CN112888434A

CN112888434A - 新型医药组合物

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Publication number: CN112888434A
Application number: CN201980068581.3A
Authority: CN
Inventors: 阿部伦明; 小柴生造; 西冈浩一郎; 川口和彦; 山崎里美; 寺中康行
Original assignee: Tohoku University NUC; Nippon Chemiphar Co Ltd
Current assignee: Tohoku University NUC; Nippon Chemiphar Co Ltd
Priority date: 2018-10-17
Filing date: 2019-10-17
Publication date: 2021-06-01
Also published as: CA3116173A1; KR20210078499A; EP3868371A4; WO2020080499A1; US20210386696A1; JPWO2020080499A1; EP3868371A1; AU2019361520A1

Abstract

本发明涉及一种医药组合物，是含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的慢性肾病中的肾保护用医药组合物，为片剂。

Description

新型医药组合物

技术领域

本发明涉及含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的肾保护用医药组合物和肾功能诊断用医药组合物。

另外，本发明涉及含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的、用于抑制肾内肾素·血管紧张素系统激活、并且抑制慢性肾病患者的酸中毒、或者改善酸性尿的医药组合物。

本申请基于2018年10月17日在日本申请的日本特愿2018－195568号、2018年10月17日在日本申请的日本特愿2018－195810号、2019年2月25日在日本申请的日本特愿2019－32126号、2019年4月28日在日本申请的日本特愿2019－86945号和2019年6月27日在日本申请的日本特愿2019－119297号要求优先权，在此引用其内容。

背景技术

在世界范围内需要透析或移植的终末期肾功能衰竭(end-stage Kidneydisease：ESKD)患者正在增加。在日本也有增加的趋势，2014年末的透析患者数为32万人。

慢性肾病(CKD)被认为是该ESKD的预备军。不管原发性疾病如何，CKD是包括慢性发展的肾病的概念，是包含由肾小球滤过率(GFR)表示的肾功能下降或者预示肾脏损害的状况慢性(3个月以上)持续的全部症状的概念。CKD不仅有发展成ESKD的风险，而且还有心血管疾病(CVD)等的强烈发病风险，所以早期发现CKD并进行适当的治疗是非常重要的。目前为止已经确立了很多的CKD治疗法，但仍不充分，需要进一步开发肾保护剂。

发展中的CKD患者，血中的碳酸氢根离子(HCO₃ ^-)浓度变低，产生代谢性酸中毒症状，因此给予碳酸氢钠、柠檬酸制剂等碱化剂。而且，报告了通过给予作为碱化剂的碳酸氢钠来抑制CKD的发展(非专利文献1)。另外，报告了在由蛋白质超负荷诱发的肾病动物模型中，碳酸氢钠的口服给予抑制由酸性尿引起的肾小管细胞损伤(非专利文献2)。另外，已知通过对早期的CKD患者给予碱化剂，可抑制肾损伤的发展和降低尿毒症物质的血中浓度(专利文献1和2)。

然而，还不知道使用柠檬酸制剂等碱化剂可以评价肾功能。

另一方面，近年来报告过很多CKD和急性肾损伤(AKI)中的肾损伤标志物。

已知肾脏内的肾素·血管紧张素系统(reninangiotensin system；有时简写为RAS)的激活不仅与高血压密切相关，而且与肾损伤的发展密切相关。肾脏内的血管紧张素原参与了高血压、肾损伤的发病进展机制。另外，报告了排泄到尿中的血管紧张素原与在肾脏中表达的血管紧张素原呈现正相关关系(非专利文献3)。

已知8-羟基-2’-脱氧鸟苷(8-OHdG)是现在最广泛使用的氧化应激标志物之一，肾损伤使得8-OHdG产生增加。

然而，还不知道通过对CKD或AKI的患者给予碱化剂，能够抑制尿中血管紧张素原浓度或者抑制氧化应激。

现有技术文献

专利文献

专利文献1:国际公开第2018/193648号

专利文献2:国际公开第2018/193752号

非专利文献

非专利文献1:Brito-Ashurst,I.D.,et al.:Bicarbonate supplementationslows progression of CKD and improves nutritional status.J.Am.Soc.Nephrol.,20:2075-2084,2009.

非专利文献2:Souma T.,et al.:Luminal alkalinization attenuatesproteinuria-induced oxidative damage in proximal tubularcells.J.Am.Soc.Nephrol.,22:635-648,2011.

非专利文献3:J.Am.Soc.Nephrol,18:pp.1558-1565,2007

发明内容

本发明的课题之一在于提供含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的肾保护用医药组合物。本发明的另一课题在于提供含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的肾功能诊断用医药组合物。本发明的又一课题在于提供抑制肾内RAS激活而对慢性肾病患者的酸中毒的治疗或预防有用的医药品，或者抑制肾内RAS激活而对慢性肾病患者的酸性尿的改善有用的医药品。本发明的再一课题在于提供对抑制肾的氧化应激有用的医药品。本发明的另一课题在于提供肾保护用或者氧化应激抑制用的食品。

本发明人等为了实现上述课题进行了深入研究，结果发现含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的组合物对肾保护和肾功能的评价有用，从而完成了本发明。

另外，发现含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的组合物与碳酸氢钠比较，对抑制尿中血管紧张素原浓度的增加或者抑制尿中8-OHdG浓度有用，发现该药剂对于在抑制肾内RAS激活的同时抑制慢性肾病患者的酸中毒、在抑制肾内RAS激活的同时改善慢性肾病患者的酸性尿、或者抑制肾脏中的氧化应激有用，从而完成了本发明。

本发明在一个方面提供一种慢性肾病中的肾保护用医药组合物，含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物。

本发明在一个方面提供一种肾功能诊断用医药组合物，含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物。

本发明在一个方面提供一种肾功能的判定方法，包括向受检者给予含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的医药组合物的步骤，以及测定给予后的受检者的随机尿的pH的步骤。

本发明在一个方面提供一种肾功能的判定方法，包括向受检者给予含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的医药组合物的步骤，以及测定给予前的受检者的晨尿的pH和给予后的受检者的随机尿的pH的步骤。

本发明在一个实施方式中提供一种伴随高血压的慢性肾病患者的酸中毒抑制用或者酸性尿的改善用医药组合物，含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物。

本发明在一个方面提供一种肾脏中的氧化应激抑制用医药组合物，含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物。

本发明在一个方面提供一种伴随慢性肾病的发展的尿中8-OHdG浓度的增加抑制用、尿中β₂－微球蛋白浓度的增加抑制用、尿中白蛋白浓度增加抑制用或者随机尿中的蛋白浓度增加抑制用医药组合物，含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物。

本发明在一个方面提供一种对慢性肾病中的肾小管功能的维持或改善、或者对慢性肾病中的肾小管功能的下降抑制有用的医药组合物，含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物。

本发明在一个方面提供一种肾保护用或者对肾中的氧化应激抑制有用的食品，含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物。

利用本发明所提供的医药组合物或者食品组合物，能够保护慢性肾病中的肾脏。利用本发明所提供的医药组合物能够评价肾功能。

利用本发明所提供的医药组合物或者食品组合物等，能够在慢性肾病患者中抑制肾内肾素·血管紧张素系统激活的同时抑制酸中毒，在慢性肾病患者中抑制肾内肾素·血管紧张素系统激活的同时改善酸性尿。

附图说明

图1是表示对照组中的随机尿的pH与eGFR的相关性的图。

图2是表示柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂给予组中的随机尿的pH与eGFR的相关性的图。

图3是表示碳酸氢钠制剂给予组中的随机尿的pH与eGFR的相关性的图。

图4是表示对照组中的随机尿和晨尿的pH之差与eGFR的相关性的图。

图5是表示柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂给予组中的随机尿和晨尿的pH之差与eGFR的相关性的图。

图6是表示碳酸氢钠制剂给予组中的随机尿和晨尿的pH之差与eGFR的相关性的图。

具体实施方式

1.医药组合物

本发明所提供的医药组合物可以含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物作为有效成分。

作为柠檬酸的药学上可接受的盐的例子，可举出柠檬酸碱金属盐。作为柠檬酸碱金属盐的例子，可举出柠檬酸钾和柠檬酸钠，可以分别为稳定的柠檬酸钾的一水合物(C₆H₅K₃O₇·H₂O)和柠檬酸钠的二水合物(C₆H₅Na₃O₇·2H₂O)等水合物。

作为本发明所提供的医药组合物中含有的优选的有效成分的例子，可举出柠檬酸钠、柠檬酸钾或其水合物或者它们的混合物，例如，可以为柠檬酸钾的一水合物(C₆H₅K₃O₇·H₂O)与柠檬酸钠的二水合物(C₆H₅Na₃O₇·2H₂O)的混合物。本领域技术人员可以适当地设定柠檬酸钾的一水合物(C₆H₅K₃O₇·H₂O)与柠檬酸钠的二水合物(C₆H₅Na₃O₇·2H₂O)的混合比，例如，可以将柠檬酸钾的一水合物与柠檬酸钠的二水合物的摩尔比设定成相对于柠檬酸钾的一水合物1使柠檬酸钠的二水合物为0.01～100。本领域技术人员可以适当地设定柠檬酸钾(例如，柠檬酸钾的一水合物)与柠檬酸钠(例如，柠檬酸钠的二水合物)的摩尔比，例如，可以为0.85:1.15～1.15:0.85、0.90:1.10～1.10:0.90、0.95:1.05～1.05:0.95或者0.99:1.01～1.01:0.99，优选为1:1。

