CN112898214B - 一种环状肉桂酰胺化合物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一类环状肉桂酰胺新化合物及其制备方法和应用，该环状肉桂酰胺类化合物为scopocycinnamide。其制备方法包括药材提取、生物碱富集、反相模式高效液相制备、离子交换模式高效液相制备和反相模式高效液相制备步骤。该化合物的应用为利用无标记细胞系统药理(CLIP)技术研究化合物对毒蕈碱M受体的作用，是M受体的拮抗剂。毒蕈碱M受体为G蛋白偶联受体，与痉挛、镇痛、帕金森症、精神分裂症、抑郁症等相关，为相关疾病提供作用靶点明确的高效新配体。该化合物对丁酰胆碱酯酶有抑制活性，丁酰胆碱酯酶与阿兹海默症、肝炎、肝硬化及肝癌等相关，为相关疾病提供作用靶点明确的高效新配体。

Description

一种环状肉桂酰胺化合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于天然药物化学领域，更具体的涉及一种环状肉桂酰胺化合物scopocycinnamide及其制备方法和作为毒蕈碱M受体拮抗活性成分，用于治疗与其相关疾病如胃肠道痉挛、胆绞痛、肾绞痛或胃肠道蠕动亢进等用途。
背景技术
唐古特山莨菪Anisodus tanguticus为茄科山莨菪属的植物，是中国的特有植物，藏语称“唐川那保”。分布在中国的甘肃、西藏、云南、青海等地，生长于海拔2,800米至4,200米的地区，一般生长在山坡及草坡阳处，目前尚未由人工引种栽培。作为传统的藏药，藏医用唐古特山莨菪及种子入药，具有麻醉镇痛的作用[1]。关于唐古特山莨菪的化学成分研究报道，多是托品烷类生物碱如莨菪碱、东莨菪碱、山莨菪碱和樟柳碱[2]，托品烷类生物碱是药材中主要的活性成分，作用于毒蕈碱M受体。龙珍等[3]发现唐古特山莨菪中还有羟基肉桂酰胺类生物碱成分，且具有一定的M1受体拮抗活性[4]。
毒蕈碱M受体与腺体和平滑肌的收缩和舒张有关，M受体的拮抗剂有舒张平滑肌的作用，临床可用于解痉[5]。如临床用解痉药阿托品，为托品烷类生物碱，用药历史已久，其解痉作用机制即是M受体拮抗作用。然而阿托品由于对腺体、平滑肌、神经系统均有作用，因此在治疗疾病的同时有多种副作用，相对于此，不同结构的M受体拮抗剂的发现，尤其是本身是新化合物的，可能有更小的副作用。本专利即公开了一种新化合物，为环状肉桂酰胺类化合物，与已知的结构不同，研究结果表明该化合物有较好的M受体拮抗活性，预示着可能作为一种副作用更小的解痉药物应用于临床。
目前，关于环状肉桂酰胺类化合物scopocycinnamide没有相关报道，与本化合物结构相似的化合物报道也极其少。因此，该化合物的结构具有一定的新颖性，并且相似结构的M受体拮抗活性也未见相关报道。
参考文献：
[1]王环，沈建伟，张晓峰.山莨菪中4种生物碱含量与海拔关系的研究.中国中药杂志, 2002,27(2):151-152
[2]张晓峰等.山莨菪植物体内4种莨菪烷类生物碱含量的变化.西北植物学报,2002,22(3):630-634
[3]Long,Z.Zhang,Y.Guo,Z.Wang,L.Xue,X.Zhang,X.Wang,S.Wang,Z.Civelli,O.Liang,X.Amide alkaloids from Scopolia tangutica.Planta Medica,2014,80(13):1124-1130.
[4]Zhang,Y.Long,Z.Guo,Z.Wang,Z.Zhang,X.Ye,R.Liang,X.Civelli,O.Hydroxycinnamic acid amides from Scopolia tangutica inhibit the activity ofM1 muscarinic acetylcholine receptor in vitro.Fitoterapia,2016,108:9-12.
[5]史一鸣,钮因尧,陆阳.M受体及相关选择性药物研究进展.国际药学研究杂志,2009,36(5):355-361.
