CN112852923A - 一种基于dna生物传感器的二级放大方法 - Google Patents

一种基于dna生物传感器的二级放大方法 Download PDF

Info

Publication number
CN112852923A
CN112852923A CN202110146584.3A CN202110146584A CN112852923A CN 112852923 A CN112852923 A CN 112852923A CN 202110146584 A CN202110146584 A CN 202110146584A CN 112852923 A CN112852923 A CN 112852923A
Authority
CN
China
Prior art keywords
dna
biosensor
solution
amplification
gold nanoparticles
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202110146584.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN112852923B (zh
Inventor
李杜娟
陈慧旖
洪锐
刘超然
杨勋
杨伟煌
樊凯
董林玺
王高峰
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hangzhou Dianzi University
Original Assignee
Hangzhou Dianzi University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hangzhou Dianzi University filed Critical Hangzhou Dianzi University
Priority to CN202110146584.3A priority Critical patent/CN112852923B/zh
Publication of CN112852923A publication Critical patent/CN112852923A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN112852923B publication Critical patent/CN112852923B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6813—Hybridisation assays
    • C12Q1/6816—Hybridisation assays characterised by the detection means
    • C12Q1/682—Signal amplification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6813—Hybridisation assays
    • C12Q1/6834—Enzymatic or biochemical coupling of nucleic acids to a solid phase
    • C12Q1/6837—Enzymatic or biochemical coupling of nucleic acids to a solid phase using probe arrays or probe chips
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明属于信号放大技术领域，具体涉及一种基于DNA生物传感器的二级放大方法，包括以下步骤：S1、将传感器表面依次用无水乙醇、去离子水冲洗并干燥，并进行氧等离子体处理，以实现对芯片表面硅烷化处理，形成末端氨基；S2、将探针DNA修饰到硅纳米线芯片上，以制得DNA生物传感器；S3、将ctDNA溶液滴加至DNA生物传感器表面进行杂交；S4、制得表面修饰有信号DNA的金纳米颗粒；S5、将金纳米颗粒加入到硅纳米线芯片上，以实现一级放大；S6、加入RCA引物和模板DNA，添加RCA缓冲液，以使金纳米颗粒上的引物DNA滚环扩增，以实现二级放大；本发明的DNA生物传感器能够用于信号二次放大，进一步提高传感器的检测限和灵敏度。

