CN112912378A - 用于抑制黄嘌呤氧化酶的肼基嘌呤化合物以及三唑并嘌呤化合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种由以下通式(式中，R1、R3、R4、R6、R8、R10和R12表示氢原子或烷基，R2、R5、R7、R9、R11和R13表示氢原子、烷基或芳基。)代表的肼基嘌呤化合物或三唑并嘌呤化合物以及包含该化合物作为有效成分的黄嘌呤氧化酶抑制用组合物、医药用组合物，尤其涉及一种用于预防或治疗由高尿酸血症、痛风以及高尿酸血症引起的疾病的医药用组合物。

Description

用于抑制黄嘌呤氧化酶的肼基嘌呤化合物以及三唑并嘌呤化 合物
技术领域
本发明涉及一种具有黄嘌呤氧化酶抑制作用的新型肼基嘌呤化合物或三唑并嘌呤化合物以及包含该化合物作为有效成分的医药用组合物。
背景技术
尿酸是由黄嘌呤、次黄嘌呤等氧嘌呤通过黄嘌呤氧化酶(XO)合成的。在人类和多数其他灵长类中，尿酸是嘌呤代谢的氧化最终产物，如果血液中的尿酸值高，就会引起痛风发作。为了降低尿酸值，使用“抑制尿酸产生的药”，这种药可举出别嘌呤醇(商品名：赛来力)。别嘌呤醇由XO代谢，转换为氧别嘌醇(与氧嘌呤的竞争性抑制)。而且，这个氧别嘌醇也有抑制XO的作用(XO酶抑制)。也就是说，该氧别嘌醇通过与黄嘌呤氧化酶的酶活性中心的钼蝶呤单元结合，也显示出酶抑制作用。即，比较黄嘌呤和别嘌呤醇的结构，由于结构相似，所以黄嘌呤氧化酶会错误地吸收别嘌呤醇而不是黄嘌呤。其结果是，别嘌呤醇被氧化生成氧别嘌醇，该氧别嘌醇进一步抑制黄嘌呤氧化酶起作用，从而抑制尿酸的生成。通过这种作用机制，别嘌呤醇可以降低尿酸值，治疗高尿酸血症和痛风。由于赛来力(别嘌呤醇)是肾排泄型药剂，因此对于肾功能低下的患者，有必要调节给药量。
在给予别嘌呤醇处方的患者中，由于有3～5％的患者会出现中毒性表皮坏死溶解症、皮肤粘膜眼综合症、剥脱性皮炎等严重的皮肤损害或过敏性血管炎等副作用，或者肾功能损害患者需要代替药，因而进行了新药的开发，最近开发出了一种新型痛风治疗药物，该药物具有黄嘌呤氧化还原酶(XOR)抑制作用。即，2011年1月获得批准的由帝人制药株式会社开发的非嘌呤型黄嘌呤氧化酶抑制剂非布索坦(商品名：Feburic)，通过抑制黄嘌呤氧化还原酶(XOR)的作用，抑制尿酸的产生，降低血中及尿中尿酸的浓度。由于非布索坦是基于酶蛋白的活性中心结构的抑制剂，因此与现有的XO抑制剂别嘌呤醇不同，其抑制方式不依赖于XOR的氧化/还原状态，与氧化型和还原型XOR均紧密结合，可以认为是显示出强酶抑制作用的混合型抑制。其以比别嘌呤醇更低的用量降低血中以及尿中尿酸。另外，在使用大鼠的药物动态试验中，肾外排泄途径的比例约占50％。非布索坦没有竞争性抑制的概念，通过变构抑制(作用于酶的活性中心以外的部分，通过改变酶的构象，间接地降低酶的催化活性等)，抑制黄嘌呤氧化酶。也就是说，可以认为，直接结合黄嘌呤氧化酶的活性中心的钼蝶呤单元进行抑制的是别嘌呤醇，通过结合到活性中心附近，抑制次黄嘌呤和黄嘌呤到达酶活性部位的是非布索坦。作为非布索坦的特征，其脂溶性高，在肝脏中也能被代谢，因此肾损伤患者易于使用。不过，虽然非布索坦显示出比别嘌呤醇强的尿酸值降低作用，但作为严重的副作用，有时会出现伴随肝功能损害：AST(GOT)、ALT(GPT)等上升的肝功能损害，因此在施用本药剂的过程中，必须进行定期的检查等，充分观察患者的状态。另外，由于可能抑制巯基嘌呤或硫唑嘌呤的代谢酶黄嘌呤氧化酶，增强骨髓抑制等副作用，因此禁止并用。另外，富士药品还开发了与非布索坦具有类似结构、具有同样的XOR抑制作用和副作用的新化合物-托吡司他(商品名：Topiloric、Uriadec)，于2013年6月获得了批准。
另一方面，作为具有黄嘌呤氧化酶抑制作用的其他化合物，虽然有报告显示了嘌呤衍生物化合物，但尚未得到批准(参照下述专利文献1和非专利文献1，该文献的全部记载作为公开被引用在此)。
[现有技术文献]
[专利文献]
[专利文献1]国际公开第96/26208号公报
[非专利文献]
[非专利文献1]永松等著，J.Chem.Soc.，Perkin Trans.1，3117-3125(1999)
发明内容
发明要解决的问题
本发明要解决的问题在于，旨在提供一种具有黄嘌呤氧化酶抑制作用的新型肼基嘌呤化合物以及三唑并嘌呤化合物。
用于解决问题的技术手段
本发明的发明人为了解决上述课题，专心合成、查找比上述的现有痛风治疗药副作用少、安全，并且通过更少量的服用来抑制黄嘌呤氧化还原酶(XOR)作用的药剂，结果发现了肼基嘌呤衍生物化合物(I)和三唑并嘌呤衍生物化合物(Ⅱ)，作为其候选化合物。这些通过与别嘌呤醇相同的反应机制(竞争抑制和酶抑制)抑制尿酸的生成，通过使用来源于牛奶的黄嘌呤氧化酶(XO)的in vitro尿酸生成抑制试验，发现了与别嘌呤醇相比超过300倍到1000倍的强抑制活性化合物。进而，通过运用计算机的计算化学，求出了对黄嘌呤氧化还原酶(XOR)的抑制方式和对接分数(结合自由能，kcal/mol)，根据对接分数(纵轴)和XO抑制(in vitro IC50，横轴)的图表，得到了有用的相关关系。另外，还明确了对数种黄嘌呤氧化酶(XO)的别嘌呤醇和新化合物的对接方式。还明确了，该肼基嘌呤衍生物化合物(I)和三唑并嘌呤衍生物化合物(Ⅱ)具有与别嘌呤醇相同的竞争抑制以及与非布索坦相同的变构抑制作用。因此，可以认为，有望发挥比迄今为止开发的黄嘌呤氧化酶抑制剂更强的抑制作用，能够减轻肾脏和肝脏等的负担地进行代谢、排出。此次开发的新化合物是核酸相关化合物的嘌呤和黄嘌呤类似化合物，与别嘌呤醇相比，脂溶性高，也可以合成接近非布索坦的脂溶性的衍生物。其相比别嘌呤醇，生物利用性高，向尿的代谢排出也容易，毒性也弱。而且，由于能够期待以更少量的服用产生有效的XOR抑制作用，因此副作用也更轻。本发明是基于这些见解和成功例子而完成的发明。
因此，根据本发明的实施方案，提供了以下的方面[1]至[16]。
[1]一种由以下通式(I)表示的肼基嘌呤化合物：
[化1]
Figure BDA0002990857160000031
式中，R1、R3和R4各自独立地表示氢原子或烷基，R2和R5各自独立地表示氢原子、烷基或芳基。
[2]如[1]所述的化合物，其中，R1、R2、R3和R4均为氢原子，R5为烷基或芳基。
[3]如[1]所述的化合物，其中，R1、R2和R3均为氢原子，R4为甲基，R5为烷基或芳基。
[4]如[1]所述的化合物，其中，R1和R3均为甲基，R2和R4均为氢原子，R5为烷基或芳基。
[5]如[1]所述的化合物，其中，R1、R3和R4均氢原子，R2和R5各自独立为烷基或芳基。
[6]一种由以下通式(Ⅱ)表示的三唑并嘌呤化合物：
[化2]
Figure BDA0002990857160000032
式中，R6和R8均表示氢原子或烷基，R7和R9各自独立地表示氢原子、烷基或芳基。
[7]如[6]所述的化合物，其中，R6、R7和R8均为氢原子，R9为氢原子、烷基或芳基。
[8]如[6]所述的化合物，其中，R6和R8均为烷基，R7为氢原子，R9为氢原子、烷基或芳基。
[9]如[6]所述的化合物，其中，R6和R8均为氢原子，R7为烷基或芳基，R9为氢原子、烷基或芳基。
[10]一种由以下通式(Ⅲ)表示的三唑并嘌呤化合物：
[化3]
Figure BDA0002990857160000041
式中，R10和R12均表示烷基，R11表示氢原子，R13表示氢原子、烷基或芳基。
[11]如[10]所述的化合物，其中，R10和R12均为甲基，R11为氢原子，R13为氢原子、甲基或芳基。
[12]一种包含选自如[1]至[5]所述的肼基嘌呤化合物以及如[6]至[11]所述的三唑并嘌呤化合物中的至少一种化合物作为有效成分的黄嘌呤氧化酶抑制用组合物。
[13]一种包含选自如[1]至[5]所述的肼基嘌呤化合物以及如[6]至[11]所述的三唑并嘌呤化合物中的至少一种化合物作为有效成分的医药用组合物。
[14]如[13]所述的医药用组合物，其中，所述医用组合物是用于预防或治疗选自高尿酸血症、痛风、肾功能衰竭或慢性肾病等肾损害、高血压、心血管疾病、血脂异常及代谢综合症中的至少一种疾病的医药用组合物。
[15]选自如[1]至[5]所述的肼基嘌呤化合物以及如[6]至[11]所述的三唑并嘌呤化合物中的至少一种化合物在制造医药用组合物中的应用。
[16]一种高尿酸血症、痛风、肾功能衰竭或慢性肾病等肾损害、高血压、心血管疾病、血脂异常及代谢综合征的预防方法或治疗方法，其包括向受试者施用有效量的选自如[1]至[5]所述的肼基嘌呤化合物以及如[6]至[11]所述的三唑并嘌呤化合物中的至少一种化合物。
发明效果
本发明的一个方面的肼基嘌呤化合物及三唑并嘌呤化合物与别嘌呤醇相比，具有较强抑制活性。另外，本发明的一个方面的肼基嘌呤化合物及三唑并嘌呤化合物能够期待对肾脏和肝脏等负担少地代谢排出，而且其与别嘌呤醇等现有的黄嘌呤氧化酶抑制剂相比，形成与黄嘌呤氧化酶更稳定的结合状态，因此也有望实现高生物利用率和低毒性。而且，由于能够期待以更少量的服用产生有效的黄嘌呤氧化酶抑制作用，因此副作用也更轻。因此，本发明的一个方面的肼基嘌呤化合物及三唑并嘌呤化合物具有黄嘌呤氧化酶抑制活性，由此可知，包含本发明的一个方面的肼基嘌呤化合物和三唑并嘌呤化合物的组合物，作为黄嘌呤氧化酶抑制用组合物是有用的，而且，作为预防或治疗高尿酸血症的治疗剂或者高尿酸血症引起的痛风、痛风关节炎以及痛风结节等尿酸盐沉积症的医药用组合物是有用的。另外，由于肾功能衰竭和慢性肾病等肾损害、高血压、心血管疾病、血脂异常以及代谢综合征与高尿酸血症有很深的关联，因此，本发明的一个方面的包含肼基嘌呤化合物和三唑并嘌呤化合物的组合物作为用于预防或治疗肾功能衰竭和慢性肾病等肾损害、高血压、心血管疾病、血脂异常及代谢综合征的医药用组合物是有用的。
具体实施方式
以下将详细说明本发明的一个方面的肼基嘌呤化合物和三唑并嘌呤化合物、制造方法以及包含该化合物的医药用组合物，但本发明的技术范围不限于本项目的事项，只要达到其目的，本发明就可以采取各种方式。
在本说明书中，所谓的“黄嘌呤氧化酶”，除非特别说明，指的是从次黄嘌呤催化到黄嘌呤、进而到尿酸的氧化反应的酶的总称。承担该反应的黄嘌呤氧化还原酶中，存在氧化酶型和脱氢酶型两种类型，每种类型都包含在本说明书中的黄嘌呤氧化酶中。在“黄嘌呤氧化酶抑制作用”、“黄嘌呤氧化酶抑制用组合物”等中，除非特别说明，“黄嘌呤氧化酶”与上述定义具有相同的意义。
黄嘌呤氧化酶抑制作用是指上述黄嘌呤氧化酶催化反应的抑制作用。在本发明的化合物中，相比别嘌呤醇等现有的具有黄嘌呤氧化酶抑制作用的痛风治疗药物，更为理想地，以更少量发挥黄嘌呤氧化酶抑制作用。
由于本发明的化合物具有更高的黄嘌呤氧化酶抑制作用，或者具有更持续的黄嘌呤氧化酶抑制作用，因此优选地，化合物与黄嘌呤氧化酶结合的复合体的状态更稳定。作为评价复合体状态稳定的指标，例如，也可以用结合常数、化合物和黄嘌呤氧化酶的复合体状态的结合自由能来表示。以结合自由能表示的情况下，值越小越好。
本发明的一个方面的肼基嘌呤化合物由上述通式(I)表示，式中的R1、R3和R4各自独立表示氢原子或烷基，R2和R5各自独立表示氢原子、烷基或芳基。以下，将上述通式(I)表示的肼基嘌呤化合物表示为肼基嘌呤化合物(I)。
作为R1、R3以和R4表示的烷基，例示有甲基、乙基、丙基、丁基等具有碳数为1至7的直链或支链的低级烷基。
作为R2和R5表示的烷基，例示有甲基、乙基、丙基、丁基等具有碳数为1至7的直链或支链的低级烷基。另外，作为芳基，例示有苯基和具有取代基的苯基。作为具有取代基的苯基的取代基，示出卤原子、烷基、烷氧基、氨基、烷基氨基、亚甲二氧基、羟基或硝基，取代基的数量为1至5个。
具体举例这样的芳基，可举出：苯基；甲苯基、乙苯基等具有碳数1至5的烷基的烷基苯基；甲氧基苯基、乙氧基苯基等具有碳数1至5的烷氧基的烷氧基苯基；二甲基氨基苯基、二乙基氨基苯基等具有碳数1至5的烷基氨基的烷基氨基苯基；氟苯基、氯苯基、溴苯基、碘苯基等卤苯基；亚甲二氧基苯基；羟基苯基；硝基苯基等。
