CN112805284A - 整合素拮抗剂 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及式(I)的新的整合素拮抗剂及其作为药物的用途，尤其是用于抑制新血管形成。

Description

整合素拮抗剂
技术领域
本发明涉及新的整合素拮抗剂和这些化合物作为药物的用途，特别是用于抑制新血管形成。
背景技术
糖尿病性黄斑水肿(diabetic macular edema，DME)是糖尿病性视网膜病变(diabetic retinopathy，DR)患者黄斑内的液体积聚，可发生在疾病的任何阶段。DR是糖尿病最常见的微血管并发症之一。威胁视力的DR(即DME和增生性糖尿病性视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy，PDR))是全世界工作年龄成年人视力障碍和失明的主要原因。在全球范围内，DR的总体患病率估计占糖尿病患者的34.6％，而DME的总体患病率估计占DR患者的约20％(Yau等人，2012)。由于糖尿病患病率的增加、人口老龄化以及糖尿病患者预期寿命的延长，预计DME的患病率将进一步上升：2017年全球成人糖尿病患者人数估计为4.25亿，预计到2045年将增加到6.29亿。
虽然糖尿病引起视网膜病变的确切机制仍不清楚，但一些研究表明，活性氧、晚期糖基化终产物以及循环和玻璃体细胞因子和趋化因子的升高与该疾病有关。视网膜的炎症是DR早期的主要病理标志。炎症因子和血管扩张因子可改变内皮功能，导致血-视网膜屏障破坏，从而导致血浆蛋白和脂质堆积到黄斑部。当这种增厚干扰视网膜中央凹或有可能干扰视网膜中央凹时，患者就会出现视物变形和视力丧失的症状。
已发现玻璃体与视网膜之间的相互作用与黄斑水肿的发生有关。具体地，当玻璃体与视网膜黄斑区紧密附着时，会极大地促进黄斑水肿的发生。在DR患者中，仅20％的玻璃体后脱离(posterior vitreous detachment，PVD)患者出现DME，相比之下没有PVD的患者则有55％出现DME，说明PVD有很强的保护作用。针对潜在的PVD益处所提出的机制是玻璃体黄斑牵引得到了缓解，然而，经玻璃体充氧和改善生长因子扩散(远离黄斑前透明膜)也被认为可能具有潜在的有益作用。
对血糖、血压和血脂的良好控制至关重要，可以延缓DR的发作并减缓其进展。在某些情况下，使用小的光强度激光灼伤(50-100μm)对微动脉瘤或弥漫性增厚区域进行聚焦/栅格激光光凝治疗。然而，这种治疗可能导致并发症，如中枢视力丧失、中心暗点和色觉下降。最近，亚阈值微脉冲激光被开发为一种治疗方法，理论上其可以避免损伤内部神经感觉视网膜，从而减少潜在的并发症。
现在有几种药物可用于治疗DME，包括抗血管内皮生长因子(VEGF)药物和皮质类固醇。VEGF是一种强有力的血管通透性因子，可导致与DME相关的黄斑增厚和视力障碍。抗VEGF化合物降低血管生成和血管通透性，导致新血管形成的消退和水肿的减少。几项临床研究表明，抗VEGF治疗在减少中央亚视场厚度(central subfield thickness，CST)和改善DME患者视力方面比聚焦/栅格激光治疗更有效。与抗VEGF治疗相关的不良事件(adverseevent，AE)很少，并且主要与需要长期重复玻璃体内(intravitreal，IVT)注射有关。
炎症在DME的发病机制中起着重要作用。血液中的白细胞释放的细胞因子和趋化因子显著增加了血管通透性，导致更多的液体在视网膜下方积聚。皮质类固醇疗法可以抑制炎症介质。多项临床研究表明，皮质类固醇能有效降低DME患者的CST并改善视力。虽然皮质类固醇植入物的治疗负担远低于抗VEGF药剂，但眼内皮质类固醇与白内障发生和眼压升高的风险增加有关。因此总的来说，对DME患者使用IVT皮质类固醇的治疗，只能作为对IVT抗VEGF治疗反应较差的那些患者的二线治疗，而对于潜在的青光眼患者则是禁忌。
在上述可能的DME治疗方法中，抗VEGF药剂是目前DME的一线金标准治疗方法。然而，迄今为止的大多数研究报告称，高达40％的相当一部分DME患者在接受抗VEGF治疗后仍有持续的水肿和视力丧失。这些研究结果表明，独立于VEGF的其他途径也会导致DME的发展，因此临床上非常需要其他有效的DME治疗方法。
整合素构成一个跨膜细胞表面受体家族，可以介导细胞-细胞和细胞-细胞外基质之间的相互作用。整合素参与多种生物过程，包括细胞分化、粘附、成形、迁移、运动、入侵、增殖和存活。由于整合素在这些生物过程中的作用，它们也与多种病理症状有关，如癌症和眼科疾病。在眼部，已证明整合素在新血管形成、血管通透性和玻璃体视网膜粘附中发挥着重要作用。
整合素是由非共价结合的α和β亚单元组成的专性异二聚体受体。已知的18种α亚单元和8种β亚单元的不同组合，构成了迄今所认识的24种异二聚整合素家族成员。整合素受体家族根据其配体识别模式的不同，大致可分为4种不同的类型：1)三肽L-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)结合型整合素、2)胶原蛋白结合型整合素、3)层粘连蛋白结合型整合素、4)白细胞结合型整合素。
整合素与细胞外基质之间的相互作用可导致视网膜表面的新血管形成，该新血管形成最终可向玻璃体区域延伸。来自PDR患者的人类视网膜组织的免疫组织学染色显示，活跃增殖的血管内皮细胞表达整合素αvβ3和αvβ5，而它们在静止的内皮细胞中表达不高(Friedlander等人，1996；Ning等人，2008)。此外，αvβ3和αIIbβ3已被证明在纤维化阶段的活动性PDR患者的纤维血管视网膜前膜中表达(Ning等人，2008；Abu El-Asrar，Missotten和Geboes，2010)，而α5β1已被证明在激光诱导的CNV小鼠模型中过度表达(Umeda等人，2006)。与此相一致的是，一些非临床研究表明，抑制整合素可减轻白细胞淤滞和视网膜血管通透性(Santulli等人，2008；lliaki等人，2009；Rao等人，2010)。拮抗αvβ3和αvβ5可防止视网膜新血管形成，但不破害已存在的血管(Friedlander等人，1996；Hammes等人，1996；Lahdenranta等人，2007；Santulli等人，2008)，而抑制α5β1可抑制内皮细胞增殖，并在不同动物模型中产生脉络膜新生血管膜的退变(Ramakrishnan等人，2006；Umeda等，2006)。
