CN113143789B - 组合物及其在皮肤护理中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及具有海洋生物活性的组合物及其在皮肤护理中的应用，特别地涉及用于生物医用材料领域的具有海洋生物活性的组合物及其制备获得的敷料或面膜，包括源自海洋生物的胶原蛋白和多聚脱氧核糖核苷酸。本发明还涉及一种具有海洋生物活性的敷料或面膜及其在皮肤屏障修复及护理中的应用。

Description

组合物及其在皮肤护理中的应用
技术领域
本发明涉及生物医用材料领域，特别涉及一种具有海洋生物活性的组合物及其制备获得的敷料或面膜，以及在皮肤屏障修复及护理中的应用。
背景技术
在中国，随着国民可支配收入的提高和对审美要求的不断提升，大众对美的意识越来越强烈，对新型医疗美容的需求也与日俱增。然而，大部分的医学美容方法会对皮肤屏障造成一定影响，如注射填充产生的皮肤创口、激光治疗的热效应造成皮肤敏感等。目前市面上针对医美术后修复的产品众多，但一方面存在修复效果不佳，修复时间长等问题，术后往往需要一周甚至更长的时间进行严格护理，与快节奏的现代工作生活相冲突，不能很好的满足求美者的需求；另一方面，这些产品中含有生物活性的成分多来源于陆生动物的组织提取物，如CN105983094A公开了一种具有生物活性的无菌胶原液和无菌胶原贴敷料的制备方法，使用了牛筋腱作为原料，具有较高的免疫原性风险和人畜共患病毒传播风险。目前，绝大部分临床用修复的产品（例如包含胶原蛋白等）为猪、牛等陆地哺乳动物源性，携带疯牛病、蓝耳病等人畜共患性传染病毒的风险较高，严重影响了胶原基医用产品的生物安全性。各国均将疯牛病高风险区的医用胶原蛋白产品列入最高等级风险监控产品予以监管，甚至严格限制其进出口。因此，需要安全性较高的新型临床用修复的产品（例如包含胶原蛋白等）。
源自海洋生物的胶原蛋白来源于海洋水生生物，相较于陆地生物污染小、安全性更高，目前主要用于化妆品、食品和保健品领域。迄今尚无鱼类病毒与人畜共患或传播的报道，因此其病毒传播风险更低，临床使用安全性更高。体内和体外生物相容性研究显示，鱼胶原蛋白凝胶提取物无菌检验为阴性，且细胞毒性、致敏作用、染色体畸变、皮内反应、急性系统性毒性、热原反应和溶血反应均为阴性，是用于生物医药领域合适的新型胶原。
发明内容
针对上述现有技术的不足，本发明提供一种具有海洋生物活性的组合物（如，包括源自海洋生物的胶原蛋白和多聚脱氧核糖核苷酸）及其制备获得的敷料或面膜，及其在皮肤屏障修复、愈合、伤口护理中的应用，能够实现皮肤屏障快速有效的恢复，且具有较低的安全性风险。
本发明提供一种具有海洋生物活性的组合物及其制备获得的敷料或面膜，包括源自海洋生物的胶原蛋白（如鱼胶原蛋白等），其来源于海洋水生生物，相较于陆地生物污染小、安全性更高，目前主要用于化妆品、食品和保健品领域。迄今尚无鱼类病毒与人畜共患或传播的报道，因此其病毒传播风险更低，临床使用安全性更高。体内和体外生物相容性研究显示，鱼胶原蛋白凝胶提取物无菌检验为阴性，且细胞毒性、致敏作用、染色体畸变、皮内反应、急性系统性毒性、热原反应和溶血反应均为阴性，是用于生物医药领域合适的胶原蛋白。