根据本发明的一个方面的肼基嘌呤化合物(I)，在黄嘌呤氧化酶抑制作用以及与黄嘌呤氧化酶的复合体的稳定性这一点上，优选化合物是至少满足以下条件之一的化合物。
(i-1)R1、R2、R3和R4均为氢原子，R5为烷基、苯基、烷基苯基或者以下通式(IV)表示的取代基：
[化4]
Figure BDA0002990857160000061
其中，X1至X5各自独立表示选自氢原子、卤原子、烷基、烷氧基、氨基、烷基氨基、硝基及羟基的取代基。
(i-2)R1、R2和R3均为氢原子，R4为甲基，R5为烷基、苯基或下述通式IV表示的取代基：
[化5]
Figure BDA0002990857160000062
其中，X1至X5各自独立表示选自氢原子、卤原子、烷基、烷氧基、氨基、烷基氨基、硝基及羟基的取代基。
(i-3)R1和R3均为甲基，R2和R4均为氢原子，R5为烷基或芳基。
(i-4)R1、R3和R4均为氢原子，R2和R5各自独立为烷基或芳基。
根据本发明的一个方面的肼基嘌呤化合物(I)，在黄嘌呤氧化酶抑制作用方面，R1、R2和R3均优选氢原子，R5优选具有π电子的芳基，更优选1取代甲基、卤素、羟基及硝基苯基。
作为本发明的一个实施方式的肼基嘌呤化合物(I)，列举了表1中记载的具有官能基团的化合物。表1中记载的Me表示甲基，Ph表示苯基。例如4-MeO-C6H4表示在4位具有甲氧基的苯基。以下，在本说明书中的表中以及上下文中也是同样。另外，表1的化合物编号I-1至7以及14至18的化合物是以下文献(该文献的全部记载作为公开而引用在此)中记载的化合物，作为参考进行了记载。
(1)专利国际公开号：PCT Int.Appl.(1996)，WO96/26208，发明名称：嘌呤化合物及黄嘌呤氧化酶抑制剂，发明人：永松朝文、渡边洋子、远藤和树、今泉正洋
(2)T.Nagamatsu，H.Yamasaki，T.Fujita，K.Endo，and H.Machida，J.Chem.Soc.， Perkin Trans.1，3117-3125(1999).
[表1]
Figure BDA0002990857160000081
Figure BDA0002990857160000082
Figure BDA0002990857160000091
以下对本发明的一个方面的化合物的合成方法进行说明。
在通式(I)表示的肼基嘌呤化合物(I)中，R1、R2和R3均为氢原子的肼基嘌呤化合物3a，3b(表1，化合物编号I-1至I-22)的制造方法没有特别限定，但可以按照下面所示的反应式进行合成(方案1)。
[化6]
Figure BDA0002990857160000101
(方案1中，R4表示氢原子或者甲基，R5表示烷基或芳基。)
本说明书中，Ac表示乙酰基，AcOH表示乙酸，TFA表示三氟乙酸。
即，通过使式1表示的化合物(以下称为化合物1等。)与水合肼或甲肼加热反应，得到式2a，2b表示的化合物(以下称为化合物2a，2b等。)(第1工序)。接着，通过使各种醛与该化合物2a，2b发生反应，能够得到由通式3a，3b表示的化合物3a，3b(第2工序)。以下，按各工序进行说明。
(第1工序)
该工序是公知的工序，化合物2a，2b根据根据已知文献(T.Nagamatsu，et al，J.Chem.Soc.Perkin Trans.1，3117(1999)，该文献的全部记载作为公开引用在此)及(T.Nagamatsu，et al，PCT Int.Appl.(1996)，WO9626208，该文献的全部记载作为公开引用在此)分别制备。
(第2工序)
可以根据公知合成法(T.Nagamatsu，et al，J.Chem.Soc.Perkin Trans.1，3117(1999))，制备表1所述的各种嘌呤醛腙类化合物3a，3b(表1，化合物编号I-1至I-22)。此外，化合物编号I-1至I-7及I-14至I-18是公知的化合物，化合物编号I-8至I-13及I-19至I-22的化合物是新化合物。
对于化合物2a，2b(3mmol)，采用R5-CHO(其中，R5表示烷基或芳基。)表示的醛(3.3至3.6mmol)，在乙酸或三氟乙酸等有机溶剂中，在10至30℃下反应30分钟，得到化合物3a，3b(表1，化合物编号I-1至I-22)。
在通式(I)表示的肼基嘌呤化合物(I)中，R1和R3均为甲基、R2和R4均为氢原子的肼基嘌呤化合物6的制造方法并不特别限制，可以按照如下所示的反应式进行合成(方案2)。
[化7]
Figure BDA0002990857160000111
(方案2中，R5表示烷基或芳基。)
本说明书中，Et表示乙基，EtOH表示乙醇，DMF表示N，N’-二甲基甲酰胺。
即，式4表示的化合物4可以由可可碱通过已知的合成方法(K.R.H.Wooldrige，etal，J.Chem.Soc.，1863(1962))衍生出来，通过使其与水合肼(NH2NH2·H2O)加热反应，能够得到新化合物即化合物5(第3工序)。接着，通过使各种醛与该化合物5反应，能够得到由通式6a，6b表示的化合物6(第4工序)。以下，按各工序进行说明。
(第3工序)
该工序能够根据常规方法，从化合物4制备化合物5。
在乙醇中，向化合物4(1g)加入水合肼(4mL)，加热回流30分钟。反应后，滤取析出的结晶，用水重结晶即可得到无色的针状结晶的化合物5。
(第4工序)
通过与第2工序所述的同样的合成法，可以制备表1所述的各种新嘌呤醛腙类化合物6(表1，化合物编号I-23至I-28)。
对化合物5(2.6mmol)采用R5-CHO(其中，R5表示烷基或芳基。)表示的醛(3.1mmol)，在N，N’-二甲基甲酰胺(DMF)(40mL)中，在10至30℃下反应0.5至2小时，能够得到化合物6(表1，化合物编号I-23至I-28)(方案2)。
通式(I)表示的肼基嘌呤化合物(I)中，R1、R3和R4均为氢原子的肼基嘌呤化合物10a-c的制造方法并不特别限制，可以根据如下所示反应式进行合成(方案3)。
[化8]
Figure BDA0002990857160000131
(方案3中，R2表示烷基或芳基，R5表示芳基。)
即，通过使式7a-c表示的化合物7a-c(7a：C.Henry，et al，J.Org.Chem.，23，1457(1958)所述；7b，c：F.Yoneda，et al，Heterocycles.4，1759(1976)所述。)与五硫化二磷加热反应，得到式8a-c表示的化合物8a-c(8a：F.Bergmann，et al，J.Chem.Soc.，4468(1961)所述；8b：F.Bergmann，et al，J.Chem.Soc.(C)，1254(1967)所述。)(第5工序)。然后，使该化合物8a-c与水合肼加热反应，得到式9a-c表示的化合物9a-c(第6工序)。进而，通过使各种醛与该化合物9a-c反应，能够得到通式10a-c表示的化合物10a-c(第7工序)。以下，按各工序进行说明。
(第5工序)
该工序能够根据常规方法，从化合物7a-c制备化合物8a-c。
向吡啶或者β-甲基吡啶(200mL)加入化合物7a-c(15mmol)和五硫化二磷(45mmol)，加热回流8小时。反应后，减压下馏出溶剂，用热水处理，滤取析出的结晶。对其进行在DMF与水的混合溶剂中的活性炭处理及重结晶，可以得到黄色粉末结晶的化合物8a-c。
(第6工序)
该工序能够根据常规方法，从化合物8a-c制备化合物9a-c。
在乙醇中(3至4mL)，向化合物8a-c(1g)加入水合肼(3至4mL)，加热回流1小时。反应后，滤取析出的结晶，用水重结晶即可得到无色的针状结晶的化合物9a-c。
(第7工序)
该工序的化合物可以通过第2工序所述的合成法，制备表1所述的各种嘌呤醛腙类化合物10a-c(表1，化合物编号I-29至I-43)。
向TFA(8mL)加入化合物9a-c(1.8至2.8mmol)和各种醛(2.2至3.3mmol)，分别在室温下搅拌0.5至1小时。反应后，减压下馏出溶剂，用二乙醚处理，滤取析出的结晶。并将其用1％aq.KHCO3洗净，将得到的固体在DMF和水的混合溶剂中重结晶，可以得到化合物10a-c(表1，化合物编号I-29至I-43)(方案3)。
本发明的一个方面的三唑并嘌呤化合物是由上述通式(Ⅱ)和(Ⅲ)表示的，式中的R6和R8均表示氢原子或烷基，R7和R9各自独立表示氢原子、烷基或芳基，R10和R12均表示烷基，R11表示氢原子，R13表示氢原子、甲基或者芳基。以下将上述通式(Ⅱ)和(Ⅲ)表示的三唑并嘌呤化合物表示为三唑并嘌呤化合物(Ⅱ)和(Ⅲ)。
作为R6至R9、R10、R12和R13表示的烷基，例示有甲基、乙基、丙基、丁基等具有碳数为1至7的直链或支链的低级烷基。
另外，作为R7、R9和R13所表示的芳基，例示有苯基和具有取代基的苯基。作为具有取代基的苯基的取代基，示出卤原子、烷基、烷氧基、氨基、烷基氨基、亚甲二氧基、羟基或硝基，取代基的数量为1至5个。具体举例这样的芳基，可举出：苯基；甲苯基、乙苯基等具有碳数1至5的烷基的烷基苯基；甲氧基苯基、乙氧基苯基等具有碳数1至5的烷氧基的烷氧基苯基；二甲基氨基苯基、二乙基氨基苯基等具有碳数1至5的烷基氨基的烷基氨基苯基；氟苯基、氯苯基、溴苯基、碘苯基等卤苯基；亚甲二氧基苯基；羟基苯基；硝基苯基等。
根据本发明的一个实施方式的三唑并嘌呤化合物(Ⅱ)，在黄嘌呤氧化酶抑制作用以及与黄嘌呤氧化酶的复合体的稳定性这一点上，优选化合物是至少满足以下条件之一的化合物。
(ii-1)R6、R7和R8均为氢原子，R9为氢原子、烷基或芳基。
(ii-2)R6、R7和R8均为氢原子，R9为碳数2至7的烷基或芳基。
(ii-3)R6和R8均为烷基，R7为氢原子，R9为氢原子、烷基或芳基。
(ii-4)R6和R8都是烷基，R7为氢原子，并且R9为氢原子、烷基或者以下通式(IV)表示的取代基。
[化9]
Figure BDA0002990857160000151
其中，X1至X5各自独立地表示选自氢原子、烷基、烷氧基、氨基、烷基氨基及羟基的取代基。
(ii-5)R6和R8均为氢原子，R7为烷基或芳基，R9为氢原子、烷基或芳基。
(ii-6)R6和R8均为氢原子，R7为烷基或芳基，R9为氢原子、烷基或者以下通式(IV)表示的取代基。
[化10]
Figure BDA0002990857160000152
其中，X1至X5各自独立地表示选自氢原子、卤原子、烷基、烷氧基、氨基、烷基氨基及羟基的取代基。
根据本发明的一个方面的三唑并嘌呤化合物(Ⅱ)，在黄嘌呤氧化酶抑制作用方面，R6和R8优选氢原子，R9优选具有π电子的芳基、苯基或卤代苯基。
根据本发明的一个方面的三唑并嘌呤化合物(Ⅱ)，在与和黄嘌呤氧化酶的复合体的稳定性方面，R6和R8优选均为氢原子，R9优选具有π电子的芳基，更优选苯基、氯苯基或者烷氧基苯基。
根据本发明的一实施方式的三唑并嘌呤化合物(Ⅲ)，优选化合物为R10和R12均为甲基，R11为氢原子，R13为氢原子、甲基或者芳基的化合物。
作为本发明的一个实施方式的三唑并嘌呤化合物(Ⅱ)和(Ⅲ)，可举出具有表2及3所述的官能基团的化合物。
[表2]
Figure BDA0002990857160000161
Figure BDA0002990857160000162
Figure BDA0002990857160000171
[表3]
Figure BDA0002990857160000172
Figure BDA0002990857160000173
在通式(Ⅱ)表示的三唑并嘌呤化合物(Ⅱ)中，R6、R7和R8均为氢原子的三唑并[5，1-i]嘌呤化合物12(表2，化合物编号Ⅱ-1至Ⅱ-10)的制造方法没有特别限定，可以按照下面所示的反应式进行合成(方案4)。
[化11]
Figure BDA0002990857160000181