Description

一种基于DNA生物传感器的二级放大方法
技术领域
本发明属于信号放大技术领域，具体涉及一种基于DNA生物传感器的二级放大方法。
背景技术
硅纳米线场效应管生物传感器利用生物分子对场效应管导电沟道电导的改变，从而使得场效应管源漏极电流发生变化，进而实现对生物分子的检测。
在针对一些疾病进行早期检测时，一方面由于实际样本(如血液)中特异性标志物的含量十分微量，对传感器的检测能力提出很大的挑战，另一方面由于环境干扰等因素的影响，硅纳米线场效应管生物传感器在进行较低浓度的目标物检测时，信号不是特别稳定。
因此，基于现有技术存在的缺陷，本发明开发了一种生物DNA传感器进行二级信号放大，基于金纳米颗粒和RCA滚环扩增技术，实现对传感器信号进行二级放大，进一步提高传感器的检测限和灵敏度。
发明内容
基于现有技术中存在的上述缺点和不足，本发明的目的之一是至少解决现有技术中存在的上述问题之一或多个，换言之，本发明的目的之一是提供满足前述需求之一或多个的一种基于DNA生物传感器的二级放大方法。
为了达到上述发明目的，本发明采用以下技术方案：
一种基于DNA生物传感器的二级放大方法，包括以下步骤：
S1、将传感器表面依次用无水乙醇、去离子水冲洗并干燥，并进行氧等离子体处理，以实现对芯片表面硅烷化处理，形成末端氨基；
S2、将探针DNA修饰到硅纳米线芯片上，以制得DNA生物传感器；
S3、将ctDNA溶液滴加至DNA生物传感器表面进行杂交；
S4、将EDC和NHS溶液添加到AuNPs溶液，以对金纳米颗粒表面活化，然后加入信号DNA(SpDNA)和NaCl溶液，通过孵育处理，以制得表面修饰有信号DNA的金纳米颗粒；
S5、将表面修饰有信号DNA的金纳米颗粒加入到硅纳米线芯片上，以实现一级放大；
S6、加入RCA引物和模板DNA，通过添加RCA缓冲液，以使金纳米颗粒上的引物DNA滚环扩增，以实现二级放大。
作为优选方案，所述硅纳米线为SOI硅片，包括硅基底、氧化硅层和顶层硅；硅纳米线尺寸大小为50～120nm。
作为优选方案，所述S1中还包括通过戊二醛溶液浸泡，并依次进行冲洗和干燥。
作为优选方案，所述步骤S2中探针DNA序列为(5’-3’)：AGT GAT TTT AGA GAG AGGAT TTTTTT-NH2’。
作为优选方案，所述步骤S3中ctDNA链为(5’-3’)：AT CCT CTC TCT AAA ATC ACTAAG CAG GAG AAA GAT TTT CTA；杂交温度为室温，杂交时间不小于1小时。
作为优选方案，所述孵育处理中通过离心去除上清液，离心转速不小于10000rpm，时间不少于30min。
作为优选方案，所述信号DNA(SpDNA)序列(5’-3’)为NH2-TTTTTTT ATA CCA CATCAT CCA TTT TTT TAG AAA ATC TTT CTC。
作为优选方案，所述RCA引物序列(5’-3’)为TGG ATG ATG TGG TATTTTTTTTTTTTTTTTC GTG TCC TCG TTG TCT。
作为优选方案，所述模板DNA的序列(5’-3’)为GCTTTCGATCGTTCTGAGCAGACAACGAGGACACGCTTACTGAATAGCTA。
作为优选方案，所述RCA缓冲液包括1U的Phi29聚合酶、0.1×的Phi29聚合酶缓冲液、去离子水以及dNTP。
本发明与现有技术相比，有益效果是：
1、本发明使用的RCA滚环扩增技术不需要昂贵、笨重的温度循环设备，减弱了生物传感器的复杂性。
2、本发明使用的RCA滚环扩增技术可以在金纳米颗粒一次放大的基础上进行二次放大，进一步提高传感器的检测限和灵敏度。
3、本发明使用的RCA滚环扩增技术操作简单，且不需要针对传感器另外进行调整，可在一次信号放大不足时，再使用，实际使用中更加灵活。
4、本发明使用的RCA滚环扩增技术可针对特定的DNA片段进行扩增有着很好的特异性。
附图说明
图1是本发明实施例一的DNA生物传感器的检测原理示意图；
图2是本发明实施例一的DNA的RCA滚环扩增原理示意图；
图3是本发明实施例一的二级信号放大电流响应图。
具体实施方式
为了更清楚地说明本发明实施例，下面将对照附图说明本发明的具体实施方式。显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图，并获得其他的实施方式。
实施例一：
本实施例提供一种基于DNA生物传感器的二级放大方法，包括以下步骤：
S1、将传感器表面依次用无水乙醇、去离子水冲洗并干燥，并进行氧等离子体处理，以实现对芯片表面硅烷化处理，形成末端氨基；具体为：
首先用乙醇冲洗30s，去离子水冲洗1分钟后，氮气吹干，将纳米线表面清洗干净；接着采用氧等离子清洗机中对硅纳米线芯片进行氧等离子体处理(70W，5分钟)，以增加传感器表面的硅羟基，改善表面亲水性；然后用2％的APTES乙醇溶液浸泡过夜，这使传感器表面硅烷化，形成末端氨基；使用99.5％无水乙醇溶液冲洗多余的APTES，冲洗时间为30s，并用氮气吹干，然后放置真空干燥箱50℃烘干15分钟；之后浸泡在2.5％戊二醛溶液两小时，再用PBS溶液(1×)冲洗30s，去除多余的戊二醛，并用氮气吹干，然后放置真空干燥箱50℃烘干15分钟，此时传感器表面末端修饰上了醛基，以便与DNA捕获探针共价结合。
