CN112697774B - 一种基于表面增强拉曼光谱检测氟尼辛葡甲胺残留的方法 - Google Patents
一种基于表面增强拉曼光谱检测氟尼辛葡甲胺残留的方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种基于表面增强拉曼光谱检测氟尼辛葡甲胺残留的方法，属于食品、药品快速检测技术领域。本发明所述的方法包括如下步骤：(1)确定氟尼辛葡甲胺的特征峰696cm‑1；(2)将氟尼辛葡甲胺标准溶液与待测样液混合，配制成多浓度梯度的氟尼辛葡甲胺模拟液；将模拟液进行拉曼检测，得到拉曼光谱，通过计算模拟液在特征峰696cm‑1处的积分峰强与模拟液氟尼辛葡甲胺浓度之间的线性关系，做出标准曲线；(3)将待测样液进行拉曼检测，之后根据步骤(2)的标准曲线，得到待测样液中氟尼辛葡甲胺的浓度。本发明的方法检测限为0.001mg/mL，单个样品可在3min内完成检测。
Description
技术领域
本发明涉及一种基于表面增强拉曼光谱检测氟尼辛葡甲胺残留的方法，属于食品、药品快速检测技术领域。
背景技术
氟尼辛葡甲胺是动物专用的非甾体类抗炎药，20世纪90年代由美国先灵葆雅公司成功研制上市。2008年在中国批准上市。自上市以来，因其具有给药量小、吸收迅速、持续时间长、疗效显著、不良反应轻等特点，深受兽医青睐，是国内外兽医临床消费量最大的NSAIDs。已被英国兽药典和美国药典收录。
氟尼辛葡甲胺是一种强效环氧化酶抑制剂，通过影响前列腺素的合成达到消炎、解热、镇痛的目的。最早用于缓解马的炎症、肌肉-骨骼紊乱以及绞痛等，后被批准用于牛传染病引起的急性炎症、母猪无乳综合征的辅助治疗和犬的内毒素血症等，现已在英国、法国、瑞士、德国、美国等许多国家广泛应用。
近年来，随着氟尼辛葡甲胺在兽医临床上的广泛应用，其不良反应慢慢显现，主要是胃肠道的毒副作用，如动物畜禽的呕吐、腹泻、胃肠溃疡。鉴于此，美国、日本、加拿大相继制定了氟尼辛葡甲胺的残留限量，但中国目前没有制定氟尼辛葡甲胺的残留限量。
国内外针对动物源性食品中氟尼辛葡甲胺残留的检测方法有高效液相色谱法(HPLC)、高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)、高效液相色谱-荧光法(HPLC—FLD)、气相色谱-质谱法(GC-MS)、气相色谱法(GC)、分光光度法。但这些方法存在着不同程度的缺陷，如前处理时间长、操作复杂、操作技术性强、设备昂贵、不利于携带等。
发明内容
[技术问题]
在传统的液相、气相色谱检测方法中，存在样品前处理时间长、样品检测耗时长、设备庞大、昂贵、对检测人员操作技术要求高等问题，极不利于现场快速定性、定量检测。
[技术方案]
为了解决上述至少一个问题，本发明提供了一种基于纳米金溶胶基底的便携式拉曼仪，对氟尼辛葡甲胺的残留进行快速定性、定量检测方法，从而应用于畜禽肉中氟尼辛葡甲胺残留的现场检测。
本发明的第一个目的是提供一种定量检测氟尼辛葡甲胺残留的方法，包括如下步骤：
(1)确定氟尼辛葡甲胺的特征峰696cm-1；
(2)将氟尼辛葡甲胺标准溶液与待测样液混合，配制成多浓度梯度的氟尼辛葡甲胺模拟液；将模拟液进行拉曼检测，得到拉曼光谱，通过计算模拟液在特征峰696cm-1处的积分峰强与模拟液氟尼辛葡甲胺浓度之间的线性关系，做出标准曲线；其中模拟液中氟尼辛葡甲胺浓度为氟尼辛葡甲胺标准溶液中氟尼辛葡甲胺的质量和氟尼辛葡甲胺标准溶液与待测样液体积和的比值，忽略待测样液中氟尼辛葡甲胺的质量，待测样液只是作为溶剂；
