CN112618716A - 一种光动力联合溶菌酶抗菌方法 - Google Patents

一种光动力联合溶菌酶抗菌方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种光动力联合溶菌酶高效抗菌的方法，所述方法是通过一种智能响应的生物‑无机杂化纳米抗菌材料来实现的，该材料包括树枝状介孔二氧化硅、偶联在孔内的光敏剂、吸附在孔内的溶菌酶和包覆在树枝状介孔二氧化硅表面的透明质酸以及阳离子聚合物外壳。这种智能响应的生物‑无机杂化纳米抗菌材料与细菌接触后，细菌分泌透明质酸酶酶解材料外壳诱导内部溶菌酶释放，同时再联合光动力达到高效杀菌的目的。

Description

一种光动力联合溶菌酶抗菌方法
技术领域
本发明属于纳米生物材料技术领域，具体涉及一种光动力联合溶菌酶抗菌的方法。
背景技术
当前，由耐药性“超级细菌”所即将引发的另一场危机我们必须要重视并及时作出应对。高发病率和高死亡率的细菌感染已成为全球最严重的健康问题之一。抗生素的使用确实可以有效降低细菌感染引起的死亡率，但是抗生素治疗过程中细菌也在不断繁殖进化，如果抗生素不能阻止细菌繁殖或彻底消灭细菌，那存活下来的细菌可以进化使其后代具有耐药性。当前抗生素的过度使用增加了细菌的耐药性，致使多种超级细菌产生，难治性感染疾病越来越多。抗生素耐药性是对全球人类健康的威胁，以往，人们通过开发新的抗生素来解决耐药问题，但现在开发新抗生素的速度已经远远赶不上细菌耐药的脚步。并且即使在引入新的抗生素后，细菌因其非凡的进化能力也迟早会对它产生抗药性，新一代抗生素依然面临很快被淘汰的问题，新抗生素的开发与细菌耐药性发展之间存在着持续性竞争。因此，控制抗生素的使用，研究发展新的抗感染策略迫在眉睫。
光动力抗菌是近年来发展起来的一种利用光敏剂和可见光诱导微生物病原体发生氧化灭活的治疗手段。随着新型光敏剂和光源的开发应用，光动力抗菌逐渐成为研究热点，有望成为一种不产生耐药性的新型抗菌方法。然而，光动力抗菌仍存在着一些问题：组织穿透深度浅；游离的光敏剂分子在生物组织中易代谢且缺乏选择性，导致光动力治疗效率低；大多数光敏剂属于有机分子，在水中溶解性低，难以在生物组织中直接应用。针对这些问题，目前多采用光动力联合其他手段进行抗菌：光动力联合药物抗菌治疗、光动力联合光热抗菌治疗、光动力联合超声抗菌治疗以及光动力联合NO气体抗菌治疗。由于光动力联合其他抗菌手段治疗耐药菌感染疾病的研究仍处于起步阶段，依然存在一些问题：光热过程中过高温度下的热扩散易损伤周围健康的组织细胞；超声抗菌具有一定区域局限性；而NO气体抗菌过程中靶向运输以及释放难以控制。因此，构建一种基于智能纳米结构的新型抗菌平台，开发光动力联合其他手段抗菌的方法实现高效杀菌是这一领域研究热点。
发明内容
本发明的目的是提供一种光动力联合溶菌酶高效抗菌的方法，构建一种基于智能纳米结构的抗菌平台，开发光动力联合其他手段抗菌的方法。
为实现上述目的，采用以下技术方案：
一种光动力联合溶菌酶高效抗菌的方法，通过一种智能响应的生物-无机杂化纳米抗菌材料来实现，该材料包括树枝状介孔二氧化硅、偶联在孔内的光敏剂、吸附在孔内的溶菌酶和包覆在树枝状介孔二氧化硅表面的透明质酸酶反应性外壳。
所述树枝状介孔二氧化硅纳米颗粒的粒径为5~1000 nm，优选50~300 nm。
所述树枝状介孔二氧化硅纳米颗粒的孔径为2~50，优选5~30 nm。
所述光敏剂带有氨基或羧基等官能团，但不限于氨基或羧基，通过共价偶联的方式与改性的介孔二氧化硅偶联，优选带羧基的Ce6、四羧基酞菁锌或孟加拉玫瑰红。
所述树枝状介孔二氧化硅：光敏剂：溶菌酶：透明质酸酶反应性外壳质量比为：10:3:50：2。
所述透明质酸酶反应性外壳为透明质酸（HA）和阳离子聚合物，质量比1:1，阳离子聚合物优选聚赖氨酸或聚甲基丙烯酸甘油酯。
本发明还提供上述智能响应的生物-无机杂化纳米抗菌材料的制备方法，其包括以下步骤：
