CN113061114A - 一种与二苯丙氨酸二肽共组装形成荧光材料的探针及其制备方法和应用 - Google Patents

一种与二苯丙氨酸二肽共组装形成荧光材料的探针及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种与二苯丙氨酸二肽共组装形成荧光材料的探针及其制备方法和应用。本发明首次提出并制备得到了一种新型的绿色荧光蛋白发色团类似物m‑DBI，制备包括中间产物及目标产物合成两个步骤，制备方法简单、可控；同时，本发明将制备得到的m‑DBI用于与二苯丙氨酸二肽形成共组装形成的管状荧光材料，可以被β‑淀粉样蛋白聚集抑制剂EGCG瓦解，而BI则不会影响m‑DBI与FF共组装管状材料的结构和荧光性质，使得所述管状荧光材料能够筛选AD疾病可能的抑制剂分子，具有潜在的应用价值。

Description

一种与二苯丙氨酸二肽共组装形成荧光材料的探针及其制备 方法和应用
技术领域
本发明属于分析检测技术领域，具体涉及一种与二苯丙氨酸二肽共组装形成荧光材料的探针及其制备方法，以及所述探针与二苯丙氨酸二肽共组装形成的荧光材料在筛选β-淀粉样蛋白聚集抑制剂中的应用。
背景技术
阿尔兹海默症(AD)是一种神经退行性疾病，临床上表现为记忆障碍、失语、人格和行为改变等。如今，全世界有4600万人患有阿尔茨海默症，预计到2050年，这一数字预计将超过1.3亿。迄今为止，临床试验的药物都没有显示出显著的疗效，因此迫切需要寻找有效的治疗方法和能够辅助药物开发的荧光探针。众所周知，β-淀粉样蛋白的聚集在阿尔兹海默症的神经病理学中起核心作用。在过去的几十年中，研究人员一直在探索阿尔兹海默症相关的聚集机制，包括氢键、疏水相互作用和空间位阻相互作用等。然而，蛋白质自身固有的聚集倾向使基于结构的研究极具挑战性；而在体外研究中，通常需要冗长的分离和纯化蛋白，利用光谱或显微技术对这些易于聚集的蛋白质进行生物物理分析，存在着分离过程缓慢、费力、导致假阳性及重复性差的不足。因此，建立一个能替代、容易处理、不涉及蛋白质纯化和结果重复性高的平台非常重要。
研究表明，芳香族基团能增强蛋白质的聚集趋势，并稳定已经形成的蛋白质聚集体；β-淀粉样蛋白19位和20位的两个苯丙氨酸残基在蛋白聚集体形成初期作用重大，亲水残基替代蛋白中的苯丙氨酸残基能使其聚集速率减慢，而蛋白中引入更多的苯丙氨酸残基则明显导致其聚集倾向增大。此外，核磁共振技术研究证明β-淀粉样蛋白抑制剂与其特异性结合的区域为FF。因此，FF区既是一个关键的分子识别和自组装单元，也是有效抑制淀粉样变性过程的有效药物靶点。通过对β-淀粉样蛋白的系统研究，证明蛋白中二苯丙氨酸二肽(FF)，可以形成高度类似淀粉样原纤维特征的纳米管，比如具有β-折叠结构，热稳定非常好，与硫磺素T亲和力强；同时，有研究还发现，FF二肽可作为β-淀粉样蛋白的最小单元或核心识别序列，也是抑制β-淀粉样蛋白聚集过程的药物靶点。因此，由于具有淀粉样蛋白聚集体的大部分特性，FF可以作为淀粉样蛋白系统的模型；而能够检测FF自组装的荧光探针，则可以作为阿尔兹海默症的荧光成像和药物筛选的早期诊断工具。
近几十年来，绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)作为一种生物相容性优异和光稳定性良好的探针，受到药理学、分子生物学和细胞生物学等领域的广泛关注。自GFP发现以来，人们设计并合成了大量的绿色荧光蛋白发色团(4-羟基苄基二咪唑啉酮，HBI)衍生物。HBI衍生物的研究拓展了GFP发色团的光谱范围、量子效率、光稳定性等，使GFP发色团类似物在生物成像领域的应用更广泛，相关新型的、高效的探针的开发成为研究的热点。
发明内容
针对现有技术存在的不足，本发明的目的之一在于提供一种新型的HBI衍生物分子，所述HBI衍生物分子可与FF共组装形成一种具备蓝色荧光性质的管状材料；本发明的另外一个目的在于提供上述 HBI衍生物分子的制备方法，所述方法简单、易行；本发明的另外一个目的在于提供由上述HBI衍生物分子与FF共组装形成的管状材料作为β-淀粉样蛋白聚集抑制剂筛选工具的应用。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种可与二苯丙氨酸二肽共组装形成荧光材料的探针，其结构式如下：