(方案4中，R9表示氢原子，表示烷基或芳基。)
作为化合物2a和原酸酯类[RC(OEt)3：R＝H、甲基及苯基]的缩合反应生成物及化合物3a(表1，化合物编号I-2：R5＝4-Cl-C6H4及化合物编号I-5：R5＝4-MeO-C6H4)的氧化闭环生成物，曾经报告有三唑并[3，4-i]嘌呤化合物11的化学结构式(J.Chem.Soc.Perkin Trans.1，3117(1999)及PCT Int.Appl.(1996)，WO9626208)。之后，通过对化学反应及生成物的各种光谱等的详查及下述结构确信的概率较高的其他合成，明确了真正的生成物不是三唑并[3，4-i]嘌呤化合物11，而是三唑并[5，1-i]嘌呤化合物12(表2，化合物编号Ⅱ-1至Ⅱ-5)。即，可以确定结构为首先生成的三唑并[3，4-i]嘌呤化合物11(上述通式(Ⅱ)的R6和R8均为无取代的氢原子的化合物)热不稳定，引起Dimroth重排反应，生成了结构异构体的三唑并[5，1-i]嘌呤化合物12。即，通式12表示的化合物12可以通过向嘌呤肼基衍生物化合物2a加入原酸酯类，加热得到重排体的三唑并[5，1-i]嘌呤化合物12(第8工序)。此外，还发现为了稳定地生成三唑并[3，4-i]嘌呤类化合物11，在化合物11的6位的仲酰胺(上述通式(Ⅲ)的R10)中导入甲基等取代基后，可以无需重排地稳定生成(后述)。进而，通过用硝酸或者氯醌对上述第2工序的方法合成的嘌呤醛腙类化合物3a进行氧化，能够合成在R9(R＝烷基或芳基)导入了各种取代基的重排化合物三唑并[5，1-i]嘌呤类化合物12(第9工序)。以下，按各工序进行说明。
(第8工序)
该工序可以向肼基化合物2a加入原酸酯类后再加热，制备化合物12(表2，化合物编号Ⅱ-1至Ⅱ-3)。
向乙酸(8mL)加入6-肼基-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物2a(1.2mmol)和各种原酸酯(4.8mmol)，分别在80℃下加热搅拌10至20分钟。反应后，冷却到室温，滤取析出的结晶，将其在DMF和水的混合溶剂中重结晶，可以得到化合物12(表2，化合物编号Ⅱ-1至Ⅱ-3)。
(第9工序)
该工序可以使用适当的氧化剂氧化化合物3a，制备化合物3a闭环的化合物12(表2，化合物编号Ⅱ-3至Ⅱ-10)。
(路线i)：向TFA(6mL)加入6-n-亚辛基肼基-7H-嘌呤-2(3H)-酮或者6-芳基甲叉基肼基-7H-嘌呤-2(3H)-酮类化合物3a(1mmol)和70％硝酸(1.5mmol)，分别在室温下搅拌10分钟。反应后，减压下馏出溶剂，用二乙醚处理，滤取析出的结晶。并将其用1％aq.KHCO3洗净，将得到的固体在DMF和水的混合溶剂中重结晶，可以得到化合物12(表2，化合物编号Ⅱ-3至Ⅱ-10)。
(路线ii)：向DMF(20mL)加入6-芳基甲叉基肼基-7H-嘌呤-2(3H)-酮类化合物3a(1mmol)和氯醌(1.5mmol)，分别加热回流10分钟。反应后，减压下馏出溶剂，用乙醇和二乙醚处理，滤取析出的结晶。对其进行在DMF与水的混合溶剂中的活性炭处理及重结晶，可以得到化合物12(表2，化合物编号Ⅱ-3至Ⅱ-10)。
在通式(Ⅲ)表示的三唑并嘌呤化合物(Ⅲ)中，R10和R12均为甲基的三唑并[3，4-i]嘌呤化合物13(表3，化合物编号Ⅲ-1至Ⅲ-7)的制造方法并不特别限制，可以根据如下所示反应式进行合成(方案5)。
[化12]
Figure BDA0002990857160000201
(方案5中，R10和R12均表示甲基，R11表示氢原子，R13表示氢原子、甲基或芳基。)
本说明书中，DMFDMA表示N，N’-二甲基甲酰胺二甲基缩醛，DNPA表示O-(2，4-二硝基苯基)羟胺，MeONaMeOH表示甲醇钠甲醇溶液。
即，向上述第3工序得到的6-肼基-3，7-二甲基-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物5加入原酸酯类，再加热即可无需重排地得到三唑并[3，4-i]嘌呤类化合物13(表3，化合物编号Ⅲ-1至Ⅲ-3)(第10工序)。可以认为，这是因为化合物13的仲酰胺部位被N-甲基化变成叔酰胺，骨架变得稳定，不易重排。同样地，即使硝酸氧化第2工序得到的嘌呤醛腙类化合物6也能稳定且高收率地得到三唑并[3，4-i]嘌呤类化合物13(表3，化合物编号Ⅲ-2至Ⅲ-7)(第11工序)。该化合物13在高温时也对中性溶液稳定，但在第12工序所示的强碱性溶液中，叔酰胺的部分受到加水分解而开环，形成化合物14a-g(第12工序)。然后，在二苯基醚中加热该化合物14，再次闭环能够得到稳定的重排异构体三唑并[5，1-i]嘌呤的1，4-二甲基类化合物12(表2，化合物编号Ⅱ-11至Ⅱ-17)(第13工序)。该1，4-二甲基类化合物12(表2，化合物编号Ⅱ-11至Ⅱ-13)能够鉴定为用DMFDMA甲基化第9工序得到的三唑并[5，1-i]嘌呤类化合物12(表2，化合物编号Ⅱ-1至Ⅱ-3)得到的化合物12(表2，化合物编号Ⅱ-11至Ⅱ-13)。因此，能够确定第9工序的生成物不是化合物11的结构，而是其重排异构体的化合物12(表2，化合物编号Ⅱ-1至Ⅱ-10)(第14工序)。进而，作为另外合成，通过对6-氨基-3，7-二甲基-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物15进行基于O-(2，4-二硝基苯基)羟胺(DNPA)的氨基化而得到1-氨基-6-亚氨基-3，7-二甲基-1，3，6，7-四氢基-2H-嘌呤-2-酮化合物16(第15工序)，然后使该化合物16与原酸酯类反应，得到重排化合物的1，4-二甲基化合物12(表2，化合物编号Ⅱ-11至Ⅱ-13)(第16工序)。以下，按各工序进行说明。
(第10工序)
该工序可以向肼基嘌呤化合物5加入原酸酯类后加热而得到化合物13(表3，化合物编号Ⅲ-1至Ⅲ-3)。
向DMF(20mL)加入6-肼基-3，7-二甲基-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物5(1.03mmol)和各种原酸酯(2.06mmol)，分别加热回流1小时。反应后，减压下馏出溶剂，用醋酸乙酯处理，滤取析出的结晶。将其用DMF和水的混合溶剂重结晶得到化合物13(表3，化合物编号Ⅲ-1至Ⅲ-3)。
(第11工序)
该工序可以通过使用适当的氧化剂氧化化合物6(表1，化合物编号I-23至I-28)，再闭环，然后得到化合物13(表3，化合物编号Ⅲ-2至Ⅲ-7)。
向DMF(30mL)加入6-亚烷基肼基-3，7-二甲基-7H-嘌呤-2(3H)-酮或者6-芳基甲叉基肼基-3，7-二甲基-7H-嘌呤-2(3H)-酮类化合物6(1mmol)和70％硝酸(1.5mmol)，分别在100℃下搅拌0.5至1小时。反应后，减压下馏出溶剂，用水处理，滤取析出的结晶。将其用DMF和水的混合溶剂重结晶得到化合物13(表3，化合物编号Ⅲ-2至Ⅲ-7)。
(第12工序)
该工序可以通过对化合物13(表3，化合物编号Ⅲ-1至Ⅲ-7)进行碱加水分解制备其开环化合物即化合物14a-g。
向0.1N甲醇钠甲醇溶液(10至15mL)加入6，9-二甲基-9H-1，2，4-三唑并[3，4-i]嘌呤-5(6H)-酮类化合物13(表3，化合物编号Ⅲ-1至Ⅲ-7)(1mmol)，分别在室温下搅拌0.5至1小时。反应后，滤去悬浮物，减压下馏出溶剂，加水用10％aq.HCl中和后，结晶析出。将其滤取，通过适当的有机溶剂重结晶，可以得到化合物14a-g。
(第13工序)
该工序可以通过在二苯基醚中加热闭环上述化合物14a-g制备化合物12(表2，化合物编号Ⅱ-11至Ⅱ-17)。
向二苯基醚(8mL)加入化合物14a-g(1mmol)，分别在200℃下加热搅拌2小时。反应后，冷却到室温，滤取析出的结晶，用二乙醚洗净，将其用DMF重结晶，可以得到化合物12(表2，化合物编号Ⅱ-11至Ⅱ-17)。
(第14工序)
该工序用于上述第9工序得到的化合物12(Ⅱ)的结构确定，由DMFDMA甲基化化合物12(表2，化合物编号Ⅱ-1至Ⅱ-3)得到的化合物12(表2，化合物编号Ⅱ-11至Ⅱ-13)能够鉴定为第13工序得到的化合物12(表2，化合物编号Ⅱ-11至Ⅱ-13)。
向DMF(10mL)加入对应的1H-[1，2，4]三唑并[5，1-i]嘌呤-5(4H)-酮类化合物12(表2，化合物编号Ⅱ-1至Ⅱ-3)(1mmol)和N，N’-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(DMFDMA)(10mmol)，分别加热回流2至3小时。反应后，减压下馏出溶剂，用醋酸乙酯处理，滤取析出的结晶。将其用DMF重结晶得到化合物12(表2，化合物编号Ⅱ-11至Ⅱ-13)。
(第15工序)
该工序还用于化合物12的结构确定，是利用另外合成法的起始物质化合物16的合成。
向DMF(100mL)加入已知的化合物6-氨基-2，3-二氢基-3，7-二甲基-2-氧代基-7H-嘌呤化合物15(1.12mmol)和O-(2，4-二硝基苯基)羟胺(DNPA)(1.68mmol)，在80℃下加热搅拌1小时。反应后，减压下馏出溶剂，将残渣用硅胶柱色谱法(Kieselgel 70-230mesh)(醋酸乙酯：乙醇＝4：1)分离纯化，将得到的固体用乙醇重结晶，可以得到无色粉末结晶1-氨基-1，2，3，6-四氢基-6-亚氨基-3，7-二甲基-2-氧代基-7H-嘌呤化合物16。
(第16工序)
该工序可以向第15工序得到的化合物16加入原甲酸酯类再加热而制备化合物12(表2，化合物编号Ⅱ-11至Ⅱ-13)。
向二苯基醚(8mL)加入1-氨基-1，2，3，6-四氢基-6-亚氨基-3，7-二甲基-2-氧代基-7H-嘌呤化合物16(1.03mmol)和各种原酸酯(3.09mmol)，分别在200℃下加热搅拌20分钟。反应后，冷却到室温，滤取析出的结晶，用二乙醚洗净，将其用DMF重结晶，可以得到化合物12(表2，化合物编号Ⅱ-11至Ⅱ-13)。
通式(Ⅱ)表示的三唑并嘌呤化合物(Ⅱ)中，R6和R8均为氢原子、R7为甲基、苯基或者4-Cl-C6H4的三唑并[5，1-i]嘌呤化合物17a-c(表2，化合物编号Ⅱ-18至Ⅱ-38)的制造方法并不特别限制，可以根据如下所示反应式进行合成(方案6)。
[化13]
Figure BDA0002990857160000231
(方案6中，R9表示氢原子、甲基或者芳基。)
本说明书中，DEAD表示偶氮二羧酸二乙酯。
即，向上述第6工序得到的肼基嘌呤衍生物化合物9a-c加入原酸酯类，加热后可以得到重排化合物的三唑并[5，1-i]嘌呤类化合物17(表2，化合物编号Ⅱ-18至Ⅱ-20、化合物编号Ⅱ-25至Ⅱ-27、及化合物编号Ⅱ-32至Ⅱ-34」(第17工序)。
进而，向第7工序得到的嘌呤醛腙衍生物化合物10a-c加入氧化剂偶氮二甲酸二乙酯，加热后，闭环重排而得到化合物17a-c(表2，化合物编号Ⅱ-20至Ⅱ-24、化合物编号Ⅱ-27至Ⅱ-31、及化合物编号Ⅱ-34至Ⅱ-38)(第18工序)。以下，按各工序进行说明。
(第17工序)
该工序可以向肼基嘌呤化合物9a-c加入原酸酯类再加热而制备化合物17a-c(表2，化合物编号Ⅱ-18至Ⅱ-20，Ⅱ-25至Ⅱ-27及Ⅱ-32至Ⅱ-34)。
即，向乙酸(5至8mL)加入肼基嘌呤化合物9a-c(0.7至1.1mmol)和各种原酸酯(2.2至3.3mmol)，分别在80℃下加热搅拌10分钟。反应后，冷却到室温，滤取析出的结晶。将其用DMF和水的混合溶剂重结晶，可以得到化合物17a-c。
(第18工序)
该工序可以用适当的氧化剂氧化嘌呤醛腙化合物10a-c而制备其闭环化合物即化合物17a-c(表2，化合物编号Ⅱ-20至Ⅱ-24，化合物编号Ⅱ-27至Ⅱ-31及化合物编号Ⅱ-34至Ⅱ-38)。
