CN112795521B - 一株促生高地芽孢杆菌及其应用 - Google Patents

一株促生高地芽孢杆菌及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN112795521B
CN112795521B CN202110257419.5A CN202110257419A CN112795521B CN 112795521 B CN112795521 B CN 112795521B CN 202110257419 A CN202110257419 A CN 202110257419A CN 112795521 B CN112795521 B CN 112795521B
Authority
CN
China
Prior art keywords
zlb
bacillus altitudinis
growth
activity
plants
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202110257419.5A
Other languages
English (en)
Other versions
CN112795521A (zh
Inventor
刘芳
袁宗胜
林鸿艳
陈垚宇
肖航
曾志浩
陈新强
夏法刚
谢宝贵
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sichuan Qianyiding Technology Co ltd
Original Assignee
Fujian Agriculture and Forestry University
Minjiang University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Fujian Agriculture and Forestry University, Minjiang University filed Critical Fujian Agriculture and Forestry University
Priority to CN202110257419.5A priority Critical patent/CN112795521B/zh
Publication of CN112795521A publication Critical patent/CN112795521A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN112795521B publication Critical patent/CN112795521B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G22/00—Cultivation of specific crops or plants not otherwise provided for
    • A01G22/05—Fruit crops, e.g. strawberries, tomatoes or cucumbers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G22/00—Cultivation of specific crops or plants not otherwise provided for
    • A01G22/15—Leaf crops, e.g. lettuce or spinach 
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G7/00—Botany in general
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • A01N63/22—Bacillus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Ecology (AREA)
  • Forests & Forestry (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明提供一株促生高地芽孢杆菌及其应用，所述菌为高地芽孢杆菌（Bacillus altitudinis）ZLB‑C01，已于2020年10月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.20898。所述促生高地芽孢杆菌具有解磷解钾固氮的作用，可以在植物体内定殖，提高生物酶活性，对调节植物生长和发育具有重要的作用。

