CN112603912A - 罗伊氏菌素在畜禽养殖方面的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及畜禽养殖技术领域，具体涉及罗伊氏菌素在畜禽养殖方面的应用，本发明从罗伊氏乳杆菌中分离得到其代谢产物‑罗伊氏菌素，经过研究发现，其对家禽家畜肠道常见致病菌有良好的抑制，并具有很好的稳定性，同时可促进细胞先天免疫应答。表明罗伊氏菌素可作为畜禽生产中的绿色替抗产品，或者制备成抗肠道疾病畜禽产品或畜禽用免疫增强产品的形式，保护畜禽肠道健康，提高畜禽免疫力，促进养殖产业发展。

Description

罗伊氏菌素在畜禽养殖方面的应用
技术领域
本发明涉及畜禽养殖技术领域，具体涉及罗伊氏菌素在畜禽养殖方面的应用。
背景技术
目前畜牧养殖业生产上通常采用亚治疗剂量的抗生素来促进畜禽的生长，抗生素在饲料中的添加，可以显著提高饲料效率和畜禽生长，促进畜牧业的发展。近年来，世界抗生素市场的平均年增长率约为8％，占世界抗感染药物市场的最大份额(约250亿-260亿美元)，在我国，每年大概使用抗生素药物原料约20万吨，约50％用于养殖业，其中60％以上用作饲料添加剂，饲料企业所用抗生素市场规模大约30-35亿元。然而，近年来越来越多的研究证明，抗生素的滥用，对人类和动物健康成了极大的伤害。随着人们对食品安全的重视，抗生素在畜牧生产中受到越来越严格的限制，饲料中禁用抗生素的呼声也越来越高，近期，农业部公布了时间表，将于2020全面停止饲料中抗生素等药物的添加。这对规模化的畜牧养殖业是极大的挑战，因此寻找抗生素替代品是畜牧养殖业中急需解决的重大任务。
致病菌的致病性有明显的宿主特异性，不同的不同菌种/株/血清型有不同的宿主范围和特异性，导致不同程度的疾病；如沙门氏菌中，肠道沙门氏菌都柏林血清型的宿主是牛，肠道沙门氏菌猪霍乱血清型的宿主是猪，而肠道沙门氏菌肠炎血清型和肠道沙门氏菌鼠伤寒血清型常引起人肠胃炎症；大肠杆菌中大部分是非致病菌，但是O157:H7大肠杆菌可侵染人， ETEC K88的宿主是猪。因此，探索致病菌的特异性有利于对生产中的病原菌进行针对性的防治，提高防治的效果。
罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri,L.reuteri)是最常用的饲喂益生菌之一，对它的研究始于本世纪初，德国微生物学家GerhardReuter和他的同事们从人的空肠、回肠以及粪便样本中第一次分离出罗伊氏乳杆菌。研究发现，罗伊氏乳杆菌对很多人畜疾病有明显的疗效，在临床上已经广泛应用于疝气、坏死性小肠结肠炎、细菌感染以及炎症等的治疗中。目前，全球实验室中分离出的罗伊氏乳杆菌大约有165个不同菌株，通过对全部菌株的基因组进行进化树分析，可以将所有的菌株分为6个进化枝，这个分类与其宿主有很大的关联。
罗伊氏菌素是罗伊氏乳杆菌在糖酵解循环中，甘油转化为1,3-丙二醇的中间产物，由不同形态的3-羟基丙醛(3-HPA)的混合物组成。不同于其他细菌素，3-HPA并不是小肽段或蛋白质类生物分子，而是水溶性小分子化合物，因而它的抗菌活性不会受到蛋白酶的破坏，更具安全性和稳定性。鉴于罗伊氏菌素“普遍认为安全”的特性，目前它被应用于乳制品生产、食品保存、以及临床应用中，被广泛应用于鲜菜处理、乳制品发酵、提高肉制品货架期，青贮饲料生产等方面。另外，具有较高罗伊氏菌素合成能力的罗伊氏乳杆菌，可高剂量应用于临床医疗中抑制大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌以及幽门螺旋杆菌等人源致病菌的侵染；同时由于其对宿主的安全性，罗伊氏菌素也被应用于特殊人群(如4个月以下的新生儿、HIV感染者)的临床治疗中。
可见，罗伊氏菌素目前主要应用于食品保鲜以及临床治疗(抗人源致病菌)中，基于罗伊氏菌素的安全性，探索罗伊氏菌素的新应用方向，特别是其在畜禽养殖方面的应用，对畜禽产生具有重要的意义。