RGD基序通常存在于细胞外基质的许多成分中，包括玻连蛋白、纤连蛋白和纤维蛋白原。因此，整合素与细胞外基质蛋白紧密相连，从而介导细胞-细胞外基质粘附，例如在玻璃体视网膜界面处。已知RGD基序的类似物可竞争细胞外基质蛋白的RGD基序，从而破坏整合素-细胞外基质之间的相互作用，并因此在体外实验中松开附着(Gehlsen等人，1988；Pierschbacher和Ruoslahti，1987；Zhou，Zhang和Yue，1996)。与此相一致的是，IVT注射可溶性RGD肽已被证明能诱导兔眼的PVD(Oliveira等人，2002)。此外，在人体中，在一项初步的概念验证研究中，3次IVT注射整合素拮抗剂ALG 1001(Allegro Ophthalmics，LLC)已被证明可诱导基线处无PVD或部分PVD的11名DME患者中的6名患者完全PVD(Kuppermann，2013；Boyer等人，2014)。
这些观察结果支持了使用泛整合素拮抗剂的优选性，这种拮抗剂针对不同类型的整合素，这些整合素是所要治疗疾病的不同方面的成因，最主要的是αvβ3、αvβ5和α5β1。复杂的是，这类泛整合素拮抗剂往往还会拮抗其他RGD结合的整合素，这可能会引起副作用。最值得注意的是血小板整合素αIIbβ3，对其的拮抗作用可能会干扰血小板的激活和聚集。
专利申请出版物WO2011/119282 A1、WO2011/094285 A1、US 2006/0052398 A1和US 2008/058348 A1公开了作为潜在整合素拮抗剂或作为潜在玻连蛋白受体拮抗剂的化合物。这些专利申请中公开的化合物大体上可概括为对应于式A的化合物：
Figure BDA0002943517100000041
其中，通常G1代表取代的吡啶或四氢萘啶，R1和R2是氢、甲基或乙基，R3是疏水尾基。具体地，在所举例的具有确认活性的化合物中，R3包括烷基、环烷基或(杂)芳香族端基。
需要新的整合素拮抗剂，特别是既同时作用于疾病途径中所涉及的不同类型的整合素，如αvβ3、αvβ5和α5β1，又通过它们对αIIbβ3的作用而降低了干扰血小板聚集的风险的整合素拮抗剂。
发明内容
本发明提供了根据式(I)的化合物或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂化物、异构体或它们的混合物，
Figure BDA0002943517100000051
其中，
R1和R2独立地选自由氢、甲基或乙基组成的组中；并且
Alk是C1-4亚烷基。
本发明进一步涉及包含本发明化合物和一种或多种药学上可接受的载体的药物组合物。
本发明进一步涉及化合物用作药物的用途。本发明的另一个目的是提供抑制病理性新血管形成的化合物。
本发明进一步涉及化合物用于治疗和/或预防眼科疾病，例如糖尿病黄斑水肿和糖尿病视网膜病变的用途。
附图说明
图1示出了对于cpd1、cpd2、cpd3以及比较化合物cpdA和cpdB，整合素αvβ3相对于αIIbβ3的EC50比值(较低的值表明对αvβ3具有较高特异性)。
图2示出了在小鼠脉络膜外植体试验中cpd3对血管萌发的抑制。
具体实施方式
还应当理解，如上文针对本发明化合物所述的所有定义和优选情况同样适用于下文所述的本实施方式和所有进一步的实施方式。
如在上文和下文中所用，以下定义都适用，除非另有说明。
术语“亚烷基”，单独或组合指的是一种衍生自烷烃的双基，它可以是含有1至4个碳原子的直链亚烷基或支链亚烷基。该直链或支链亚烷基基团连接在任何可连接的点上，以产生稳定的化合物。根据某些实施方式，CA-B亚烷基定义了具有A至B个碳原子的直链或支链亚烷基双基，例如C1-4亚烷基定义了具有1至4个碳原子的直链或支链亚烷基双基，例如亚甲基、亚乙基、1-亚丙基、2-亚丙基、1-亚丁基、2-亚丁基、2-甲基-1-亚丙基。
在提及百分比的地方，指的是重量对重量的百分比，除非上下文另有明确规定。
如前所述，本发明提供了根据式(I)的化合物或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂化物、异构体或它们的混合物。
Figure BDA0002943517100000071
其中，
R1和R2独立地选自由氢、甲基或乙基组成的组中；并且
Alk是C1-4亚烷基。
根据本发明的某一实施方式，R1和R2都是甲基，或者R1是氢而R2是乙基。
根据优选的实施方式，本发明提供了其中R1和R2均为甲基的那些化合物。
根据本发明的某一实施方式，Alk是C1-2亚烷基。
根据本发明的一优选实施方式，该化合物选自由以下化合物组成的组中，或者是这些化合物药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂化物、异构体或它们的混合物：
Figure BDA0002943517100000072
Figure BDA0002943517100000081
如上所述，本发明的化合物可以具有手性中心，并以立体化学异构形式存在。本文使用的术语“立体化学异构形式”定义了由相同的原子通过相同的键序构成但具有不可互换的不同三维结构的所有可能的化合物，本文所述的抗炎化合物可具有立体化学异构形式。
除非另有提及或说明，如上文详述的化合物的化学名称包括所述化合物可能具有的所有可能的立体化学异构体形式的混合物。所述混合物可包含所用化合物基本分子结构的所有非对映体和/或对映体。本发明化合物的所有立体化学异构体形式，无论是纯的形式还是相互混合的形式，都包含在本发明的范围内。
在一个优选的实施方式中，本发明提供了根据式I的化合物的(S)对映体形式。因此，在一个特定的实施方式中，本发明提供了根据式II的化合物：
Figure BDA0002943517100000091
其中，R1、R2和Alk如本申请中所定义。
在另一个实施方式中，本发明提供了选自由以下化合物组成的组中的化合物，或者是该化合物药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂化物、异构体或它们的混合物：
Figure BDA0002943517100000092
Figure BDA0002943517100000101