Figure BDA0002992819120000031
本发明还要求保护制备上述探针的方法，其合成路线如下：
Figure BDA0002992819120000032
优选的，制备包括如下步骤：
(1)化合物1的制备：按比例称取N-乙酰甘氨酸、乙酸钠和3-(二甲氨基)苯甲醛，加入到四氢呋喃和乙酸酐的混合溶剂中，溶解均匀后进行搅拌反应，反应完成后除去溶剂，然后加入二氯甲烷并用盐水多次洗涤，得有机相；对所述有机相依次进行干燥、过滤、浓缩、层析处理后，得黄色固体，即得所述化合物1，其结构式如下；
Figure BDA0002992819120000041
(2)m-DBI的制备：按比例称取化合物1、2,2,2-三氟乙胺、碳酸钾，加入到乙醇溶剂中后进行加热回流，回流完成后除去溶剂，然后加入二氯甲烷并用盐水多次洗涤，得有机相；对所述有机相依次进行干燥、过滤、浓缩、层析处理后，得黄色固体，即得所述m-DBI，其结构式如下；
Figure BDA0002992819120000042
优选的，步骤(1)中N-乙酰甘氨酸、乙酸钠和3-(二甲氨基)苯甲醛的摩尔比为1:1.5～3：0.2～0.8。
优选的，步骤(1)中搅拌反应温度为80～100℃，反应时间为 12～18h。
优选的，步骤(1)中四氢呋喃和乙酸酐的体积比为1:1。
优选的，步骤(2)中化合物1、2,2,2-三氟乙胺和碳酸钾的摩尔比为1:1～3:1～3。
优选的，步骤(2)中回流加热温度为80～100℃，回流时间为2～8h。
优选的，所述层析均使用硅胶柱，化合物1的层析洗脱剂为体积比为1:6的二氯甲烷和石油醚的混合溶剂，m-DBI的层析洗脱剂为体积比为50:1的二氯甲烷和甲醇的混合溶剂。
本发明还要求保护由上述方法制备得到的探针在制备筛选β-淀粉样蛋白聚集抑制剂材料中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果如下：
(1)本发明首次提出并制备得到了一种新型的绿色荧光蛋白发色团类似物m-DBI，通过优化反应条件，得到了纯度较高的m-DBI 物质，制备方法简单、可控。
(2)申请人创造性的发现制备得到的m-DBI可以与二苯丙氨酸二肽(FF)共组装形成具有蓝色荧光的管状材料，这种管状材料能够被β-淀粉样蛋白聚集抑制剂EGCG瓦解，并伴随着荧光强度降低，而对β-淀粉样蛋白聚集无作用的BI不会影响m-DBI与FF共组装管状材料的结构和荧光性质。本发明提出的m-DBI与FF共组装管状材料能够筛选AD疾病可能的抑制剂分子，具有潜在的应用价值。
(3)本发明中比较了吸附组装和共组装两种不同方式得到的 m-DBI与FF组装材料。研究发现，通过吸附组装得到的组装材料发绿光；通过共组装得到的组装材料发蓝光。
附图说明
图1是m-DBI浓度增加时FF组装材料的荧光显微镜图像:0.00 mg/mL(A)、0.06mg/mL(B)、0.24mg/mL(C)、0.6mg/mL(D)；(E) 和(F)对应(A)和(C)中微管直径的统计分布。
图2是m-DBI浓度增加时m-DBI与FF共组装材料的荧光显微镜图像：0.00mg/mL(A)、0.06mg/mL(B)、0.24mg/mL(C)、0.48mg/mL (D)、0.6mg/mL(E)、0.75mg/mL(F)；(G)和(H)对应(A)和(E)中微管直径的统计分布。
图3是m-DBI随浓度增加的荧光显微镜图像:0.06mg/mL(A)、 0.48mg/mL(B)、0.6mg/mL(C)、0.75mg/mL(D)。
图4是m-DBI与FF组装材料的扫描电镜图像：FF自组装材料 (A)，m-DBI吸附于FF组装材料(B)，m-DBI与FF共组装(C)，m-DBI 自组装材料(D)。
图5是EGCG浓度从0mM增加到4.8mM时FF-DBI自组装管状材料的荧光光谱。
图6是EGCG孵化后FF与m-DBI自组装管状材料的荧光显微镜图像(A)和扫描电镜图像(B)。