发明内容
为了克服上述现有技术的不足，本发明提供一种益生菌代谢物-罗伊氏菌素，其对家禽家畜肠道常见致病菌有良好的抑制，并可促进上皮细胞先天免疫应答，可作为畜禽生产中的绿色替抗产品，促进养殖产业发展。
为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：
本发明提供罗伊氏菌素在畜禽养殖方面的应用。
本发明还提供罗伊氏菌素作为抗生素替代品在畜禽养殖方面的应用。
罗伊氏菌素(Reuterin)是糖酵解循环中，甘油转化为1,3-丙二醇的中间产物：三羟基丙醛(3-HPA)，在自然状态下，罗伊氏菌素由不同形态的3-羟基丙醛(3-HPA)的混合物组成，如其水合物、二聚体、三聚体等。相比传统抗生素，罗伊氏菌素作为益生菌代谢物，具有绿色、安全等特性，而不同于其他细菌素，3-HPA并不是小肽段或蛋白质类生物分子，而是水溶性小分子化合物，因而它的抑菌活性不会受到蛋白酶的破坏，更具安全性和稳定性。
为研究探索罗伊氏菌素的新应用方向，探究了罗伊氏菌素对猪腹泻主要致病菌ETEC K88，鸡肠道常见致病菌沙门氏菌、白色念珠菌的抑菌效果和抑菌浓度，以及对猪肠上皮细胞先天免疫因子的影响，结果表明罗伊氏菌素对家禽家畜肠道常见致病菌有良好的抑制，并具有很好的稳定性，同时可促进细胞先天免疫应答，不同浓度的罗伊氏菌素可引发IPEC-J2 细胞产生不同的免疫应答，低浓度更倾向于上调细胞增殖和迁移相关的细胞因子表达。提示罗伊氏菌素可作为畜禽生产中绿色替抗产品，保护畜禽肠道健康，提高畜禽免疫力，促进养殖产业发展。
本发明还提供罗伊氏菌素在制备抗肠道疾病畜禽产品中的应用。
优选地，所述畜禽包括但不限于鸡和猪。
研究表明，罗伊氏菌素对猪腹泻主要致病菌ETEC K88，鸡肠道常见致病菌沙门氏菌以及白色念珠菌，均具有较好的抑菌效果；而且其对储存温度不敏感，稳定性好，表明罗伊氏菌素可用于制备抗肠道疾病畜禽产品。
本发明还提供罗伊氏菌素在制备畜禽用免疫增强产品中的应用。
优选地，所述畜禽包括但不限于猪。
研究表明，罗伊氏菌素可促进细胞先天免疫应答，不同浓度的罗伊氏菌素可引发猪肠上皮细胞IPEC-J2产生不同的免疫应答，低浓度更倾向于上调细胞增殖和迁移相关的细胞因子表达，表明罗伊氏菌素可用于制备畜禽用免疫增强产品。
优选地，所述产品包括但不限于饲料添加剂和畜禽药物。
本发明还提供一种抗肠道疾病畜禽饲料添加剂，该饲料添加剂以罗伊氏菌素为主要活性成分。
本发明还提供一种抗肠道疾病畜禽药物，该药物以罗伊氏菌素为主要活性成分。
本发明还提供一种畜禽用免疫增强饲料添加剂，饲料添加剂以罗伊氏菌素为主要活性成分。
本发明还提供一种畜禽用免疫增强药物，该药物以罗伊氏菌素为主要活性成分。
优选的，上述抗肠道疾病畜禽药物或免疫增强药物还包括药学上可接受的辅料。所述辅料包括甜味剂(如甜菊糖、甘草甜素)、抗氧化剂(如乙氧喹啉、丁羟甲苯、丁羟甲氧苯)、防霉剂(如苯甲酸钠、丙酸钠、富马酸二甲酯)等。
优选的，上述抗肠道疾病畜禽饲料添加剂或免疫增强饲料添加剂还包括饲料学上可接受的辅料，所述辅料包括载体(如木薯粉、麸皮)、酶制剂(如淀粉酶、α-半乳糖苷酶、纤维素酶、β-葡聚糖酶、葡萄糖氧化酶)和粘合剂(如微晶纤维素、乙基纤维素)等。
优选的，本发明提供的药物可添加相应的辅料制成各种剂型，以满足市场的需求，所述组合物的剂型为颗粒剂、片剂、散剂、冲剂、膏剂、注射剂中的任一种。
优选的，为满足市场的需求，本发明提供的饲料添加剂可添加相应的辅料制成颗粒剂或粉剂等。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明从罗伊氏乳杆菌中分离得到其代谢产物-罗伊氏菌素，经过研究发现，其对家禽家畜肠道常见致病菌有良好的抑制，并具有很好的稳定性，同时可促进细胞先天免疫应答。表明罗伊氏菌素可作为畜禽生产中的绿色替抗产品，或者制备成抗肠道疾病畜禽产品或畜禽用免疫增强产品的形式，保护畜禽肠道健康，提高畜禽免疫力，促进养殖产业发展。