另外，本发明所提供的医药组合物中含有的有效成分的其它例子中，可举出柠檬酸钠或其水合物，例如，可以为柠檬酸钠的二水合物(C₆H₅Na₃O₇·2H₂O)。

另外，本发明所提供的医药组合物中含有的有效成分的其它例子中，可举出柠檬酸钾或其水合物，例如，可以为柠檬酸钾的一水合物(C₆H₅K₃O₇·H₂O)。

在一个实施方式中，本发明的医药组合物中含有的有效成分可以含有柠檬酸钠或其水合物与柠檬酸钾或其水合物的混合物。

在一个实施方式中，本发明的医药组合物中含有的有效成分可以为柠檬酸钾、柠檬酸钠和柠檬酸(例如，柠檬酸酐)的混合物。这种情况下，本领域技术人员可以适当地设定柠檬酸(例如，柠檬酸酐)、柠檬酸钾和柠檬酸钠的混合比，例如，可以为1:1.7～2.3:1.7～2.3、1:1.9～2.1:1.9～2.1或者1:1.95～2.05:1.95～2.05，优选为1:2:2。

在一个实施方式中，本发明的医药组合物中含有的有效成分可以为柠檬酸钾的一水合物(C₆H₅K₃O₇·H₂O)、柠檬酸钠的二水合物(C₆H₅Na₃O₇·2H₂O)和柠檬酸酐的混合物。这种情况下，本领域技术人员可以适当地设定柠檬酸酐、柠檬酸钾的一水合物(C₆H₅K₃O₇·H₂O)和柠檬酸钠的二水合物(C₆H₅Na₃O₇·2H₂O)的混合比，例如，可以为1:1.7～2.3:1.7～2.3、1:1.9～2.1:1.9～2.1或者1:1.95～2.05:1.95～2.05，优选为1:2:2。

在一个实施方式中，本发明的医药组合物中含有的有效成分可以仅由柠檬酸钠或其水合物与柠檬酸钾或其水合物的混合物构成。

本说明书中，谈及柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物(例如，柠檬酸钾的一水合物(C₆H₅K₃O₇·H₂O)和柠檬酸钠的二水合物(C₆H₅Na₃O₇·2H₂O))的重量时，其重量可以为干燥重量。

本发明所提供的医药组合物可以用于诊断肾功能。本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物可以含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物(例如，柠檬酸钠或其水合物与柠檬酸钾或其水合物的混合物(例如，柠檬酸钾的一水合物(C₆H₅K₃O₇·H₂O)和柠檬酸钠的二水合物(C₆H₅Na₃O₇·2H₂O)的混合物))作为有效成分。

由此，在一个实施方式中，本发明提供一种肾功能诊断用医药组合物，含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物。

另外，在一个实施方式中，本发明提供一种受检者的肾功能的判定方法，包括向受检者给予含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的肾功能诊断用医药组合物的步骤，以及测定给予后的受检者的尿的pH的步骤。

本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物中的有效成分的配合量没有特别限定，例如肾功能诊断用医药组合物为片剂时，1片中可以含有柠檬酸钾(C₆H₅K₃O₇·H₂O)231.5mg和柠檬酸钠水合物(C₆H₅Na₃O₇·2H₂O)195.0mg。

本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物可以用于诊断肾小球滤过功能，可以成为eGFR的改善或恶化、eGFR的指标。

本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物可以给予需要评价肾功能的对象，例如，可以给予慢性肾病患者、急性肾病患者。

在一个实施方式中，提供一种与本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物一起包含用于测定尿的pH的设备、试剂(例如，pH试纸)等的试剂盒。

本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物通过被给予需要评价肾功能的对象(例如，人)，并测定给予后该对象的尿的pH，从而可以评价肾功能。给予可以为早晨、中午、晚上的任一时间，给予次数也没有特别限制，优选单次给予。给予后，测定尿的pH的时机也可以适当地设定，例如，可以为给予1小时后、给予2小时后、给予3小时后、给予4小时后、给予5小时后、给予6小时后。尿的pH的测定可以用本技术领域中公知的测定法进行测定，例如，可以用pH试纸测定。优选在给予本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物后，通过测定最初的尿的pH来判定给予对象的肾功能。

在一个实施方式中，本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物也可以用于实施了慢性肾病或急性肾病的治疗或预防的患者(例如，给予了慢性肾病或急性肾病的治疗或预防用医药品(例如，尿碱化剂)的患者)的肾功能的判定或者上述治疗或预防的效果的判定。例如，在实施上述治疗或预防(例如，给予治疗或预防用医药品)前，给予本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物，给予后测定尿(例如，给予后最初的随机尿)的pH(将该pH值设为A值)，在实施了上述治疗或预防(例如，给予了治疗或预防用医药品)后，给予本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物，在给予后测定尿(例如，给予后最初的随机尿)的pH(将该pH值设为B值)，如果B值比A值高，则可以判定为通过上述治疗或预防(例如，给予治疗或预防用医药品)可改善肾功能。相反，例如，在实施上述治疗或预防(例如，给予治疗或预防用医药品)前，给予本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物，在给予后测定尿(例如，给予后最初的随机尿)的pH(将该pH值设为A值)，在实施了上述治疗或预防(例如，给予治疗或预防用医药品)后，给予本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物，在给予后测定尿(例如，给予后最初的随机尿)的pH(将该pH值设为B值)，如果B值比A值低，则可以判定为通过上述治疗或预防(例如，给予治疗或预防用医药品)肾功能恶化。在该实施方式中，上述治疗或预防用医药品(例如，尿碱化剂)可以被连续给予(例如，可以被连续给予6周、12周、24周、48周、72周)，在连续给予的前后，可以给予本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物，在给予后测定尿(例如，给予后最初的随机尿)的pH，从而判定肾功能的改善、恶化。另外，在该实施方式中，被给予的慢性肾病或急性肾病的治疗或预防用医药品与本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物为相同的药剂时，在即将测定尿的pH之前给予的药剂可以为本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物。

在一个实施方式中，无论是否给予本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物，都可以通过测定需要评价肾功能的对象(例如，人)的晨尿的pH，来评价肾功能。在该实施方式中，评价肾功能的受验者可以为实施了慢性肾病或急性肾病的治疗或预防的患者(例如，给予了慢性肾病或急性肾病的治疗或预防用医药品(例如，尿碱化剂)的患者)。慢性肾病或急性肾病的治疗或预防用医药品(例如，尿碱化剂)可以为单次给予，也可以连续给予，测定pH的晨尿可以为慢性肾病或急性肾病的治疗或预防用医药品(例如，尿碱化剂)的给予前日和/或给予次日的晨尿。

在一个实施方式中，为了判定实施了慢性肾病或急性肾病的治疗或预防的患者(例如，给予了慢性肾病或急性肾病的治疗或预防用医药品(例如，尿碱化剂)的患者)的肾功能或者判定上述治疗或预防的效果，可以测定实施上述治疗或预防(例如，给予治疗或预防用医药品)前的晨尿(例如，实施上述治疗或预防前最后的晨尿)的pH(将该pH值设为A值)，并测定实施了上述治疗或预防(例如，给予了治疗或预防用医药品)后的晨尿(例如，实施上述治疗或预防后最初的晨尿)的pH(将该pH值设为B值)，如果B值比A值高，则可以判定为通过上述治疗或预防(例如，给予治疗或预防用医药品)可改善肾功能。相反，例如，在实施上述治疗或预防(例如，给予治疗或预防用医药品)前，测定晨尿(例如，实施上述治疗或预防前最后的晨尿)的pH(将该pH值设为A值)，在实施了上述治疗或预防(例如，给予了治疗或预防用医药品)后，测定晨尿(例如，实施上述治疗或预防后最初的晨尿)的pH(将该pH值设为B值)，如果B值比A值低，则可以判定为通过上述治疗或预防(例如，给予治疗或预防用医药品)肾功能恶化。在该实施方式中，上述治疗或预防用医药品(例如，尿碱化剂)可以被连续给予(例如，被连续给予6周、12周、24周、48周、72周)，在连续给予的前后，测定晨尿的pH，判定肾功能的改善、恶化。

另外，在一个实施方式中，本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物通过被给予需要评价肾功能的对象(例如，人)，并测定给予前的该对象的晨尿(例如，给予前最后的晨尿)的pH和给予后该对象的尿(例如，给予后最初的随机尿)的pH，可以评价肾功能。给予可以为早晨、中午、晚上的任一时间，但优选为早晨，给予次数也没有特别限制，优选单次给予。给予本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物后，测定尿的pH的时机也可以适当地设定，例如，可以为给予1小时后、给予2小时后、给予3小时后、给予4小时后、给予5小时后、给予6小时后，可以测定给予本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物后最初的尿(随机尿)的pH。晨尿可以为给予本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物前的最后的晨尿。例如，晨尿可以为在给予本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物的1小时前、2小时前、3小时前、4小时前、5小时前或者6小时前采集的晨尿。另外，例如，测定pH的本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物给予后最初的尿(随机尿)和本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物给予前的最后的晨尿可以为同日的尿。

