CN113166122A

CN113166122A - 半乳糖凝集素-3的小分子抑制剂

Info

Publication number: CN113166122A
Application number: CN201980080814.1A
Authority: CN
Inventors: J·斯威多斯基; B·R·贝诺; D·S·尹; A·雷盖罗-伦
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 2018-12-06
Filing date: 2019-12-04
Publication date: 2021-07-23
Also published as: JP2022511094A; WO2020117883A1; EP3891144A1; KR20210100139A; US20220009913A1

Abstract

本公开涉及抑制Gal‑3的式I的化合物，并且包括药学上可接受的盐、包含这类化合物的组合物以及使用和制备这类化合物和组合物的方法。

Description

半乳糖凝集素-3的小分子抑制剂

相关申请的交叉引用

本申请要求了2018年12月6日提交的美国临时申请No.62/776,282的优先权权益；通过引用将其内容整体合并入本文。

发明背景

半乳糖凝集素-3(galectin-3,Gal-3)是约30KDa的结合β-半乳糖苷的凝集素(Cell 76:597-598)，其参与炎性和纤维化过程的调节(Immunological Reviews 230:160-171)。在不受控制的炎症和促纤维化条件下，Gal-3促进成纤维细胞增殖和转化并介导胶原蛋白的产生(Circulation 110:3121-3128)。

Gal-3定位在许多细胞位置，例如细胞质、细胞核和细胞表面。Gal-3还被多种细胞类型、主要是巨噬细胞和单核细胞分泌到血流中(J Pharmacol Exp Ther351:336–343)。文献中有多方面的证据支持Gal-3参与多种器官例如肺(Am J.Respir.Crit.Care Med.185:537-546)、肝(PNAS 103:5060-5065)和肾(Am.J.Pathol.172:288-298)中的纤维化过程的发生。Gal-3还被鉴定是心力衰竭的生物标志物，这表明调节Gal-3在心力衰竭的治疗中具有潜在用途(Curr.Heart Fail.Rep.7:1-8)。调节Gal-3可用于癌症治疗，因为Gal-3参与在血管生成、凋亡和转移途径中发挥关键作用的细胞生长和分化(Galectin-3C:HumanLectin for Treatment of Cancer.ACS Symposium Series,Vol.1115.第12章,195–23)。最近，已经证明Gal-3抑制剂在组合免疫疗法中使用时具有积极作用(GalectinTherapeutics.Press Release,2017年2月7日)。

多个出版物和专利申请描述了正被开发为抗纤维化药的Gal-3的合成抑制剂。这些方式的最近的实例有WO2005113568、WO2005113569、US2014067986、WO2014067986、WO2017080971、WO2016120403、US20140099319和WO2014067986。

发明内容

本公开涉及抑制Gal-3的式I的化合物，包括其药学上可接受的盐、包含此类化合物的组合物以及使用和制备此类化合物和组合物的方法。

本发明的一个方面是式I的化合物或其药学上可接受的盐：

其中：

R¹是((R³)(R⁴)N)羰基或Ar²；

R²是-O-L¹-O-、-OCON(R⁵)-L²-N(R⁵)C(O)O-或-O-(L³)-CON(R⁵)-L²-N(R⁵)C(O)-(L³)-O-；

L¹是亚烷基；

L²是亚烷基或-CH₂-Ph-CH₂-；

或N(R⁵)-L²-N(R⁵)一起是哌嗪基或高哌嗪基(homopiperazinyl)；

L³是亚烷基；

R³是氢、烷基、环烷基、苄基或卤代苄基；

R⁴是氢或烷基；

或(R³)(R⁴)N一起是氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或吗啉基，且被0-3个选自卤素、烷基和烷基羰基的取代基取代；

R⁵是氢或烷基；

R⁶是氢或烷基；

R⁷是氢或烷基；

或(R⁶)(R⁷)N一起是氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或吗啉基，且被0-3个选自卤素、烷基和羟基的取代基取代；

R⁸是氢、烷基、烷基羰基或烷基磺酰基；

R⁹是氢或烷基；

或(R⁸)(R⁹)N一起是氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或吗啉基，且被0-3个选自卤素、烷基和烷基羰基的取代基取代；

R¹⁰是氰基、卤素、烷氧基或(R¹¹)(R¹²)N；

R¹¹是氢或烷基；

R¹²是氢或烷基；

或(R¹¹)(R¹²)N一起是氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或吗啉基；

R¹³是氢、烷基、烷基羰基、烷氧基羰基或烷基磺酰基；

R¹⁴是氢或烷基；

或(R¹³)(R¹⁴)N一起是氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或吗啉基，且被0-3个选自卤素、烷基和羟基的取代基取代；

R¹⁵是氢、烷基、烷基羰基或烷基磺酰基；

R¹⁶是氢或烷基；

或(R¹⁵)(R¹⁶)N一起是氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或吗啉基，且被0-3个选自卤素、烷基和烷基羰基的取代基取代；

Ar¹是吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、噁二唑基、噻二唑基、苯基或吲哚基，且被0-3个选自以下的取代基取代：烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、(羧基)烷基、(烷氧基羰基)烷基、(H₂NCO)烷基、(Ar³)烷基、环烷基、羟基环烷基、烯基、烷氧基、烷硫基、烷基磺酰基、羧基、烷氧基羰基、(烷基NH)羰基、(((R⁶)(R⁷)N)烷基NH)羰基、((吡啶基)烷基NH)羰基、(R⁸)(R⁹)N和Ar³；

Ar²是苯基、吡啶基、萘基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、喹啉基或喹喔啉基，且被0-5个选自以下的取代基取代：氰基、卤素、烷基、(R¹⁰)烷基、卤代烷基、环烷基、(R¹⁰)环烷基、烷氧基、环烷氧基、卤代烷氧基和(R¹³)(R¹⁴)N；且

Ar³是苯基、萘基、联苯基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并异噁唑基、苯并异噻唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并间二氧杂环戊烯基、二氢苯并二噁烯基、二氢喹啉酮基或二氢苯并噻吩-2,2-二氧化物，且被0-5个选自以下的取代基取代：氰基、硝基、卤素、烷基、卤代烷基、环烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷硫基、羧基、烷氧基羰基、CONH₂和(R¹⁵)(R¹⁶)N；

或Ar³是吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、噁二唑基和噻二唑基，且被0-3个选自以下的取代基取代：氰基、硝基、卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷硫基、羧基、烷氧基羰基、CONH₂和(R¹⁵)(R¹⁶)N；

或Ar³是(烷基SO₂)苯基、(烷基SO₂)(卤代)苯基、(氨基SO₂)苯基、(二烷基氨基SO₂)苯基、((烷基NHSO₂)烷基)苯基、(吡咯基)苯基、(咪唑基)苯基、(噁唑基)苯基、(四唑基)苯基、((吡啶基)甲基)苯基、苯氧基苯基、(苄基氧基)苯基、((甲基)噻唑基)苯基、(噻唑基)苯磺酰氨基(sulfamido)、((甲基)噻二唑基)苯磺酰氨基、(甲基)苯并噻唑酮基或氟吡唑并嘧啶基。

本发明的另一个方面是式I的化合物或其药学上可接受的盐，其中R¹是Ar²；Ar¹是三唑基，其被0-3个选自以下的取代基取代：烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、(羧基)烷基、(烷氧基羰基)烷基、(H₂NCO)烷基、(Ar³)烷基、环烷基、羟基环烷基、烯基、烷氧基、烷硫基、烷基磺酰基、羧基、烷氧基羰基、(烷基NH)羰基、(((R⁶)(R⁷)N)烷基NH)羰基、((吡啶基)烷基NH)羰基、(R⁸)(R⁹)N和Ar³；Ar²是苯基或吡啶基，且被0-5个选自以下的取代基取代：氰基、卤素、烷基、(R¹⁰)烷基、卤代烷基、环烷基、(R¹⁰)环烷基、烷氧基、环烷氧基、卤代烷氧基和(R¹³)(R¹⁴)N；且Ar³是苯基或苯并噻唑基，且被0-5个选自以下的取代基取代：氰基、硝基、卤素、烷基、卤代烷基、环烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷硫基、羧基、烷氧基羰基、CONH₂和(R¹⁵)(R¹⁶)N。

本发明的另一个方面是式I的化合物或其药学上可接受的盐，其中R¹是Ar²；R²是羟基；Ar¹是三唑基，其被0-2个选自以下的取代基取代：烷基、卤代烷基和Ar³；Ar²是苯基，其被0-5个卤素取代基取代；且Ar³是苯基，其被0-5个选自以下的取代基取代：卤素、烷基、卤代烷基、环烷基、烷氧基和卤代烷氧基。

本发明的另一个方面是式I的化合物，其中R¹是Ar²。

本发明的另一个方面是式I的化合物，其中Ar¹是三唑基，其被0-3个选自以下的取代基取代：烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、(羧基)烷基、(烷氧基羰基)烷基、(H₂NCO)烷基、(Ar³)烷基、环烷基、羟基环烷基、烯基、烷氧基、烷硫基、烷基磺酰基、羧基、烷氧基羰基、(烷基NH)羰基、(((R⁶)(R⁷)N)烷基NH)羰基、((吡啶基)烷基NH)羰基、(R⁸)(R⁹)N和Ar³。

本发明的另一个方面是式I的化合物，其中Ar¹是三唑基，其被0-2个选自以下的取代基取代：烷基、卤代烷基和Ar³。

本发明的另一个方面是式I的化合物，其中Ar²是苯基或吡啶基，且被0-5个选自以下的取代基取代：氰基、卤素、烷基、(R¹⁰)烷基、卤代烷基、环烷基、(R¹⁰)环烷基、烷氧基、环烷氧基、卤代烷氧基和(R¹³)(R¹⁴)N。

本发明的另一个方面是式I的化合物，其中Ar²是苯基，其被0-5个卤素取代基取代。

本发明的另一个方面是式I的化合物，其中Ar³是苯基，其被0-5个选自以下的取代基取代：氰基、卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基和卤代烷氧基。

对于式I的化合物，包括R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、R¹⁰、R¹¹、R¹²、R¹³、R¹⁴、R¹⁵、R¹⁶、Ar¹、Ar²、Ar³、L¹、L²和L³在内的可变取代基的任何情况下的范围可以与可变取代基的任何其它情况下的范围彼此独立地使用。照此，本发明包括不同方面的组合。

除非另有说明，否则这些术语具有以下含义。“烷基”意指由1至6个碳构成的直链或支链的烷基。“烯基”意指具有至少一个双键的由2至6个碳构成的直链或支链的烷基。“炔基”意指具有至少一个三键的由2至6个碳构成的直链或支链的烷基。“亚烷基”意指由1至6个碳构成的直链或支链的二价烷基。“环烷基”意指由3至7个碳构成的单环环系。具有烃部分的术语(例如烷氧基)包括由1-6个碳构成的所述烃部分的直链和支链异构体。“卤素”包括氟、氯、溴和碘。“卤代烷基”和“卤代烷氧基”包括从单卤代到全卤代的所有卤代异构体。“芳基”意指具有5至12个碳原子的单环或双环芳族环系，其中一个环或两个环都是芳族的。芳基的代表性实例包括但不限于茚满基、茚基、萘基、苯基和四氢萘基。“杂芳基”意指具有1-5个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5至7元单环或8至11元双环芳族环系。在未指定连接位置的情况下，如本领域技术人员所理解的，可以在任何适宜的位置连接键合。如本领域技术人员所理解的，取代基和键合模式的组合仅是那些导致稳定化合物的键合。括号和多括号术语旨在向本领域技术人员阐明键合关系。例如，诸如((R)烷基)等术语意指进一步被取代基R取代的烷基取代基。

本发明包括化合物的所有药学上可接受的盐形式。药学上可接受的盐是其中抗衡离子对化合物的生理活性或毒性没有显著贡献并且照此作为药理学等效物发挥作用的那些盐。这些盐可以根据常规的有机技术使用可商购的试剂制备。一些阴离子盐形式包括乙酸盐、醋硬脂酸盐(acistrate)、苯磺酸盐、溴化物、氯化物、柠檬酸盐、富马酸盐、葡糖醛酸盐(glucouronate)、氢溴酸盐、盐酸盐、氢碘酸盐、碘化物、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、硝酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐和昔萘酸盐(xinofoate)。一些阳离子盐形式包括铵、铝、benzathine、铋、钙、胆碱、二乙胺、二乙醇胺、锂、镁、葡甲胺(meglumine)、4-苯基环己基胺、哌嗪、钾、钠、氨丁三醇和锌。

本发明的一些化合物以立体异构形式存在。本发明包括化合物的所有立体异构形式，包括对映体和非对映体。制备和分离立体异构体的方法是本领域已知的。本发明包括化合物的所有互变异构形式。本发明包括阻转异构体和旋转异构体。

本发明旨在包括本发明的化合物中存在的原子的所有同位素。同位素包括具有相同的原子数、但具有不同的质量数的那些原子。作为一般实例，但不限于此，氢的同位素包括氘和氚。碳的同位素包括¹³C和¹⁴C。同位素标记的本发明的化合物通常可以通过本领域技术人员已知的常规技术或通过与本文所述的那些类似的方法、使用适宜的同位素标记的试剂替代否则采用的非标记的试剂来制备。这类化合物可以具有多种潜在用途，例如作为测定生物活性的标准品和试剂。在稳定同位素的情况下，这类化合物可具有有利地改变生物学、药理学或药代动力学性质的潜能。

生物学方法

测定缓冲液组成:25mM HEPES,100mM NaCl,0.005％Tween 20,0.05％BSA，用无菌水制备(所有试剂均来自Sigma)

对照:

阳性对照:100％DMSO(1μl)+His-标记的hGal-3(20μL)+B-ASF(20μl)+抗-His铽抗体(5μl)+链霉抗生物素d2抗体(5μl)。

阴性对照:100％DMSO(1μl)+His-标记的hGal-3(20μL)+抗His铽抗体(5μl)+链霉抗生物素d2抗体(5μl)。

储备液制备:

方案:在室温、250-300rpm温和振摇下，在384白色Opti板中一式三份地进行Gal-3测定。由初始储备液制备His标记的重组人Gal-3(hGal-3)和B-ASF的2.525X工作储备液浓度。由工作储备液，将20μl hGal-3(15nM)和20μl B-ASF(15nM)添加到板中。在阴性对照中，仅添加了hGal-3。对于在100％DMSO中的化合物，制备了50x工作储备液的浓度范围。将等分试样的1uL化合物加入孔中，与20μl hGal-3/孔一起预温育30分钟。然后加入20μl B-ASF并再温育1小时。为了检测信号，加入5μL(终浓度1.0nM)的铽标记的抗-His抗体，温育30min，然后加入5μl(终浓度20nM)链霉抗生物素d2，再温育1小时。在Envision2104MultilabelReader上使用HTRF筛选方案(激发波长＝340nm，发射波长＝615nm/665nm)检测测定信号。使用Toolset和Curve Master分析数据。将结果报告在实验部分(以μM计的IC₅₀)。