附图说明
图1为实施例1的上清液浓缩物的GC-MS总离子流图；
图2为罗伊氏菌素对大肠杆菌K88的抑制情况；
图3为罗伊氏菌素对鸡源沙门氏菌的抑制情况；
图4为罗伊氏菌素对鸡源白色念珠菌的抑制情况；
图5为罗伊氏菌素对大肠杆菌K88的MIC；
图6为罗伊氏菌素对鸡源沙门氏菌的MIC；
图7为罗伊氏菌素对鸡源白色念珠菌的MIC；
图8为-20℃、20℃和37℃储存下的罗伊氏菌素对大肠杆菌的抑制效果；
图9为-20℃、20℃和37℃储存下的罗伊氏菌素对沙门氏菌的抑制效果；
图10为-20℃、20℃和37℃储存下的罗伊氏菌素对白色念珠菌的抑制效果；
图11为罗伊氏菌素引起的白细胞介素相关基因表达显著性差异(p value<0.05)；
图11中，(A)为2μL/mL Reuterin引起的基因表达显著性差异；(B)为20μL/mLReuterin 引起的基因表达显著性差异。
图12为罗伊氏菌素对趋化因子相关基因显著性差异表达总览(p value<0.05)；
在图12中，(A)为2μL/mL Reuterin引起的基因表达显著性差异；(B)为20μL/mLReuterin 引起的基因表达显著性差异。
图13为qRT-PCR检测罗伊氏菌素对部分白细胞介素相关因子(IL11、LIF、IL1R1、IL22RA1)相对表达量的影响(“*”表示差异性显著，p-value<＝0.05)；
图14为qRT-PCR检测罗伊氏菌素对部分白细胞介素相关因子(IL6ST、IL1RAPL2、IL10RA、IL18)相对表达量的影响(“*”表示差异性显著，p-value<＝0.05)；
图15为qRT-PCR检测罗伊氏菌素对部分趋化因子相关基因的相对表达量影响(“*”表示差异性显著，p-value<＝0.05)。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是，对于这些实施方式的说明用于帮助理解本发明，但并不构成对本发明的限定。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为可通过常规的商业途径购买得到的。
实施例1罗伊氏菌素的提取
复苏L.reuteri ATCC55730菌株，经过夜培养后取100μL菌液接种于10mL MRS培养基中，37℃摇床培养3h，然后取10mL菌液倒入1L MRS+20mM甘油的培养基中，37℃摇床培养过夜；4℃/3000g离心20min，弃去上清，再加入1L磷酸钾缓冲液(100mM，pH＝7.0)重悬浮，再次离心沉淀，弃去上清液；加入60mL甘油储液，37℃摇床培养2.5-3h，离心沉淀，收集上清液，以0.22μm的滤膜过滤上清后放入-80℃长期保存，上清的工作液则保存于-20℃冰箱。最后取10mL上清液冻干浓缩，进行浓度及纯度检测：
浓度检测采用丙烯醛-色氨酸比色法，纯度检测采用GC-MS方法。检测结果显示，上清液浓缩物的浓度为：27.92μmol/mL；GC-MS结果(图1)显示上清液浓缩物的成分清晰，经过与NIST库进行比对，发现该上清液浓缩物的分为6个峰，其中，第一、二个峰与乙酸匹配度较高，第三个峰与丙酸、丙烯酸匹配度较高，第四、五、六个峰与甘油有很高的匹配度，属于典型的罗伊氏菌素的特征，由此提取得到罗伊氏菌素。
实施例2罗伊氏菌素对畜禽常见致病菌的抑制作用
(1)实验材料
采用的细菌菌株为lactobacillus reuteri ATCC 55730，大肠杆菌K88(ETECK88)、大肠杆菌BW25113、沙门氏菌、白色念珠菌；均由本实验室保存。
采用的培养基为：MRS培养基(用于培养lactobacillus reuteri)、LB培养基(用于培养致病菌大肠杆菌、沙门氏菌以及白色念珠菌)，其中MRS培养基和甘油购自广州环凯生物科技有限公司，LB培养基购自广州环凯生物科技有限公司。
