CN112725207A - 异常威克汉姆酵母、利用其制备的微生物菌剂及应用 - Google Patents

异常威克汉姆酵母、利用其制备的微生物菌剂及应用 Download PDF

Info

Publication number
CN112725207A
CN112725207A CN202110227736.2A CN202110227736A CN112725207A CN 112725207 A CN112725207 A CN 112725207A CN 202110227736 A CN202110227736 A CN 202110227736A CN 112725207 A CN112725207 A CN 112725207A
Authority
CN
China
Prior art keywords
yeast
strain
cgmcc
abnormal
culture
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202110227736.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN112725207B (zh
Inventor
王占武
王旭
胡栋
朱德富
彭杰丽
张翠绵
贾楠
马佳
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
INSTITUTE OF AGRICULTURAL RESOURCES AND ENVIRONMENT HEBEI ACADEMY OF AGRICULTURE AND FORESTRY SCIENCES
Original Assignee
Institute Of Genetics And Physiology Hebei Academy Of Agriculture And Forestry Sciences (hebei Agricultural Product Quality Safety Research Center Of Agriculture And Forestry Academy)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Institute Of Genetics And Physiology Hebei Academy Of Agriculture And Forestry Sciences (hebei Agricultural Product Quality Safety Research Center Of Agriculture And Forestry Academy) filed Critical Institute Of Genetics And Physiology Hebei Academy Of Agriculture And Forestry Sciences (hebei Agricultural Product Quality Safety Research Center Of Agriculture And Forestry Academy)
Priority to CN202110227736.2A priority Critical patent/CN112725207B/zh
Publication of CN112725207A publication Critical patent/CN112725207A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN112725207B publication Critical patent/CN112725207B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D53/00—Separation of gases or vapours; Recovering vapours of volatile solvents from gases; Chemical or biological purification of waste gases, e.g. engine exhaust gases, smoke, fumes, flue gases, aerosols
    • B01D53/34—Chemical or biological purification of waste gases
    • B01D53/46—Removing components of defined structure
    • B01D53/54—Nitrogen compounds
    • B01D53/58—Ammonia
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D53/00—Separation of gases or vapours; Recovering vapours of volatile solvents from gases; Chemical or biological purification of waste gases, e.g. engine exhaust gases, smoke, fumes, flue gases, aerosols
    • B01D53/34—Chemical or biological purification of waste gases
    • B01D53/74—General processes for purification of waste gases; Apparatus or devices specially adapted therefor
    • B01D53/84—Biological processes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
    • C02F3/34—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
    • C02F3/347—Use of yeasts or fungi
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/16—Yeasts; Culture media therefor
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D2251/00—Reactants
    • B01D2251/95—Specific microorganisms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2103/00—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated
    • C02F2103/20—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated from animal husbandry
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2303/00—Specific treatment goals
    • C02F2303/02—Odour removal or prevention of malodour
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/20—Air quality improvement or preservation, e.g. vehicle emission control or emission reduction by using catalytic converters

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Environmental & Geological Engineering (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Water Supply & Treatment (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Hydrology & Water Resources (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明提供了一株具有广谱除臭产香功能的异常威克汉姆酵母Wickerh amomyces anomalus CGMCC No.206548，该菌株可在20℃～40℃下生长，最适温度为28～35℃，最适的pH为6.0～6.5。生长周期中延迟期短，增殖速度快，能快速进入对数期，培养30小时后进入稳定期，培养到54小时后逐渐进入衰退期。喷洒含有该菌种的发酵液或菌剂第四天猪舍氨浓度显著降低，投放污水中后7天氨气释放量明显减少，可以有效改善场区环境臭味。具有除臭、产香、避蝇蚊、抑菌等多种功效，对于净化养殖环境效果显著，安全无害且具有广阔的应用前景。