在一个实施方式中，给予本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物后的受检者的尿(例如，给予后最初的随机尿)的pH值(将该pH值设为A值)与给予前的受检者的晨尿(例如，给予前最后的晨尿)的pH值(将该pH值设为B值)的差(A值－B值)为﹣1以下时，可以判定受检者的eGFR值小于50。

另外，在一个实施方式中，给予本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物后的受检者的尿(例如，给予后最初的随机尿)的pH值(将该pH值设为A值)与给予前的受检者的晨尿(例如，给予前最后的晨尿)的pH值(将该pH值设为B值)的差(A值－B值)为1以上时，可以判定受检者的eGFR值为50以上。

另外，在一个实施方式中，本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物也可以用于实施了慢性肾病或急性肾病的治疗或预防的患者(例如，给予了慢性肾病或急性肾病的治疗或预防用医药品(例如，尿碱化剂)的患者)的肾功能的判定或者上述治疗或预防的效果的判定。例如，在实施上述治疗或预防(例如，给予治疗或预防用医药品)前，给予本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物，求出给予后的受检者的尿(例如，给予后最初的随机尿)的pH值(将该pH值设为A值)与给予前的受检者的晨尿(例如，给予前最后的晨尿)的pH值(将该pH值设为B值)的差(A值－B值)，在实施了上述治疗或预防(例如，给予了治疗或预防用医药品)后，给予本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物，求出给予后的受检者的尿(例如，给予后最初的随机尿)的pH值(将该pH值设为C值)与给予前的受检者的晨尿(例如，给予前最后的晨尿)的pH值(将该pH值设为D值)的差(C值－D值)，如果(C值－D值)比(A值－B值)高，则可以判定为通过上述治疗或预防(例如，给予治疗或预防用医药品)可改善肾功能。相反，例如，在实施上述治疗或预防(例如，给予治疗或预防用医药品)前，给予本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物，求出给予后的受检者的尿(例如，给予后最初的随机尿)的pH值(将该pH值设为A值)与给予前的受检者的晨尿(例如，给予前最后的晨尿)的pH值(将该pH值设为B值)的差(A值－B值)，在实施了上述治疗或预防(例如，给予了治疗或预防用医药品)后，给予本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物，求出给予后的受检者的尿(例如，给予后最初的随机尿)的pH值(将该pH值设为C值)与给予前的受检者的晨尿(例如，给予前最后的晨尿)的pH值(将该pH值设为D值)的差(C值－D值)，如果(C值－D值)比(A值－B值)低，则可以判定为通过上述治疗或预防(例如，给予治疗或预防用医药品)肾功能恶化。在该实施方式中，上述治疗或预防用医药品(例如，尿碱化剂)可以被连续给予(例如，可以被连续给予6周、12周、24周、48周、72周)，可以在连续给予的前后，给予本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物，并测定本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物给予前的晨尿(例如，给予前最后的晨尿)的pH与本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物给予后的尿(例如，给予后最初的随机尿)的pH，从而判定肾功能的改善、恶化。在该实施方式中，测定pH的本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物给予前的晨尿与本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物给予后的随机尿可以为同日的尿。另外，在该实施方式中，被给予的慢性肾病或急性肾病的治疗或预防用医药品与本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物为相同的药剂时，在即将测定尿的pH之前给予的药剂可以为本发明所提供的肾功能诊断用医药组合物。

另外，本发明所提供的医药组合物可以用于慢性肾病中的肾保护。肾保护包括肾组织的保护和肾功能的保护。

例如，本发明所提供的医药组合物可以为慢性肾病中的肾组织的保护用医药组合物、伴随慢性肾病的发展的肾组织损伤的抑制用医药组合物、慢性肾病中的肾功能的维持或改善用医药组合物、或者伴随慢性肾病的发展的肾功能的下降抑制用医药组合物。

利用本发明所提供的医药组合物保护的肾组织的例子中，可举出肾小管(例如，近端肾小管)。

另外，利用本发明所提供的医药组合物维持或改善的肾功能的例子中，可举出肾小管功能(例如，近端肾小管功能)，作为肾小管功能的例子，可举出尿浓缩功能。

由此，本发明所提供的医药组合物可以为慢性肾病中的肾小管功能的维持或改善用医药组合物、伴随慢性肾病的发展的肾小管功能的下降抑制用医药组合物、慢性肾病中的尿浓缩功能的维持或改善用医药组合物、或者伴随慢性肾病的发展的尿浓缩功能的下降抑制用医药组合物。

这样的本发明所提供的医药组合物的效果可以通过用本领域中公知的方法测定给予了本发明所提供的医药组合物的慢性肾病患者中的、晨尿中的8-OHdG浓度、晨尿中的β₂－微球蛋白浓度、晨尿中白蛋白浓度、随机尿中的白蛋白浓度、随机尿中的蛋白质浓度和/或晨尿渗透压来评价。

例如，可以向慢性肾病患者给予本发明所提供的医药组合物，与给予前进行比较，当慢性肾病患者的晨尿中的8-OHdG浓度下降的情况下，可以评价为利用本发明所提供的医药组合物保护了肾组织。

例如，将给予了本发明所提供的医药组合物的慢性肾病患者与未给予本发明所提供的医药组合物的慢性肾病患者进行比较，晨尿中的8-OHdG浓度为低值时，可以评价为利用本发明所提供的医药组合物抑制了伴随慢性肾病的发展的肾组织损伤。

例如，可以向慢性肾病患者给予本发明所提供的医药组合物，与给予前进行比较，当慢性肾病患者的晨尿中的β₂－微球蛋白浓度下降的情况下，可以评价为利用本发明所提供的医药组合物保护了肾小管组织。

例如，将给予了本发明所提供的医药组合物的慢性肾病患者与未给予本发明所提供的医药组合物的慢性肾病患者进行比较，晨尿中的β₂－微球蛋白浓度为低值时，可以评价为利用本发明所提供的医药组合物抑制了伴随慢性肾病的发展的肾小管组织损伤。

例如，可以向慢性肾病患者给予本发明所提供的医药组合物，与给予前进行比较，当慢性肾病患者的晨尿中白蛋白浓度、随机尿中的白蛋白浓度和/或随机尿中的蛋白质浓度没有增加的情况下，可以评价为利用本发明所提供的医药组合物维持或改善了肾功能。

例如，将给予了本发明所提供的医药组合物的慢性肾病患者与未给予本发明所提供的医药组合物的慢性肾病患者进行比较，晨尿中白蛋白浓度、随机尿中的白蛋白浓度和/或随机尿中的蛋白质浓度为低值时，可以评价为利用本发明所提供的医药组合物抑制了伴随慢性肾病的发展的肾功能下降。

例如，可以向慢性肾病患者给予本发明所提供的医药组合物，与给予前进行比较，当慢性肾病患者的晨尿的渗透压没有下降的情况下，可以评价为利用本发明所提供的医药组合物维持或改善了肾小管功能，可以评价为利用本发明所提供的医药组合物维持或改善了尿浓缩功能。

例如，将给予了本发明所提供的医药组合物的慢性肾病患者与未给予本发明所提供的医药组合物的慢性肾病患者进行比较，晨尿的渗透压高时，可以评价为利用本发明所提供的医药组合物抑制了伴随慢性肾病的发展的肾小管功能的下降，可以评价为利用本发明所提供的医药组合物抑制了伴随慢性肾病的发展的尿浓缩功能的下降。

在一个实施方式中，本发明所提供的医药组合物使成为肾脏的氧化应激的指标的8-OHdG的尿中浓度下降，因此可以为慢性肾病患者的肾脏的氧化应激抑制用医药组合物。8-OHdG的尿中浓度的下降可以在本发明所提供的医药组合物的给予前与给予后的比较、或者本发明所提供的医药组合物的给予与未给予的比较中评价。

另外，在一个实施方式中，通过给予本发明所提供的医药组合物，可抑制肾内肾素·血管紧张素系的激活，可治疗或预防慢性肾病患者的酸中毒，可改善酸性尿，因此本发明所提供的医药组合物可以为伴随高血压的慢性肾病患者的酸中毒的治疗或预防用医药组合物或者伴随高血压的慢性肾病患者的酸性尿的改善用医药组合物。

“肾内肾素·血管紧张素系统激活的抑制”可以通过与给予本发明所提供的医药组合物前的尿中血管紧张素原浓度进行比较，给予后的尿中血管紧张素原浓度的增加得到抑制来评价，或者可以通过给予本发明所提供的医药组合物，与给予安慰剂或者对照组进行比较，尿中血管紧张素原浓度的增加得到抑制来评价。