图7是当BI浓度从0mM增加到4.8mM时，FF与m-DBI自组装管状材料的荧光光谱。
图8是BI孵化后FF与m-DBI自组装管状材料的荧光显微镜图像(A)和扫描电镜图像(B)。
具体实施方式
下面结合实施例和附图对本发明做进一步说明，但本发明不受下述实施例的限制。
除了特殊说明外，本发明中所有试剂均从商业渠道购买。其中，二苯丙氨酸二肽购买自北京伊诺凯科技有限公司，N-乙酰甘氨酸、 3-(二甲氨基)苯甲醛均购买自郑州阿尔法化工有限公司。
实施例1
一种可与二苯丙氨酸二肽共组装形成荧光材料的探针的制备方法，包括如下步骤：
(1)化合物1的制备：称取17mmol N-乙酰甘氨酸、34mmol 乙酸钠和10mmol 3-(二甲氨基)苯甲醛，加入到20mL四氢呋喃和 20mL乙酸酐组成的混合溶剂中，溶解均匀后于80℃下搅拌反应16h，反应完成后用旋转蒸发器除去溶剂，然后加入50mL二氯甲烷，并用 30mL盐水洗涤3次，得有机相；用无水MgSO4对所述有机相进行干燥，然后进行过滤、浓缩处理，最后利用硅胶柱对得到的粗产物进行层析(以体积比为1:6的二氯甲烷和石油醚的混合溶液为洗脱剂)，得1.5g黄色固体，即为所述化合物1，其结构式如下；
Figure BDA0002992819120000071
其中，化合物1的氢核磁谱图信息如下：
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.21(t,J＝7.9Hz,1H),7.12(s,1H), 7.00(s,1H),6.93(d,J＝7.6Hz,1H),6.75(dd,J＝8.3,2.2Hz,1H),4.15 (q,J＝7.1Hz,2H),2.90(s,6H),1.98(s,3H)；
碳核磁谱图信息如下：
13C NMR(100MHz,CDCl3)δ168.06,165.61,150.57,133.71, 132.80,132.16,129.50,120.95,115.90,115.73,113.95,40.62,15.74；
(2)m-DBI的制备：称取6.5mmol化合物1、9.75mmol 2,2,2- 三氟乙胺、9.75mmol碳酸钾，加入到20mL乙醇溶剂中后于85℃下回流4h，回流完成后用旋转蒸发器除去溶剂，然后加入50mL二氯甲烷，并用30mL盐水洗涤3次，得有机相；用无水MgSO4对所述有机相进行干燥，然后进行过滤、浓缩处理，最后利用硅胶柱对得到的粗产物层析(以体积比为50:1的二氯甲烷和甲醇的混合溶液为洗脱剂)处理，得1.3g黄色固体，即为所述m-DBI，其结构式如下：
Figure BDA0002992819120000081
其中，m-DBI的氢核磁谱图信息如下：
1H NMR(400MHz,DMSO)δ7.21(t,J＝8.0Hz,1H),7.12(s,1H), 6.99(s,1H),6.92(d,J＝4.0Hz,1H),6.75(dd,J＝8.0,2.4Hz,1H),4.15 (q,J＝7.6Hz,2H),2.90(s,6H),1.94(s,3H)；
碳核磁谱图信息如下：
13C NMR(100MHz,CDCl3)δ169.68,165.57,150.82,134.28, 132.51,129.56,126.89,118.36,114.00,61.14,40.51,22.77。
实施例2
将实施例1制备得到的m-DBI用于制备与FF吸附共组装形成的管状材料，具体制备方法如下：
(1)FF储备溶液的制备：称取100mg FF溶解在1mL 1,1,1,3,3,3- 六氟-2-丙醇(HFP)中，得浓度为100mg/mL的FF储备溶液；
(2)m-DBI储备溶液的制备：称取30mg m-DBI溶解在1mL HFP 中，得m-DBI储备溶液；
(3)FF自组装：量取2.5μL FF储备溶液，加入到1.5mL离心管中，自然干燥，待HFP完全蒸发后，加入1mL超纯水再溶解，确保FF的最终浓度为0.25mg/mL，接着室温下超声5min，静置1h后在水溶液中可得到FF自组装体；