药物组合物和使用方法

本发明的化合物抑制Gal-3。因此，本发明的另一个方面是包含治疗有效量的式I的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体的药物组合物。

本发明的另一个方面是本发明的化合物在疗法中的用途。

本发明的另一个方面是用式I或Ia的化合物治疗患有疾病或病症的患者的方法，所述疾病或病症选自器官(包括肝、肾、肺、心脏和皮肤)的纤维化、肝疾病和病症(包括急性肝炎、慢性肝炎、肝纤维化、肝硬化、门静脉高压、再生衰竭(regenerative failure)、非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis)(NASH)、肝功能减退和肝血流量异常(hepatic blood flow disorder))、细胞增殖性疾病、癌症和病症(包括实体瘤、实体瘤转移、血管纤维瘤(vascular fibroma)、骨髓瘤、多发性骨髓瘤、卡波西肉瘤、白血病、慢性淋巴细胞白血病(CLL))和癌细胞的侵入性转移)、炎症性疾病和病症(包括银屑病、肾病和肺炎)、胃肠道疾病和病症(包括肠易激惹综合征(IBS)、炎症性肠病(IBD)和胰腺分泌异常)、肾疾病和病症、与泌尿道相关的疾病和病症(包括良性前列腺增生或与神经性膀胱疾病、脊髓肿瘤、椎间盘疝、脊椎管狭窄相关的症状、和源自糖尿病的症状)、下泌尿道疾病和病症(包括下泌尿道阻塞)、下泌尿道的炎症性疾病和病症(包括排尿困难和尿频)、胰腺疾病和病症、与血管生成异常相关的疾病和病症(包括动脉阻塞)、硬皮病、与脑相关的疾病和病症(包括脑梗塞和脑出血)、神经性疼痛和周围神经病、眼疾病和病症(包括年龄相关性黄斑变性(AMD)、糖尿病性视网膜病变、增殖性玻璃体视网膜病变(proliferativevitreoretinopathy)(PVR)、瘢痕性类天疱疮和青光眼滤过手术瘢痕形成(glaucomafiltration surgery scarring))。

本发明的另一个方面是治疗肾纤维化、肺纤维化、肝纤维化、动脉纤维化和系统性硬化的方法，所述方法包括给患者施用式I或Ia的化合物。

本发明的另一个方面是治疗器官(包括肝、肾、肺、心脏和皮肤)的纤维化的方法，所述方法包括给患者施用式I或Ia的化合物。

本发明的另一个方面是治疗肝疾病和病症(包括急性肝炎、慢性肝炎、肝纤维化、肝硬化、门静脉高压、再生衰竭、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肝功能减退和肝血流量异常)的方法，所述方法包括给患者施用式I或Ia的化合物。

本发明的另一个方面是治疗细胞增殖性疾病、癌症和病症(包括实体瘤、实体瘤转移、血管纤维瘤、骨髓瘤、多发性骨髓瘤、卡波西肉瘤、白血病、慢性淋巴细胞白血病(CLL))和癌细胞的侵入性转移)的方法，所述方法包括给患者施用式I或Ia的化合物。

本发明的另一个方面是治疗炎症性疾病和病症(包括银屑病、肾病和肺炎)的方法，所述方法包括给患者施用式I或Ia的化合物。

本发明的另一个方面是治疗胃肠道疾病和病症(包括肠易激惹综合征(IBS)、炎症性肠病(IBD)和胰腺分泌异常)的方法，所述方法包括给患者施用式I或Ia的化合物。

本发明的另一个方面是治疗肾疾病和病症的方法，所述方法包括给患者施用式I或Ia的化合物。

本发明的另一个方面是治疗与泌尿道相关的疾病和病症(包括良性前列腺增生或与神经性膀胱疾病、脊髓肿瘤、椎间盘疝、脊椎管狭窄相关的症状、和源自糖尿病的症状)的方法，所述方法包括给患者施用式I或Ia的化合物。

本发明的另一个方面是治疗下泌尿道疾病和病症(包括下泌尿道阻塞)、下泌尿道的炎症性疾病和病症(包括排尿困难和尿频)的方法，所述方法包括给患者施用式I或Ia的化合物。

本发明的另一个方面是治疗胰腺疾病和病症的方法，所述方法包括给患者施用式I或Ia的化合物。

本发明的另一个方面是治疗与血管生成异常相关的疾病和病症(包括动脉阻塞)的方法，所述方法包括给患者施用式I或Ia的化合物。

本发明的另一个方面是治疗与脑相关的疾病和病症(包括脑梗塞和脑出血)的方法，所述方法包括给患者施用式I或Ia的化合物。

本发明的另一个方面是治疗神经性疼痛和周围神经病的方法，所述方法包括给患者施用式I或Ia的化合物。

本发明的另一个方面是治疗眼疾病和病症(包括年龄相关性黄斑变性(AMD)、糖尿病性视网膜病变、增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)、瘢痕性类天疱疮和青光眼滤过手术瘢痕形成)的方法，所述方法包括给患者施用式I或Ia的化合物。

本发明的化合物可以用于治疗和/或预防其中Gal-3起作用的病症。

本发明的化合物可用于制备药剂，所述药剂用于治疗和/或预防抑制Gal-3的生理活性有用的病症，例如其中Gal-3受体参与疾病的病因学或病理学或者与疾病的至少一种症状相关的疾病。

本发明的化合物可以单独使用、与本发明的其它化合物组合使用、或者与一种或多种、优选1至2种其它活性剂组合使用。

“治疗有效量”意指提供疼痛领域的从业人员所理解的有意义的患者益处所需的活性剂的量。

“患者”意指患有疼痛的人以及本领域的从业人员所理解的适合于疗法的人。

“治疗”、“疗法”、“方案”和相关术语如本领域的从业人员所理解的那样使用。

本发明的化合物通常以药物组合物的形式提供，所述药物组合物包含治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体，并且可以含有常规赋形剂。治疗有效量是提供有意义的患者益处所需的量。药学上可接受的载体是具有可接受的安全性特性的那些常规的已知的载体。组合物包括所有常见的固体和液体形式，包括胶囊、片剂、锭剂(losenge)和粉末以及液体混悬液、糖浆、酏剂和溶液。使用常规配制技术和常规赋形剂(例如粘合剂和润湿剂)以及通常用于组合物的媒介物(例如水和醇)制备组合物。例如，参见，Remington’s Pharmaceutical Sciences,第17版,Mack Publishing Company,Easton,PA(1985)。

固体组合物通常配制在剂量单位中，优选每剂提供约1至1000mg活性成分的组合物。剂量的一些实例是1mg、10mg、100mg、250mg、500mg和1000mg。通常，其它抗逆转录病毒药物将以与临床上使用的此类药物类似的单位范围存在。典型地，其是0.25-1000mg/单位。

液体组合物通常在剂量单位范围内。通常，液体组合物在1-100mg/mL的单位剂量范围内。剂量的一些实例是1mg/mL、10mg/mL、25mg/mL、50mg/mL和100mg/mL。

本发明包括所有常规的施用方式；优选口服和肠胃外方法。通常，给药方案类似于临床上使用的其它药物。典型地，日剂量是每天1-100mg/kg体重。通常，口服需要更多的化合物，胃肠外需要更少的化合物。然而，具体的给药方案将由临床医师使用合理的医学判断来确定。

化学方法

对于本领域技术人员而言显而易见的是，本公开不限于前述举例说明性的实例，在不脱离本公开的本质属性的情况下，可以以其它特定形式来实施本公开。因此，所述实例在所有方面都应被认为是举例说明性的，而不是限制性的，应参考所附权利要求书、而不是前述实例，因此，旨在包括与权利要求等同的含义和范围之内的所有改变。

章节1

针对每个实施例和中间体所报告的分析型LC-MS/HPLC保留时间使用以下常规分析型LC-MS/HPLC条件之一：

LC/MS方法

方法1:

起始％B＝2，最终％B＝98，历时1min梯度

流速＝0.8ml/min

波长＝254

溶剂A＝水-0.05％TFA

溶剂B＝乙腈-0.05％TFA

柱＝BEH C18 2.1x 50mm

方法2:

起始％B＝0，最终％B＝100，历时3min梯度

流速＝1ml/min

波长＝220

溶剂A＝5％ACN-95％水–10mM乙酸铵

溶剂B＝95％ACN-5％水–10mM乙酸铵

柱＝XBridge C18 2.1x 50mm,1.7μM颗粒

温度＝50℃

制备型HPLC纯化方法:

方法1:柱:XBridge C18,200mm x 19mm,5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；梯度:在28％B保持0分钟,历时20分钟28-68％B，然后在100％B保持4分钟；流速:20mL/min；柱温:25℃。根据MS信号触发级分收集。合并含有期望产物的级分并且通过离心蒸发干燥。

方法2:柱:Waters Sunfire C18,30x 100mm,5-μm颗粒；流动相A:10％ACN-90％水-0.1％TFA；流动相B:90％ACN-10％水-0.1％TFA；梯度：历时15分钟20-100％B，然后保持在100％B；流速:30mL/min；根据UV 220nM波长触发级分收集。减压浓缩含有产物的级分。

方法3:柱:XBridge C18,200mm x 19mm,5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；梯度:在40％B保持0分钟，历时20分钟40-80％B，然后在100％B保持4分钟；流速:20mL/min；柱温:25℃。根据MS信号触发级分收集。合并含有期望的产物的级分并且通过离心蒸发干燥。

方法4:通过制备型LC/MS、使用下面的条件纯化粗物质:柱:XBridge C18,200mm x19mm,5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有0.1％三氟乙酸的水；流动相B:95:5乙腈:含有0.1％三氟乙酸的水；梯度:在32％B保持0分钟，历时20分钟32-72％B，然后在100％B保持4分钟；流速:20mL/min；柱温:25℃。根据MS信号触发级分收集。合并含有期望的产物的级分并且通过离心蒸发干燥。

方法5:柱:XBridge C18,200mm x 19mm,5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；梯度:在34％B保持0分钟，历时20分钟34-84％B，然后在100％B保持4分钟；流速:20mL/min；柱温:25℃。根据UV信号触发级分收集。合并含有期望的产物的级分并且通过离心蒸发干燥。

方法6:柱:XBridge C18,200mm x 19mm,5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；梯度:在29％B保持0分钟，历时20分钟29-69％B，然后在100％B保持4分钟；流速:20mL/min；柱温:25℃。根据MS信号触发级分收集。合并含有期望的产物的级分并且通过离心蒸发干燥。

方法7:柱:XBridge C18,200mm x 19mm,5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；梯度:在30％B保持0分钟,历时20分钟30-70％B，然后在100％B保持4分钟；流速:20mL/min；柱温:25℃。根据MS信号触发级分收集。合并含有期望的产物的级分并且通过离心蒸发干燥。

方法8:柱:XBridge C18,200mm x 19mm,5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；梯度:在28％B保持0分钟，历时20分钟28-68％B，然后在100％B保持4分钟；流速:20mL/min；柱温:25℃。根据MS信号触发级分收集。合并含有期望的产物的级分并且通过离心蒸发干燥。

方法9:柱:Waters Sunfire C18,30x 100mm,5-μm颗粒；流动相A:10％ACN-90％H20-0.1％TFA；流动相B:90％ACN-10％H2O-0.1％TFA；梯度：历时15分钟25-100％B，然后保持在100％B；流速:30mL/min；根据UV 220nM波长触发级分收集。减压浓缩含有产物的级分。

方法10:柱:XBridge C18,200mm x 19mm,5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；梯度:在45％B保持0分钟,历时22分钟45-90％B，然后在100％B保持5分钟；流速:20mL/min；柱温:25℃。根据MS信号触发级分收集。合并含有期望的产物的级分并且通过离心蒸发干燥。

方法11:柱:XBridge C18,200mm x 19mm,5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；梯度:在36％B保持0分钟,历时20分钟36-76％B，然后在100％B保持4分钟；流速:20mL/min；柱温:25℃。根据MS信号触发级分收集。合并含有期望的产物的级分并且通过离心蒸发干燥。

方法12:柱:XBridge C18,200mm x 19mm,5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；梯度:在33％B保持0分钟,历时20分钟33-73％B，然后在100％B保持4分钟；流速:20mL/min；柱温:25℃。根据MS信号触发级分收集。合并含有期望的产物的级分并且通过离心蒸发干燥。

方法13:柱:XBridge C18,200mm x 19mm,5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；梯度:在34％B保持0分钟,历时20分钟34-74％B，然后在100％B保持4分钟；流速:20mL/min；柱温:25℃。根据MS信号触发级分收集。合并含有期望的产物的级分并且通过离心蒸发干燥。

方法14:柱:XBridge C18,200mm x 19mm,5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；梯度:在32％B保持0分钟,历时20分钟32-72％B，然后在100％B保持4分钟；流速:20mL/min；柱温:25℃。根据MS信号触发级分收集。合并含有期望的产物的级分并且通过离心蒸发干燥。

方法15:柱:Waters Sunfire C18,30x 100mm,5-μm颗粒；流动相A:10％ACN-90％水-0.1％TFA；流动相B:90％ACN-10％水-0.1％TFA；梯度：历时15分钟30-100％B，然后保持在100％B；流速:30mL/min；根据UV 220nM波长触发级分收集。减压浓缩含有产物的级分。

方法16:柱:XBridge C18,200mm x 19mm,5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；梯度:在20％B保持0分钟,历时20分钟20-60％B，然后在100％B保持4分钟；流速:20mL/min；柱温:25℃。根据MS信号触发级分收集。合并含有期望的产物的级分并且通过离心蒸发干燥。

方法17:柱:XBridge C18,200mm x 19mm,5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；梯度:在30％B保持0分钟,历时20分钟30-70％B，然后在100％B保持4分钟；流速:20mL/min；柱温:25℃。根据MS和UV信号触发级分收集。合并含有期望的产物的级分并且通过离心蒸发干燥。

方法18:柱:XBridge C18,200mm x 19mm,5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；梯度:在52％B保持0分钟,历时20分钟52-92％B，然后在100％B保持4分钟；流速:20mL/min；柱温:25℃。根据MS信号触发级分收集。合并含有期望的产物的级分并且通过离心蒸发干燥。

方法19:柱:XBridge C18,200mm x 19mm,5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；梯度:在51％B保持0分钟,历时20分钟51-91％B，然后在100％B保持4分钟；流速:20mL/min；柱温:25℃。根据MS信号触发级分收集。合并含有期望的产物的级分并且通过离心蒸发干燥。

方法20:柱:XBridge C18,200mm x 19mm,5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；梯度:在32％B保持0分钟,历时20分钟32-72％B，然后在100％B保持6分钟；流速:20mL/min；柱温:25℃。根据MS和UV信号触发级分收集。合并含有期望的产物的级分并且通过离心蒸发干燥。