(3)将待测样液进行拉曼检测，之后根据步骤(2)的标准曲线，得到待测样液中氟尼辛葡甲胺的浓度。
在本发明的一种实施方式中，步骤(2)和步骤(3)所述的待测样液包括禽畜肉提取液。
在本发明的一种实施方式中，步骤(2)和步骤(3)所述的待测样液的制备方法为：
在待测样品中加入Na2CO3溶液，混合均匀；之后加入提取剂，混合均匀、离心，得到上清液；残留物用提取剂重复提取，合并提取液；将提取液氮吹浓缩得到浓缩液；之后在浓缩液中加入乙腈、乙腈饱和正己烷，混合均匀、离心，收集下层清液，氮吹干；复溶得到待测样液。
在本发明的一种实施方式中，步骤(2)和步骤(3)所述的待测样液的制备方法中所述的提取剂为乙酸乙酯。
本发明的第二个目的是提供一种定量检测禽畜肉中氟尼辛葡甲胺残留的方法，包括如下步骤：
(1)氟尼辛葡甲胺的特征峰的确定：
在禽畜肉中加入Na2CO3溶液，混合均匀；加入提取剂，混合均匀、离心、得到上清液；残留物用提取剂重复提取，合并提取液；将提取液氮吹浓缩得到浓缩液；之后在浓缩液中加入乙腈、乙腈饱和正己烷，混合均匀、离心，收集下层清液，氮吹干；复溶得到禽畜肉空白提取液；
将氟尼辛葡甲胺溶解在甲醇中，制备得到多浓度梯度的氟尼辛葡甲胺标准溶液；之后将氟尼辛葡甲胺标准溶液加入禽畜肉中混合均匀，采用禽畜肉空白提取液的方法进行提取，得到禽畜肉加标液；将禽畜肉空白提取液和禽畜肉加标液进行拉曼检测得到拉曼光谱；对比禽畜肉空白提取液和禽畜肉加标液的拉曼光谱确定特征峰696cm-1；
(2)标准曲线的制备：
将氟尼辛葡甲胺标准溶液与禽畜肉空白提取液混合，配制成多浓度梯度的氟尼辛葡甲胺禽畜肉模拟液；将模拟液进行拉曼检测，得到拉曼光谱，通过计算模拟液特征峰696cm-1处的积分峰强与氟尼辛葡甲胺浓度之间的线性关系，做出标准曲线；其中模拟液中氟尼辛葡甲胺浓度为氟尼辛葡甲胺标准溶液中氟尼辛葡甲胺的质量和氟尼辛葡甲胺标准溶液与待测样液体积和的比值；忽略待测样液中氟尼辛葡甲胺的质量，待测样液只是作为溶剂；
(3)待测样品的检测：
按照步骤(1)中的禽畜肉空白提取液的方法对待测样品进行预处理，得到待测样品提取液，之后进行拉曼检测，得到拉曼光谱；之后根据步骤(2)的标准曲线，得到待测样品中氟尼辛葡甲胺的浓度。
在本发明的一种实施方式中，步骤(1)中禽畜肉和Na2CO3溶液的质量体积比为2.5g：2mL。
在本发明的一种实施方式中，步骤(1)中Na2CO3溶液的质量分数为10％。
在本发明的一种实施方式中，步骤(1)中提取剂为乙酸乙酯。
在本发明的一种实施方式中，步骤(1)中禽畜肉和提取剂的质量体积比为2.5g：5mL。
在本发明的一种实施方式中，步骤(1)中混合均匀是涡旋2min。
在本发明的一种实施方式中，步骤(1)中离心是在4℃下10000rpm离心10min。
在本发明的一种实施方式中，步骤(1)中重复提取的次数为一次。
在本发明的一种实施方式中，步骤(1)中体积浓缩为原来的1/3。
在本发明的一种实施方式中，步骤(1)中乙腈、(乙腈饱和正己烷)、浓缩液的体积比为1：1：1.5。
在本发明的一种实施方式中，步骤(1)所述的氮吹是在45℃下氮吹。
在本发明的一种实施方式中，步骤(1)中复溶是采用甲醇进行复溶。