即，向DMF(15至20mL)加入6-芳基甲叉基肼基-8-甲基-7H-嘌呤-2(3H)-酮类化合物10a-c(表1，化合物编号I-29至I-43)(1mmol)和DEAD(2mmol)，分别加热回流1至2小时。反应后，减压下浓缩溶剂，在冰中冷却，滤取析出的结晶。将其用DMF和水的混合溶剂重结晶可以得到化合物17a-c。
通式(Ⅱ)表示的三唑并嘌呤化合物(Ⅱ)中，R6和R8均为氢原子、R7为苯基或者4-Cl-C6H4的三唑并[5，1-i]嘌呤化合物17b，17c(表2，化合物编号Ⅱ-25至Ⅱ-27及化合物编号Ⅱ-32至Ⅱ-34)结构可靠的其他制造方法并无特别限制，可以根据如下所示反应式进行合成(方案7)。
[化14]
Figure BDA0002990857160000251
(方案7中，R9表示氢原子、甲基或者苯基。)
本说明书中，HAOS表示羟胺-O-亚磺酸。
即，向第5工序得到的硫代嘌呤化合物8b，8c加入氨水溶液，密封试管中加热后，得到其氨基化合物即化合物18b，18c(第19工序)。然后，在碱水溶液中向该化合物18b，18c加入HAOS进行氨基化，得到1-氨基-6-亚氨基嘌呤化合物19b，19c(第20工序)。进而，使该化合物19b，19c与各种原酸酯作用后可以得到化合物17b，17c(第21工序)。另外，将某种衍生物同样在无水醋酸中加热，或者加入苯甲醛后在DEAD中加热氧化也可以得到同样的生成物。以下，按各工序进行说明。
(第19工序)
该工序向28％氨水(50mL)加入硫代嘌呤化合物8b，8c(8mmol)，在密封试管中，在160℃下加热48小时。反应后，在冰中冷却，滤取析出的结晶，用水及乙醇洗净，可以得到无色粉末结晶的化合物18b，18c。
(第20工序)
该工序将氨基化合物18b，18c(2mmol)溶解于2N NaOH(15mL)，在0至10℃下加入溶解于3mL水的羟胺-O-亚磺酸(HAOS)(7.6至8.6mmol)，反应后，滤取析出的结晶，将其溶解于水中，用10％aq.HCl中和后，结晶析出。将其用乙醇重结晶，可以得到无色粉末结晶的1-氨基-6-亚氨基化合物即化合物19b，19c。
(第21工序)
该工序作为三唑并[5，1-i]嘌呤类的结构可靠的另外合成法，可以通过以下3种途径合成三唑并[5，1-i]嘌呤类化合物17b，17c(表2，化合物编号Ⅱ-25至Ⅱ-27及化合物编号Ⅱ-32至Ⅱ-34)。
(路线i)：向TFA(4mL)加入8-取代的1-氨基-1，2，3，6-四氢基-6-亚氨基-2-氧代基-7H-嘌呤化合物19b，19c(0.8mmol)和原酸酯(4mmol)，室温下搅拌3小时。反应后，减压下馏出溶剂，用二乙醚处理，滤取析出的结晶。将其用0.5％aq.KHCO3洗净，将得到的固体用DMF和乙醇的混合溶剂重结晶，可以得到无色粉末结晶的化合物17b，17c(表2，化合物编号Ⅱ-25及Ⅱ-32)。
(路线ii)：向无水乙酸(4mL)加入8-取代的1-氨基-1，2，3，6-四氢基-6-亚氨基-2-氧代基-7H-嘌呤化合物19b，19c(0.8mmol)，加热回流3小时。反应后，冷却到室温，滤取析出的结晶。将其用DMF和乙醇的混合溶剂重结晶，可以得到无色粉末结晶的化合物17b，17c(表2，化合物编号Ⅱ-26及Ⅱ-33)。
(路线iii)：向DMF(15mL)加入8-取代的1-氨基-1，2，3，6-四氢基-6-亚氨基-2-氧代基-7H-嘌呤化合物19b，19c(0.8mmol)和苯甲醛(1.2mmol)，加热回流30分钟后，加入DEAD(1.25mmol)，再加热回流1小时。反应后，减压下浓缩溶剂，用水处理，滤取析出的结晶。将其用DMF和乙醇的混合溶剂重结晶，可以得到无色粉末结晶的化合物17b，17c(表2，化合物编号Ⅱ-27及Ⅱ-34)。
另外，本发明的肼基嘌呤化合物(I)及三唑并嘌呤化合物(Ⅱ)和(Ⅲ)及合成中间体的分离纯化只要采用通常的核碱基的分离纯化手段即可，例如可以使用重结晶、各种色谱法等进行。
本发明的肼基嘌呤化合物(I)以及三唑并嘌呤化合物(Ⅱ)和(Ⅲ)可以是游离型、盐型或者水合物型(也包括含水盐)中的任意形态，例如盐型可举出盐酸盐、硫酸盐、氢溴酸盐等无机酸盐、草酸盐、柠檬酸盐、苹果酸盐等有机酸盐、或者铵盐等，特别优选药学上可接受的盐。
本发明的一个方面的黄嘌呤氧化酶抑制用组合物是包含选自上述肼基嘌呤化合物(I)以及三唑并嘌呤化合物(Ⅱ)和(Ⅲ)中的至少一种化合物作为有效成分的黄嘌呤氧化酶抑制用组合物。
本发明的一个方面的医药用组合物是包含选自上述肼基嘌呤化合物(I)或者三唑并嘌呤化合物(Ⅱ)和(Ⅲ)中的至少一种化合物作为有效成分的医药用组合物。作为一个方面的医药用组合物，是一种用于预防或治疗选自高尿酸血症、痛风、肾功能衰竭或慢性肾病等肾损害、高血压、心血管疾病、血脂异常及代谢综合症中的至少一种疾病的医药用组合物。
本发明的上述肼基嘌呤化合物(I)以及三唑并嘌呤化合物(Ⅱ)和(Ⅲ)具有黄嘌呤氧化酶抑制作用，能够抑制尿酸的合成。因此，作为用于降低血液中尿酸值、预防或治疗高尿酸血症的医药用组合物，或者作为预防或治疗由高尿酸血症引起的痛风、痛风关节炎及痛风结节等尿酸盐沉积症的医药用组合物，是有用的。
另外，黄嘌呤氧化酶是生物体内产生的氧化应激的主要来源之一，特别是在因缺血、组织创伤等而受伤的组织中与活性氧物质的产生有关，因此，过剩的尿酸导致黄嘌呤氧化酶过度工作时产生的活性氧物质与各种细胞功能障碍有关。
另一方面，高尿酸血症促进作为尿酸转运体作用的转运体分子群的活性化。尿酸转运体以脂肪细胞、血管平滑肌细胞等血管构成细胞为代表，在各种细胞中表达，因此在高尿酸血症中，很多尿酸被吸收到各种细胞中。尿酸被脂肪细胞、血管平滑肌细胞吸收后，如上所述，会由活性氧物质引发炎症。由于脂肪细胞的炎症，导致脂肪组织异常。另外，通过血管内皮、血管平滑肌细的炎症引起肾内血管病变，进而引起全身高血压和肾小球高血压，导致肾损害的发病和肾脏疾病的发展。
因此，本发明的上述肼基嘌呤化合物(I)以及三唑并嘌呤化合物(Ⅱ)和(Ⅲ)作为预防或治疗肾功能衰竭及慢性肾病等肾损害、高血压、心血管疾病、血脂质异常及代谢综合征的医药用组合物是有用的。
本发明的一个方面的预防方法或者治疗方法是一种高尿酸血症、痛风、肾功能衰竭或慢性肾病等肾损害、高血压、心血管疾病、血脂异常及代谢综合征的预防方法或治疗方法，其包括向受试者施用有效量的选自本发明的上述肼基嘌呤化合物(I)以及三唑并嘌呤化合物(Ⅱ)和(Ⅲ)中的至少一种化合物。
为了预防或治疗上述疾病，可以通过经口、经肠、非经口等任一途径对人给药。给药量是根据患者的年龄、病情、体重等来适当决定的，但通常在每天0.01至100mg/kg体重的范围选择，分一次或多次给药。
本发明的一个方面的应用是用于制造医药用组合物的、选自本发明的上述肼基嘌呤化合物(I)以及三唑并嘌呤化合物(Ⅱ)和(Ⅲ)中的至少一种化合物的应用。
在将本发明化合物制造成医药用组合物使用时，优选作为包含药学上可接受的载体，例如包含赋形剂、其他添加剂的组合物使用。作为载体，可举出乳糖、高岭土、蔗糖、结晶纤维素、玉米淀粉、滑石粉、琼脂、果胶、硬脂酸、硬脂酸镁、卵磷脂、氯化钠等固体状载体；甘油、花生油、聚乙烯吡咯烷酮、橄榄油、乙醇、苯甲醇、丙二醇、水等液状载体。
作为医药用组合物的形态，即剂型，可以采取任意形态，例如使用固体状载体时可举出片剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂、栓剂、含片剂等，使用液状载体时可举出糖浆、乳液、软凝胶胶囊、乳脂、凝胶、糊剂、注射等。
[实施例]
以下将结合实施例，具体地说明本发明，但是本发明并不限定于此。
[例1.肼基嘌呤化合物的合成例]
按照上述方案1所述的反应式，合成化合物3a(表1，化合物编号I-1至I-13，以下所述的化合物编号参照上述表1至3)及化合物3b(化合物编号I-14至I-22)表示的肼基嘌呤化合物(方案1中，R5参照表1)。
合成例1：
6-n-亚辛基肼基-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物3a(化合物编号I-8：R5＝n-C7H15)的合成
向TFA(10mL)加入6-肼基-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物2a(0.50g，3.0mmol)和辛醛(0.42g，3.3mmol)，室温下搅拌30分钟。反应后，减压下馏出溶剂，用水处理，滤取析出的结晶。并将其用1％aq.KHCO3洗净，将得到的固体用乙醇重结晶，得到无色粉末结晶的化合物3a(化合物编号I-8)(表4及表5)。
合成例2：
6-芳基甲叉基肼基-7H-嘌呤-2(3H)-酮类化合物3a(化合物编号I-9至I-13：R5＝芳基)的一般合成
向TFA(10mL)加入6-肼基-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物2a(0.50g，3.0mmol)和各种醛(3.6mmol)，分别在室温下搅拌30分钟。反应后，减压下馏出溶剂，用二乙醚处理，滤取析出的结晶。将其用1％aq.KHCO3洗净，将得到的固体用DMF和水的混合溶剂重结晶，得到化合物3a(化合物编号I-9至I-13)(表4及表5)。
合成例3：
6-(1-甲基-2-n-亚辛基肼基)-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物3b(化合物编号I-19：R5＝n-C7H15)的合成
向TFA(10mL)加入6-(1-甲基肼基)-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物2b(0.50g，2.78mmol)和辛醛(0.39g，3.06mmol)，室温下搅拌30分钟。反应后，减压下馏出溶剂，用水处理，滤取析出的结晶。将其用1％aq.KHCO3洗净，将得到的固体用乙醇重结晶，得到无色粉末结晶的化合物3b(化合物编号I-19)(表4及表5)。
合成例4：
6-(2-芳基甲叉基-1-甲基肼基)-7H-嘌呤-2(3H)-酮类化合物3b(化合物编号I-20至I-22：R5＝芳基)的一般合成
向TFA(10mL)加入6-(1-甲基肼基)-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物2b(0.50g，2.78mmol)各种醛(3.34mmol)，分别在室温下搅拌30分钟。反应后，减压下馏出溶剂，用二乙醚处理，滤取析出的结晶。将其用1％aq.KHCO3洗净，将得到的固体用DMF和水的混合溶剂重结晶，得到化合物3b(化合物编号I-20至I-22)(表4及表5)。
按照上述方案2所述的反应式，合成化合物6(化合物编号I-23至I-28)表示的肼基嘌呤化合物(方案2中，R5参照表1)。
合成例5：
6-肼基-3，7-二甲基-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物5的合成
向乙醇(4mL)加入1，2，3，6-四氢基-3，7-二甲基-2-氧代基-6-硫代-7H-嘌呤化合物4(1g，5.1mmol)和水合肼(4mL，117mmol)，加热回流30分钟。反应后，滤取析出的结晶，将其用水重结晶，得到无色的针状结晶的化合物5 0.73g(收率74％)。
[化15]
1H-NMR[200MHz，(CD3)2SO]δ：3.23(3H，s，3-Me)，3.76(3H，s，7-Me)，6.68(3H，br，可与D2O交换，6-NHNH2)，7.60(1H，s，8-H)；IR：3260(νas，NH2)，3190(νs，NH2)，3110(ν，NH)，1690(ν，C＝O)，1640cm-1(δ，NH2)；分析、计算值C7H10N6O·1/10H2O：C，42.90；H，5.25；N，42.88实验值：C，42.67；H，5.37；N，43.08；MS(FAB，甘油基质)：m/z＝195(MH+).
