CN113142247A - 一种专门用于畜禽养殖圈舍的灭蚊制剂的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种专门用于畜禽养殖圈舍的灭蚊制剂的制备方法，属于微生物和酶复合的生物制剂技术领域，其特征在于包括发酵工艺、前处理工序、提取工序和分离工序和灭蚊制剂的复配，本发明的有益效果是：将灭蚊链霉菌发酵液与酶复配而成，能有效杀灭蚊子幼虫，降低蚊虫成活率，酶能有效分解环境中的有机污染物，使本发明在杀灭蚊虫的同时，起到圈舍除臭的作用，从而也进一步减少了蚊虫的滋生；将灭蚊链霉菌体与发酵液分离，避免了灭蚊链霉菌体腐败变质产生臭味，利用几丁质酶对灭蚊链霉菌体进行破壁处理，然后进行分离，避免了将灭蚊链霉菌体与发酵液分离导致有效成分流失的问题，同时解决了破壁导致难以过滤及活性降低的问题。

Description

一种专门用于畜禽养殖圈舍的灭蚊制剂的制备方法
技术领域：
本发明属于微生物和酶复合的生物制剂技术领域，更具体地涉及一种专门用于畜禽养殖圈舍的灭蚊制剂的制备方法。
背景技术：
畜禽养殖圈舍中，由于粪水池、排水沟、积水洼、积水缸等的存在，加之一些畜禽的排泄物及散落的饲料等有机废物得不到及时清理，极易滋生蚊虫，影响环境卫生，蚊虫叮咬还可能会传播疾病，危害畜禽和养殖人员健康。
为了很好的去除蚊虫，目前具有多种手段，如安设蓝光蚊灯或喷洒驱蚊药物，但是安设蓝光蚊灯对于蛾类效果较优，对于蚊虫效果较差，为了提供效果需要增设蓝光蚊灯的数量，这样必然影响畜禽的生活；而喷洒驱蚊药物具有一定的安全隐患。
发明内容：
为解决上述问题，克服现有技术的不足，本发明提供了一种生物杀虫剂，能够有效的解决上述的问题。
本发明解决上述技术问题的具体技术方案为：专门用于畜禽养殖圈舍的灭蚊制剂的制备方法，包括发酵工艺和灭蚊制剂的复配；
所述发酵工艺将发酵培养基加入到发酵罐中，然后将活化好的灭蚊霉菌接种至发酵罐中，控制发酵罐罐压0.06-0.08Mpa，温度28-32℃，通气量200-220L/h，转速150-200r/min，发酵时间为3-4d，即获得灭蚊霉菌的发酵液；
所述灭蚊制剂的复配按以下质量份数配制灭蚊制剂：灭蚊霉菌的发酵液30-40份，蛋白酶5-10份，脂肪酶4-8份，吐温1-3份，混匀，静置均质后即得灭蚊制剂。
进一步地，所述的发酵培养基的组成为：马铃薯汁20％-30％，葡萄糖2％-3％，磷酸氢二钾0.5％-0.6％，磷酸二氢钾0.3％-0.4％，七水硫酸镁0.2％-0.4％，氯化铵0.1％-0.2％，硫酸亚铁0.1％-0.15％。
进一步地，所述的发酵工艺后还设置有前处理工序、提取工序和分离工序。
进一步地，所述前处理工序是指灭蚊霉菌的发酵液进行破壁处理，在灭蚊霉菌的发酵液中加入几丁质酶。
进一步地，所述提取工序将灭蚊霉菌的发酵液温度提升到45-55℃，保温1-2h。
进一步地，所述分离工序指利用0.22μm的过滤纸板过滤，将灭蚊霉菌原生质体与灭蚊霉菌的发酵液分离。
进一步地，所述蛋白酶为胰蛋白酶或组织蛋白酶或木瓜蛋白酶或枯草杆菌蛋白酶的一种或两种以上的混合物。
本发明的有益效果是：
1.本发明创造性的将灭蚊霉菌发酵液与酶复配而成，应用在畜禽养殖圈舍的排水沟、粪水池、积水洼、积水缸等地，能有效杀灭蚊子幼虫，降低蚊虫成活率。酶能有效分解环境中的有机污染物，使本发明在杀灭蚊虫的同时，起到圈舍除臭的作用，从而也进一步减少了蚊虫的滋生；
2.本发明创造性的将灭蚊霉菌体与发酵液分离，避免了灭蚊霉菌体腐败变质产生臭味，
3.本发明创造性的利用几丁质酶对灭蚊霉菌体进行破壁处理，然后进行分离，避免了将灭蚊霉菌体与发酵液分离导致有效成分流失的问题，同时解决了破壁导致难以过滤及活性降低的问题。
具体实施方式：