在本发明的一种实施方式中，步骤(1)中多浓度梯度是0.8、0.5、0.4、0.2、0.1、0.05、0.025mg/mL。
在本发明的一种实施方式中，步骤(1)-(3)中拉曼光谱的检测都是以金溶胶为增强基底，用激发光源为785nm的便携式拉曼光谱仪进行扫描，扫描功率为150mW，扫描时间为10s，扫描次数为3-5次得到拉曼光谱。
在本发明的一种实施方式中，所述的金溶胶的制备方法为：在圆底烧瓶内加入47mL超纯水与3mL 10mg/mL的氯金酸钾，充分混合；之后将圆底烧瓶放入120℃油浴锅内，同时用磁力搅拌器搅拌(565r/min)并保持温度恒定至溶液沸腾；加入2mL 1％的柠檬酸三钠水溶液继续120℃恒温搅拌20min；冷却金溶胶至常温，即得到短棒状纳米金溶胶。
在本发明的一种实施方式中，拉曼检测中测试样品(禽畜肉空白提取液、禽畜肉加标液、氟尼辛葡甲胺禽畜肉模拟液)和金溶胶的体积比为1：3。
在本发明的一种实施方式中，步骤(1)中氟尼辛葡甲胺标准溶液和禽畜肉的体积质量比为2mL：2.5g。
在本发明的一种实施方式中，步骤(2)中多浓度梯度是0.8、0.5、0.25、0.2、0.1、0.05、0.025、0.005、0.001mg/mL。
在本发明的一种实施方式中，步骤(1)中禽畜肉空白提取液的制备具体为：
用天平秤取2.5g绞碎的禽畜肉于50mL离心管中，加入2mL碳酸钠溶液(质量分数10％)，涡旋2min；加入5mL乙酸乙酯，涡旋2min，在4℃下10000rpm离心10min，取上清溶液于另一50mL离心管中，残渣用5mL乙酸乙酯重复提取一次；将两次的上清液合并；将合并的上清液常温氮吹至5mL，加入5mL乙腈、7.5mL乙腈饱和正己烷，涡旋2min，10000rpm、4℃离心10min，尽除去上层液体以及上下层交界处薄薄的一层液体，下层液体转入另一50mL离心管；将下层液体加入5mL乙腈、7.5mL乙腈饱和正己烷，重复以上操作一次。将最终得到的下层清液在45℃条件下氮气吹干，用2mL甲醇复溶，得到禽畜肉空白提取液。
本发明的第三个目的是本发明的方法在食品检测领域中的应用。
本发明的第四个目的是本发明的方法在检测禽畜肉中氟尼辛葡甲胺的应用。
[有益效果]
(1)本发明采用表面增强拉曼光谱的方法，对禽畜肉中氟尼辛葡甲胺的残留进行了初次探究；通过比较标准工作液的拉曼光谱、加标液的拉曼光谱、空白提取液的拉曼光谱、模拟液的拉曼光谱，确定特征峰，再运用密度泛函理论，对特征峰进行归属；用模拟液中拉曼峰强高、且峰形好的特征峰建立定量分析曲线。
(2)本发明的方法中氟尼辛葡甲胺检测的最低浓度为0.001mg/mL，线性范围为0.001mg/mL-0.25mg/mL，线性拟合方程为ISERS＝49.13XC+3359.5，R2为0.99；回收率为81.45％-97.23％，RSD为0.88％-3.7％(n＝10)。因此，本发明的方法的准确度和精确度都很好。
(3)本发明可以定性定量分析禽畜肉中氟尼辛葡甲胺的残留，单个样品的检测可以在2min内完成。
(4)本发明的方法操作简单便捷、检测快速、灵敏度高、成本低、绿色环保，在食品安全检测领域具有广阔的应用前进，为畜禽养殖及加工检测领域中氟尼辛葡甲胺等非甾体类消炎药物的残留检测提供了新的方法和思路。
附图说明
图1为金溶胶中纳米粒子的SEM图。
图2为金溶胶、金溶胶+甲醇及金溶胶+甲醇+样品(氟尼辛葡甲胺标准溶液)混合液的紫外图。
图3为0.25mg/mL氟尼辛葡甲胺标准工作液和甲醇的拉曼图。