合成例6：
6-亚烷基肼基-3，7-二甲基-7H-嘌呤-2(3H)-酮或者6-芳基甲叉基肼基-3，7-二甲基-7H-嘌呤-2(3H)-酮类化合物6(化合物编号I-23至I-28)的一般合成
向DMF(40mL)加入6-肼基-3，7-二甲基-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物5(0.50g，2.57mmol)和各种醛(3.08mmol)，分别在室温下搅拌0.5至2小时。反应后，减压下馏出溶剂，用醋酸乙酯处理，滤取析出的结晶。将其用乙醇或者DMF和水的混合溶剂重结晶，得到化合物6(化合物编号i-23至i-28)(表6及表7)。
按照上述方案3所述的反应式，合成化合物10a-c(化合物编号I-29至I-43)表示的肼基嘌呤化合物(方案3中，R2和R5参照表1)。
合成例7：
8-(4-氯苯基)-1，2，3，6-四氢基-2-氧代基-6-硫代-7H-嘌呤化合物8c(R2＝4-Cl-C6H4)的合成
向吡啶(200mL)加入8-(4-氯苯基)-1，2，3，6-四氢基-2，6-二氧代基-7H-嘌呤化合物7c(4g，15.2mmol)和五硫化磷(10g，45.6mmol)，加热回流8小时。反应后，减压下馏出溶剂，用热水处理，滤取析出的结晶。对其进行DMF和水的混合溶剂中的活性炭处理及重结晶，得到黄色的粉末结晶的化合物8c(3.5g，82％，mp＞330℃)。
[化16]
1H-NMR[300MHz，(CD3)2SO]δ：7.58(2H，d，JAB＝8.4Hz，Ar-mH)，8.20(2H，d，JAB＝8.4Hz，Ar-oH)，12.05(1H，s，可与D20交换，1-NH)，12.25(1H，s，可与D2O交换，3-NH)，13.68(1H，s，可与D2O交换，7-NH)；IR：3180sh，3100sh(ν，NH)，1720cm-1(ν，C＝O)；分析、计算值C11H7CIN4OS·1/2H2o：C，45.92；H，2.80；N，19.47实验值：C，45.82；H，2.79；N，19.72；MS(FAB，甘油基质)：m/z＝279(MH+)，281(MH++2).
合成例8：
6-肼基-8-甲基-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物9a(R2＝甲基)的合成
向乙醇(3mL)加入1，2，3，6-四氢基-8-甲基-2-氧代基-6-硫代-7H-嘌呤化合物8a(1g，5.49mmol)和水合肼(3mL，85.6mmol)，加热回流1小时。反应后，滤取析出的结晶，用水及乙醇洗净，得到无色粉末结晶的化合物9a(0.66g，67％，mp285℃(分解))。由于对通用溶剂的溶解性差，因此不可能重结晶，作为纯度指标的元素分析不可能进行，但通过TLC及1H-NMR光谱确认了是单体化合物。
[化17]
1H-NMR[300MHz，CF3COOD]δ：2.91(3H，s，8-Me)；IR：3330(νas，NH2)，3180sh(νs，NH2)，3140(ν，NH)，1670(ν，C＝O)，1650cm-1(δ，NH2)；MS(FAB，甘油基质)：m/z＝181(MH+).
合成例9：
6-肼基-8-苯基-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物9b(R2＝苯基)的合成
向乙醇(4mL)加入1，2，3，6-四氢基-2-氧代基-8-苯基-6-硫代-7H-嘌呤化合物8b(1g，4.09mmol)和水合肼(4mL，114mmol)，加热回流1小时。反应后，滤取析出的结晶，用水及乙醇洗净，得到无色粉末结晶的化合物9b(0.65g，66％，mp280℃(分解))。由于对通用溶剂的溶解性差，因此不可能重结晶，作为纯度指标的元素分析不可能进行，但通过TLC及1H-NMR光谱确认了是单体化合物。
[化18]
1H-NMR[300MHz，CF3COOD]δ：7.65-7.78(2H，m，Ph-mH)，7.80-7.88(1H，m，Ph-pH)，7.96-8.08(2H，m，Ph-oH)；IR：3320(νas，NH2)，3180sh(νs，NH2)，3070sh(ν，NH)，1680(ν，C＝O)，1650cm-1(δ，NH2)；MS(FAB，甘油基质)：m/z＝243(MH+).
合成例10：
8-(4-氯苯基)-6-肼基-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物9c(R2＝4-C1-C6H4)的合成
向乙醇(4mL)加入8-(4-氯苯基)-1，2，3，6-四氢基-2-氧代基-6-硫代-7H-嘌呤化合物8c(1g，3.59mmol)和水合肼(4mL，114mmol)，加热回流1小时。反应后，滤取析出的结晶，用水及乙醇洗净，得到无色粉末结晶的化合物9c(0.60g，60％，mp290℃(分解))。由于对通用溶剂的溶解性差，因此不可能重结晶，作为纯度指标的元素分析不可能进行，但通过TLC及1H-NMR光谱确认了是单体化合物。
[化19]
1H-NMR[300MHz，CF3COOD]δ：7.69(2H，d，JAB＝7.5Hz，Ar-mH)，7.94(2H，d，JAB＝7.5Hz，Ar-oH)；IR：3320(νas，NH2)，3180sh(νs，NH2)，3070sh(ν，NH)，1670(ν，C＝O)，1630cm-1(δ，NH2)；MS(FAB，甘油基质)：m/z＝277(MH+)，279(MH++2).
合成例11：
6-芳基甲叉基肼基-8-甲基-7H-嘌呤-2(3H)-酮类化合物10a(R2＝Me)(化合物编号I-29至I-33)的一般合成
向TFA(8mL)加入6-肼基-8-甲基-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物9a(0.50g，2.77mmol)和各种醛(3.32mmol)，分别在室温下搅拌30分钟。反应后，减压下馏出溶剂，用二乙醚处理，滤取析出的结晶。将其用1％aq.KHCO3洗净，将得到的固体用DMF和水的混合溶剂重结晶，得到化合物10a(化合物编号I-29至I-33)(表8及表9)。
合成例12：
6-芳基甲叉基肼基-8-苯基-7H-嘌呤-2(3H)-酮类化合物10b(R2＝苯基)(化合物编号I-34至I-38)的一般合成
向TFA(8mL)加入6-肼基-8-苯基-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物9b(0.50g，2.06mmol)和各种醛(2.47mmol)，分别在室温下搅拌0.5至1小时。反应后，减压下馏出溶剂，用二乙醚处理，滤取析出的结晶。将其用1％aq.KHCO3洗净，将得到的固体用DMF和水的混合溶剂重结晶，得到化合物10b(化合物编号i-34至i-38)(表10及表11)。
合成例13：
6-芳基甲叉基肼基-8-(4-氯苯基)-7H-嘌呤-2(3H)-酮类化合物10c(R2＝4-Cl-C6H4)(化合物编号I-39至I-43)的一般合成
向TFA(8mL)加入8-(4-氯苯基)-6-肼基-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物10c(0.50g，1.81mmol)和各种醛(2.17mmol)，分别在室温下搅拌0.5至1小时。反应后，减压下馏出溶剂，用二乙醚处理，滤取析出的结晶。将其用1％aq.KHCO3洗净，将得到的固体用DMF和乙醇的混合溶剂重结晶，得到化合物10c(化合物编号I-39至I-43)(表12及表13)。
[例2.三唑并嘌呤化合物的合成例]
按照上述方案4所述的反应式，合成化合物12(化合物编号Ⅱ-1至Ⅱ-10)表示的三唑并[5，1-i]嘌呤化合物。(方案4中，R9参照表2)
合成例14：
1H-[1，2，4]三唑并[5，1-i]嘌呤-5(4H)-酮类化合物12(化合物编号Ⅱ-1至Ⅱ-3)的一般合成
向乙酸(8mL)加入6-肼基-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物2a(0.20g，1.2mmol)和各种原酸酯(4.8mmol)，分别在80℃下加热搅拌10至20分钟。反应后，冷却到室温，滤取析出的结晶。将其用DMF和水的混合溶剂重结晶，得到化合物12(化合物编号Ⅱ-1至Ⅱ-3)(表14及表15)。
合成例15：
8-取代的1H-[1，2，4]三唑并[5，1-i]嘌呤-5(4H)-酮类化合物12(化合物编号Ⅱ-3至Ⅱ-10)的一般合成
(路线i)：向TFA(6mL)加入对应的6-n-亚辛基肼基-7H-嘌呤-2(3H)-酮或者6-芳基甲叉基肼基-7H-嘌呤-2(3H)-酮类化合物3a(1mmol)和70％硝酸(0.10mL，1.5mmol)，分别在室温下搅拌10分钟。反应后，减压下馏出溶剂，用二乙醚处理，滤取析出的结晶。将其用1％aq.KHCO3洗净，将得到的固体用DMF和水的混合溶剂重结晶，得到化合物12(化合物编号Ⅱ-3至Ⅱ-10)(表14及表15)。
(路线ii)：向DMF(20mL)加入对应的6-芳基甲叉基肼基-7H-嘌呤-2(3H)-酮类化合物3a(1mmol)和氯醌(0.37g，1.5mmol)，分别加热回流10分钟。反应后，减压下馏出溶剂，用乙醇和二乙醚处理，滤取析出的结晶。对其进行DMF和水的混合溶剂中的活性炭处理及重结晶，得到化合物12(化合物编号Ⅱ-3至Ⅱ-10)(表14及表15)。
按照上述方案5所述的反应式，合成化合物13(化合物编号Ⅲ-1至Ⅲ-7)表示的三唑并[3，4-i]嘌呤化合物。(方案5中，R13参照表3)
合成例16：
6，9-二甲基-9H-1，2，4-三唑并[3，4-i]嘌呤-5(6H)-酮类13(化合物编号Ⅲ-1至Ⅲ-3)的一般合成
向DMF(20mL)加入6-肼基-3，7-二甲基-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物5(0.20g，1.03mmol)和各种原酸酯(2.06mmol)，分别加热回流1小时。反应后，减压下馏出溶剂，用醋酸乙酯处理，滤取析出的结晶。将其用DMF和水的混合溶剂重结晶，得到化合物13(化合物编号Ⅲ-1至Ⅲ-3)(表16及表17)。
合成例17：
3-取代的6，9-二甲基-9H-1，2，4-三唑并[3，4-i]嘌呤-5(6H)-酮类化合物13(化合物编号Ⅲ-2至Ⅲ-7)的一般合成
向DMF(30mL)加入6-亚烷基肼基-3，7-二甲基-7H-嘌呤-2(3H)-酮或者6-芳基甲叉基肼基-3，7-二甲基-7H-嘌呤-2(3H)-酮类化合物6(1mmol)和70％硝酸(0.10mL，1.5mmol)，分别在100℃下搅拌0.5至1小时。反应后，减压下馏出溶剂，用水处理，滤取析出的结晶。将其用DMF和水的混合溶剂重结晶，得到化合物13(化合物编号Ⅲ-2至Ⅲ-7)(表16及表17)。
合成例18：
甲基(1-甲基-5-(4H-1，2，4-三唑-3-基)-1H-咪唑啉-4-基)氨基甲酸甲基化合物14a的合成
向0.1N甲醇钠甲醇溶液(10mL)加入6，9-二甲基-9H-1，2，4-三唑并[3，4-i]嘌呤-5(6H)-酮化合物13(化合物编号Ⅲ-1)(0.20g，0.98mmol)，室温下搅拌30分钟。反应后，滤去悬浮物，减压下馏出溶剂，加水用10％aq.HCl中和后，用醋酸乙酯提取(20mL×4)，用Mg2SO4干燥有机层。减压下对其馏出，将得到的结晶用醋酸乙酯重结晶，得到化合物14a(表18及表19)。