方法21:柱:XBridge C18,200mm x 19mm,5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；梯度:在36％B保持0分钟,历时20分钟36-73％B，然后在100％B保持8分钟；流速:20mL/min；柱温:25℃。根据MS信号触发级分收集。合并含有期望的产物的级分并且通过离心蒸发干燥。

方法22:柱:XBridge C18,200mm x 19mm,5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；梯度:在36％B保持0分钟,历时20分钟36-76％B，然后在100％B保持4分钟；流速:20mL/min；柱温:25℃。根据MS和UV信号触发级分收集。合并含有期望的产物的级分并且通过离心蒸发干燥。

方法23:柱:XBridge C18,200mm x 19mm,5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；梯度:在31％B保持0分钟,历时20分钟31-71％B，然后在100％B保持4分钟；流速:20mL/min；柱温:25℃。根据MS信号触发级分收集。合并含有期望的产物的级分并且通过离心蒸发干燥。

方法24:柱:XBridge C18,200mm x 19mm,5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；梯度:在35％B保持0分钟,历时25分钟35-75％B，然后在100％B保持4分钟；流速:20mL/min；柱温:25℃。根据MS信号触发级分收集。合并含有期望的产物的级分并且通过离心蒸发干燥。

方法25:柱:Waters Sunfire C18,30x 100mm,5-μm颗粒；流动相A:10％ACN-90％水-0.1％TFA；流动相B:90％ACN-10％水-0.1％TFA；梯度：历时15分钟20-100％B，然后保持在100％B；流速:30mL/min；根据UV 220nM波长触发级分收集。减压浓缩含有产物的级分。

2-(((2S,3R,4R,5R,6R)-5-乙酰氧基-6-(乙酰氧基甲基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酸的制备:

步骤1.(2S,4aR,6R,7R,8S,8aR)-7-乙酰氧基-2-苯基-8-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酸甲酯的制备:向含有(2S,4aR,6R,7R,8S,8aR)-7-乙酰氧基-8-叠氮基-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酸甲酯(5.0g,13.25mmol)的烧瓶中加入硫酸铜(II)五水合物(2.316g,9.28mmol)和抗坏血酸钠(2.62g,13.25mmol)。用DMF(100mL)和水(33.3mL)稀释混合物。加入5-乙炔基-1,2,3-三氟苯(3.23mL,26.5mmol)，将混合物在室温搅拌21.5h。通过celite短柱过滤混合物，将celite短柱进一步用DCM和甲醇洗涤，然后用DMF洗涤。减压浓缩合并的滤液。用水稀释固体，通过过滤收集它们。用过量的水、然后用乙醚洗涤固体。再次浓缩滤液，用水处理固体，收集固体，用乙醚洗涤第二次。将该过程重复第三次，得到标题产物，为灰白色(off white)固体(6.61g,12.4mmol,94％收率).LCMS:m/e 534.1(MH⁺),0.96min(方法1).¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.82(s,1H),7.91-7.76(m,2H),7.46-7.29(m,5H),5.74-5.65(m,2H),5.61(s,1H),4.58(d,J＝2.2Hz,1H),4.51-4.47(m,1H),4.23-4.11(m,2H),4.01(s,1H),3.66(s,3H),1.84(s,3H).

步骤2.(2S,4aR,6R,7R,8R,8aR)-7-羟基-2-苯基-8-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酰胺的制备:向含有(2S,4aR,6R,7R,8S,8aR)-7-乙酰氧基-2-苯基-8-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酸甲酯(2.0g,3.75mmol)的烧瓶中加入氨(7M在甲醇中的溶液)(50ml,350mmol)，将混悬液在室温搅拌27h。减压浓缩混合物，然后用二氯甲烷稀释，再浓缩两次。分离标题产物，为灰白色固体，不经额外纯化用于下一步。LCMS:m/e 477.3(MH⁺),0.84min(方法1).¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.87(s,1H),7.88-7.75(m,2H),7.58(br s,1H),7.49(br s,1H),7.40-7.23(m,5H),5.54(s,1H),5.49(br d,J＝3.7Hz,1H),5.14(dd,J＝10.8,3.5Hz,1H),4.55-4.43(m,2H),4.22-4.07(m,2H),3.94(d,J＝9.2Hz,1H),3.90(s,1H).

步骤3.(2S,4aR,6R,7R,8R,8aR)-N-((E)-1-(二甲基氨基)亚乙基)-7-羟基-2-苯基-8-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酰胺的制备:向含有(2S,4aR,6R,7R,8R,8aR)-7-羟基-2-苯基-8-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酰胺(1.787g,3.75mmol)在1,4-二噁烷(50mL)中的混悬液的烧瓶中加入N,N-二甲基乙酰胺二甲基缩醛(2.193mL,15.00mmol)。将混合物加热至50℃达15h，然后冷却至室温，用水(100mL)稀释，用二氯甲烷(100mL)分配。将混合物搅拌至固体溶解，然后除去有机层，用二氯甲烷(2×75mL)萃取水层。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩，得到粗产物，为淡黄色固体。将粗产物不经额外纯化用于下一步。LCMS:m/e 546.3(MH⁺),0.75min(方法1).¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.01(s,1H),7.47-7.32(m,7H),6.29-6.21(m,1H),5.48(s,1H),5.05(dd,J＝10.6,3.3Hz,1H),4.58(dd,J＝12.7,1.4Hz,1H),4.52-4.44(m,2H),4.10(dd,J＝12.7,1.9Hz,1H),4.04(d,J＝9.2Hz,1H),3.76(d,J＝1.1Hz,1H),3.17(s,3H),3.10(s,3H),2.44(s,3H).

步骤4.(2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基-8-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-醇的制备:向(2S,4aR,6R,7R,8R,8aR)-N-((E)-1-(二甲基氨基)乙叉基)-7-羟基-2-苯基-8-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酰胺(2.046g,3.75mmol)在乙酸(30ml)中的溶液中加入2,5-二氯苯基肼(0.664g,3.75mmol)，将混合物加热至65℃。加热4h后，将混合物冷却至室温，然后减压浓缩。用饱和碳酸氢钠水溶液稀释残余物，用二氯甲烷萃取(80mL,然后2×30mL)。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩。通过闪式色谱法、使用25-80％EtOAc的己烷溶液梯度和120g硅胶柱纯化残余物。合并含有主峰的级分，减压浓缩，得到标题产物，为棕褐色(tan)泡沫(1.37g,2.08mmol,三步收率55.4％)。LCMS:m/e 659.4(MH⁺),1.02min(方法1).¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.03(s,1H),7.59(d,J＝1.8Hz,1H),7.51-7.29(m,9H),5.40(s,1H),5.11(dd,J＝10.9,3.4Hz,1H),4.89-4.80(m,1H),4.65(d,J＝9.0Hz,1H),4.59(d,J＝2.0Hz,1H),4.48(d,J＝3.5Hz,1H),3.95(dd,J＝12.8,1.8Hz,1H),3.82-3.75(m,1H),3.58(d,J＝0.9Hz,1H),2.45(s,3H).

步骤5.2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基-8-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸叔丁酯的制备:将(2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基-8-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-醇(0.536g,0.813mmol)在THF(10mL)中的溶液冷却至0℃，加入氢化钠(0.098g,2.438mmol)。将混合物搅拌15分钟，加入溴乙酸叔丁酯(0.238mL,1.626mmol)。随着冰浴融化，使混合物温热至室温，将混合物在室温搅拌24h。用20mL水小心地稀释混合物，用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。用盐水洗涤有机层，用硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩。通过闪式色谱法、使用10-50％EtOAc的己烷溶液梯度和40g硅胶柱纯化残余物。合并含有产物的级分，减压浓缩，得到标题产物，为白色固体(0.494g,0.64mmol,79％收率)。LCMS:m/e 773.5(MH⁺),1.14min(方法1).¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.12(s,1H),7.79-7.67(m,1H),7.56-7.38(m,9H),5.48(s,1H),5.12(dd,J＝10.5,3.4Hz,1H),4.91-4.76(m,1H),4.47-4.39(m,2H),4.34(dd,J＝12.8,1.1Hz,1H),4.05(dd,J＝12.8,1.5Hz,1H),3.89-3.76(m,1H),3.65-3.55(m,2H),2.46(s,3H),1.28(s,9H).

步骤6.2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酸的制备:向2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基-8-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸叔丁酯(0.494g,0.639mmol)在二氯甲烷(4mL)中的溶液中加入TFA(2ml,26.0mmol)，在室温搅拌混合物。搅拌38h后，减压浓缩混合物。用1,3-二氨基丙烷(1M在THF中的溶液)处理残余物，在室温搅拌。搅拌66h后，用几滴稀释混合物，通过闪式色谱法、使用0-15％MeOH的DCM溶液梯度和40g硅胶柱纯化。合并含有产物的级分，减压浓缩，得到标题产物，为灰白色固体(0.09g,0.14mmol,22％收率)。LCMS:m/e 629.3(MH⁺),0.76min(方法1)。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.24(s,1H),7.60-7.45(m,5H),4.89-4.76(m,2H),4.69-4.60(m,1H),4.36(d,J＝2.0Hz,1H),4.12-4.04(m,1H),3.74-3.51(m,4H),3.44(d,J＝15.6Hz,1H),2.49(s,3H).

步骤7.向2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酸(0.089g,0.14mmol)在二氯甲烷(2mL)中的混悬液中加入吡啶(0.1mL,1.236mmol)、DMAP(0.864mg,7.07μmol)和乙酰氯(0.075mL,1.055mmol)。将混合物在室温搅拌63h，然后减压浓缩。通过闪式色谱法、使用0-10％EtOAc的DCM溶液梯度、然后使用10％MeOH的DCM溶液纯化残余物。合并含有产物的级分，减压浓缩，得到标题产物，为灰白色固体(0.10g,0.14mmol,100％收率)。LCMS:m/e 713.4(MH⁺),0.89min(方法1)。

二聚体形成和脱保护

实施例1

2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)-N-(2-(2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酰氨基)乙基)乙酰胺的制备:

步骤1.乙酸((2R,3R,4R,5R,6S)-3-乙酰氧基-5-(2-((2-(2-(((2R,3S,4S,5S,6S)-5-乙酰氧基-6-(乙酰氧基甲基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酰氨基)乙基)氨基)-2-氧代乙氧基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-2-基)甲基酯的制备:向含有2-(((2S,3R,4R,5R,6R)-5-乙酰氧基-6-(乙酰氧基甲基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酸(0.036g,0.050mmol)在DMF(2mL)和三乙胺(0.035mL,0.252mmol)中的溶液的烧瓶中加入HATU(0.058g,0.151mmol)，然后加入乙二胺(1M的DMF溶液)(0.040mL,0.040mmol)。将混合物在室温搅拌24h，然后通过玻璃棉短柱过滤，通过制备型HPLC纯化(方法2)。将含有产物的级分减压浓缩，得到标题产物，为白色固体(0.7mg,0.0048mmol,19％收率)。LCMS:m/e1452.0(MH⁺),1.03min(方法1)。

步骤2.向含有乙酸((2R,3R,4R,5R,6S)-3-乙酰氧基-5-(2-((2-(2-(((2R,3S,4S,5S,6S)-5-乙酰氧基-6-(乙酰氧基甲基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酰氨基)乙基)氨基)-2-氧代乙氧基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-2-基)甲基酯(0.007g,4.82μmol)在MeOH(1mL)中的溶液的小瓶中加入甲醇钠(25％的甲醇溶液)(1.1μl,4.8μmol)。将混合物在室温搅拌16h。加入3滴1N HCl，在氮气流下浓缩混合物。用DMF稀释混合物，通过玻璃棉短柱过滤，通过制备型HPLC纯化(方法6)。合并含有产物的级分，减压浓缩，得到标题产物(2.7mg,0.0021mmol,44％收率)。LCMS:m/e 1281.33(MH⁺),1.84min(方法2)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.96(s,2H),7.87-7.57(m,10H),6.96(br s,2H),5.50-5.34(m,2H),5.08(br d,J＝10.1Hz,2H),4.80-4.55(m,4H),4.40(br d,J＝9.2Hz,2H),4.10-3.31(m,8H),2.70-2.58(m,4H),2.27(br s,6H).

实施例2

2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)-N-(5-(2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酰氨基)戊基)乙酰胺的制备

步骤1.乙酸((2R,3R,4R,5R,6S)-3-乙酰氧基-5-(2-((5-(2-(((2R,3S,4S,5S,6S)-5-乙酰氧基-6-(乙酰氧基甲基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酰氨基)戊基)氨基)-2-氧代乙氧基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-2-基)甲基酯的制备:向含有2-(((2S,3R,4R,5R,6R)-5-乙酰氧基-6-(乙酰氧基甲基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酸(0.056g,0.078mmol)在DMF(2mL)和三乙胺(0.055mL,0.392mmol)中的溶液的烧瓶中加入HATU(0.090g,0.235mmol)，然后加入1,5-二氨基戊烷(9.2μl,0.08mmol)。将混合物在室温搅拌45h，然后用水(15mL)稀释混合物，用乙酸乙酯(2×15mL)萃取。用(3×15mL)水、然后用盐水洗涤合并的有机层，用硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩。通过闪式色谱法、使用10-75％EtOAc的己烷溶液梯度和24g硅胶柱纯化残余物。当产物未洗脱时，将溶剂系统改变成0-10％MeOH的DCM溶液梯度。合并含有主要产物的级分，减压浓缩，得到预期的二聚体(0.020g,0.013mmol,33％收率)，为灰白色薄膜。LCMS:m/e1494.2(MH⁺),1.02min(方法1)。

步骤2.向乙酸((2R,3R,4R,5R,6S)-3-乙酰氧基-5-(2-((5-(2-(((2R,3S,4S,5S,6S)-5-乙酰氧基-6-(乙酰氧基甲基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酰氨基)戊基)氨基)-2-氧代乙氧基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-2-基)甲基酯(0.02g,0.013mmol)中的溶液中加入甲醇钠(25％的甲醇溶液)(3.0μl,0.013mmol)，在室温搅拌混合物。在室温搅拌2.5h后，加入5滴1N HCl，减压浓缩混合物。用DMF稀释残余物，通过玻璃棉短柱过滤，通过制备型HPLC纯化(方法7)。减压浓缩含有产物的级分，得到标题产物(10.2mg,0.0076mmol,58％收率)。LCMS:m/e 1323.66(MH⁺),1.85min(方法2)。关键1H NMR峰:¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.96(s,2H),7.84-7.62(m,10H),6.62(br s,2H),2.30(s,6H),1.04-0.92(m,4H),0.79(br d,J＝6.4Hz,2H).IC₅₀＝0.001uM.