(2)抑菌性检测
采用固体平板梯度滴定法和MIC检测法研究罗伊氏菌素(Reuterin)对畜禽常见致病菌大肠杆菌(猪源)、沙门氏菌(鸡源)、白色念珠菌(鸡源)的抑菌性能。
固体平板梯度滴定法采用含有不同浓度罗伊氏菌素(0,0.279μM，0.698μM，1.395μM， 2.79μM)的LB固体培养基平板，将过夜培养的病原菌培养液(大肠杆菌、沙门氏菌以及白色念珠菌)按10倍的梯度进行稀释，从100稀释至10-13倍，每个浓度的菌液取3μL，滴至含有不同浓度罗伊氏菌素的LB培养板上，置于37℃培养箱中过夜培养，然后观察各致病菌的生长情况。实验过程中，设置了阳性对照(添加了甘油的LB平板)和阴性对照(添加了 30μg/mL卡那霉素(Kan)的LB平板)，每组样品均进行3次重复实验。
MIC检测方法采用含有不同浓度罗伊氏菌素(0,0.279μM,0.558μM,0.837μM,1.116μM, 1.396μM,1.675μM,1.954μM,2.233μM,2.512μM)的LB液体培养基平板，将各病原菌(大肠杆菌、沙门氏菌以及白色念珠菌)过夜培养后，取1μL接种于100μL含有不同罗伊氏菌素浓度的LB培养基中，置于37℃培养箱中过夜培养后，以酶标仪读取OD600数值，实验过程中，设置了阳性对照(LB培养基)和阴性对照(添加了30μg/mL卡那霉素的LB培养基)，每组样品均进行3次重复实验。
(3)抑菌性能稳定性检测
为确定罗伊氏菌素在畜禽生产中的应用潜力，检测了储存温度对罗伊氏菌素抑菌性能的影响，本实验一共设置三个储存温度：-20℃，室温(20℃)和37℃，实验时，将罗伊氏菌素从-20℃冰箱中取出，分别取10mL置于不同的温度环境中，储存24小时后，按照MIC检测方法观察其对畜禽致病菌的MIC变化。
从图2-7可以看出，罗伊氏菌素对猪腹泻主要致病菌ETEC K88，鸡肠道常见致病菌沙门氏菌以及白色念珠菌，均具有较好的抑菌效果，其中，罗伊氏菌素抑制大肠杆菌的MIC为 1.954μM，罗伊氏菌素抑制鸡源沙门氏菌的MIC为1.116μM，罗伊氏菌素抑制鸡源白色念珠菌的MIC为0.837μM。
罗伊氏菌素的稳定性对其在畜禽生产中的应用方式起到重大指导作用，本研究中，检测了罗伊氏菌素在-20℃，室温(约20℃)，以及37℃条件下存储后的抑菌性能变化，从图8- 图10可以看出，这三种储存温度对罗伊氏菌素的抗菌性能影响不大。
实施例3罗伊氏菌素对猪肠上皮细胞IPEC-J2的细胞因子表达的调节作用
应用于畜禽养殖中，也需具备对宿主无毒，可促进宿主生长、提高宿主免疫等功效，因此检测了罗伊氏菌素对猪肠上皮细胞先天免疫因子的影响。
(1)实验材料
猪肠上皮细胞系IPEC-J2，由本实验室保存。
采用的主要试剂耗材为：RNA抽提采用RNAiso Plus试剂盒(9109，Takara)，反转录试剂盒采用
Figure RE-GDA0002947212080000062
Ⅱ1st Strand cDNA Synthesis Kit(11119ES60，翊圣生物)，荧光定量PCR试剂盒采用
Figure RE-GDA0002947212080000061
qPCR SYBR Green Master Mix(11202ES08，翊圣生物)，引物合成由生工(上海)公司完成。
(2)IPEC-J2细胞全转录组研究