图4为氟尼辛葡甲胺固体、猪肉加标液、猪肉空白提取液的拉曼图。
图5为不同浓度氟尼辛葡甲胺模拟液的拉曼图。
图6为模拟液在696cm-1处的标准曲线图，插图为拟合的线性关系。
图7为对照例1酸性环境下的拉曼测试结果。
图8为对照例2酸性水解过程下的拉曼测试结果。
图9为对照例3酶解过程下的拉曼测试结果。
图10为对照例4中不同提取剂的拉曼测试结果。
图11为对照例5中不同比例的待测样品与金溶胶体积的拉曼测试结果。
具体实施方式
以下对本发明的优选实施例进行说明，应当理解实施例是为了更好地解释本发明，不用于限制本发明。
实施例1
一种定量检测猪肉中氟尼辛葡甲胺残留的方法，包括如下步骤：
(1)纳米金溶胶的制备：
用王水浸泡实验所用到的玻璃器皿(圆底烧瓶、量筒)以及转子12h，取出用超纯水冲洗6次，60℃烘箱烘干，备用；配制1％柠檬酸三钠水溶液、10mg/mL氯金酸钾溶液，备用；将油浴锅升温至120℃并保持恒定；设置磁力搅拌器参数：565r/min；
在圆底烧瓶内加入47mL超纯水与3mL氯金酸钾溶液，充分混合；将圆底烧瓶放入120℃油浴锅内，同时用磁力搅拌器搅拌并保持温度恒定至溶液沸腾；加入2mL 1％柠檬酸三钠水溶液继续120℃恒温搅拌20min；冷却金溶胶至常温，即得到短棒状纳米金溶胶，形貌如图1所示，从图1可以看出：合成的金纳米粒子呈短棒状，长约100nm，宽约55nm。
(2)氟尼辛葡甲胺的特征峰的确定：
①氟尼辛葡甲胺标准溶液的SERS光谱图：
用分析天平称取10mg氟尼辛葡甲胺标准品于小烧杯中，用5mL甲醇溶解，将溶解液转入10mL容量瓶中，再用5mL甲醇分三次润洗小烧杯，将润洗液转入容量瓶中，定容至10mL得到1mg/mL的氟尼辛葡甲胺标准储备液，用甲醇按一定的比例稀释即得到800、500、400、200、100、50、25、5、1mg/L的一系列浓度的氟尼辛葡甲胺标准液；
取30μL纳米金溶胶于锡箔纸上，再取10μL氟尼辛葡甲胺标准液，通过移液枪吹打与纳米金溶胶混匀，用激发光源为785nm的便携式拉曼光谱仪进行扫描，扫描功率为150mW，扫描时间为10s，扫描次数为5次，得到氟尼辛葡甲胺标准溶液的拉曼SERS光谱图。同样的条件下，测定溶剂甲醇的SERS光谱图。通过对比氟尼辛葡甲胺标准溶液的SERS光谱图与溶剂甲醇的光谱图，确定特征峰。如图3所示。
从图2可以看出：氟尼辛葡甲胺的特征峰为590cm-1、700cm-1、779cm-1、807cm-1、892cm-1、991cm-1、1056cm-1、1182cm-1、1305cm-1、1545cm-1、1588cm-1。
②氟尼辛葡甲胺密度泛函理论计算
使用Gauss View 5.0软件构建氟尼辛葡甲胺分子模型，先分别对氟尼辛和葡甲胺分子进行几何构型优化，之后采用同样的几何优化方法，将已经优化好的氟尼辛、葡甲胺分子放在一起进行几何优化。采用Gaussian 09程序建立密度泛函理论(DFT)计算，采用“freq＝raman b3lyp/6-311g(d)”关键字进行运算，输出得到氟尼辛葡甲胺的理论拉曼振动频率图。把DFT计算得到的理论谱图的半高峰宽改为4，波数的矫正因子设置为0.966。之后将矫正后的理论拉曼光谱图于固体的拉曼光谱图对比，进行峰归属指认。