对于治疗用途，如上所述，用于本发明用途的化合物的盐是其中的抗衡离子是药学上可接受的那些盐，这些盐可称为药学上可接受的酸加成盐和碱加成盐。然而，非药学上可接受的酸和碱的盐也可用于例如药学上可接受的化合物的制备或纯化。所有的盐，无论是否为药学上可接受的，都包括在本发明的范围内。
上述提及的药学上可接受的酸加成盐和碱加成盐包括如上所述的用于本发明用途的化合物能够形成的治疗活性的无毒的酸加成盐形式和碱加成盐形式。药学上可接受的酸加成盐可以通过用这种合适的阴离子形式的酸对碱形式进行处理来方便地获得。合适的阴离子例如包括三氟乙酸根、乙酸根、苯磺酸根、苯甲酸根、碳酸氢根、酒石酸氢根、溴离子、依地酸钙、右旋樟脑磺酸根(camsyiate)、碳酸根、氯离子、柠檬酸根、二盐酸根(dihydrochloride)、依地酸根、乙二磺酸根、依托酸根(estolate)、乙磺酸根、延胡索酸根、葡庚糖酸根、葡萄糖酸根、谷氨酸根、甘酰胺苯砒酸根(glycollylarsanilate)、己基间苯二酸根(hexylresorcinate)、海巴明酸根(hydrabamine)、氢溴酸根、盐酸根、羟基萘甲酸根、碘离子、羟乙磺酸根、乳酸根、乳糖醛酸根、苹果酸根、马来酸根、扁桃酸根、甲磺酸根、甲基溴、硝酸甲酯、甲基硫酸根、粘液酸根(mucate)、萘磺酸根、硝酸根、双羟萘酸根(恩波酸根)、泛酸根、磷酸根/二磷酸根、聚半乳糖酸根、水杨酸根、硬脂酸根、碱式醋酸根、琥珀酸根、硫酸根、鞣酸根，酒石酸根、茶氯酸根(teoclate)、三乙基碘离子(triethiodide)等。可以使用离子交换树脂引入所选择的抗衡离子。反之，所述盐形式可以通过用合适的碱处理转化为游离碱形式。优选的盐是本文所述化合物的盐酸盐。
通过用阳离子形式的合适的有机和无机碱处理，也可将含有酸性质子的用于本文所述用途的化合物转化为它们的无毒金属或胺加成盐形式。合适的碱性盐包括与有机阳离子如苄星、氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺、普鲁卡因等形成的那些盐；以及与金属阳离子如铝、钙、锂、镁、钾、钠、锌等形成的那些盐。反之，所述盐形式可以通过用合适的酸处理转化为游离形式。
上文中使用的术语加成盐还包括用于如本文所述用途的化合物及其盐能够形成的溶剂化物。这些溶剂化物例如是水合物、醇化物等。
从本文公开的内容中可以理解，本发明特别提供了独立的化合物和独立的组合物。特别地，化合物通过体外合成，例如通过化学合成获得。在另一个实施方式中，本发明的化合物具有至少85％，特别是至少90％，更特别是至少95％的纯度。在一个特定的实施方式中，本发明提供了一种用于提供本发明化合物的方法，该方法包括化学合成本发明化合物和将所合成的化合物包装在无菌容器中。在另一个实施方式中，本发明提供了一种用于提供本发明化合物的方法，该方法包括化学合成纯度为至少85％，特别是至少90％，更特别是至少95％的化合物。优选地，随后将合成的化合物包装在无菌容器中。
组合物
本发明进一步涉及一种药物组合物，该组合物包含如上定义的化合物和本文提供的任一实施方式中所定义的化合物。
在文本的其余部分中，表述“化合物”或“根据本发明的化合物”在本发明中被理解为复数和单数，也就是说，本发明的组合物可以包含一种或多种“根据本发明的化合物”。
在一个特定的实施方式中，本发明提供了一种药物组合物，其包含根据任何一项权利要求所述的化合物，以及一种或多种药学上可接受的载体。药学上可接受的制剂的示例以及制备它们的方法例如可见于Remington's Pharmaceutical Sciences(例如第20版；Lippincott，Williams&Wilkins，2000)或任何药典手册(例如美国药典、欧洲药典或国际药典)。
在另一实施方式中，本发明提供了一种组合物，其包含其中已溶解有本发明的化合物的水性缓冲液。在另一实施方式中，本发明提供了一种药物组合物，其包含已溶解有本发明的化合物以及一种或多种药学上可接受的载体的水性缓冲液。在另一实施方式中，本发明提供了一种药物组合物，其由水性缓冲液、本发明化合物和一种或多种药学上可接受的载体组成。
在一个特定的实施方式中，本发明提供了一种包含整合素拮抗剂的组合物，其中，该组合物中至少90％的整合素拮抗剂化合物是根据本发明的化合物。优选地，至少95％，特别是至少99％的本发明的整合素拮抗剂化合物是根据本发明的化合物。在另一个特定的实施方式中，本发明的组合物基本上不含另一种整合素拮抗剂，例如化合物A，在另一实施方式中，本发明的化合物与其他整合素拮抗剂化合物(例如化合物A)之比大于98∶2，特别是大于99∶1，更特别是大于99.9∶0.1。在又一个实施方式中，本发明提供了一种如本文所述的组合物，其中该组合物基本上不含化合物A，特别是该组合物含有小于3％，特别是小于2％，优选小于1％的化合物A，更特别地，条件是该组合物不含化合物A。
在另一实施方式中，本发明提供了一种包含第一活性成分和第二活性成分的组合物，其中第一活性成分是根据本发明的整合素拮抗剂，并且该组合物基本上不含除第一活性成分以外的整合素拮抗剂。在另一实施方式中，第二活性成分是结合VEGF或VEGF受体并抑制VEGF或VEGF受体的活性的化合物。
本申请中的整合素拮抗剂或整合素拮抗剂化合物优选指对整合素受体的半数最大有效浓度(EC50)小于1μM的化合物，该EC50尤其是对αvβ3整合素受体而言的EC50。确定EC50值的合适方法是技术人员已知的。确定某一特定化合物的值的一种特定方法是竞争ELISA试验，在该试验中，将被研究的整合素受体(特别是人αvβ3整合素受体)以4μg/mL溶液涂到多孔板上，并用5％牛血清白蛋白封闭孔。在各个实验中，通过测定不同浓度的纤连蛋白与被研究的涂覆的整合素的结合情况来实验性地确定试验中使用的纤连蛋白浓度，用于试验的纤连蛋白浓度是给出最大结合的80％的浓度。然后在化合物浓度增加的情况下，将确定浓度的人纤连蛋白加入到涂覆的和封闭的孔中。在37℃下孵育2小时后，清洗孔，并借助于特异性试剂，如可检测的抗纤连蛋白抗体来检测结合的纤连蛋白。然后对数据进行定量分析，确定EC50值，即，使与涂覆的受体结合的纤连蛋白减少50％的化合物浓度。
在另一实施方式中，本发明提供了包含水性缓冲液和本发明化合物的组合物。在另一实施方式中，本发明提供了一种药物组合物，其包括水性缓冲液、本发明化合物和一种或多种药学上可接受的载体。在另一实施方式中，本发明提供了一种药物组合物，其由水性缓冲液、本发明化合物和一种或多种药学上可接受的载体组成。
