CN113207768B - 一种培育企鹅珍珠贝游离珍珠的新方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种培育企鹅珍珠贝游离珍珠的新方法，其包括如下步骤：(1)育珠贝的选择、小片贝的选择、珠核选择；(2)育珠贝的开口处理；(3)细胞小片的制作；(4)植核；(5)育珠贝的休养与养殖，其中植核为：将放置了栓口器的育珠贝固定在植核器上，剪去部分或全部的足丝，同时剪断部分或全部的缩足肌，在足和内脏团分界处切一个小口作为送核口，用通道针将珠核送到预定的核位，再植入细胞小片，先进行右袋的植核，再进行左袋的植核，并使细胞小片的光滑面紧贴珠核。本发明的植核方式可以显著的增加植核母贝的留核率、成活率、成珠率、优珠率，实现企鹅珍珠贝大型游离珍珠的产业化培育。
Description
技术领域
本发明涉及海水珍珠培育技术领域，具体涉及一种培育企鹅珍珠贝游离珍珠的新方法。
背景技术
企鹅珍珠贝个体大，生长速度快，珍珠质分泌速度快，环境适应能力强，珍珠层色彩丰富，适合培育高档大型珍珠。由于其足丝粗大，挤占了核位空间，不利于插核培育游离珠，目前主要用作培育大型附壳珍珠的母贝。但游离珠的价值远远高于附壳珠，尤其是大型游离珍珠具有更高的价值。企鹅珍珠贝壳内表面珍珠层颜色丰富，靠近腹缘部分为古铜色，具有虹彩光泽，目前国内外均有研究人员对该贝用于培育大型游离珠进行研究，但尚未有产业化的应用报道。我国目前初步掌握了企鹅珍珠贝游离珠培育技术，但仍存在育珠贝插核施术后死亡率高、吐核率高、优珠率低等问题，严重制约利用企鹅珍珠贝培育大型游离珠的规模化生产。
企鹅珍珠贝培育游离珍珠主要有以下几个方面的技术难点：(1)企鹅珍珠贝足丝粗大，挤压其他部位的组织器官，可容纳珠核的空间小；(2)企鹅珍珠贝闭壳肌强壮有力，容易将植入的珠核挤出，导致术后留核率显著降低；(3)企鹅珍珠贝的缩足肌同样很发达，其反复伸缩会将植入的珠核挤出核位；(4)企鹅珍珠贝贝壳呈长条形，闭合部分较突出，开壳后离内脏团较远，植核通道难于寻找；(5)企鹅珍珠贝围绕内脏团的结缔组织较为单薄，大规格珠核植入时容易损伤通道附近的组织，导致育珠贝出现感染，术后死亡率升高等。
发明内容
本发明克服了上述技术难点中导致的育珠贝留核率低、死亡率高的技术问题，提供一种培育企鹅珍珠贝游离珍珠的新方法。
为解决上述问题，本发明采取如下技术方案：
一种培育企鹅珍珠贝游离珍珠的新方法，包括如下步骤：(1)育珠贝的选择、小片贝的选择、珠核选择；(2)育珠贝的开口处理；(3)细胞小片的制作；(4)植核；(5)育珠贝的休养与养殖；
所述(4)植核为：将放置了栓口器的育珠贝固定在植核器上，根据足丝大小剪去部分或全部的足丝，同时根据缩足肌的大小剪断部分或全部的缩足肌，在足和内脏团分界处切一个小口作为送核口，用通道针将珠核送到预定的核位，再植入细胞小片，先进行右袋的植核，再进行左袋的植核，并使细胞小片的光滑面紧贴珠核。
其中，所述(2)育珠贝的开口处理为：将育珠贝清洗干净后用开壳器撑开贝壳腹面中央部分，插入栓口器，放置了栓口器的育珠贝铰合部向下排列，使栓口器统一向上，静置待用。
其中，所述植核在每年的冬季进行植核，避开繁殖季节。