另外，在一个实施方式中，通过给予本发明所提供的医药组合物，可抑制尿中(例如，晨尿中)8-OHdG浓度的增加、尿中(例如，晨尿中)血管紧张素原浓度的增加、尿中(例如，晨尿中)β₂－微球蛋白的增加、尿中(例如，晨尿中)白蛋白浓度的增加、尿中(例如，随机尿中)白蛋白浓度的增加、尿中(例如，随机尿中)蛋白质浓度的增加或者尿(例如，晨尿)渗透压的下降，因此本发明所提供的医药组合物可以为尿中(例如，晨尿中)8-OHdG浓度的增加抑制用、尿中(例如，晨尿中)血管紧张素原浓度的增加抑制用、尿中(例如，晨尿中)β₂－微球蛋白的增加抑制用、尿中(例如，晨尿中)白蛋白浓度的增加抑制用、尿中(例如，随机尿中)白蛋白浓度的增加抑制用、尿中(例如，随机尿中)蛋白质浓度的增加抑制用或者尿(例如，晨尿)渗透压的下降抑制用医药组合物。这些效果也可以在给予本发明所提供的医药组合物前后的比较、本发明所提供的医药组合物的给予组与安慰剂或对照组的比较中评价。

本说明书中，“抑制”是指包括使症状、状态或疾病的恶化或发展停止或减速以及为此进行的手段，还包括改善上述症状、状态或疾病或为此进行的手段的概念。在此，“改善”是指包括使“病态的”或“异常的”症状、状态或疾病接近“健康的”或“正常的”状态或为此进行的手段、以及成为“健康的”或“正常的”状态或为此进行的手段的概念。因此，在一个实施方式中，“改善”包括成为“病态的”或“异常的”症状或状态的指标的数值随着上述“改善”变小或变大，接近正常的值、或者变成正常的值。上述“症状、状态或疾病的恶化或发展”包括“病态的”或“异常的”症状、状态或疾病的恶化或发展、以及从“健康的”或“正常的”状态向“病态的”或“异常的”症状、状态或疾病的恶化或发展。在一个实施方式中，“抑制”是指使症状、状态或疾病的恶化或发展停止或减速或者为此进行的手段。在其它的实施方式中，“抑制”是指使症状、状态或疾病的恶化或发展停止或减速。

本说明书中，“健康”表示没有急性或慢性的疾病或损伤的状态，“正常”表示健康的对象处于通常呈现的状态。

在此，上述症状、状态或疾病在本发明所提供的医药组合物的给予前和给予后被比较，或者在给予本发明所提供的医药组合物时与对照组或者给予安慰剂时被比较。

本说明书中，“治疗”是指包括使“病态的”或“异常的”症状、状态或疾病消失、痊愈、治愈或者好转和为此进行的手段，包括“抑制”“病态的”或“异常的”症状、状态或疾病的恶化和为此进行的手段，还包括“改善”的概念。在此，“抑制”和“改善”具有上述的意思。在一个实施方式中，“治疗”是指使“病态的”或“异常的”症状、状态或疾病消失、痊愈、治愈或者好转和为此进行的手段。在其它的实施方式中，“治疗”是指使“病态的”或“异常的”症状、状态或疾病消失、痊愈、治愈或者好转。

本说明书中，“预防”是指包括防止“病态的”或“异常的”症状、状态或疾病的发病于未然和为此进行的手段的概念。

本说明书中，“晨尿”表示起床后最初的尿，“随机尿”表示除上述“晨尿”以外的尿。

本发明所提供的医药组合物以口服或非口服的形式给予人或其它的哺乳动物，非口服给予的例子中，可举出静脈内给予、皮下给予、肌肉内给予、关节内给予、经粘膜给予、经皮给予、经鼻给予、直肠给予、髄腔内给予、腹腔内给予、局部给予。

本发明所提供的医药组合物可以将作为有效成分的柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物直接制备，或者与药学上可接受的载体例如赋形剂(例如乳糖、D－甘露醇、结晶纤维素、葡萄糖)、粘合剂(例如羟丙基纤维素(HPC)、明胶、聚乙烯吡咯烷酮(PVP))、润滑剂(例如硬脂酸镁、滑石)、崩解剂(例如淀粉、羧甲基纤维素钙(CMC－Ca))、稀释剂(例如注射用水、生理食盐水)以及需要时用的其它的添加剂(例如pH调节剂、表面活性剂、助溶剂、保存剂、乳化剂、等渗剂、稳定剂)混合而制备，可以为片剂、胶囊剂、悬浮剂、注射剂、栓剂等制剂。例如，制成片剂时，可以将作为有效成分的柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物与赋形剂(例如乳糖、D－甘露醇、结晶纤维素、葡萄糖)、崩解剂(例如淀粉、羧甲基纤维素钙(CMC－Ca))、粘合剂(例如羟丙基纤维素(HPC)、明胶、聚乙烯吡咯烷酮(PVP))、润滑剂(例如硬脂酸镁、滑石)等混合而制剂化。

在一个实施方式中，本发明所提供的医药组合物为片剂。本发明所提供的片剂除含有作为有效成分的柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物(例如柠檬酸钾或其水合物；柠檬酸钠或其水合物；柠檬酸钾的一水合物和柠檬酸钠的二水合物的混合物；或者碳酸氢钠)以外，还可以含有在制药领域中惯用的药学上可接受的添加剂。作为这样的添加剂的例子，可举出赋形剂、粘合剂、崩解剂、流动剂、矫味剂、润滑剂、pH调节剂、表面活性剂、稳定剂和香料。

作为本发明所提供的片剂中的有效成分的柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的含量相对于片剂，可以为10～95重量％，优选为30～90重量％，更优选为60～85重量％。

本发明所提供的医药组合物可以通过在制药领域中公知的方法来制造。

在一个实施方式中，得到的片剂的硬度可以为10～200N，优选为30～150N。

作为本发明所提供的医药组合物中的有效成分的柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的量可以适当地设定。

在一个实施方式中，作为本发明所提供的医药组合物中的有效成分的柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的量以成为向人给予作为有效成分的柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的给予量而改善痛风或者高尿酸血症的酸性尿的量、或者比其少的量的方式设定，例如，可以以成为对于改善痛风或者高尿酸血症的酸性尿在日本认可的1日用量(例如，将1片中含有柠檬酸钾(C₆H₅K₃O₇·H₂O)231.5mg和柠檬酸钠水合物(C₆H₅Na₃O₇·2H₂O)195.0mg的片剂以1次2片、1日3次的方式口服给予，碱化剂为碳酸氢钠时:1日3～5g口服给予)的1～50％或者10～20％的方式设定。

在一个实施方式中，本发明所提供的医药组合物为片剂，1片剂中可以含有柠檬酸钾一水合物或者柠檬酸钠二水合物10mg～1g，优选含有100mg～500mg，更优选含有400mg～500mg。

在一个实施方式中，本发明所提供的医药组合物为片剂，1片剂中可以含有柠檬酸钾一水合物和柠檬酸钠二水合物各自为10mg～300mg，合计为20mg～600mg，优选各自为150～250mg，合计为400～500mg，更优选各自为190～240mg，合计为400～450mg。

作为一个实施方式，本发明所提供的医药组合物为片剂，可以含有柠檬酸钾一水合物231.5mg和柠檬酸钠二水合物195.0mg，可以含有柠檬酸酐、结晶纤维素、部分糊化淀粉、羟丙基纤维素、硬脂酸镁、羟丙甲纤维素、聚乙二醇6000、氧化钛和巴西棕榈蜡作为添加剂。

作为一个实施方式，可以将含有柠檬酸钾一水合物231.5mg和柠檬酸钠二水合物195.0mg的片剂作为1给予单位。

本说明书中，“给予单位”表示制剂的单位，“1给予单位”表示制剂的最小单位。因此，例如，若为片剂，则给予单位为各片剂，1给予单位表示一个片剂。若为注射剂，则给予单位为装入安瓿或管药瓶等密封容器的注射剂，1给予单位表示装入一个安瓿或管药瓶等密封容器的注射剂。

本发明所提供的医药组合物在给予人或其它的哺乳动物时，每次可以给予1或2以上的上述给予单位，上述1给予单位可以被分开给予。

作为有效成分的柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的给予量可以根据给予方法、给予对象的年龄、体重、性别、症状、对药剂的敏感性等而适当地决定，可以根据症状的改善状况调节给予量。

在一个实施方式中，向人口服给予柠檬酸钾一水合物和柠檬酸钠二水合物的混合物时，可以将为了改善痛风和高尿酸血症的酸性尿而在日本认可的1日的给予量(例如，柠檬酸制剂的情况下:将1片中含有柠檬酸钾(C₆H₅K₃O₇·H₂O)231.5mg和柠檬酸钠水合物(C₆H₅Na₃O₇·2H₂O)195.0mg的片剂以1次2片、1日3次的方式口服给予)的一半量作为1日的给予量。

在一个实施方式中，向人口服给予柠檬酸钾一水合物和柠檬酸钠二水合物的混合物时，可以将为了改善痛风和高尿酸血症的酸性尿而在日本认可的1日的给予量(例如，柠檬酸制剂的情况下:将1片中含有柠檬酸钾(C₆H₅K₃O₇·H₂O)231.5mg和柠檬酸钠水合物(C₆H₅Na₃O₇·2H₂O)195.0mg的片剂以1次2片、1日3次的方式口服给予)作为1日的给予量。