在一个特定的实施方式中，本发明提供了一种组合物，其中，每毫升组合物包含0.1至1000mg本发明的化合物，特别是1至500mg/ml，更特别是1至100mg/ml。在另一实施方式中，该组合物包含10至100mg/ml，例如20至75mg/ml。
化合物和/或组合物用作药物的用途
本发明进一步涉及化合物用作药物的用途。
在一个特定的实施方式中，本发明涉及化合物用于抑制新血管形成的用途。
在另一实施方式中，本发明涉及化合物用于治疗和/或预防癌症的用途。特别是用于抑制癌症生长和/或转移。
在又一实施方式中，本发明涉及化合物用于治疗和/或预防眼科疾病的用途。特别是用于治疗和/或预防眼中的新血管形成。更一般地，本发明提供了药物化合物和组合物，用于治疗、减少、改善或抑制(病理性)眼部新血管形成的进展。另一方面，本发明提供了药物化合物和组合物，用于治疗、减少、改善或抑制由眼部新血管形成引起的或具有眼部新血管形成方面的致病源的眼科疾病的进展。
在另一实施方式中，本发明涉及化合物用于治疗和/或预防眼科疾病的用途，其中，所述眼科疾病选自由湿性年龄相关性黄斑变性、视网膜脱落、后葡萄膜炎、角膜新血管形成、虹膜新血管形成、糖尿病性黄斑水肿和糖尿病性视网膜病变组成的组中。
在又一实施方式中，本发明的化合物被提供用作体外或体内的整合素拮抗剂，特别是玻连蛋白受体拮抗剂的用途。在一特定的实施方式中，整合素是结合RGD的整合素。在另一实施方式中，整合素是包含αv、α5或α8亚单元的整合素。在一更特定的实施方式中，整合素是αvβ3、αvβ5或α5β1受体。
在另一实施方式中，本发明的化合物用于降低血管渗透性，优选用于降低视网膜血管渗透性。在另一实施方式中，本发明的化合物用于治疗和/或预防水肿，特别是用于治疗和/或预防黄斑水肿，更特别是用于治疗和/或预防糖尿病性黄斑水肿。
在另一实施方式中，本发明的化合物被提供用于诱导玻璃体后脱离(PVD)。在另一实施方式中，本发明的化合物被提供用于治疗玻璃体黄斑牵引。
如前所述，本发明涉及新化合物、其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂化物、异构体或它们的混合物。出于给药目的，本发明的化合物也可以配制成各种药物形式。作为合适的组合物，可以列举通常用于全身给药的所有组合物。为了制备本发明的药物组合物，将有效量的特定化合物，任选地以加成盐形式或金属络合物形式，作为活性成分与药学上可接受的载体充分混合，该载体可以根据给药所需的制剂形式采取多种形式。这些药物组合物呈特别适合于口服、直肠、经皮、胃肠外或玻璃体内注射给药的单位剂型是理想的。例如，在制备口服剂型的组合物时，可采用任何通常的药物介质，例如，在口服液体制剂如悬浮剂、糖浆、酏剂、乳剂和溶液的情况下，可采用水、乙二醇、油、醇等；在粉剂、丸剂、胶囊和片剂的情况下，可采用固体载体如淀粉、糖、高岭土、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。
特别有利的是将上述组合物配制成单位剂型，以便于给药和剂量的一致性。本文所用的单位剂型是指适合作为单一剂量的物理上不连续的单元，每一单元含有预定量的活性成分，该活性成分经计算可与所需的药物载体一起产生所需的治疗效果。这种单位剂型的示例是片剂(包括刻痕或包衣的片剂)、胶囊、丸剂、栓剂、粉末包、糯米纸囊剂、注射型溶液或悬浮液等，以及上述剂型的隔离开的多份式(segregated multiples)。
在一特定的实施方式中，本发明提供了一种包装，该包装包含本发明的化合物和说明书，以将该化合物给药至患有本文所列眼科疾病的患者，特别是患有湿性年龄相关性黄斑变性、糖尿病性视网膜病变或糖尿病性黄斑水肿，更特别是糖尿病性视网膜病变或糖尿病性黄斑水肿的患者。
为了进行治疗和/或预防，可以通过任何将治疗剂递送到眼科疾病部位的方法，例如通过向眼部给药，向患者给药本文所述的化合物或组合物。在另一实施方式中，使用、治疗和/或预防包括使玻璃体和/或房水与有效量的包含本发明化合物的组合物接触。可以通过眼部途径给药，例如局部给药、结膜下给药、眼球筋膜下给药、眼内给药、眼部植入物给药等。局部给药可包括将一滴或几滴包含本发明化合物的组合物给药至眼部。可通过注射、插管或设计为将精确计量的所需眼用组合物引入眼内特定分隔区域或组织(如后房或视网膜)的其它侵入式装置，实现原位递送至眼内区域。眼内注射可以是进入玻璃体部(玻璃体内的)，或结膜下方(结膜下的)，或眼部后方(眼球后的)，或巩膜内，或眼球筋膜下方(眼球筋膜下的)。其他眼内给药途径和注射部位和形式也是可预期的，并且在本发明的范围内。在优选的实施方式中，治疗和/或预防包括通过玻璃体内注射给药化合物。优选地，这通过自密封量针或任何合适校准的其他递送装置来进行。可以通过自密封针经由坦部水晶体(pars plana)注射到眼中。
当以玻璃体内注射给药组合物时，应将活性剂浓缩，以尽量减少注射体积。优选地，注射体积小于约5mL。像这样的体积可能需要玻璃体液的代偿性引流，以防止眼内压增加和注射液通过输液针形成的开口的泄漏。更优选地，注射体积为约10至200μL。最优选地，注射体积为30至100μL，特别是大约为50μL。
关于优选的给药途径，药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂化物、异构体或它们的混合物也是眼科可接受的盐、眼科可接受的溶剂化物、异构体或它们的混合物。在一个优选的实施方式中，药物组合物包含化合物和一种或多种眼科可接受的载体。有趣的是，已经发现本发明的化合物具有超过100mg/ml的高水溶性，而现有技术化合物的水溶性为个位数的mg/ml或更低。在优选实施方式中，本文公开的本发明组合物是包含本发明化合物的水性溶液。在另一实施方式中，本发明提供了一套部件，其包括含有本发明化合物的容器和含有用于溶解本发明化合物的水性缓冲液的另一个容器。