发明内容
本发明的目的之一在于提供一类新型环状肉桂酰胺化合物，或其晶型、或其手性异构体、或其糖苷、或其药学形式上可接受的盐、或其溶剂合物、或其前体药物、或其代谢产物，其结构通式如下式所示：
Figure BDA0002302260000000021
其中n1＝2，3，4；n2＝2，3，4；n3＝2，3，4；
R1＝H,OH,OCH3；R2＝OH,OCH3；R3＝H,OH,OCH3；R4＝OH,OCH3
本发明的目的之二在于提供了一种新化合物的纯化制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)以唐古特山莨菪为原料，经粉碎后，加入原料重量6-10倍的醇溶液作为提取溶剂，回流提取3次，每次2h，过滤；将滤液合并后旋蒸浓缩得到提取物浓溶液；
(2)将步骤(1)最终得到的滤液用阳离子交换固相萃取填料进行生物碱的选择性富集，将高氯酸铵以250mmol/L(质量浓度)的浓度溶于90％甲醇水(体积浓度)中，用于洗脱生物碱成分，收集的生物碱的盐溶液，旋蒸浓缩，去除析出的高氯酸铵盐，得到生物碱的浸膏，用体积浓度0.1％的三氟乙酸/水超声溶解，离心，将沉淀再次溶解，离心，2次滤液合并，得到生物碱样品；
(3)将步骤(2)得到的生物碱样品用反相模式高效制备色谱柱进行分离，从出峰开始，按照峰收集(色谱峰及峰之间的间隔都收集)得到24个生物碱一维馏分F1-F24；
(4)将步骤(3)中得到的馏分F9用离子交换模式高效制备色谱柱进行分离，得到F9-1～F9-8的8个二维馏分。
(5)将步骤(4)中得到的二维馏分F9-3用反相模式高效制备色谱柱进行分离，得到所述化合物的白色粉末，是一个新化合物，通过HR-ESI-MS、 1H-NMR、13C-NMR和二维核磁共振等检测方法，确认结构，命名为 scopocycinnamide。
本发明的目的之三在于提供一种新的环状肉桂酰胺化合物 scopocycinnamide，或其晶型、或其异构体、或其糖苷、或其药学形式上可接受的盐、或其溶剂合物、或其前体药物、或其代谢产物作为活性成分，或由所述的任一种或几种作为毒蕈碱M受体拮抗剂的药物组合物在制备镇痛、解痉等相关疾病药物中的应用。所述与M受体相关疾病包括但不限于疼痛、痉挛、溃疡、支气管炎、肺气肿、慢性阻塞性肺疾病、失血性休克、溃疡、晕动症导致的恶心、呕吐、眩晕等等。所述疼痛疾病包括但不限于创伤性疼痛、神经病理性疼痛、癌痛、精神(心理性)疼痛；所述痉挛疾病包括但不限于胃肠道痉挛、心绞痛、胆绞痛、肾绞痛等；所述溃疡疾病包括但不限于胃肠道溃疡、消化道溃疡等。
本发明的目的之四在于提供一种新的环状肉桂酰胺化合物scopocycinnamide，或其晶型、或其异构体、或其糖苷、或其药学形式上可接受的盐、或其溶剂合物、或其前体药物、或其代谢产物作为活性成分，或由所述的任一种或几种作为丁酰胆碱酯酶抑制剂的药物组合物在制备阿兹海默症、肝病等相关疾病药物中的应用。所述与丁酰胆碱酯酶相关疾病包括但不限于阿兹海默症、急性肝炎、慢性肝炎、非酒精性肝脂肪变、非酒精性脂肪性肝炎、肝硬化和肝癌等。
本发明化合物使用方法包括给所述患者施用有效量的药物，可采用任何适当的给药方式施用这些治疗单体化合物或药物组合物，可以是但不限于经静脉注射、口服、直肠、舌下、粘膜、鼻、眼、肌肉、静脉内、经皮、脊椎、鞘内、关节内、动脉内、蛛网膜下、支气管、淋巴和子宫、皮下、皮肤表面、局部注射等方式给药。
所述药物组合物是指本发明的一种或多种化合物可以彼此联合使用，也可选择将本发明的化合物与任何其它活性试剂结合使用。如果使用的是一组化合物，则可将这些化合物同时、分别或有序地对受试对象进行给药。本发明中药物组合物中活性成分(即本发明化合物)的量可以根据患者的病情、医生诊断的情况特定的加以应用，活性化合物的剂量或浓度在一个较宽的范围内调节，活性化合物的含量范围为药物组合物的1％～90％。
显然，根据本发明的上述内容，按照本科领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明的上述基本技术思想前提下，还可以做出其他多种形式的修改、替换或变更。
附图说明
图1.化合物的scopocycinnamide纯化制备；
A.生物碱的一维制备；
B.一维馏分F9的二维制备；
C.馏分F9-3的三维制备；