在一个实施方式中，向人口服给予柠檬酸钾一水合物和柠檬酸钠二水合物的混合物时，可以将为了改善痛风和高尿酸血症的酸性尿而在日本认可的1日的给予量(例如，柠檬酸制剂的情况下:将1片中含有柠檬酸钾(C₆H₅K₃O₇·H₂O)231.5mg和柠檬酸钠水合物(C₆H₅Na₃O₇·2H₂O)195.0mg的片剂以1次2片、1日3次的方式口服给予)的一半量作为1日的给予量开始给予，其后将给予量增量至为了改善痛风和高尿酸血症的酸性尿而在日本认可的1日的给予量。

在一个实施方式中，作为有效成分的柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的给予量可以是通过口服给予作为有效成分的柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物而使人的尿(例如晨尿)的pH成为pH5.2～pH6.8、pH5.5～pH6.8、pH5.8～pH6.8、pH5.8～pH6.5、pH5.8～pH6.2、pH5.8以上且小于pH6.2、pH6.0～pH6.5、pH6.0～pH6.4、pH6.0～pH6.3、pH6.0～pH6.2、pH6.0以上且小于pH6.2、pH6.1～pH6.3、pH6.2～6.8、pH6.2～pH6.5或者pH6.5～6.8的给予量。

在一个实施方式中，作为有效成分的柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的给予量可以是通过口服给予作为有效成分的柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物而使人的尿(例如晨尿)的pH在给予6周、12周或者24周后成为pH5.2～pH6.8、pH5.5～pH6.8、pH5.8～pH6.8、pH5.8～pH6.5、pH5.8～pH6.2、pH5.8以上且小于pH6.2、pH6.0～pH6.5、pH6.0～pH6.4、pH6.0～pH6.3、pH6.0～pH6.2、pH6.0以上且小于pH6.2、pH6.1～pH6.3、pH6.2～6.8、pH6.2～pH6.5或者pH6.5～6.8的给予量。

在一个实施方式中，向人口服给予作为有效成分的柠檬酸钾一水合物和柠檬酸钠二水合物的混合物时，可以给予柠檬酸钾一水合物和柠檬酸钠二水合物各自0.1～5g/日且合计0.2～10g/日、各自0.1～3g/日且合计0.2～6g/日、各自0.5～3g/日且合计1～6g/日，优选各自0.5～1.5g/日且合计1～3g/日、各自1～1.5g/日且合计2～3g/日或者各自0.5～1g/日且合计1～2g/日，可以分成1日1～5次、优选1日3次给予。

在一个实施方式中，向人口服给予作为有效成分的柠檬酸钾一水合物或者柠檬酸钠二水合物时，可以给予1～10g/日、1～6g/日、2～5.5g/日、1～3g/日、2～3g/日或者1～1.5g/日，可以分成1日1～5次、优选1日3次给予。

在一个实施方式中，可以长期给予作为有效成分的柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物，例如，给予1周、2周、3周、6周、8周、10周、12周、24周、40周、60周、80周、100周、120周、1周以上、2周以上、3周以上、6周以上、8周以上、10周以上、12周以上、24周以上、40周以上、60周以上、80周以上、100周以上、120周以上、6周～24周、12周～24周、6周～30周、12周～30周、6周～40周、12周～40周、6周～60周、12周～60周、6周～80周、12周～80周、6周～100周、12周～100周、6周～120周或者12周～120周。

在一个实施方式中，本发明所提供的医药组合物通过6周的连续给予、12周的连续给予和/或24周的连续给予，可检测出对慢性肾病的患者有益的效果(例如，肾保护效果)。

慢性肾病(CKD)不论原发性疾病如何，是包括慢性经过的肾病的概念，是包含由肾小球滤过率(GFR)表示的肾功能的下降、或者预示肾脏的损伤的状况慢性(3个月以上)持续的全部症状的概念。

根据CKD诊疗指南2012(日本肾脏学会期刊2012)，慢性肾病的重症度可以根据基于原因(Cause:C)、肾功能(GFR:G)、蛋白尿(白蛋白尿:A)的分类来评价。

GFR的区分如下。

G1:GFR为正常或者高值(≥90mL/分钟/1.73m²)

G2:GFR正常或者轻度下降(60～89mL/分钟/1.73m²)

G3a:GFR轻度～中度下降(45～59mL/分钟/1.73m²)

G3b:GFR中度～高度下降(30～44mL/分钟/1.73m²)

G4:GFR高度下降(15～29mL/分钟/1.73m²)

G5:终末期肾功能衰竭(ESKD)(＜15mL/分钟/1.73m²)

基于蛋白尿(白蛋白尿:A)进行的区分在原发性疾病为糖尿病时，采用尿白蛋白/肌酐(Cr)比如下进行分类。

A1:正常(小于30mg/gCr)

A2:微量白蛋白尿(30～299mg/gCr)

A3:显性白蛋白尿(300mg/gCr以上)

另外，基于蛋白尿(白蛋白尿:A)进行的区分在原发性疾病为除糖尿病以外的高血压、肾炎、多囊肾、移植肾、其它疾病时，采用尿蛋白/肌酐(Cr)比如下进行分类。

A1:正常(小于0.15g/gCr)

A2:轻度蛋白尿(0.15～0.49g/gCr)

A3:高度蛋白尿(0.50g/gCr以上)

根据CKD诊疗指南2012(日本肾脏学会期刊2012)，慢性肾病(CKD)的重症度分类采用上述C、G和A，例如表述为糖尿病G2A3、慢性肾炎G3bA1等。

然而，以往，考虑慢性肾病的重症度仅由用GFR区分的期来表述，也可以像以往那样用G1、G2、G3a、G3b、G4和G5期来表述慢性肾病的重症度。

在一个实施方式中，本发明所提供的医药组合物被给予重症度低的早期的慢性肾病患者。

在一个实施方式中，本发明所提供的医药组合物被给予G3b期以下、优选为G2期或其以下的慢性肾病患者。

在一个实施方式中，本发明所提供的医药组合物被给予处于G2期以上G3b期以下(例如，G2期和G3a期；或者G2期、G3a期和G3b期)的慢性肾病患者。

在一个实施方式中，本发明所提供的医药组合物被给予G3b期以下且为微量白蛋白尿的慢性肾病患者，优选被给予G2期且为微量白蛋白尿的慢性肾病患者。

在一个实施方式中，本发明所提供的医药组合物被给予G2期以上G3b期以下(例如，G2期和G3a期；或者G2期、G3a期和G3b期)且为微量白蛋白尿的慢性肾病患者。

在一个实施方式中，本发明所提供的医药组合物被给予G3b期以下且尿中蛋白排泄量小于3.5g/gCr的慢性肾病患者，优选被给予G2期且尿中蛋白排泄量小于3.5g/gCr的慢性肾病患者。

在一个实施方式中，本发明所提供的医药组合物被给予G2期以上G3b期以下(例如，G2期和G3a期；或者G2期、G3a期和G3b期)且尿中蛋白排泄量小于3.5g/gCr的慢性肾病患者。

在一个实施方式中，本发明所提供的医药组合物被给予进行性的慢性肾病患者。

在一个实施方式中，本发明所提供的医药组合物被给予伴随高血压的慢性肾病患者。

在一个实施方式中，本发明所提供的医药组合物被给予根据CKD诊疗指南实施治疗的患者。例如，被给予根据CKD诊疗指南实施血压管理(ARB、ACE抑制剂等RA系统抑制剂、利尿剂、钙拮抗剂的给予等)、蛋白尿对策(RA系统抑制剂的给予等)、血糖值管理(α-葡萄糖苷酶抑制剂的给予等)、脂质管理(他汀类药物、贝特类药物的给予等)、贫血管理(促红细胞生成素的给予等)和/或骨·矿物质对策(双膦酸盐的给予等)的患者。

在一个实施方式中，本发明所提供的医药组合物与降压药(例如，ARB、ACE抑制剂、利尿剂、钙拮抗剂)并用。

在一个实施方式中，本发明所提供的医药组合物与将来源于石油系烃的球形微粒多孔碳在高温下进行氧化和还原处理而得的球形吸附碳(以KREMEZIN(注册商标)在日本销售)并用。

作为本发明实施的其它形态的例子，可举出以下例子。

1－1)一种患有慢性肾病的哺乳类对象(例如，人)的肾保护方法，包括向需要肾保护的对象给予有效量的柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的步骤；

1－2)一种哺乳类对象(例如，人)的伴随慢性肾病的酸中毒的抑制或者酸性尿的改善方法，包括向需要抑制伴随慢性肾病的酸中毒的对象给予有效量的柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的步骤，在该对象的肾内可抑制RAS激活；

1－3)一种患有慢性肾病的哺乳类对象(例如，人)的肾脏的氧化应激的抑制方法，包括向需要抑制氧化应激的对象给予有效量的柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的步骤；

1－4)一种判定哺乳类对象(例如，人)中的肾小球滤过功能的方法，包括向需要判定该肾小球滤过功能的对象给予含有有效量的柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的医药组合物的步骤，测定该给予前和该给予后的尿的pH的步骤，以及算出该给予后的尿的pH与该给予前的尿的pH的差的步骤(例如，该差为﹣1以下时，判定eGFR小于50，该差为1以上时，判定eGFR为50以上)；

2－1)一种含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的医药组合物，用于保护患有慢性肾病的哺乳类对象(例如，人)中的肾；