Description

异常威克汉姆酵母、利用其制备的微生物菌剂及应用
技术领域
本发明涉及微生物菌种及其应用，特别是指一种异常威克汉姆酵母、利用其制备的微生物菌剂及应用。
背景技术
随着养殖业向规模化、集约化发展，畜禽养殖对生态环境带来了巨大压力。畜禽养殖场产生的恶臭气体不仅污染周边环境，而且会影响畜禽和饲养人员的健康，成为高效绿色养殖的主要限制因素。造成畜禽养殖业恶臭的物质种类繁多，成分复杂，已经鉴定出来的即有三百多种，其中氨气更是畜禽养殖臭气的首恶，有研究表明年出栏1万头的猪场日氨气产生量达1.6kg以上，长期接触氨气可造成人和牲畜的呼吸黏膜损伤，引发呼吸道等多种疾病。
当前畜禽粪便臭气治理有物理方法、化学方法和生物方法等。生物除臭法是20世纪50年代发展起来的一种治理恶臭污染的方法，该方法是利用微生物的生理代谢活动来降解恶臭物质使之转化为无臭物质，具有处理效率高、无二次污染、便于操作、费用低廉等特点，已成为国内外恶臭防治研究与应用中的主要方法。《畜禽场环境质量标准》(NY/T388～1999)对养殖场的氨浓度提出了明确的量化指标要求。
目前国内外市场上的生物除臭产品普遍存在菌种低效、有效菌数虚高等问题。因此获得高效除臭微生物菌株，是建立生物除臭技术，研发除臭菌剂产品的基础和关键，对解决养殖场等场所臭味对人体和环境的危害，实现美丽乡村建设具有重要意义。
经申请人查询，国内专利数据库中公开的对于除臭效果的文献主要采用复合菌剂，从目前文献报道公开内容看采用单一菌株制备的微生物菌剂功能单一，除臭效果整体上不如复合菌剂。
申请人检索的背景文献包括：
申请号为201910395208.0的发明专利申请公开说明书中公开了一种复合生物除臭菌剂的制备方法，该复合生物除臭菌剂由高效除氨菌株乳酸菌和酵母菌经特殊发酵工艺浓缩制成，总活菌数大于2×109cfu/mL。将制备的复合菌剂喷洒到鸡舍后，氨气降低率达到70％，单一酵母菌株的菌剂喷洒到鸡舍后，氨气降低率为42.1％。上述现有技术存在的问题一是未公开乳酸菌及酵母菌的具体分类命名，就申请人了解的范围而言，从微生物分类学的角度看，乳酸菌及酵母菌均为一类而并非单一品种，其中具体分别包括数百种，每种菌的菌落形态、生长环境、代谢产物各不相同甚至有的差异明显，因此本领域技术人员无法预测在未知具体生产菌种的情况下采用相对固定的发酵培养基及发酵条件能够实现上述技术效果；二是除臭效果中未说明是喷洒除臭菌剂后多长时间内的检测结果。
申请号为201911192874.0的发明专利申请公开说明书中公开了一种复合微生物除臭菌剂及其使用方法，复合微生物除臭菌剂包括贝莱斯芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母菌和干酪乳杆菌，将该菌剂添加到猪粪中，氨气的降低率为63％。该现有技术存在的技术缺陷是菌种为复合菌种，相比纯种发酵而言难于实现对发酵液中有效物质的准确控制。
发明内容
本发明的目的之一是提供拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus，保藏编号为CGMCC No.20654的异常威克汉姆酵母，该菌种具有广谱除臭产香功能。
本发明中的菌种从生猪养殖粪污中分离获得的，该菌株于2020年9月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，分类命名为异常威克汉姆酵母(Wickerhamomyces anomalus)，保藏编号CGMCC No.20654，保藏机构地址位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所(简称CGMCC)。
该菌种的菌落形态及生理生化特性如下：
该菌株在YPD培养基平皿上培养，菌落呈圆屋顶状，灰白色，不透明，表面平滑，边缘较整齐，粘稠；单细胞为椭圆形或纺锤形，个体大，单一或聚集分布。菌株的生理生化特征如表1，通过菌株形态学特征、生理生化特征和16S rRNA序列分析，该菌株被鉴定为异常威克汉姆酵母菌，其拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus。
菌株的生长特征如下：
拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus的异常威克汉姆酵母CGMCC No.20654，可以在20℃～40℃下生长，最适温度为28～35℃，兼性厌氧，最适的pH为6.0～6.5。生长周期中延迟期短，增殖速度快，能快速进入对数期(6～30小时)，培养30小时后进入稳定期(30～54小时)，培养到54小时后逐渐进入衰退期。
表1异常威克汉姆酵母菌(Wickerhamomyces anomalus)的生理生化实验
项目 结果 项目 结果
糖发酵 麦芽糖 +
葡萄糖 + 蔗糖 +
麦芽糖 + 乳糖 -
蔗糖 + 淀粉 +
乳糖 - 蜜二糖 -
半乳糖 + 棉籽糖 +
蜜二糖 - 假菌丝 无
棉籽糖 + 类淀粉化合物 -
碳源同化实验 硝酸盐 +
阿拉伯糖 - 气味 浓郁果香味
注：“+”表示阳性或生长；“-”表示不生长或阴性。
该菌株的筛选方法如下：
1、菌株的分离
将采集的样品各取10g，放入到含有灭菌玻璃珠和50ml生理盐水的三角瓶中，于30℃、160转/分钟的转速下震荡2小时，静置20分钟，取上清液1ml，用无菌水稀释成10～4～10～6等不同浓度梯度，吸取不同稀释度悬液100μl涂布在YPD琼脂培养基上，30℃培养48小时，离出酵母菌47株。
2.菌株的初筛
取10mL NH3选择性培养基装于PA瓶中，高压灭菌后注入10μL体积百分比浓度为25％的氨水，将分离得到的菌株接种至培养基，在摇床上30℃、160转/分钟培养48小时，按体积百分比为3％接种量接种至PA瓶中，于30℃、160转/分钟摇床上恒温培养，观察菌液变化，若菌液浑浊表明该菌株具有利用NH3的能力。
3.菌株的复筛
通过测定氨气释放量的变化进行菌株的复筛，取200g新鲜猪粪置于体积为1L的锥形瓶中，将初选的菌株接种于YPD液体培养基培养，按猪粪质量的10％加入锥形瓶中，用保鲜膜密封后，置于30℃恒温培养箱中发酵培养3天。对照组加入等量灭菌培养基，每个处理重复3次。用气体检测仪测定NH3的释放量。
最终选得除臭效果最好的菌株Y21，对其进行进一步的鉴定。
本发明的目的之二是提供含有拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus、保藏编号为CGMCC No.20654的异常威克汉姆酵母的微生物菌剂。
