作用(图8)。
实施例6.MET、2DG和IP6的单一和复合制剂对肿瘤重量的影响
在给予测试物质的第19天，通过处死测试动物提取肿瘤，测量肿瘤的重量并示于图9。对照组的肿瘤重量为1.244±0.22g，MET组的肿瘤重量为1.134±0.15g，2DG组的肿瘤重量为1.092±0.18g，IP6组的肿瘤重量为0.874±0.18g，Ins组的肿瘤重量为0.904±0.20g，但复合制剂显著降低了肿瘤重量，MET+2DG组为0.621±0.14g，IP6+Ins组为0.599±0.12g。此外，MET+2DG+IP6组的0.342±0.11g和MET+2DG+IP6+Ins组的0.203±0.06g显示出高于对照组和单一给药的显著性差异(P<0.0001)，并且与作为双复合制剂的MET+2DG组相比，显示出显著性差异(P<0.01)。与MET+2DG+IP6组和MET+2DG+IP6+Ins组相比也有显著性差异(P<0.05)，总体而言，MET+2DG+IP6+Ins组显示出肿瘤尺寸的最大减小率(图9)。
实施例7.对测试动物体重的影响
在测试期间，每六天测量一次动物的体重。在给予测试物质的第6天，与对照组相比，单一治疗组和组合治疗组之间的体重减轻没有显著性差异。在测试结束时，在给予测试物质的第18天，在体重减轻方面无显著性差异，与对照组为23.34±0.52g相比，MET+2DG组为22.90±0.41g，MET+2DG+IP6组为22.90±0.47g，MET+2DG+IP6+Ins组为22.90±0.50g(图10)。
实施例8.MET、2DG和IP6的单一和复合制剂对肺转移发生率的影响
在肿瘤动物模型中观察到癌细胞转移至肺。为了检查测试物质对转移的影响，检查了肺转移的发生率并示于图11中。对照组、MET组和2DG组的肺转移发生率为100％(10/10)，但IP6组的肺转移发生率降至90％(9/10)，Ins组降至90％(9/10)，MET+2DG组降至80％(8/10)，IP6+Ins组降至80％(8/10)，MET+2DG+IP6组降至30％(3/10)，MET+2DG+Ins组降至30％(3/10)，MET+2DG+IP6+Ins组降至20％(2/10)。MET+2DG+IP6+Ins组的肺转移发生率在各测试组中表现出最高的抑制作用(图11)。
实施例9.对肿瘤组织的组织形态学变化的影响
图12示出了苏木精&伊红染色后的显微镜观察结果，以检查测试物质对肿瘤组织的组织形态学变化的影响。对照组的肿瘤组织的外周由4T1细胞密集组成，在中心观察到凝固性坏死。与对照组相比，MET+2DG组和IP6+Ins组的肿瘤组织在中心的凝固坏死区域增加，并且在MET+2DG+IP6组、MET+2DG+Ins组和MET+2DG+IP6+Ins组的情况下，正常4T1细胞的比率显著降低(图12)。

Claims (13)