(4)m-DBI标记FF的组装材料的制备：在干净试管中加入不同体积的m-DBI储备溶液，待HFP完全蒸发后，向试管内加入FF 自组装体，振荡器混合，静置1h，得不同浓度的m-DBI标记FF的组装材料。
本实施例中，先制备好FF自组装材料，然后m-DBI通过吸附的方法附着在FF自组装纳米材料上，从而得到m-DBI标记FF的组装材料。
对制备得到的m-DBI标记FF的组装材料做荧光显微镜测试和 SEM测试。
(1)荧光显微镜测试
量取20μL制备得到的组装材料，滴加到载玻片上，待水溶液自然挥发干后，用荧光显微镜观察。结果如图1所示。
从图1中可以看到，m-DBI可以很好地吸附在FF自组装的纳米材料上，并发出绿色荧光。图1A表明FF自组装形成的管状材料是没有荧光的，当吸附一定量的m-DBI之后，FF纳米管发出绿色荧光；从图1B-C中可以看到，随着m-DBI的浓度增加，荧光强度相应增强；此外，FF吸附m-DBI之后不会影响其结构。同时，从图1E中可以看出，FF自组装材料呈管状，直径为0.3至2.2微米；从图1F中可以看出，当吸附m-DBI后直径为0.5至3.1微米，与吸附前区别不大。
(2)SEM测试
量取10μL本实施例中的组装材料，滴加到玻璃片上，通风橱中静置2天，待水溶液彻底挥发干后，将玻璃片放置到场发射电子显微镜(SEM)中测试。结果见图4所示。
从图4A和图4B中可以看到，FF自组装管状材料的直径明显小于本实施例制备得到的组装材料。
实施例3
将实施例1制备得到的m-DBI用于制备与FF共组装形成的管状材料，具体制备方法如下：
(1)FF储备溶液的制备：称取100mg FF溶解在1mL HFP中，得浓度为100mg/mL的FF储备溶液；
(2)m-DBI储备溶液的制备：称取30mg m-DBI溶解在1mL HFP 中，得m-DBI储备溶液；
(3)m-DBI与FF共组装管状材料的制备：量取2.5μL FF储备溶液和不同体积(2、8、16、20及25μL)的m-DBI储备溶液，于 1.5mL的离心管中进行混合，待HFP完全蒸发后，加入1mL超纯水中再溶解，FF的最终浓度为0.25mg/mL，m-DBI的最终浓度为0.06、 0.24、0.48、0.6及0.75mg/mL，然后在室温下超声处理5min，静置 1h，得到m-DBI与FF共组装管状材料。
本实施例中，化合物m-DBI和FF通过一定非共价键的方式共组装成管状材料。对制备得到的组装材料做荧光显微镜测试和SEM测试。
(1)荧光显微镜测试
量取20μL制备得到的共组装材料，滴加到载玻片上，待水溶液自然挥发干后，用荧光显微镜观察。观察结果如图2所示。
从图2中可以看到，m-DBI与FF共组装管状材料发出均匀的蓝色荧光；进一步的，从图2B-F中可以看到，随着m-DBI的浓度增加，荧光强度增强。此外，从图2G-H中可以看到，m-DBI与FF共组装形成的管状材料的直径为0.5至5微米，大于FF自组装形成的管状材料的直径(0.3至2.2微米)。
(2)SEM测试
量取10μL本实施例中的组装材料，滴加到玻璃片上，通风橱中静置2天，待水溶液彻底挥发干后，将玻璃片放置到场发射电子显微镜(SEM)中测试。结果见图4所示。
从图4C中可以看到，FF自组装材料和实施例2制备得到的组装材料的直径明显小于本实施例制备得到的组装材料。
实施例4
本实施例中，观察m-DBI自组装材料的形貌。首先，制备m-DBI 自组装材料，其方法如下：
(1)m-DBI储备溶液的制备：称取300mg m-DBI溶解在1mL HFP中，得m-DBI储备溶液；
(2)m-DBI自组装：量取20μL m-DBI储备溶液，加入到1.5mL 离心管中，自然干燥，待HFP完全蒸发后，加入1mL超纯水再溶解， m-DBI最终浓度为6mg/mL，接着室温下超声5min，静置1h，即得 m-DBI自组装体。
接着，量取20μL制备得到的m-DBI自组装体材料，滴加到载玻片上，待水溶液自然挥发干后，用荧光显微镜观察。观察结果如图 3所示。
从图3中可以看到，m-DBI自身无法组装形成管状材料，而是聚集成不规则的球体，且发出绿色荧光。结合图1、图2的形貌及结果分析，可以进一步证明m-DBI材料本身不呈管状，而是与FF组装后才形成的具有荧光性质的管状材料。