本发明的目的之三是提供含有拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus、保藏编号为CGMCC No.20654异常威克汉姆酵母或含有其的发酵液或含有其的微生物菌剂在对养殖环境除臭中的应用。
本发明的目的之四是提供含有拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus、保藏编号为CGMCC No.20654异常威克汉姆酵母或含有其的发酵液或含有其的微生物菌剂在对养殖废水净化中的应用。
所述的含有拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus、保藏编号为CGMCCNo.20654的异常威克汉姆酵母的发酵液是将活化后的拉丁文名称为Wickerhamomycesanomalus、保藏编号为CGMCC No.20654的异常威克汉姆酵母接种于灭菌后且含有碳源、氮源及无机盐的培养基中进行通气培养获得。
所述的碳源选用红糖、葡萄糖、糖蜜中的一种或其结合，氮源选用豆饼粉、酵母提取物、蛋白胨、牛肉膏中的一种或其结合。
所述的无机盐选用硫酸铵及磷酸二氢钾。
所述的通气培养的培养条件如下：接种量为1％～5％，温度为28℃～35℃，培养基装量为40％～80％，通气量0.4～0.6立方米/小时，搅拌转速为150～200转/分钟，溶氧70％～75％，pH＝6.0～6.5，培养周期36～48小时至有效活菌数不低于108cfu/mL。
所述的培养基由如下质量份数的原料组成：
氮源5～15；碳源5～15；硫酸铵1～5；磷酸二氢钾1～5；水1000；pH＝6.0～6.5。
本发明所取得的实质性特点和显著的技术进步在于：
本发明采用多级筛选方法获得了一株异常威克汉姆酵母，该菌种的拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus、保藏编号为CGMCC No.20654，经申请人实验证实，喷洒含有该菌种的发酵液或菌剂第四天猪舍氨浓度降低56％以上(达到15.18mg/m3)，明显低于《畜禽场环境质量标准》(NY/T388～1999)中规定的数值(20mg/m3)；投放污水中后7天氨气释放量减少60％以上，可以有效改善场区环境臭味。具有除臭、产香、避蝇蚊、抑菌等多种功效，对于净化养殖环境效果显著，安全无害且具有广阔的应用前景。
附图说明
图1是异常威克汉姆酵母(Wickerhamomyces anomalus)CGMCC No.20654在固体平板上的菌落形态。
图2是异常威克汉姆酵母(Wickerhamomyces anomalus)CGMCC No.20654在光学显微镜下(100×)的照片。
因菌株的菌落和单细胞形态是菌株鉴定的依据之一，从图1、图2可以初步判断菌株为酵母菌。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明做进一步描述，但不作为对本发明的限定，本发明的保护范围以权利要求记载的内容为准，任何依据本发明的说明书所做出的等效手段替换，均不脱离本发明的保护范围。
实施例1
拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus、保藏编号为CGMCC No.20654的异常威克汉姆酵母的形态和鉴定
1、菌株的形态学特征
该菌株在YPD培养基平皿上培养，菌落呈圆屋顶状，灰白色，不透明，表面平滑，边缘较整齐，粘稠；单细胞为椭圆形或纺锤形，个体大，单一或聚集分布。
2、菌株生理生化特性
该菌株的生理生化特性如表1。
3、菌株鉴定与保藏
通过菌株形态学特征、生理生化特征和16S rRNA序列分析，本申请中的菌种为被鉴定为异常威克汉姆酵母，拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus，该菌株2020年9月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，分类命名为异常威克汉姆酵母(Wickerhamomyces anomalus)，保藏编号CGMCC No.20654，保藏机构地址位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所(简称CGMCC，邮编100101)。
实施例2
含有拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus、保藏编号为CGMCC No.20654的异常威克汉姆酵母的发酵液的制备
(1)菌种活化
将斜面保存的拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus、保藏编号为CGMCCNo.20654的异常威克汉姆酵母接种在YPD固体培养基，30℃培养40小时后，转接到YPD液体培养基，30℃培养24小时，得到相应的种子液。
(2)发酵培养
所述的培养基由如下质量份数的原料组成：
氮源5；碳源5；硫酸铵1；磷酸二氢钾1；水1000；pH＝6.0～6.5。碳源选用红糖，氮源选用酵母提取物。
培养条件如下：接种量为1％，温度为28℃，培养基装量为40％，通气量0.4立方米/小时，搅拌转速为150转/分钟，溶氧70％，pH＝6.0～6.5，培养周期为36小时至有效活菌数不低于108cfu/mL。
实施例3
含有拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus、保藏编号为CGMCC No.20654的异常威克汉姆酵母的发酵液的制备
(1)菌种活化
将斜面保存的拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus、保藏编号为CGMCCNo.20654的异常威克汉姆酵母接种在YPD固体培养基，35℃培养48小时后，转接到YPD液体培养基，35℃培养28小时，得到相应的种子液。
(2)发酵培养
所述的培养基由如下质量份数的原料组成：
氮源15；碳源15；硫酸铵5；磷酸二氢钾5；水1000；pH＝6.0～6.5。碳源选用葡萄糖，氮源选用牛肉膏。
培养条件如下：接种量为5％，温度为35℃，培养基装量为80％，通气量0.6立方米/小时，搅拌转速为200转/分钟，溶氧75％，pH＝6.5，培养周期为48小时至有效活菌数不低于108cfu/mL。