实施例3

2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)-N-(3-(2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酰氨基)丙基)乙酰胺的制备

步骤1.乙酸((2R,3R,4R,5R,6S)-3-乙酰氧基-5-(2-((3-(2-(((2R,3S,4S,5S,6S)-5-乙酰氧基-6-(乙酰氧基甲基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酰氨基)丙基)氨基)-2-氧代乙氧基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-2-基)甲基酯的制备:向含有2-(((2S,3R,4R,5R,6R)-5-乙酰氧基-6-(乙酰氧基甲基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酸(0.034g,0.048mmol)在DMF(1mL)和三乙胺(0.033mL,0.238mmol)中的溶液的烧瓶中加入HATU(0.054g,0.143mmol)，随后加入1,3-二氨基丙烷(1M的DMF溶液)(0.038mL,0.038mmol)。将混合物在室温搅拌24h，然后通过玻璃棉短柱过滤，通过制备型HPLC纯化(方法2)。合并含有产物的级分，减压浓缩，得到标题产物(0.007g,0.0047mmol,20％收率)，为白色固体。LCMS:m/e 1466.1(MH⁺),1.03min(方法1)。

步骤2.向乙酸((2R,3R,4R,5R,6S)-3-乙酰氧基-5-(2-((3-(2-(((2R,3S,4S,5S,6S)-5-乙酰氧基-6-(乙酰氧基甲基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酰氨基)丙基)氨基)-2-氧代乙氧基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-2-基)甲基酯(0.007g,4.7μmol)在甲醇(1mL)中的溶液中加入甲醇钠(25％的甲醇溶液)(1.093μl,4.78μmol)，将混合物在室温搅拌16h。加入3滴1N HCl，在氮气流下浓缩混合物。用DMF稀释混合物，通过玻璃棉短柱过滤，通过制备型HPLC纯化(方法8)。减压浓缩含有产物的级分，得到标题产物(1.9mg,0.0015mmol,32％收率)。LCMS:m/e 1295.86(MH⁺),1.84min(方法2)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.03-8.89(m,2H),7.85-7.59(m,10H),6.91-6.69(m,2H),5.42(br d,J＝5.8Hz,2H),5.10(br d,J＝13.4Hz,2H),4.73(br t,J＝9.8Hz,2H),4.64-4.55(m,2H),4.48-4.37(m,2H),3.93-3.85(m,2H),3.77(br d,J＝15.0Hz,2H),3.65-3.52(m,2H),5.33-3.14(m,2H),2.67-2.54(m,4H),2.27(s,6H),1.14-0.85(m,2H).

实施例4

2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)-N-(4-(2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酰氨基)丁基)乙酰胺的制备

步骤1.乙酸((2R,3R,4R,5R,6S)-3-乙酰氧基-5-(2-((4-(2-(((2R,3S,4S,5S,6S)-5-乙酰氧基-6-(乙酰氧基甲基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酰氨基)丁基)氨基)-2-氧代乙氧基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-2-基)甲基酯的制备:向含有2-(((2S,3R,4R,5R,6R)-5-乙酰氧基-6-(乙酰氧基甲基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酸(0.031g,0.043mmol)在DMF(1mL)和三乙胺(0.030mL,0.217mmol)中的溶液的烧瓶中加入HATU(0.050g,0.130mmol)，随后加入1,4-二氨基丁烷(1M的DMF溶液)(0.035mL,0.035mmol)。将混合物在室温搅拌24h，然后通过玻璃棉短柱过滤，通过制备型HPLC纯化(方法2)。合并含有产物的级分，减压浓缩，得到标题产物(0.007g,0.0047mmol,22％收率)，为白色固体。LCMS:m/e 1480.0(MH⁺),1.02min(方法1)。

步骤2.向乙酸((2R,3R,4R,5R,6S)-3-乙酰氧基-5-(2-((4-(2-(((2R,3S,4S,5S,6S)-5-乙酰氧基-6-(乙酰氧基甲基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酰氨基)丁基)氨基)-2-氧代乙氧基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-2-基)甲基酯(0.007g,4.7μmol)在甲醇(0.5mL)中的溶液中加入甲醇钠(25％的甲醇溶液)(1.270μl,5.55μmol)，将混合物在室温搅拌16h。加入3滴1N HCl，在氮气流下浓缩混合物。用DMF稀释混合物，通过玻璃棉短柱过滤，通过制备型HPLC纯化(方法6)。减压浓缩含有产物的级分，得到标题产物(2.4mg,0.0018mmol,38％收率)。LCMS:m/e 1309.09(MH⁺),1.86min(方法2)。关键1H NMR峰:¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.03(s,2H),7.89-7.58(m,10H),6.79-6.61(m,2H),2.34(s,6H),0.96(br s,4H).

羧酸中间体(7)的合成

步骤1.形成1,2,3-三唑(2)的通用操作:向含有(2S,4aR,6R,7R,8S,8aR)-7-乙酰氧基-8-叠氮基-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酸甲酯(1当量)的烧瓶中加入硫酸铜(II)五水合物(0.7当量)和抗坏血酸钠(1当量)。用DMF和水(3:1,0.075M溶液)稀释混合物。加入炔基硅烷和炔(1.2-2当量)，在室温搅拌混合物。在室温搅拌18h后，通过celite短柱过滤混合物，进一步用DCM:MeOH混合物(4:1)洗涤。在产物不太溶于DCM:MeOH混合物的情况下，进一步用DMF洗涤celite，以确保过滤器上没有残留的产物。减压浓缩混合物，然后用水(75mL)和乙醚(75mL)稀释。通过过滤收集固体，用水、然后用乙醚洗涤，得到预期的产物。

步骤2.伯酰胺(3)形成的通用操作:向含有1,2,3-三唑(2)的烧瓶中加入氨(7M的甲醇溶液,106当量)，将混悬液在室温搅拌过夜。通常，过夜反应完全，但在原料尤其不溶的情况下，加入另外的甲醇，将混合物搅拌至不存在原料(至多5天)。减压浓缩混合物，然后用DCM稀释，再浓缩两次。将粗产物不经额外纯化用于下一步。

步骤3.合成乙酰胺(4)的通用操作:向含有伯酰胺(3)的烧瓶中加入1,4-二噁烷(0.06M溶液)，随后加入N,N-二甲基乙酰胺二甲基缩醛(4当量)。将混合物加热至50℃达7.5h，然后冷却至室温，通过celite短柱过滤以除去固体(用DCM洗涤)，然后用水(100mL)稀释。收集有机层，用二氯甲烷(2×75mL)萃取水层。用硫酸钠干燥合并的有机层，过滤，减压浓缩。注意:还添加粉末状4A分子筛进行反应，但其显然不影响反应结果。将粗产物不经额外纯化用于下一步。

步骤4.合成1,2,4-三唑(5)的通用操作:向乙酰胺(4)在乙酸中的溶液(0.12-0.17M溶液)中加入取代的肼(0.65-1.0当量)，将混合物加热至65℃。3.5h后，将混合物冷却至室温，减压浓缩。用饱和碳酸氢钠水溶液(40mL)稀释残余物，用二氯甲烷(3×30mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩。通过闪式色谱法、使用20-80％EtOAc的己烷溶液梯度纯化残余物。合并产物级分，浓缩，得到1,2,4-三唑产物。

步骤5.C2烷基化成酯(6)的通用操作:将1,2,4-三唑(5)(0.291g,0.410mmol)在THF(0.08M溶液)中的溶液冷却至0℃，加入氢化钠(60％矿物油分散液)(5当量)。将混合物搅拌15分钟，加入溴乙酸乙酯(4当量)。随着冰浴融化并温热，使混合物温热至室温。将混合物搅拌17.5h后，用乙醇小心地淬灭反应，减压浓缩混合物。用水稀释残余物，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤有机层，用硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩。通过闪式色谱法、使用10-80％EtOAc的己烷溶液梯度纯化残余物。合并含有产物的级分，减压浓缩，得到烷基化产物(6)。

步骤6.合成羧酸(7)的通用操作:向酯(6)在甲醇中的混悬液(0.05M溶液)中加入甲醇钠(25％的甲醇溶液)(0.5当量)，在室温搅拌混合物。2h后，用1,4-二噁烷(5mL)稀释混合物，加入氢氧化钠(1N,5当量)。将混合物在室温搅拌2h，LC/MS显示完全转化成预期的产物。减压浓缩混合物，然后用饱和氯化铵水溶液稀释，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤有机层，用硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，得到羧酸(7)。

2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸的制备

步骤1.(2S,4aR,6R,7R,8S,8aR)-7-乙酰氧基-8-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酸甲酯的制备:使用形成1,2,3-三唑(2)的通用操作由(2S,4aR,6R,7R,8S,8aR)-7-乙酰氧基-8-叠氮基-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酸甲酯(1.5g,3.98mmol)和(4-氯-3-氟苯基)乙炔基)三甲基硅烷(1.803g,7.95mmol)制备1,2,3-三唑。分离标题化合物(1.99g,3.74mmol,94％收率)，为淡黄色固体。LCMS:m/e 532.3(MH⁺),0.96min(方法1).¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.06(s,1H),7.59(dd,J＝9.9,1.5Hz,1H),7.49-7.38(m,7H),5.89(dd,J＝11.0,9.7Hz,1H),5.52(s,1H),5.20(dd,J＝11.0,3.3Hz,1H),4.53-4.44(m,2H),4.23(d,J＝9.7Hz,1H),4.12(dd,J＝12.8,1.8Hz,1H),3.83-3.77(m,4H),1.88(s,3H).

步骤2.(2S,4aR,6R,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-7-羟基-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酰胺的制备:使用伯酰胺(3)形成的通用操作由(2S,4aR,6R,7R,8S,8aR)-7-乙酰氧基-8-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酸甲酯(1.99g,3.74mmol)形成伯酰胺。分离标题化合物(1.78g,3.74mmol,100％收率)，为灰白色固体。LCMS:m/e 475.3(MH⁺),0.84min(方法1)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.81(s,1H),7.88(dd,J＝10.7,1.9Hz,1H),7.77-7.65(m,2H),7.57(br s,1H),7.48(br s,1H),7.38-7.30(m,5H),5.54(s,1H),5.47(d,J＝5.1Hz,1H),5.12(dd,J＝10.6,3.5Hz,1H),4.56-4.48(m,1H),4.45(d,J＝3.3Hz,1H),4.21-4.07(m,2H),3.93(d,J＝9.5Hz,1H),3.89(s,1H).

步骤3.(2S,4aR,6R,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((E)-1-(二甲基氨基)乙叉基)-7-羟基-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酰胺的制备:使用合成乙酰胺(4)的通用操作进行伯酰胺(2S,4aR,6R,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-7-羟基-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酰胺(1.1g,2.316mmol)的乙酰胺形成。分离标题化合物(0.75g,1.38mmol,60％收率)，为淡黄色固体。LCMS:m/e 544.3(MH⁺),0.76min(方法1)。

步骤4.(2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-醇的制备:使用合成1,2,4-三唑(5)的通用操作环化(2S,4aR,6R,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((E)-1-(二甲基氨基)乙叉基)-7-羟基-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酰胺(0.75g,1.379mmol)。分离标题化合物(0.278g,0.423mmol,31％收率)，为灰白色泡沫。LCMS:m/e 659.2(MH⁺),1.01min(方法1)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.07(s,1H),7.62(td,J＝10.7,1.9Hz,2H),7.55-7.29(m,9H),5.40(s,1H),5.12(dd,J＝10.8,3.3Hz,1H),4.90-4.80(m,1H),4.64(d,J＝9.0Hz,1H),4.56(d,J＝2.2Hz,1H),4.48(d,J＝2.6Hz,1H),3.95(dd,J＝12.7,1.7Hz,1H),3.79(dd,J＝12.7,1.2Hz,1H),3.57(d,J＝1.1Hz,1H),2.45(s,3H).

步骤5.2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸乙酯的制备:使用C2烷基化成酯(6)的通用操作烷基化C2醇(2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-醇(0.287g,0.436mmol)。分离标题化合物(0.100g,0.134mmol,31％收率)，为灰白色固体。LCMS:m/e 745.4(MH⁺),1.09min(方法1)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.15(s,1H),7.69(s,1H),7.64(dd,J＝10.0,1.9Hz,1H),7.54-7.38(m,9H),5.49(s,1H),5.15(dd,J＝10.5,3.4Hz,1H),4.85(br t,J＝9.0Hz,1H),4.46-4.40(m,2H),4.34(dd,J＝12.8,1.3Hz,1H),4.05(dd,J＝12.7,1.7Hz,1H),4.00-3.89(m,3H),3.71-3.60(m,2H),2.46(s,3H),1.10(t,J＝7.2Hz,3H).

步骤6.2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸的制备:使用合成羧酸(7)的通用操作水解羧酸酯2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸乙酯(0.100g,0.134mmol)。分离标题化合物(0.087g,0.122mmol,91％收率)，为白色固体。LCMS:m/e 715.4(MH⁺),0.99min(方法1)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.12(s,1H),7.58(br d,J＝8.6Hz,2H),7.52-7.36(m,9H),5.44(s,1H),5.21(br dd,J＝9.6,2.5Hz,1H),4.86(br d,J＝9.0Hz,1H),4.50(br t,J＝9.4Hz,1H),4.38(d,J＝2.6Hz,1H),3.92(br d,J＝12.8Hz,1H),3.77-3.61(m,2H),3.57(s,1H),3.33(br d,J＝15.6Hz,1H),2.47(s,3H).

2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸的制备

步骤1.(2S,4aR,6R,7R,8S,8aR)-7-乙酰氧基-8-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酸甲酯的制备:使用形成1,2,3-三唑(2)的通用操作由(2S,4aR,6R,7R,8S,8aR)-7-乙酰氧基-8-叠氮基-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酸甲酯(1.5g,3.98mmol)和((4-氯-3,5-二氟苯基)乙炔基)三甲基硅烷(1.946g,7.95mmol)制备了1,2,3-三唑。分离标题化合物(2.19g,3.98mmol,100％收率)，为灰白色固体。LCMS:m/e 550.3(MH⁺),0.99min(方法1)。¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ8.07(s,1H),7.49-7.37(m,7H),5.88(t,J＝10.3Hz,1H),5.52(s,1H),5.20(dd,J＝11.0,3.3Hz,1H),4.52-4.45(m,2H),4.23(d,J＝9.6Hz,1H),4.15-4.09(m,1H),3.84-3.77(m,4H),1.88(s,3H).

步骤2.(2S,4aR,6R,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-7-羟基-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酰胺的制备:使用伯酰胺(3)形成的通用操作由(2S,4aR,6R,7R,8S,8aR)-7-乙酰氧基-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酸甲酯(2.189g,3.98mmol)形成伯酰胺。分离标题化合物(1.96g,3.98mmol,100％收率)，为灰白色固体。LCMS:m/e493.2(MH⁺),0.87min(方法1)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.93(s,1H),7.81(d,J＝8.4Hz,2H),7.62-7.43(m,2H),7.39-7.26(m,5H),5.54(s,1H),5.48(d,J＝4.8Hz,1H),5.14(dd,J＝10.7,3.6Hz,1H),4.55-4.43(m,2H),4.20-4.06(m,2H),3.93(d,J＝9.5Hz,1H),3.89(s,1H).