（1）制备所述树枝状介孔二氧化硅；
（2）先对所述树枝状介孔二氧化硅进行氨基改性，然后在所述树枝状介孔二氧化硅孔内共价偶联光敏剂；
（3）在所述树枝状介孔二氧化硅孔内吸附溶菌酶；
（4）在所述树枝状介孔二氧化硅孔外包覆透明质酸酶反应性外壳。
所述步骤（1）具体是通过阴离子辅助合成的树枝状介孔二氧化硅纳米颗粒。其具体步骤包括：先在水中加入三乙醇胺60~90℃搅拌0.1~24小时，然后将十六烷基三甲基氯化铵和水杨酸钠加入到上述体系继续搅拌0.1~24小时，继续加入原硅酸四乙酯继续反应0.1~24小时，离心，去上清；产物分散在含有1.2/60 v/v%氨水和0.4/60 v/v% 3-氨丙基三乙氧基硅烷的乙醇溶液中，室温搅拌12小时，离心，醇洗三次，去上清；产物再次分散在含有0.0125g/mL琥珀酸酐的N,N-二甲基甲酰胺溶液中，室温搅拌6小时，离心，醇洗三次去上清；产物再次分散到体积比为0.5/35的盐酸/甲醇溶液中，在40-80℃下搅拌1-48小时，离心，醇洗三次去上清；产物分散在含有0.6/30 v/v%氨水和0.2/30 v/v % 3-氨丙基三乙氧基硅烷的乙醇溶液中，室温搅拌12小时，离心，醇洗三次，真空干燥，得到内部为氨基、外部为羧基的树枝状介孔二氧化硅。
所述步骤（2）中，共价偶联的光敏剂为二氢卟吩E6（Ce6）、酞菁锌等一种或多种。具体的，共价偶联Ce6的方法为：
在N,N-二甲基甲酰胺（DMF）溶液中，加入1-乙基-3-（3-二甲基氨基丙基）碳酰二亚胺盐酸盐（EDC）、N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐（NHS）和Ce6，反应2小时，Ce6被活化后与树枝状介孔二氧化硅在4℃下反应过夜，Ce6的羧基与纳米颗粒表面氨基共价偶联。反应物Ce6:EDC：NHS：树枝状介孔二氧化硅质量比为3:20：20：10。
所述步骤（3）中，吸附溶菌酶是通过物理吸附负载溶菌酶。具体的，所述吸附为：将已偶联光敏剂的树枝状介孔二氧化硅加入到含有溶菌酶的缓冲溶液中，避光搅拌1~24小时。
所述步骤（4）中，通过层层自组装技术在树枝状介孔二氧化硅外包覆透明质酸和阳离子聚合物外壳。
本发明还公开如下技术方案：
上述材料在抗菌治疗中应用。所述抗菌材料与细菌接触后，细菌分泌透明质酸酶酶解材料外壳诱导内部溶菌酶释放同时联合光动力共同杀菌。
本发明的优点在于：
利用树枝状介孔二氧化硅的大孔，孔的内部负载光敏剂，外部负载溶菌酶，表面通过自组装包覆透明质酸酶反应性壳，实现溶菌酶的可控释放，达到光动力与溶菌酶联合抗菌的目的。
附图说明
图1是本发明实施例1中树枝状介孔二氧化硅负载光敏剂和溶菌酶并包覆透明质酸酶反应性壳后的扫描电镜图。仪器型号为JSM-2010，厂家为JEOL。
图2是本发明实施例1中树枝状介孔二氧化硅内外改性后的透射电镜图。仪器型号为JSM-6700F，厂家为JEOL。
图3是树枝状介孔二氧化硅偶联光敏剂（Ce6）后的紫外可见吸收光谱图。仪器型号为Lambda 900，厂家为Perkin-Elmer。
图4是溶菌酶的可控释放曲线图。
图5是光动力联合溶菌酶抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌效果图。
图6是光动力联合溶菌酶抗耐药性大肠杆菌效果图。
具体实施方式
以下结合附图和实施例对本发明作进一步的详细说明。但本领域技术人员了解，本发明的保护范围不仅限于以下实施例。根据本发明公开的内容，本领域技术人员将认识到在不脱离本发明技术方案所给出的技术特征和范围的情况下，对以上所述实施例做出许多变化和修改都属于本发明的保护范围。
实施例1：智能响应的生物-无机杂化纳米抗菌材料的制备
（1）树枝状介孔二氧化硅的制备及改性