1.一种包含(1)双胍基化合物或其药学上可接受的盐、(2)2-脱氧-D-葡萄糖和(3)肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐、肌醇或它们的混合物的组合物制备治疗癌症的药物的用途，
其中，所述双胍基化合物为二甲双胍或苯乙双胍，所述肌醇为myo-肌醇。
2.根据权利要求1所述的用途，其中所述组合物包含双胍基化合物或其药学上可接受的盐、2-脱氧-D-葡萄糖和肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐。
3.根据权利要求1所述的用途，其中所述组合物包含双胍基化合物或其药学上可接受的盐、2-脱氧-D-葡萄糖和肌醇。
4.根据权利要求1所述的用途，其中所述组合物包含双胍基化合物或其药学上可接受的盐、2-脱氧-D-葡萄糖、肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐和肌醇。
5.根据权利要求2所述的用途，其中所述双胍基化合物为二甲双胍，其中二甲双胍或其药学上可接受的盐：2-脱氧-D-葡萄糖：肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐的重量比为1:0.2:0.5至1:5:20。
6.根据权利要求2所述的用途，其中所述双胍基化合物为苯乙双胍，其中苯乙双胍或其药学上可接受的盐：2-脱氧-D-葡萄糖：肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐的重量比为1:1:1至1:50:200。
7.根据权利要求3所述的用途，其中所述双胍基化合物为二甲双胍，其中二甲双胍或其药学上可接受的盐：2-脱氧-D-葡萄糖：肌醇的重量比为1:0.2:0.5至1:5:20。
8.根据权利要求3所述的用途，其中所述双胍基化合物为苯乙双胍，其中苯乙双胍或其药学上可接受的盐：2-脱氧-D-葡萄糖：肌醇的重量比为1:1:1至1:50:200。
9.根据权利要求4所述的用途，其中所述双胍基化合物为二甲双胍，其中二甲双胍或其药学上可接受的盐：2-脱氧-D-葡萄糖：肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐：肌醇的重量比为1:0.2:0.5:0.5至1:5:20:20。
10.根据权利要求4所述的用途，其中所述双胍基化合物为苯乙双胍，其中苯乙双胍或其药学上可接受的盐：2-脱氧-D-葡萄糖：肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐：肌醇的重量比为1:1:1:1至1:50:200:200。
11.根据权利要求1所述的用途，其中所述癌症为选自以下中的至少一种：肝癌、肺癌、胃癌、胰腺癌、结肠癌、宫颈癌、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、脑癌、骨肉瘤和膀胱癌。
12.一种组合物，包含：(1)双胍基化合物或其药学上可接受的盐、(2)2-脱氧-D-葡萄糖和(3)肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐、肌醇或它们的混合物，
其中，所述双胍基化合物为二甲双胍或苯乙双胍，所述肌醇为myo-肌醇。
13.一种组合物，包含(1)双胍基化合物或其药学上可接受的盐、(2)2-脱氧-D-葡萄糖、(3)肌醇六磷酸或其药学上可接受的盐、肌醇或它们的混合物，和药学上可接受的载体，
其中，所述双胍基化合物为二甲双胍或苯乙双胍，所述肌醇为myo-肌醇。
CN201980085555.1A 2018-11-12 2019-11-11 抗癌组合物 Active CN113271933B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020180138345A KR102141971B1 (ko) 2018-11-12 2018-11-12 항암용 조성물
KR10-2018-0138345 2018-11-12
PCT/KR2019/015251 WO2020101302A1 (en) 2018-11-12 2019-11-11 Anticancer composition

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113271933A CN113271933A (zh) 2021-08-17
CN113271933B true CN113271933B (zh) 2024-01-09

Family

ID=70731181

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201980085555.1A Active CN113271933B (zh) 2018-11-12 2019-11-11 抗癌组合物

Country Status (10)

Country Link
US (1) US20220000810A1 (zh)
EP (1) EP3880190B1 (zh)
JP (1) JP7149025B2 (zh)
KR (1) KR102141971B1 (zh)
CN (1) CN113271933B (zh)
AU (1) AU2019381050B2 (zh)
BR (1) BR112021009169A2 (zh)
CA (1) CA3119713A1 (zh)
SG (1) SG11202104832VA (zh)
WO (1) WO2020101302A1 (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11633416B1 (en) 2020-03-06 2023-04-25 Arcus Biosciences, Inc. Oral formulations of CD73 compounds

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ITRM990248A1 (it) * 1999-04-22 2000-10-22 Sigma Tau Healthscience Spa Composizione comprendente una carnitina ed un inositolfosfato, utile quale integratore dietetico o mediacamento.
CN101612142A (zh) * 2008-06-25 2009-12-30 广州威尔曼新药开发中心有限公司 肌醇衍生物或其盐在制药中的用途
KR20110136753A (ko) * 2010-06-15 2011-12-21 한올바이오파마주식회사 항암 활성을 나타내는 약제학적 조성물
WO2013019058A2 (en) * 2011-08-04 2013-02-07 Hanall Biopharma Co., Ltd. Pharmaceutical composition for inhibiting cancer recurrence or metastasis
WO2014030972A1 (ko) * 2012-08-24 2014-02-27 주식회사 노암 항암용 조성물
WO2016065353A1 (en) * 2014-10-24 2016-04-28 University Of Miami Combination therapy with fenofibrate and 2-deoxyglucose or 2-deoxymannose
CN107106580A (zh) * 2014-10-29 2017-08-29 延世大学校产学协力团 治疗癌症干细胞的组合物
KR20180055423A (ko) * 2016-11-17 2018-05-25 주식회사 하임바이오 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20140235558A1 (en) * 2010-06-15 2014-08-21 Hanall Biopharma Co., Ltd. Pharmaceutical composition having activity of anticancer
KR20160109926A (ko) * 2015-03-13 2016-09-21 연세대학교 산학협력단 암의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물
ITUB20160180A1 (it) * 2016-01-27 2017-07-27 Lo Li Pharma Srl Somministrazione topica/locale di inositolo esafosfato come coadiuvante nei trattamenti antitumorali
KR102018841B1 (ko) * 2017-09-01 2019-09-06 리퓨어생명과학 주식회사 암의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물
KR102127125B1 (ko) * 2018-12-31 2020-06-26 주식회사 노암 면역체크포인트 억제제를 포함하는 항암용 조성물