实施例5
将实施例3制备得到的m-DBI与FF共组装管状材料用于筛选β- 淀粉样蛋白聚集抑制剂，具体方法如下：
根据现有文献的报道(Brahmachari S,etal.2017)，选取对β-淀粉样蛋白聚集有抑制作用的表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)为正对照，对β-淀粉样蛋白聚集没有抑制作用的苯并咪唑(BI)作为负对照。取实施例3制备得到的m-DBI与FF共组装管状材料2mL，向其中分别加入一定量的EGCG或BI固体粉末，得到不同浓度(0.8、 2.4及4.8mmol/L)的EGCG或BI水溶液，振荡器混合3min，静置 24h，将所得含EGCG或BI的水溶液移入荧光比色皿中，用荧光分光光度计测试。测试结果见图5～图8所示。
从图5中可以看到，正对照中，EGCG水溶液中孵化m-DBI与 FF通过共组装形成具有荧光性质材料24h后，随着EGCG浓度的增加，m-DBI与FF共组装管状材料的荧光强度下降，当EGCG的浓度达到4.8mM时，管状材料的荧光强度下降50％，表明EGCG对m-DBI 与FF共组装管状材料有明显的解聚作用。
从图6A何图6B中可以看到，m-DBI与FF共组装管状材料与 EGCG孵育后部分被瓦解，表明EGCG对m-DBI与FF共组装管状材料有瓦解能力。
从图7中可以看到，负对照中，随着BI的浓度增加，m-DBI与 FF共组装管状材料在水溶液中的荧光强度没有变化，说明BI对组装好的荧光材料没有影响。进一步的，从图8中可以看到，m-DBI与 FF共组装管状材料与BI孵育后形态无任何变化，表明BI对m-DBI 与FF共组装管状材料没有瓦解能力。上述结果表明，m-DBI与FF 共组装形成具有荧光性质的材料可作为β-淀粉样蛋白聚集抑制剂筛选模型。
最后需要说明的是：以上实施例不以任何形式限制本发明。对本领域技术人员来说，在本发明基础上，可以对其作一些修改和改进。因此，凡在不偏离本发明精神的基础上所做的任何修改或改进，均属于本发明要求保护的范围之内。

Claims (10)

1.一种与二苯丙氨酸二肽共组装形成荧光材料的探针，其特征在于，结构式如下：
Figure FDA0002992819110000011
2.一种如权利要求1所述探针的制备方法，其特征在于，合成路线如下：
Figure FDA0002992819110000012
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，制备包括如下步骤：
(1)化合物1的制备：按比例称取N-乙酰甘氨酸、乙酸钠和3-(二甲氨基)苯甲醛，加入到四氢呋喃和乙酸酐的混合溶剂中，溶解均匀后进行搅拌反应，反应完成后除去溶剂，然后加入二氯甲烷并用盐水多次洗涤，得有机相；对所述有机相依次进行干燥、过滤、浓缩、层析处理后，得黄色固体，即得所述化合物1，其结构式如下；
Figure FDA0002992819110000013
(2)m-DBI的制备：按比例称取化合物1、2,2,2-三氟乙胺、碳酸钾，加入到乙醇溶剂中后进行加热回流，回流完成后除去溶剂，然后加入二氯甲烷并用盐水多次洗涤，得有机相；对所述有机相依次进行干燥、过滤、浓缩、层析处理后，得黄色固体，即得所述m-DBI，其结构式如下：
Figure FDA0002992819110000021
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中N-乙酰甘氨酸、乙酸钠和3-(二甲氨基)苯甲醛的摩尔比为1:1.5～3：0.2～0.8。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中搅拌反应温度为80～100℃，反应时间为12～18h。
6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中四氢呋喃和乙酸酐的体积比为1:1。
7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中化合物1、2,2,2-三氟乙胺和碳酸钾的摩尔比为1:1～3:1～3。
8.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中回流加热温度为80～100℃，回流时间为2～8h。
9.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述层析均使用硅胶柱，化合物1的层析洗脱剂为体积比为1:6的二氯甲烷和石油醚的混合溶剂，m-DBI的层析洗脱剂为体积比为50:1的二氯甲烷和甲醇的混合溶剂。
10.由权利要求2-9所述方法制备得到的探针在制备筛选β-淀粉样蛋白聚集抑制剂材料中的应用。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114989093A (zh) * 2022-06-29 2022-09-02 江汉大学 Aie荧光材料的制备和应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102279270A (zh) * 2011-04-27 2011-12-14 商丘师范学院 利用聚集诱导发光监测β淀粉样蛋白聚集过程的方法
US20120252699A1 (en) * 2009-02-18 2012-10-04 Cornell University Coupled recognition/detection system for in vivo and in vitro use
CN111440206A (zh) * 2020-03-05 2020-07-24 淮阴工学院 一种近红外荧光探针bodipy类化合物及其制备方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20120252699A1 (en) * 2009-02-18 2012-10-04 Cornell University Coupled recognition/detection system for in vivo and in vitro use
CN102279270A (zh) * 2011-04-27 2011-12-14 商丘师范学院 利用聚集诱导发光监测β淀粉样蛋白聚集过程的方法
CN111440206A (zh) * 2020-03-05 2020-07-24 淮阴工学院 一种近红外荧光探针bodipy类化合物及其制备方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HAOKE ZHANG ET AL.: "Aggregate Science: From Structures to Properties", 《ADVANCED MATERIALS》 *
SIO-LON TOU ET AL.: "Aggregation-induced emission of GFP-like chromophores via exclusion of solvent-solute hydrogen bonding", 《CHEMICAL COMMUNICATIONS》 *
WENJIAO SONG ET AL.: "Plug-and-play fluorophores extend the spectral properties of Spinach", 《JOURNAL OF THE AMERICAN CHEMICAL SOCIETY》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114989093A (zh) * 2022-06-29 2022-09-02 江汉大学 Aie荧光材料的制备和应用
CN114989093B (zh) * 2022-06-29 2023-05-16 江汉大学 Aie荧光材料的制备和应用

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