在25mL水中加入0.068g三乙醇胺80℃搅拌0.5小时，然后将380mg 十六烷基三甲基氯化铵和168mg 水杨酸钠加入到上述体系继续搅拌1小时，继续加入4mL 原硅酸四乙酯继续反应2小时，离心，去上清。产物分散在60mL 含有1.2mL氨水和400μL 3-氨丙基三乙氧基硅烷的乙醇溶液中，室温搅拌12小时，离心，醇洗三次，去上清。产物再次分散在40mL 含有0.5g 琥珀酸酐的N,N-二甲基甲酰胺（DMF）溶液中，室温搅拌6小时，离心，醇洗三次去上清。产物再次分散到35mL甲醇溶液中，加入0.5mL盐酸，在60℃下搅拌12小时，离心，醇洗三次去上清。产物分散在30mL 含有0.6mL氨水和200μL 3-氨丙基三乙氧基硅烷的乙醇溶液中，室温搅拌12小时，离心，醇洗三次，真空干燥，得到内部为氨基、外部为羧基的树枝状介孔二氧化硅，其透射电镜图如图1所示，颗粒尺寸均匀，大约为200 nm。
（2）共价偶联Ce6
取5mL DMF，加入20mg 1-乙基-3-（3-二甲基氨基丙基）碳酰二亚胺盐酸盐（EDC）、20mg N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐（NHS）和3mg Ce6，反应2小时，Ce6被活化后与10mg 树枝状介孔二氧化硅在4℃下反应过夜，使Ce6的羧基与纳米颗粒表面氨基共价偶联，离心，去上清液，待用。
（3）通过物理吸附负载溶菌酶
将2mg 已偶联Ce6的树枝状介孔二氧化硅加入到2mL 含有5mg/mL溶菌酶的碳酸盐缓冲溶液（pH为10, 20mM）中，避光搅拌2小时，离心洗涤，得到负载有光敏剂和溶菌酶的树枝状介孔二氧化硅。
（4）通过层层自组装包覆透明质酸酶反应性外壳。
将2mg负载有光敏剂和溶菌酶的树枝状介孔二氧化硅分散到2mL 、pH10的碳酸盐缓冲溶液（浓度20mM）中，加入0.2mg透明质酸（HA），搅拌1小时，离心，去上清液，产物再次分散到2mL缓冲溶液中，加入0.2mg聚赖氨酸（PLL），剧烈搅拌1小时，最终得到透明质酸酶响应性生物-无机杂化纳米抗菌材料，其扫描电镜如图2所示。
实施例2：光动力联合溶菌酶体外抗耐药菌：
从-80℃取拿出冻存的甘油菌（耐药性金黄色葡萄球菌和耐药性大肠杆菌）后，用枪头沾取少量甘油菌接种到2 mL LB培养基中，于37℃摇床培养数小时直至其OD600=0.5。将上述活化后的菌液用生理盐水稀释100倍后与生物-无机杂化纳米抗菌材料共同孵育30分钟，纳米材料浓度为60μg/mL，总体积均为2 mL。调节高功率半导体激光器功率为0.5 W/cm²，照射十分钟。将光照后的菌液用生理盐水按浓度梯度分别稀释为10-1、10-2、10-3、10-4、10-5，然后从不同浓度的菌液中吸取100μL用涂布棒均匀的涂抹在LB固体培养基中，每个浓度梯度做4个重复，然后将上述所有平板倒置在37℃培养箱中过夜培养12 h。除上述实验组外还设立只有细菌不作任何处理的空白对照组。除了实验处理不同，以上所有的实验操作和实验重复数量均相同。将所有平板过夜培养后计算各平板中的菌落数量。最后通过对比各组之间菌落数量来评价材料的联合抗菌效果。抗菌效果如图5和图6所示，这种光动力联合溶菌酶的体外抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌效果达到了4.8 log10，抗耐药性大肠杆菌效果达到了2.5 log10。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。

Claims (9)

1.一种光动力联合溶菌酶抗菌材料，其特征在于，所述材料为生物-无机杂化纳米抗菌材料，该材料包括树枝状介孔二氧化硅、偶联在孔内的光敏剂、吸附在孔内的溶菌酶和包覆在树枝状介孔二氧化硅表面的透明质酸酶反应性外壳。
2.根据权利要求1所述的光动力联合溶菌酶抗菌材料，其特征在于，所述树枝状介孔二氧化硅：光敏剂：溶菌酶：透明质酸酶反应性外壳质量比为：10:3:50：2。