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ITRM990248A1 (it) * 1999-04-22 2000-10-22 Sigma Tau Healthscience Spa Composizione comprendente una carnitina ed un inositolfosfato, utile quale integratore dietetico o mediacamento.
CN101612142A (zh) * 2008-06-25 2009-12-30 广州威尔曼新药开发中心有限公司 肌醇衍生物或其盐在制药中的用途
KR20110136753A (ko) * 2010-06-15 2011-12-21 한올바이오파마주식회사 항암 활성을 나타내는 약제학적 조성물
WO2013019058A2 (en) * 2011-08-04 2013-02-07 Hanall Biopharma Co., Ltd. Pharmaceutical composition for inhibiting cancer recurrence or metastasis
WO2014030972A1 (ko) * 2012-08-24 2014-02-27 주식회사 노암 항암용 조성물
WO2016065353A1 (en) * 2014-10-24 2016-04-28 University Of Miami Combination therapy with fenofibrate and 2-deoxyglucose or 2-deoxymannose
CN107106580A (zh) * 2014-10-29 2017-08-29 延世大学校产学协力团 治疗癌症干细胞的组合物
KR20180055423A (ko) * 2016-11-17 2018-05-25 주식회사 하임바이오 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
2-脱氧-D-葡萄糖抗肿瘤作用机制及联合应用治疗肿瘤的研究进展;邵霞;王婷;;医学综述(第17期);3374-3378 *
二甲双胍与2-脱氧―葡萄糖抑制三阴性乳腺癌细胞株的研究;王俊丽;李斌琦;王英条;夏炎春;杨峂;;现代实用医学(第06期);772-774 *
六磷酸肌醇激酶(IP6Ks)的生物学功能及其在疾病中的作用;王永荣;刘飞;许元富;;中国细胞生物学学报(第01期);132-138 *
安登魁.《药物分析》.济南出版社,1992,1458-1459. *
肌醇六磷酸及其次级磷酸化形式抗肿瘤的作用;付敏;宋扬;;青岛大学医学院学报(第06期);732-736 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN113271933A (zh) 2021-08-17
JP2022509552A (ja) 2022-01-20
WO2020101302A1 (en) 2020-05-22
EP3880190B1 (en) 2024-04-10
AU2019381050A1 (en) 2021-06-03
SG11202104832VA (en) 2021-06-29
KR20200054710A (ko) 2020-05-20
EP3880190A4 (en) 2022-07-27
AU2019381050B2 (en) 2023-01-19
EP3880190A1 (en) 2021-09-22
EP3880190C0 (en) 2024-04-10
CA3119713A1 (en) 2020-05-22
BR112021009169A2 (pt) 2021-08-17
KR102141971B1 (ko) 2020-08-06
JP7149025B2 (ja) 2022-10-06
US20220000810A1 (en) 2022-01-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10085950B2 (en) Pharmaceutical composition for cancer treatment containing gossypol and phenformin as active ingredients
Hong et al. Wogonin exacerbates the cytotoxic effect of oxaliplatin by inducing nitrosative stress and autophagy in human gastric cancer cells
ES2881928T3 (es) Profármacos de etopósido para su uso en el direccionamiento a las células madre cancerosas
KR101398076B1 (ko) 포스파티딜콜린을 유효성분으로 포함하는 항암제의 독성 감소용 조성물
KR102375288B1 (ko) 대사항암제를 포함하는 항암용 조성물
US20220081482A1 (en) Anticancer compositions comprising immune checkpoint inhibitors
KR101377037B1 (ko) 항암용 조성물
KR101458061B1 (ko) 항암용 조성물
CN113271933B (zh) 抗癌组合物
KR102011105B1 (ko) 고시폴 및 펜포르민을 유효성분으로 포함하는 췌장암 예방 및 치료용 약학적 조성물
TWI849001B (zh) Mcl-1抑制劑及米哚妥林(midostaurin)之組合，其用途及醫藥組合物
RU2789245C2 (ru) Противораковая композиция
US20220304985A1 (en) Combination therapy for proliferative conditions
KR102639036B1 (ko) 베르바민 및 sr 140333을 포함하는 뇌암 치료, 개선 또는 예방용 조성물
KR102639035B1 (ko) 베르바민 및 아프레피탄트를 포함하는 뇌암 치료, 개선 또는 예방용 조성물
KR102714321B1 (ko) 대사항암제를 포함하는 항암용 조성물
KR102655754B1 (ko) Hbc 및 아프레피탄트를 포함하는 뇌암 치료, 개선 또는 예방용 조성물
KR101686411B1 (ko) 피리딘계 유도체를 포함하는 암 예방 또는 치료용 조성물
KR101832351B1 (ko) 신코닌 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 골질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
KR20240038394A (ko) 해당과정 억제제 및 미토콘드리아 기능 억제제를 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 40048076

Country of ref document: HK

GR01 Patent grant
GR01 Patent grant