将IPEC-J2细胞以2.5×105个/mL的密度接种于6孔板中，置于37℃、5％CO2培养箱中培养，隔天换液；待细胞长满后更换含有甘油(20μL/mL)，罗伊氏菌素(2μL/mL，20μL/mL，50μL/mL)的完全培养基，处理4h以后取出，弃去培养基，以PBS清洗3次后，加入Trizol。然后采用Illumina TruSeq Small RNA试剂盒构建small RNA文库。再利用Illumina Novaseq6000/Hiseq X ten(Illumina，美国)高通量测序平台，对真核生物特定组织或细胞在某个时期转录出来的多种RNA进行测序，与参考基因组进行比对，获得用于后续分析的Mappeddata (reads)，同时统计其在各染色体上的分布情况。使用RSEM软件对各样本中mRNA、small RNA、lncRNA和circRNA等4类RNA的表达水平进行定量分析，以便后续分析不同样本间的差异表达情况。获得4类RNA的Read Counts数后，采用DEseq2对多组样本(≥2组) 项目进行样本间表达差异分析，鉴定出样本间差异表达的RNAs。最后进行GO、KEGG功能注释及功能富集研究，通过功能富集分析，获得该基因集中的基因主要具有哪些功能或主要参与哪些代谢通路。
(3)数据分析与统计
对上述转录组研究获得的数据通过R语言进行分析，并利用R语言和Graphpadprism7 进行数据可视化。
(4)qRT-PCR检测
离心收集细胞，转移至装有1mL RNAiso Plus的1.5mL离心管中，振荡混匀后室温静置约5min；每1mL RNAiso Plus加入0.2mL氯仿，振荡混匀15s后室温静置约3min，4℃/12000rpm 离心10min；转移水相至新的1.5mL离心管中，每1mL RNAiso Plus加入0.5mL异丙醇，混匀后室温静置10min，4℃/12000rpm离心10min，弃上清；每1mL RNAiso Plus加入1mL75％的乙醇，混匀后4℃/7500rpm离心5min，弃上清，空气干燥RNA沉淀约5min(注意不要完全干燥，只需沉淀泛白即可)，加入适量的DEPC处理水溶解RNA沉淀。用分光光度计测定RNA浓度和纯度后记录数据。根据
Figure RE-GDA0002947212080000071
Ⅱ1st Strand cDNA Synthesis Kit操作手册，进行cDNA第一链合成，反应完后产物稀释8倍放-20℃保存备用；根据
Figure RE-GDA0002947212080000072
qPCR SYBR GreenMaster Mix操作说明准备样品、引物和PCR反应buffer，然后进行荧光定量PCR反应。
(5)qRT-PCR结果计算方法
每个样品用内参基因(GAPDH)做均一化处理，校正各样品在核酸数量上的差异，校正值＝目的基因/内参基因，即X1/X2＝2-(Ct1-Ct2)＝2-△Ct，2-△Ct即表示每个样品中目的基因经过内参基因均一化处理后的分子数量。比较不同样品间某个基因的表达量差异；相对值＝处理样品 /对照样品，即倍数变化为2-△Ct1/2-△Ct2＝2-△△Ct。
(6)结果分析
1)白细胞介素相关基因表达差异分析
白细胞介素(白介素，IL)是一大类免疫调节蛋白，可引起细胞和组织中的多种免疫应答。IL在免疫应答过程中调节生长，分化和激活。本研究中对各个实验组的表达结果进行分析发现，白细胞介素相关的基因表达差异在各个实验组重复性良好，上下调趋势明显。对有差异基因进行逐个分析，可以观察到，以低浓度(2μL/mL)罗伊氏菌素处理的IPEC-J2细胞有9个白细胞介素相关因子基因表达呈现显著性差异，如图11(A)，其中4个基因表达上调，分别为：IL11、LIF、NFIL3、IL23R；5个基因表达下调，分别为：ENSSSCG00000029668、IL4I1、IL22RA1、IL17B、IL1R1；以高浓度(20μL/mL)罗伊氏菌素处理的IPEC-J2细胞有 21个白细胞介素相关因子基因表达有显著性差异，如图11(B)，其中8个上调，如：IL6ST、IL13RA1、IL1RAPL2、IL7、IL18、IL1R1、IL34、IL23R；13个基因表达显著性下调，如： IL4R、IL4I1、IL17RA、IRAK1、ILF3、IL27RA、ENSSSCG00000029668、IL10RA、IRAK2、ENSSSCG00000012397、IL21R、LIF。