在本发明的描述中具体细节仅仅是为了能够充分理解本发明的实施例，但是作为本领域的技术人员应该知道本发明的实施并不限于这些细节。另外，公知的结构和功能没有被详细的描述或者展示，以避免模糊了本发明实施例的要点。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
本发明的具体实施方式：
专门用于畜禽养殖圈舍的灭蚊制剂的制备方法，具体步骤为：
(1)将发酵培养基加入到发酵罐中，所述的发酵培养基的组成为：马铃薯汁20％-30％，葡萄糖2％-3％，磷酸氢二钾0.5％-0.6％，磷酸二氢钾0.3％-0.4％，七水硫酸镁0.2％-0.4％，氯化铵0.1％-0.2％，硫酸亚铁0.1％-0.15％；
(2)发酵工艺：将活化好的灭蚊霉菌接种至发酵罐中，控制发酵罐罐压0.06-0.08Mpa，温度28-32℃，通气量200-220L/h，转速150-200r/min，发酵时间为3-4d，即获得灭蚊霉菌的发酵液；
(3)前处理工序：将灭蚊霉菌的发酵液进行破壁处理，在灭蚊霉菌的发酵液中加入几丁质酶，灭蚊霉菌的发酵液30-40份，几丁质酶5-8份，温度40-45℃，保温处理1-2h，得到灭蚊霉菌原生质体与灭蚊霉菌的发酵液；
(4)提取工序：将上述经破壁处理的灭蚊霉菌发酵液温度提升到45-55℃，保温1-2h；
(5)分离工序：利用0.22μm的过滤纸板过滤，将灭蚊霉菌原生质体与灭蚊霉菌的发酵液分离；
(6)灭蚊制剂的复配：按以下质量份数配制灭蚊制剂：灭蚊霉菌的发酵液30-40份，蛋白酶5-10份，脂肪酶4-8份，吐温1-3份，混匀，静置均质后即得灭蚊制剂；
所述蛋白酶为胰蛋白酶或组织蛋白酶或木瓜蛋白酶或枯草杆菌蛋白酶的一种或两种以上的混合物。
为了更加直观的展现本发明的工艺优势，特以本发明和相同工艺采用等效替换的方法进行对比，
对比例一：
制备方法同实施例，所不同的是：本对比例的制备过程中，将获得灭蚊霉菌的发酵液直接进行灭蚊制剂的复配；
对比例二：
制备方法同实施例，所不同的是：本对比例的制备过程中，前处理工序采用破壁机机械破壁：
对比例三：
制备方法同实施例，所不同的是：本对比例的制备过程中，前处理工序采用强碱破壁；
对比例四：
制备方法同实施例，所不同的是：本对比例的制备过程中，不采用前处理工序；
对比例五：
制备方法同实施例，所不同的是：本对比例的制备过程中，不采用复配；
对比例五：
制备方法同实施例，所不同的是：本对比例的制备过程中，不采用提取工艺；
本发明采用的灭蚊霉菌，其毒效特点是对鳞翅目昆虫无毒，而对双翅目昆虫(主要是蚊虫)有特异毒效。
将本发明的复合液体应用于池塘等静水水域中的摇蚊幼虫治理时，使用浓度为100ppm，按估计水量每天喷酒，持续15天，使用周期为30天；分别对花翅摇蚊幼虫24小时致死率进行测定；
表1：不同对比例对于驱蚊效果和除臭效果的评述
发酵 前处理工序 提取工序 分离工序 复配 驱蚊效果 臭味
本发明 + + + + + 98％ 无
对比例一 + - - - + 90％ 差
对比例二 + 破壁机 + + + 98％ 良
对比例三 + 强碱 + + + 95％ 差
对比例四 + - + + + 70％ 无
对比例五 + + + + - 96％ 极差
对比例六 + + - + + 94％ 无
1.本发明与对比例一对比数据分析可知：对比例一中采用的是灭蚊霉菌的发酵液直接复配使用，灭蚊制剂存留大量的霉菌的菌丝体，导致灭蚊制剂一定程度上加剧了腐败和变质，产生臭味，虽然复配中添加了蛋白酶，明显未能很好的将菌体蛋白处理；
2.本发明与对比例二对比数据分析可知：对比例二中采用的是破壁机对灭蚊霉菌进行破壁处理，这样蚊霉菌的细胞壁和细胞膜均受到破坏，细胞的内容物释放，包括用于对对双翅目昆虫(主要是蚊虫)有特异毒效的物质，也包括细胞的其他物质，导致了分离工序很难利用0.22μm的过滤纸板过滤，极易堵塞，产量很低；
