CN113045428A - 化合物及其在减脂中的用途 - Google Patents

化合物及其在减脂中的用途 Download PDF

Info

Publication number
CN113045428A
CN113045428A CN201911364124.7A CN201911364124A CN113045428A CN 113045428 A CN113045428 A CN 113045428A CN 201911364124 A CN201911364124 A CN 201911364124A CN 113045428 A CN113045428 A CN 113045428A
Authority
CN
China
Prior art keywords
fat
dnp
compound
cells
alkyl group
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201911364124.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113045428B (zh
Inventor
李媛
鲍诚
李泽坤
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
China Agricultural University
Original Assignee
China Agricultural University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by China Agricultural University filed Critical China Agricultural University
Priority to CN201911364124.7A priority Critical patent/CN113045428B/zh
Publication of CN113045428A publication Critical patent/CN113045428A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113045428B publication Critical patent/CN113045428B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C205/00—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton
    • C07C205/39—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by esterified hydroxy groups
    • C07C205/42—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by esterified hydroxy groups having nitro groups or esterified hydroxy groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the carbon skeleton
    • C07C205/43—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by esterified hydroxy groups having nitro groups or esterified hydroxy groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the carbon skeleton to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring or to carbon atoms of six-membered aromatic rings being part of the same condensed ring system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

本发明提出了化合物及其用途和含有其的药物组合物，所述化合物具有下式所示的结构：
Figure DDA0002337959950000011
其中，R为
Figure DDA0002337959950000012
R1选自C2～20烷基；所述烷基可任选地被一个或多个氟、氯、溴、碘、羟基或氨基所取代。本发明的化合物具有亲油特性，能够有效地促进DNP在脂肪部位的靶向聚集，同时也不影响减脂功效，不会对脂肪细胞产生毒性，对于减脂方面具有较高的科学研究价值和临床应用价值，应用前景广泛。