Description

一株促生高地芽孢杆菌及其应用
技术领域
本发明属于微生物技术领域，具体涉及一株促生高地芽孢杆菌及其应用。
背景技术
红树植物是生长在热带、亚热带海湾、河口和海岸受周期性海水浸淹的潮间带的一种特殊植被群落，是链接陆地生态系统和海洋生态系统的重要“生态屏障”。因其生境非常特殊，同时又具有海洋和陆地生态系统的特点，使得红树林内生菌具有独特的代谢途径和遗传背景，其种类和产物类型丰富多样。红树林特殊的生境决定了其丰富的微生物资源，蕴藏着不同于其他环境微生物来源的遗传资源。
植物是高度多样化、动态化的微生物的宿主，这些微生物对宿主有着重要的功能。植物相关的微生物可以保护宿主免受病原体和害虫侵袭，有助于植物利用营养，并提高植物抗逆性。植物内生细菌是指那些在其生活史的一定阶段或全部阶段生活于健康植物的各种组织和器官内部, 并与植物建立了和谐联合关系的细菌。植物内生细菌因其生态学优势，能在植物体内长期定殖、传导，且不易受环境条件的影响，对植物生长发育、抵抗疾病以及不良环境具有广泛的生物学作用，是非常难得的天然生物资源，在农业生产中具有良好的研究和开发潜力。
发明内容
本发明的目的在于提供一株促生高地芽孢杆菌及其应用。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一株促生高地芽孢杆菌，其分类命名为高地芽孢杆菌（Bacillus altitudinis）ZLB-C01，已于2020年10月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.20898，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
所述促生高地芽孢杆菌的菌落特征及菌体形态为：
将高地芽孢杆菌（Bacillus altitudinis）ZLB-C01在NA平板上培养24h后形成菌落颜色为乳白色，无光泽，呈圆形、无流动性，革兰氏染色阳性，有芽孢，无荚膜；菌落直径2-3mm。
所述促生高地芽孢杆菌的生理生化特征：
高地芽孢杆菌（Bacillus altitudinis）ZLB-C01 接触酶反应呈阴性，V．P测定呈阳性，MR测定呈阳性，葡萄糖产酸试验阴性，葡萄糖产气试验阴性，柠檬酸盐试验阴性，硝酸盐还原呈阳性，淀粉水解呈阴性，吲哚实验呈阴性，丙二酸测定呈阴性，产H2S试验试验阳性。
将所述促生高地芽孢杆菌的16S rDNA序列与GenBank数据库中的序列比对，结果表明: ZLB-C01与Bacillus altitudinis同处于一个分支上，其16S rDNA序列与Bacillus altitudinis（MW474842.1）的相似度达99.86%。结合菌落形态，生理生化特征和16S rDNA序列分析，鉴定为高地芽孢杆菌（Bacillus altitudinis）。
本发明的优点在于：
所述植物内生高地芽孢杆菌具有解磷解钾固氮的作用，可以在植物体内定殖，提高生物酶活性，对调节植物生长和发育具有重要的作用。
本发明所述促生高地芽孢杆菌制成菌剂通过灌根接种到植物幼苗，可以明显提高植物叶片叶绿素含量，提高过氧化氢酶(CAT)活性、过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)，与对照相比，差异显著。因此，本发明为将来开发植物专用的微生物菌剂菌肥提供了良好的菌株资源。
附图说明
图1 ZLB-C01处理后油菜叶片 SPAD值的变化。
图2 ZLB-C01处理后油菜叶片 CAT 活性的变化。
图3 ZLB-C01处理后油菜叶片POD活性的变化。
图4 ZLB-C01处理后油菜叶片SOD 活性的变化。
图5 ZLB-C01处理后对油菜生长的影响。
图6 ZLB-C01处理后上海青叶片 SPAD值的变化。
图7 ZLB-C01处理后上海青叶片 CAT 活性的变化。
图8 ZLB-C01处理后上海青叶片POD活性的变化。
图9 ZLB-C01处理后上海青叶片SOD 活性的变化。
图10 ZLB-C01处理后对上海青生长的影响。
具体实施方式
下面结合实例对本发明进一步说明。
一株促生高地芽孢杆菌，其分类命名为高地芽孢杆菌（Bacillus altitudinis）ZLB-C01，已于2020年10月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.20898。
实施例1 解磷解钾固氮高地芽孢杆菌的筛选
（1）筛选过程：
通过梯度稀释法，从福建漳州、泉州、宁德红树植物中分离出319株分离物。通过三区划线法对分离到的内生细菌进行纯化，并通过镜检判断菌株是否纯化，对纯化后的细菌进行编号，挑取单菌落，转移到NA斜面上保存备用。通过平板解磷解钾固氮效果测定，初步筛选出32株具有较好解磷解钾固氮效果的内生菌株，最终筛选出一株具有良好解磷解钾固氮效果的内生细菌，标记为ZLB-C01。
（2）菌落特征及菌落形态：
将ZLB-C01在NA平板上培养24h后形成菌落颜色为乳白色，无光泽，呈圆形、无流动性，革兰氏染色阳性，有芽孢，无荚膜；菌落直径4-5mm。
（3）生理生化特征：
ZLB-C01 接触酶反应呈阴性，V．P测定呈阳性，MR测定呈阳性，葡萄糖产酸试验阴性，葡萄糖产气试验阴性，柠檬酸盐试验阴性，硝酸盐还原呈阳性，淀粉水解呈阴性，吲哚实验呈阴性，丙二酸测定呈阴性，产H2S试验试验阳性。
（4）解磷解钾固氮能力测定：
将分离得到的内生细菌菌株分别接种到事先配制好的有机磷培养基、无机磷培养基、钾细菌培养基以及Ashby无氮培养基平板上，每皿4个接菌点，重复3次。28℃恒温培养 5d。分别观察并记录菌株生长情况及分解圈大小，根据分解圈大小、透明圈直径／菌落直径（Ｄ/ｄ值）确定内生细菌的解磷解钾固氮活性。分解圈越大、Ｄ/ｄ值越大，表示解磷解钾固氮活性越强。
其中，有机磷培养基： 葡萄糖 10g，(NH4)2 SO4 0.5g，NaCl 0.3g，KCl 0.3g，MnSO4 0.03g，FeSO4 0.03g，卵磷脂 0.2 g，CaCO3 5.0g，酵母膏 0.4 g，琼脂 20g，蒸馏水 1000mL，pH 7.0-7.2（液体培养基则不加琼脂）；
无机磷培养基：葡萄糖 10g，(NH4)2 SO4 0.5g，NaCl 0.3g，KCl 0.3g，MnSO4 0.03g，FeSO4 0.03g，MgSO4 0.3g，CaCO3 5.0g，Ca3(PO4)2 5.0g，酵母膏 0.4 g，琼脂 20g，蒸馏水1000 mL，pH 7.0-7.2（液体培养基则不加琼脂）；
钾细菌培养基：蔗糖10.0g，酵母膏 0.5 g ，(NH4)2SO4,1.0g，Na2HPO4 2.0g，MgSO4·7H2O 0.5g，CaCO3 1.0 g，钾长石粉 1g，琼脂 15g，蒸馏水 1000 mL，pH 7.0-7.2（液体培养基则不加琼脂）；
Ashby无氮培养基：蔗糖10.0g，酵母膏 0.5 g ，(NH4)2SO4,1.0g，Na2HPO4 2.0g，MgSO4·7H2O 0.5g，CaCO3 1.0 g，钾长石粉 1g，琼脂 15g，蒸馏水 1000 mL，pH 7.0-7.2（液体培养基则不加琼脂）。
通过测定，高地芽孢杆菌ZLB-C01解有机磷活性为“+++”，透明圈/菌落直径（D/d）为4.65±0.37，解无机磷活性为“++”，透明圈/菌落直径（D/d）为2.24±0.26，解钾活性为“++”，透明圈/菌落直径（D/d）为3.57±0.39。固氮活性为“+++”。
表1高效解磷解钾固氮菌株的初步筛选
Figure DEST_PATH_IMAGE001
注: D:透明圈直径 ，d:菌落直径 ，
“-”：无活性（分解圈＜10mm）；“+”：有活性（分解圈:10-15mm）；
“++”：较强活性（分解圈：16-20mm）；“+++”：很强活性（分解圈：＞20mm）；
将初筛中具有解磷解钾活性的菌株接种于NB培养基中，待菌悬液的浓度达到108cfu/ mL时，各取5mL菌悬液分别接种于100 mL有机磷液体培养基、无机磷液体培养基及钾细菌液体培养基中，每个处理重复3 次，同时设不接种为对照。28℃，160 r /min 培养7d后进行离心（４℃，10000 r/ min，15 min），取上清液采用钼锑抗比色法测定测定有效磷增量（扣除对照后的值），可溶性磷含量计算公式如下：P＝K×V/V1。式中，P为有效磷含量；Ｋ为标准曲线查得显色液的磷含量（mg/L）；V为显色时溶液定容的体积（mL）；V1为显色时吸取上清液的体积（mL）。用火焰光度法测定有效钾增量（扣除对照后的值）。
通过测定，高地芽孢杆菌ZLB-C01从0.2g/L卵磷脂中释放出的可溶性磷为63.43mg/L，是对照处理的37.53倍，差异显著（P＜0.05）；从5.0g/L磷酸三钙中释放出的可溶性磷为42.29 mg/L，是对照处理（0.82 mg/L）的51.57倍，差异显著（P＜0.05）。培养液中可溶性钾含量为22.9 mg/L，与对照差异显著。
表2 摇瓶法内生细菌解磷效果测定
Figure 336712DEST_PATH_IMAGE002
（5）16S rDNA序列分析
16S rDNA基因序列，见核苷酸序列表SEQ ID NO.1所示。将所测的16S rDNA序列与GenBank数据库中的序列比对，结果表明: ZLB-C01与Bacillus altitudinis 同处于一个分支上，其16S rDNA序列与Bacillus altitudinis（MW474842.1）的相似度达99.86%。结合菌落形态，生理生化特征和16S rDNA序列分析，鉴定为高地芽孢杆菌（Bacillus altitudinis）。
（6）内生定殖
将所述内生细菌菌株ZLB-C01通过利福平标记的方法，获得稳定的利福平标记抗性突变体菌株。在含300μg/ml 利福平（Rif）的NB培养基中，28 ℃，180 r·min-1 条件下振荡培养 72 h，用无菌水稀释制成含1×108cfu/mL 的菌悬液。通过灌根法及叶腋注射法接种油菜幼苗，并于接种后3 d和7 d分别取植物幼苗根、茎、叶部组织分离突变体菌株。测定结果表明，通过灌根法及叶腋注射处理第3 d及第7 d两种接种处理方法在植物的根、茎、叶部组织中均能回收到突变菌株，而对照中未分离到细菌，表明内生高地芽孢杆菌ZLB-C01可以在植物体内定殖，并可以传导与繁殖。
表3 灌根和注射法接种促生菌株在油菜植株体内的定殖分离结果
Figure DEST_PATH_IMAGE003
注：+表示可分离到细菌菌落。
实施例2 油菜盆栽实验
将高地芽孢杆菌（Bacillus altitudinis）ZLB-C01在NA斜面上活化，挑取一环接入NA培养基（牛肉膏3g，蛋白胨10g，Nacl 5g，琼脂18g，水1000ml，pH7.0-7.2）中，于28℃、180 r·min-1 条件下振荡培养72 h，培养液用无菌水稀释制成含1×108 cfu/mL的菌悬液做接种用。灌根接种油菜幼苗（接种量为20mL/株），每处理 10 株，3 次重复，以清水为对照。接种处理15d测定叶片叶绿素含量，并采集油菜叶片各5-10片，并充分混合作为一个混合样，用于过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）、超氧化物歧化酶(SOD)等指标的测定。
采用SPAD-502叶绿素快速测定仪（Minolta，Japan），选取10片植物叶片，分别在叶基、叶中、叶尖处测得SPAD值，求出每片叶的平均值，进行3个重复。用SPAD值表示叶片叶绿素相对值。
采用紫外分光光度法测定植物叶片过氧化氢酶（CAT）活性，参照愈创木酚法测定植物叶片过氧化物酶（POD）活性活性，参照氮蓝四唑(NBT)光还原法测定植物叶片超氧化物歧化酶(SOD)活性。
ZLB-C01对油菜叶片叶绿素含量的影响
从图1可以看出，经ZLB-C01注射接种处理15d，内生细菌ZLB-C01接种处理油菜叶片SPAD值与清水对照相比差异显著，ZLB-C01处理后的油菜叶片叶绿素含量增加。因叶绿素在光能吸收、传递和转换中起着重要的作用，叶绿素含量的增加能够提高植物的光合作用速率，从而促进其生长。
ZLB-C01对油菜叶片过氧化氢酶（CAT）活性的影响
由图2可以看出，ZLB-C01处理后的植物叶片过氧化氢酶活性高于清水对照处理，与对照处理之间差异显著。过氧化氢酶（CAT）是植物体内重要的酶促防御系统，可以清除H2O2，是植物体内重要的抗氧化酶。
ZLB-C01对油菜叶片过氧化物酶(POD)活性的影响
由图3 可以看出，ZLB-C01接种处理15d时POD活性明显高于清水对照处理，差异显著。表明内生细菌注射接种植物后可以提高植物叶片过氧化物酶（POD）活性，从而促进植物生长。
ZLB-C01对油菜叶片超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响
内生细菌ZLB-C01处理15 d后，油菜叶片SOD活性明显高于清水对照处理，差异显著（图4）。表明接种促生菌株后可以提高植物叶片的超氧化物歧化酶（SOD）活性。
ZLB-C01对油菜株高生长的影响
内生细菌ZLB-C01处理后，可以促进油菜幼苗株高的生长，与清水对照相比，差异显著（图5），表明接种促生菌株后可以提高植物生长发育。
实施例3 上海青盆栽实验