如本领域技术人员所理解的，本文公开的组合物优选为无菌组合物。在一特定实施方式中，本发明提供含有本发明化合物或组合物的无菌容器。在另一实施方式中，无菌容器是含有本发明化合物或组合物的小瓶。小瓶可含有粉末或溶液(优选水性溶液)形式的化合物。在一更特定的实施方式中，本发明提供含有本发明化合物水性溶液的无菌小瓶。在一甚至更特定的实施方式中，本文所述的小瓶包括设计成可被注射器针头刺穿的部分。在另一实施方式中，本发明提供了套件，其包括含有粉末形式的本发明化合物的小瓶和含有水性溶液，特别是水性缓冲溶液的容器。在另一实施方式中，无菌容器是预填充有本发明药物组合物，特别是包含本发明化合物的水性溶液的注射器。在又一实施方式中，无菌容器是含有至少一个片剂的容器，所述片剂包含本发明的药物组合物。特别地，包含多个片剂的泡罩包装或瓶子，所述片剂包含本发明的化合物和一种或多种药学上可接受的载体。在一个具体实施方式中，所述小瓶含有少于5mL，特别是少于4mL，更特别是少于3mL的包括本发明化合物的溶液。
在优选的实施方式中，本发明进一步涉及化合物的用途，其中，前述疾病的治疗、抑制和/或预防进一步包括给药结合VEGF或VEGF受体并抑制VEGF或VEGF受体活性的化合物。该化合物可以是VEGF抑制剂、VEGF受体抗体或其抗原结合片段，或VEGF抗体或其抗原结合片段。此类化合物的合适示例包括贝伐单抗、雷珠单抗、布罗卢西单抗(brolucizumab)或康柏西普。另一种可能的化合物是VEGF捕获剂(VEGF trap)，包括VEGF结合结构域，如阿帕西普。
本发明进一步涉及包含本发明化合物和与VEGF或VEGF受体结合并抑制VEGF或VEGF受体活性的另一种化合物的组合。如上所述，该另一种化合物可以是VEGF抑制剂、VEGF受体抗体或其抗原结合片段，或VEGF抗体或其抗原结合片段，例如贝伐单抗、雷珠单抗、布罗卢西单抗或康柏西普。另一种可能的化合物是VEGF捕获剂，包括VEGF结合结构域，如阿帕西普。
每当提及活性成分的组合时，活性成分可以以单一组合物或独立组合物提供。此外，活性成分的组合还包括非共价或共价连接的活性成分。
本发明进一步涉及如上所述的组合用作药物或用于抑制、治疗和/或预防病理性新生血管、癌症或眼科疾病，例如湿性年龄相关性黄斑变性、视网膜脱落、后葡萄膜炎、角膜新血管形成、虹膜新血管形成、糖尿病性黄斑水肿和糖尿病性视网膜病的用途。
本发明还提供了在有需要的受试者中拮抗整合素，特别是拮抗玻连蛋白受体的方法，该方法包括给药本发明的化合物。更特别的是，本发明提供了抑制受试者血管形成的方法。本发明进一步涉及一种用于抑制有需要的受试者的(病理性)新血管形成的方法，该方法包括给药本发明的化合物。在另一实施方式中，本发明提供了一种抑制受试者眼部新血管形成的方法，该方法包括向受试者给药本发明的化合物。在又一特定的实施方式中，该方法包括将本发明的化合物或组合物给药至受试者的眼部，例如通过玻璃体内注射。特别是，该方法包括玻璃体内注射本文所述的组合物。
本发明进一步提供了本文所述的化合物和组合物用于制备用于预防和/或治疗本文所述疾病的药物的用途。
实施例
实施例1：本发明化合物的合成
N-[(2S)-1-(叔丁氧基)-3-({2,5-二甲基-6-[4-(1,8-萘啶-2-基)哌啶-1-基]嘧啶-4-基}氨基)-1-羟丙烷-2-基]氨基甲酸苄酯的合成
Figure BDA0002943517100000181
2-[1-(6-氯-2,5-二甲基嘧啶-4-基)哌啶-4-基]-1,8-萘啶和(2S)-3-氨基-2-{[(苄氧基)羰基]氨基}丙酸叔丁酯是根据US2008/0058348A1中记载的方法制备的，该文献通过引入并入本文。这两种分子在2-甲基四氢呋喃中在[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(II)二氯甲烷络合物(1:1)、1,1'-二茂铁二基-双二苯基膦、苯硼酸、三乙胺和氟化铯催化的Buchwald-Hartwig胺化反应中偶联。通过硅藻土过滤反应混合物，并用盐酸水溶液提取。用乙酸钠水溶液中和水性提取物，并用二氯甲烷萃取，用碳酸氢钠水溶液洗涤，并用硫酸钠干燥，得到粗产物，通过硅胶柱色谱法进行纯化，其中使用甲苯/乙酸乙酯作为洗脱剂。将色谱分离的物质溶解在乙酸乙酯中，通过结晶进一步纯化为(-)-二苯甲酰-L-酒石酸盐。用碳酸氢钠水溶液除去酒石酸盐，得到纯化产物。
(2S)-2-氨基-3-({2,5-二甲基-6-[4-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基)哌啶-1-基]嘧啶-4-基}氨基)丙酸叔丁酯的合成
Figure BDA0002943517100000182
在2-甲基四氢呋喃中使用含钯活性炭使N-[(2S)-1-(叔丁氧基)-3-({2,5-二甲基-6-[4-(1,8-萘啶-2-基)哌啶-1-基]嘧啶-4-基}氨基)-1-羟丙烷-2-基]氨基甲酸苄酯进行氢化。通过硅藻土过滤除去催化剂。蒸发掉溶剂，得到所需产物。
(2S)-3-({2,5-二甲基-6-[4-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基)哌啶-1-基]嘧啶-4-基}氨基)-2-{[(3-甲氧基-3-氧代丙氧基)羰基]氨基}正丙酸叔丁酯的合成
Figure BDA0002943517100000191
在三乙胺存在下，在二氯甲烷中N,N-二琥珀酰亚胺碳酸酯与3-羟基丙酸甲酯反应得到2-({[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]羰基}氧基)乙酸甲酯。加入(2S)-2-氨基-3-({2,5-二甲基-6-[4-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基)哌啶-1-基]嘧啶-4-基}氨基)丙酸叔丁酯得到所需产物。用盐酸水溶液和碳酸氢钠水溶液洗涤反应混合物，然后用硫酸钠干燥，得到粗产物，通过硅胶柱色谱法进行纯化，其中使用乙酸乙酯/正庚烷/三乙胺作为洗脱剂。
(2S)-3-({2,5-二甲基-6-[4-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基)哌啶-1-基]嘧啶-4-基}氨基)-2-{[(3-甲氧基-3-氧代丙氧基)羰基]氨基}丙酸三氟乙酸盐的合成
Figure BDA0002943517100000192
使(2S)-3-({2,5-二甲基-6-[4-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基)哌啶-1-基]嘧啶-4-基}氨基)-2-{[(2-甲氧基-2-氧代乙氧基)羰基]氨基}丙酸叔丁酯溶解在二氯甲烷中并用三氟乙酸处理。用盐水洗涤反应混合物，蒸发溶剂，得到作为三氟乙酸盐的所需产物。所得化合物还称为比较化合物A(cpd A)。