Description

化合物及其在减脂中的用途
技术领域
本发明涉及生物医药领域。具体地，本发明涉及化合物及其在减脂中的用途。
背景技术
20世纪30年代曾经流行过一种减肥药——2,4-二硝基苯酚(DNP)，其减脂原理是阻断细胞线粒体中ATP的合成，导致线粒体产生热量而非ATP，使糖与脂肪分解出的热量白白浪费掉，不能为身体供能，从而需要消耗更多的糖与脂肪，而产生过多的热量。虽然达到了一定的减肥效果，但后来多人由于过热死亡，在1938年被废止使用。近来有研究发现，线粒体中与DNP工作原理相似的解偶联蛋白(uncoupling proteins)也有助于减肥，特别是有助于白色脂肪棕色化的效果。DNP被禁用的一个主要原因就是没有靶向到脂肪组织，导致全身细胞的产热，产生致死的副作用。
Figure BDA0002337959930000011
因此，目前用于靶向到脂肪组织进行减脂的化合物仍有待研究。
发明内容
本发明旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题至少之一。
为此，在本发明的一个方面，本发明提出了一种化合物。根据本发明的实施例，所述化合物具有下式所示的结构：
Figure BDA0002337959930000012
其中，R为
Figure BDA0002337959930000013
R1选自C2～20烷基；所述烷基可任选地被一个或多个氟、氯、溴、碘、羟基或氨基所取代。
本发明的发明人尝试在DNP的基础上连接一个基团，以便于促进DNP在脂肪部位的靶向聚集。经过缜密设计和实验后发现，将芳基上的羟基被具有一定碳原子数量的烷基所取代，所得到的化合物具有亲油特性，能够有效地促进DNP在脂肪部位的靶向聚集，同时也不影响减脂功效，不会对脂肪细胞产生毒性，对于减脂方面具有较高的科学研究价值和临床应用价值，应用前景广泛。
根据本发明的实施例，所述化合物还可以具有下列附加技术特征：
根据本发明的实施例，所述R1选自C5～15烷基，优选C10～15烷基。由此，可以进一步提高化合物的靶向性，有助于其在脂肪部位的聚集和释放，发挥减脂功效。若烷基上的碳原子数过多，不利于其穿过细胞膜进入细胞，若碳原子数过少，会导致靶向性差，不易特异性地聚集到脂肪部位，而导致全身细胞产热，产生副作用。
根据本发明的实施例，所述化合物具有下式所示的结构。由此，可以进一步提高化合物的靶向性，有助于其在脂肪部位的聚集和释放，发挥减脂功效。
Figure BDA0002337959930000021
(FA-DNP)。
在本发明的另一方面，本发明提出了前面所述化合物在制备药物中的用途。根据本发明的实施例，所述药物用于减脂。如前所述，前面所述化合物可以特异性地靶向聚集和释放到脂肪部位，发挥减脂功效，可起到减肥作用，并可用于治疗因机体脂肪含量过高而引发的疾病。
根据本发明的实施例，所述药物用于抑制胚胎成纤维细胞分化为成熟白色脂肪细胞过程中PPARγ和c/EBPα的表达。由此，可以抑制油滴生成，起到减脂功效。
根据本发明的实施例，所述药物用于促进成熟白色脂肪细胞棕色化过程中PPARγ、UCP1、PCG1α和PRDM16的表达。由此，可以促进成熟白色脂肪细胞棕色化。
根据本发明的实施例，所述药物作用于腹腔白色脂肪细胞、背部棕色脂肪细胞和腹股沟白色脂肪细胞。该化合物能够特异性地聚集并释放到腹腔白色脂肪细胞、背部棕色脂肪细胞和腹股沟白色脂肪细胞上，从而起到减脂功效。
本领域技术人员能够理解的是，前面针对化合物所描述的特征和优点，同样适用于该化合物在制备药物中的用途，在此不再赘述。
在本发明的又一方面，本发明提出了一种药物组合物。根据本发明的实施例，所述药物组合物包括前面所述的化合物。如前所述，化合物具有亲油特性，能够有效地促进DNP在脂肪部位的靶向聚集，同时也不影响减脂功效，不会对脂肪细胞产生毒性，应用前景广泛。
根据本发明的实施例，所述药物组合物进一步包括药学上可接受的辅料。本发明对于辅料的种类不做严格限定，可以根据情况灵活选择。对于注射制剂，药物上可接受的载体可以包括缓冲剂、防腐剂、止痛剂、增溶剂等渗压剂(isotonic agent)和稳定剂。对于局部给药的制剂，药物上可接受的载体可以包括碱，赋形剂，润滑剂和防腐剂。本发明的药物组合物可以与上述的药物上可接受的载体结合被制备成各种剂型。对于注射制剂，药物组合物可以被制备成例如一次剂量的剂型的安瓿或例如多剂量容器的单元型剂型。药物组合物还可以被制备成溶液，悬浮液，药片，药丸，胶囊和长效制剂。
其中，根据本发明的一些具体示例，适合药物配方的辅料中赋形剂和稀释液的可以包括：乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、木糖醇、赤藻糖醇、麦芽糖醇、淀粉、阿拉伯橡胶、藻酸盐、凝胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羟基苯甲酸甲酯、羟苯丙酯、滑石、硬脂酸镁和矿物油。根据本发明的另一些实施例，本发明的辅料还可以包括填充剂、润滑剂、保湿剂、芳香剂和防腐剂。
本领域技术人员能够理解的是，前面针对化合物所描述的特征和优点，同样适用于该药物组合物，在此不再赘述。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。