D.化合物的纯度鉴定；
图2.化合物scopocycinnamide的紫外吸收光谱和MS图；
A.化合物的紫外吸收光谱；
B.化合物的MS图；
图3.化合物scopocycinnamide的1H-NMR谱；
图4.化合物scopocycinnamide的13C-NMR谱；
图5.化合物scopocycinnamide的HSQC谱；
图6.化合物scopocycinnamide的1H-1H COSY谱；
图7.化合物scopocycinnamide的1H-COSY谱和HMBC谱；
图8.化合物scopocycinnamide的拮抗活性实验；A.化合物的DMR信号；B.第二步乙酰胆碱的DMR信号；
图9.化合物scopocycinnamide的拮抗活性剂量曲线；
图10化合物scopocycinnamide对BchE的抑制活性。
具体实施方式
下述非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。下面以具体实施例的方式对本发明作进一步的说明。
实施例1唐古特山莨菪中生物碱化合物的纯化制备
(1)50kg唐古特山莨菪药材干粉由西北高原植物所提供，用工业乙醇约 500L(纯度95％左右，25kg药材/100L)浸泡过夜后回流提取2小时，提取液抽滤得滤液，共提取3次，滤液合并，浓缩至100L，得到提取物浓溶液；
(2)将步骤(1)最终得到的滤液用阳离子交换固相萃取填料(silica SCX， 60μm)进行生物碱的选择性富集，首先用甲醇洗涤除去非生物碱，然后将高氯酸铵以250mmol/L的浓度溶于90％甲醇水(体积浓度)中，用于洗脱生物碱成分，收集的生物碱的盐溶液，旋蒸浓缩，去除析出的高氯酸铵盐，得到生物碱的浸膏，用体积浓度0.1％的三氟乙酸/水超声溶解，离心，将沉淀再次溶解，离心，2次滤液合并，得到生物碱样品；
(3)将步骤(2)得到的生物碱样品用反相模式高效制备色谱柱(C18HCE， 7μm)进行分离，流动相条件为乙腈-硫酸钠的水溶液-水三相体系，其中硫酸钠溶液配制方法为1L水中溶解200mM硫酸钠，加入1mL乙醇胺和3.5mL 磷酸，混匀，过0.45μm水膜，流动相梯度条件为固定盐相为10％(体积浓度)，0～30min，乙腈5～15％(体积浓度)，水相85～75％(体积浓度)；30～40 min，乙腈15～60％，水相75～30％；40～50min，乙腈60％～60％，水相 30～30％。室温；流速为320mL/min，检测波长为210nm；按照峰收集(色谱峰及峰之间的间隔都收集)得到24个生物碱一维馏分F1-F24；
(4)将步骤(3)中得到的馏分F9用离子交换模式高效制备色谱柱(silica SCX,7μm)进行分离，流动相条件为乙腈-100mmol/L磷酸二氢钠水溶液(质量浓度)-水三相流动相体系，流动相梯度条件为：固定磷酸二氢钠盐相为30％ (体积浓度)，0～20min，乙腈5～50％(体积浓度)，水相65～20％(体积浓度)；20～50min，乙腈50％等度，水相20％。室温，流速为120mL/min，检测波长210nm。按峰收集，得到8个二维馏分F9-1到F9-8。
(5)将步骤(4)中得到的二维馏分F9-3用反相模式高效制备色谱柱 (C18HCE，7μm)进行分离，流动相为体积浓度0.1％甲酸水溶液和乙腈，用2％乙腈(体积浓度)的等度洗脱条件；室温，流速为20mL/min，检测波长为210nm；收集馏分F9-3-P4，浓缩后冷冻干燥，得到所述化合物的白色絮状粉末。
实施例2化合物scopocycinnamide的结构表征
化合物F9-3-P4为白色絮状粉末，易溶于水，HR-ESI-MS显示分子离子峰[M+H]+为472.2462，计算分子式为C25H34N3O6，紫外吸收谱带200nm、 235nm和285nm。利用HR-ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR和二维核磁共振进行检测，结构解析过程如下：