步骤3.(2S,4aR,6R,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((E)-1-(二甲基氨基)乙叉基)-7-羟基-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酰胺的制备:使用合成乙酰胺(4)的通用操作进行伯酰胺(2S,4aR,6R,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-7-羟基-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酰胺(1.38g,2.80mmol)的乙酰胺形成。分离粗产物，为淡黄色固体，不经额外纯化用于下一步。LCMS:m/e 562.3(MH⁺),0.78min(方法1)。

步骤4.(2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-醇:使用合成1,2,4-三唑(5)的通用操作环化(2S,4aR,6R,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((E)-1-(二甲基氨基)乙叉基)-7-羟基-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酰胺(0.66g,1.174mmol)。分离标题化合物(0.352g,0.496mmol,两步收率42％)，为灰白色泡沫。LCMS:m/e 709.4(MH⁺),1.06min(方法1)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.04(s,1H),7.75(d,J＝8.6Hz,1H),7.68-7.58(m,1H),7.50-7.28(m,8H),5.38(s,1H),5.07(dd,J＝10.7,3.2Hz,1H),4.82-4.73(m,1H),4.61(s,1H),4.55(d,J＝9.0Hz,1H),4.46(br d,J＝2.9Hz,1H),3.96-3.86(m,1H),3.69(brd,J＝12.3Hz,1H),3.52(s,1H),2.43(s,3H).

步骤5.2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸乙酯的制备:使用C2烷基化成酯(6)的通用操作烷基化C2醇(2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-醇(0.291g,0.410mmol)。分离标题化合物(0.207g,0.260mmol,63％收率)，为灰白色固体。LCMS:m/e 795.4(MH⁺),1.12min(方法1)。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.18(s,1H),7.80(br d,J＝8.4Hz,2H),7.65(dd,J＝8.7,1.0Hz,1H),7.47-7.40(m,7H),5.49(s,1H),5.13(dd,J＝10.6,3.5Hz,1H),4.86(br t,J＝9.2Hz,1H),4.41(d,J＝3.1Hz,1H),4.36(d,J＝9.0Hz,1H),4.33(dd,J＝12.8,1.1Hz,1H),4.05(dd,J＝12.7,1.2Hz,1H),4.01-3.84(m,3H),3.67(br d,J＝15.6Hz,1H),3.58(s,1H),2.45(s,3H),1.11(t,J＝7.2Hz,3H).

步骤6.2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸的制备:使用合成羧酸(7)的通用操作水解羧酸酯2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸乙酯(0.207g,0.260mmol)。分离标题化合物(0.20g,0.26mmol,100％收率)，为灰白色固体。LCMS:m/e 767.5(MH⁺),1.02min(方法1)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.59(br s,1H),9.27(s,1H),8.31-8.13(m,1H),8.09-8.02(m,1H),7.96(br d,J＝8.4Hz,1H),7.82(br d,J＝8.4Hz,2H),7.37(s,5H),5.54(s,1H),5.47(brdd,J＝10.7,3.0Hz,1H),4.87(br t,J＝9.1Hz,1H),4.62(br d,J＝9.2Hz,1H),4.43(br d,J＝2.9Hz,1H),4.12-4.03(m,1H),3.99-3.78(m,3H),3.67-3.51(m,1H),2.33(s,3H).

2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸的制备

步骤1.(2S,4aR,6R,7R,8S,8aR)-7-乙酰氧基-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酸甲酯的制备:使用形成1,2,3-三唑(2)的通用操作由(2S,4aR,6R,7R,8S,8aR)-7-乙酰氧基-8-叠氮基-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酸甲酯(1.5g,3.98mmol)和((4-氯-3,5-二氟苯基)乙炔基)三甲基硅烷(1.946g,7.95mmol)制备1,2,3-三唑。分离标题化合物(2.186g,3.98mmol,100％收率)，为灰白色固体。LCMS:m/e 550.3(MH⁺),0.99min(方法1)。¹H NMR(500MHz,氯仿-d)δ8.07(s,1H),7.49-7.37(m,7H),5.88(t,J＝10.3Hz,1H),5.52(s,1H),5.20(dd,J＝11.0,3.3Hz,1H),4.52-4.45(m,2H),4.23(d,J＝9.6Hz,1H),4.15-4.09(m,1H),3.84-3.77(m,4H),1.88(s,3H).

步骤2.(2S,4aR,6R,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-7-羟基-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酰胺的制备:使用伯酰胺(3)形成的通用操作由(2S,4aR,6R,7R,8S,8aR)-7-乙酰氧基-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酸甲酯(2.19g,3.98mmol)形成伯酰胺。分离标题化合物(1.96g,3.98mmol,100％收率)，为灰白色固体。LCMS:m/e493.2(MH⁺),0.87min(方法1)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.93(s,1H),7.81(d,J＝8.4Hz,2H),7.62-7.43(m,2H),7.39-7.26(m,5H),5.54(s,1H),5.48(d,J＝4.8Hz,1H),5.14(dd,J＝10.7,3.6Hz,1H),4.55-4.43(m,2H),4.20-4.06(m,2H),3.93(d,J＝9.5Hz,1H),3.89(s,1H).

步骤3.(2S,4aR,6R,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((E)-1-(二甲基氨基)乙叉基)-7-羟基-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酰胺的制备:使用合成乙酰胺(4)的通用操作进行伯酰胺(2S,4aR,6R,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-7-羟基-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酰胺(1.38g,2.80mmol)的乙酰胺形成。粗产物为淡黄色固体，不经额外纯化用于下一步。LCMS:m/e 562.2(MH⁺),0.79min(方法1)。

步骤4.(2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-醇的制备:使用合成1,2,4-三唑(5)的通用操作环化(2S,4aR,6R,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-N-((E)-1-(二甲基氨基)乙叉基)-7-羟基-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-6-甲酰胺(0.93g,1.655mmol)。分离标题化合物(0.442g,0.654mmol,40％收率)，为灰白色泡沫。LCMS:m/e 675.4(MH⁺),1.04min(方法1)。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.08(s,1H),7.59(d,J＝1.8Hz,1H),7.51-7.40(m,4H),7.39-7.29(m,5H),5.40(s,1H),5.12(dd,J＝10.9,3.4Hz,1H),4.84(ddd,J＝10.8,9.0,2.2Hz,1H),4.65(d,J＝9.0Hz,1H),4.61(d,J＝2.2Hz,1H),4.49(d,J＝3.1Hz,1H),3.95(dd,J＝12.7,1.7Hz,1H),3.78(dd,J＝12.8,1.3Hz,1H),3.58(d,J＝0.9Hz,1H),2.45(s,3H).

步骤5.2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸乙酯的制备:使用C2烷基化成酯(6)的通用操作烷基化C2醇(2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-醇(0.442g,0.654mmol)。分离标题化合物(0.422g,0.554mmol,85％收率)，为灰白色固体。LCMS:m/e 761.3(MH⁺),1.11min(方法1)。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.17(s,1H),7.68(br d,J＝0.9Hz,1H),7.54-7.38(m,9H),5.49(s,1H),5.15(dd,J＝10.6,3.5Hz,1H),4.91-4.79(m,1H),4.46-4.40(m,2H),4.34(dd,J＝12.8,1.1Hz,1H),4.05(dd,J＝12.8,1.5Hz,1H),4.00-3.89(m,3H),3.68(br d,J＝15.8Hz,1H),3.63(s,1H),2.46(s,3H),1.11(t,J＝7.2Hz,3H).

步骤6.2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸的制备:使用合成羧酸(7)的通用操作水解羧酸酯2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸乙酯(0.422g,0.554mmol)。分离标题化合物(0.307g,0.418mmol,75％收率)，为白色固体。LCMS:m/e 733.4(MH⁺),1.01min(方法1)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.34(s,1H),8.36-8.21(m,1H),7.84(d,J＝8.1Hz,2H),7.81-7.76(m,1H),7.75-7.69(m,1H),7.37(s,5H),5.55(s,1H),5.44(dd,J＝10.9,3.4Hz,1H),4.88-4.76(m,1H),4.57(d,J＝9.2Hz,1H),4.44(d,J＝3.5Hz,1H),4.11-3.98(m,2H),3.87(s,1H),3.71-3.51(m,1H),3.47-3.35(m,1H),2.34(s,3H).

亚苄基缩醛的二聚化和脱保护，方法1

实施例5

2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-4-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)-N-(5-(2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酰氨基)戊基)乙酰胺的制备

步骤1.2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-(5-(2-(((2S,6R,7S,8S)-8-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酰氨基)戊基)乙酰胺的制备:向含有2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸(33mg,0.046mmol)在DMF(1mL)和三乙胺(0.032mL,0.230mmol)中的溶液的烧瓶中加入HATU(52.6mg,0.138mmol)，随后加入1,5-二氨基戊烷(0.032mL,0.032mmol)。将混合物在室温搅拌17h，然后用2mL水稀释，用二氯甲烷(3×2mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(方法2)。合并含有产物的级分，减压浓缩。分离标题化合物(21mg,0.014mmol,61％收率)，为白色固体。LCMS:m/e 1498.0(MH⁺),1.16min(方法1)。

步骤2.向2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-(5-(2-(((2S,6R,7S,8S)-8-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酰氨基)戊基)乙酰胺的溶液(21mg,0.014mmol)中加入乙酸(0.5mL)和水(0.167mL)，将混合物加热至70℃。17.5h后，将混合物冷却至室温，在氮气流下浓缩。向残余物中加入0.035g碳酸钾，用0.5mL MeOH和0.25mL水稀释混合物，在室温搅拌过夜达17h。用水(1mL)稀释混合物，用二氯甲烷:氯仿:甲醇混合物(1:1:0.25,3×2.25mL)萃取。用硫酸钠干燥合并的有机层，过滤，减压浓缩。将残余物溶于DMF，通过玻璃棉短柱过滤，通过制备型HPLC纯化(方法2)。减压浓缩含有产物的级分，得到标题化合物(8.9mg,0.0067mmol,48％收率)。LCMS:m/e 1318.82(MH⁺),1.92min(方法2)。关键1H NMR峰:¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.83(s,2H),7.90-7.62(m,10H),7.56(t,J＝7.9Hz,2H),6.76-6.57(m,2H),2.29(s,6H),0.91(quin,J＝7.2Hz,4H),0.78-0.66(m,2H).IC₅₀＝0.01uM.

实施例6

2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-2-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)-N-(3-(2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-2-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酰氨基)丙基)乙酰胺的制备

步骤1.2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-(3-(2-(((2S,6R,7S,8S)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酰氨基)丙基)乙酰胺的制备:向含有2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸(0.035g,0.046mmol)在DMF(1mL)和三乙胺(0.032mL,0.228mmol)中的溶液的烧瓶中加入1,3-二氨基丙烷(1M的DMF溶液)(0.023mL,0.023mmol)，随后加入HATU(0.052g,0.137mmol)。将混合物在室温搅拌43h，然后用2mL水稀释，用二氯甲烷(3×2mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩。将残余物溶于DMF，通过玻璃棉短柱过滤，通过制备型HPLC纯化(方法2)。减压浓缩含有产物的级分。分离标题化合物(25mg,0.016mmol,70％收率)，为白色薄膜。LCMS:m/e 1573.6(MH⁺),1.19min(方法1)。

步骤2.向2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-(3-(2-(((2S,6R,7S,8S)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酰氨基)丙基)乙酰胺的溶液(25mg,0.016mmol)中加入乙酸(0.5mL)和水(0.167mL)，将混合物加热至70℃。将混合物加热17.5h后，将其冷却至室温，在氮气流下浓缩。向残余物中加入0.035g碳酸钾，用0.5mL MeOH和0.25mL水稀释混合物，在室温搅拌过夜达17h。用水(1mL)稀释混合物，用二氯甲烷:氯仿:甲醇混合物(1:1:0.25,3×2.25mL)萃取。用硫酸钠干燥合并的有机层，过滤，减压浓缩。将残余物溶于DMF，通过玻璃棉短柱过滤，通过制备型HPLC纯化(方法3)。减压浓缩含有产物的级分，得到标题化合物(13.0mg,0.0093mmol,59％收率)。LCMS:m/e 1396.8(MH⁺),2.03min(方法2)。关键¹H NMR峰:¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.93(s,2H),7.98-7.65(m,10H),6.99-6.74(m,2H),2.24(s,6H),1.06-0.90(m,2H).IC₅₀＝0.001uM.

实施例7

2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-2-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)-N-(4-(2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-2-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酰氨基)丁基)乙酰胺的制备

步骤1.2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-(4-(2-(((2S,6R,7S,8S)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酰氨基)丁基)乙酰胺的制备:向含有2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸(0.026g,0.034mmol)在DMF(1mL)和三乙胺(0.024mL,0.169mmol)中的溶液的烧瓶中加入1,4-二氨基丁烷(1M的DMF溶液)(0.017mL,0.017mmol)，随后加入HATU(0.039g,0.102mmol)。将混合物在室温搅拌43h，然后用2mL水稀释，用二氯甲烷(3×2mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩。通过制备型HPLC(方法2)纯化残余物。减压浓缩含有产物的级分。分离标题化合物(24mg,0.015mmol,88％收率)，为灰白色固体。LCMS:m/e 1573.6(MH⁺),1.19min(方法1)。

步骤2.向2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-(4-(2-(((2S,6R,7S,8S)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酰氨基)丁基)乙酰胺的溶液(24mg,0.015mmol)中加入乙酸(0.5mL)和水(0.167mL)，将混合物加热至70℃。加热17.5h后，将混合物冷却至室温，在氮气流下浓缩。向产物中加入0.035g碳酸钾，用0.5mLMeOH和0.25mL水稀释混合物。将混合物在室温搅拌5h，然后用水(1mL)稀释，用二氯甲烷萃取(3×1mL)。用硫酸钠干燥合并的有机层，过滤，减压浓缩。将残余物溶于DMF，通过制备型HPLC纯化(方法4)。减压浓缩含有产物的级分，得到标题产物(13.0mg,0.0092mmol,61％收率)。LCMS:m/e 1409.19(MH⁺),1.97min(方法2)。关键1H NMR峰:¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.02(s,2H),7.99-7.94(m,2H),7.92-7.84(m,4H),7.77(d,J＝8.2Hz,4H),6.72-6.54(m,2H),2.27(s,6H),0.90(br s,4H).IC₅₀＝0.001uM.