附图说明
本发明的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：
图1显示了根据本发明实施例的DNP与FA-DNP在3T3-L1脂肪细胞中的细胞毒性分析示意图；
图2显示了根据本发明实施例的DNP与FA-DNP在3T3-L1细胞中的内吞情况分析示意图；
图3显示了根据本发明实施例的DNP与FA-DNP对脂肪分化的抑制作用分析示意图；
图4显示了根据本发明实施例的DNP与FA-DNP对脂肪分化过程中关键蛋白的调控分析示意图；
图5显示了根据本发明实施例的DNP与FA-DNP对白色脂肪棕色化关键蛋白的调控分析示意图；
图6显示了根据本发明实施例的DNP与FA-DNP干预的高脂饲料诱导的肥胖小鼠动物实验结果分析示意图。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的方案进行解释。本领域技术人员将会理解，下面的实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1
将3T3-L1细胞接种在96孔细胞培养板上，每孔接种8000个细胞，待细胞贴壁后分别处理不同浓度的DNP或者FA-DNP，24h后，通过MTT实验方法测量细胞的存活率，验证药物对细胞的毒性。
结果如图1所示，可以看出，DNP与FA-DNP均不会对3T3-L1(小鼠胚胎成纤维细胞)产生细胞毒性。
实施例2
将3T3-L1细胞接种在6孔细胞培养板上，待细胞增殖到80％左右时，处理相同浓度的DNP或着FA-DNP，之后在不同的时间点取上层培养基，测量未被细胞吸收的药物量，并收集细胞，通过乙腈提取出被细胞内吞的药物，通过UPLC测量各个时间点的DNP及FA-DNP的含量。
结果如图2所示，可以看出，当给药浓度相同时，随着给药时间的增长，到24h的时候细胞对FA-DNP的内吞率(Endocytosis rate)达到90％以上，而细胞对DNP的内吞率只到70％左右。到24h后，在细胞外培养基中的药物浓度(Concentration in media)也是FA-DNP组比较少。
实施例3
将3T3-L1细胞接种在6孔细胞培养板上，当细胞长满整个培养孔的时候，NC组每两天更换正常细胞培养基，MDI组和其他给药组均每两天更换含MDI药物的培养基，给药组同时处理不同浓度的DNP或者FA-DNP，在经过8天后，除了NC组，其他组在MDI药物的诱导下，分化为成熟的白色脂肪细胞，有大量的脂滴积累，通过光学显微镜明场下观察给药后脂滴积累量的变化。
结果如图3所示，3T3-L1(小鼠胚胎成纤维细胞)在脂肪分化诱导药物MDI的诱导下逐渐分化为成熟的脂肪细胞，并产生许多油滴(MDI组)，而在处理DNP或FA-DNP之后，在处理10μg/ml低浓度时，已经表现出很好的抑制油滴生成的效果，但是这个效果随着给药浓度的升高有所减弱，而FA-DNP并没有因为结构上的变化而减弱其减脂功效。
实施例4
同实施例3，将细胞进行相同的处理后，在细胞分化成熟过程中，连续处理不同浓度的DNP或FA-DNP后，将细胞收集并提取细胞内的总蛋白，通过western blots实验测定不同浓度的药物对脂肪分化过程中关键蛋白PPARγ及cEPBα表达的影响。
结果如图4所示，与图3的结果类似，在10μg/ml的给药浓度时，两者都达到了非常明显的抑制脂肪分化促进因子PPARγ和c/EBPα的表达，但是抑制效果随浓度升高而减弱，因此推测DNP的主要作用是解耦连作用，白色脂肪棕色化也是减脂过程中非常关键的一个过程，由此推测高浓度可能会促进白色脂肪棕色化。
实施例5
同实施例4，将细胞进行相同的处理后，在细胞分化成熟过程中，连续处理不同浓度的DNP或FA-DNP后，将细胞收集并提取细胞内的总蛋白，通过western blots实验测定DNP或FA-DNP对白色脂肪棕色化蛋白表达的影响。
结果如图5所示，随着给药浓度的升高，两者都表现出促进白色脂肪棕色化正向调控蛋白PPARγ、UCP1、PCG1α、PRDM16的表达。表明高浓度的DNP和FA-DNP都有促进白色脂肪棕色化的效果。
实施例6
采用高脂饲料诱导肥胖小鼠模型后，采取腹腔注射的方法，以0.32mg/20g BW的给药剂量，每天腹腔注射DNP或FA-DNP，每周监测两次体重，在给药3周后，绘制体重变化图(图6A)，利用清醒动物体成分分析仪，测定各组小鼠的体脂率(图6B)，然后通过UPLC测定各种脂肪组织中DNP及FA-DNP的含量，进行比较(图6C)。其中，CD代表喂养小鼠生长普通饲料，HFD代表喂养高脂饲料。
如图6A结果显示，FA-DNP显示出与DNP相似的减轻高脂小鼠体重的结果，图6B各组小鼠的体脂率结果来看，FA-DNP的减脂效果比DNP略好一些，图6C的结果证实了我们的猜想，FA-DNP在FWAT(腹腔白色脂肪)，BAT(背部棕色脂肪)和iWAT(腹股沟白色脂肪)中的累积量远大于DNP，表明FA-DNP在改变结构后增加了DNP的脂肪部位靶向性，并没有降低DNP的减肥效果。
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。