电子喷雾(Electron Spray，ES)低分辨率MSm/z：556[(M+1),100％]。
(2S)-2-{[(2-羧乙氧基)羰基]氨基}-3-({2,5-二甲基-6-[4-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基)哌啶-1-基]嘧啶-4-基}氨基)丙酸的合成
Figure BDA0002943517100000201
将(2S)-3-({2,5-二甲基-6-[4-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基)哌啶-1-基]嘧啶-4-基}氨基)-2-{[(3-甲氧基-3-氧代丙氧基)羰基]氨基}丙酸三氟乙酸盐溶解在2M盐酸水溶液中。反应完成后，将溶剂冻干，得到所需产物。(2S)-2-{[(2-羧乙氧基)羰基]氨基}-3-({2,5-二甲基-6-[4-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基)哌啶-1-基]嘧啶-4-基}氨基)丙酸，也称为化合物1(cpd1)。
电子喷雾(Electron Spray，ES)低分辨率MSm/z：542[(M+1),100％]。
(2S)-2-({[2-(叔丁氧基)-2-氧代乙氧基]羰基}氨基)-3-({2,5-二甲基-6-[4-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基)哌啶-1-基]嘧啶-4-基}氨基)丙酸叔丁酯的合成
Figure BDA0002943517100000202
在三乙胺存在下，在二氯甲烷中，N,N-二琥珀酰亚胺碳酸酯与2-羟基乙酸叔丁酯反应得到2-({[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]羰基}氧基)乙酸叔丁酯。加入(2S)-2-氨基-3-({2,5-二甲基-6-[4-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基)哌啶-1-基]嘧啶-4-基}氨基)丙酸叔丁酯。反应完成后，用盐酸水溶液和碳酸氢钠水溶液洗涤反应混合物，然后用硫酸钠干燥，得到粗产物。通过硅胶柱色谱法纯化粗产物，其中使用乙酸乙酯/正庚烷/三乙胺作为洗脱剂。
(2S)-2-([(羧甲氧基)羰基]氨基)-3-({2,5-二甲基-6-[4-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基)哌啶-1-基]嘧啶-4-基}氨基)丙酸二盐酸化物(THR-687)的合成
Figure BDA0002943517100000211
用盐酸水溶液水解(2S)-2-({[2-(叔丁氧基)-2-氧代乙氧基]羰基}氨基)-3-({2,5-二甲基-6-[4-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基)哌啶-1-基]嘧啶-4-基}氨基)丙酸叔丁酯。用正庚烷洗涤反应混合物，蒸发后得到化合物2(cpd2)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.64(d 1H),6.71(d 1H),4.63(d 1H),4.46(d 1H),4.57(dd 1H),4.06(dd 1H),3.85(dd 1H),3.77(m 2H),3.53(dd 2H),3.27(m,2H),3.01(tt1H),2.84(dd 2H),2.58,(s 3H),2.10(dd,2H),,2.07(s 3H),1.99(t,2H),1.95(td 2H)。
(2S)-3-({2,5-二甲基-6-[4-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基)哌啶-1-基]嘧啶-4-基}氨基)-2-({[(1-乙氧基-1-氧代丙-2-基)氧基]羰基}氨基)丙酸叔丁酯的合成
Figure BDA0002943517100000212
在三乙胺存在下，在二氯甲烷中，N,N-二琥珀酰亚胺碳酸酯与2-羟基丙酸乙酯反应得到2-({[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]羰基}氧基)丙酸乙酯。加入(2S)-2-氨基-3-({2,5-二甲基-6-[4-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基)哌啶-1-基]嘧啶-4-基}氨基)丙酸叔丁酯。反应完成后，用盐酸水溶液和碳酸氢钠水溶液洗涤反应混合物，然后用硫酸钠干燥，得到粗产物。通过硅胶柱色谱法纯化粗产物，其中使用二氯甲烷/甲醇作为洗脱剂。
(2S)-2-{[(1-羧乙氧基)羰基]氨基}-3-({2,5-二甲基-6-[4-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基)哌啶-1-基]嘧啶-4-基}氨基)丙酸二盐酸化物的合成
Figure BDA0002943517100000221
用盐酸水溶液水解(2S)-3-({2,5-二甲基-6-[4-(5,6,7,8-四氢-1,8-萘啶-2-基)哌啶-1-基]嘧啶-4-基}氨基)-2-({[(1-乙氧基-1-氧代丙-2-基)氧基]羰基}氨基)丙酸叔丁酯。用正庚烷洗涤反应混合物，蒸发后得到产物，也称为化合物3(cpd3)。
1H NMR(400MHz,D2O)δ:7.5(d 1H),6.5(d 1H),4.5(m 1H),4.2(m 1H),3.9(dd1H),3.5-3.7(m 3H),3.4(t 2H),3.1(t 2H),2.8(m 1H),2.7(t 2H),2.4(s 3H),1.9(s3H),1.9-2.0(m 3H),1.7-1.9(m 4H),1.3(d 3H)。
因此，已经制备了本发明的下列化合物：
Figure BDA0002943517100000222
Figure BDA0002943517100000231
根据本发明的其它示例性化合物是：
Figure BDA0002943517100000232