经峰归属指认得：590cm-1处为吡啶环面内完全，吡啶环于苯环之间C-N-C两键非平面摇摆；700cm-1处为苯环、吡啶环之间C-N-C两键平面内摇摆；779cm-1处为苯环、吡啶环上C-H平面摆动，羧基中O-C＝O之间平面剪式运动，以及羧基中O-H摇摆；807cm-1处为苯环上C-H键非平面摇摆；892cm-1处为苯环上C-H面外摇摆、吡啶环中C-C-N两键平面内摇摆；991cm-1处为吡啶环上C-H面外摇摆；1056cm-1处为苯环上连接甲基的C于相邻两碳之间的伸缩振动；1182cm-1处为吡啶环上C-H平面内摇摆、吡啶环上N对位C＝C键伸缩运动、羧基中C-OH伸缩运动；1305cm-1处为吡啶环上C-H面内摇摆、苯环中C＝C＝C键面内摇摆拉动苯环变形；1545cm-1处为葡甲胺末端甲基中C-H摆动；1588cm-1处为苯环上C-H面内摆动。
③猪肉空白提取液、猪肉加标提取液的拉曼光谱
用天平秤取2.5g搅碎的猪肌肉于50mL的离心管中，加入质量分数为10％的Na2CO3溶液2mL，涡旋混合均匀；之后加入乙酸乙酯5mL，涡旋混合均匀；10000rpm、4℃离心10min，取上清溶液于另一50mL离心管中，残渣用5mL乙酸乙酯重复提取一次；将两次的上清液合并。
将合并的上清液常温氮吹至5mL，加入5mL乙腈、7.5mL乙腈饱和正己烷，涡旋2min，10000rpm、4℃离心10min，尽除去上层液体以及上下层交界处薄薄的一层液体，下层液体转入另一50mL离心管；将下层液体加入5mL乙腈、7.5mL乙腈饱和正己烷，重复以上操作一次；将最终得到的下层清液在45℃条件下氮气吹干，用2mL甲醇复溶，得到猪肉空白提取液；
将氟尼辛葡甲胺标准工作液加入到绞碎猪肉中，然后按照猪肉空白提取液的方法进行前处理，复溶后得到一定浓度的猪肉加标液。
将猪肉空白提取液、猪肉加标提取液进行拉曼检测；取30μL纳米金溶胶于包裹了锡箔纸的载玻片上，再取10μL猪肉空白提取液或猪肉加标提取液，通过移液枪吹打与纳米金溶胶混匀，用激发光源为785nm的便携式拉曼光谱仪进行扫描，扫描功率为150mW，扫描时间为10s，扫描次数为5次，得到猪肉空白提取液、猪肉加标液的拉曼光谱。
通过对比猪肉空白提取液与猪肉加标液的SERS光谱图，确定特征峰。具体如图4所示，选定特征峰为猪肉加标液的特征峰为696cm-1、1053cm-1。
④模拟液的拉曼光谱
将氟尼辛葡甲胺标准溶液与猪肉空白提取液混合，配制成0.8、0.5、0.4、0.2、0.1、0.05、0.025、0.005、0.001mg/mL的多浓度梯度的氟尼辛葡甲胺猪肉模拟液；将氟尼辛葡甲胺猪肉模拟液进行拉曼检测，取30μL纳米金溶胶于包裹了锡箔纸的载玻片上，再取10μL氟尼辛葡甲胺猪肉模拟液，通过移液枪吹打与纳米金溶胶混匀，用激发光源为785nm的便携式拉曼光谱仪进行扫描，扫描功率为150mW，扫描时间为10s，扫描次数为5次，得到氟尼辛葡甲胺猪肉模拟液的SERS光谱图(图5)。
在氟尼辛葡甲胺猪肉模拟液的拉曼光谱中，计算氟尼辛葡甲胺猪肉模拟液SERS峰强与模拟液浓度之间的线性关系。如图6所示，在696cm-1处具有良好的线性关系，得到标准曲线。线性范围为0.001mg/mL-0.25mg/mL，线性拟合方程为ISERS＝49.13XC+3359.5，检测限为0.001mg/mL。在1053cm-1处的线性关系不明显，因此，确定氟尼辛葡甲胺的特征峰为696cm-1。
(3)回收率的计算