Claims (9)

1.一种化合物，其特征在于，具有下式所示的结构：
Figure FDA0002337959920000011
其中，R为
Figure FDA0002337959920000012
R1选自C2～20烷基；
所述烷基可任选地被一个或多个氟、氯、溴、碘、羟基或氨基所取代。
2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述R1选自C5～15烷基，优选C10～15烷基。
3.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，具有下式所示的结构：
Figure FDA0002337959920000013
4.权利要求1～3任一项所述的化合物在制备药物中的用途，其特征在于，所述药物用于减脂。
5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述药物用于抑制胚胎成纤维细胞分化为成熟白色脂肪细胞过程中PPARγ和c/EBPα的表达。
6.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述药物用于促进成熟白色脂肪细胞棕色化过程中PPARγ、UCP1、PCG1α和PRDM16的表达。
7.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述药物作用于腹腔白色脂肪细胞、背部棕色脂肪细胞和腹股沟白色脂肪细胞。
8.一种药物组合物，其特征在于，包括权利要求1～3任一项所述的化合物。
9.根据权利要求8所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物进一步包括药学上可接受的辅料。
CN201911364124.7A 2019-12-26 2019-12-26 化合物及其在减脂中的用途 Active CN113045428B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911364124.7A CN113045428B (zh) 2019-12-26 2019-12-26 化合物及其在减脂中的用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911364124.7A CN113045428B (zh) 2019-12-26 2019-12-26 化合物及其在减脂中的用途

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113045428A true CN113045428A (zh) 2021-06-29
CN113045428B CN113045428B (zh) 2022-04-22

Family

ID=76505889

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201911364124.7A Active CN113045428B (zh) 2019-12-26 2019-12-26 化合物及其在减脂中的用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN113045428B (zh)

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103376241A (zh) * 2012-04-12 2013-10-30 云南天士力帝泊洱生物茶集团有限公司 一种快速从天然产物中筛选脂肪酶抑制剂的方法
WO2015154732A1 (en) * 2014-04-09 2015-10-15 Agra Group A.S. Plant stimulators, use thereof and method of plant stimulation
CN105682653A (zh) * 2013-08-30 2016-06-15 耶鲁大学 新型2，4-二硝基苯酚制剂和使用其的方法
CN106866432A (zh) * 2017-03-31 2017-06-20 九江善水科技股份有限公司 一种硝基苯酚及其中间体的合成工艺
CN109195589A (zh) * 2016-03-07 2019-01-11 米托充制药公司 神经肌肉性、神经变性、自身免疫性、发育性、脑震荡、干眼病和/或代谢性疾病的dnp和dnp前药治疗

