CN112972484A - 一种三叶苷在制备促进皮肤伤口愈合药物中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开一种三叶苷在制备促进皮肤伤口愈合药物中的应用，涉及药学领域；本发明采用三叶苷制备了促进大鼠皮肤伤口愈合的药物组合物，经过动物实验验证得知，制备得到的药物组合物能明显降低与皮肤创伤相关的炎症因子的水平，增加胶原纤维沉积，促进大鼠皮肤伤口愈合。本发明材料来源广泛，易于获取，用于制备药物简单易行、治疗效果好，还具有安全和成本低等特点。

Description

一种三叶苷在制备促进皮肤伤口愈合药物中的应用
技术领域
本发明涉及药学领域，特别是涉及一种三叶苷在制备促进皮肤伤口愈合药物中的应用。
背景技术
皮肤是人体最大的天然屏障，也是人体面积最大的器官，因其具有阻挡异物和病原体侵入，防止体液流失等功能，从而起到重要的屏障保护作用。由于皮肤总是暴露在外部环境中，故受伤概率较大。伤口通常是由正常组织的结构和功能被破坏引起，导致皮肤破裂造成身体伤害。创伤愈合是一个动态的交互过程，包含止血/炎症、增殖和组织重塑3个重叠阶段。这些阶段的任何异常都将导致慢性伤口或严重的组织纤维化。造成皮肤创伤的原因主要包括切割伤、脊髓损伤、挤压伤、冻伤、枪伤、烧伤、疾病等。长期无法愈合的伤口所产生的费用给患者和社会带来沉重的负担。因此，加速创伤愈合具有重要意义。炎症是机体对于刺激的一种防御反应，表现为红肿热痛，功能障碍。炎症阶段在伤口愈合中发挥重要作用。炎症是一把“双刃剑”，适度的炎症反应有利于伤口的愈合，过于强烈的炎症反应和渗出则不利于伤口愈合。伤口愈合后期，大量炎症因子，例如肿瘤坏死因子 (tumor necrosisfactor,TNF)-α、白细胞介素(interleukin,IL) -1β和IL-6等，进而诱导一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, iNOS)产生一氧化氮(nitric oxide，NO)，延迟伤口愈合。因此，抑制过度的炎症反应是促进伤口愈合的重要策略。
迄今为止，在治疗学上尚无理想的促进皮肤伤口愈合的药物，因此，进一步寻找安全、有效、经济的促进皮肤伤口愈合的药物具有重要意义。如果从中草药活性成分中能够发现一种有效的促进皮肤伤口愈合药物，这对该化合物用于促进皮肤伤口愈合的治疗意义重大。
三叶苷(Tilobatin，TLB)为多穗石柯植物的Lithocarpus polystachyus Rehd.的干燥茎叶提取物，是一种中草药活性成分，分子式为C21H24O10，结构式为：
Figure RE-GDA0003043035850000021
已知三叶苷具有抗缺血性脑卒中、抗病毒、抗老年痴呆等作用。此外，三叶苷能够减少脂多糖诱导的促炎因子(TNF-α、IL-1β、IL-6) 的分泌，并具有较强的抗氧化作用。
迄今尚无三叶苷促进皮肤伤口愈合的报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种三叶苷在制备促进皮肤伤口愈合的药物中的应用，以解决上述现有技术存在的问题。
为实现上述目的，本发明提供一种三叶苷在制备促进皮肤伤口愈合的药物中的应用。
本发明还提供一种促进皮肤伤口愈合的三叶苷软膏，所述三叶苷软膏由蜂蜡、植物油和三叶苷组成。
进一步的，所述三叶苷软膏的制备方法为：取熔化的蜂蜡和植物油搅拌均匀，加入三叶苷粉混匀即得所述三叶苷软膏。
本发明还提供一种促进皮肤伤口愈合的三叶苷水凝胶，所述三叶苷水凝胶由卡波姆、甘油、蒸馏水、苯甲酸钠水溶液、三乙醇胺和三叶苷组成。