实施例4
含有拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus、保藏编号为CGMCC No.20654的异常威克汉姆酵母的发酵液的制备
(1)菌种活化
将斜面保存的拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus、保藏编号为CGMCCNo.20654的异常威克汉姆酵母接种在YPD固体培养基，33℃培养44小时后，转接到YPD液体培养基，33℃培养26小时，得到相应的种子液。
(2)发酵培养
所述的培养基由如下质量份数的原料组成：
氮源10；碳源10；硫酸铵3；磷酸二氢钾3；水1000；pH＝6.0～6.5。碳源选用红糖及葡萄糖，氮源选用豆饼粉及蛋白胨。
培养条件如下：接种量为3％，温度为31℃，培养基装量为60％，通气量0.5立方米/小时，搅拌转速为175转/分钟，溶氧73％，pH＝6.0～6.5，培养周期为42小时至有效活菌数不低于108cfu/mL。
实施例5
含有拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus、保藏编号为CGMCC No.20654的异常威克汉姆酵母的发酵液的制备
(1)菌种活化
将斜面保存的拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus、保藏编号为CGMCCNo.20654的异常威克汉姆酵母接种在YPD固体培养基，31℃培养42小时后，转接到YPD液体培养基，31℃培养25小时，得到相应的种子液。
(2)发酵培养
所述的培养基由如下质量份数的原料组成：
氮源7；碳源7；硫酸铵2；磷酸二氢钾2；水1000；pH＝6.0～6.5。碳源选用葡萄糖及糖蜜，氮源选用牛肉膏。
培养条件如下：接种量为2％，温度为29℃，培养基装量为50％，通气量0.45立方米/小时，搅拌转速为160转/分钟，溶氧72％，pH＝6.0～6.5，培养周期为38小时至有效活菌数不低于108cfu/mL。
实施例6
含有拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus、保藏编号为CGMCC No.20654的异常威克汉姆酵母的发酵液的制备
(1)菌种活化
将斜面保存的异常威克汉姆酵母菌Y21接种在YPD固体培养基，34℃培养47小时后，转接到YPD液体培养基，34℃培养27小时得到相应的种子液。
(2)发酵培养
所述的培养基由如下质量份数的原料组成：
氮源12；碳源12；硫酸铵4；磷酸二氢钾4；水1000；pH＝6.0～6.5。碳源选用葡萄糖，氮源选用酵母提取物及牛肉膏。
培养条件如下：接种量为4％，温度为33℃，培养基装量为70％，通气量0.55立方米/小时，搅拌转速为190转/分钟，溶氧74％，pH＝6.0～6.5，培养周期为46小时至有效活菌数不低于108cfu/mL。
实施例7
含有拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus、保藏编号为CGMCC No.20654的异常威克汉姆酵母的发酵液在生猪养殖场除臭上的应用
经申请人查询，臭气浓度为无量纲量，单位是“1”。测定方法采用“三点比较式臭袋法”《空气质量恶臭的测定三点比较式臭袋法》(GBT 14675-1993)进行测定，例如臭气浓度500，检测方法是用三只无臭袋，其中的2只充入无臭气体，另一只按一定稀释比例充入无臭空气和检测样品供多名嗅辨员嗅辨，当嗅辨员正确识别有臭气袋后，在逐级稀释，嗅辨，直至稀释样品的臭气浓度低于嗅辨员的嗅觉阈值时停止嗅辨。最终，由多名嗅辨员嗅辨稀释样品的平均稀释倍数500，即为臭气的浓度。由于养殖场臭气的主要成分是氨气，其含量远远超过硫化氢，为更为简便直观地检测并观察氨气浓度及除氨率等技术指标，因此申请人设计了如下试验对本发明中微生物菌剂的除臭效果进行验证。
1、试验时间：2019年1月
2、试验场所：河北省辛集市某生猪养殖场
3、试验器材：实施例2～6制备的发酵液、农用喷雾器、便携式氨气检测仪(英思科GB Pro)
4、试验过程：将实施例2～6制备的含有拉丁文名称为Wickerhamomycesanomalus、保藏编号为CGMCC No.20654的异常威克汉姆酵母的发酵液，用自来水分别稀释10倍，均匀喷洒在密闭猪舍内(100mL/m2)。猪舍面积为330m2，育肥猪200头。在猪舍中心距离地面1.5m位置，每天上午7点用便携式氨气检测仪检测记录猪舍内氨气浓度，并计算除氨率。第四天时猪舍内氨气浓度降至最低。
5、试验结果如表2。
表2对生猪养殖场除臭试验结果
Figure BDA0002957170340000091
表2中A为氨气浓度(mg/m3)，B为除氨率(％)。实施例2～6制备的发酵液经试验人员嗅辨可闻到浓郁的果香味。
6、试验结论
从表2中看出，实施例2～6制备的发酵液的十倍稀释液喷洒后能有效降低猪舍内氨气浓度，喷洒后四天时猪舍内除氨率达56％以上，除氨率优于申请人所了解到的单一菌种所制备的微生物菌剂的除氨效果，在养殖环境净化方面有很好的应用前景。
实施例8
含有拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus、保藏编号为CGMCC No.20654的异常威克汉姆酵母的发酵液对养殖污水的除臭效果
基于与实施例7同样的理由，申请人设计了如下试验检测对于养殖污水的除臭效果。
1、试验时间：2019年2月
2、试验场所：申请人的实验室
3、试验器材：菌株发酵液、1L三角瓶、便携式氨气检测仪(英思科GB Pro)
4、试验过程：取400mL新鲜养殖污水置于1L三角瓶中，按照10％(M/V)接种实施例2～6制备的含有拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus、保藏编号为CGMCC No.20654的异常威克汉姆酵母的发酵液至污水中，用保鲜膜密封后，置于30℃恒温培养箱中发酵培养，对照组加入等量灭菌蒸馏水。每天在固定时间用检测仪测定三角瓶中NH3的浓度，测定周期为7天。
5、试验结果如表3。
表3对养殖污水的除臭实验结果
Figure BDA0002957170340000101
6、试验结论
从表3中看出，实施例2～6制备的发酵液添加至养殖污水中后能有效减少氨气的释放量，与对照相比七天时减少量可达60％以上，在养殖环境净化方面有很好的应用前景。