将高地芽孢杆菌（Bacillus altitudinis）ZLB-C01在NA斜面上活化，挑取一环接入NA培养基（牛肉膏3g，蛋白胨10g，Nacl 5g，琼脂18g，水1000ml，pH7.0-7.2）中，于28℃、180 r·min-1 条件下振荡培养72 h，培养液用无菌水稀释制成含1×108 cfu/mL的菌悬液做接种用。灌根接种上海青幼苗（接种量为20mL/株），每处理 10 株，3 次重复，以清水为对照。接种处理15d测定叶片叶绿素含量，并采集叶片各5-10片，并充分混合作为一个混合样，用于过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）、超氧化物歧化酶(SOD)等生理生化指标的测定。
采用SPAD-502叶绿素快速测定仪（Minolta，Japan），选取10片植物叶片，分别在叶基、叶中、叶尖处测得SPAD值，求出每片叶的平均值，进行3个重复。用SPAD值表示叶片叶绿素相对值。
采用紫外分光光度法测定植物叶片过氧化氢酶（CAT）活性，参照愈创木酚法测定植物叶片过氧化物酶（POD）活性活性，参照氮蓝四唑(NBT)光还原法测定植物叶片超氧化物歧化酶(SOD)活性。
ZLB-C01对上海青叶片叶绿素含量的影响
从图6可以看出，经ZLB-C01注射接种处理15d，内生细菌ZLB-C01接种处理上海青叶片SPAD值与清水对照相比差异显著，ZLB-C01处理后的上海青叶片叶绿素含量增加。因叶绿素在光能吸收、传递和转换中起着重要的作用，叶绿素含量的增加能够提高植物的光合作用速率，从而促进其生长。
ZLB-C01对上海青叶片过氧化氢酶（CAT）活性的影响
由图7可以看出，ZLB-C01处理后的植物叶片过氧化氢酶活性高于清水对照处理，与对照处理之间差异显著。过氧化氢酶（CAT）是植物体内重要的酶促防御系统，可以清除H2O2，是植物体内重要的抗氧化酶。
ZLB-C01对上海青叶片过氧化物酶(POD)活性的影响
由图8 可以看出，ZLB-C01接种处理15d时POD活性明显高于清水对照处理，差异显著。表明内生细菌注射接种植物后可以提高植物叶片过氧化物酶（POD）活性，从而促进植物生长。
ZLB-C01对上海青叶片超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响
内生细菌ZLB-C01处理15 d后，上海青叶片SOD活性明显高于清水对照处理，差异显著（图9）。表明接种促生菌株后可以提高植物叶片的超氧化物歧化酶（SOD）活性。
ZLB-C01对上海青株高生长的影响
内生细菌ZLB-C01处理后，可以促进上海青幼苗株高的生长，与清水对照相比，差异显著（图10），表明接种促生菌株后可以提高植物生长发育。
实施例4 内生细菌ZLB-C01对草莓生长的作用效果
将高地芽孢杆菌（Bacillus altitudinis）ZLB-C01在NA斜面上活化，挑取一环接入NA培养基（牛肉膏3g，蛋白胨10g，Nacl 5g，琼脂18g，水1000ml，pH7.0-7.2）中，于28℃、180 r·min-1 条件下振荡培养72 h，培养液用无菌水稀释制成含1×108 cfu/mL的菌悬液做接种用。选取温室大棚内移栽1个月左右的草莓幼苗，施用高地芽孢杆菌ZLB-C01菌液灌根接种草莓幼苗（接种量为20mL/株），每处理 30 株，3 次重复，30天后再次灌根施用以上菌液。以清水处理的草莓为对照，60天后调查结果。试验结果表明，与清水对照组相比，接种高地芽孢杆菌ZLB-C01菌液处理的草莓长势强壮，叶片大而浓绿；花蕾、开花数量处理与对照偏少，新枝微多；坐果数明显高于对照，且坐果早而大，坐果数增幅为13.85%，草莓糖份提高了0.5，增幅为4.35%。
表4 ZLB-C01对草莓生长的作用效果
Figure 391868DEST_PATH_IMAGE004
实施例5 ZLB-C01对黄瓜生长的作用效果
将高地芽孢杆菌（Bacillus altitudinis）ZLB-C01在NA斜面上活化，挑取一环接入NA培养基（牛肉膏3g，蛋白胨10g，Nacl 5g，琼脂18g，水1000ml，pH7.0-7.2）中，于28℃、180 r·min-1 条件下振荡培养72 h，培养液用无菌水稀释制成含1×108 cfu/mL的菌悬液做接种用。选取温室大棚内长势均匀，四叶一心的黄瓜秧苗各20m2，分别作为试验组与对照组，各组内黄瓜秧苗株数相同。将高地芽孢杆菌ZLB-C01菌液稀释30倍后喷施叶面，15天后灌根施用接种黄瓜秧苗（接种量为20mL/株），以清水处理作为对照。待开始收获时，连续15天统计黄瓜产量、发病率等。试验结果表明，与清水对照组相比，高地芽孢杆菌ZLB-C01菌液处理的黄瓜长势强壮，叶色浓绿；黄瓜瓜形均匀，产量明显高于对照，产量增幅10.09%；发病率降低78.38%。
表5微生物菌剂对黄瓜生长的作用效果
Figure DEST_PATH_IMAGE005
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。
SEQUENCE LISTING
<110> 福建农林大学
<120> 一株促生高地芽孢杆菌及其应用
<130> 1
<160> 1
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 1434
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 1
ctatactgca gtcgagcgga cagaagggag cttgctcccg gatgttagcg gcggacgggt 60
gagtaacacg tgggtaacct gcctgtaaga ctgggataac tccgggaaac cggagctaat 120
accggatagt tccttgaacc gcatggttca aggatgaaag acggtttcgg ctgtcactta 180
cagatggacc cgcggcgcat tagctagttg gtgaggtaac ggctcaccaa ggcgacgatg 240
cgtagccgac ctgagagggt gatcggccac actgggactg agacacggcc cagactccta 300
cgggaggcag cagtagggaa tcttccgcaa tggacgaaag tctgacggag caacgccgcg 360
tgagtgatga aggttttcgg atcgtaaagc tctgttgtta gggaagaaca agtgcaagag 420
taactgcttg caccttgacg gtacctaacc agaaagccac ggctaactac gtgccagcag 480
ccgcggtaat acgtaggtgg caagcgttgt ccggaattat tgggcgtaaa gggctcgcag 540
gcggtttctt aagtctgatg tgaaagcccc cggctcaacc ggggagggtc attggaaact 600
gggaaacttg agtgcagaag aggagagtgg aattccacgg tgtagcggtg aaatgcgtag 660
agatgtggag gaacaccagt ggcgaaggcg actctctggt ctgtaactga cgctgaggag 720
cgaaagcgtg gggagcgaac aggattagat accctggtag tccacgccgt aaacgatgag 780
tgctaagtgt tagggggttt ccgcccctta gtgctgcagc taacgcatta agcactccgc 840
ctggggagta cggtcgcaag actgaaactc aaaggaattg acgggggccc gcacaagcgg 900
tggagcatgt ggtttaattc gaagcaacgc gaagaacctt accaggtctt gacatcctct 960
gacaacccta gagatagggc tttcccttcg gggacagagt gacaggtggt gcatggttgt 1020
cgtcagctcg tgtcgtgaga tgttgggtta agtcccgcaa cgagcgcaac ccttgatctt 1080
agttgccagc attcagttgg gcactctaag gtgactgccg gtgacaaacc ggaggaaggt 1140
ggggatgacg tcaaatcatc atgcccctta tgacctgggc tacacacgtg ctacaatgga 1200
cagaacaaag ggctgcgaga ccgcaaggtt tagccaatcc cacaaatctg ttctcagttc 1260
ggatcgcagt ctgcaactcg actgcgtgaa gctggaatcg ctagtaatcg cggatcagca 1320
tgccgcggtg aatacgttcc cgggccttgt acacaccgcc cgtcacacca cgagagtttg 1380
caacacccga agtcggtgag gtaaccttta tggagccagc cgccgaaggg ggac 1434