3.本发明与对比例三对比数据分析可知：对比例三中采用的是强碱对灭蚊霉菌进行破壁处理，这样蚊霉菌的细胞壁和细胞膜均受到破坏，细胞的内容物释放，包括用于对双翅目昆虫(主要是蚊虫)有特异毒效的物质，
此法相对对比例二过滤相对容易，这可能是由于碱性条件下蛋白质变性导致的，然而，用于对双翅目昆虫(主要是蚊虫)有特异毒效的物质也一定程度上受到影响，从98％降低至95％；但是碱性导致了酶的活性降低，无法将畜禽养殖圈舍内的蛋白质去除，臭味依旧存在；
4.本发明与对比例四对比数据分析可知：对比例四中采用的是未对灭蚊霉菌进行破壁处理，并且利于分离工序将菌体与发酵液分离，这样很好的避免了菌体的蛋白质腐败导致的臭味的产生，但是由于双翅目昆虫(主要是蚊虫)有特异毒效的物质不能完全释放，导致驱蚊效果降低至70％；
5.本发明与对比例五对比数据分析可知：对比例五中采用的是未进行复配，本发明中酶能有效分解环境中的有机污染物，使本发明在杀灭蚊虫的同时，起到圈舍除臭的作用，从而也进一步减少了蚊虫的滋生。
6.本发明与对比例六对比数据分析可知：对比例六中采用的是未进行提取，导致对双翅目昆虫(主要是蚊虫)有特异毒效的物质不能完全释放，导致驱蚊效果降低至94％。
综上所述：1.本发明创造性的将灭蚊霉菌发酵液与酶复配而成，应用在畜禽养殖圈舍的排水沟、粪水池、积水洼、积水缸等地，能有效杀灭蚊子幼虫，降低蚊虫成活率。酶能有效分解环境中的有机污染物，使本发明在杀灭蚊虫的同时，起到圈舍除臭的作用，从而也进一步减少了蚊虫的滋生；
2.本发明创造性的将灭蚊霉菌体与发酵液分离，避免了灭蚊霉菌体腐败变质产生臭味，
3.本发明创造性的利用几丁质酶对灭蚊霉菌体进行破壁处理，然后进行分离，避免了将灭蚊霉菌体与发酵液分离导致有效成分流失的问题，同时解决了破壁导致难以过滤及活性降低的问题。

Claims (7)

1.一种专门用于畜禽养殖圈舍的灭蚊制剂的制备方法，包括发酵工艺和灭蚊制剂的复配；所述发酵工艺为将发酵培养基加入到发酵罐中，然后将活化好的灭蚊霉菌接种至发酵罐中，控制发酵罐罐压0.06-0.08Mpa，温度28-32℃，通气量200-220L/h，转速150-200r/min，发酵时间为3-4d，即获得灭蚊霉菌的发酵液；所述灭蚊制剂的复配按以下质量份数配制灭蚊制剂：灭蚊霉菌的发酵液30-40份，蛋白酶5-10份，脂肪酶4-8份，吐温1-3份，混匀，静置均质后即得灭蚊制剂。
2.根据权利要求1所述的专门用于畜禽养殖圈舍的灭蚊制剂的制备方法，其特征在于所述的发酵培养基的组成为：马铃薯汁20％-30％，葡萄糖2％-3％，磷酸氢二钾0.5％-0.6％，磷酸二氢钾0.3％-0.4％，七水硫酸镁0.2％-0.4％，氯化铵0.1％-0.2％，硫酸亚铁0.1％-0.15％。
3.根据权利要求1所述的专门用于畜禽养殖圈舍的灭蚊制剂的制备方法，其特征在于所述的发酵工艺后还设置有前处理工序、提取工序和分离工序。
4.根据权利要求3所述的专门用于畜禽养殖圈舍的灭蚊制剂的制备方法，其特征在于所述前处理工序是指灭蚊霉菌的发酵液进行破壁处理，在灭蚊霉菌的发酵液中加入几丁质酶。
5.根据权利要求4所述的专门用于畜禽养殖圈舍的灭蚊制剂的制备方法，其特征在于所述提取工序将灭蚊霉菌的发酵液温度提升到45-55℃，保温1-2h。
6.根据权利要求5所述的专门用于畜禽养殖圈舍的灭蚊制剂的制备方法，其特征在于所述分离工序指利用0.22μm的过滤纸板过滤，将灭蚊霉菌原生质体与灭蚊霉菌的发酵液分离。
7.根据权利要求1所述的专门用于畜禽养殖圈舍的灭蚊制剂的制备方法，其特征在于所述蛋白酶为胰蛋白酶或组织蛋白酶或木瓜蛋白酶或枯草杆菌蛋白酶的一种或两种以上的混合物。
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