其中，硅纳米线场效应管是(111)型SOI硅片，其结构分成3层，分别为硅基底，氧化硅层和顶层硅；其上覆盖着15×8叉指结构的纳米线阵列，且纳米线尺寸大小为50～120nm。
S2、将探针DNA修饰到硅纳米线芯片上，以制得DNA生物传感器；具体为：
取160μL的DNA捕获探针混合溶液，滴加在硅纳米线表面，孵育约2小时；之后用PBS溶液(1×)冲洗3次，除去未反应的DNA捕获探针，再滴加160μL缓冲液进行静置，用KEYSIGHT直流电源分析仪N6705C测量源漏极之间的电流，其中将稳定电流作为基准电流I0。
其中，探针DNA序列为(5’-3’)：AGT GAT TTT AGA GAG AGG AT TTTTTT-NH2’。
S3、将ctDNA溶液滴加至DNA生物传感器表面进行杂交；具体为：
移除上一步的PBS溶液，在传感器表面滴加160μL的ctDNA混合溶液，并于室温下杂交1h，同时用KEYSIGHT直流电源分析仪N6705C观察源漏极之间的电流变化。
其中，ctDNA链为(5’-3’)：AT CCT CTC TCT AAA ATC ACT AAG CAG GAG AAA GATTTT CTA。
S4、将EDC和NHS溶液添加到AuNPs溶液，以对金纳米颗粒表面活化，然后加入信号DNA(SpDNA)和NaCl溶液，以制得表面修饰有信号DNA的金纳米颗粒；具体为：
取2nM 2mL的AuNPs溶液，添加1ml 3.2mM的EDC和1ml 0.8mM的NHS，常温活化30分钟，以激活末端修饰的羧基；加入20uM 20uL的信号DNA(SpDNA)，进行室温震荡孵育，孵育时间16小时；之后，缓慢逐滴加入0.5mol/L NaCl溶液，分5次滴加，每次滴加200uL，间隔1小时，并且充分混匀，NaCl的最终浓度在0.1mol/L；继续室温孵育24h，最终形成CO＝NH键，成功修饰信号DNA(SpDNA)，其中，整个孵育过程需要遮光处理，以防止金纳米颗粒发生团聚；以10000rpm离心30min去除多余试剂，去除上清液，并最终分散在3mL 10mmol/L的PBS磷酸盐缓冲液(137mM的NaCl，2.7mM的KCl，10mM的磷酸盐，pH为7.2～7.4)中，并于4℃遮光保存。
其中，信号DNA(SpDNA)序列(5’-3’)为NH2-TTTTTTT ATA CCA CAT CAT CCA TTTTTT TAG AAA ATC TTT CTC。
S5、将表面修饰有信号DNA的金纳米颗粒加入到硅纳米线芯片上，以实现一级放大；具体为：
先将160μL的AuNPs/SpDNA复合物滴加在硅纳米线表面，孵育1小时，吸走硅纳米线表面的溶液，并检测电流变化。
S6、加入RCA引物和模板DNA，通过添加RCA缓冲液，以使金纳米颗粒上的引物DNA滚环扩增，以实现二级放大；具体为：
取160μL杂交缓冲液(1μM的RCA引物，1μM的RCA环状模板和0.1×的PBS溶液以体积比为1:1:98混合)滴在硅纳米线芯片上。
其中，RCA引物序列(5’-3’)为TGG ATG ATG TGG TAT TTTTTTTTTTTTTTTC GTG TCCTCG TTG TCT；模板DNA的序列(5’-3’)GCTTTCGATCGTTCTGAGCAGACAACGAGGACACGCTTACTGAATAGCTA。
滴加160μL的RCA缓冲液(1U的Phi29聚合酶，0.1×的Phi29聚合酶缓冲液，0.1％的去离子水以及0.1mM的dNTP混合形成)，监测电流变化。
本实施例的探针DNA溶液配置的方法为：将探针DNA链干粉于离心机中以5000rpm高速离心1min，再用0.01mol的PBS缓冲溶液，PH＝7.4配置成浓度为2.5μM的探针DNA溶液，于混匀器混匀30～60s。
如图1所示，搭建DNA生物传感器定量检测特定DNA的平台，以硅纳米线为传输通道。在硅纳米线上以硅烷剂APTES作为连接物，将DNA探针以肽键的形式固定在纳米线表面。引入目标ctDNA后，通过碱基互补配对原则进行杂交以定量检测DNA。
如图2所示，进行DNA的RCA滚环扩增，在硅纳米线上滴加制备好的AuNPs/SpDNA复合物，使得硅纳米线上的探针DNA捕获金纳米颗粒。孵育结束后，加入杂交缓冲液杂交10～15分钟，环形DNA模板通过引物和金纳米颗粒上的信号DNA相连接，吸走硅纳米线上的溶液，再加入RCA缓冲液，在Phi29 DNA聚合酶的作用下，dNTP作为合成原料合成DNA，使得金纳米颗粒上引物DNA延长，RCA滚环扩增使得金纳米颗粒表面的引物DNA延长使得硅纳米线表面的负电荷大量聚集，从而造成硅纳米线的栅极负电势增大，硅纳米线中的载流子变化，进而导致电流的增大，实现信号的二级放大。