2－2)一种含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的医药组合物，用于抑制肾内RAS激活从而抑制伴随慢性肾病的酸中毒或者改善酸性尿；

2－3)一种含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的医药组合物，用于抑制患有慢性肾病的哺乳类对象(例如，人)的肾脏的氧化应激；

2－4)一种含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的医药组合物，用于判定肾小球滤过功能；

3－1)柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物在制造保护患有慢性肾病的哺乳类对象(例如，人)的肾的医药组合物中的应用；

3－2)柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物在制造抑制肾内RAS激活从而抑制伴随慢性肾病的酸中毒或者改善酸性尿的医药组合物中的应用；

3－3)柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物在制造抑制患有慢性肾病的哺乳类对象(例如，人)的肾脏的氧化应激的医药组合物中的应用；以及

3－4)柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物在制造判定肾小球滤过功能的医药组合物中的应用。

2.食品组合物

在一个实施方式中，本发明所提供的食品组合物含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物，起到保护肾脏或者维持健康的效果。

在一个实施方式中，本发明所提供的食品组合物起到抑制肾中的氧化应激的效果。

有效成分可以使用上述“1.医药组合物”中记载的有效成分。例如，本发明所提供的食品组合物可以为含有柠檬酸碱金属盐或其水合物或者它们的混合物、优选含有柠檬酸钾的一水合物(C₆H₅K₃O₇·H₂O)和柠檬酸钠的二水合物(C₆H₅Na₃O₇·2H₂O)的混合物的食品组合物。

本发明所提供的食品组合物中的柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的含量可以根据食品的种类适当地决定。食品组合物的例子中，可举出特定保健用食品、功能性食品、医院患者用食品、营养辅助食品。作为这些食品组合物的形态，只要为含有起到上述效果的有效量的柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物且能够口服摄取的形态就没有特别限定，可以为通常的饮食品的形态，也可以作为上述医药组合物可采用的制剂中适合口服给予的制剂例如片剂、胶囊剂、悬浮剂等制剂提供。对于这些制剂的构成和制造方法，可以直接使用本说明书中上述“1.医药组合物”中记载的医药制剂的构成和制造方法，除此以外也可以使用在医药品的制剂技术的领域中其自身公知的制剂技术。

例如，特定保健用食品、功能性食品、医院患者用食品或者营养辅助食品的情况下，每1份的食品中，可以含有合计为1～3g的1/3量的作为有效成分的柠檬酸钾一水合物和柠檬酸钠二水合物，或者含有1～6g的1/3量的作为有效成分的碳酸氢钠。特定保健用食品、功能性食品、医院患者用食品或者营养辅助食品以片剂形式提供的情况下，例如，每1片中，在300mg～600mg的片剂中可以含有70～80重量％的柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物。

本发明所提供的食品组合物未被制剂化而作为通常的饮食品的形态提供的情况下，本领域技术人员可以根据该食品的种类适当地制造，例如，可以在食品原料中配合柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物而制造。

作为上述饮食品的形态，可举出饮料、酱油、牛奶、酸奶、味增等液态或乳状或者糊状食品；果冻、软糖等半固体形状食品；糖、口香糖、豆腐、营养辅助食品等固体形状食品；或者粉末状食品等。

作为饮料，可举出果汁·果实饮料、咖啡饮料、乌龙茶饮料、绿茶饮料、红茶饮料、大麦茶饮料、蔬菜饮料、作为软饮料的碳酸饮料、含果实提取物的饮料、含蔬菜提取物的果蔬汁、近水饮料(near water)、运动饮料、减肥饮料等。

饮料中可以单独或者组合配合抗氧化剂、香料、各种酯类、有机酸类、有机酸盐类、无机酸类、无机酸盐类、无机盐类、色素类、乳化剂、防腐剂、调味料、甜味料、酸味料、果汁提取物类、蔬菜提取物类、花蜜提取物类、pH调节剂、品质稳定剂等添加剂。

上述“1.医药组合物”中记载的“给予”这种术语也可以用于本发明所涉及的“食品组合物”，此外，针对本发明所涉及的“食品组合物”，可以将术语“给予”替换成“摄取”。因此，例如，术语“给予”、“被给予”等，可以根据前后文的逻辑性进行词语变化而替换成“使摄取”、“摄取”、“被摄取”等。

因此，作为本发明所涉及的食品组合物的实施方式，可举出以下实施方式。

＜1＞一种维持肾脏健康的食品组合物，含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物；

＜11＞一种维持肾脏的健康的方法，使需要维持肾脏的健康的对象摄取含有有效量的柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的食品组合物；

＜111＞柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物在制造维持肾脏健康的食品组合物中的应用。

本发明所涉及的食品组合物优选在其包装、容器或者说明书上展示维持肾脏的健康等效果。

作为本发明的实施方式的其它例子，可举出以下实施方式:

(1)

一种慢性肾病中的肾保护用医药组合物，含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物；

(2)

根据(1)所述的医药组合物，保护肾组织；

(3)

根据(1)或(2)所述的医药组合物，维持或改善肾功能；

(4)

根据(1)～(3)中任一项所述的医药组合物，保护肾小管组织；

(5)

根据(1)～(4)中任一项所述的医药组合物，维持或改善肾小管功能；

(6)

根据(1)～(5)中任一项所述的医药组合物，维持或改善尿浓缩功能；

(7)

根据(1)～(6)中任一项所述的医药组合物，抑制肾脏中的氧化应激；

(8)

一种伴随高血压的慢性肾病中的酸中毒的治疗或预防用、或者酸性尿的改善用医药组合物，含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或其水合物或者它们的混合物；

(9)

根据(1)～(8)中任一项所述的医药组合物，其中，柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物是柠檬酸钠或其水合物与柠檬酸钾或其水合物的混合物；

(10)

根据(1)～(9)中任一项所述的医药组合物，其中，进一步含有柠檬酸酐；

(11)

根据(1)～(10)中任一项所述的医药组合物，其中，按1～3g/日给予柠檬酸、柠檬酸的医药上可接受的盐、或其水合物或者它们的混合物；

(12)

根据(1)～(11)中任一项所述的医药组合物，其中，按1～1.5g/日给予柠檬酸、柠檬酸的医药上可接受的盐、或其水合物或者它们的混合物；

(13)

根据(1)～(12)中任一项所述的医药组合物，被给予G2期以上G3b期以下的慢性肾病患者；

(14)

根据(1)～(13)中任一项所述的医药组合物，其中，给予6周以上的柠檬酸、柠檬酸的医药上可接受的盐、或其水合物或者它们的混合物；

(15)

一种肾功能诊断用医药组合物，含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物；

(16)

根据(15)所述的医药组合物，其中，肾功能为肾小球滤过功能；

(17)

根据(15)或(16)所述的医药组合物，被给予慢性肾病患者，是慢性肾病患者的肾功能诊断用医药组合物；

(18)

根据(15)～(17)中任一项所述的医药组合物，其中，柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物是柠檬酸钠或其水合物与柠檬酸钾或其水合物的混合物；

(19)

根据(15)～(18)中任一项所述的医药组合物，其中，进一步含有柠檬酸酐；

(20)

根据(15)～(19)中任一项所述的医药组合物，其中，按1～3g/日给予柠檬酸、柠檬酸的医药上可接受的盐、或其水合物或者它们的混合物；

(21)

根据(15)～(20)中任一项所述的医药组合物，其中，按1～1.5g/日给予柠檬酸、柠檬酸的医药上可接受的盐、或其水合物或者它们的混合物；

(22)

根据(15)～(21)中任一项所述的医药组合物，被给予G2期以上G3b期以下的慢性肾病患者；

(23)

一种肾功能诊断用医药试剂盒，包含(15)～(22)中任一项所述的医药组合物和用于测定人尿的pH的试纸；

(24)

一种肾功能的判定方法，包括向受检者给予(15)～(22)中任一项所述的医药组合物的步骤，以及测定给予后的受检者的尿的pH的步骤；

(25)

根据(24)所述的方法，其中，给予后的受检者的尿为给予后的最初的受检者的尿；

(26)

根据(24)或(25)所述的方法，其中，给予后的受检者的尿为给予2～5小时后的受检者的尿；

(27)

根据(24)～(26)中任一项所述的方法，其中，受检者为连续给予了含有碱化剂的医药组合物的慢性肾病患者；

(28)

根据(24)～(27)中任一项所述的方法，其中，受检者为连续给予了含有碱化剂的医药组合物的慢性肾病患者，与在连续给予碱化剂前给予(15)～(22)中任一项所述的医药组合物其后采集的受检者的尿的pH值进行比较，在连续给予碱化剂后给予(15)～(22)中任一项所述的医药组合物其后采集的受检者的尿的pH值高的情况下，判定为受检者的肾功能得到改善；

(29)

一种肾功能的判定方法，包括向受检者给予(15)～(22)中任一项所述的医药组合物的步骤，以及测定给予前的受检者的晨尿的pH和给予后的受检者的尿的pH的步骤；

(30)

根据(29)所述的方法，其中，给予前的受检者的晨尿为给予前的最后的受检者的晨尿；

(31)

根据(29)或(30)所述的方法，其中，给予前的受检者的尿为给予3小时前的受检者的晨尿；

(32)