3. 根据权利要求1所述的光动力联合溶菌酶抗菌材料，其特征在于，所述树枝状介孔二氧化硅的粒径为5~1000 nm；所述树枝状介孔二氧化硅纳米颗粒的孔径为2~50nm；所述光敏剂为带羧基的Ce6、四羧基酞菁锌或孟加拉玫瑰红；所述透明质酸酶反应性外壳为透明质酸和阳离子聚合物组成，两者质量比为1:1。
4.根据权利要求3所述的光动力联合溶菌酶抗菌材料，其特征在于，所述阳离子聚合物为聚赖氨酸或聚甲基丙烯酸甘油酯。
5.如权利要求1-4中任一项所述的智能响应的光动力联合溶菌酶抗菌材料的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
（1）制备所述树枝状介孔二氧化硅；
（2）在所述树枝状介孔二氧化硅孔内共价偶联光敏剂；
（3）在所述树枝状介孔二氧化硅孔内吸附溶菌酶；
（4）在所述树枝状介孔二氧化硅孔外包覆透明质酸酶反应性外壳。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述步骤（1）是通过阴离子辅助合成法制备所述树枝状介孔二氧化硅纳米颗粒；其具体步骤包括：
先在水中加入三乙醇胺60~90℃搅拌0.1~24小时，然后将十六烷基三甲基氯化铵和水杨酸钠加入到上述体系继续搅拌0.1 ~24小时，继续加入原硅酸四乙酯继续反应0.1~24小时，离心，去上清液；产物分散在含有1.2/60 v/v%氨水和0.4/60 v/v% 3-氨丙基三乙氧基硅烷的乙醇溶液中，室温搅拌12小时，离心，醇洗三次，去上清；产物再次分散在含有0.0125g/mL琥珀酸酐的N,N-二甲基甲酰胺溶液中，室温搅拌6小时，离心，醇洗三次去上清；产物再次分散到体积比为0.5/35的盐酸/甲醇溶液中，在40-80℃下搅拌1-48小时，离心，醇洗三次去上清；产物分散在含有0.6/30 v/v%氨水和0.2/30 v/v % 3-氨丙基三乙氧基硅烷的乙醇溶液中，室温搅拌12小时，离心，醇洗三次，真空干燥，得到内部为氨基、外部为羧基的树枝状介孔二氧化硅。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述步骤（2）中，共价偶联光敏剂Ce6的方法为：
在N,N-二甲基甲酰胺溶液中，加入1-乙基-3-（3-二甲基氨基丙基）碳酰二亚胺盐酸盐（EDC）、N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐（NHS）和Ce6，反应2小时，Ce6被活化后与树枝状介孔二氧化硅在4℃下反应过夜，Ce6的羧基与纳米颗粒表面氨基共价偶联；反应物Ce6:EDC：NHS：树枝状介孔二氧化硅质量比为3:20：20：10。
8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述步骤（3）中，吸附溶菌酶是通过物理吸附负载溶菌酶，具体为：将已偶联光敏剂的树枝状介孔二氧化硅加入到含有溶菌酶的缓冲溶液中，避光搅拌1~24小时。
9.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述步骤（4）中，通过层层自组装技术在树枝状介孔二氧化硅外包覆透明质酸和阳离子聚合物外壳。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113813381A (zh) * 2021-09-16 2021-12-21 江苏大学 一种溶菌酶负载硫化铜纳米酶复合材料的合成方法及其光热催化协同杀菌应用
CN114010845A (zh) * 2021-11-01 2022-02-08 淮阴工学院 一种近红外光响应抗菌涂层及制备方法