如图3所示，DNA生物传感器检测ctDNA的结果，加入AuNPs/SpDNA后电流响应信号有了一个明显的上升，实现了一级放大。在加入RCA Template(RCA环状模板)和引物之后，电流响应有一个小幅度的下降，之后加入RCA缓冲液进行扩增，电流响应上升，即实现了对信号的二级放大。
本实施例使用的RCA滚环扩增技术不需要昂贵、笨重的温度循环设备，减弱了生物传感器的复杂性；RCA滚环扩增技术可以在金纳米颗粒一次放大的基础上进行二次放大，进一步提高传感器的检测限和灵敏度；RCA滚环扩增技术操作简单，且不需要针对传感器另外进行调整，可在一次信号放大不足时，再使用，实际使用中更加灵活；RCA滚环扩增技术可针对特定的DNA片段进行扩增有着很好的特异性。
以上所述仅是对本发明的优选实施例及原理进行了详细说明，对本领域的普通技术人员而言，依据本发明提供的思想，在具体实施方式上会有改变之处，而这些改变也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种基于DNA生物传感器的二级放大方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、将传感器表面依次用无水乙醇、去离子水冲洗并干燥，并进行氧等离子体处理，以实现对芯片表面硅烷化处理，形成末端氨基；
S2、将探针DNA修饰到硅纳米线芯片上，以制得DNA生物传感器；
S3、将ctDNA溶液滴加至DNA生物传感器表面进行杂交；
S4、将EDC和NHS溶液添加到AuNPs溶液，以对金纳米颗粒表面活化，然后加入信号DNA(SpDNA)和NaCl溶液，通过孵育处理，以制得表面修饰有信号DNA的金纳米颗粒；
S5、将表面修饰有信号DNA的金纳米颗粒加入到硅纳米线芯片上，以实现一级放大；
S6、加入RCA引物和模板DNA，通过添加RCA缓冲液，以使金纳米颗粒上的引物DNA滚环扩增，以实现二级放大。
2.根据权利要求1所述的一种基于DNA生物传感器的二级放大方法，其特征在于，所述硅纳米线为SOI硅片，包括硅基底、氧化硅层和顶层硅；硅纳米线尺寸大小为50～120nm。
3.根据权利要求1所述的一种基于DNA生物传感器的二级放大方法，其特征在于，所述S1中还包括通过戊二醛溶液浸泡，并依次进行冲洗和干燥。
4.根据权利要求1所述的一种基于DNA生物传感器的二级放大方法，其特征在于，所述步骤S2中探针DNA序列为(5’-3’)：AGT GAT TTT AGA GAG AGG AT TTTTTT-NH2’。
5.根据权利要求1所述的一种基于DNA生物传感器的二级放大方法，其特征在于，所述步骤S3中ctDNA链为(5’-3’)：AT CCT CTC TCT AAA ATC ACT AAG CAG GAG AAA GAT TTTCTA；杂交温度为室温，杂交时间不小于1小时。
6.根据权利要求1所述的一种基于DNA生物传感器的二级放大方法，其特征在于，所述孵育处理中通过离心去除上清液，离心转速不小于10000rpm，时间不少于30min。
7.根据权利要求1所述的一种基于DNA生物传感器的二级放大方法，其特征在于，所述信号DNA(SpDNA)序列(5’-3’)为NH2-TTTTTTT ATA CCA CAT CAT CCA TTT TTT TAG AAAATC TTT CTC。
8.根据权利要求1所述的一种基于DNA生物传感器的二级放大方法，其特征在于，所述RCA引物序列(5’-3’)为TGG ATG ATG TGG TAT TTTTTTTTTTTTTTTC GTG TCC TCG TTG TCT。
9.根据权利要求1所述的一种基于DNA生物传感器的二级放大方法，其特征在于，所述模板DNA的序列(5’-3’)为GCTTTCGATCGTTCTGAGCAGACAACGAGGACACGCTTACTGAATAGCTA。
10.根据权利要求1所述的一种基于DNA生物传感器的二级放大方法，其特征在于，所述RCA缓冲液包括1U的Phi29聚合酶、0.1×的Phi29聚合酶缓冲液、去离子水以及dNTP。
CN202110146584.3A 2021-02-03 2021-02-03 一种基于dna生物传感器的二级放大方法 Active CN112852923B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110146584.3A CN112852923B (zh) 2021-02-03 2021-02-03 一种基于dna生物传感器的二级放大方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110146584.3A CN112852923B (zh) 2021-02-03 2021-02-03 一种基于dna生物传感器的二级放大方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN112852923A true CN112852923A (zh) 2021-05-28
CN112852923B CN112852923B (zh) 2023-06-09