进一步的，所述三叶苷水凝胶的制备方法为：将卡波姆在搅拌下加入甘油中，全部分散后加蒸馏水与其混匀，再加苯甲酸钠水溶液搅拌均匀后即得卡波姆凝胶基质，三叶苷粉与所述卡波姆凝胶基质研磨均匀，加三乙醇胺，搅拌均匀后即得所述三叶苷水凝胶。
本发明还提供一种促进皮肤伤口愈合的三叶苷乳膏，所述三叶苷乳膏由硬脂酸、白凡士林、液体石蜡、月桂醇硫酸钠、尼泊金乙酯、甘油、蒸馏水和三叶苷组成。
进一步的，所述三叶苷乳膏的制备方法为：将硬脂酸、白凡士林和液体石蜡加热融化，得油溶液备用；月桂醇硫酸钠、尼泊金乙酯、甘油和蒸馏水加热融化，得水溶液；将所述水溶液和所述油溶液混合加热搅拌，再在室温下搅拌冷凝获得乳白色半固体状的基质；三叶苷粉与所述基质研匀即得所述三叶苷乳膏。
本发明公开了以下技术效果：本发明采用三叶苷制备了促进皮肤伤口愈合的药物，经过动物实验验证得知，制备得到的药物组合物能明显降低与皮肤创伤相关的炎症因子的水平，增加胶原纤维沉积，促进大鼠皮肤伤口愈合。本发明材料来源广泛，易于获取，用于制备药物简单易行、治疗效果好，还具有安全和成本低等特点。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为不同浓度的TLB治疗组较模型组大鼠的皮肤伤口测量图；
图2为不同浓度的TLB治疗组较模型组大鼠的皮肤伤口面积量化图；
图3为TLB对胶原纤维沉积的影响图；
图4为TLB三叶苷对炎症相关因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平影响的量化图，其中A为大鼠血清IL-1β水平的比较结果，B为大鼠血清IL-6水平的比较结果，C为大鼠血清TNF-α水平的比较结果。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。
若无特殊说明，本发明实施例中的材料均市售可得。
实施例1三叶苷药物的制备
1.1软膏
取165g蜂蜡置水浴上加热熔化后，缓缓加入170g植物油，搅拌均匀，自水浴上取下，不断搅拌至冷凝；取5g三叶苷细粉于研磨器中，分次加入所制的基质，研匀即得。
1.2水凝胶
将1.5g卡波姆940在搅拌下缓慢加入60mL甘油中，充分搅拌至卡波姆940全部分散。然后加40mL蒸馏水与其搅拌混匀，再加1％苯甲酸钠水溶液搅拌均匀后即得卡波姆凝胶基质。取5g三叶苷细粉于研磨器中，分次加入卡波姆凝胶基质研磨均匀，加2g三乙醇胺，搅拌均匀后即得。
1.3乳膏
将10g硬脂酸、12g白凡士林和10g液体石蜡水浴加热搅拌融化，得油溶液备用；1g月桂醇硫酸钠、0.1g尼泊金乙酯、5g甘油和100ml 蒸馏水在另一容器中水浴加热搅拌融化，得水溶液；上述水溶液以细流的方式加入油溶液中，在水浴上不断顺向搅拌，再在室温下搅拌冷凝至呈乳白色半固体状。取5g三叶苷细粉于研磨器中，分次加入上述所制的基质，研匀即得。
实施例2三叶苷在制备促进皮肤伤口愈合药物中的应用
雄性SD大鼠(200-220g)60只，采用直径8mm的取皮器从大鼠背部正中线肩胛下角2cm处钻取全层皮肤制备皮肤创伤模型，模型建立成功后将大鼠随机平均分为6组，分别为模型组(不做药物处理) 和5组TBL药物处理组。5组TLB药物处理组的给药方式为：分别对 5组TLB药物处理组的大鼠的伤口上均匀涂抹TLB软膏(实施例1制备)，2次/天，连续涂抹14天，观察TLB对大鼠皮肤伤口愈合的作用。5组TLB药物处理组的大鼠的TLB的用量分别为含TLB 0.001％、 0.005％、0.025％、0.125％、0.625％的软膏。
2.1 TLB对大鼠皮肤伤口愈合的影响
采用2％戊巴比妥钠麻醉大鼠后，使其取俯卧位，剔除大鼠伤口周围新生的毛发，充分暴露伤口，于造模后第0、3、7、10和14天对伤口进行拍照和测量。结果如图1-2所示，其中图1为不同浓度的 TLB治疗组较模型组大鼠皮肤伤口图，由图1可观察到TBL治疗组的皮肤伤口明显缩小；图2为不同浓度的TLB治疗组较模型组大鼠的皮肤伤口面积量化图。由图1-2可知，TLB能够明显促进皮肤创伤模型大鼠伤口愈合并呈剂量依赖性。
2.2 TLB对胶原纤维沉积的影响实验
取大鼠皮肤，制备石蜡切片，通过Masson染色法观察TLB对胶原纤维沉积的影响。结果如图3所示，其中，Model代表模型组，0.005％代表三叶苷0.005％软膏治疗；0.025％代表三叶苷0.025％软膏治疗， 0.125％代表三叶苷0.125％软膏治疗，0.625％代表三叶苷0.625％软膏治疗；Model设定为1；**代表三叶苷治疗组与Model比较，P<0.01； *代表三叶苷治疗组与Model比较，P<0.05。结果发现，TLB可明显增加胶原纤维沉积。
2.3 TLB降低炎症相关因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平
取血清，通过ELISA法观察三叶苷对炎症相关因子TNF-α、 IL-1β、IL-6水平的影响。研究结果表明，三叶苷能够明显降低皮肤创伤模型大鼠炎症相关因子的水平(图4)，其中，A图，与正常组比较，模型组大鼠血清IL-1β水平明显升高(P<0.05)；而TLB可降低大鼠血清IL-1β的水平(P<0.05)。B图，与正常组比较，模型组大鼠血清IL-6水平明显升高(P<0.05)；而TLB可降低大鼠血清IL-6 的水平(P<0.05)。C图，与正常组比较，模型组大鼠血清TNF-α水平明显升高(P<0.05)；而TLB可降低大鼠血清TNF-α的水平(P<0.05)。因此，TLB能够通过抑制炎症反应发挥促进伤口愈合作用。
经过上述动物实验验证得知，本发明采用三叶苷制备得到的药物组合物能增加胶原纤维沉积、抑制炎症反应并且促进大鼠皮肤伤口愈合。
以上所述的实施例仅是对本发明的优选方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。

Claims (7)

1.一种三叶苷在制备促进皮肤伤口愈合的药物中的应用。
2.一种促进皮肤伤口愈合的三叶苷软膏，其特征在于，所述三叶苷软膏由蜂蜡、植物油和三叶苷组成。
3.根据权利要求2所述的三叶苷软膏，其特征在于，所述三叶苷软膏的制备方法为：取熔化的蜂蜡和植物油搅拌均匀，加入三叶苷粉混匀即得所述三叶苷软膏。
4.一种促进皮肤伤口愈合的三叶苷水凝胶，其特征在于，所述三叶苷水凝胶由卡波姆、甘油、蒸馏水、苯甲酸钠水溶液、三乙醇胺和三叶苷组成。
5.根据权利要求4所述的三叶苷水凝胶，其特征在于，所述三叶苷水凝胶的制备方法为：将卡波姆在搅拌下加入甘油中，全部分散后加蒸馏水与其混匀，再加苯甲酸钠水溶液搅拌均匀后即得卡波姆凝胶基质，三叶苷粉与所述卡波姆凝胶基质研磨均匀，加三乙醇胺，搅拌均匀后即得所述三叶苷水凝胶。
6.一种促进皮肤伤口愈合的三叶苷乳膏，其特征在于，所述三叶苷乳膏由硬脂酸、白凡士林、液体石蜡、月桂醇硫酸钠、尼泊金乙酯、甘油、蒸馏水和三叶苷组成。
7.根据权利要求6所述的三叶苷乳膏，其特征在于，所述三叶苷乳膏的制备方法为：将硬脂酸、白凡士林和液体石蜡加热融化，得油溶液备用；月桂醇硫酸钠、尼泊金乙酯、甘油和蒸馏水加热融化，得水溶液；将所述水溶液和所述油溶液混合加热搅拌，再在室温下搅拌冷凝获得乳白色半固体状的基质；三叶苷粉与所述基质研匀即得所述三叶苷乳膏。
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