其中，所述送核口的切割方法为：采用送小片的弯头针插入足丝孔，并轻压，打开视野，在足和内脏团分界处交接的皱褶上进行横切，切出的送核口等于或略小于珠核直径，为保证尽量切小口，降低术后感染风险，切口可以采取弧形，以实现小创口的情况下也可以植入较大珠核的目标。
其中，所述育珠贝的选择为：选择贝龄1.5～2.0龄，壳高11.0～13.0cm的企鹅珍珠贝作为育珠贝。
其中，所述小片贝的选择为：选择1.0～1.5龄的企鹅珍珠贝作为小片贝，小片贝壳高10.0～12.0cm。
其中，所述珠核选择：选择由淡水丽蚌贝壳磨制的珠核，核形为正圆形，大珠核规格为直径7.0～8.0mm，小珠核规格为直径4.0～5.0mm。
其中，所述育珠贝的休养与养殖方法为：植核手术后，将育珠贝置于近岸养殖排架上休养1～2个月；休养期结束后，将装育珠贝的塑料筐移到水深3m以上的水域继续养殖，育珠期控制为1.0～2.0年。
其中，细胞小片的制作：用解剖刀将小片贝的闭壳肌从中间切断，将贝体打开，用灭菌海水冲洗贝体内部黏液及其他附着物，再用切片刀将唇瓣下方至肛门之间的外套膜切下，切除外套膜缘触手，以色线为中心按外侧占30％、内侧占70％的比例切成宽度为2.0～2.5mm的条状物，将所述条状物净化后，切成正方形的细胞小片。
其中，所述(4)植核中，所述足丝的剪除量为60～80％或更多(少)。
其中，所述(4)植核为：所述缩足肌的剪除量为40～50％或更多(少)。
本发明与现有技术相比较具有以下有益效果：
(1)本发明的企鹅珍珠贝培育游离珍珠的新方法通过切断企鹅珍珠贝部分足丝，以增加插核施术的操作空间，提升植核操作的视野，同时剪断40～50％的缩足肌，降低缩足肌伸缩对珠核的挤压强度，以上两种操作可以显著的增加植核母贝的留珠率、成活率、成珠率。本发明在左袋核位植入略大的珠核，在右袋核位平行同向植入略小的珠核，植入双珠核便于平衡闭壳肌张力以及缩足肌伸缩对多珠核部位的挤压，提高留核率和优珠率。本发明提供的企鹅珍珠贝培育游离珍珠的新方法可以进行规模化的珍珠植核、养殖。
(2)本发明中选择年龄较小但个体相对较大的母贝做育珠贝，低龄贝的珍珠质分泌能力强，而较大个体可容纳相对较大的珠核，达到在相对较短的时间内培育较大直径游离珠的目的，切实提高企鹅珍珠贝育珠效益，实现企鹅珍珠贝大型游离珠产业化培育。
具体实施方式
下面结合实施例和试验对本发明作进一步说明。
实施例1
一种培育企鹅珍珠贝游离珍珠的新方法，包括如下步骤：
(1)育珠贝的选择：选择双壳完整、壳面光洁附着物少、角质层无分层脱落现象、无病害的健康企鹅珍珠贝作为育珠贝；同时，选择贝龄2.0龄，壳高13.0cm的企鹅珍珠贝作为育珠贝；
小片贝的选择：选择正处于快速生长期的1.5龄的企鹅珍珠贝作为小片贝，小片贝同样需要选择活力好，健康无缺损，壳内面珍珠层为银白色或虹彩色；小片贝壳高12.0cm；
珠核选择：选择由淡水丽蚌贝壳磨制的珠核，核形为正圆形，大珠核规格为直径8.0mm，小珠核规格为直径5.0mm；珠核使用前须经高锰酸钾浸泡消毒处理；
(2)育珠贝的开口处理：将选择用作育珠贝的母贝清洗干净，去掉壳面的附着物，用开壳器撑开贝壳腹面中央部分，插入已消毒的统一规格的塑料(PVC材质)栓口器，将放置了栓口器的育珠贝整齐的排放于休养筐中静置1.0h待用，放置了栓口器的育珠贝铰合部向下排列，使栓口器统一向上；休养筐采用规格为55◇40◇25cm的塑料筐；
(3)细胞小片的制作：用解剖刀将小片贝的闭壳肌从中间切断，将贝体打开，用灭菌海水冲洗贝体内部黏液及其他附着物，再用切片刀将唇瓣下方至肛门之间的外套膜切下，切除外套膜缘触手，以色线为中心按外侧占30％、内侧占70％的比例分别切成宽度为2.0mm和宽度为2.5mm的条状物，将所述条状物净化后，切成正方形的细胞小片；使用前用2％的汞溴红水溶液进行消毒和染色；其中较大的珠核匹配使用2.5mm的细胞小片，较小的珠核匹配使用2.0mm的细胞小片；其中净化所用的净化液由20.0g/L丙酸钙+0.02g/L强力霉素组成；强力霉素片是一种药物，本实施例中采用“徽千方”品牌，兽药产品批准文号：兽药字120156011、货号：QiangLMS。
(4)植核：在每年的冬季进行植核，避开繁殖季节；植核时，检查放置了栓口器的育珠贝，挑选活力正常的作为手术植核贝，将装了栓口器的育珠贝固定在植核器上，剪去80％的足丝，同时剪断50％的缩足肌；在足和内脏团分界处切一个小口作为送核口，具体的采用送小片的弯头针插入足丝孔，并轻压，打开视野，在足和内脏团分界处交接的皱褶上进行横切，切出的送核口等于或略小于珠核直径，为保证尽量切小口，降低术后感染风险，切口可以采取弧形，以实现小创口的情况下也可以植入较大珠核的目标。再用通道针将珠核送到预定的核位，再用弯头针将细胞小片植入珠核侧面，先进行右袋核植(珠核直径5.0mm)，再进行左袋核植(珠核直径8.0mm)，并使细胞小片的光滑面紧贴珠核；
(5)育珠贝的休养与养殖：植核手术后，按每筐30只育珠贝将其装入塑料筐中，置于近岸养殖排架上休养2个月；休养期间依据潮水的涨落约10d检查1次育珠贝的脱核情况以及死亡情况。休养期结束后，将装育珠贝的塑料筐移到水深3m以上的水域继续养殖，育珠期控制为2.0年。大约每月选择低潮时冲洗一次育珠贝的筐，以便于去掉附着的淤泥、附着生物等，同时检查育珠贝的生长情况以及脱核情况。
实施例2
一种培育企鹅珍珠贝游离珍珠的新方法，包括如下步骤：
(1)育珠贝的选择：选择双壳完整、壳面光洁附着物少、角质层无分层脱落现象、无病害的健康企鹅珍珠贝作为育珠贝；同时，选择贝龄1.5龄，壳高11.0cm的企鹅珍珠贝作为育珠贝；
小片贝的选择：选择正处于快速生长期的1.0龄的企鹅珍珠贝作为小片贝，小片贝同样需要选择活力好，健康无缺损，壳内面珍珠层为银白色或虹彩色；小片贝壳高10.0cm；
珠核选择：选择由淡水丽蚌贝壳磨制的珠核，核形为正圆形，大珠核规格为直径7.0mm，小珠核规格为直径4.0mm；珠核使用前须经高锰酸钾浸泡消毒处理；
(2)育珠贝的开口处理：将选择用作育珠贝的母贝清洗干净，去掉壳面的附着物，用开壳器撑开贝壳腹面中央部分，插入已消毒的统一规格的塑料(PVC材质)栓口器，将放置了栓口器的育珠贝整齐的排放于休养筐中静置0.5h待用，放置了栓口器的育珠贝铰合部向下排列，使栓口器统一向上；休养筐采用规格为55◇40◇25cm的塑料筐；
(3)细胞小片的制作：用解剖刀将小片贝的闭壳肌从中间切断，将贝体打开，用灭菌海水冲洗贝体内部黏液及其他附着物，再用切片刀将唇瓣下方至肛门之间的外套膜切下，切除外套膜缘触手，以色线为中心按外侧占30％、内侧占70％的比例分别切成宽度为2.0mm和宽度为2.5mm的条状物，将所述条状物净化后，切成正方形的细胞小片；使用前用2％的汞溴红水溶液进行消毒和染色；其中较大的珠核匹配使用2.5mm的细胞小片，较小的珠核匹配使用2.0mm的细胞小片；其中净化所用的净化液由20.0g/L丙酸钙+0.02g/L强力霉素组成；强力霉素片是一种药物，本实施例中采用“徽千方”品牌，兽药产品批准文号：兽药字120156011、货号：QiangLMS。
(4)植核：在每年的冬季进行植核，避开繁殖季节；植核时，检查放置了栓口器的育珠贝，挑选活力正常的作为手术植核贝，将装了栓口器的育珠贝固定在植核器上，剪去60％的足丝，同时剪断40％的缩足肌；在足和内脏团分界处切一个小口作为送核口，具体的采用送小片的弯头针插入足丝孔，并轻压，打开视野，在足和内脏团分界处交接的皱褶上进行横切，切出的送核口等于或略小于珠核直径，为保证尽量切小口，降低术后感染风险，切口可以采取弧形，以实现小创口的情况下也可以植入较大珠核的目标。再用通道针将珠核送到预定的核位，再用弯头针将细胞小片植入珠核侧面，先进行右袋核植(珠核直径4.0mm)，再进行左袋核植(珠核直径7.0mm)，并使细胞小片的光滑面紧贴珠核；
(5)育珠贝的休养与养殖：植核手术后，按每筐20只育珠贝将其装入塑料筐中，置于近岸养殖排架上休养1个月；休养期间依据潮水的涨落约10d检查1次育珠贝的脱核情况以及死亡情况。休养期结束后，将装育珠贝的塑料筐移到水深3m以上的水域继续养殖，育珠期控制为1.0年。大约每月选择低潮时冲洗一次育珠贝的筐，以便于去掉附着的淤泥、附着生物等，同时检查育珠贝的生长情况以及脱核情况。
实施例3
一种培育企鹅珍珠贝游离珍珠的新方法，包括如下步骤：
(1)育珠贝的选择：选择双壳完整、壳面光洁附着物少、角质层无分层脱落现象、无病害的健康企鹅珍珠贝作为育珠贝；同时，选择贝龄1.8龄，壳高12.0cm的企鹅珍珠贝作为育珠贝；
小片贝的选择：选择正处于快速生长期的1.2龄的企鹅珍珠贝作为小片贝，小片贝同样需要选择活力好，健康无缺损，壳内面珍珠层为银白色或虹彩色；小片贝壳高11.0cm；
珠核选择：选择由淡水丽蚌贝壳磨制的珠核，核形为正圆形，大珠核规格为直径7.5mm，小珠核规格为直径4.5mm；珠核使用前须经高锰酸钾浸泡消毒处理；
(2)育珠贝的开口处理：将选择用作育珠贝的母贝清洗干净，去掉壳面的附着物，用开壳器撑开贝壳腹面中央部分，插入已消毒的统一规格的塑料(PVC材质)栓口器，将放置了栓口器的育珠贝整齐的排放于休养筐中静置0.8h待用，放置了栓口器的育珠贝铰合部向下排列，使栓口器统一向上；休养筐采用规格为55◇40◇25cm的塑料筐；
(3)细胞小片的制作：用解剖刀将小片贝的闭壳肌从中间切断，将贝体打开，用灭菌海水冲洗贝体内部黏液及其他附着物，再用切片刀将唇瓣下方至肛门之间的外套膜切下，切除外套膜缘触手，以色线为中心按外侧占30％、内侧占70％的比例分别切成宽度为2.0mm和宽度为2.5mm的条状物，将所述条状物净化后，切成正方形的细胞小片；使用前用2％的汞溴红水溶液进行消毒和染色；其中较大的珠核匹配使用2.5mm的细胞小片，较小的珠核匹配使用2.0mm的细胞小片；其中净化所用的净化液由20.0g/L丙酸钙+0.02g/L强力霉素组成；强力霉素片是一种药物，本实施例中采用“徽千方”品牌，兽药产品批准文号：兽药字120156011、货号：QiangLMS。
(4)植核：在每年的冬季进行植核，避开繁殖季节；植核时，检查放置了栓口器的育珠贝，挑选活力正常的作为手术植核贝，将放置了栓口器的育珠贝固定在植核器上，剪去70％的足丝，同时剪断45％的缩足肌；在足和内脏团分界处切一个小口作为送核口，具体的采用送小片的弯头针插入足丝孔，并轻压，打开视野，在足和内脏团分界处交接的皱褶上进行横切，切出的送核口等于或略小于珠核直径，为保证尽量切小口，降低术后感染风险，切口可以采取弧形，以实现小创口的情况下也可以植入较大珠核的目标。再用通道针将珠核送到预定的核位，再用弯头针将细胞小片植入珠核侧面，先进行右袋核植(珠核直径4.5mm)，再进左行袋核植(珠核直径7.5mm)，并使细胞小片的光滑面紧贴珠核；
(5)育珠贝的休养与养殖：植核手术后，按每筐25只育珠贝将其装入塑料筐中，置于近岸养殖排架上休养2个月；休养期间依据潮水的涨落约10d检查1次育珠贝的脱核情况以及死亡情况。休养期结束后，将装育珠贝的塑料筐移到水深3m以上的水域继续养殖，育珠期控制为1.5年。大约每月选择低潮时冲洗一次育珠贝的筐，以便于去掉附着的淤泥、附着生物等，同时检查育珠贝的生长情况以及脱核情况。
对照组1：
对照组1的一种企鹅珍珠贝培育游离珍珠的方法与实施例1相同，区别在于，核植方法采用改进前的技术，即：植核前，先将放置栓口器的育珠贝，右壳朝上，左壳朝下，置于插核台上，用平板针拨开育珠贝右核边的鳃片，使其露出软体部，同时用消毒的酒精棉花擦去软体部位和壳口附近的污泥和黏液，然后在足基部的软体部用切口刀切开一个切口，大小以刚好能送进珠核，深度以刚好切开表皮为准，接着将通道针插进切口，沿着左袋方向拨通送核道，左手拿平板针压住育珠贝的足，右手拿送核器将中等大小的珠核送到左袋中去(植入珠核直径为6.0mm)，送核后，立即用小片针把一块细胞小片送贴于核面上。将细胞小片的光滑面紧贴珠核。植核完成后取出木质栓口器。
实验数据：
依照实施例1～实施例3以及对照组1的企鹅珍珠贝培育游离珍珠的方法操作，每种方法每平行组培育300个育珠贝，每种方法设置3个平行组别，统计培育期间的留核率和死亡率，以及培育完成后成珠率和优珠率，结果如下表1：
其中：
30d死亡率＝培育30d期间死亡贝数量/植核贝数量；
60d死亡率＝培育60d期间死亡贝数量/植核贝数量；
30d留核率＝培育30d期间留核贝数量/植核贝数量；
成珠率＝收获商品珍珠数量/成活贝中收获的珍珠及珠核数量；
优质珠率＝优质珍珠数/收获珍珠数。
优质珍珠衡量依据：珍珠形状为圆形、正圆形；珍珠反射光明亮、锐利、均匀；表面光滑细腻、无肉眼可见的褶纹和斑点；珍珠层厚度≥350mm。
试验结果及分析：实验结果利用SPSS25.0进行统计和分析，采用单因素方差(One-Way ANOVA)分析，Duncan′S多重比较，以P＜0.05作为差异显著水平，所有数据以平均值±标准差(Mean±SD)表示。