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011097347A2 (en) * 2010-02-03 2011-08-11 Microbion Corporation Bismuth-thiols as antiseptics for biomedical uses, including treatment of bacterial biofilms and other uses
CN105031669A (zh) * 2015-06-23 2015-11-11 上海师范大学 一种核壳结构纳米复合材料及其制备方法与应用
CN105412940A (zh) * 2015-12-02 2016-03-23 鲁东大学 一种复合型纳米抑菌材料用于万古霉素耐药致病菌的治疗
CN110180596A (zh) * 2019-05-22 2019-08-30 国家纳米科学中心 树枝状介孔二氧化硅/二氧化铱复合纳米酶的制备和应用
CN111215638A (zh) * 2018-11-24 2020-06-02 启东茂材实业有限公司 一种纳米银负载树枝状介孔二氧化硅的制备方法
CN111249461A (zh) * 2020-03-10 2020-06-09 福州大学 藻蓝蛋白-二氢卟酚e6共价纳米颗粒的制备及其应用

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011097347A2 (en) * 2010-02-03 2011-08-11 Microbion Corporation Bismuth-thiols as antiseptics for biomedical uses, including treatment of bacterial biofilms and other uses
CN105031669A (zh) * 2015-06-23 2015-11-11 上海师范大学 一种核壳结构纳米复合材料及其制备方法与应用
CN105412940A (zh) * 2015-12-02 2016-03-23 鲁东大学 一种复合型纳米抑菌材料用于万古霉素耐药致病菌的治疗
CN111215638A (zh) * 2018-11-24 2020-06-02 启东茂材实业有限公司 一种纳米银负载树枝状介孔二氧化硅的制备方法
CN110180596A (zh) * 2019-05-22 2019-08-30 国家纳米科学中心 树枝状介孔二氧化硅/二氧化铱复合纳米酶的制备和应用
CN111249461A (zh) * 2020-03-10 2020-06-09 福州大学 藻蓝蛋白-二氢卟酚e6共价纳米颗粒的制备及其应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
B. SHAREGHI ET.AL: "Structural studies on the interaction of nano-SiO2 with lysozyme", 《NANOSTRUCTURES》 *
张昌等: "光动力抗菌纳米制剂研究进展", 《中国激光》 *
黄连根 等: "树枝状介孔二氧化硅的制备及其负载纳米银的抗菌性", 《材料工程》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113813381A (zh) * 2021-09-16 2021-12-21 江苏大学 一种溶菌酶负载硫化铜纳米酶复合材料的合成方法及其光热催化协同杀菌应用
CN113813381B (zh) * 2021-09-16 2022-08-23 江苏大学 一种溶菌酶负载硫化铜纳米酶复合材料的合成方法及其光热催化协同杀菌应用
CN114010845A (zh) * 2021-11-01 2022-02-08 淮阴工学院 一种近红外光响应抗菌涂层及制备方法

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