Family

ID=75986760

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110146584.3A Active CN112852923B (zh) 2021-02-03 2021-02-03 一种基于dna生物传感器的二级放大方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN112852923B (zh)

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102072931A (zh) * 2010-12-09 2011-05-25 华东师范大学 一种基于硅纳米线的生物传感器制备方法及在dna检测中的应用
CN102586450A (zh) * 2012-03-06 2012-07-18 中国科学院上海微系统与信息技术研究所 基于滚环扩增比色检测靶核酸或蛋白的方法
CN105842453A (zh) * 2015-01-12 2016-08-10 南京理工大学 一种基于末端延伸、金纳米粒子和酶三级放大电化学传感器检测dna的方法
CN111122679A (zh) * 2019-12-25 2020-05-08 杭州电子科技大学 一种dna生物传感器及其制备方法和应用
CN111781191A (zh) * 2020-07-20 2020-10-16 济南大学 基于sers机理的复合纳米阵列监测4-硝基苯硫酚

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102072931A (zh) * 2010-12-09 2011-05-25 华东师范大学 一种基于硅纳米线的生物传感器制备方法及在dna检测中的应用
CN102586450A (zh) * 2012-03-06 2012-07-18 中国科学院上海微系统与信息技术研究所 基于滚环扩增比色检测靶核酸或蛋白的方法
CN105842453A (zh) * 2015-01-12 2016-08-10 南京理工大学 一种基于末端延伸、金纳米粒子和酶三级放大电化学传感器检测dna的方法
CN111122679A (zh) * 2019-12-25 2020-05-08 杭州电子科技大学 一种dna生物传感器及其制备方法和应用
CN111781191A (zh) * 2020-07-20 2020-10-16 济南大学 基于sers机理的复合纳米阵列监测4-硝基苯硫酚