在2.5g绞碎的猪肉中分别加入1mL 0.4mg/mL、0.2mg/mL、0.1mg/mL的氟尼辛葡甲胺标准工作液，按照猪肉空白提取液的方法进行提取，之后加甲醇复溶到2mL，得到理论浓度分别为0.2mg/mL、0.1mg/mL、0.05mg/mL的猪肉加标液。
猪肉加标液进行拉曼检测，得到拉曼光谱。
将猪肉加标液的拉曼峰强代入氟尼辛葡甲胺猪肉模拟液的标准曲线中，计算出检测浓度。
根据回收率的计算公式：
回收率(％)＝检测浓度/理论浓度×100
计算回收率，计算结果为：以696cm-1为特征峰，得到回收率为81.45％-97.23％，具体见表1：
表1回收率的测试结果
对照例1
调整实施例1中Na2CO3溶液为0.1M的盐酸，用量为2mL，其他和实施例1保持一致，进行检测。
测试结果如图7，当在0.1M盐酸环境下提取时，对比猪肉加标液和猪肉空白提取液，没有出现特征峰，但是在10％NaCO3溶液环境下提取时，出现了特征峰，如图7中三角标注所示。
对照例2
调整实施例1中Na2CO3溶液为6M盐酸，用量为2mL，将猪肉和盐酸混合均匀之后在95℃下水解2h，之后和实施例1保持一致，进行检测。
测试结果如图8所示，未出现特征峰，原因可能是酸水解过程中，水溶性蛋白使基质效应干扰过大。
对照例3
调整实施例1中Na2CO3溶液为β-葡萄糖苷酸酶(酶活为150000U/ml)，用量为2mL，将猪肉和β-葡萄糖苷酸酶混合均匀之后在常温下酶解2h，之后和实施例1保持一致，进行检测。
测试结果如图9所示，未出现特征峰，原因可能是酶解过程中，引入了更多的小分子物质，导致基质干扰更大。
对照例4
调整实施例1中提取剂乙酸乙酯为甲醇或乙醇，其他和实施例1保持一致，进行检测。
测试结果如图10所示，甲醇、乙醇作为提取剂时，猪肉加标液与各自的猪肉空白提取液相比均未出现特征峰。
对照例5
调整实施例1中拉曼检测中测试样品(猪肉空白提取液、猪肉加标液、氟尼辛葡甲胺猪肉模拟液)和金溶胶的体积比为1：1、1：2、1：3、1：4、1：5，其他和实施例1保持一致，进行检测。
测试结果如图11，当测试样品与金胶的体积比为1：3时，拉曼光谱信号最明显。
虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的技术和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。
Claims (6)
1.一种定量检测猪肉中氟尼辛葡甲胺残留的方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）氟尼辛葡甲胺的特征峰的确定：
在猪肉中加入Na2CO3溶液，混合均匀；之后加入提取剂，混合均匀、离心、得到上清液；残留物用提取剂重复提取，合并提取液；将提取液氮吹浓缩得到浓缩液；之后在浓缩液中加入乙腈、乙腈饱和正己烷，混合均匀、离心，收集下层清液，氮吹干；复溶得到猪肉空白提取液；
将氟尼辛葡甲胺溶解在甲醇中，制备得到多浓度梯度的氟尼辛葡甲胺标准溶液；之后将氟尼辛葡甲胺标准溶液加入猪肉中混合均匀，采用猪肉空白提取液的方法进行提取，得到猪肉加标液；将猪肉空白提取液和猪肉加标液进行表面增强拉曼检测得到表面增强拉曼光谱；对比猪肉空白提取液和猪肉加标液的表面增强拉曼光谱，确定特征峰为696 cm-1；
（2）标准曲线的制备：