结合1H NMR谱、HSQC谱和1H-1H COSY谱分析，结构中有6个自旋耦合体系：3.57(ddd,J＝14.5,9.6,4.5Hz,1H,2-H),3.06(dt,J＝14.5,4.8 Hz,1H,2-H),1.8(m,2H,3-H),2.55(m,1H,4-H),2.68(m,1H,4-H)，为丙二胺结构片段a；2.59(m,1H,6-H),2.84(m,1H,6-H),0.98(m,1H,7-H),1.24(m, 1H,7-H),1.40(m,2H,8-H),2.88(m,1H,9-H),3.45(dt,J＝14.1,4.2Hz,1H, 9-H)，为丁二胺结构片段b；6.71(d,J＝2.0Hz,1H,2”-H),6.80(d,J＝8.2Hz, 1H,5”-H),6.60(dd,J＝8.2,2.0Hz,1H,6”-H)，为苯环1,2,4三取代结构片段 c；6.56(s,1H,3’-H),6.98(s,1H,6’-H)，为苯环的对位而取代结构片段d； 4.48(dd,J＝11.7,5.0Hz,1H,13-H),2.93(dd,J＝15.0,11.7Hz,1H,12-H),2.81 (m,1H,12-H)，为乙基结构片段e，因与吸电子基团相连，导致化学位移向低场移动；2.50(m,1H,14-H),2.85(m,1H,14-H),2.56(m,2H,15-H)，为乙基结构片段f。
结合13C NMR谱和DEPT135谱分析，分子中有6个次甲基碳，包括5 个苯环碳118.06(C-3’),114.07(C-6’),115.27(C-2”),116.17(C-5”),119.75 (C-6”)和烷基碳41.19(C-13)；有9个季碳，包括7个苯环季碳132.07(C-1’), 130.65(C-2’),142.08(C-4’),142.05(C-5’),142.05(C-1”),144.00(C-3”), 136.32(C-4”)和2个酰胺季碳175.27(C-11),174.70(C-16)；有10个亚甲基碳 35.66(C-2),25.65(C-3),42.71(C-4),45.38(C-6),20.41(C-7),24.51(C-8), 37.57(C-9),42.25(C-12),27.05(C-14),35.74(C-15)。
分析HMBC二维相关谱，41.19(C-13)与6.98(s,1H,6’-H),6.71(d,J＝ 2.0Hz,1H,2”-H)相关，4.48(dd,1H,13-H)与119.75(C-6”)和132.07(C-1’) 相关，表明乙基结构片段e与苯环片段c和苯环d皆有连接；175.27(C-11) 与2.81(m,1H,12-H)和3.45(dt,1H,9-H)相关，表明乙基结构片段e与丁二胺片段b连接；174.70(C-16)与3.57(ddd,1H,2-H)和2.56(m,2H,15-H)相关，表明乙基结构片段f与丙二胺片段a连接；27.05(C-14)与6.56(s,1H,3’-H)相关，表明苯环结构片段d与乙基结构片段f连接。确定化合物为scopocycinnamide，是一个新化合物。
1H-NMR and 13C-NMR数据如表1所示。
表1化合物scopocycinnamide的核磁归属
Figure BDA0002302260000000071
实施例3化合物scopocycinnamide的毒蕈碱M受体拮抗活性研究
1.材料：CHO-M1细胞系是转染表达毒蕈碱M1受体的仓鼠卵巢细胞(美国，加州大学欧文分校)，乙酰胆碱是毒蕈碱受体的激动剂(Sigma公司)。检测平台为康宁第三代
Figure BDA0002302260000000081
成像仪，检测的信号为细胞动态质量重置(DMR) 引起的波长位移。
2.将处于对数生长期的CHO-M1细胞，接种于384孔的细胞板中，每孔的培养液体积为40μL，接种密度为1.4×104个/孔，将接种好的细胞板置于细胞培养箱中培养20-22h，至细胞融合度达95％左右进行活性实验。检测前用HBSS缓冲液洗1次，再在每孔中加入30μLHBSS缓冲液，置于
Figure BDA0002302260000000085
系统上平衡孵育1h。
3.化合物scopocycinnamide的M受体拮抗活性实验分两步进行：①在
Figure BDA0002302260000000082
系统上建立一个2min的基线，将化合物scopocycinnamide按剂量浓度加入已接种CHO-M1细胞的
Figure BDA0002302260000000083
384孔生物感应器微型板中，14个剂量浓度为依次为25μM,12.5μM,6.25μM,3.125μM,1.563μM,0.781μM,0.391μM, 0.195μM,0.098μM,0.049μM,0.024μM,0.012μM,0.006μM0.003μM，在
Figure BDA0002302260000000084
系统上监测60min，得化合物的DMR响应曲线(图8A)；②加入乙酰胆碱(16μM)继续监测60min，得乙酰胆碱DMR响应曲线(图8B)。通过监测乙酰胆碱引起的DMR响应信号是否被预处理时加入的待测化合物所抑制来判断化合物对毒蕈碱M受体的拮抗活性。
4.结果与讨论：化合物scopocycinnamide在CHO-M1细胞上不引起 DMR信号，表明化合物不能对CHO-M1细胞所表达的M1受体起激动作用。而第二步加入乙酰胆碱时，探针分子乙酰胆碱的DMR响应信号受到化合物 scopocycinnamide的抑制作用，且表现出剂量依赖性的抑制效应，化合物浓度越高，对乙酰胆碱的DMR信号抑制越强，表明化合物scopocycinnamide 具有毒蕈碱M受体的拮抗活性。
在第二步实验中，选取化合物scopocycinnamide各个浓度30min时间点的乙酰胆碱DMR信号值，以浓度对数为横坐标，DMR值为纵坐标，在prism软件中拟合拮抗活性曲线，得到S型剂量曲线(图9)，化合物的IC50值为0.93μM，表明化合物scopocycinnamide具有较高的M受体拮抗活性。
实施例4化合物scopocycinnamide的丁酰胆碱酯酶抑制活性研究
1.材料：丁酰胆碱酯酶(BchE)购于Sigma,底物碘代硫化丁酰胆碱(BTCI) 购于TCI，显色剂5,5-二硫代-2-硝基苯甲酸(DTNB)购于TCI，毒扁豆碱(+) 是丁酰胆碱酯酶的抑制剂，购买于阿拉丁。检测平台为康Perkinelmer EnSight多功能酶标仪
2.化合物scopocycinnamide的BchE抑制活性实验：(1)在空白组、阳性对照组和实验组的1.5mL的离心管中加入12.5μL的BchE(0.2U/mL)，在实验控制组加入12.5uL的磷酸缓冲液(0.1mol/L,pH 7.4)；(2)在空白组加入15μL 的磷酸缓冲液(0.1mol/L,pH＝7.4)，在阳性对照组加入15μL的毒扁豆碱(+) (1μM)，在实验组加入15μL的化合物scopocycinnamide溶液，浓度分别为400μM、200μM、100μM、50μM、25μM、12.5μM、6.25μM和3.125 μM，在实验控制组加入15μL的磷酸缓冲液(0.1mol/L,pH 7.4)；每个浓度两组独立实验，充分混匀；(3)在每个离心管中加入25μL的BTCI(2mM)，充分混匀后放入恒温培养箱孵育10min，再加入25μL的DTNB(6mM，含质量浓度为2％的SDS)，最后加入22.5μL的磷酸缓冲液(0.1mol/L,pH＝7.4)，在410 nm下检测OD值，根据公式I＝[(A空白组－A阳性对照组)－(A实验组－A实验控制组)]/(A空白组－A阳性对照组)计算抑制率。
3.根据化合物scopocycinnamide不同浓度的抑制率，以浓度为横坐标，抑制率为纵坐标，使用prism软件作图，结果见图10，从图中可以看出，化合物浓度越高，对BchE的抑制越强，且表现出剂量依赖性的抑制效应，说明化合物scopocycinnamide具有BchE抑制活性。

Claims (9)

1.一种环状肉桂酰胺化合物，其结构式如下所示：
Figure DEST_PATH_IMAGE001
所述化合物命名为scopocycinnamide。
2.一种权利要求1所述化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)以唐古特山莨菪为原料，经粉碎后，加入原料重量6-10倍的醇溶液作为提取溶剂，回流提取2-4h，过滤，滤渣重复回流提取过滤1、2、3或4次；将滤液合并后旋蒸浓缩至原体积的1/4-1/5，得到提取物浓溶液；
(2)将步骤（1）最终得到的滤液用阳离子交换固相萃取填料进行生物碱的选择性富集，将高氯酸铵以250 mmol/L的浓度溶于甲醇或体积浓度大于等于85%小于100%的甲醇水中，用于洗脱生物碱成分，收集的生物碱的盐溶液，旋蒸浓缩，去除析出的高氯酸铵盐，得到生物碱的浸膏，用体积浓度0.1%~1%的三氟乙酸/水超声溶解，离心，将沉淀再次溶解，离心，2次滤液合并，得到生物碱样品；