实施例8

2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-2-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)-N-(5-(2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-2-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酰氨基)戊基)乙酰胺的制备

步骤1.2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-(5-(2-(((2S,6R,7S,8S)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酰氨基)戊基)乙酰胺的制备:向含有2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸(37mg,0.048mmol)在DMF(1mL)和三乙胺(0.034mL,0.241mmol)中的溶液的烧瓶中加入1,5-二氨基戊烷(0.024mL,0.024mmol)，随后加入HATU(55.0mg,0.145mmol)。将混合物在室温搅拌43h，然后用2mL水稀释，用二氯甲烷(3×2mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩。将残余物溶于DMF，通过制备型HPLC纯化(方法2)。合并含有产物的级分，减压浓缩。分离标题化合物(29mg,0.018mmol,75％收率)，为白色固体。LCMS:m/e 1602.2(MH⁺),1.19min(方法1)。

步骤2.向2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-(5-(2-(((2S,6R,7S,8S)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酰氨基)戊基)乙酰胺的溶液(29mg,0.018mmol)中加入乙酸(0.5mL)和水(0.167mL)，将混合物加热至70℃。加热17.5h后，将混合物冷却至室温，在氮气流下浓缩。向残余物中加入0.035g碳酸钾，用0.5mLMeOH和0.25mL水稀释混合物，在室温搅拌5h。用水(1mL)稀释混合物，用二氯甲烷(3×1mL)萃取。用硫酸钠干燥合并的有机层，过滤，减压浓缩。将残余物溶于DMF，通过玻璃棉短柱过滤，通过制备型HPLC纯化(方法5)。减压浓缩含有产物的级分，得到标题产物(15.3mg,0.011mmol,61％收率)。LCMS:m/e 1423.11(MH⁺),2.08min(方法2)。关键1H NMR峰:¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.94(s,2H),7.95(d,J＝8.9Hz,2H),7.91-7.80(m,4H),7.72(d,J＝8.2Hz,4H),6.73-6.51(m,2H),2.28(s,6H),0.93(quin,J＝7.2Hz,4H),0.74(quin,J＝7.1Hz,2H).IC₅₀＝0.001uM.

实施例9

2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)-N-(6-(2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酰氨基)己基)乙酰胺的制备

步骤1.2-(((2R,4aS,6R,7S,8S,8aS)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-(6-(2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酰氨基)己基)乙酰胺的制备:向含有2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸(0.04g,0.055mmol)在DMF(1mL)和三乙胺(0.038mL,0.273mmol)中的溶液的烧瓶中加入己烷-1,6-二胺(1M的DMF溶液)(0.027mL,0.027mmol)，随后加入HATU(0.062g,0.164mmol)。将混合物在室温搅拌64h，然后用2mL水稀释，用二氯甲烷(3×2mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(方法9)。合并含有产物的级分，减压浓缩，得到标题产物(0.027g,0.017mmol,62％收率)，为白色固体。LCMS:m/e1546.0(MH⁺),1.19min(方法1)。

步骤2.向2-(((2R,4aS,6R,7S,8S,8aS)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-(6-(2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酰氨基)己基)乙酰胺(27mg,0.017mmol)在乙酸(0.5mL)中的溶液中加入水(0.167mL)，将混合物加热至70℃。加热19h后，将混合物冷却至室温，在氮气流下浓缩。向残余物中加入0.035g K₂CO₃，用0.5mL MeOH和0.25mL水稀释混合物。将混合物搅拌20h后，用水(1mL)稀释混合物，用二氯甲烷(2×1mL)、然后用氯仿:MeOH(4:1,2mL)萃取。用硫酸钠干燥合并的有机层，过滤，减压浓缩。将残余物溶于DMF，通过玻璃棉短柱过滤，通过制备型HPLC纯化(方法10)。减压浓缩含有产物的级分，得到标题产物(10.1mg,0.0074mmol,43％收率)。LCMS:m/e 1369.96(MH⁺),2.06min(方法2)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.98(s,2H),7.84-7.61(m,10H),6.62(br d,J＝4.9Hz,2H),5.46(d,J＝6.1Hz,2H),5.12(dd,J＝11.0,2.4Hz,2H),4.80-4.63(m,4H),4.42(br d,J＝9.5Hz,2H),3.90(br d,J＝2.7Hz,2H),3.78-2.58(m,10H),2.30(s,6H),0.96(br s,4H),0.79(br s,4H).IC₅₀＝0.006uM.

实施例10

2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)-N-(7-(2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酰氨基)庚基)乙酰胺的制备

步骤1.2-(((2R,4aS,6R,7S,8S,8aS)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-(7-(2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酰氨基)庚基)乙酰胺的制备:向含有2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸(0.04g,0.055mmol)在DMF(2mL)和三乙胺(0.038mL,0.273mmol)中的溶液的烧瓶中加入己烷-1,7-二胺(1M的DMF溶液)(0.027mL,0.027mmol)，随后加入HATU(0.062g,0.164mmol)。将混合物在室温搅拌64h，然后用2mL水稀释，用二氯甲烷(3×2mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(方法9)。合并含有产物的级分，减压浓缩，得到标题产物(0.027g,0.017mmol,62％收率)，为白色固体。LCMS:m/e1559.9(MH⁺),1.20min(方法1)。

步骤2:向2-(((2R,4aS,6R,7S,8S,8aS)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-(7-(2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酰氨基)庚基)乙酰胺(27mg,0.017mmol)在乙酸(0.5mL)中的溶液中加入水(0.167mL)，将混合物加热至70℃。19h后，将混合物冷却至室温，在氮气流下浓缩。向残余物中加入0.035g K₂CO₃，用0.5mL MeOH和0.25mL水稀释混合物。将混合物在室温搅拌20h，然后用水(1mL)稀释，用二氯甲烷(2×1mL)、然后用氯仿:MeOH(4:1,2mL)萃取。用硫酸钠干燥合并的有机层，过滤，减压浓缩。将残余物溶于DMF，通过玻璃棉短柱过滤，通过制备型HPLC纯化(方法11)。减压浓缩含有产物的级分，得到标题产物(16.2mg,0.0117mmol,69％收率)。LCMS:m/e 1382.89(MH⁺),2.14min(方法2)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.98(s,2H),7.83-7.60(m,10H),6.61(br d,J＝3.7Hz,2H),5.46(d,J＝6.1Hz,2H),5.12(dd,J＝10.7,2.7Hz,2H),4.83-4.63(m,4H),4.42(d,J＝9.5Hz,2H),3.91(dd,J＝5.5,2.7Hz,2H),3.75-2.59(m,10H),2.30(s,6H),0.98(br s,4H),0.83(br s,6H).IC₅₀＝0.01uM.

实施例11

2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)-N-(5-(2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酰氨基)戊基)乙酰胺的制备

步骤1.2-(((2R,4aS,6R,7S,8S,8aS)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-(5-(2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酰氨基)戊基)乙酰胺的制备:向含有2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸(0.04g,0.055mmol)在DMF(1mL)和三乙胺(0.038mL,0.273mmol)中的溶液的烧瓶中加入1,5-二氨基戊烷(1M的DMF溶液)(0.027mL,0.027mmol)，随后加入HATU(0.062g,0.164mmol)。将混合物在室温搅拌64h，然后用2mL水稀释，用二氯甲烷(3×2mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(方法9)。合并含有产物的级分，减压浓缩，得到标题产物(0.024g,0.0156mmol,57％收率)，为白色固体。LCMS:m/e1535.3(MH⁺),1.27min(方法1)。

步骤2.向2-(((2R,4aS,6R,7S,8S,8aS)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-(5-(2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酰氨基)戊基)乙酰胺(24mg,0.016mmol)在乙酸(0.5mL)中的溶液中加入水(0.167mL)，将混合物加热至70℃。将混合物加热67h后，将其冷却至室温，在氮气流下浓缩。向残余物中加入0.035g K₂CO₃，用0.5mLMeOH和0.25mL水稀释混合物。将混合物在室温搅拌66h，然后用水(1mL)稀释，用二氯甲烷(3×1mL)萃取。用硫酸钠干燥合并的有机层，过滤，减压浓缩。用DMF稀释残余物，通过玻璃棉短柱过滤，通过制备型HPLC纯化(方法12)。合并含有产物的级分，减压浓缩，得到标题产物(6.5mg,0.0048mmol,30％收率)。LCMS:m/e 1357.9(MH⁺),1.96min(方法2)。关键¹H NMR峰:¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.01-8.93(m,2H),7.81-7.62(m,10H),6.76-6.58(m,2H),2.29(s,6H),0.99-0.87(m,4H),0.80-0.69(m,2H).IC₅₀＝0.001uM.

实施例12

2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)-N-(4-(2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酰氨基)丁基)乙酰胺的制备

步骤1.2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-(4-(2-(((2S,6R,7S,8S)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酰氨基)丁基)乙酰胺的制备:向含有2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸(40mg,0.055mmol)在DMF(1mL)和三乙胺(0.038mL,0.273mmol)中的溶液的烧瓶中加入丁烷-1,4-二胺(1M的DMF溶液)(0.027mL,0.027mmol)，随后加入HATU(62.2mg,0.164mmol)。将混合物在室温搅拌64h，然后用2mL水稀释，用二氯甲烷(3×2mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩。通过闪式色谱法、使用0-100％MeOH的二氯甲烷溶液梯度和24g硅胶柱纯化残余物。合并含有产物的级分，减压浓缩，得到产物(0.022g,0.0145,53％收率)，为灰白色固体。LCMS:m/e 1520.1(MH⁺),1.18min(方法1)。

步骤2.向2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-(4-(2-(((2S,6R,7S,8S)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酰氨基)丁基)乙酰胺(22mg,0.014mmol)在乙酸(0.5mL)中的溶液中加入水(0.167mL)，将混合物加热至70℃。加热21h后，将混合物冷却至室温，在氮气流下浓缩。向残余物中加入0.035g K₂CO₃，用0.5mL MeOH和0.25mL水稀释混合物。将混合物在室温搅拌20h，然后用水(1mL)稀释，用二氯甲烷(3×1mL)萃取。用硫酸钠干燥合并的有机层，过滤，减压浓缩。将残余物溶于DMF，通过玻璃棉短柱过滤，通过制备型HPLC纯化(方法13)。合并含有产物的级分，减压浓缩，得到标题产物(9.8mg,0.0073mmol,52％收率)。LCMS:m/e 1341.8(MH⁺),1.94min(方法2)。关键¹H NMR峰:¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.03-8.88(m,2H),7.81-7.61(m,10H),6.86-6.60(m,2H),2.27(s,6H),0.87(br s,4H).IC₅₀＝0.001uM.

实施例13

2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)-N-(2-(2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酰氨基)乙基)乙酰胺的制备

步骤1.2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-(2-(2-(((2S,6R,7S,8S)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酰氨基)乙基)乙酰胺的制备:向含有2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸(40mg,0.055mmol)在DMF(1mL)和三乙胺(0.038mL,0.273mmol)中的溶液的烧瓶中加入乙烷-1,2-二胺(1M的DMF溶液)(0.027mL,0.027mmol)，随后加入HATU(62.2mg,0.164mmol)。将混合物在室温搅拌40h，然后用2mL水稀释混合物，用二氯甲烷(3×2mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(方法9)。合并含有产物的级分，减压浓缩，得到标题产物(0.023g,0.0154mmol,56％收率)，为白色固体。LCMS:m/e 1489.9(MH⁺),1.19min(方法1)。

步骤2.向2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-(2-(2-(((2S,6R,7S,8S)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酰氨基)乙基)乙酰胺(0.023g,0.015mmol)在乙酸(0.5mL)中的溶液中加入水(0.167mL)，将混合物加热至70℃。将混合物加热30h后，将混合物冷却至室温，在氮气流下浓缩。向残余物中加入0.035g K₂CO₃，用0.5mL MeOH和0.25mL水稀释混合物。将混合物在室温搅拌3天，然后用水(1mL)稀释，用二氯甲烷(3×1mL)萃取。用硫酸钠干燥合并的有机层，过滤，减压浓缩。将残余物溶于DMF，通过玻璃棉短柱过滤，通过制备型HPLC纯化(方法14)。合并含有产物的级分，减压浓缩，得到标题产物(6.8mg,0.0052,35％收率)。LCMS:m/e 1316.1(MH⁺),1.93min(方法2).关键¹H NMR峰:¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.94(dd,J＝5.4,2.5Hz,2H),7.79-7.58(m,10H),7.01(br d,J＝1.3Hz,2H),2.26(s,6H).IC₅₀＝0.001uM.

实施例14

2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-2-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)-N-(4-((2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-2-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酰氨基)甲基)苄基)乙酰胺的制备

步骤1.2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-(4-((2-(((2S,6R,7S,8S)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酰氨基)甲基)苄基)乙酰胺的制备:向含有2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸(0.021g,0.027mmol)在DMF(1mL)和三乙胺(0.019mL,0.137mmol)中的溶液的烧瓶中加入HATU(0.031g,0.082mmol)，随后加入对-苯二甲基二胺(p-xylylenediamine)(1M的DMF溶液)(0.027mL,0.014mmol)。将混合物在室温搅拌17.5h，然后用2mL水稀释，用二氯甲烷(3×2mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩。将残余物溶于DMF，通过制备型HPLC纯化(方法25)。合并含有产物的级分，减压浓缩，得到标题产物(0.005g,0.0031mmol,23％收率)，为白色固体。LCMS:m/e 1635.9(MH⁺),1.19min(方法1)。

步骤2.向含有粗品2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-(4-((2-(((2S,6R,7S,8S)-6-(1-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酰氨基)甲基)苄基)乙酰胺(5mg,3.1μmol)的烧瓶中加入乙酸(0.5mL)和水(0.167mL)。将混合物加热至70℃达16h，然后将混合物冷却至室温，减压浓缩。向混合物中加入35mg碳酸钾，用0.5mL甲醇和0.25mL水稀释，然后在室温搅拌4h。用水(2mL)稀释混合物，用二氯甲烷(3×3mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩。将残余物溶于DMF，通过制备型HPLC纯化。减压浓缩含有产物的级分，得到标题产物(1.3mg,0.891μmol,29％收率)。LCMS:m/e 1457.12(MH⁺),2.21min(方法2).关键¹H NMR峰:¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.06(s,2H),7.97(d,J＝8.2Hz,2H),7.92-7.86(m,4H),7.79(br d,J＝8.2Hz,4H),7.35-7.19(m,2H),6.79(s,4H),2.25(s,6H).