将氟尼辛葡甲胺标准溶液与猪肉空白提取液混合，配制成多浓度梯度的氟尼辛葡甲胺猪肉模拟液；将模拟液进行表面增强拉曼检测，得到表面增强拉曼光谱，通过计算模拟液特征峰696 cm-1处的积分峰强与模拟液氟尼辛葡甲胺浓度之间的线性关系，做出标准曲线；其中模拟液中氟尼辛葡甲胺浓度为氟尼辛葡甲胺标准溶液中氟尼辛葡甲胺的质量和氟尼辛葡甲胺标准溶液与待测样液体积和的比值；
（3）待测样品的检测：
按照步骤（1）中的猪肉空白提取液的方法对待测样品进行预处理，得到待测样品提取液，之后进行表面增强拉曼检测，得到表面增强拉曼光谱；之后根据步骤（2）的标准曲线，得到待测样品中氟尼辛葡甲胺的浓度；
步骤（1）中提取剂为乙酸乙酯；
表面增强拉曼检测中测试样品和金溶胶的体积比为1:3。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中猪肉和提取剂的比例以g/mL计为2.5:5。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）-（3）中表面增强拉曼光谱的检测都是以金溶胶为增强基底，用激发光源为785 nm的便携式拉曼光谱仪进行扫描，扫描功率为150 mW，扫描时间为10 s，扫描次数为5次得到表面增强拉曼光谱。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中氟尼辛葡甲胺标准溶液和猪肉的比例以mL/g计为2:2.5。
5.权利要求1-4任一项所述的方法在食品检测领域中的应用。
6.权利要求1-4任一项所述的方法在检测猪肉中氟尼辛葡甲胺的应用。
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Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103196886A (zh) * | 2013-03-20 | 2013-07-10 | 厦门大学 | 一种茶叶中有机磷农药残留的检测方法 |
| CN106896172A (zh) * | 2017-01-19 | 2017-06-27 | 烟台出入境检验检疫局检验检疫技术中心 | 一种动物源性食品中兽药多残留快速检测方法 |
| CN107179310A (zh) * | 2017-06-01 | 2017-09-19 | 温州大学 | 基于鲁棒噪声方差估计的拉曼光谱特征峰识别方法 |
| CN111579546A (zh) * | 2020-05-29 | 2020-08-25 | 詹云丹 | 磺胺噻唑快速检测方法 |
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|---|---|---|---|---|
| US10942124B2 (en) * | 2018-06-14 | 2021-03-09 | University Of Massachusetts | Surface enhanced Raman scattering substrate assembly |
-
2020
- 2020-12-24 CN CN202011610081.9A patent/CN112697774B/zh active Active
Patent Citations (4)
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