本发明所述的具有海洋生物活性的组合物及其制备获得的敷料或面膜，其组成中的源自海洋生物的胶原蛋白分子链上含有大量的亲水性基团，通过分子链内和分子链间的范德华作用力形成富水的大分子网状结构，能物理吸附本身质量数倍的水分，为皮肤提供了一个临时性的物理屏障和湿性环境，并作为细胞支架诱导损伤区域细胞的迁移再生；组成中的另一成分多聚脱氧核糖核苷酸则可以激活细胞A2受体，调控细胞炎症反应程度，促进组织快速修复和再生。根据本发明具体实施方式，两种成分（胶原蛋白和多聚脱氧核糖核苷酸）的组合发挥了明显的协同作用，即使在较低的含量下也实现了皮肤屏障的快速有效修复。
本发明涉及一种具有海洋生物活性的组合物及其制备获得的敷料或面膜包括：源自海洋生物的胶原蛋白和多聚脱氧核糖核苷酸。
根据本发明一个实施方案，本发明提供的具有海洋生物活性的组合物及其制备获得的敷料或面膜包括以下重量分数的组分：海洋胶原蛋白0.5至5份、多聚脱氧核糖核苷酸0.5至5份、保湿剂50至100份，水800至1000份。
根据本发明另一实施方案，可以用于本发明中使用的源自海洋生物的胶原蛋白可以是源自海洋生物的胶原蛋白，尤其地选自源自海洋动物（包括无脊椎动物和脊椎动物）的胶原蛋白，如选自源自下述海洋生物的胶原蛋白：鱼；海洋哺乳动物如鲸，海豹，海狮；爬行动物如海蛇，海龟；节肢动物，软体动物如海星，海参；腔肠动物如水母，无脊椎动物等，优选源自鱼。
根据本发明另一实施方案，可以用于本发明中使用的源自海洋生物的胶原蛋白可以是变性鱼胶原蛋白如胶原蛋白明胶或胶原蛋白多肽、以及非变性鱼胶原蛋白。根据本发明另一实施方案，可以用于本发明中使用的鱼胶原蛋白主要来源于：
- 鱼皮、鱼鳞等组织（Ⅰ型），其属于非变性鱼胶原蛋白，其分子量低于猪、牛胶原蛋白，由于分子间交联度低，非变性鱼胶原蛋白在低温下也易溶于中性盐溶液或弱酸溶液，可操作性优于哺乳动物源性胶原蛋白，
- 软骨（Ⅱ 型），
- 鱼肠（Ⅲ 型），
- 肌肉（Ⅴ 型）等组织。
此外，鱼胶原蛋白多肽的抗氧化作用优于猪、牛胶原蛋白多肽。另外，鱼胶原蛋白多肽可有效促进细胞的体外黏附，对表皮细胞的增殖以及成纤维细胞的蛋白分泌均有一定促进作用。
根据本发明另一实施方案，所述的海洋胶原蛋白为从海洋生物的鱼皮、鱼鳞、鱼鳔、软骨、肌肉等组织中提取得到的胶原蛋白。
根据本发明另一实施方案，所述的海洋胶原蛋白为从海洋软体动物或脊索动物组织中提取得到的胶原蛋白。
根据本发明另一实施方案，所述的海洋胶原蛋白为从海洋软体动物或脊索动物的皮、鳞、鳔、软骨、肌肉中的一种或其混合物中提取得到的胶原蛋白。
根据本发明另一实施方案，所述的海洋胶原蛋白为从鲑鱼、鳕鱼、黄鱼、鲳鱼、金枪鱼、带鱼、鳗鱼、罗非鱼、乌贼、鱿鱼、水母的皮、鳞、鳔、软骨、肌肉中的一种或其混合物中提取得到的胶原蛋白。
根据本发明另一实施方案，本发明提供的具有海洋生物活性的组合物包括海洋胶原蛋白0.5至25份，或者1至15份，或者1.5至10份，或者2至5份，或者2.5至3份，基于1000重量份的本发明具有海洋生物活性的组合物的总重量份。
根据本发明另一实施方案，所述的多聚脱氧核糖核苷酸为从鲑鱼的生殖细胞中提取得到的多聚脱氧核糖核苷酸。
根据本发明另一实施方案，本发明提供的具有海洋生物活性的组合物包括多聚脱氧核糖核苷酸0.5至20份，或者1至15份，或者1.5至10份，或者2至5份，或者2至3份，基于1000重量份的本发明具有海洋生物活性的组合物的总重量份。
根据本发明另一实施方案，可以用于本发明具有海洋生物活性的组合物及其制备获得的敷料或面膜中使用的多聚脱氧核糖核苷酸的分子量为50bp～500bp，或者50bp～400bp，或者50bp～300bp，或者50bp～200bp。