Figure BDA0002943517100000241
如上所述，合成了化合物A(cpd A)：
Figure BDA0002943517100000242
根据US2008058348 A1的方法合成了化合物B(CpdB)：
Figure BDA0002943517100000243
实施例2–整合素拮抗作用
本文使用的竞争ELISA试验的原理如下：(1)将被研究的整合素受体涂到96孔板上，并将孔封闭，(2)然后在给定整合素拮抗剂的浓度增加的情况下，将整合素配体(纤连蛋白)加入到相应孔中，(3)在一定时间后，洗涤孔，并借助特定试剂检测被结合的配体。然后对数据进行定量分析，确定EC50值，即，使结合到涂覆的受体的配体减少50％的整合素拮抗剂浓度。
表1：不同整合素和人类整合素拮抗剂的EC50
α<sub>v</sub>β<sub>3</sub> α<sub>v</sub>β<sub>5</sub> α<sub>5</sub>β<sub>1</sub> α<sub>IIb</sub>β<sub>3</sub>
cpd1 +++ +++ +++ +
cpd2 +++ +++ +++ +
cpd3 +++ +++ +++ +
cpdA +++ +++ +++ +++
cpdB ++ +++ +++ +++
+++：1至10nM；++：10至25nM；+：>25nM。
根据式(I)的化合物抑制整合素和它们的配体之间的相互作用。根据式(I)的化合物已被证明以个位数纳摩尔亲和力拮抗包括αvβ3、αvβ5和α5β1在内的多种整合素受体。这些整合素受体已被证明在血管形成(αvβ3、αvβ5和α5β1)、血管通透性(αvβ3和αvβ5)和玻璃体视网膜粘附(α5β1)中发挥作用。
值得注意的是，本发明的化合物对血小板聚集涉及的血小板整合素αIIbβ3的拮抗作用显著降低。图1示出了测定的αvβ3相对于αIIbβ3的EC50值比。由这些结果可推导出，本发明的化合物对血小板整合素的活性比对αvβ3整合素的活性低得多。相反，现有技术中记载的化合物对血小板整合素的活性比对αvβ3整合素的活性显著更高。
实施例3：细胞迁移试验
内皮细胞伤口愈合是由内皮细胞迁移和增殖所介导的，这两者都是血管生成过程中的关键组成部分，并且内皮细胞伤口愈合通常被用作体外血管生成潜力的替代模型。使用人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells，HUVECs)进行ORISTM细胞迁移试验。
在T175培养瓶(Cat n 353112，福尔肯(falcon))中的EndoGro生长培养基(SCME-003，默克化学)中培养HUVEC细胞(SCCE-001，Cat n 1000519，默克化学)，并在达到90-100％汇合时进行分裂。
对于该试验，细胞在复苏后的第2至4代和80-90％汇合时使用。在一天开始时，将涂有纤连蛋白的OrisTM细胞迁移试验板(Cat n#CMAFN.l01，AMS生物科技)从冰箱中取出，置于室温下1小时。用乙醇洗涤Oris检测掩模(Oris Detection Mask)，并施用于96孔板的底部，将掩模的Al角与板的Al角对齐。通过胰蛋白酶化(Cat n 25300，Gibco)收获细胞，以250g离心5mm，并以每毫升0,4.106悬浮在完全的EndoGro生长培养基中。将100μL细胞悬浮液加入孔中，并在37℃和5％CO2下孵育板6小时以使细胞粘附。
在孵育结束时，用乙醇清洗取塞器，并使用取塞器从除参比孔外的所有孔中取出塞子。向孔中加入100μL含有不同浓度化合物(cpd2、cpd3、cpdB、西伦吉肽)的生长培养基，并将板转移到37℃和5％CO2的培养箱中保持24小时，以实现迁移。
在孵化即将结束之前，在预热的HBSS(Cat n 14025，Gibco)中制备4μg/mL钙黄绿素AM(Cat n 354217，Beckton Dickinson)溶液。从参比孔中取出塞子，并通过多通道(无真空抽吸)小心地从所有孔中除去培养基。用100μL DPBS洗涤孔。然后，加入100μL钙黄绿素AM溶液，并在37℃和5％CO2下孵育板1小时。孵育后，使用软件Flexstation和SofiMax Pro5.4.5(分子仪器公司(Molecular Devices))在494nm激发波长和517nm发射波长下读取荧光。从板的底部读取荧光，盖着盖子，以保持无菌。然后移除掩模，通过Axiovert荧光显微镜(蔡司公司(Zeiss))拍摄照片，其中使用反射光、GFP和2.5倍物镜。
cpdB、cpd2和cpd3的IC50值均低于1μM。阳性对照西伦吉肽的IC50为100μM。可以得出结论，式(I)的化合物保持强活性并抑制细胞迁移，其IC50值在纳摩尔范围内。
实施例4：小鼠脉络膜外植体试验
该试验基于小鼠微血管的血管生成外植体模型，该模型非常近似地模拟活体脉络膜血管生成。这种器官型培养模型的主要优点是细胞保持在其正常环境中，从而保持细胞-细胞之间的相互作用，同时保持比动物模型更高的实验控制水平。脉络膜外植体模型或简称的EMCA模型使得能够对新的抗血管生成疗法进行快速评估，另外的益处是排除了在动物眼部测试小分子时经常遇到的潜在的暴露不足的问题。RPE-脉络膜巩膜外植体(以下简称脉络膜外植体)嵌入三维纤维蛋白原/纤维蛋白凝胶中。加入含血清的培养基，培养3至4天后，可诱导内皮细胞大量萌发生长到基质中。
动物
所有实验均采用4至5周龄的雄性C57BL/6J小鼠(Charles River Laboratories，法国)，按照正常的昼夜节律，在标准实验室条件下饲养，随意获取食物和水。所有的动物实验都获得了KU Leuven机构伦理委员会的批准。
脉络膜组织解剖及外植体培养准备
经过初步的优化后，制定了一个通用的方案。简而言之，在使用戊巴比妥(200mg/kg，IP，Dolethal，Vetoquinol)使小鼠安乐死，然后进行颈椎脱臼后，立即用弯曲的镊子摘除眼睛，并将其保存在冰冷的DPBS(cat n 14190-136，Gihco)。在立体显微镜下，将眼球放置在一滴冰冷的DPBS中，并用镊子固定在冰冷的陪替氏培养皿上。使用Vannas弹簧剪刀(Fine Science Tools)，通过在角膜缘(角膜-巩膜边界)处的周缘切口移除角膜和晶状体。接着，从剩余的眼球中移除多余的肌肉，并从后房的边缘向视神经头进行切割。仔细地将RPE-脉络膜-巩膜复合体与视网膜分离后，使用冲针(直径750μm，Mediquip Surgical)在该复合体的周围制作6至8个外植体。将外植体转移到48孔板(BD Biosciences)上，其中预填有350μl无血清的DMEM(cat n 11995-065，Gibco)和1％(v/v)青霉素/链霉素(Pen/Strep)(cat n 15140-122，Gibco)，并在37℃和5％CO2下孵育过夜。