(3)将步骤（2）得到的生物碱样品用反相模式高效制备色谱柱进行分离，从出峰开始，包括色谱峰峰之间的间隔在内按照峰收集得到24个生物碱一维馏分F1-F24；
(4) 将步骤（3）中得到的馏分F9用离子交换模式高效制备色谱柱进行分离，按照峰收集，得到8个二维馏分F9-1到F9-8；
(5) 将步骤（4）中得到的二维馏分F9-3用反相模式高效制备色谱柱进行分离，按照色谱峰收集；得到所述化合物的白色粉末。
3.根据权利要求2所述的化合物的制备方法，其特征在于：步骤（1）中的醇溶液为体积浓度大于等于90%小于100%的醇溶液，醇为甲醇和/或乙醇。
4.根据权利要求2所述的化合物的制备方法，其特征在于：步骤（2）中的阳离子交换固相萃取填料为表面修饰磺酸基的强阳离子交换填料，粒径40~70μm μm，洗脱过程为先用甲醇洗3~5 BV，再用质量浓度250 mmol/L的高氯酸铵的90%甲醇/水（v/v）洗脱3~5 BV。
5.根据权利要求2所述的化合物的制备方法，其特征在于：步骤（3）中的反相模式高效制备色谱柱填料为表面修饰极性基团的硅胶，粒径5-10 μm，流速为120-320 mL/min，根据色谱柱尺寸调整流速；流动相条件为乙腈-硫酸钠的水溶液-水三相体系，其中硫酸钠溶液配制方法为1 L水中溶解200 mmol硫酸钠，加入1 mL乙醇胺和3.5 mL磷酸，混匀，过0.45 µm水膜；流动相梯度条件为固定盐相的体积浓度为10%，0~30 min，乙腈的体积浓度5~15%；30~40 min，乙腈15~60%；40~50 min，乙腈60%~60%；室温；检测波长为210 nm；按照色谱峰收集馏分；进行重复进样，合并每一针的相同色谱峰馏分，分别旋蒸浓缩；
步骤（4）中的离子交换模式高效制备色谱柱填料为表面修饰磺酸基的强阳离子交换填料的硅胶，粒径5-10 μm；流速为120-320 mL/min，根据色谱柱尺寸调整流速；流动相条件为乙腈-100 mmol/L磷酸二氢钠水溶液-水三相流动相体系，流动相梯度条件为：固定磷酸二氢钠盐相的体积浓度为30%，0~20 min，乙腈的体积浓度5~50%；20~50 min，乙腈50%等度；室温，检测波长210 nm；按照色谱峰收集；进行重复进样，合并2次以上上样的每一针的相同色谱峰，分别旋蒸浓缩；
步骤（5）中的反相模式高效制备色谱柱填料为表面修饰极性基团的硅胶，粒径5-10 μm；流速为5-20 ml/min ，根据色谱柱尺寸调整流速；流动相为体积浓度0.1%甲酸水溶液和乙腈，用体积浓度为2-5%的乙腈等度洗脱；室温，检测波长为210 nm；按照色谱峰收集；进行重复进样，合并2次以上上样的每一针的相同色谱峰，分别浓缩后冷冻干燥。
6.一种权利要求1所述化合物scopocycinnamide或其药学形式上可接受的盐的应用，其特征在于：用于制备毒蕈碱M受体相关疾病的治疗药物；毒蕈碱M受体相关疾病为胃肠道痉挛、胆绞痛、肾绞痛或胃肠道蠕动亢进。
7.一种权利要求1所述化合物scopocycinnamide或其药学形式上可接受的盐的应用，其特征在于：用于制备丁酰胆碱酯酶相关疾病的治疗药物；丁酰胆碱酯酶相关疾病为阿兹海默症、肝炎、肝硬化或肝癌。
8.一种药物组合物，其特征在于：药物组合物为权利要求2所述的化合物scopocycinnamide或其药学形式上可接受的盐，加上药学上可接受的辅料制备而成的制剂。
9.根据权利要求8所述的药物组合物，所述的化合物scopocycinnamide药学形式上可接受的盐选自硫酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、三氟乙酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、三氟甲磺酸盐、樟脑磺酸盐、甲酸盐、乙酸盐、丙酸盐、己酸盐、己二酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、苯甲酸盐、富马酸盐、马来酸盐、乳酸盐、琥珀酸盐中的一种或二种以上。
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