根据本发明另一实施方案，所述的一种具有海洋生物活性的组合物及其制备获得的敷料，其海洋胶原蛋白和多聚脱氧核糖核苷酸的重量总和为本发明所述组合物总重量的0.1%至1%，或者0.15到0.9%，或者0.2到0.8%，或者0.25到0.7%，或者0.3到0.6%，或者0.35到0.5%，或者0.35到0.4%。
根据本发明另一实施方案，本发明所述的一种具有海洋生物活性的组合物及其制备获得的敷料或面膜，其海洋胶原蛋白和多聚脱氧核糖核苷酸的质量比为1:0.2到1:2，或者为1:0.3到1:1.5，或者为1:0.4到1:1.2，或者为1:0.5到1:1。
根据本发明另一实施方案，本发明提供的具有海洋生物活性的组合物及其制备获得的敷料或面膜可包括保湿剂，保湿剂可选自：透明质酸或透明质酸钠，聚谷氨酸，甘油，和/或多元醇类如戊二醇，丁二醇，丙烯乙二醇，山梨醇，或乳酸，角鲨烷，海藻糖，明胶，尿素，乳酸钠，吡咯烷酮羧酸类，神经酰胺类及植物提取物，维他命类等。
根据本发明另一实施方案，本发明提供的具有海洋生物活性的组合物及其制备获得的敷料或面膜可包括以下重量分数的组分：海洋胶原蛋白1至2.5份、多聚脱氧核糖核苷酸0.5至2份、透明质酸钠4至8份、甘油15至25份、戊二醇50至60份、水800至1000份。
根据本发明另一实施方案，所述的海洋胶原蛋白的杂蛋白总量应在总蛋白的1%以下。
根据本发明另一实施方案，所述的海洋胶原蛋白应不含有色氨酸。
根据本发明另一实施方案，所述的海洋胶原蛋白的纯度不小于其质量的95%。
根据本发明另一实施方案，所述的海洋胶原蛋白的灰分不大于其质量的2%。
根据本发明另一实施方案，所述的海洋胶原蛋白的重金属含量不大于10 μg/g。
根据本发明另一实施方案，所述的多聚脱氧核糖核苷酸的pH值在5到9之间。
根据本发明另一实施方案，所述的多聚脱氧核糖核苷酸的蛋白质含量不得超过2%。
根据本发明另一实施方案，所述的多聚脱氧核糖核苷酸的氮含量在11-16%之间。
根据本发明另一实施方案，所述的多聚脱氧核糖核苷酸的磷含量在7.5-9.5之间。
根据本发明另一实施方案，所述的多聚脱氧核糖核苷酸的重金属含量不大于10 μg/g。
根据本发明另一实施方案，所述水为纯化水、超纯水、蒸馏水、软化水、灭菌注射用水中的一种。
根据本发明另一实施方案，本发明所述具有海洋生物活性的组合物及其制备获得的敷料或面膜，还可包括与之配合使用的载体，其可以是本领域使用的载体，如膜材或凝胶，其中载体可以是由纤维制成的载体，如纱布、无纺布，纤维素、海藻酸等材料制成的膜布，或凝胶。根据本发明另一实施方案，本发明提供的具有海洋生物活性的组合物及其制备获得的敷料或面膜可进一步包含其他多种药物，任选地其他药物可以是抗菌药、镇痛药中的至少一种或者有利于伤口愈合的药物，如止血剂等。
本发明还涉及本发明提供的具有海洋生物活性的组合物及其制备获得的敷料或面膜的制备方法，包括以下步骤：
- 分别制备A相、B相和C相，
其中，在水中加入保湿剂，至体系透明均匀后，作为A相；将胶原蛋白加入水中并持续搅拌至体系透明均匀，作为B相；在水中加入多聚脱氧核糖核苷酸，直至溶解透明，作为C相；
- 将A相、B相、C相均匀混合直至溶液透明均匀。
本发明所述具有海洋生物活性的组合物如上所述可以以敷料形式提供，还可以以面膜形式提供，并可以用于医疗、美容和化妆领域，例如用于美容整形术后伤口及皮肤护理；用于日常皮肤保养，护理，为整容整形伤口及皮肤提供积极的舒润环境及必要营养，并可起到促进伤口愈合，减少疤痕的作用；用于皮肤护理，为皮肤提供水分和丰富营养，起到营养、美白、补水、护肤的作用。
