CN113209085B - 水鬼蕉新碱a在制备抗菌药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于医药技术领域,具体涉及一种从植物水鬼蕉鳞茎分离出的水鬼蕉新碱A在制备抗菌药物中的应用。本发明所涉及的水鬼蕉新碱A的结构式如式(I)所示。所涉及的具体应用是关于水鬼蕉新碱A能够在制备抗细菌、真菌的药物中的应用,水鬼蕉新碱A具有较好的抗细菌、真菌作用,具有开发成为抗菌药物的潜质。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域,具体涉及水鬼蕉新碱A在制备抗菌药物中的应用。
背景技术
水鬼蕉新碱A是从水鬼蕉的鳞茎提取出的新型生物碱,在抗肿瘤和抗炎方面均有突出疗效,如申请号为CN201710354463.1的专利,公开水鬼蕉新碱 A在制备抗肿瘤药物中的应用,如申请号为CN20170354440.0的专利,公开水鬼蕉新碱A在制备抗炎药物中的应用。本发明在已知水鬼蕉新碱A的基础上,进一步探索和开发其药用价值,并通过试验证明水鬼蕉新碱A能有效抑制细菌、真菌的生长。
发明内容
本发明的目的在于提供水鬼蕉新碱A在制备抗菌药物中的应用。
本发明解决上述技术问题的技术方案如下:
水鬼蕉新碱A在制备抗菌药物中的应用,水鬼新碱A的结构式如式(I)所示:
用于制备抗菌药物的水鬼蕉新碱A,由植物水鬼蕉鳞茎分离出。
水鬼蕉新碱A在制备抗细菌药物中的应用,水鬼新碱A的结构式如式(I) 所示:
水鬼蕉新碱A在制备抗真菌药物中的应用,水鬼新碱A的结构式如式(I) 所示:
本发明的有益效果:
本发明表明水鬼蕉新碱A能够有效抑制微生物生长,具有开发成为抗菌药物的潜质,制备水鬼蕉新碱A的原料资源丰富,提取分离技术难度小,溶剂可回收使用,生产成本低。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明,以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
实施例1
抗细菌活性测试:
供试细菌菌株:金黄色葡萄球菌(CMCC(B)26003)、枯草芽孢杆菌(CMCC (B)63534)、大肠埃希菌(CMCC(B)44102)、伤寒沙门氏菌(CMCC(B) 50071)、铜绿假单胞菌(CMCC(B)10104)。
供试细菌菌株的培养:以无菌营养肉汤培养基分别培养上述供试细菌菌株,培养8-12小时,菌液浓度约为1×108cfu/mL。
实验方法
将水鬼蕉新碱A溶解于5μL的DMSO中(DMSO浓度不可超过0.5%v/v),再加入无菌生理盐水,将其配制成1024μg/mL的溶液。利用无菌生理盐水将水鬼蕉新碱A的浓度范围稀释成1024μg/mL到32μg/mL,配制相同浓度范围的盐酸小檗碱作为阳性对照。
利用无菌营养肉汤将供试菌液稀释至浓度为1×106cfu/mL,备用。
在96孔板中加入已经稀释成系列浓度(1024、512、256、128、64、32 μg/mL)的药液,之后在每孔加入100μL菌悬液。分别设置不加菌液的生理盐水以及等量无菌生理盐水和菌液,做为阴性对照1以及阴性对照2。利用盐酸小檗碱做为阳性对照。每组实验重复3次。在37℃恒温培养箱中培养 24h后,以肉眼观察不到细菌生长的最低浓度的水鬼蕉新碱A即为MIC(最小抑菌浓度)。
在MIC实验基础上,从肉眼观察无菌生长的各小孔中吸取10μL溶液,滴于营养琼脂培养基上,每组实验重复3次,37℃恒温培养箱中培养24h 后,以营养琼脂平板内菌落个数少于4的最小药物浓度做为MBC(最小杀菌浓度)。
实验结果
水鬼蕉新碱A及阳性对照药物盐酸小檗碱对5种标准细菌菌株的MIC和 MBC值如表1所示,从表中结果可知水鬼蕉新碱A对选取的5种细菌中,4种具有抑制的作用,且其对金黄色葡萄球菌抑制效果较好,MIC为128μg/mL、 MBC为256μg/mL,效果均优于阳性对照药盐酸小檗碱。在测试浓度范围内,水鬼蕉新碱A及盐酸小檗碱对铜绿假单胞菌的MIC与MBC值均未检测到。该实验结果表明,水鬼蕉新碱A具有较好的抗菌作用,具有开发成为抗菌药物的潜质。
表1水鬼蕉新碱A及阳性对照药物盐酸小檗碱对 5种供试细菌的MIC和MBC值(μg/mL)
表中“—”代表在测试浓度范围内,未检测到相应的MIC及MBC值。
实施例2
抗植物病原真菌活性测试:
供试植物病原真菌菌株:选取4种植物病原真菌,包括蓝莓溃疡病菌(Botryosphaeria dothidea)、云杉立枯病菌(Fusarium verticillioides)、杨树溃疡病菌(Dothiorella gregaria)、杨树烂皮病菌(Cytospora chrysosperma)。
供试植物病原真菌活化:将冰箱中保藏的植物病原真菌菌种接种到新鲜的马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)上,于28℃恒温培养箱中培养5-7天,进行活化。
实验方法
将水鬼蕉新碱A溶解于5μL的DMSO中(DMSO浓度不可超过0.5%v/v),再加入无菌生理盐水,将其配制成2mg/mL的溶液。经0.22μm无菌滤膜过滤,得到无菌滤液。
挑取已活化的供试植物病原真菌,接种于5mL无菌生理盐水中,涡旋振荡混匀,制成菌悬液,其浓度为1×105cfu/mL,备用。
在无菌操作条件下,吸取100μL菌悬液,均匀涂布于PDA固体培养基上,等距离放置无菌的牛津杯,并吸取无菌药液200μL加入牛津杯中,以 DMSO溶液为阴性对照,每种处理设3次重复,于28℃恒温培养箱中培养3-7 天,并测量其抑菌圈直径。
实验结果
由表2可见水鬼蕉新碱A具有抑制植物病原菌的活性,可应用在植物病原菌的防治中。
表2水鬼蕉新碱A对4种植物致病真菌的抑菌圈直径(mm)(n=3)
尽管本发明的实施方案已公开如上,但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用,它完全可以被适用于各种适合本发明的领域,对于熟悉本领域的人员而言,可容易地实现另外的修改,因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下,本发明并不限于特定的细节。
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