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DUJUAN LI等: "A supersensitive silicon nanowire array biosensor for quantitating tumor marker ctDNA", 《BIOSENSORS AND BIOELECTRONICS》 *
JUNMING WANG等: "Multi-DNAzymes-functionalized gold nanoparticles for ultrasensitive chemiluminescence detection of thrombin on microchip", 《ANALYTICA CHIMICA ACTA》 *
LIDE GU等: "Research Progress on Rolling Circle Amplification (RCA)-Based Biomedical Sensing", 《PHARMACEUTICALS》 *
Y. HE等: "《Silicon Nano-biotechnology》", 31 December 2014, SPRINGER *
樊凯等: "基于纳米材料的乳腺癌检测电化学生物传感器研究进展", 《中国医疗器械杂志》 *
陈慧旖: "基于SiNW阵列的生物医学检测用基因传感器研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库》 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN112852923B (zh) 2023-06-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2016062101A1 (zh) 检测ndm-1的修饰电极及其制备方法和应用
CN109932407B (zh) 一种基于原位信号放大的夹心型前列腺特异性抗原光电化学检测方法
CN110736777B (zh) 基于滚环扩增dna酶和共价有机骨架的电化学-elisa免疫传感器
CN110806439B (zh) 一种同时检测玉米赤霉烯酮和伏马毒素b1的方法
CN112505116B (zh) 一种用于特异性检测卡那霉素的电化学发光适配体传感器以及制备方法和应用
CN104049007B (zh) 一种基于酶切作用的胰蛋白酶和糜蛋白酶电化学同时检测方法
Thiruppathiraja et al. Development of electrochemical based sandwich enzyme linked immunosensor for Cryptosporidium parvum detection in drinking water
CN111122679A (zh) 一种dna生物传感器及其制备方法和应用
CN113406168B (zh) 分子印迹检测氯霉素的电化学传感器及其制备方法和应用
CN113686934B (zh) 一种CRISPR/Cas12a-RCA电化学传感器检测体系及其应用
CN106645354A (zh) 一种重金属离子电化学传感器的制备方法及应用
CN104152449B (zh) miRNA捕获探针及其修饰电极与捕获探针互补链及其修饰碳纳米管‑金磁纳米粒复合物
CN104391117A (zh) 一种基于PPy-NH2GO-Ag2Se@CdSe的胃癌抗原电致化学发光传感器的制备方法及应用
CN107085024A (zh) 一种检测乙肝病毒标志物的免疫传感器的制备方法及应用
CN109540995B (zh) 检测转基因成分dna的方法及其使用的电化学传感器
Yu et al. Saltatory rolling circle amplification-based ratiometric electrochemical biosensor for rapid detection of Salmonella enterica serovar typhimurium in food
CN111198222A (zh) 一种检测前列腺特异性抗原的夹心型电化学免疫传感器的制备及使用方法
CN113185697A (zh) 一种卟啉基MOFs模拟酶及其制备方法和应用
CN111721820A (zh) 一种非标记型检测前列腺特异性抗原的电化学免疫传感器及其制备方法
CN105067694A (zh) 用于快速检测阪崎肠杆菌的纳米免疫传感器的制备方法及其检测方法
CN106370858A (zh) 一种基于电位寻址模式的双肿瘤标志物的光电检测方法
Lee et al. Electrochemical microgap immunosensors for selective detection of pathogenic Aspergillus niger
CN112852923B (zh) 一种基于dna生物传感器的二级放大方法
CN114634974A (zh) 核酸检测系统、核酸检测系统阵列、核酸检测方法以及候选引导核酸的筛选方法
Wei et al. A novel biosensor based on a bio-barcode for the detection of Mycobacterium tuberculosis

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant