CN112790102B - 一种促进海黍子中褐藻多酚高效积累的处理方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种促进海黍子中褐藻多酚高效积累的处理方法。本发明包括以下步骤：1)取天然海水，盐度30‑32‰，pH值7.5‑8.0；2)取海黍子，采用天然海水清洗，去除泥沙和杂质；3)在天然海水中添加蒸馏水或氯化钠制成培养液，培养液盐度20‑25‰或者35‑40‰，将海黍子置于培养液中充气培育，于12‑16℃下培育0.5‑8h，光照强度60‑80μmol/(m2·s)，光周期12L:12D‑8L:16D。本发明可以在短时间内显著提高海黍子中褐藻多酚的含量，提取价值高，操作简单，便于实现，成本低，适于批量处理和工厂化生产，不仅为褐藻多酚的高效提取提供了技术手段，也为海黍子的开发利用提供了参考。
Description
技术领域
本发明属于海黍子培育处理的技术领域，特别是指一种促进海黍子中褐藻多酚高效积累的处理方法。
背景技术
褐藻多酚(phlorotannins)是发现于褐藻且仅存于褐藻中的一族天然产物，是海洋褐藻中重要的活性次级代谢产物。化学结构上，褐藻多酚是一类以间苯三酚为基础骨架的独特的多酚类化合物，其聚合度可以几个至几百个，具有抗氧化、抗菌、抗病毒、治疗心血管疾病、抗糖尿病综合症、保肝以及抑制赖氨酸激酶等多种生物活性，是重要的药用和食用资源。褐藻多酚因其潜在的生物活性已被广泛应用于食品、药品及化妆品等多个产业。
海黍子(Sargassum muticum)属于褐藻门、墨角藻目、马尾藻科、马尾藻属，是我国沿海常见的经济海藻。海黍子的藻体长、生长快、适应环境能力强，是海洋生态环境修复的理想生物材料，而且，可用于提取褐藻胶、甘露醇、碘等工业原料，还可以提取褐藻多酚和褐藻多糖等活性物质。研究表明海黍子中多酚类物质含量达干重的2.8％，因此，海黍子是提取褐藻多酚的优质资源，具有广泛的应用前景。现有技术中从海黍子中提取褐藻多酚的方法通常是将采集到的海黍子立即处理并提取褐藻多酚，这种方法提取的褐藻多酚收率低，造成了资源浪费。
发明内容
本发明的目的是提供一种促进海黍子中褐藻多酚高效积累的处理方法，旨在解决现有技术中从海黍子中提取褐藻多酚的方法存在收率低从而造成资源浪费的问题。
为了解决上述技术问题，本发明主要是通过以下技术方案加以实现的：
在一个方面，本发明的一种促进海黍子中褐藻多酚高效积累的处理方法，包括以下步骤：1)取天然海水，天然海水的盐度为30-32‰，天然海水的pH值为7.5-8.0，备用；2)取海黍子，采用步骤1)所述的天然海水清洗，去除泥沙和杂质；3)在步骤1)所述的天然海水中添加蒸馏水或氯化钠制成培养液，将步骤2)所得的海黍子置于培养液中充气培育，培养液的盐度为20-25‰或者35-40‰，于12-16℃下培育0.5-8h，培育过程中，光照强度为60-80μmol/(m2·s)，光周期为12L:12D-8L:16D。
本发明将采集来的海黍子首先利用天然海水反复清洗，去除泥沙和杂质，这种海黍子优选为植株高大、藻体健壮、无杂藻附着且分枝粗壮的藻体，然后，在由天然海水配制的培养液中充气培育，控制培育过程中培养液的盐度、培育温度、光照强度、光照周期和培育时间，可以显著提高海黍子中的褐藻多酚的含量；经过这种方法处理后的海黍子在进行褐藻多酚提取时，所得褐藻多酚的含量得到了明显提升，提取价值高。这种方法操作简单，便于实现，成本低，周期短，适于批量处理和工厂化生产，不仅为褐藻多酚的高效提取提供了技术手段，也为海黍子的开发利用提供了参考。
作为一种优选的实施方案，所述步骤3)中，培养液的盐度为20‰，培育时间为0.5-1h。本发明中培养液的盐度较天然海水的盐度低时，海黍子的生长环境得到了改变，从而促进海黍子内褐藻多酚快速高效的积累。通常情况下，培养液的盐度为20‰时，很短的时间内，海黍子藻体内褐藻多酚含量就可以得到显著提高。
作为一种优选的实施方案，所述步骤3)中，培养液的盐度为25‰，培育时间为5-6h。本发明中培养液的盐度为25‰时，培育的时间适当延长，海黍子内褐藻多酚也可以得到显著提高。
作为一种优选的实施方案，所述步骤3)中，培养液的盐度为35‰，培育时间为3.8-4.2h。本发明中培养液的盐度较天然海水的盐度高时，海黍子的生长环境也得到了改变，也会促进海黍子内褐藻多酚快速高效的积累。通常情况下，培养液的盐度为35‰时，培育4h左右，海黍子内褐藻多酚就可以得到显著提高。
作为一种优选的实施方案，所述处理方法处理后的海黍子中褐藻多酚的含量提高率为11.32-65.33％。本发明的方法处理的海黍子褐藻多酚的含量较普通的海黍子中褐藻多酚的含量得到了很大的提高，提高率在11.32-65.33％之间，具有明显的经济效益。
作为一种优选的实施方案，所述处理方法处理后的海黍子中褐藻多酚的含量提高率为41.26-65.33％。本发明的方法处理的海黍子褐藻多酚的含量较普通的海黍子中褐藻多酚的含量的提高率可以达41.26-65.33％，此时，海黍子中褐藻多酚得到了较大的提高，实现了海黍子中褐藻多酚快速高效积累。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明将采集来的海黍子首先利用天然海水反复清洗，去除泥沙和杂质，然后，在由天然海水配制的培养液中充气培育，控制培育过程中培养液的盐度、培育温度、光照强度、光照周期和培育时间，可以显著提高海黍子中的褐藻多酚的含量；经过这种方法处理后的海黍子再进行褐藻多酚提取时，所得褐藻多酚的含量得到了明显提升，提取价值高。这种方法操作简单，便于实现，成本低，周期短，适于批量处理和工厂化生产，不仅为褐藻多酚的高效提取提供了技术手段，也为海黍子的开发利用提供了参考。
具体实施方式
下面将结合本发明的具体实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明的一种促进海黍子中褐藻多酚高效积累的处理方法，包括以下步骤：
1)取天然海水，天然海水的盐度为30-32‰，天然海水的pH值为7.5-8.0，备用；
2)取海黍子，采用步骤1)所述的天然海水清洗，去除泥沙和杂质；
3)在步骤1)所述的天然海水中添加蒸馏水或氯化钠制成培养液，将步骤2)所得的海黍子置于培养液中充气培育，培养液的盐度为20-25‰或者35-40‰，于12-16℃下培育0.5-8h，培育过程中，光照强度为60-80μmol/(m2·s)，光周期为12L:12D-8L:16D。
优选地，所述步骤3)中，培养液的盐度为20‰，培育时间为0.5-1h。
优选地，所述步骤3)中，培养液的盐度为25‰，培育时间为5-6h。
优选地，所述步骤3)中，培养液的盐度为35‰，培育时间为3.8-4.2h。
优选地，所述处理方法处理后的海黍子中褐藻多酚的含量提高率为11.32-65.33％。
进一步地，所述处理方法处理后的海黍子中褐藻多酚的含量提高率为41.26-65.33％。
实施例一
本发明的一种促进海黍子中褐藻多酚高效积累的方法，包括以下步骤：
1)取天然海水，天然海水的盐度为30‰，天然海水的pH值为7.5，备用；
2)取海黍子，采用步骤1)所述的天然海水清洗，去除泥沙和杂质；
3)在步骤1)所述的天然海水中添加蒸馏水制成培养液，将步骤2)所得的海黍子置于培养液中充气培育，培养液的盐度为20‰，于12℃下培育1h，培育过程中，光照强度为60μmol/(m2·s)，光周期为12L:12D。
实施例二
本发明的一种促进海黍子中褐藻多酚高效积累的处理方法，包括以下步骤：
1)取天然海水，天然海水的盐度为32‰，天然海水的pH值为8.0，备用；
2)取海黍子，采用步骤1)所述的天然海水清洗，去除泥沙和杂质；
3)在步骤1)所述的天然海水中添加蒸馏水制成培养液，将步骤2)所得的海黍子置于培养液中充气培育，培养液的盐度为25‰，于16℃下培育6h，培育过程中，光照强度为80μmol/(m2·s)，光周期为8L:16D。
实施例三
本发明的一种促进海黍子中褐藻多酚高效积累的处理方法，包括以下步骤：
1)取天然海水，天然海水的盐度为30.5‰，天然海水的pH值为7.8，备用；
2)取海黍子，采用步骤1)所述的天然海水清洗，去除泥沙和杂质；
3)在步骤1)所述的天然海水中添加氯化钠制成培养液，将步骤2)所得的海黍子置于培养液中充气培育，培养液的盐度为35‰，于15℃下培育4h，培育过程中，光照强度为70μmol/(m2·s)，光周期为12L:12D。
实施例四
本发明的一种促进海黍子中褐藻多酚高效积累的处理方法，包括以下步骤：
1)取天然海水，天然海水的盐度为30.5‰，天然海水的pH值为7.5，备用；
2)取海黍子，采用步骤1)所述的天然海水清洗，去除泥沙和杂质；
3)在步骤1)所述的天然海水中添加氯化钠制成培养液，将步骤2)所得的海黍子置于培养液中充气培育，培养液的盐度为40‰，于15℃下培育1h，培育过程中，光照强度为60μmol/(m2·s)，光周期为12L:12D。
实施例五
本发明的一种促进海黍子中褐藻多酚高效积累的处理方法，包括以下步骤：
1)取天然海水，天然海水的盐度为30.5‰，天然海水的pH值为7.5，备用；
2)取海黍子，采用步骤1)所述的天然海水清洗，去除泥沙和杂质；
3)在步骤1)所述的天然海水中添加蒸馏水制成培养液，将步骤2)所得的海黍子置于培养液中充气培育，培养液的盐度为20‰，于15℃下培育0.5h，培育过程中，光照强度为60μmol/(m2·s)，光周期为12L:12D。
实施例六
本发明的一种促进海黍子中褐藻多酚高效积累的处理方法，包括以下步骤：
1)取天然海水，天然海水的盐度为30.5‰，天然海水的pH值为7.5，备用；
2)取海黍子，采用步骤1)所述的天然海水清洗，去除泥沙和杂质；
3)在步骤1)所述的天然海水中添加蒸馏水制成培养液，将步骤2)所得的海黍子置于培养液中充气培育，培养液的盐度为20‰，于15℃下培育8h，培育过程中，光照强度为60μmol/(m2·s)，光周期为12L:12D。
实施例七
本发明的一种促进海黍子中褐藻多酚高效积累的处理方法，包括以下步骤：
1)取天然海水，天然海水的盐度为30.5‰，天然海水的pH值为7.5，备用；
2)取海黍子，采用步骤1)所述的天然海水清洗，去除泥沙和杂质；
3)在步骤1)所述的天然海水中添加蒸馏水制成培养液，将步骤2)所得的海黍子置于培养液中充气培育，培养液的盐度为25‰，于15℃下培育4h，培育过程中，光照强度为60μmol/(m2·s)，光周期为12L:12D。
将实施例一至实施例七所得的七份处理后的海黍子以及现场刚采集来的用于得到这七份处理后海黍子的原料——海黍子(即对照样)于60℃烘干，采用粉碎机打成均匀的粉末。取0.1g藻干粉，加入3mL 15％的乙醇浸泡48h；置于功率为700MHz的微波炉中，加热10s。然后，于4000r/min的离心机上离心15min，取上清液，定容至3mL，得到褐藻多酚待测液。取0.5mL褐藻多酚待测液，加水稀释至7mL，加入1mL Folin-Denis试剂摇匀，3min后，加入2mL饱和碳酸钠溶液，充分混合，于710nm处测定吸光值。采用间苯三酚标准液按上述方法做出标准曲线，待测液测得的710nm处吸光值代入标准曲线公式中，求得褐藻多酚含量，实验结果列入表1。
表1海黍子处理前后褐藻多酚含量测定结果
由表1可以看出，本发明的方法所得的海黍子中褐藻多酚含量为0.777-1.154mg/g，然而，未经处理的海黍子中褐藻多酚含量仅为0.698mg/g，因此，本发明的方法所得海黍子中褐藻多酚含量明显提高。与未经处理的海黍子中褐藻多酚含量相比，本发明的方法所得的海黍子中褐藻多酚的含量提高率为11.32-65.33％，因此，本发明的方法在短时间内显著提高了海黍子中褐藻多酚的含量。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明将采集来的海黍子首先利用天然海水反复清洗，去除泥沙和杂质，然后，在由天然海水配制的培养液中充气培育，控制培育过程中培养液的盐度、培育温度、光照强度、光照周期和培育时间，可以显著提高海黍子中的褐藻多酚的含量；经过这种方法处理后的海黍子再进行褐藻多酚提取时，所得褐藻多酚的含量得到了明显提升，提取价值高。这种方法操作简单，便于实现，成本低，周期短，适于批量处理和工厂化生产，不仅为褐藻多酚的高效提取提供了技术手段，也为海黍子的开发利用提供了参考。
Claims (2)
1.一种促进海黍子中褐藻多酚高效积累的处理方法，其特征在于，由以下步骤组成：
1）取天然海水，天然海水的盐度为32‰，天然海水的pH值为8.0，备用；
2）取海黍子，采用步骤1）所述的天然海水清洗，去除泥沙和杂质；
3）在步骤1）所述的天然海水中添加蒸馏水制成培养液，将步骤2）所得的海黍子置于培养液中充气培育，培养液的盐度为25‰，于16℃下培育6h，培育过程中，光照强度为80 μmol/(m2·s)，光周期为8L:16D。
2.根据权利要求1所述的促进海黍子中褐藻多酚高效积累的处理方法，其特征在于：
所述处理方法处理后的海黍子中褐藻多酚的含量提高率为65.33%。
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