CN113155251A - 一种兰科植物种子重量的测定方法 - Google Patents
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Abstract
本发明为一种兰科植物种子重量的测定方法，目前对兰科植物种子重量的测定大多使用精密仪器称量，然精密仪器价格高，这种方式无法广泛应用于普通工厂或实验室。本方法为解决在无精密仪器的条件下，测定兰科植物种子重量的难题。主要包括四个步骤：万分之一天平称量、种子沉水均匀、装置分量悬浮液、计数统计单粒种子重量。本方法中使用的万分之一天平、分量装置(10ml离心管切割成1ml勺子)均价值不高且易制作，使用本方法测定兰科植物种子重量，大大节约了时间和成本，准确度高。
Description
技术领域
本发明涉及植物科学领域，尤其涉及一种兰科植物种子重量的测定方法。
背景技术
兰科植物单颗蒴果内种子成千上万且轻如尘埃，对于测量兰科植物单粒种子的重量，通常使用精密度高的仪器(如：十万分之一分析天平)，该方法准确度高，但十万分之一分析天平的价格高昂，对大多数普通实验室或工厂来说较难实现；另外，若将种子交于专门的工厂测量又会增加生产成本，为在保障测量结果准确度的前提下解决现有测量方式的成本高、周期长的问题。
发明内容
发明的目的：为了提供效果更好的一种兰科植物种子重量的测定方法，具体目的见具体实施部分的多个实质技术效果。
为了达到如上目的，本发明采取如下技术方案：
一种兰科植物种子重量的测定方法，其特征在于，利用如下列步骤进行：
a、采集同一批次的种子；
b、将种子分为三组使用万分之一天平使用锡纸称量，称量结束使用镊子取出锡纸，折叠后标记保存，三组分别标记为A、B、C；
c、配置次氯酸钠溶液与量取工具误差测试；
利用十分之一次氯酸钠溶液有助于种子快速沉水；将三组称量好的种子分别倒入三瓶50ml的十分之一次氯酸钠溶液内，十分之一次氯酸钠溶液为有效氯10％的次氯酸钠溶液，静置等待种子全部沉水；种子全部沉水后，摇匀后取1ml悬浮液，每瓶溶液中取三个重复样，分别倒入干净的培养皿内，标记备用；A组三个重复取样标记为：A1、A2、A3；B组三个重复取样标记为：B1、B2、B3；C组三个重复取样标记为：C1、C2、C3；
d、统计每组种子数量；
使用立式显微镜观察计数；计算每组单粒种子重量时使用公式：每组单粒种子重量＝(称量种子总重量/50)/该组三个重复计数平均值，A组单粒种子重量＝(A组称量种子总重量/50)/[(A1对应计数+A2对应计数+A3对应计数)/3]；采用如上公式分别对得到A、B、C三组数据，其平均值即为该类兰科植物种子的单粒种子重量。
本发明进一步技术方案在于，步骤a中所使用种子需为成熟干燥的种子。
本发明进一步技术方案在于，使用锡纸称量采用万分之一天平进行测量。
本发明进一步技术方案在于，1ml悬浮液采用1ml小勺制备而成，1ml小勺为将10ml离心管切割后制作而成。
本发明进一步技术方案在于，培养皿下方包含方格系统。
本发明进一步技术方案在于，方格系统为辅助的格子控制板，辅助的格子控制板通过多个辅助的格子控制板的单体板彼此对接而成，辅助的格子控制板的单体板上包含多个凹槽(3)，横竖搭配的多个辅助的格子控制板的单体通过凹槽插紧，构成辅助的格子控制板。
本发明进一步技术方案在于，方格系统为方格纸，步骤d中计数的时候在9.0cm×9.0cm纸张上画满0.5×0.5mm的方格，将制作好的方格纸置于培养皿下方；用于拍照计存为实验图片资料并采用图片辅助计数。
本发明进一步技术方案在于，横竖搭配的多个辅助的格子控制板的方格孔中布置有朝上的灯珠。
采用如上技术方案的本发明，相对于现有技术有如下有益效果：使用仪器及材料价值不高且易于寻找；操作简单，在生产实践中节约成本。
附图说明
为了进一步说明本发明，下面结合附图进一步进行说明：
图1为辅助的格子控制板的结构示意图；
图2为辅助的格子控制板的单体板的结构示意图；
其中：1.辅助的格子控制板的单体板；2.刻度；3.凹槽；4.方格孔。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施方式，进一步阐明本发明，应理解下述具体实施方式仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。在本发明的描述中，需要说明的是，术语“中心”、“上”、“下”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“内”、“外”、“顶”、“底”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。此外，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