2)趋化因子相关基因显著性差异表达
趋化因子因其可诱导细胞的趋向性而得名，一般分子量较小(约8KD-14KD)，由4个半胱氨酸(Cys)残基维持其三维结构。趋化因子可分为四个主要的亚家族：CXC、CC、CX3C 和XC，与细胞迁移和炎症反应有密切关联。本研究对各个实验组的表达结果进行分析发现，趋化因子相关的基因表达差异在各个实验组上下调趋势重复性良好。差异基因逐个检查发现，以低浓度(2μL/mL)罗伊氏菌素处理的IPEC-J2细胞有6个趋化因子相关基因表达呈现显著性差异，如图12(A)，其中4个基因表达上调，分别为：CXCL8、CXCL2、ENSSSCG00000013593、CCL4；2个基因表达下调，分别为：CCL22、CXCR5；以高浓度 (20μL/mL)罗伊氏菌素处理的IPEC-J2细胞有4个趋化因子相关基因表达有显著性差异，如图12(B)，其中3个上调，如：CXCL2、CXCL8、ENSSSCG00000013593；1个基因表达显著性下调，如：CCL22。
3)罗伊氏菌素对部分白细胞介素相关因子和部分趋化因子相关基因的相对表达量的影响
基于转录组学内容，对具有显著性表达差异的细胞因子进行qRT-PCR检测，本次实验检测了以下基因表达：IL11、LIF、IL1R1、IL22RA1、IL10RA、IL18、IL6ST、IL1RAPL2、CCL4、CXCR5、CCL22、CXCL8。其中在2μL/mL罗伊氏菌素和20μL/mL罗伊氏菌素中均表现显著性差异表达的有：LIF、IL1R1、IL22RA1、CCL22、CXCL8；仅在2μL/mL罗伊氏菌素处理中表现显著性差异的有：IL11、CCL4、CXCR5；仅在20μL/mL罗伊氏菌素处理中表现显著性差异的有：IL10RA、IL18、IL6ST、IL1RAPL2。
本次测试采用3个罗伊氏菌素处理浓度2μL/mL、20μL/mL、50μLl/mL。具有显著性表达差异的部分白细胞介素因子的相对表达量如图13和图14所示：IL11、LIF在低浓度罗伊氏菌素(2μL/mL)处理时表达上调，高浓度处理时表达下调(20μL/mL、50μL/mL)；IL1R1、IL22RA1、IL10RA、IL6ST、IL1RAPL2在3个浓度罗伊氏菌素处理时均下调；IL18基因的表达在罗伊氏菌素处理时无显著性差异。部分趋化因子的相对表达量如图15所示，CXCR5、 CCL22经罗伊氏菌素处理后均表现为表达均下调，CXCL8表达量显著性上调，CCL4基因的表达经2μL/mL、20μL/mL罗伊氏菌素处理无显著性差异，50μL/mL罗伊氏菌素处理后表达下调。
综上所述可见，罗伊氏菌素可促进细胞先天免疫应答，不同浓度的罗伊氏菌素可引发 IPEC-J2细胞产生不同的免疫应答，低浓度更倾向于上调细胞增殖和迁移相关的细胞因子表达。
以上对本发明的实施方式作了详细说明，但本发明不限于所描述的实施方式。对于本领域的技术人员而言，在不脱离本发明原理和精神的情况下，对这些实施方式进行多种变化、修改、替换和变型，仍落入本发明的保护范围内。

Claims (9)

1.罗伊氏菌素在畜禽养殖方面的应用。
2.罗伊氏菌素作为抗生素替代品在畜禽养殖方面的应用。
3.罗伊氏菌素在制备抗肠道疾病畜禽产品中的应用。
4.罗伊氏菌素在制备畜禽用免疫增强产品中的应用。
5.根据权利要求3或4所述的应用，其特征在于，所述产品包括但不限于饲料添加剂和畜禽药物。
6.一种抗肠道疾病畜禽饲料添加剂，其特征在于，以罗伊氏菌素为主要活性成分。
7.一种抗肠道疾病畜禽药物，其特征在于，以罗伊氏菌素为主要活性成分。
8.一种畜禽用免疫增强饲料添加剂，其特征在于，以罗伊氏菌素为主要活性成分。
9.一种畜禽用免疫增强药物，其特征在于，以罗伊氏菌素为主要活性成分。
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