合成例19：
甲基(1-甲基-5-(5-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)-1H-咪唑啉-4-基)氨基甲酸甲基化合物14b的合成
向0.1N甲醇钠甲醇溶液(10mL)加入3，6，9-三甲基-9H-1，2，4-三唑并[3，4-i]嘌呤-5(6H)-酮类化合物13(化合物编号Ⅲ-2)(0.20g，0.92mmol)，室温下搅拌30分钟。反应后，滤去悬浮物，减压下馏出溶剂，加水用10％aq.HCl中和后，用醋酸乙酯提取(20mL×4)，用Mg2SO4干燥有机层。减压下对其馏出，对得到的结晶用醋酸乙酯重结晶，得到化合物14b(表18及表19)。
合成例20：
甲基(1-甲基-5-(5-芳基-4H-1，2，4-三唑-3-基)-1H-咪唑啉-4-基)氨基甲酸甲基类化合物14c-g的一般合成
向0.1N甲醇钠甲醇溶液(15mL)加入3-芳基-6，9-二甲基-9H-1，2，4-三唑并[3，4-i]嘌呤-5(6H)-酮类化合物13(化合物编号Ⅲ-3至Ⅲ-7)(1mmol)，分别在室温下搅拌0.5至1小时。反应后，滤去悬浮物，减压下馏出溶剂，加水用10％aq.HCl中和，结晶析出。对其滤取，用乙醇或者DMF和乙醇的混合溶剂重结晶，得到化合物14c-g(表18及表19)。
合成例21：
1，4-二甲基-1H-[1，2，4]三唑并[5，1-i]嘌呤-5(4H)-酮类化合物12(化合物编号Ⅱ-11至Ⅱ-17)的一般合成
向二苯基醚(8mL)加入化合物14a-g(1mmol)，分别在200℃下加热搅拌2小时。反应后，冷却到室温，滤取析出的结晶，用二乙醚洗净，将其用DMF重结晶，得到化合物12(化合物编号Ⅱ-11至Ⅱ-17)(表20及表21)。
合成例22：
1，4-二甲基-1H-[1，2，4]三唑并[5，1-i]嘌呤-5(4H)-酮类化合物12(化合物编号Ⅱ-11至Ⅱ-13)的一般合成
向DMF(10mL)加入对应的1H-[1，2，4]三唑并[5，1-i]嘌呤-5(4H)-酮类化合物12(化合物编号Ⅱ-1至Ⅱ-3)(1mmol)和N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(1.2g，10mmol)，分别加热回流2至3小时。反应后，减压下馏出溶剂，用醋酸乙酯处理，滤取析出的结晶。将其用DMF重结晶，得到化合物12(化合物编号Ⅱ-11至Ⅱ-13)(表20及表21)。
合成例23：
1-氨基-1，2，3，6-四氢基-6-亚氨基-3，7-二甲基-2-氧代基-7H-嘌呤化合物16的合成
向DMF(100mL)加入已知的(Z.Kazimierczuk，et al，Acta Biochim.Pol.，21，455(1974))的6-氨基-2，3-二氢基-3，7-二甲基-2-氧代基-7H-嘌呤化合物15(0.20g，1.12mmol)和O-(2，4-二硝基苯基)羟胺(DNPA)(0.33g，1.68mmol)，80℃下加热搅拌1小时。反应后，减压下馏出溶剂，将残渣用硅胶柱色谱法(Kieselgel 70-230mesh)(醋酸乙酯：乙醇＝4：1)分离纯化，将得到的固体用乙醇重结晶，得到无色粉末结晶的化合物16(0.12g，55％，mp226℃(分解))。
[化20]
1H-NMR[200MHz，(CD3)2SO]δ：3.35(3H，s，3-Me)，3.92(3H，s，7-Me)，4.90(2H，s，可与D2O交换，1-NH2)，7.49(1H，br s，可与D2O交换，6-NH)，7.81(1H，s，8-H)；IR：3320(νas，NH2)，3250(ν8，NH2)，3200(ν，NH)，1690(v，C＝O)，1630cm-1(δ，NH2)；分析、计算值C7H10N6O·1/3H2O：C，42.00；H，5.37；N，41.98实验值：C，41.80；H，5.11；N，41.78；MS(FAB，甘油基质)：m/z＝195(MH+).
合成例24：
1，4-二甲基-1H-[1，2，4]三唑并[5，1-i]嘌呤-5(4H)-酮类化合物12(化合物编号II-11至II-13)的一般合成
向二苯基醚(8mL)加入1-氨基-1，2，3，6-四氢基-6-亚氨基-3，7-二甲基-2-氧代基-7H-嘌呤化合物16(0.20g，1.03mmol)和各种原酸酯(3.09mmol)，分别在200℃下加热搅拌20分钟。反应后，冷却到室温，滤取析出的结晶，用二乙醚洗净，将其用DMF重结晶，得到化合物12(化合物编号II-11至II-13)(表20及表21)。
按照上述方案6所述的反应式，合成化合物17a-c(化合物编号II-18至II-38)表示的三唑并[5，1-i]嘌呤化合物(方案6中，R7和R9参照表2)。
合成例25：
2-甲基-1H-[1，2，4]三唑并[5，1-i]嘌呤-5(4H)-酮类化合物17a(化合物编号II-18至II-20)的一般合成
向乙酸(5mL)加入6-肼基-8-甲基-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物9a(0.20g，1.11mmol)和各种原酸酯(3.33mmol)，分别在80℃下加热搅拌10分钟。反应后，冷却到室温，滤取析出的结晶。将其用DMF和水的混合溶剂重结晶，得到化合物17a(化合物编号II-18至II-20)(表22及表23)。
合成例26：
8-芳基-2-甲基-1H-[1，2，4]三唑并[5，1-i]嘌呤-5(4H)-酮类化合物17a(化合物编号II-20至II-24)的一般合成
A：向DMF(15mL)加入6-芳基甲叉基肼基-8-甲基-7H-嘌呤-2(3H)-酮类化合物10a(化合物编号I-29至I-32)(1mmol)和DEAD(0.26g，1.5mmol)，分别加热回流1小时。反应后，减压下浓缩溶剂，在冰中冷却，滤取析出的结晶。将其用DMF和水的混合溶剂重结晶，得到化合物17a(化合物编号1I-20至II-23)(表22及表23)。
B：向DMF(20mL)加入8-甲基-6-(4-硝基苯亚甲基肼基)-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物10a(化合物编号I-33)(0.30g，0.96mmol)和DEAD(0.17g，0.96mmol)，加热回流3小时。其中，隔1小时分两回追加DEAD 0.17g。反应后，减压下浓缩溶剂，在冰中冷却，滤取析出的结晶。将其用DMF和水的混合溶剂重结晶，得到无色粉末结晶的化合物17a(化合物编号Ⅱ-24)(表22及表23)。
合成例27：
2-苯基-1H-[1，2，4]三唑并[5，1-i]嘌呤-5(4H)-酮类化合物17b(化合物编号Ⅱ-25至Ⅱ-27)的一般合成
向乙酸(8mL)加入6-肼基-8-苯基-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物9b(0.20g，0.83mmol)和各种原酸酯(2.49mmol)，分别在80℃下加热搅拌10分钟。反应后，冷却到室温，滤取析出的结晶。将其用DMF和乙醇的混合溶剂重结晶，得到化合物17b(化合物编号Ⅱ-25至Ⅱ-27)(表24及表25)。
合成例28：
8-芳基-2-苯基-1H-[1，2，4]三唑并[5，1-i]嘌呤-5(4H)-酮类化合物17b(化合物编号Ⅱ-27至Ⅱ-31)的一般合成
A：向DMF(20mL)加入对应的6-芳基甲叉基肼基-8-苯基-7H-嘌呤-2(3H)-酮类化合物10b(化合物编号I-34至I-37)(1mmol)和DEAD(0.26g，1.5mmol)，分别加热回流1至1.5小时。反应后，减压下浓缩溶剂，用水处理，滤取析出的结晶。将其用DMF和乙醇的混合溶剂重结晶，得到化合物17b(化合物编号Ⅱ-27至Ⅱ-30)(表24及表25)。
B：向DMF(20mL)加入6-(4-硝基苯亚甲基肼基)-8-苯基-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物10b(化合物编号I-38)(0.30g，0.80mmol)和DEAD(0.14g，0.80mmol)，加热回流2小时。其中，1小时后追加DEAD 0.14g。反应后，减压下浓缩溶剂，用水处理，滤取析出的结晶。将其用DMF和乙醇的混合溶剂重结晶，得到无色粉末结晶的化合物17b(化合物编号Ⅱ-31)(表24及表25)。
合成例29：
2-(氯苯基)-1H-[1，2，4]三唑并[5，1-i]嘌呤-5(4H)-酮类化合物17c(化合物编号Ⅱ-32至Ⅱ-34)的一般合成
向乙酸(8mL)加入8-(4-氯苯基)-6-肼基-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物9c(0.20g，0.72mmol)和各种原酸酯(2.16mmol)，分别在80℃下加热搅拌10分钟。反应后，冷却到室温，滤取析出的结晶。将其用DMF和乙醇的混合溶剂重结晶，得到化合物17c(化合物编号Ⅱ-32至Ⅱ-34)(表26及表27)。
合成例30：
8-芳基-2-(氯苯基)-1H-[1，2，4]三唑并[5，1-i]嘌呤-5(4H)-酮类化合物17c(化合物编号II-34至II-38)的一般合成
A：向DMF(20mL)加入对应的6-芳基甲叉基肼基-8-(4-氯苯基)-7H-嘌呤-2(3H)-酮类化合物10c(化合物编号I-39至I-42)(1mmol)和DEAD(0.26g，1.5mmol)，分别加热回流1至1.5小时。反应后，减压下浓缩溶剂，用水处理，滤取析出的结晶。将其用DMF和乙醇的混合溶剂重结晶，得到化合物17c(化合物编号11-34至1I-37)(表26及表27)。
B：向DMF(20mL)加入8-(4-氯苯基)-6-(4-硝基苯亚甲基肼基)-7H-嘌呤-2(3H)-酮化合物10c(化合物编号I-43)(0.30g，0.73mmol)和DEAD(0.13g，0.73mmol)，加热回流2小时。其中，1小时后追加DEAD0.13g。反应后，减压下浓缩溶剂，用水处理，滤取析出的结晶。将其用DMF和乙醇的混合溶剂重结晶，得到无色粉末结晶的化合物17c(化合物编号II-38)(表26及表27)。
按照上述方案7所述的反应式，另外合成化合物17b，17c(化合物编号II-25至II-27及II-32至II-34)表示的三唑并[5，1-i]嘌呤化合物(方案7中，R7和R9参照表2)。
合成例31：
6-氨基-2，3-二氢基-2-氧代基-8-苯基-7H-嘌呤化合物18b的合成
向28％氨水(50mL)加入1，2，3，6-四氢基-2-氧代基-8-苯基-6-硫代-7H-嘌呤化合物8b(2g，8.19mmol)，密封试管中160℃下加热48小时。反应后，在冰中冷却，滤取析出的结晶，用水及乙醇洗净，得到无色粉末结晶的化合物18b(1.4g，75％，mp＞330℃)。由于对通用溶剂的溶解性差，因此不可能重结晶，作为纯度指标的元素分析不可能进行，但通过TLC及1H-NMR光谱确认了是单体化合物。
[化21]
1H-NMR[300MHz，CF3COOD]δ：7.65-7.77(2H，m，Ph-mH)，7.77-7.86(1H，m，Ph-pH)，7.95-8.05(2H，m，Ph-oH)；IR：3320(νas，NH2)，3080(νs，NH2and ν，NH)，1680(ν，C＝O)，1660cm-1(δ，NH2)；MS(FAB，甘油基质)：m/z＝228(MH+).