本专利提供多种并列方案，不同表述之处，属于基于基本方案的改进型方案或者是并列型方案。每种方案都有自己的独特特点。此外，下面所描述的本发明不同实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互结合。文中未表述的固定方式，可以是螺纹固定，螺栓固定或者是胶水粘结等任意一种固定方式。
本发明的目的为在没有十万分之一及以上的电子天平的情况下快速准确地测量单粒兰科植物种子的重量，为一般实验室或工厂测量兰科植物种子提供便利，快速并准确的测定兰科植物种子的重量。
为了解决上述技术问题，本发明一种兰科植物种子重量的测定方法，如下列步骤进行：
a、材料
本方法中所使用种子需为成熟干燥的种子，称量某种兰科植物种子时，每组材料应为同一批次的种子(避免因不同批次种子不同生长情况及不同储藏时间造成实验误差)。
b、称量仪器测试与种子称量
在使用万分之一天平时，需要对天平的准确性、精密性、灵敏性进行测试；种子称量时的称量纸使用锡纸，种子每次称量100-150mg，称量结束使用镊子取出锡纸，折叠后标记保存。
c、配置次氯酸钠溶液与量取工具误差测试
经测试十分之一次氯酸钠溶液有助于种子快速沉水。将三组称量好的种子分别倒入三瓶50ml的十分之一次氯酸钠溶液内，静置等待种子全部沉水。期间，制作量取工具，将10ml离心管切割后制作为1ml小勺，测试小勺的精密度(相对标准差≤1％)，种子全部沉水后，摇匀取1ml悬浮液，每瓶溶液中取三个重复，分别倒入干净的培养皿内，标记备用(如A组三个重复标记为：A1、A2、A3)。
d、统计每组种子数量
制作计数时使用的方格纸(在9.0×9.0cm纸张上画满0.5×0.5mm的小方格)，将制作好的方格纸置于培养皿下方，使用立式显微镜观察计数。计算每组单粒种子重量时使用公式：每组单粒种子重量＝(称量种子总重量/50)/该组三个重复计数平均值，例：A组单粒种子重量＝(A组称量种子总重量/50)/[(A1+A2+A3)/3]，得到A、B、C三组数据，其平均值即为该类兰科植物种子的单粒种子重量。
所采用的测量仪器、溶液是万分之一天平、1ml小勺、次氯酸钠溶液。
所述的任意一种仪器均具备易操作、易获取性，简单快捷。
实施例1
a、材料
采用2020年保存的成熟天麻种子。
b、称量仪器测试与种子称量
使用万分之一天平前，测试天平的准确性、精密性、灵敏性；称量前将锡纸剪为正方形，提前沿对角线折叠锡纸，便于称量和折叠保存，称量三次(A.0.0108mg、B.0.0128mg、C.0.0138mg)，称量结束使用镊子取出锡纸，按照折叠痕迹折叠标记。
c、配置次氯酸钠溶液与量取工具误差测试
经测试十分之一的次氯酸钠溶液有助于种子快速沉水。将A、B、C三组种子分别倒入三瓶的50ml次氯酸钠溶液内，静置等待种子全部沉水。期间，制作量取工具，将10ml离心管切割后制作为1ml小勺，测试小勺的精密度(相对标准差≤1％)，待三组种子全部沉水后，分别摇匀取1ml悬浮液(A瓶摇匀取三勺悬浮液分别倒入三个不同的培养皿内，标记为A1、A2、A3；B瓶摇匀取三勺混合溶液分别倒入三个不同的培养皿内，标记为B1、B2、B3；C瓶摇匀取三勺混合溶液分别倒入三个不同的培养皿内，标记为C1、C2、C3)，备用。
d、统计每组种子数量
制作计数时使用的方格纸(在9.0×9.0cm纸张上画满0.5×0.5mm的小方格)，将制作好的方格纸置于培养皿下方，使用立式显微镜观察计数。A组(三次计数平均值：411.3)：A1：389粒、A2：443粒、A3：402粒；B组(三次计数平均值：482.6)：B1：476粒、B2：540粒、B3：432粒；C组(三次计数平均值：502.3)：C1：547粒、C2：491粒、C3：469粒。计算每组单粒种子重量时使用公式：每组单粒种子重量＝(称量种子总重量/50)/该组三个重复计数平均值，例：A组单粒种子重量＝(A组称量种子总重量/50)/[(A1+A2+A3)/3]，得到A、B、C三组数据，(A组单粒种子重量0.5251μg；B组单粒种子重量0.5304μg；C组单粒种子重量0.5494μg；)，计算其平均值为0.5350μg，即天麻的单粒种子重量为0.5350μg，相对标准差1％。
实施例2
a、材料
采用2019年保存的成熟白及种子。
b、称量仪器测试与种子称量
使用万分之一天平前，测试天平的准确性、精密性、灵敏性；称量前将锡纸剪为正方形，提前沿对角线折叠锡纸，便于称量和折叠保存，称量三次(1.0.0115mg、2.0.0125mg、3.0.0120mg)，称量结束使用镊子取出锡纸，按照折叠痕迹折叠标记。
c、配置次氯酸钠溶液与量取工具误差测试