本发明还涉及本发明提供的具有海洋生物活性的组合物及其制备获得的敷料或面膜在皮肤屏障修复、伤口护理中的应用，例如但不限于皮肤注射填充和激光治疗的术后护理、烫伤伤口护理中的应用。
具体实施方式
实施例1-5
一种具有海洋生物活性的敷料，包括以下重量分数的组分：
敷料采用如下制备方法：在水中加入保湿剂，至体系透明均一后，作为A相；将海洋胶原蛋白加入水中并持续搅拌至体系透明均一，作为B相；在水中加入多聚脱氧核糖核苷酸，直至完全溶解透明，作为C相；将A相、B相、C相均匀混合直至溶液透明均一，将其与膜布组合得到具有海洋生物活性的敷料。
实施例6-7
一种具有海洋生物活性的敷料，包括以下重量分数的组分：
敷料采用如下制备方法：在水中加入保湿剂，至体系透明均一后，作为A相；将海洋胶原蛋白加入水中并持续搅拌至体系透明均一，作为B相；在水中加入多聚脱氧核糖核苷酸，直至完全溶解透明，作为C相；将A相、B相、C相均匀混合直至溶液透明均一，将其与膜布组合得到具有海洋生物活性的敷料。
实施例8-9
一种具有海洋生物活性的敷料，包括以下重量分数的组分：
敷料采用如下制备方法：在水中加入保湿剂，至体系透明均一后，作为A相；将海洋胶原蛋白加入水中并持续搅拌至体系透明均一，作为B相；在水中加入多聚脱氧核糖核苷酸，直至完全溶解透明，作为C相；将A相、B相、C相均匀混合直至溶液透明均一，将其与膜布组合得到具有海洋生物活性的敷料。
对比例1-4
一种具有海洋生物活性的敷料，包括以下重量分数的组分：
敷料采用如下制备方法：在水中加入保湿剂，至体系透明均一后，作为A相；将海洋胶原蛋白加入水中并持续搅拌至体系透明均一，作为B相；在水中加入多聚脱氧核糖核苷酸，直至完全溶解透明，作为C相；将A相、B相、C相均匀混合直至溶液透明均一，将其与膜布组合得到具有海洋生物活性的敷料。
对比例5
对比例5与实施例6的区别在于：未加入保湿剂。
一、细胞增殖活性测试
1. 试验依据的标准为GB/T 16886.5-2017，采用真皮成纤维细胞作为试验对象。
二、动物皮肤致敏测试
1. 试验依据的标准为GB/T 16886.10-2017，采用豚鼠作为试验对象。
试验结果：
三、注射填充术后护理情况
1. 随机抽取150名女性志愿者，年龄为20-40岁，将其分为15组，每组10人，分别使用实施例1-7、对比例1-5及市售胶原贴敷料（市售胶原贴敷料的组成如下：胶原蛋白（1重量份）， 多聚脱氧核糖核苷酸(0份），保湿剂(0份），水（950重量份）），期间不使用任何修复产品。
2.使用方法：注射填充美容术后即刻，将产品敷至术后屏障破损处，30分钟后将产品截除。之后每晚各敷一次，持续3天。按如下方式进行评价，以平均分计入最终结果。
3.测试结果：
由上表可知，本发明所述的一种具有海洋生物活性的敷料，效果优于市售样品。实施例1-5对比可知，在海洋胶原蛋白与多聚脱氧核糖核苷酸的添加量之和在总重量的0.3%时，海洋胶原蛋白与多聚脱氧核糖核苷酸比例在2：1至1：1之间敷料具有最佳的促进皮肤屏障修复的效果。实施例2、3、6、7对比可知，本试验所呈现的最优的海洋胶原蛋白与多聚脱氧核糖核苷酸比例为3：2。实施例6、8、9与对比例5对比可知，添加比例在50到100份之间的保湿剂对于皮肤屏障修复有明显的辅助作用。实施例1-5与对比例1-4对比可知，只添加海洋胶原蛋白或只添加多聚脱氧核糖核苷酸至总重量的0.3%或0.6%时，仍然无法达到较优的促进皮肤屏障修复的作用，海洋胶原蛋白与多聚脱氧核糖核苷酸的协同作用在皮肤屏障的修复过程中非常重要。实施例2与对比例5-6结果显示，透明质酸钠和甘油也对皮肤的舒缓和修复起到了明显作用。