根据(29)～(31)中任一项所述的方法，其中，给予后的受检者的尿为给予后的最初的受检者的尿；

(33)

根据(29)～(32)中任一项所述的方法，其中，给予后的受检者的尿为给予2～5小时后的受检者的尿；

(34)

根据(29)～(33)中任一项所述的方法，其中，受检者为连续给予了含有碱化剂的医药组合物的慢性肾病患者；

(35)

根据(29)～(34)中任一项所述的方法，其中，受检者为连续给予了含有碱化剂的医药组合物的慢性肾病患者，将连续给予后与连续给予前进行比较，当给予(15)～(22)中任一项所述的医药组合物后的受检者的尿的pH减去给予(15)～(22)中任一项所述的医药组合物前的受检者的晨尿的pH而得的差大的情况下，判定为受检者的肾功能得到改善；

(36)

根据(29)～(35)中任一项所述的方法，其中，当给予(15)～(22)中任一项所述的医药组合物后的受检者的尿的pH减去给予(15)～(22)中任一项所述的医药组合物前的受检者的晨尿的pH而得的差为﹣1以下时，判定eGFR小于50；以及

(37)

根据(29)～(36)中任一项所述的方法，其中，当给予(15)～(22)中任一项所述的医药组合物后的受检者的尿的pH减去给予(15)～(22)中任一项所述的医药组合物前的受检者的晨尿的pH而得的差为1以上时，判定eGFR为50以上。

以下，通过实施例对本发明进一步进行说明，但本发明不限于这些实施例。

实施例

为了研究作为口服碱化剂的柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂和碳酸氢钠制剂的口服给予带来的效果，实施了人体临床试验。

1.方法

将47名G2期以上G3b期以下的慢性肾病患者(eGFR:30～89ml/min/1.73m²)随机分成柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂给予组(A组:16名)、碳酸氢钠制剂给予组(B组:16名)和对照组(C组:15名)。将患者以年龄、性别、糖尿病的有无、eGFR无不均衡的方式分配到各组。基于“CKD诊疗指南－治疗的总结”对各组进行治疗(以下称为标准治疗)。

没有向对照组给予碱化剂。A组中，将含有柠檬酸钾(C₆H₅K₃O₇·H₂O)231.5mg和柠檬酸钠水合物(C₆H₅Na₃O₇·2H₂O)195.0mg的片剂以1日3片、1日3次(早晨、中午、傍晚)的方式口服给予24周。应予说明，经时进行晨尿的pH管理，对于晨尿小于pH6.5的症例，经医师的判断可以适当地增量至1日6片、1日3次(早晨、中午、傍晚)。B组中，将含有碳酸氢钠500mg的片剂以1日3片、1日3次(早晨、中午、傍晚)的方式口服给予24周。应予说明，经时进行晨尿的pH管理，对于晨尿小于pH6.5的症例，经医师的判断可以适当地增量至1日6片、1日3次(早晨、中午、傍晚)。

采集给予开始前、给予开始后6周、12周、24周的晨尿、随机尿以及血液，将各检测样品保持在﹣80℃。

用ELISA法测定尿中的8-OHdG浓度、血管紧张素原浓度。

用Nitroso-PSAP法测定血清的铁浓度，用CLEIA(化学发光酶免疫测定法)法测定铁蛋白浓度。

用使用了LZ test‘荣研’β2－M和LZ－β2－M标准U‘荣研’(荣研化学，东京，日本)的乳胶凝集免疫法测定尿中的β2－微球蛋白量。

使用冰点降低法测定尿的渗透压。

使用免疫比浊法、比色法测定尿中的白蛋白浓度、蛋白质浓度。

利用酶法测定尿中的肌酐浓度。

对于统计解析，组间比较使用Mann-Whitney检验，经时变化的比较使用Wilcoxon检验。另外，关于相关性，使用Pearson检验。

2.结果

根据测定结果，对A组(柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂给予组)、B组(碳酸氢钠制剂给予组)和C组(对照组)的各患者算出以下的值：

(i)给予开始前的晨尿中的8-OHdG和血管紧张素原的各浓度除以尿中肌酐浓度而得的值

(ii)给予开始后6周、12周、24周的晨尿中的8-OHdG和血管紧张素原的各浓度除以尿中肌酐浓度而得的值

(iii)给予开始后6周、12周、24周的晨尿中的8-OHdG的各浓度除以尿中肌酐浓度而得的值与给予开始前的晨尿中的8-OHdG的各浓度除以尿中肌酐浓度而得的值之比(给予开始后6周、12周、24周的晨尿中的8-OHdG的各浓度除以尿中肌酐浓度而得的值/给予开始前的晨尿中的8-OHdG的各浓度除以尿中肌酐浓度而得的值)

(iv)给予开始前的晨尿中的β₂-微球蛋白和白蛋白的各浓度除以尿中肌酐浓度而得的值

(v)给予开始后6周、12周、24周的晨尿中的β₂-微球蛋白和白蛋白的各浓度除以尿中肌酐浓度而得的值

(vi)由给予开始后6周、12周、24周的晨尿中的β₂-微球蛋白和白蛋白的各浓度除以尿中肌酐浓度而得的值减去给予开始前的晨尿中的β₂-微球蛋白和白蛋白的各浓度除以尿中肌酐浓度而得的值所得到的差(给予开始后6周、12周、24周的晨尿中的β₂-微球蛋白和白蛋白的各浓度除以尿中肌酐浓度而得的值－给予开始前的晨尿中的β₂-微球蛋白和白蛋白的各浓度除以尿中肌酐浓度而得的值)

(vii)给予开始前的随机尿中的白蛋白和蛋白质的各浓度除以尿中肌酐浓度而得的值

(viii)给予开始后6周、12周、24周的晨尿中的白蛋白和蛋白质的各浓度除以尿中肌酐浓度而得的值

(ix)由给予开始后6周、12周、24周的晨尿中的白蛋白和蛋白质的各浓度除以尿中肌酐浓度而得的值减去给予开始前的晨尿中的白蛋白和蛋白质的各浓度除以尿中肌酐浓度而得的值所得到的差(给予开始后6周、12周、24周的晨尿中的白蛋白和蛋白质的各浓度除以尿中肌酐浓度而得的值－给予开始前的晨尿中的白蛋白和蛋白质的各浓度除以尿中肌酐浓度而得的值)

(x)给予开始前的晨尿的渗透压值

(xi)给予开始后6周、12周、24周的晨尿的各渗透压值

然后，对上述(i)～(xii)算出各组的平均值和SD。

将结果示于以下的表中。应予说明，在表中和图中，将A组:柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂给予组记载为“柠檬酸盐”，将B组:碳酸氢钠制剂给予组记载为“碳酸氢盐”。

表1中示出给予开始后6周、12周、24周的晨尿中的8-OHdG的浓度除以尿中肌酐浓度而得的值与给予开始前的晨尿中的8-OHdG的浓度除以尿中肌酐浓度而得的值之比(％)。

[表1]

尿中8-OHdG(μg/ gCr，％相对值vs 0周)

Mean+/-SD

^ap＝0.0126vs对照且^bp＝0.0005，^cp＜0.0001，^d p＝0.0917，^ep＝0.0003，^fp＝0.0177，

^gp＝0.0062，^hp＝0.0263，ⁱp＝0.0003vs碳酸氢盐(Mann-Whitney)

^jp＜0.0001，^kp＝0.0031，¹p＝0.0070，^mp＝0.0023(Kruskal-Wallis)且ⁿp＝0.0024，

^op＜0.0001，^pp＝0.0021，^qp＝0.0054， ^rp＝0.0636，^sp＝0.0018vs碳酸氢盐(Dunn)

A组(柠檬酸盐：柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂给予组)与B组(碳酸氢盐：碳酸氢钠制剂给予组)和C组(对照：对照组)进行比较，给予6、12和24周后的晨尿中的8-OHdG的浓度为低值(参照表1)。A组与B组、C组进行比较，给予6～24周的晨尿中8-OHdG的浓度显著下降(参照表1)。尿中的8-OHdG浓度反映了作为组织损伤的指标的8-OHdG在肾中的蓄积。根据上述结果，说明了柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂的给予对抑制慢性肾病患者的肾脏中的氧化应激有用，通过柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂的给予，可发挥肾组织保护效果。

表2中示出给予开始前、给予后6、12、24周和6～24周的晨尿中的血管紧张素原量除以尿中肌酐浓度而得的值(μg/gCr)。

[表2]

尿中血管紧张素原(g/gCr)

mean+/SD

^ap＝0.0792，^bp＝0.0166， ^cp＝0.0984且 ^dp＝0.0780vs碳酸氢盐(Mann·Whitney)

无显著性差异vs0周(Wilcoxon)

^ep＝0.0495(Kruskal-Wallis)且 ^fp＝0.0596vs碳酸氢盐(Dunn)

(在0周的组间无显著性差异)

B组(碳酸氢盐：碳酸氢钠制剂给予组)与A组(柠檬酸盐：柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂给予组)进行比较，给予6～24周的晨尿中血管紧张素原的浓度为有意地高值(参照表2)。这说明了碳酸氢钠的给予在使肾内肾素·血管紧张素系统亢进的方向发挥作用，另一方面，柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂的给予没有这样的作用。