表1不同处理下企鹅珍珠贝的育珠效果比较
注：同一列平均数后不同的大写字母表示差异显著(P＜0.05)，n＝3。
由表1数据可知，本申请实施例1～实施例3的留核率显著高于对照组1，30d和60d的死亡率显著低于对照组1，成珠率和优珠率显著高于对照组1，说明本发明的一种培育企鹅珍珠贝游离珍珠的方法能显著提高留核率、成活率、成珠率以及优珠率，具有突出的技术效果。
上述说明是针对本发明较佳可行实施例的详细说明，但实施例并非用以限定本发明的专利申请范围，凡本发明所提示的技术精神下所完成的同等变化或修饰变更，均应属于本发明所涵盖专利范围。
Claims (8)
1.一种培育企鹅珍珠贝游离珍珠的新方法，包括如下步骤：(1)育珠贝的选择、小片贝的选择、珠核选择；(2)育珠贝的开口处理；(3)细胞小片的制作；(4)植核；(5)育珠贝的休养与养殖，其特征在于：
步骤(4)所述核植为：将放置了栓口器的育珠贝固定在植核器上，剪去60～80％的足丝，同时剪断40～50％的缩足肌，在足和内脏团分界处切一个小口作为送核口，用通道针将珠核送到预定的核位，再植入细胞小片，先进行右袋的植核，再进行左袋的植核，并使细胞小片的光滑面紧贴珠核。
2.如权利要求1所述的一种培育企鹅珍珠贝游离珍珠的新方法，其特征在于，所述(2)育珠贝的开口处理为：将育珠贝清洗干净后用开壳器撑开贝壳腹面中央部分，插入栓口器，放置了栓口器的育珠贝铰合部向下排列，使栓口器统一向上，静置待用。
3.如权利要求1所述的一种培育企鹅珍珠贝游离珍珠的新方法，其特征在于，所述送核口的切割方法为：采用送小片的弯头针插入足丝孔，并轻压，打开视野，在足和内脏团分界处交接的皱褶上进行横切，切出的送核口等于或小于珠核直径，切口为弧形。
4.如权利要求1所述的一种培育企鹅珍珠贝游离珍珠的新方法，其特征在于，所述育珠贝的选择为：选择贝龄1.5～2.0龄，壳高11.0～13.0cm的企鹅珍珠贝作为育珠贝。
5.如权利要求1所述的一种培育企鹅珍珠贝游离珍珠的新方法，其特征在于，所述小片贝的选择为：选择1.0～1.5龄的企鹅珍珠贝作为小片贝，小片贝壳高10.0～12.0cm。
6.如权利要求1所述的一种培育企鹅珍珠贝游离珍珠的新方法，其特征在于，所述珠核选择：选择由淡水丽蚌贝壳磨制的珠核，核形为正圆形，大珠核规格为直径7.0～8.0mm，小珠核规格为直径4.0～5.0mm。
7.如权利要求1所述的一种培育企鹅珍珠贝游离珍珠的新方法，其特征在于，所述育珠贝的休养与养殖方法为：植核手术后，将育珠贝置于近岸养殖排架上休养1个月；休养期结束后，将装育珠贝移到水深3m以上的水域继续养殖，育珠期为1.0～2.0年。
8.如权利要求1所述的一种培育企鹅珍珠贝游离珍珠的新方法，其特征在于，细胞小片的制作：用解剖刀将小片贝的闭壳肌从中间切断，将贝体打开，用灭菌海水冲洗贝体内部黏液及其他附着物，再用切片刀将唇瓣下方至肛门之间的外套膜切下，切除外套膜缘触手，以色线为中心按外侧占30％、内侧占70％的比例切成宽度为2.0～2.5mm的条状物，将所述条状物净化后，切成正方形的细胞小片。
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