嵌入纤维蛋白原/纤维蛋白凝胶的脉络膜外植体和培养条件
将牛纤维蛋白原(3.1mg/mi，cat n F863，Sigma-Aldrich)溶解在含有1％(v/v)青霉素/链霉素(cat n 15140-122，Gibco)的DMEM(cat n 11995-065，Gibco)中，随后通过0.22μm孔隙过滤器(Corning)过滤。接下来，向纤维蛋白原溶液中加入10μg/mL的丝氨酸蛋白酶抑制剂抑肽酶(cat n A6279，Sigma-Aldrich)，以阻断纤维蛋白溶解活性。添加400mU/mL的牛凝血酶(SRP6555，Sigma-Aldrich)后，迅速将此纤维蛋白原-抑肽酶-凝血酶溶液分配到48孔板(每孔100μL)中，并允许在37℃下凝固至少5毫米。在纤维蛋白涂覆的孔的顶部，加入175μL添加有抑肽酶的纤维蛋白原溶液，随后使用切尖(a cut tip)将各RPE-脉络膜外植体转移到175μL DMEM培养基中。最后，向每个孔中加入1.4μL凝血酶(400mU/nit)，并使该混合物在37℃和5％CO2下凝胶化1小时。凝固后，将350μL含10％FBS(SH30071.03，热灭活的，HyClone)的DMEM和待测分子(cpd3、cpdB和西伦吉肽)添加到凝胶顶部，并使板在37℃、5％CO2下孵育。
血管萌发的定量化
3～4天后，通过Axio Vert.A1倒置显微镜(Zeiss)使用ZEN lite 2012显微镜软件(Zeiss)以2.5倍放大率拍摄明场照片。在ZVI图像上手动地对血管生长区域进行分析，更具体地说，使用Axiovision Rel 4.8软件(“测量>轮廓”，Zeiss)勾勒出外植体的轮廓，以及总血管生长区域(包括外植体)。进一步的分析是在Microsoft Excel中进行的，其中内皮器官型培养的萌发面积通过从萌芽所占的总面积中减去组织外植体的面积来定量化。由于独立实验之间的绝对萌发面积略有不同，因此每个实验中的所有数据都被归一化为媒介处理条件(vehicle-treated condition)，并计算IC50值(GraphPad Prism 5)。
结果
所有整合素拮抗剂均以取决于浓度的方式阻断内皮萌芽形成。这与表明内皮细胞通过ROD识别特异性与纤维蛋白原相关联的研究是一致的。事实上，纤维蛋白原含有αvβ3和α5β1整合素的多个结合位点，已知αvβ3和α5β1整合素由内皮细胞表达，并且是(病理性)血管形成的重要调节因子。Cpd3和CpdB抑制血管生长，其IC50值约为1μM，而对于阳性对照西伦吉肽而言，测得的IC50约为300μM。cpd3的代表性明场照片如图2所示。这些发现与实施例3中讨论的细胞迁移试验的结果一致。
总之，本发明的化合物是泛整合素抑制剂，对已被证明在血管生成(αvβ3、αvβ5和α5β1)、血管通透性(αvβ3和αvβ5)和玻璃体粘附(α5β1)中起作用的多种整合素受体显示出强拮抗作用。另一方面，相对于比较化合物，本发明化合物对血小板整合素(αIIbβ3)的拮抗作用要低得多，从而降低了干扰血小板聚集的风险，增加了治疗窗口。此外，已经证明本发明的化合物能抑制细胞迁移并减少血管的萌发。本发明提供了新的整合素拮抗剂，其用于治疗新生血管疾病等。

Claims (15)

1.根据式(I)的化合物或其药学上可接受的盐、药学上可接受的溶剂化物、异构体或它们的混合物，
Figure FDA0002943517090000011
其中，
R1和R2独立地选自由氢、甲基和乙基组成的组中；并且
Alk是C1-4亚烷基。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中，R1和R2均为甲基。
3.根据权利要求1或2所述的化合物，其中，Alk是C1或C2亚烷基。
4.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中，所述化合物选自由以下化合物组成的组中：
Figure FDA0002943517090000012
Figure FDA0002943517090000021
5.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据前述权利要求中任一项所述的化合物，以及一种或多种药学上可接受的载体。
6.根据权利要求1至4中任一项所述的化合物，用作药物的用途。
7.根据权利要求6所述的用于所述用途的化合物，用于抑制新血管形成。
8.根据权利要求6所述的用于所述用途的化合物，用于治疗和/或预防癌症。
9.根据权利要求6所述的用于所述用途的化合物，用于治疗和/或预防眼科疾病。
10.根据权利要求9所述的用于所述用途的化合物，其中，所述眼科疾病选自湿性年龄相关性黄斑变性、视网膜脱落、后葡萄膜炎、角膜新血管形成、虹膜新血管形成、糖尿病性黄斑水肿和糖尿病性视网膜病变组成的组中。
11.根据权利要求9或10所述的用于所述用途的化合物，其中，所述治疗和/或预防包括通过玻璃体内注射给药所述化合物。
12.根据权利要求7至10中任一项所述的用于所述用途的化合物，其中，所述抑制、治疗或预防进一步包括给药结合血管内皮生长因子(VEGF)或VEGF受体并抑制血管内皮生长因子(VEGF)或VEGF受体活性的化合物。
13.一种组合，所述组合包括根据权利要求1至4中任一项所述的化合物；和一种结合血管内皮生长因子(VEGF)或VEGF受体并抑制血管内皮生长因子(VEGF)或VEGF受体活性的化合物。
14.根据权利要求13所述的组合，用于权利要求6至11中任一项所限定的用途。
15.一种抑制有需要的受试者的新血管形成的方法，所述方法包括向所述受试者给药权利要求1至4中任一项所述的化合物。
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