表3中示出由给予开始后6周、12周、24周的晨尿中的β₂-微球蛋白的浓度除以尿中肌酐浓度而得的值减去给予开始前的晨尿中的β₂-微球蛋白的浓度除以尿中肌酐浓度而得的值所得到的差(μg/gCr)。

[表3]

尿中β₂-微球蛋白(μg/gCr，Δ实测值vs 0周)

Mean+/·SD()：中间值

^ap＝0.0818且^bp＝0.0615vs对照(Mann-Whitney)

组间无显著性差异(Kruskal-Wallis&Dunn)

A组(柠檬酸盐：柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂给予组)与C组(对照：对照组)进行比较，发现有给予6～24周的晨尿中的β2微球蛋白的浓度为低值的趋势(参照表3)。而在B组(碳酸氢盐：碳酸氢钠制剂给予组)中没有发现这样的趋势(参照表3)。这表明了柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂的给予与对照组比较，发挥肾小管组织保护效果。

表4中示出由给予开始后6周、12周、24周的晨尿中白蛋白的浓度除以尿中肌酐浓度而得的值减去给予开始前的晨尿中的白蛋白的浓度除以尿中肌酐浓度而得的值所得到的差(mg/gCr)。

[表4]

晨尿中白蛋白(mg/gcr，Δ实测值vs 0周)

Mean+/-sD()：中间值

^ap＝0.0508vs对照且^bp＝0.0108，^cp＝0.0256， ^dp＝0.0951vs碳酸氢盐

(Mann-Whitney)

^ep＝0.0353(Kruskal-Wallis)且^fp＝0.0292vs碳酸氢盐(Dunn)

^gp＝0.0272vs对照(Student-t)

A组(柠檬酸盐：柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂给予组)与给予开始前进行比较，发现给予后的晨尿中的白蛋白浓度有变成低值的趋势。而在B组(碳酸氢盐：碳酸氢钠制剂给予组)和C组(对照：对照组)中没有发现这样的趋势(参照表4)。

另外，A组(柠檬酸盐：柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂给予组)与B组(碳酸氢盐：碳酸氢钠制剂给予组)和C组(对照：对照组)进行比较，给予6～24周的晨尿中的白蛋白的浓度为有意地低值(参照表4)。这说明了通过柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂的给予可保护肾功能。

表5中示出由给予开始后6周、12周、24周的随机尿中白蛋白的浓度除以尿中肌酐浓度而得的值减去给予开始前的随机尿中的白蛋白的浓度除以尿中肌酐浓度而得的值所得到的差(mg/gCr)。

[表5]

随机尿中白蛋白(mg/gCr，Δ实测值vs 0周)

Mean+/-SD()：中间值

^ap＝0.0751vs对照且^bp＝0.0258，^cp＝0.0005，^dp＝0.0097， ^ep＝0.0741

vs碳酸氢盐(Mann·Whitney)

^fp＝0.0018，^gp＝0.0226(Kruskal-Wallis)且^hp＝0.0010，ⁱp＝0.0185vs碳酸氢盐(Dunn)

^jp＝0.0101且^kp＝0.0635vs对照(Student-t)

¹p＝0.0025(1way ANOVA)且^mp＝0.0467vs对照(Tukey)

A组(柠檬酸盐：柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂给予组)与给予开始前进行比较，发现给予后的随机尿中的白蛋白浓度有变成低值的趋势。而在B组(碳酸氢盐：碳酸氢钠制剂给予组)和C组(对照：对照组)中没有发现这样的趋势(参照表5)。

另外，A组(柠檬酸盐：柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂给予组)与B组(碳酸氢盐：碳酸氢钠制剂给予组)和C组(对照：对照组)进行比较，给予6～24周的晨尿中的白蛋白的浓度为低值(参照表5)。这说明了通过柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂的给予可保护肾功能。

通过柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂的给予，无论在晨尿中(参照表4)，还是在随机尿中(参照表5)，与C组(对照：对照组)进行比较，都发现尿中白蛋白浓度下降，因此说明了柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂全天发挥肾功能保护效果。

表6中示出由给予开始后6周、12周、24周的随机尿中的蛋白质的浓度除以尿中肌酐浓度而得的值减去给予开始前的随机尿中的蛋白质的浓度除以尿中肌酐浓度而得的值所得到的差(mg/gCr)。

[表6]

随机尿中蛋白质(mg/gCr，Δ实测值vs0周)

Mean+/·SD()：中间值

^ap＝0.0329，^bp＝0.0258，^cp＝0.0005且^dp＝0.0097vs碳酸氢盐(Mann-Whitney)

^cp＝0.0018，^fp＝0.0226(Kruskal-Wallis)且^gp＝0.0010，^hp＝0.0185vs碳酸氢盐(Dunn)

ⁱp＝0.0124且^jp＝0.0565vs对照(Student-t)

^kp＝0.0033(1way ANOVA)且¹p＝0.0429vs对照(Tukey)

A组(柠檬酸盐：柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂给予组)与给予开始前进行比较，发现给予后的随机尿中的蛋白质浓度有变成低值的趋势。而在B组(碳酸氢盐：碳酸氢钠制剂给予组)和C组(对照：对照组)中没有发现这样的趋势(参照表6)。

另外，A组(柠檬酸盐：柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂给予组)与B组(碳酸氢盐：碳酸氢钠制剂给予组)和C组(对照：对照组)进行比较，给予6～24周的晨尿中的蛋白质的浓度为低值，说明了可保护肾功能。

表7中示出给予开始后6周、12周、24周的晨尿的渗透压值(mOsm/kg H₂O)。

[表7]

尿渗透压(mOsm/kg H₂O)

Mean+/-SD()：中间值

组间没有显著性差异(Mann-Whitney)

没有显著性差异vs 0周(Wilcoxon)

组间没有显著性差异(Kruskal-Wallis&Dunn)

(0周的组间没有显著性差异)

A组(柠檬酸盐：柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂给予组)与给予开始前进行比较，发现给予后的晨尿的渗透压有被维持或变高的趋势。在B组(碳酸氢盐:碳酸氢钠制剂给予组)中，与给予开始前进行比较，发现给予后的晨尿的渗透压有被维持的趋势，但在C组(对照:对照组)中，与给予开始前进行比较，给予后的晨尿的渗透压有下降的趋势(参照表7)。

表明了通过柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂的给予，可维持或改善作为肾小管功能的尿浓缩功能。

另外，对于A组(柠檬酸盐:柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂给予组)、B组(碳酸氢盐:碳酸氢钠制剂给予组)和C组(对照:对照组)各组测定早晨的药剂服用2～5小时后采集的尿(随机尿:图1～3中的随机尿)的pH，并将eGFR的关系绘图(图1～3)。另外，测定早晨的药剂服用2～5小时后采集的尿(随机尿)的pH和晨尿的pH，并将其差(随机尿的pH－晨尿的pH:图4～6中的随机尿-晨尿)与eGFR的关系绘图(图4～6)。其结果，仅在A组(柠檬酸盐:柠檬酸钾·柠檬酸钠水合物配合制剂给予组)中，发现“随机尿的pH”的值与eGFR的关系存在有意的相关关系(图2)，并发现“随机尿的pH－晨尿的pH”的值与eGFR的关系存在有意的相关关系(图5)。

产业上的可利用性

利用本发明所提供的医药组合物，可保护肾，可维持或改善肾小管功能。另外，利用本发明所提供的医药组合物，可评价肾脏的功能。

Claims

1.一种医药组合物，其为片剂，是含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物的慢性肾病中的肾保护用医药组合物。

2.根据权利要求1所述的医药组合物，保护肾组织。

3.根据权利要求1或2所述的医药组合物，维持或改善肾功能。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的医药组合物，保护肾小管组织。

5.根据权利要求1～4中任一项所述的医药组合物，维持或改善肾小管功能。

6.根据权利要求1～5中任一项所述的医药组合物，维持或改善尿浓缩功能。

7.根据权利要求1～6中任一项所述的医药组合物，抑制肾脏中的氧化应激。

8.一种伴随高血压的慢性肾病中的酸中毒的治疗或预防用、或者酸性尿的改善用医药组合物，含有柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或其水合物或者它们的混合物。

9.根据权利要求1～8中任一项所述的医药组合物，其中，柠檬酸、柠檬酸的药学上可接受的盐、或它们的水合物或者它们的混合物是柠檬酸钠或其水合物与柠檬酸钾或其水合物的混合物。

10.根据权利要求1～9中任一项所述的医药组合物，其中，进一步含有柠檬酸酐。

11.根据权利要求1～10中任一项所述的医药组合物，其中，按1～3g/日给予柠檬酸、柠檬酸的医药上可接受的盐、或其水合物或者它们的混合物。

12.根据权利要求1～11中任一项所述的医药组合物，其中，按1～1.5g/日给予柠檬酸、柠檬酸的医药上可接受的盐、或其水合物或者它们的混合物。

13.根据权利要求1～12中任一项所述的医药组合物，是给予G2期以上G3b期以下的慢性肾病患者的医药组合物。

14.根据权利要求1～13中任一项所述的医药组合物，其中，给予6周以上的柠檬酸、柠檬酸的医药上可接受的盐、或其水合物或者它们的混合物。