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103376241A (zh) * 2012-04-12 2013-10-30 云南天士力帝泊洱生物茶集团有限公司 一种快速从天然产物中筛选脂肪酶抑制剂的方法
CN105682653A (zh) * 2013-08-30 2016-06-15 耶鲁大学 新型2，4-二硝基苯酚制剂和使用其的方法
CN110302385A (zh) * 2013-08-30 2019-10-08 耶鲁大学 新型2，4-二硝基苯酚制剂和使用其的方法
WO2015154732A1 (en) * 2014-04-09 2015-10-15 Agra Group A.S. Plant stimulators, use thereof and method of plant stimulation
CN109195589A (zh) * 2016-03-07 2019-01-11 米托充制药公司 神经肌肉性、神经变性、自身免疫性、发育性、脑震荡、干眼病和/或代谢性疾病的dnp和dnp前药治疗
CN106866432A (zh) * 2017-03-31 2017-06-20 九江善水科技股份有限公司 一种硝基苯酚及其中间体的合成工艺

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
SHI,JI-LIANG等: "Electron- transfer fluorescence quenching processes in coaggregates between excited N-alkylcarbazoles as electron donors and 2,4-dinitrophenyl carboxylates or pentafluorophenyl carboxylates as acceptors", 《CHINESE JOURNAL OF CHEMLWRY》 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN113045428B (zh) 2022-04-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5484320B2 (ja) ナリンゲニンとナリンジンを形質転換成長因子−β１のシグナル経路阻害剤とする使用
US11149014B2 (en) Method for treating pain or associated condition or symptom
WO2017113649A1 (zh) 罗汉果提取物抗肺纤维化的应用
EP1955701B1 (en) Polyacetylenic compounds
KR101577792B1 (ko) 마치현 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 ｉｌ-6 매개성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
WO2016043517A1 (ko) 목단피，백지 및 시호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는，신경 퇴행성 질환의 치료 및 예방용 약학적 조성물
KR102006998B1 (ko) 개머루덩굴 추출물, 이의 분획물 또는 이로부터 분리된 화합물을 유효성분으로 포함하는 ｉｌ-6 매개성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
CN113045428B (zh) 化合物及其在减脂中的用途
EP0915696A2 (en) ANTI-beta-AMYLOID PROTEIN-INDUCED CYTOTOXICITY COMPOSITION
JP2014152175A (ja) カテプシンｋ抑制剤としてミリセチンの用途
KR20170045463A (ko) 오미자 추출물을 유효성분으로 포함하는 IL-1β에 의한 관절염의 예방 또는 개선용 조성물
WO2014063660A1 (en) Naringenin and asiatic acid combination treatment of fibrosis
CN107137417B (zh) 一种用于治疗恶病质的药物组合物及其应用
JP5819209B2 (ja) 幹細胞から褐色脂肪細胞への分化促進剤
JP6034107B2 (ja) 幹細胞から褐色脂肪細胞への分化促進剤
KR102447966B1 (ko) 녹용 유산균 발효물을 유효성분으로 포함하는 근육 질환 또는 근육 손상의 예방, 개선 또는 치료용 조성물
CN111840512B (zh) 治疗软骨修复和/或骨关节炎的组合物
KR102063962B1 (ko) 캄펜을 유효성분으로 함유하는 골다공증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
KR20210016163A (ko) 커큐민 및 다가 불포화 지방산을 유효성분으로 함유하는 관절염의 예방 및 치료용 조성물
KR20200140104A (ko) 당근잎을 유효성분으로 포함하는 뼈 성장 촉진용 조성물
RU2761826C1 (ru) Композиция для профилактики или лечения рака, включающая разрушающее сосуды средство и таксановое соединение
KR102605187B1 (ko) 배암차즈기 추출물 또는 이의 유래 화합물을 유효성분으로 포함하는 근위축 예방 또는 치료용 약학적 조성물
WO2024029173A1 (ja) 骨粗鬆症の予防又は改善剤
KR101788306B1 (ko) 매칠린 에이를 포함하는 자궁내막증의 예방 또는 치료용 조성물
KR101785970B1 (ko) 올레산 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 근육손실 예방 및 치료용 약학적 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant