CN112898445B - 一种粗根荨麻多糖的分离提取方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种粗根荨麻多糖的分离提取方法及应用,所述粗根荨麻多糖粗根荨麻的分子量范围在11000‑20000,所述粗根荨麻多糖由鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖和阿拉伯糖构成;所述粗根荨麻多糖中鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖和阿拉伯糖的质量比为1:1.0‑1.4:0.4‑0.8:0.4‑0.8;所述粗根荨麻多糖中总糖含量为40‑90%;所述粗根荨麻多糖中糖醛酸含量为20‑50%。本发明涉及粗根荨麻提取技术领域,具体是提供了一种粗根荨麻多糖的分离提取方法及应用,首次从粗根荨麻中分离提取、纯化得到一种粗根荨麻多糖,研究发现其具有激活免疫细胞、增强免疫力的功效。
Description
技术领域
本发明涉及粗根荨麻提取技术领域,具体是指一种粗根荨麻多糖的分离提取方法及应用。
背景技术
荨麻(Urtica L.)为被子植物门、荨麻科、荨麻属一年生或多年生草本植物,是一种常用的民族药和民间药。该属植物在我国药用历史悠久,早在《本草纲目》、《本草图经》、《纲目拾遗》、《益部方物略记》中就有记载,其具有祛风通络、平肝定惊、消积通便、解毒等功效。荨麻属植物在我国产量充沛,在全世界现今所知的36种荨麻属植物中,有23种分布在我国各地区,其中粗根荨麻(Urticamacrorrhiza Hand.-Mazz.)是云南特有的品种,在云南地区俗称老虎麻,具长而粗的木质化根状茎,全草能入药,民间使用时间长,疗效确切且毒副作用小,产量大,具有较高的研发价值。目前关于粗根荨麻的报道均为粗根荨麻的水提醇沉物,其中含有大量蛋白、核酸及其它水溶性成分,无法明确其药理作用是由粗根荨麻多糖还是其它的水溶性成分产生的。关于粗根荨麻多糖的详细制备方法、表征及应用尚未见报道。
发明内容
针对上述情况,为克服现有技术的缺陷,本发明提供一种粗根荨麻多糖的分离提取方法及应用,首次从粗根荨麻中分离提取、纯化得到一种粗根荨麻多糖,研究发现其具有激活免疫细胞、增强免疫力的功效。
本发明采取的技术方案如下:本发明一种粗根荨麻多糖,分子量范围在11000-20000,所述粗根荨麻多糖由鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖和阿拉伯糖构成;
所述粗根荨麻多糖中鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖和阿拉伯糖的质量比为1:1.0-1.4:0.4-0.8:0.4-0.8;
所述粗根荨麻多糖中总糖含量为40-90%;
所述粗根荨麻多糖中糖醛酸含量为20-50%。
进一步地,所述根荨麻多糖中鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖和阿拉伯糖的质量比为1:1.28:0.58:0.53。
进一步地,所述粗根荨麻多糖是从粗根荨麻中经过乙醇脱脂、热水提取、乙醇沉淀、再经过DEAE-纤维素离子交换层析和Sephadex G100凝胶柱层析纯化得到。
本发明还公开了一种粗根荨麻多糖的分离提取方法,包括如下步骤:
(1)将粗根荨麻地上部分适当粉碎后,加8-10倍量70-95%乙醇60-80℃回流脱脂得到药渣,药渣加入8-10倍量去离子水于70-90℃回流提取,重复提取2-4次,提取液经旋转蒸发仪浓缩后加入终浓度为70%-90%的乙醇进行沉淀,重复沉淀3次初步纯化后得到粗根荨麻的粗多糖溶液;
(2)将初步纯化后的粗多糖溶液采用30%H2O2脱色、重复脱色1-3次;
(3)将脱色后的粗多糖溶液采用Sevage试剂脱蛋白,重复5-8次,将除蛋白后的粗多糖溶液用去离子水透析48h以上,浓缩,冷冻干燥;
(4)将脱蛋白的粗多糖溶解于适量蒸馏水中,加入DEAE-纤维素柱中进行离子交换层析,依次用水、0.1M NaCl溶液、0.3M NaCl溶液、0.5M NaCl溶液、0.7M NaCl溶液洗脱,收集0.3M NaCl溶液洗脱部分,加入Sephadex G100凝胶柱中进一步纯化,用0.1M NaCl溶液洗脱,自动收集器收集,合并单一峰,透析脱盐、冷冻干燥后得到精制粗根荨麻多糖。
进一步地,所述Sevage试剂中氯仿与正丁醇的质量比为4:1。
本发明还公开了一种粗根荨麻多糖在制备具有增强机体免疫力的保健食品或药物方面的应用。
采用上述结构本发明取得的有益效果如下:本方案经药理实验证明,粗根荨麻多糖具有免疫增强活性,能够刺激巨噬细胞增殖,活化巨噬细胞,增加巨噬细胞的吞噬活性,此外,还能刺激巨噬细胞分泌IL-6、TNF-α等细胞因子。
附图说明
附图用来提供对本发明的进一步理解,并且构成说明书的一部分,与本发明的实施例一起用于解释本发明,并不构成对本发明的限制。在附图中:
图1为一种粗根荨麻多糖分子量及其分布色谱图;
图2为一种粗根荨麻多糖全波长扫描图;
图3为一种粗根荨麻多糖红外波谱图;
图4为单糖组成色谱图,其中(A)为标准单糖,(B)为一种粗根荨麻多糖;
图5为一种粗根荨麻多糖对巨噬细胞吞噬活性的影响图;
图6为一种粗根荨麻多糖对巨噬细胞增殖能力的影响流式直方图;
图7为一种粗根荨麻多糖对巨噬细胞增殖能力的影响荧光强度统计图;
图8为一种粗根荨麻多糖对巨噬细胞形态的影响图;
图9为一种粗根荨麻多糖对巨噬细胞IL-6分泌水平的影响;
图10为一种粗根荨麻多糖对巨噬细胞TNF-α分泌水平的影响。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例;基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
在本发明的描述中,需要理解的是,术语“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“顶”、“底”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系,仅是为了便于描述本发明和简化描述,而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作,因此不能理解为对本发明的限制。
所述粗根荨麻多糖是从粗根荨麻中经过乙醇脱脂、热水提取、乙醇沉淀、再经过DEAE-纤维素离子交换层析和Sephadex G100凝胶柱层析纯化得到。
对该多糖的组成及理化性质进行了表征,研究了该多糖对巨噬细胞的调节作用。实验结果显示,该多糖为一种均一的酸性多糖,其中不含有蛋白质和核酸等杂质,该多糖能够刺激巨噬细胞增殖,活化巨噬细胞,增加巨噬细胞的吞噬活性,此外,还能刺激巨噬细胞分泌IL-6、TNF-α等细胞因子。
实验方法
1粗根荨麻多糖的提取
粗根荨麻地上部分用自来水洗净后晾干,粉碎机粉碎。称取粗根荨麻粉末300g置于回流装置中,加入8倍量95%乙醇,80℃回流3h。弃去上清,药渣室温晾干后置于回流装置中,加入10倍量去离子水,90℃回流提取2h,重复提取2次,合并两次提取液,旋转蒸发仪浓缩至400mL。加入95%乙醇,使乙醇的终浓度为70%(v/v),静置2h,离心(4000rmp,15min),沉淀加少量蒸馏水溶解,70%(v/v)乙醇沉淀,重复操作3次,收集沉淀,真空干燥,既得粗根荨麻粗多糖。
2粗根荨麻多糖的纯化
2.1 H2O2脱色:加入3倍量蒸馏水溶解,用2M NaOH溶液调节PH至9-10。50℃水浴,搅拌下缓慢加入30%H2O2使溶液中H2O2的终浓度为2%,搅拌下继续反应1.5h。反应结束后将溶液离心(4000rmp,15min),上清液中加入终浓度为70%(v/v)的乙醇,离心收集沉淀,重复操作2次,收集沉淀。
2.2 Sevage法脱蛋白:沉淀溶解于200ml热蒸馏水中,放至室温,离心(4000rmp,10min),去除沉淀。上清液置分液漏斗中,加入50ml(1/4体积)Sevage试剂(氯仿/正丁醇=4/1),振荡分离,静止取上层,重复7次。将除蛋白的多糖溶液用去离子水透析48h,浓缩,冷冻干燥。
2.3 DEAE-纤维素离子交换层析:将上述脱蛋白的粗根荨麻多糖溶解于100mL纯净水中,进行DEAE-Cellulose(5.5×80cm)柱层析,依次用2倍柱体积水、0.1M NaCl、0.3MNaCl、0.5M NaCl、0.7M NaCl进行洗脱。收集0.3M NaCl洗脱液,浓缩至100mL。透析以除去NaCl,冷冻干燥。
2.4 Sephadex G100凝胶柱层析:上述粗根荨麻多糖溶解于少量纯水,加入Sephadex G100(2.5×150cm)凝胶柱中,用0.1M NaCl洗脱,自动收集器收集,2ml/份,9min/份。紫外检测器检测210nm处吸光度,绘制洗脱曲线图,合并单一峰,去离子水透析48h,浓缩,冷冻干燥,得到精制粗根荨麻多糖。
3粗根荨麻多糖的化学特征
3.1 HGPC法测分子量
3.1.1样品配制:Dextran T系列标准品:右旋糖酐D2,D3,D4,D5,D6,D7,D8(中国药品生物制品检定所),标准分子量分别为4600、7100、10000、21400、41100、84400、133800Da。分别取各标准品10mg,加1ml水溶解,经0.22μm滤膜过滤。供试品粗根荨麻多糖同法配置成10mg/ml溶液。
3.1.2检测条件:Agilent 1200HPLC系统,Agilent示差检测器,ShodexOhpak SB-806HQ凝胶色谱柱,流动相:0.1M NaCl,流速:0.5mL/min,柱温:35℃,示差检测器温度:35℃,进样量:20μL。
3.1.3应用GPC软件分析数据,绘制标准曲线。回归方程:log Mw=-1.0314V+15.0469,R=0.9969。
3.1.4粗根荨麻多糖HGPC图谱如图1所示,结果表明,粗根荨麻多糖的重均分子量为18320。
3.2全波长扫描
3.2.1将粗根荨麻多糖用去离子水配制成2mg/mL水溶液,并用去离子水做空白对照,在190nm-800nm进行连续扫描。
3.2.2结果如图2所示,结果表明,该粗根荨麻多糖在260nm和280nm处无吸收,表明该粗根荨麻多糖中不含有核酸和蛋白质。
3.3红外波谱分析
3.3.1称取粗根荨麻多糖样品3mg做压片,按常规方法测定红外光谱,结果如图3所示。
3.4旋光度测定
称取粗根荨麻多糖2mg,蒸馏水溶解并定容至1mL,T=19.3℃,钠灯光源,以蒸馏水为空白,l dm管室温下测定多糖样品的旋光度。结果表明粗根荨麻多糖的旋光度为+72.92°。
3.5总糖、糖醛酸含量测定
3.5.1硫酸苯酚法测总糖含量
3.5.1.1标准曲线的制备:将无水葡萄糖置于105℃烘箱中恒重,精密称定无水葡萄糖对照品9mg,置100mL容量瓶中,用水溶解并加水至刻度,摇匀,即得。精密量取对照品溶液0.1mL、0.2mL、0.3mL、0.4mL、0.5mL、0.6mL、0.7mL、0.8mL、0.9mL、1.0mL分别置10mL具塞刻度试管中,各加水至1.0mL,摇匀,加入5%苯酚溶液1mL(临用配制),摇匀,再加入浓硫酸5mL,混匀,放入沸水浴中加热20min,取出,在冰水浴中冷却5min,以相应试剂为空白,使用酶标仪在488nm波长处测定吸光度,绘制标准曲线。
3.5.1.2供试品的测定:精密称取粗根荨麻多糖粉末10mg,加蒸馏水溶解并定容至10mL容量瓶中,摇匀。精密量取0.1mL,置10mL具塞试管中,照标准曲线制备项下的方法,自“加水至1.0mL”起,依法测定吸光度,根据标准曲线计算出糖醛酸含量。
3.5.1.3结果表明,粗根荨麻多糖中总糖含量为67.74%。
3.5.2四硼酸钠-硫酸法测糖醛酸含量:
3.5.2.1标准曲线的制备:精密称取干燥至恒重的D-半乳糖醛酸对照品25mg,置25mL容量瓶中,加水溶解并定容至刻度,摇匀,即得。精密量取浓度为1mg/mL的对照品溶液0.025mL、0.05mL、0.075mL、0.1mL、0.125mL、0.15mL分别置于10mL具塞试管中,各加水至1.0mL,摇匀,在冰水浴中加入四硼酸钠-硫酸溶液6mL,混匀,置沸水浴中保温20min,取出,立即置于冰水浴中冷却,再加入1.5mg/mL的间羟基联苯溶液100μL,混匀。以相应试剂为空白,用酶标仪在525nm波长处测定吸光度。以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
3.5.2.2供试品的测定:精密称取粗根荨麻多糖粉末50mg,加蒸馏水溶解并定容至50mL容量瓶中,摇匀。精密量取0.25mL,置10mL具塞试管中,照标准曲线制备项下的方法,自“加水至1.0mL”起,依法测定吸光度,根据标准曲线计算出糖醛酸含量。
3.5.2.3结果表明,粗根荨麻多糖中糖醛酸含量为44.99%。
3.6单糖组成分析
3.6.1样品制备:取样品2mg,于5mL的COD管中,加2mol/L三氟乙酸1mL,110℃中水解4h,将水解液蒸干,用甲醇洗4-5次,蒸干甲醇,加1mL水溶解,取50uL上述水解液与50uL0.6M的NaOH溶液充分混合;加100uL 0.5M的PMP甲醇溶液,涡旋混匀,70℃烘箱反应30min;取出放置10min冷却至室温,加50μL 0.3mol/L的HCl中和,加水至1mL,使用等体积的氯仿萃取3次,将水相用0.22μm滤膜过滤后上样进行分析。标准单糖:甘露糖(Man)、鼠李糖(Rha)、葡萄糖醛酸(Glc A)、艾杜糖醛酸(Ido A)、半乳糖醛酸(Gal A)、葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)、阿拉伯糖(Ara)。
色谱条件:色谱柱:Agilent C18;150mm4.6 mm,id.5μm;流动相:0.1M醋酸盐缓冲液-乙腈;柱温:30℃;进样体积:20μL;流速:1mL/min;检测波长:250nm。
3.6.2单糖组成结果见图4,结果表明,粗根荨麻多糖主要由鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖和阿拉伯糖组成,质量比为1:1.28:0.58:0.53。
4粗根荨麻多糖的免疫调节活性研究
4.1 MTT实验检测粗根荨麻多糖对巨噬细胞增殖的影响
4.1.1取对数生长期的Raw264.7细胞按1×104个/孔加入96孔细胞培养板中,37℃,5%CO2条件下培养24h。弃去培养基,分别加入含有各浓度粗根荨麻多糖(12.5、25、50、100、200、300μg/mL)的新鲜培养基,每孔150μL,阳性对照组加入1μg/mL LPS。继续培养24h,每孔加入20μL 5mg/ml的MTT溶液,37℃继续培养4h,弃去培养基,每孔加入150μL DMSO溶液,震荡混匀,在酶标仪上测定490nm处吸光度。细胞生长率=(实验组A值-空白组A值)/(对照组A值-空白组A值)×100%。
4.1.2粗根荨麻多糖对巨噬细胞增殖能力影响的结果如图5所示,结果表明,当浓度≥200μg/mL时,粗根荨麻多糖能够显著增加巨噬细胞的增殖能力(P<0.01vs空白组)。
4.2流式细胞术检测粗根荨麻多糖对巨噬细胞吞噬活性的影响
4.2.1取对数生长期的Raw264.7细胞按1×105个/孔加入12孔细胞培养板中,37℃,5%CO2条件下培养24h。弃去培养基,分别加入含有各浓度粗根荨麻多糖(低浓度:50μg/mL、中浓度:100μg/mL、高浓度:200μg/mL)的新鲜培养基,每孔1mL,阳性对照组加入1μg/mLLPS。培养24h后,弃去培养基,用PBS洗2次,加入1mg/mL FITC-dextran 40,阴性对照组置于4℃避光孵育1h,其它组置于37℃避光培养1h。弃去培养基,用预冷的PBS洗细胞3次,500μLPBS重悬,用流式细胞仪检测。
4.2.2粗根荨麻多糖对巨噬细胞吞噬活性影响的结果如图6和图7所示,结果表明,低、中、高浓度的粗根荨麻多糖均能够显著促进巨噬细胞的吞噬活性(P<0.01vs空白组),其中高浓度的粗根荨麻多糖促吞噬作用显著高于阳性对照LPS(P<0.01)。
4.3粗根荨麻多糖对巨噬细胞形态的影响
4.3.1取对数生长期的Raw264.7细胞按1×105个/孔加入12孔细胞培养板中,37℃,5%CO2条件下培养24h。弃去培养基,加入含有200μg/ml粗根荨麻多糖的新鲜培养基,每孔1mL,阳性对照组加入1μg/mL LPS。培养24h后,分别于100×和400×显微镜下观察细胞形态。
4.3.2在倒置显微镜下观察巨噬细胞形态结果如图9所示,与空白组相比,经粗根荨麻多糖和LPS处理后的细胞数量增多,与MTT法测定细胞增殖结果一致,进一步证实了粗根荨麻多糖具有促进细胞增殖的作用。此外,经粗根荨麻多糖和LPS处理后细胞形态发生了显著变化。空白对照组中Raw264.7细胞呈圆形或椭圆形,贴壁良好,较少见突起,细胞内未见空泡。经粗根荨麻多糖和LPS处理24h后,细胞数量明显增多,细胞体积变大,呈圆形、椭圆形、菱形、梭性或不规则形,可见较多伪足,细胞内出现较多颗粒和空泡,呈现激活状态。
4.4 ELISA检测粗根荨麻多糖对巨噬细胞细胞因子表达的影响
4.4.1取对数生长期的Raw264.7细胞按1×105个/孔加入12孔细胞培养板中,37℃,5%CO2条件下培养24h。弃去培养基,分别加入含有各浓度粗根荨麻多糖(低浓度:50μg/mL、中浓度:100μg/mL、高浓度:200μg/mL)的新鲜培养基,每孔1mL,阳性对照组加入1μg/mLLPS。培养24h后,收集培养上清,按ELISA试剂盒说明书操作检测IL-6和TNF-α的含量。4.4.2粗根荨麻多糖对巨噬细胞分泌细胞因子影响的结果如图9和图10所示,结果表明,粗根荨麻多糖和LPS能够显著促进Raw264.7细胞分泌IL-6和TNF-α(P<0.01),且随着浓度的增加,该促进作用增强,高浓度的粗根荨麻多糖促进Raw264.7细胞分泌IL-6和TNF-α的作用显著高于阳性对照LPS组(P<0.01)。
综上所述,本次粗根荨麻多糖为首次从粗根荨麻药材中分离纯化得到。该粗根荨麻多糖是分子量在18320左右的均一多糖,其中不含蛋白质和核酸,总糖含量为67.74%,糖醛酸含量为44.99%,主要由鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖和阿拉伯糖组成,质量比为1:1.28:0.58:0.53。药理实验证明,该粗根荨麻多糖具有免疫增强活性,能够刺激巨噬细胞增殖,活化巨噬细胞,增加巨噬细胞的吞噬活性,此外,还能刺激巨噬细胞分泌IL-6、TNF-α等细胞因子,因此,粗根荨麻多糖能够用于制备具有增强机体免疫力的保健食品或药物。
需要说明的是,在本文中,诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来,而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且,术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含,从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素,而且还包括没有明确列出的其他要素,或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点,对于本领域技术人员而言,显然本发明不限于上述示范性实施例的细节,而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下,能够以其他的具体形式实现本发明。因此,无论从哪一点来看,均应将实施例看作是示范性的,而且是非限制性的,本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定,因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。不应将权利要求中的任何附图标记视为限制所涉及的权利要求。
此外,应当理解,虽然本说明书按照实施方式加以描述,但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案,说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见,本领域技术人员应当将说明书作为一个整体,各实施例中的技术方案也可以经适当组合,形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。
Claims (7)
1.一种粗根荨麻多糖,其特征在于,分子量范围在11000-20000,所述粗根荨麻多糖由鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖和阿拉伯糖构成;所述粗根荨麻多糖中鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖和阿拉伯糖的质量比为1: 1.0-1.4:0.4-0.8:0.4-0.8;所述粗根荨麻多糖中总糖含量为40-90%;所述粗根荨麻多糖中糖醛酸含量为20-50%。
2.根据权利要求1所述的一种粗根荨麻多糖,其特征在于,所述粗根荨麻多糖中鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖和阿拉伯糖的质量比为1:1.28:0.58:0.53。
3.根据权利要求1所述的一种粗根荨麻多糖,其特征在于,所述粗根荨麻多糖中总糖含量为67.74%,所述粗根荨麻多糖中糖醛酸含量为44.99%。
4.根据权利要求1-3任一项所述的一种粗根荨麻多糖,其特征在于,所述粗根荨麻多糖是从粗根荨麻中经过乙醇脱脂、热水提取、乙醇沉淀、再经过DEAE -纤维素离子交换层析和Sephadex G100凝胶柱层析纯化得到。
5.根据权利要求1-3任一项所述的一种粗根荨麻多糖的分离提取方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)将粗根荨麻地上部分适当粉碎后,加8-10倍量70-95%乙醇60-80℃回流脱脂得到药渣,药渣加入8-10倍量去离子水于70-90℃回流提取,重复提取2-4次,提取液经旋转蒸发仪浓缩后加入终浓度为70%-90%体积比的乙醇进行沉淀,重复沉淀3次初步纯化后得到粗根荨麻的粗多糖溶液;
(2)将初步纯化后的粗多糖溶液采用30% H2O2脱色、重复脱色1-3次;
(3)将脱色后的粗多糖溶液采用Sevage试剂脱蛋白,重复5-8次,将除蛋白后的粗多糖溶液用去离子水透析48h以上,浓缩,冷冻干燥;
(4)将脱蛋白的粗多糖溶解于适量蒸馏水中,加入DEAE -纤维素柱中进行离子交换层析,依次用水、0.1M NaCl溶液、0.3M NaCl溶液、 0.5M NaCl溶液、0.7 M NaCl溶液洗脱,收集0.3 M NaCl溶液洗脱部分,加入Sephadex G100凝胶柱中进一步纯化,用0.1 M NaCl溶液洗脱,自动收集器收集,合并单一峰,透析脱盐、冷冻干燥后得到精制粗根荨麻多糖。
6.根据权利要求5所述的一种粗根荨麻多糖的分离提取方法,其特征在于:所述Sevage试剂中氯仿与正丁醇的质量比为4:1。
7.根据权利要求1-3任一项所述的一种粗根荨麻多糖在制备具有增强机体免疫力的保健食品或药物方面的应用。
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