Claims (9)

1.异常威克汉姆酵母，其特征在于该菌种拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus，其保藏编号为CGMCC No.20654。
2.含有权利要求1所述的拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus、保藏编号为CGMCCNo.20654的异常威克汉姆酵母的微生物菌剂。
3.如含有权利要求1所述的拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus、保藏编号为CGMCC No.20654异常威克汉姆酵母或含有其的发酵液或权利要求2所述的微生物菌剂在对养殖环境除臭中的应用。
4.如含有权利要求1所述的拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus、保藏编号为CGMCC No.20654异常威克汉姆酵母或含有其的发酵液或权利要求2所述的微生物菌剂在对养殖废水净化中的应用。
5.根据权利要求3或4所述的应用，其特征在于所述的含有拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus、保藏编号为CGMCC No.20654的异常威克汉姆酵母的发酵液是将活化后的拉丁文名称为Wickerhamomyces anomalus、保藏编号为CGMCC No.20654的异常威克汉姆酵母接种于灭菌后且含有碳源、氮源及无机盐的培养基中进行通气培养获得。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于所述的碳源选用红糖、葡萄糖、糖蜜中的一种或其结合，氮源选用豆饼粉、酵母提取物、蛋白胨、牛肉膏中的一种或其结合。
7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于所述的无机盐选用硫酸铵及磷酸二氢钾。
8.根据权利要求5所述的应用，其特征在于所述的通气培养的培养条件如下：接种量为1％～5％，温度为28℃～35℃，培养基装量为40％～80％，通气量0.4～0.6立方米/小时，搅拌转速为150～200转/分钟，溶氧70％～75％，pH＝6.0～6.5，培养周期36～48小时至有效活菌数不低于108cfu/mL。
9.根据权利要求6～8中任一项所述的应用，其特征在于培养基由如下质量份数的原料组成：
氮源5～15；碳源5～15；硫酸铵1～5；磷酸二氢钾1～5；水1000；pH＝6.0～6.5。
CN202110227736.2A 2021-03-01 2021-03-01 异常威克汉姆酵母、利用其制备的微生物菌剂及应用 Active CN112725207B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110227736.2A CN112725207B (zh) 2021-03-01 2021-03-01 异常威克汉姆酵母、利用其制备的微生物菌剂及应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110227736.2A CN112725207B (zh) 2021-03-01 2021-03-01 异常威克汉姆酵母、利用其制备的微生物菌剂及应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN112725207A true CN112725207A (zh) 2021-04-30
CN112725207B CN112725207B (zh) 2022-11-11

Family

ID=75595596

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110227736.2A Active CN112725207B (zh) 2021-03-01 2021-03-01 异常威克汉姆酵母、利用其制备的微生物菌剂及应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN112725207B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117363498A (zh) * 2023-11-21 2024-01-09 河北省科学院生物研究所 一种威克汉姆酵母cyw-7及其应用

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20020040198A (ko) * 2000-11-24 2002-05-30 심석구 다단계식 악취 또는 유해가스 정화시스템
US20140308231A1 (en) * 2013-04-12 2014-10-16 Song BYUNG JOON Autotroph-based deodorizer and method for manufacturing the same
CN108048344A (zh) * 2017-11-20 2018-05-18 广东博沃特生物科技有限公司 两株除臭菌株及其在制备复合生物除臭剂中的应用
WO2018191172A1 (en) * 2017-04-09 2018-10-18 Locus Oil Ip Company, Llc Microbial products and uses thereof to improve oil recovery
WO2020252203A1 (en) * 2019-06-11 2020-12-17 G&S Laboratories, Inc. Deodorant compositions

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20020040198A (ko) * 2000-11-24 2002-05-30 심석구 다단계식 악취 또는 유해가스 정화시스템
US20140308231A1 (en) * 2013-04-12 2014-10-16 Song BYUNG JOON Autotroph-based deodorizer and method for manufacturing the same
WO2018191172A1 (en) * 2017-04-09 2018-10-18 Locus Oil Ip Company, Llc Microbial products and uses thereof to improve oil recovery
CN108048344A (zh) * 2017-11-20 2018-05-18 广东博沃特生物科技有限公司 两株除臭菌株及其在制备复合生物除臭剂中的应用
WO2020252203A1 (en) * 2019-06-11 2020-12-17 G&S Laboratories, Inc. Deodorant compositions