合成例32：
6-氨基-8-(4-氯苯基)-2，3-二氢基-2-氧代基-7H-嘌呤化合物18c的合成
向28％氨水(50mL)加入8-(4-氯苯基)-1，2，3，6-四氢基-2-氧代基-6-硫代-7H-嘌呤化合物8c(2g，7.18mmol)，密封试管中在160℃下加热48小时。反应后，在冰中冷却，滤取析出的结晶，用水及乙醇洗净，得到无色粉末结晶的化合物18c(1.44g，77％，mp＞330℃)。由于对通用溶剂的溶解性差，因此不可能重结晶，作为纯度指标的元素分析不可能进行，但通过TLC及1H-NMR光谱确认了是单体化合物。
[化22]
1H-NMR[300MHz，CF3COOD]δ：7.69(2H，JAB＝8.6Hz，Ar-mH)，7.96(2H，JAB＝8.6Hz，Ar-oH)；IR：3320(νas，NH2)，3090(νs，NH2 and ν，NH)，1690(ν，C＝O)，1660cm-1(δ，NH2)；MS(FAB，甘油基质)：m/z＝262(MH+)，264(MH++2).
合成例33：
1-氨基-1，2，3，6-四氢基-6-亚氨基-2-氧代基-8-苯基-7H-嘌呤化合物19b的合成
将6-氨基-2，3-二氢基-2-氧代基-8-苯基-7H-嘌呤化合物18b(0.50g，2.20mmol)溶解于2N NaOH(15mL)，0至10℃下滴加溶解于水3mL的羟胺-O-亚磺酸(1g，8.80mmol)，搅拌30分钟。反应后，滤取析出的结晶，将其溶解于水中，用10％aq.HCl中和，结晶析出。对其滤取，用乙醇重结晶，得到无色粉末结晶的化合物19b(0.34g，64％，mp270℃(分解))。
[化23]
1H-NMR[300MHz，(CD3)2SO]δ：5.34(2H，s，可与D2O交换，1-NH2)，7.33-7.50(3H，m，Ph-m，pH)，7.91-8.10(2H，m，Ph-oH)，8.39(1H，br，可与D2O交换，6-NH)，12.54(1H，br s，可与D2O交换，3-NH)；IR：3400(νas，NH2)，3300(νs，NH2)，3120(ν，NH)，1660(ν，C＝O)，1640cm-1(δ，NH2)；分析、计算值C11H10N6O·1/4H2O：C，53.55；H，4.29；N，34.06实验值：C，53.57；H，4.52；N，34.31；MS(FAB，甘油基质)：m/z＝243(MH+).
合成例34：
1-氨基-8-(4-氯苯基)-1，2，3，6-四氢基-6-亚氨基-2-氧代基-7H-嘌呤化合物19c的合成
将6-氨基-8-(4-氯苯基)-2，3-二氢基-2-氧代基-7H-嘌呤化合物18c(0.50g，1.91mmol)溶解于2N NaOH(15mL)，在0至10℃下滴加溶解于水3mL的羟胺-O-亚磺酸(0.86g，7.64mmol)，搅拌30分钟。反应后，滤取析出的结晶，将其溶解于水中，用10％aq.HCl中和，结晶析出。对其滤取，用乙醇重结晶，得到无色粉末结晶的化合物19c(0.33g，62％，mp292℃(分解))。
[化24]
1H-NMR[300MHz，(CD3)2SO]δ：5.39(2H，s，可与D2O交换，1-NH2)，7.53(2H，d，JAB＝8.6Hz，Ar-mH)，8.02(2H，d，JAB＝8.6HZ，Ar-oH)，8.71(1H，br，可与D2O交换，6-NH)，12.78(1H，br，可与D2O交换，3-NH)；IR：3460(νas，NH2)，3330(νs，NH2)，3090(ν，NH)，1680(ν，C＝O)，1640cm-1(δ，NH2)；分析、计算值C11H9C1N6O·3/4H2O：C，45.53；H，3.65；N，28.96实验值：C，45.72；H，3.44；N，29.18；MS(FAB，甘油基质)：m/z＝277(MH+)，279(MH++2).
合成例35：
2-苯基-1H-[1，2，4]三唑并[5，1-i]嘌呤-5(4H)-酮类化合物17b(化合物编号II-25至II-27)的一般合成
(路线i)：向TFA(4mL)加入1-氨基-1，2，3，6-四氢基-6-亚氨基-2-氧代基-8-苯基-7H-嘌呤化合物19b(0.20g，0.83mmol)和原甲酸三乙酯(0.62g，4.15mmol)，室温下搅拌3小时。反应后，减压下馏出溶剂，用二乙醚处理，滤取析出的结晶。将其用0.5％aq.KHCO3洗净，将得到的固体用DMF和乙醇的混合溶剂重结晶，得到无色粉末结晶的化合物17b(化合物编号Ⅱ-25)(表24及表25)。
(路线ii)：向无水乙酸(4mL)加入1-氨基-1，2，3，6-四氢基-6-亚氨基-2-氧代基-8-苯基-7H-嘌呤化合物19b(0.20g，0.83mmol)，加热回流3小时。反应后，冷却到室温，滤取析出的结晶。将其用DMF和乙醇的混合溶剂重结晶，得到无色粉末结晶的化合物17b(化合物编号Ⅱ-26)(表24及表25)。
(路线iii)：向DMF(15mL)加入1-氨基-1，2，3，6-四氢基-6-亚氨基-2-氧代基-8-苯基-7H-嘌呤化合物19b(0.20g，0.83mmol)和苯甲醛(0.13g，1.25mmol)，加热回流30分钟后，加入DEAD(0.22g，1.25mmol)，加热回流1小时。反应后，减压下浓缩溶剂，用水处理，滤取析出的结晶。将其用DMF和乙醇的混合溶剂重结晶，得到无色粉末结晶的化合物17b(化合物编号Ⅱ-27)(表24及表25)。
合成例36：
2-(氯苯基)-1H-[1，2，4]三唑并[5，1-i]嘌呤-5(4H)-酮类化合物17c(化合物编号Ⅱ-32至Ⅱ-34)的一般合成
(路线i)：向TFA(4mL)加入1-氨基-8-(4-氯苯基)-1，2，3，6-四氢基-6-亚氨基-2-氧代基-7H-嘌呤化合物19c(0.20g，0.72mmol)和原甲酸三乙酯(0.53g，3.6mmol)，室温下搅拌3小时。反应后，减压下馏出溶剂，用二乙醚处理，滤取析出的结晶。将其用0.5％aq.KHCO3洗净，将得到的固体用DMF和乙醇的混合溶剂重结晶，得到无色粉末结晶的化合物17c(化合物编号Ⅱ-32)(表26及表27)。
(路线ii)：向无水乙酸(4mL)加入1-氨基-8-(4-氯苯基)-1，2，3，6-四氢基-6-亚氨基-2-氧代基-7H-嘌呤化合物19c(0.20g，0.72mmol)，加热回流3小时。反应后，冷却到室温，滤取析出的结晶。将其用DMF和乙醇的混合溶剂重结晶，得到无色粉末结晶的化合物17c(化合物编号Ⅱ-33)(表26及表27)。
(路线iii)：向DMF(15mL)加入1-氨基-8-(4-氯苯基)-1，2，3，6-四氢基-6-亚氨基-2-氧代基-7H-嘌呤化合物19c(0.20g，0.72mmol)和苯甲醛(0.11g，1.08mmol)，加热回流30分钟后，加入DEAD(0.19g，1.08mmol)，加热回流1小时。反应后，减压下浓缩溶剂，用水处理，滤取析出的结晶。将其用DMF和乙醇的混合溶剂重结晶，得到无色粉末结晶的化合物17c(化合物编号Ⅱ-34)(表26及表27)。
[例3.化合物的物理数据及NMR数据]
例1至例2合成的化合物的物理数据及1H-NMR数据如下表4至表27所示。
[表4]
化合物I-8至I-13以及I-9至I-22的物理数据
Figure BDA0002990857160000411
a除I-8和I-19(来自EtOH)外，所有化合物都是
从DMF和H2O的混合物中重结晶得到的无色粉末。b基质是甘油。
[表5]
化合物I-8至I-13以及I-9至I-22的1H-NMR数据
Figure BDA0002990857160000421
a该化合物在(CD3)2SO中在300MHz下测量。
[表6]
化合物I-23至I-28的物理数据
Figure BDA0002990857160000431
a除I-23(来自EtOH)外，所有化合物都是从DMF和H2O的混合物中重结晶得到的无色粉末(I-28除外，为橙色粉末)。b基质是甘油。
[表7]
化合物I-23至I-28的1H-NMR数据
Figure BDA0002990857160000441
[表8]
化合物I-29至I-33的物理数据
Figure BDA0002990857160000451
a所有化合物都是从DMF和H2O的混合物中重结晶得到的无色粉末(I-33除外，为黄色粉末)。b基质是甘油。
[表9]
化合物I-29至I-33的1H-NMR数据
Figure BDA0002990857160000461
[表10]
化合物I-34至I-38的物理数据
Figure BDA0002990857160000471
a所有化合物都是从DMF和H2O的混合物中重结晶得到的无色粉末(I-38除外，为橙色粉末)。b基质是甘油。
[表11]
化合物I-34至I-38的1H-NMR数据
Figure BDA0002990857160000481
[表12]
化合物I-39至I-43的物理数据
Figure BDA0002990857160000491
a所有化合物都是从DMF和HzO的混合物中重结晶得到的无色粉末(I-39及I-40除外，为淡黄色粉末；I-43除外，为橙色粉末).b基质是甘油.
[表13]
化合物I-39至I-43的1H-NMR数据
Figure BDA0002990857160000501
[表14]
化合物II-1至II-10的物理数据
Figure BDA0002990857160000511
a除II-6(来自EtOH)外，所有化合物都是从DMF和H2O的混合物中重结晶得到的无色粉末。
b路线i：70％HNO3，TFA，r.t.；路线ii：氯醌，DMF，回流；路线iii：RC(OEt)3，AcOH，80℃。
c基质是甘油。dRef.J.Chem.Soc.，Perkin Trans.1，3117(1999).