Claims (5)

1.一株促生高地芽孢杆菌 ，其特征在于：所述菌为高地芽孢杆菌（Bacillus altitudinis）ZLB-C01，已于2020年10月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.20898。
2.含权利要求1所述促生高地芽孢杆菌的生物菌剂。
3.如权利要求1所述的促生高地芽孢杆菌在解磷解钾固氮中的应用。
4.如权利要求1所述的促生高地芽孢杆菌在促进植物光合作用中的应用。
5.如权利要求1所述的促生高地芽孢杆菌在提高植物酶活性中的应用，所述酶为过氧化氢酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶中的一种或多种。
CN202110257419.5A 2021-03-10 2021-03-10 一株促生高地芽孢杆菌及其应用 Active CN112795521B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110257419.5A CN112795521B (zh) 2021-03-10 2021-03-10 一株促生高地芽孢杆菌及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110257419.5A CN112795521B (zh) 2021-03-10 2021-03-10 一株促生高地芽孢杆菌及其应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN112795521A CN112795521A (zh) 2021-05-14
CN112795521B true CN112795521B (zh) 2022-04-05

Family

ID=75816824

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110257419.5A Active CN112795521B (zh) 2021-03-10 2021-03-10 一株促生高地芽孢杆菌及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN112795521B (zh)

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110791442A (zh) * 2019-06-13 2020-02-14 山东省林业科学研究院 一种具有解磷功能的高地芽孢杆菌及其应用
CN111100818B (zh) * 2020-01-10 2023-05-12 新疆根力多生物科技有限公司 高地芽孢杆菌swy137及其应用
CN112322518B (zh) * 2020-10-15 2022-02-01 华南农业大学 一株具有解钾作用的高山芽孢杆菌及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN112795521A (zh) 2021-05-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106754557B (zh) 枯草芽孢杆菌ybm-4及其在防治烟草黑胫病和促生长中的应用
CN112877255B (zh) 一株贝莱斯芽孢杆菌及其应用
CN107136122B (zh) 一种防治马铃薯晚疫病的生防菌剂
CN111690578B (zh) 一株耐盐碱暹罗芽孢杆菌及其活菌制剂的生产方法与应用
CN110076193B (zh) 黎巴嫩假单胞菌株my及其在重金属污染盐渍土壤修复中的应用
US20230088888A1 (en) Phosphorus-dissolving bacterium rbc25 regulated by phosphate deficiency and application thereof
CN118064325B (zh) 一种具有促进坛紫菜丝状体孢子囊枝形成功效的嗜温粘杆菌
CN114032182B (zh) 一株兼具拮抗大蒜根腐病病原菌和促生功能的真菌
CN115873747A (zh) 一株具有广谱抑菌活性的贝莱斯芽孢杆菌及其应用
CN108504608B (zh) 一株内生解磷解钾固氮乙酸钙不动杆菌及其应用
CN109112072B (zh) 一种木霉菌在促进植物生长中的应用
CN108913625B (zh) 耐盐链霉菌、其菌剂及其菌剂在促进植物生长中的应用
CN111019872B (zh) 一株内生解淀粉芽孢杆菌jl-b06及其应用
CN106929433B (zh) 解磷青霉菌及其应用
CN108587959B (zh) 一株毛竹内生解磷解钾固氮产气肠杆菌及其应用
CN111139206B (zh) 一种促生复合内生菌剂及其应用
CN116218720B (zh) 一株绿针假单胞菌pck02及其获取方法与应用
CN116463220B (zh) 一株促进蓝莓生长的深色有隔dse真菌及其应用
CN114752538B (zh) 具有土壤改良功能的油茶内生放线菌及其应用
CN115851447B (zh) 一株促进杉木植株磷吸收的内生胶孢炭疽菌s28
CN112795521B (zh) 一株促生高地芽孢杆菌及其应用
CN113234601B (zh) 一株海洋真菌新种及其在植物抗干旱胁迫中的应用
CN115725445A (zh) 一株多粘类芽孢杆菌及其悬浮液和应用
CN116240126A (zh) 一株多功能贝莱斯芽孢杆菌sb10及其应用
CN112877254B (zh) 一株内生克什米尔小陌生菌及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20220223

Address after: No. 15, Cangshan District, Fujian, Fuzhou, Fujian

Applicant after: FUJIAN AGRICULTURE AND FORESTRY University

Applicant after: Minjiang University

Address before: No. 15, Cangshan District, Fujian, Fuzhou, Fujian

Applicant before: FUJIAN AGRICULTURE AND FORESTRY University

TA01 Transfer of patent application right
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20241010

Address after: No. 2106, 21st Floor, Unit 1, Building 9, No. 1700, North Tianfu Avenue, Chengdu High tech Zone, China (Sichuan) Pilot Free Trade Zone, Chengdu City, Sichuan Province, China 611633

Patentee after: Sichuan qianyiding Technology Co.,Ltd.

Country or region after: China

Address before: No. 15, Cangshan District, Fujian, Fuzhou, Fujian

Patentee before: FUJIAN AGRICULTURE AND FORESTRY University

Country or region before: China

Patentee before: MINJIANG University