实施例15

2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)-N-(4-(2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)-N-甲基乙酰氨基)丁基)-N-甲基乙酰胺的制备

步骤1.2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-(4-(2-(((2S,6R,7S,8S)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-甲基乙酰氨基)丁基)-N-甲基乙酰胺的制备:将2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-(4-(2-(((2S,6R,7S,8S)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酰氨基)丁基)乙酰胺(0.03g,0.020mmol)在THF(2mL)中的溶液冷却至0℃，加入氢化钠(60％分散液)(4.74mg,0.118mmol)。将混合物搅拌15分钟，加入碘甲烷(4.94μl,0.079mmol)。随着冰浴融化并温热，混合物温热至室温。搅拌15h后，小心地用水(5mL)稀释混合物，用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。用盐水洗涤有机层，用硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩。将残余物溶于DMF，通过制备型HPLC纯化(方法15)。减压浓缩含有产物的级分，得到标题产物(0.012g,0.0078mmol,39％收率)，是澄清的薄膜。LCMS:m/e 1550.3(MH⁺),1.20min(方法1)。

步骤2.向2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-(4-(2-(((2S,6R,7S,8S)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-甲基乙酰氨基)丁基)-N-甲基乙酰胺(0.012g,7.8μmol)在乙酸(0.5mL)中的溶液中加入水(0.167mL)，将混合物加热至70℃。将混合物加热17h后，将其冷却至室温，在氮气流下浓缩。向残余物中加入0.035g K₂CO₃，用0.5mL MeOH和0.25mL H₂O稀释混合物。将混合物在室温搅拌4h，然后在氮气流下浓缩，用水(1mL)稀释，用二氯甲烷(3×1mL)萃取。用硫酸钠干燥合并的有机层，过滤，减压浓缩。将残余物溶于DMF，通过制备型HPLC纯化(方法11)。减压浓缩含有产物的级分，得到标题化合物(0.0045g,0.0033mmol,42％收率)。LCMS:m/e 1368.98(MH⁺),2.14min(方法2)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.10(s,2H),8.01(d,J＝8.2Hz,2H),7.96-7.89(m,4H),7.83(br d,J＝8.2Hz,4H),7.40-7.21(m,2H),6.83(s,4H),5.50(br d,J＝6.1Hz,1H),5.19-5.10(m,2H),4.84(br t,J＝9.2Hz,2H),4.69(br s,1H),4.50(br d,J＝9.2Hz,2H),4.07-3.17(m,14H),2.29(s,6H).IC₅₀＝0.005uM.

实施例16

(2R,3R,4S,5R,6S)-4-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-5-((10-(((2R,3S,4R,5S,6S)-4-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)癸基)氧基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-醇的制备

步骤1.1-(((2R,4aS,6R,7S,8S,8aS)-8-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-10-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)硅烷的制备:将(2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-醇(43mg,0.065mmol)在THF(2mL)中的溶液冷却至0℃，加入氢化钠(60％矿物油分散液)(13.07mg,0.327mmol)。将混合物搅拌15分钟，加入1,10-二碘癸烷溶液(1M的THF溶液)(0.033mL,0.033mmol)。在0℃搅拌混合物，随着冰浴融化并温热，使混合物温热至室温。将混合物搅拌6天后，小心地用水(10mL)稀释混合物，用二氯甲烷(3×10mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩。将粗产物(37mg,0.025mmol,77％收率)不经额外纯化用于下一步。LCMS:m/e 1453.9(MH⁺),1.31min(方法1)。

步骤2.向含有粗品1-(((2R,4aS,6R,7S,8S,8aS)-8-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-10-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)癸烷(37mg,0.025mmol)的小瓶中加入乙酸(0.5mL)和水(0.167mL)。将混合物加热至70℃，然后在氮气流下浓缩。向残余物中加入35mg碳酸钾，用0.5mL甲醇和0.25mL水稀释混合物，在室温搅拌2h。用水(1mL)稀释混合物，用二氯甲烷(3×1mL)萃取。用硫酸钠干燥合并的有机层，过滤，减压浓缩。将残余物溶于DMF，通过制备型HPLC纯化(方法18)。减压浓缩含有产物的级分，得到标题化合物。LCMS:m/e1277.0(MH⁺),2.65min(方法2)。关键¹H NMR峰。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.91(br s,2H),7.86(br d,J＝10.4Hz,2H),7.79-7.48(m,10H),2.30(s,6H),0.81(br d,J＝5.0Hz,4H),0.65-0.41(m,12H).IC₅₀＝10uM.

实施例17

(2R,3R,4S,5R,6S)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-5-((8-(((2R,3S,4R,5S,6S)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)辛基)氧基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-醇的制备

步骤1.1-(((2R,4aS,6R,7S,8S,8aS)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-8-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)辛烷的制备:将(2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-醇(50mg,0.074mmol)在THF(2mL)中的溶液冷却至0℃，加入氢化钠(60％矿物油分散液)(0.370mL,0.370mmol)。将混合物搅拌15分钟，加入1,8-二碘辛烷溶液(0.044mL,0.044mmol)。在0℃搅拌混合物，随着冰浴融化并温热，使混合物温热至室温。搅拌7天后，蒸发溶剂。再加入1mL THF，然后加入1,8-二碘辛烷(0.044mL,0.044mmol)。再搅拌4天后，再次用1mL THF稀释混合物，再加入1,8-二碘辛烷(0.044mL,0.044mmol)。搅拌3天后，用水(10mL)稀释混合物，用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。用盐水洗涤有机层，用硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。将包括具有预期产物的m/z的峰的产物粗混合物不经额外纯化用于下一步。LCMS:m/e 1462.3(MH⁺),1.29min(方法1)。

步骤2.向含有上述粗混合物的烧瓶中加入乙酸(0.5mL)和水(0.167mL)。将混合物加热至70℃达16h。将混合物冷却至室温，然后减压浓缩。向残余物中加入碳酸钾(35mg)，用0.5mL甲醇和0.25mL水稀释混合物。将混合物在室温搅拌4h，然后用水(2mL)稀释，用二氯甲烷(3×3mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩。将残余物溶于DMF，通过制备型HPLC纯化(方法19)。合并含有产物的级分，减压浓缩，得到标题产物(3.7mg,0.0029mmol,两步收率8％)。LCMS:m/e 1283.09(MH⁺),2.63min(方法2)。关键¹H NMR峰。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.05(s,2H),7.87-7.70(m,8H),7.68-7.47(m,2H),2.34(s,6H),0.81-0.68(m,4H),0.58-0.37(m,8H).IC₅₀＝2uM.

实施例18

丁烷-1,4-二基二氨基甲酸(2R,3S,4R,5S,6S)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-3-基酯((2S,3R,4S,5R,6R)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)-4-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)四氢-2H-吡喃-3-基)酯的制备

步骤1A.(4-氨基丁基)氨基甲酸(2S,4aR,6S,7R,8S,8aR)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基-8-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基酯的制备:向(2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基-8-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-醇(28mg,0.042mmol)在d-氯仿(2mL)中的溶液中加入DMAP(0.5mg,4.25μmol)，随后加入碳酸二吡啶-2-基酯(45.9mg,0.212mmol)。将混合物加热至50℃达3h，然后加入1,4-二氨基丁烷(0.043mL,0.425mmol)，在室温搅拌混合物。将混合物搅拌22h后，将其用水(3mL)稀释，用二氯甲烷(3×3mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩。LC/MS显示为包括预期产物的m/z的产物混合物。粗产物不经额外纯化用于步骤2。LCMS:m/e 773.8(MH⁺),0.83min(方法1)。

步骤1B.碳酸(2S,4aR,6S,7R,8S,8aR)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基-8-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基酯吡啶-2-基酯的制备:向(2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基-8-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-醇(28mg,0.042mmol)在d-氯仿(2mL)中的溶液中加入DMAP(0.5mg,4.25μmol)，随后加入碳酸二吡啶-2-基酯(45.9mg,0.212mmol)。将混合物加热至50℃达2.5h，然后冷却至室温。用饱和氯化铵水溶液稀释混合物，用二氯甲烷(3×10mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩。粗产物不经额外纯化用于步骤2。

步骤2.丁烷-1,4-二基二氨基甲酸(2S,4aR,6S,7R,8S,8aR)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基-8-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基酯((2S,6R,7S,8R)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基-8-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)酯的制备:

向含有粗品碳酸(2S,4aR,6S,7R,8S,8aR)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基-8-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基酯吡啶-2-基酯(32.8mg,0.042mmol)的烧瓶中加入含有(4-氨基丁基)氨基甲酸(2S,4aR,6S,7R,8S,8aR)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基-8-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基酯(32.5mg,0.042mmol)的粗混合物在d-氯仿(2mL)中的溶液的烧瓶中加入DMAP(0.26mg,2.100μmol)。将混合物在室温搅拌18h，然后用水稀释，用二氯甲烷(3×10mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩。通过闪式色谱法、使用0-50％EtOAc的DCM溶液梯度和24g硅胶柱纯化残余物。合并含有产物的级分，减压浓缩，得到标题产物(24mg,0.016mmol,38％收率)，为灰白色固体。LCMS:m/e 1460.3(MH⁺),1.19min(方法1)。

步骤3.向丁烷-1,4-二基二氨基甲酸(2S,4aR,6S,7R,8S,8aR)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基-8-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基酯((2S,6R,7S,8R)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基-8-(4-(3,4,5-三氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)酯(0.024g,0.016mmol)中的溶液中加入乙酸(0.5mL)和水(0.167mL)，将混合物加热至70℃达20.5h。将混合物冷却至室温，在氮气流下浓缩。向残余物中加入0.035g碳酸钾，用0.5mL MeOH和0.25mL水稀释混合物。将混合物在室温搅拌3h，然后在氮气流下浓缩，用DMF稀释，通过玻璃棉短柱过滤，通过制备型HPLC纯化(方法20)。减压浓缩含有产物的级分，得到标题产物(8.2mg,0.0064mmol,40％收率)。LCMS:m/e 1281.04(MH⁺),1.91min(方法2).关键¹H NMR峰:¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.49(br s,2H),7.75-7.55(m,10H),2.18(s,6H),0.75(br s,4H).IC₅₀＝0.019uM.

实施例19

丙烷-1,4-二基二氨基甲酸(2R,3S,4R,5S,6S)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基酯((2S,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)酯的制备

步骤1A.(3-氨基丙基)氨基甲酸(2S,4aR,6S,7R,8S,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基酯的制备:向(2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-醇(0.063g,0.093mmol)在d-氯仿(2mL)中的溶液中加入DMAP(1.1mg,9.32μmol)，随后加入碳酸二吡啶-2-基酯(0.101g,0.466mmol)。将混合物加热至50℃达2h，然后冷却至室温。向混合物中加入丙烷-1,3-二胺(0.078mL,0.932mmol)，将其在室温搅拌4h。将混合物用饱和氯化铵水溶液稀释，用二氯甲烷(3×10mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩。得到产物混合物，其包括具有标题化合物的m/z的峰。将粗产物不经额外纯化用于步骤2。LCMS:m/e 777.3(MH⁺),0.84min(方法1)。步骤1B.碳酸(2S,4aR,6S,7R,8S,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基酯吡啶-2-基酯的制备:向(2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-醇(0.05g,0.074mmol)在d-氯仿(3mL)中的溶液中加入DMAP(0.9mg,7.40μmol)，随后加入碳酸二吡啶-2-基酯(0.080g,0.370mmol)。将混合物加热至50℃达2h，然后冷却至室温。将混合物用饱和氯化铵水溶液稀释，用二氯甲烷(3×10mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩，得到标题产物。将粗产物不经额外纯化用于步骤2。

步骤2.丙烷-1,3-二基二氨基甲酸(2R,3S,4R,5S,6S)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基酯((2S,4aR,6S,7R,8S,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)酯的制备:向包含粗品(3-氨基丙基)氨基甲酸(2S,4aR,6S,7R,8S,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基酯(0.072g,0.093mmol)和碳酸(2S,4aR,6S,7R,8S,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基酯吡啶-2-基酯(0.059g,0.074mmol)在d-氯仿(3mL)中的溶液的烧瓶中加入DMAP(0.9mg,7.40μmol)，将混合物在室温搅拌18h。将混合物用水(3mL)稀释，用二氯甲烷(3×3mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩。将残余物溶于DMF，通过玻璃棉短柱过滤，通过制备型HPLC纯化。合并含有产物的级分，减压浓缩，得到包括标题化合物的产物混合物(54mg)。LCMS:m/e 1479.5(MH⁺),1.22min(方法1)。

步骤3.将来自步骤2的产物混合物(54mg)在乙酸(0.5mL)和水(0.167mL)中的溶液加热至70℃。15.5h后，将混合物冷却至室温，在氮气流下浓缩。向残余物中加入0.035g碳酸钾，然后用0.5mL MeOH和0.25mL水稀释混合物。将混合物在室温搅拌1h后，进一步用1mL甲醇稀释，加热至50℃。加热1h后，将混合物冷却至室温，在室温搅拌过夜。然后将混合物加热至50°达2h，冷却至室温，在氮气流下浓缩。用DMF稀释残余物，通过玻璃棉短柱过滤以除去固体。通过制备型HPLC纯化DMF溶液(方法21)。合并含有产物的级分，减压浓缩，得到标题产物(29.0mg,0.022mmol,三步收率30％)。LCMS:m/e 1299.2(MH⁺),2.09min(方法2)。关键¹HNMR峰:¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.57(br s,2H),7.79-7.50(m,10H),2.14(s,6H),0.94(brs,2H).IC₅₀＝0.11uM.

实施例20

乙烷-1,2-二基双(甲基氨基甲酸)(2R,3S,4R,5S,6S)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基酯((2S,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)酯的制备

步骤1A.甲基(2-(甲基氨基)乙基)氨基甲酸(2S,4aR,6S,7R,8S,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基酯的制备:向(2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-醇(0.065g,0.096mmol)在d-氯仿(2mL)中的溶液中加入DMAP(1.2mg,9.62μmol)，随后加入碳酸二吡啶-2-基酯(0.104g,0.481mmol)。将混合物加热至50℃达2h，然后冷却至室温。用氯化铵水溶液稀释混合物，用二氯甲烷(3×7mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩。将残余物溶于d-氯仿(2mL)，加入DMAP(1.175mg,9.62μmol)，然后加入N1,N2-二甲基乙烷-1,2-二胺(0.042g,0.481mmol)。将混合物在室温搅拌2h，然后用水稀释，用二氯甲烷(3×5mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩。将包括标题产物的粗产物混合物不经额外纯化用于步骤2。LCMS:m/e 791.3(MH⁺),0.88min(方法1)。

步骤1B.碳酸(2S,4aR,6S,7R,8S,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基酯吡啶-2-基酯的制备:向(2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-醇(0.05g,0.074mmol)在d-氯仿(2mL)中的溶液中加入DMAP(0.9mg,7.40μmol)，随后加入碳酸二吡啶-2-基酯(0.080g,0.370mmol)。将混合物加热至50℃。加热3h后，将混合物冷却至室温，用氯化铵水溶液稀释，用二氯甲烷(3×7mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩。将粗产物不经额外纯化用于步骤2。

步骤2.乙烷-1,2-二基双(甲基氨基甲酸)(2R,4aS,6R,7S,8R,8aS)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基酯((2S,4aR,6S,7R,8S,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)酯的制备:向粗品甲基(2-(甲基氨基)乙基)氨基甲酸(2S,4aR,6S,7R,8S,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基酯(0.076g,0.096mmol)和碳酸(2S,4aR,6S,7R,8S,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基酯吡啶-2-基酯(0.059g,0.074mmol)在d-氯仿(2mL)中的溶液中加入DMAP(0.904mg,7.40μmol)。将混合物加热至50℃达15.5h，然后用水稀释，用二氯甲烷(3×10mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层，过滤，减压浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物(方法2)。合并含有标题产物的级分，减压浓缩。浓缩后，形成产物混合物，此时benzylidine缩醛保护基部分裂解。将8mg产物混合物不经额外纯化用于步骤3。LCMS:m/e 1493.4(MH⁺),1.25min(方法1)。

步骤3.向含有来自步骤2的产物混合物的小瓶中加入乙酸(0.5mL)和水(0.167mL)，将混合物加热至70℃。将混合物加热18.5h后，将其冷却至室温。在氮气流下浓缩混合物，然后用0.5mL甲醇和0.25mL水稀释，加入0.035g碳酸钾。将混合物在室温搅拌24h，然后在氮气流下浓缩。用DMF稀释残余物，通过玻璃棉短柱过滤，通过制备型HPLC纯化。减压浓缩含有产物的级分，得到标题产物(3.2mg,0.0024mmol,三步收率3％)。LCMS:m/e1313.06(MH⁺),2.21min(方法2)。关键¹H NMR峰:¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.84-8.60(m,2H),7.87-7.47(m,10H),2.31-2.08(m,12H).