[表15]
化合物II-1至II-10的1H-NMR数据
Figure BDA0002990857160000521
a该化合物在(CD3)2sO中在300MHz下测量
[表16]
化合物III-1至III-7的物理数据
Figure BDA0002990857160000531
a所有化合物都是从DMF和H2O的混合物中重结晶得到的无色针状结晶(III-7除外，为浅黄色针状结晶)。
b路线i：70％HNO3，DMF，100℃，x.t.：路线ii：RC(OMe)3，DMF，回流。c基质是甘油。
[表17]
化合物III-1至III-7的1H-NMR数据
Figure BDA0002990857160000541
[表18]
化合物14a-g的物理数据
Figure BDA0002990857160000551
a除14a和14b(来自AcOEt)以及14g(来自DMF和EtOH的混合物)外，所有化合物都是从EtOH中重结晶得到的无色针状粉末(14a和14g除外，分别为无色针状结晶与黄色粉末)。b基质是甘油。
[表19]
化合物14a-g的1H-NMR数据
Figure BDA0002990857160000561
[表20]
化合物II-11至II-17的物理数据
Figure BDA0002990857160000571
a所有化合物都是从DMF中重结晶得到的无色粉末(II-11，II-14，II-17除外，为无色针状结晶)。
b路径i：用化合物14，Ph，O，200℃；路径ii：用化合物16，RC(OMe)3，Ph20，200℃；
路径ii：用化合物12，DMFDMA，DMF，回流。c基质是甘油。
[表21]
化合物II-11至II-17的1H-NMR数据
Figure BDA0002990857160000581
[表22]
化合物II-18至II-24的物理数据
Figure BDA0002990857160000591
a所有化合物都是从DMF和H2O的混合物中重结晶得到的无色粉末。
b路线i：DEAD，DMF，回流；路线ii：Rc(OEt)3，AcOH，80℃。c基质是甘油。
[表23]
化合物II-18至II-24的1H-NMR数据
Figure BDA0002990857160000601
[表24]
化合物II-25至II-31的物理数据
Figure BDA0002990857160000611
a所有化合物都是从DMF和EtOH的混合物中重结晶得到的无色粉末。
b路线i：DEAD，DMF，回流；路线ii：RC(OEt)3，AcOH，80℃；路线ii；HC(OEt)3，TFA，x.t.：
路线iv：AczO，回流；路径v：PhCHO，DEAD，DMF，回流。c基质是甘油。
[表25]
化合物II-25至II-31的1H-NMR数据
Figure BDA0002990857160000621
[表26]
化合物II-32至II-38的物理数据
Figure BDA0002990857160000631
a所有化合物都是从DMF和EtOH的混合物中重结晶得到的无色粉末。
b路径i：DEAD，DMF，回流i路线ii：RC(OEt)3，AcOH，80℃；路线ii；HC(OEt)3，TFA，r.t.：
路线iv：Ac2O，回流；路线v：Ph-CHO，DEAD，DMF，回流。c基质是甘油。
[表27]
化合物II-32至II-38的1H-NMR数据
Figure BDA0002990857160000641
a该化合物在(CD3)zSO中在300MHz下测量
[例4.化合物的评价]
试验例1：黄嘌呤氧化酶抑制作用
关于例1至例2合成的化合物，测量了黄嘌呤氧化酶的抑制作用。
1.测定方法
使用50mM磷酸缓冲液(ph7.4)，将黄嘌呤(100μM)、来自牛奶的黄嘌呤氧化酶(XOD)(10mU/mL)及待测化合物混合，在室温下温育15分钟后，测定从黄嘌呤到尿酸的变化作为292nm处的吸光度(O.D.)，研究待测化合物的尿酸生成抑制作用。
根据下式求出尿酸生成抑制率，制作各待测化合物的用量反应曲线，计算出50％的抑制浓度(IC50，μM)。此外，作为对照化合物使用了别嘌呤醇。
尿酸生成抑制率(％)＝100-[(D-DB)/T]×100
T：(黄嘌呤+XOD)溶液的O.D.
D：(待测化合物+黄嘌呤+XOD)溶液的O.D.
DB：(待测化合物+XOD)溶液的O.D.
2.评价
计算出的IC50的结果如表所示。
[表28]
Figure BDA0002990857160000651
如表28所示，得到的化合物编号I-8至13、37及38的肼基嘌呤化合物对XOD的50％抑制浓度(IC50)小于10μM，与现有的黄嘌呤氧化酶抑制剂别嘌呤醇的IC50相比，大约低2.6倍至1200倍左右。即，化合物编号I-8至13、37及38的肼基嘌呤化合物显示出比别嘌呤醇高的黄嘌呤氧化酶抑制作用。
另外，化合物编号Ⅱ-3至10、25及32的三唑并嘌呤化合物对XOD的50％抑制浓度(IC50)小于10μM，和现有的黄嘌呤氧化酶抑制剂别嘌呤醇的IC50相比，大约低2.5倍至370倍左右。即，化合物编号Ⅱ-3至10、25及32的三唑并嘌呤化合物显示出比别嘌呤醇高的黄嘌呤氧化酶抑制作用。
因此，本发明的肼基嘌呤化合物(I)及三唑并嘌呤化合物(Ⅱ)具有黄嘌呤氧化酶抑制作用，特别是化合物编号I-8至13、37及38的肼基嘌呤化合物以及化合物编号Ⅱ-3至10、25及32的三唑并嘌呤化合物具有比别嘌呤醇更高的黄嘌呤氧化酶抑制作用。由此可知，包含本发明的肼基嘌呤化合物(I)及三唑并嘌呤化合物(Ⅱ)的组合物作为黄嘌呤氧化酶抑制用组合物、以及用于预防或治疗由高尿酸血症、痛风以及高尿酸血症引起的疾病的医药用组合物是有用的。
试验例2：黄嘌呤氧化还原酶和配体的对接评价
对于例1至例2合成的化合物，计算与黄嘌呤氧化还原酶的对接分数(结合自由能，kcal/mol)。
1.计算方法
按照J Comput Aided Mol Des(2010)24：57-75所述的计算方法，计算例1至例2合成的化合物与黄嘌呤氧化还原酶(XOR)(PDB编号1N5X及1V97)的对接分数。作为对照化合物，别嘌呤醇、氧别嘌醇、尿酸及非布索坦也同样地计算。
2.对接分数的计算结果
PDB编号1N5X与XOR的对接分数的结果如表29所示，PDB编号1V97与XOR的对接分数的结果如表30所示。
[表29]
利用BioMed CAChe的MOPAC的配体与XOR(PDB编号1N5X)的对接结果
Figure BDA0002990857160000671
[表30]
利用BioMed CAChe的MOPAC的配体与XOR(PDB编号1V97)的对接结果
Figure BDA0002990857160000681
如表29及30所示，化合物编号I1-3至10的三唑并嘌呤化合物在PDB编号1N5X及PDB编号1V97的任一XOR中，与别嘌呤醇、氧别嘌醇、尿酸及非布索坦相比，对接分数的值更低，显示出与XOR的结合状态比别嘌呤醇、氧别嘌醇、尿酸及非布索坦更稳定。此外，化合物编号II-3至10的三唑并嘌呤化合物与化合物编号I-1至8、10至13的肼基嘌呤化合物相比，对接分数的值更低，因此化合物编号II-3至10的三唑并嘌呤化合物显示出比化合物编号I-1至8、10至13的肼基嘌呤化合物更稳定的与XOR的结合状态。上述试验例1的In vitro活性试验(黄嘌呤氧化酶抑制作用的试验)中，一般而言，化合物编号I-1至8、10至13的肼基嘌呤化合物显示比化合物编号II-3至10的三唑并嘌呤化合物更强的黄嘌呤氧化酶抑制作用的原因在于，除了酶抑制，还存在与别嘌呤醇同样的与黄嘌呤的竞争性抑制，特别是肼基嘌呤化合物。
此外，对与PDB编号1N5X的XOR的对接分数进行了计算(表29)、化合物编号I-10至13的肼基嘌呤化合物以及化合物编号II-1至2的三唑并嘌呤化合物与别嘌呤醇、氧别嘌醇及尿酸相比，对接分数的值较低，显示出其与XOR的结合状态比别嘌呤醇、氧别嘌醇及尿酸更稳定。
此外，对与PDB编号1V97的XOR的对接分数进行了计算(表30)，化合物编号I-8、10、12及13的肼基嘌呤化合物以及化合物编号Ⅱ-1至2的三唑并嘌呤化合物与别嘌呤醇、氧别嘌醇、尿酸及非布索坦相比，对接分数的值较低，显示出其与XOR的结合状态比别嘌呤醇、氧别嘌醇、尿酸及非布索坦更稳定。
因此，本发明的肼基嘌呤化合物(I)及三唑并嘌呤化合物(Ⅱ)通过与XOR持续地结合，可以期待较高的生物利用性。由此可知，包含本发明的肼基嘌呤化合物(I)及三唑并嘌呤化合物(Ⅱ)的组合物作为黄嘌呤氧化酶抑制用组合物以及用于预防或治疗由高尿酸血症、痛风以及高尿酸血症引起的疾病的医药用组合物是有用的。
[例5.制剂的制备]
本发明的化合物的黄嘌呤氧化酶抑制用组合物以及用于预防或治疗由高尿酸血症、痛风以及高尿酸血症引起的疾病的制剂的制备例如下所示。
制剂例1：片剂
Figure BDA0002990857160000691
根据上述组成，按照常规方法调整片剂。
制剂例2：胶囊制剂
Figure BDA0002990857160000692
根据上述组成，按照常规方法调整胶囊制剂。
制剂例3：注射剂
本发明化合物 30.0mg
葡萄糖 100.0mg
将上述组成溶解在注射用纯化水中，调整注射剂。
产业实用性
本发明的肼基嘌呤化合物及三唑并嘌呤化合物在许多衍生物中具有比现有的别嘌呤醇更优异的黄嘌呤氧化酶抑制作用，作为用于预防或治疗由高尿酸血症、痛风发作的医药用组合物是有用的。进而，作为用于预防或治疗肾功能衰竭或慢性肾病等肾损害、高血压、心血管疾病、血脂异常及代谢综合症等疾病的医药用组合物是有用的。
相关申请的交叉引用
本申请要求在2018年8月30日申请的日本发明专利申请2018-161925号的优先权，其全部记载作为公开引用在此。

Claims (16)

1.一种由以下通式(I)表示的肼基嘌呤化合物：
[化1]
Figure FDA0002990857150000011
式中，R1、R3和R4各自独立地表示氢原子或烷基，R2和R5各自独立地表示氢原子、烷基或芳基。
2.如权利要求1所述的化合物，其中，R1、R2、R3和R4均为氢原子，R5为烷基或芳基。
3.如权利要求1所述的化合物，其中，R1、R2和R3均为氢原子，R4为甲基，R5为烷基或芳基。
4.如权利要求1所述的化合物，其中，R1和R3均为甲基，R2和R4均为氢原子，R5为烷基或芳基。
5.如权利要求1所述的化合物，其中，R1、R3和R4均为氢原子，R2和R5各自独立为烷基或芳基。
6.一种由以下通式(Ⅱ)表示的三唑并嘌呤化合物：
[化2]
Figure FDA0002990857150000012
式中，R6和R8均表示氢原子或烷基，R7和R9各自独立地表示氢原子、烷基或芳基。
7.如权利要求6所述的化合物，其中，R6、R7和R8均为氢原子，R9为氢原子、烷基或芳基。
8.如权利要求6所述的化合物，其中，R6和R8均为烷基，R7为氢原子，R9为氢原子、烷基或芳基。
9.如权利要求6所述的化合物，其中，R6和R8均为氢原子，R7为烷基或芳基，R9为氢原子、烷基或芳基。
10.一种由以下通式(Ⅲ)表示的三唑并嘌呤化合物：
[化3]
Figure FDA0002990857150000021
式中，R10和R12均表示烷基，R11表示氢原子，R13表示氢原子、烷基或芳基。
11.如权利要求10所述的化合物，其中，R10和R12均为甲基，R11为氢原子，R13为氢原子、甲基或芳基。
12.一种包含选自如权利要求1至5所述的肼基嘌呤化合物以及如权利要求6至11所述的三唑并嘌呤化合物中的至少一种化合物作为有效成分的黄嘌呤氧化酶抑制用组合物。
13.一种包含选自如权利要求1至5所述的肼基嘌呤化合物以及如权利要求6至11所述的三唑并嘌呤化合物中的至少一种化合物作为有效成分的医药用组合物。
14.如权利要求13所述的医药用组合物，其中，所述医用组合物是用于预防或治疗选自高尿酸血症、痛风、肾功能衰竭或慢性肾病等肾损害、高血压、心血管疾病、血脂异常及代谢综合症中的至少一种疾病的医药用组合物。
15.选自如权利要求1至5所述的肼基嘌呤化合物以及如权利要求6至11所述的三唑并嘌呤化合物中的至少一种化合物在制造医药用组合物中的应用。
16.一种高尿酸血症、痛风、肾功能衰竭或慢性肾病等肾损害、高血压、心血管疾病、血脂异常及代谢综合征的预防方法或治疗方法，其包括向受试者施用有效量的选自如权利要求1至5所述的肼基嘌呤化合物以及如权利要求6至11所述的三唑并嘌呤化合物中的至少一种化合物。
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Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS59232342A (ja) * 1983-06-15 1984-12-27 Konishiroku Photo Ind Co Ltd 色素画像の形成方法
WO1988002370A1 (en) * 1986-09-30 1988-04-07 Ciba-Geigy Ag 2-substituted-e-fused-[1,2,4]triazolo[1,5-c]pyrimidines pharmaceutical compositions and uses thereof
DK0417790T3 (da) * 1989-09-14 1997-04-07 Kyowa Hakko Kogyo Kk S-triazolo(3,4-i)purin-derivater
EP0811624A1 (en) * 1995-02-21 1997-12-10 Yamasa Corporation Purine compounds and xanthine oxidase inhibitors
JPH09208467A (ja) * 1995-02-21 1997-08-12 Yamasa Shoyu Co Ltd トリアゾロプリン化合物を含有する抗腫瘍剤
ES2166270B1 (es) * 1999-07-27 2003-04-01 Almirall Prodesfarma Sa Derivados de 8-fenil-6,9-dihidro-(1,2,4,)triazolo(3,4-i)purin-5-ona.
DE602007010312D1 (de) * 2006-06-23 2010-12-16 Incyte Corp Purinonderivate als hm74a-agonisten

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