经测试十分之一的次氯酸钠溶液有助于种子快速沉水。将1、2、3三组种子分别倒入三瓶的50ml次氯酸钠溶液内，静置等待种子全部沉水。期间，制作量取工具，将10ml离心管切割后制作为1ml小勺，测试小勺的精密度(相对标准差≤1％)，待三组种子全部沉水后，分别摇匀取1ml悬浮液(1瓶摇匀取三勺悬浮液分别倒入三个不同的培养皿内，标记为11、22、33；2瓶摇匀取三勺混合溶液分别倒入三个不同的培养皿内，标记为21、22、23；C瓶摇匀取三勺混合溶液分别倒入三个不同的培养皿内，标记为31、32、33)，备用。
d、统计每组种子数量
制作计数时使用的方格纸(在9.0×9.0cm纸张上画满0.5×0.5mm的小方格)，将制作好的方格纸置于培养皿下方，使用立式显微镜观察计数。1组(三次计数平均值：90.3)：11：96粒、12：81粒、13：94粒；2组(三次计数平均值：107.3)：21：117粒、22：106粒、23：99粒；3组(三次计数平均值：102.3)：31：96粒、32：103粒、33：108粒。计算每组单粒种子重量时使用公式：每组单粒种子重量＝(称量种子总重量/50)/该组三个重复计数平均值，例：1组单粒种子重量＝(1组称量种子总重量/50)/[(11+12+13)/3]，得到1、2、3三组数据，(1组单粒种子重量2.547μg；2组单粒种子重量2.336μg；3组单粒种子重量2.346μg)，计算其平均值为2.4098μg，即白及的单粒种子重量为2.4098μg，相对标准差4％(此批白及种子结实率低，计数时未计入空胚数)。
表1实例1、2数据
作为进一步的改进：方格系统为辅助的格子控制板，辅助的格子控制板通过多个辅助的格子控制板的单体板彼此对接而成，辅助的格子控制板的单体板上包含多个凹槽(3)，横竖搭配的多个辅助的格子控制板的单体通过凹槽插紧，构成辅助的格子控制板。本处的技术方案所起到的实质的技术效果及其实现过程为如下：能够调整格子的大小，用于在生物试验如微生物试验或者是植物试验的时候，调整计数区域的大小。
作为进一步的改进：横竖搭配的多个辅助的格子控制板的方格孔中布置有朝上的灯珠。本处的技术方案所起到的实质的技术效果及其实现过程为如下：计数的时候，计算哪个方格孔，就打开哪个灯珠，避免别的方格干扰。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本领域的技术人员应该了解本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的范围内。
Claims (8)
1.一种兰科植物种子重量的测定方法，其特征在于，利用如下列步骤进行：
a、
采集同一批次的种子；
b、将种子分为三组使用万分之一天平使用锡纸称量，称量结束使用镊子取出锡纸，折叠后标记保存，三组分别标记为A、B、C；
c、配置次氯酸钠溶液与量取工具误差测试；
利用十分之一次氯酸钠溶液有助于种子快速沉水；将三组称量好的种子分别倒入三瓶50ml的十分之一次氯酸钠溶液内，十分之一次氯酸钠溶液为有效氯10％的次氯酸钠溶液，静置等待种子全部沉水；种子全部沉水后，摇匀后取1ml悬浮液，每瓶溶液中取三个重复样，分别倒入干净的培养皿内，标记备用；A组三个重复取样标记为：A1、A2、A3；B组三个重复取样标记为：B1、B2、B3；C组三个重复取样标记为：C1、C2、C3；
d、统计每组种子数量；
使用立式显微镜观察计数；计算每组单粒种子重量时使用公式：每组单粒种子重量＝(称量种子总重量/50)/该组三个重复计数平均值，A组单粒种子重量＝(A组称量种子总重量/50)/[(A1对应计数+A2对应计数+A3对应计数)/3]；采用如上公式分别对得到A、B、C三组数据，其平均值即为该类兰科植物种子的单粒种子重量。
2.如权利要求1所述的一种兰科植物种子重量的测定方法，其特征在于，步骤a中所使用种子需为成熟干燥的种子。
3.如权利要求1所述的一种兰科植物种子重量的测定方法，其特征在于，使用锡纸称量采用万分之一天平进行测量。
4.如权利要求1所述的一种兰科植物种子重量的测定方法，其特征在于，1ml悬浮液采用1ml小勺制备而成，1ml小勺为将10ml离心管切割后制作而成。
5.如权利要求1所述的一种兰科植物种子重量的测定方法，其特征在于，培养皿下方包含方格系统。
6.如权利要求5所述的一种兰科植物种子重量的测定方法，其特征在于，方格系统为辅助的格子控制板，辅助的格子控制板通过多个辅助的格子控制板的单体板彼此对接而成，辅助的格子控制板的单体板上包含多个凹槽(3)，横竖搭配的多个辅助的格子控制板的单体通过凹槽插紧，构成辅助的格子控制板。
7.如权利要求5所述的一种兰科植物种子重量的测定方法，其特征在于，方格系统为方格纸，步骤d中计数的时候在9.0cm×9.0cm纸张上画满0.5×0.5mm的方格，将制作好的方格纸置于培养皿下方；用于拍照计存为实验图片资料并采用图片辅助计数。
8.如权利要求6所述的一种兰科植物种子重量的测定方法，其特征在于，横竖搭配的多个辅助的格子控制板的方格孔中布置有朝上的灯珠。
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