由上述实施例所示，本发明所述的具有海洋生物活性的敷料，其组成中的源自海洋生物的胶原蛋白分子链上含有大量的亲水性基团，通过分子链内和分子链间的范德华作用力形成富水的网状结构，能物理吸附本身质量数倍的水分，为皮肤提供了一个临时性的物理屏障和湿性环境，同时也通过对细胞通路、信号分子的调节和细胞支架的诱导作用促进损伤区域细胞的迁移再生和创伤修复；组成中的另一成分多聚脱氧核糖核苷酸则可以激活细胞A2受体，调控细胞炎症反应程度，促进组织快速修复和再生，两种成分发挥了明显的协同作用，即使在较低的含量下也实现了皮肤屏障的快速有效修复。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (32)

1.一种组合物，其特征在于，该组合物由下述组成：源自海洋生物的胶原蛋白和多聚脱氧核糖核苷酸和保湿剂，其中组合物包括以下重量分数的组分：源自海洋生物的胶原蛋白0.5至5份、多聚脱氧核糖核苷酸0.5至5份、保湿剂50至100份，水800至1000份，其中保湿剂选自如下至少之一：透明质酸或透明质酸钠，聚谷氨酸，甘油，戊二醇，丁二醇，丙烯乙二醇，山梨醇，或乳酸，角鲨烷，海藻糖，明胶，尿素，乳酸钠，吡咯烷酮羧酸类，神经酰胺类，维他命，
其中所述的源自海洋生物的胶原蛋白的纯度不小于其质量的95％，所述的源自海洋生物的胶原蛋白的杂蛋白总量应在总蛋白的1％以下，
其中所述的源自海洋生物的胶原蛋白应不含有色氨酸，
其中多聚脱氧核糖核苷酸的分子量为50bp～500bp，
其中源自海洋生物的胶原蛋白和多聚脱氧核糖核苷酸的质量比为1:0.2到1:1，
其中源自海洋生物的胶原蛋白和多聚脱氧核糖核苷酸的重量总和为组合物总重量的0.1％至1％。
2.根据权利要求1所述的组合物，其中源自海洋生物的胶原蛋白和多聚脱氧核糖核苷酸的质量比为1:0.3到1:1。
3.根据权利要求1所述的组合物，其中源自海洋生物的胶原蛋白和多聚脱氧核糖核苷酸的质量比为1:0.4到1:1。
4.根据权利要求1所述的组合物，其中源自海洋生物的胶原蛋白和多聚脱氧核糖核苷酸的质量比为1:0.5到1:1。
5.根据权利要求1-4任一项所述的组合物，其中源自海洋生物的胶原蛋白和多聚脱氧核糖核苷酸的重量总和为组合物总重量的0.15到0.9％。
6.根据权利要求1-4任一项所述的组合物，其中源自海洋生物的胶原蛋白和多聚脱氧核糖核苷酸的重量总和为组合物总重量的0.2到0.8％。
7.根据权利要求1-4任一项所述的组合物，其中源自海洋生物的胶原蛋白和多聚脱氧核糖核苷酸的重量总和为组合物总重量的0.25到0.7％。
8.根据权利要求1-4任一项所述的组合物，其中源自海洋生物的胶原蛋白和多聚脱氧核糖核苷酸的重量总和为组合物总重量的0.3到0.6％。
9.根据权利要求1-4任一项所述的组合物，其中源自海洋生物的胶原蛋白和多聚脱氧核糖核苷酸的重量总和为组合物总重量的0.35到0.5％。
10.根据权利要求1-4任一项所述的组合物，其中源自海洋生物的胶原蛋白和多聚脱氧核糖核苷酸的重量总和为组合物总重量的0.35到0.4％。