实施例21

2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)-N-(2-(2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)-N-甲基乙酰氨基)乙基)-N-甲基乙酰胺的制备

步骤1.2-(((2R,4aS,6R,7S,8S,8aS)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-(2-(2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-甲基乙酰氨基)乙基)-N-甲基乙酰胺的制备:向含有2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸(0.168g,0.229mmol)的小瓶中加入DMF(2mL)、TEA(0.128mL,0.916mmol)、N1,N2-二甲基乙烷-1,2-二胺(0.092mL,0.092mmol)和1-丙烷膦酸酐(T3P,50％的EtOAc溶液)(0.340mL,0.572mmol)。将混合物在室温搅拌17h，然后再加入0.046mLN1,N2-二甲基乙烷-1,2-二胺，将混合物在室温搅拌24h。再加入0.092mL N1,N2-二甲基乙烷-1,2-二胺，将混合物在室温再搅拌24h。用水(10mL)稀释混合物，用乙酸乙酯(2×10mL)萃取。用水(3×10mL)洗涤有机层，然后用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。通过闪式色谱法、使用0-100％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液梯度纯化残余物。合并含有标题产物的级分，减压浓缩，得到产物(0.095g,0.0625mmol,55％收率)，为灰白色固体。LCMS:m/e 1521.4(MH⁺),1.21min(方法1)。

步骤2.向含有2-(((2R,4aS,6R,7S,8S,8aS)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-(2-(2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-N-甲基乙酰氨基)乙基)-N-甲基乙酰胺(0.09g,0.059mmol)的烧瓶中加入乙酸(1mL)和水(0.33mL)，将混合物加热至70℃。将混合物加热19.5h后，将混合物冷却至室温，减压浓缩。再用DCM稀释残余物并浓缩两次。用1mL甲醇和0.5mL水稀释残余物，加入0.07g碳酸钾。将混合物在室温搅拌5h，然后减压浓缩，用DMF稀释，通过玻璃棉短柱过滤以除去固体。通过制备型HPLC纯化滤液(方法22)。合并含有产物的级分，减压浓缩，得到标题产物(46.6mg,0.035mmol,59％收率)。LCMS:m/e1341.18(MH⁺),2.08min(方法2)。关键¹H NMR峰:¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.11-8.95(m,2H),7.97-7.44(m,10H),2.85(s,3H),2.69(s,3H),2.32-2.17(m,6H).IC₅₀＝0.002uM.

实施例22

2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)-1-(4-(2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酰基)哌嗪-1-基)乙烷-1-酮的制备

步骤1.2-(((2R,4aS,6R,7S,8S,8aS)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-1-(4-(2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酰基)哌嗪-1-基)乙烷-1-酮的制备:向含有2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸(0.125g,0.170mmol)的小瓶中加入DMF(2mL)、TEA(0.095mL,0.681mmol)、哌嗪(0.5M的DMF:THF(1:1)溶液)(0.136mL,0.068mmol)和1-丙烷膦酸酐(T3P,50％的EtOAc溶液)(0.253mL,0.426mmol)。将混合物在室温搅拌17h，然后用水(20mL)稀释，用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。用水(3×20mL)洗涤有机层，然后用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。将粗产物不经额外纯化用于下一步。LCMS:m/e 1517.6(MH⁺),1.18min(方法1)。

步骤2.向含有2-(((2R,4aS,6R,7S,8S,8aS)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-1-(4-(2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酰基)哌嗪-1-基)乙烷-1-酮(129mg,0.085mmol)的烧瓶中加入乙酸(2mL)和水(0.667mL)，将混合物加热至70℃。将混合物加热18h后，将其冷却至室温，减压浓缩。用5mL甲醇和2.5mL水稀释残余物，加入0.07g碳酸钾。将混合物在室温搅拌24h，然后减压浓缩。用DMF稀释残余物，通过玻璃棉短柱过滤，通过制备型HPLC纯化残余物(方法23)。减压浓缩含有产物的级分，得到标题产物(46.1mg,0.034mmol,两步收率40％)。LCMS:m/e 1339.3(MH⁺),2.02min(方法2)。关键¹H NMR峰.¹HNMR(600MHz,DMSO-d6)δ9.07(br s,2H),7.90-7.79(m,6H),7.77(d,J＝8.6Hz,2H),7.73(dd,J＝8.6,2.2Hz,2H),5.43(d,J＝6.0Hz,2H),5.19(br d,J＝10.3Hz,2H),4.85-4.69(m,2H),4.65(t,J＝5.5Hz,2H),4.42(br d,J＝7.9Hz,2H),4.22-4.05(m,1H),3.90(br s,2H),3.81(br s,3H),3.70(t,J＝6.5Hz,2H),3.47-3.37(m,4H),2.32(br s,6H).IC₅₀＝0.004uM.

实施例23

2-(((2R,3S,4R,5S,6S)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)-1-(4-(2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5-羟基-6-(羟基甲基)四氢-2H-吡喃-3-基)氧基)乙酰基)-1,4-二氮杂环庚烷-1-基)乙烷-1-酮的制备

步骤1.2-(((2R,4aS,6R,7S,8S,8aS)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-1-(4-(2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酰基)-1,4-二氮环庚烷-1-基)乙烷-1-酮的制备:向含有2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酸(0.05g,0.068mmol)的烧瓶中加入DMF(1mL)、TEA(0.038mL,0.273mmol)、高哌嗪(1M的DMF溶液)(0.034mL,0.034mmol)和1-丙烷膦酸酐(T3P,50％的EtOAc溶液)(0.101mL,0.170mmol)。将混合物在室温搅拌，然后用水(10mL)稀释，用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。用水(3×20mL)、然后用盐水洗涤有机层，用硫酸钠干燥。通过过滤除去干燥剂，减压浓缩滤液。得到粗产物(0.048g,0.031mmol,91％收率)，为灰白色固体。LCMS:m/e1533.5(MH⁺),1.21min(方法1)。

步骤2.向含有2-(((2R,4aS,6R,7S,8S,8aS)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)-1-(4-(2-(((2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-(4-(4-氯-3,5-二氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)-6-(1-(2,5-二氯苯基)-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-苯基六氢吡喃并[3,2-d][1,3]二噁烯-7-基)氧基)乙酰基)-1,4-二氮环庚烷-1-基)乙烷-1-酮(0.048g,0.031mmol)的烧瓶中加入乙酸(1mL)和水(0.33mL)。将混合物加热至70℃达15h，然后冷却至室温，减压浓缩。用2mL MeOH和0.5mL水稀释残余物，加入0.07g碳酸钾。将混合物在室温搅拌过夜，然后减压浓缩。用DMF稀释残余物，通过玻璃棉短柱过滤以除去固体。通过制备型HPLC纯化滤液(方法24)。减压浓缩含有产物的级分，得到标题产物(15.1mg,0.0111mmol,36％收率)。LCMS:m/e 1353.16(MH⁺),2.04min(方法2).¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.09-8.94(m,2H),7.94-7.60(m,12H),5.44-5.35(m,2H),5.18-5.08(m,2H),4.78-4.58(m,4H),4.41-4.26(m,2H),3.91-3.80(m,2H),3.64(br d,J＝6.1Hz,2H),2.50(s,14H),2.31-2.22(m,6H),1.26-1.02(m,2H).IC₅₀＝0.004uM.

Claims

1.式I的化合物或其药学上可接受的盐：

其中：

R¹是((R³)(R⁴)N)羰基或Ar²；

L¹是亚烷基；

L²是亚烷基或-CH₂-Ph-CH₂-；

或N(R⁵)-L²-N(R⁵)一起是哌嗪基或高哌嗪基；

L³是亚烷基；

R³是氢、烷基、环烷基、苄基或卤代苄基；

R⁴是氢或烷基；

R⁵是氢或烷基；

R⁶是氢或烷基；

R⁷是氢或烷基；

R⁸是氢、烷基、烷基羰基或烷基磺酰基；

R⁹是氢或烷基；

R¹⁰是氰基、卤素、烷氧基或(R¹¹)(R¹²)N；

R¹¹是氢或烷基；

R¹²是氢或烷基；

R¹³是氢、烷基、烷基羰基、烷氧基羰基或烷基磺酰基；

R¹⁴是氢或烷基；

R¹⁵是氢、烷基、烷基羰基或烷基磺酰基；

R¹⁶是氢或烷基；

或Ar³是(烷基SO₂)苯基、(烷基SO₂)(卤代)苯基、(氨基SO₂)苯基、(二烷基氨基SO₂)苯基、((烷基NHSO₂)烷基)苯基、(吡咯基)苯基、(咪唑基)苯基、(噁唑基)苯基、(四唑基)苯基、((吡啶基)甲基)苯基、苯氧基苯基、(苄基氧基)苯基、((甲基)噻唑基)苯基、(噻唑基)苯磺酰氨基、((甲基)噻二唑基)苯磺酰氨基、(甲基)苯并噻唑酮基或氟吡唑并嘧啶基。

2.权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中R¹是Ar²；Ar¹是三唑基，其被0-3个选自以下的取代基取代：烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、(羧基)烷基、(烷氧基羰基)烷基、(H₂NCO)烷基、(Ar³)烷基、环烷基、羟基环烷基、烯基、烷氧基、烷硫基、烷基磺酰基、羧基、烷氧基羰基、(烷基NH)羰基、(((R⁶)(R⁷)N)烷基NH)羰基、((吡啶基)烷基NH)羰基、(R⁸)(R⁹)N和Ar³；Ar²是苯基或吡啶基，且被0-5个选自以下的取代基取代：氰基、卤素、烷基、(R¹⁰)烷基、卤代烷基、环烷基、(R¹⁰)环烷基、烷氧基、环烷氧基、卤代烷氧基和(R¹³)(R¹⁴)N；且Ar³是苯基或苯并噻唑基，且被0-5个选自以下的取代基取代：氰基、硝基、卤素、烷基、卤代烷基、环烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷硫基、羧基、烷氧基羰基、CONH₂和(R¹⁵)(R¹⁶)N。

3.权利要求1的化合物，其中R¹是Ar²；R²是羟基；Ar¹是三唑基，其被0-2个选自以下的取代基取代：烷基、卤代烷基和Ar³；Ar²是苯基，其被0-5个卤素取代基取代；且Ar³是苯基，其被0-5个选自以下的取代基取代：卤素、烷基、卤代烷基、环烷基、烷氧基和卤代烷氧基。

4.权利要求1的化合物，其中R¹是Ar²。

5.权利要求1的化合物，其中Ar¹是三唑基，其被0-3个选自以下的取代基取代：烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、(羧基)烷基、(烷氧基羰基)烷基、(H₂NCO)烷基、(Ar³)烷基、环烷基、羟基环烷基、烯基、烷氧基、烷硫基、烷基磺酰基、羧基、烷氧基羰基、(烷基NH)羰基、(((R⁶)(R⁷)N)烷基NH)羰基、((吡啶基)烷基NH)羰基、(R⁸)(R⁹)N和Ar³。

6.权利要求1的化合物，其中Ar¹是三唑基，其被0-2个选自以下的取代基取代：烷基、卤代烷基和Ar³。

7.权利要求1的化合物，其中Ar²是苯基或吡啶基，且被0-5个选自以下的取代基取代：氰基、卤素、烷基、(R¹⁰)烷基、卤代烷基、环烷基、(R¹⁰)环烷基、烷氧基、环烷氧基、卤代烷氧基和(R¹³)(R¹⁴)N。

8.权利要求1的化合物，其中Ar²是苯基，其被0-5个卤素取代基取代。

9.权利要求1的化合物，其中Ar³是苯基，其被0-5个选自以下的取代基取代：氰基、卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基和卤代烷氧基。

10.组合物，所述组合物包含治疗有效量的权利要求1-9中任意一项的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。

11.权利要求1-9中任意一项的化合物或其药学上可接受的盐，用于疗法。

12.权利要求1-9中任意一项的化合物或其药学上可接受的盐，用于治疗以下疾病的方法：器官(包括肝、肾、肺、心脏和皮肤)的纤维化、肝疾病和病症(包括急性肝炎、慢性肝炎、肝纤维化、肝硬化、门静脉高压、再生衰竭、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肝功能减退和肝血流量异常)、细胞增殖性疾病、癌症和病症(包括实体瘤、实体瘤转移、血管纤维瘤、骨髓瘤、多发性骨髓瘤、卡波西肉瘤、白血病、慢性淋巴细胞白血病(CLL))和癌细胞的侵入性转移)、炎症性疾病和病症(包括银屑病、肾病和肺炎)、胃肠道疾病和病症(包括肠易激惹综合征(IBS)、炎症性肠病(IBD)和胰腺分泌异常)、肾疾病和病症、与泌尿道相关的疾病和病症(包括良性前列腺增生或与神经性膀胱疾病、脊髓肿瘤、椎间盘疝、脊椎管狭窄相关的症状、和源自糖尿病的症状)、下泌尿道疾病和病症(包括下泌尿道阻塞)、下泌尿道的炎症性疾病和病症(包括排尿困难和尿频)、胰腺疾病和病症、与血管生成异常相关的疾病和病症(包括动脉阻塞)、硬皮病、与脑相关的疾病和病症(包括脑梗塞和脑出血)、神经性疼痛和周围神经病、眼疾病和病症(包括年龄相关性黄斑变性(AMD)、糖尿病性视网膜病变、增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)、瘢痕性类天疱疮和青光眼滤过手术瘢痕形成)，所述方法包括给需要其的患者施用治疗有效量。

13.权利要求12的用途，其中所述疾病或病症是肾纤维化、肺纤维化、肝纤维化、动脉纤维化或系统性硬化。