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HONG J W ET AL: "Effects of dietary probiotics supplementation on growth performance and fecal gas emmission in nursing and finishing pigs", 《JOURNAL OF ANIMAL SCIENCE AND TECHNOLOGY》 *
唐微微: "两株酵母菌的筛选及其除臭性能", 《安全与环境学报》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117363498A (zh) * 2023-11-21 2024-01-09 河北省科学院生物研究所 一种威克汉姆酵母cyw-7及其应用
CN117363498B (zh) * 2023-11-21 2024-03-26 河北省科学院生物研究所 一种威克汉姆酵母cyw-7及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN112725207B (zh) 2022-11-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN108048344B (zh) 两株除臭菌株及其在制备复合生物除臭剂中的应用
CN106520597B (zh) 一种生态活性除臭剂及其制备方法
CN109609401A (zh) 一种复合微生物除臭菌剂及其制备方法与应用
CN107568071A (zh) 用于畜禽养殖场的生物除臭剂
CN107541477B (zh) 一种利用乳酸菌发酵液培养光合细菌的方法
CN106167776A (zh) 一种可活化土壤中重金属镉的蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）TH‑35及其应用
CN113652373B (zh) 一株芽孢杆菌及其应用
CN102965294A (zh) 一种粪产碱杆菌及其制备脱硫除臭剂的方法和应用
CN114015586A (zh) 一种除臭降解复合菌剂及其制备方法和应用
CN109762767A (zh) 一种污水复合微生物处理剂及其制备方法与应用
CN112790287A (zh) 一种环境友好型综合除臭育肥猪生物饲料配制技术与应用
CN104673715A (zh) 对镉具有固定效应并能促进植物生长的肠杆菌及其应用
CN112725207B (zh) 异常威克汉姆酵母、利用其制备的微生物菌剂及应用
CN107475157B (zh) 一种地衣芽孢杆菌及其应用
CN117070428B (zh) 枯草芽孢杆菌bs-22株在改善养殖环境中的应用
KR20150092874A (ko) 악취 제거용 미생물 제제
CN112251357A (zh) 一种禽畜粪便发酵菌剂的筛选方法
CN109652328B (zh) 一种复合微生物活菌制剂及其在高浓度养猪废水中的应用
CN113025507B (zh) 复合微生物菌剂及其制备和在畜禽场高浓度废水脱臭净化中的应用
CN114410512B (zh) 一种畜禽粪污除臭微生物菌剂及其制备方法和应用
CN112877223B (zh) 微生物腐熟剂及其制备和在有机物料发酵腐熟中的应用
CN104877920B (zh) 克鲁斯假丝酵母lsa及其在降解氨氮中的应用
CN112899198B (zh) 复合微生物菌剂及其制备和在快速消减养殖场环境中氨气和硫化氢的应用
CN108441437B (zh) 一种复合菌剂及其应用
CN111411046A (zh) 一种深色有隔内生真菌菌剂与应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
CB02 Change of applicant information
CB02 Change of applicant information

Address after: 050051 No. 598 Heping West Road, Hebei, Shijiazhuang

Applicant after: Institute of biotechnology and food science, Hebei Academy of agricultural and Forestry Sciences

Address before: 050051 No. 598 Heping West Road, Hebei, Shijiazhuang

Applicant before: INSTITUTE OF GENETICS AND PHYSIOLOGY, HEBEI ACADEMY OF AGRICULTURE AND FORESTRY SCIENCES (HEBEI AGRICULTURAL PRODUCT QUALITY SAFETY RESEARCH CENTER OF AGRICULTURE AND FORESTRY ACADEMY)

TA01 Transfer of patent application right
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20220609

Address after: 050051 No. 598 Heping West Road, Hebei, Shijiazhuang

Applicant after: INSTITUTE OF AGRICULTURAL RESOURCES AND ENVIRONMENT, HEBEI ACADEMY OF AGRICULTURE AND FORESTRY SCIENCES

Address before: 050051 No. 598 Heping West Road, Hebei, Shijiazhuang

Applicant before: Institute of biotechnology and food science, Hebei Academy of agricultural and Forestry Sciences

GR01 Patent grant
GR01 Patent grant