11.根据前述权利要求1-4任一项所述的组合物，其中源自海洋生物的胶原蛋白选自变性鱼胶原蛋白、以及非变性鱼胶原蛋白。
12.根据前述权利要求1-4任一项所述的组合物，其中源自海洋生物的胶原蛋白选自胶原蛋白明胶。
13.根据前述权利要求1-4任一项所述的组合物，其中多聚脱氧核糖核苷酸为从鲑鱼的生殖细胞中提取得到的多聚脱氧核糖核苷酸。
14.根据前述权利要求1-4任一项所述的组合物，其中组合物由以下重量分数的组分组成：源自海洋生物的胶原蛋白1至2.5份、多聚脱氧核糖核苷酸1至2份、透明质酸钠4至8份、甘油15至25份、戊二醇50至60份、水800至1000份。
15.根据前述权利要求1-4任一项所述的组合物，其中海洋生物的胶原蛋白源自海洋动物的胶原蛋白。
16.根据前述权利要求1-4任一项所述的组合物，其中所述海洋生物的胶原蛋白源自海洋软体动物或脊索动物的胶原蛋白。
17.根据前述权利要求1-4任一项所述的组合物，其中所述海洋生物的胶原蛋白源自从选自下述物质至少之一或其混合提取得到的胶原蛋白：鲑鱼、鳕鱼、黄鱼、鲳鱼、金枪鱼、带鱼、鳗鱼、罗非鱼、乌贼、鱿鱼、水母的皮、鳞、鳔、软骨、肌肉。
18.根据前述权利要求1-4任一项所述的组合物，其中多聚脱氧核糖核苷酸的分子量为50bp～400bp。
19.根据前述权利要求1-4任一项所述的组合物，其中多聚脱氧核糖核苷酸的分子量为50bp～300bp。
20.根据前述权利要求1-4任一项所述的组合物，其中多聚脱氧核糖核苷酸的分子量为50bp～200bp。
21.根据前述权利要求1-4任一项所述的组合物，其中所述的源自海洋生物的胶原蛋白的重金属含量不大于10μg/g。
22.根据前述权利要求1-4任一项所述的组合物，其中所述的多聚脱氧核糖核苷酸的pH值在5到9之间。
23.根据前述权利要求1-4任一项所述的组合物，其中所述的多聚脱氧核糖核苷酸的蛋白质含量不超过2％。
24.根据前述权利要求1-4任一项所述的组合物，其中所述的多聚脱氧核糖核苷酸的氮含量在11-16％之间。
25.根据前述权利要求1-4任一项所述的组合物，其中所述的多聚脱氧核糖核苷酸的磷含量在7.5-9.5之间。
26.根据前述权利要求1-4任一项所述的组合物，其中所述的多聚脱氧核糖核苷酸的重金属含量不大于10μg/g。
27.一种敷料或面膜，包括根据前述权利要求1-26任一项所述的组合物，还包括与之配合使用的载体。
28.制备根据前述权利要求27所述敷料或面膜的方法，包括以下步骤：
(1)提供根据前述权利要求1-26任一项所述的组合物，其包括：
(a)分别制备A相、B相和C相，其中，
-在水中加入保湿剂至体系透明均匀后，作为A相；
-将胶原蛋白加入水中并持续搅拌至体系透明均匀，作为B相；
-在水中加入多聚脱氧核糖核苷酸直至溶解透明，作为C相；
(b)然后将A相、B相、C相均匀混合直至溶液透明均匀，
(2)将上述获得的组合物与载体组合。
29.根据前述权利要求27所述的敷料或面膜在制备用于医疗、美容和化妆的产品中的用途。
30.根据权利要求29所述的用途，用于美容整形术后伤口及皮肤护理。
31.根据权利要求29所述的用途，用于日常皮肤保养，护理。
32.根据权利要求29所述的用途，用于整容整形，促进伤口愈合，减少疤痕。
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