CN112574276A - 一种菜籽蛋白的提取工艺 - Google Patents

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Abstract

本发明属于菜籽蛋白提取技术领域，具体涉及一种菜籽蛋白的提取工艺。本发明提取工艺包括将油菜籽经过脱皮及仁皮分离后，对菜籽仁进行软化处理，对经软化处理后的菜籽仁进行压榨处理，对经压榨处理后的饼胚进行粉碎，得菜籽粕；将菜籽粕置于容器中，加入石油醚，脱脂，过滤，将脱脂后菜籽粕置于容器中，加入混合液，浸泡2‑4h后进行辐照处理，过滤，向辐照后沉淀物中加入盐酸水溶液，超声处理，过滤，向所得混合料A中加入乙醇水溶液，超声处理，过滤，向混合料B中加水，调节pH，升温，加入复合酶，酶解，灭酶，过滤，向酶解液中加入活性炭，抽滤，将滤液浓缩、冷冻干燥。本发明提取率高，且能有效脱除抗营养成分，所得菜籽蛋白的消化率高。

Description

一种菜籽蛋白的提取工艺
技术领域
本发明属于菜籽蛋白提取技术领域，具体涉及一种菜籽蛋白的提取工艺。
背景技术
油菜是我国主要油料作物之一，油菜籽油是我国重要的食用植物油之一。然而菜籽通过榨油环节之后还留有大量的菜籽粕剩余物。菜籽粕(饼)作为油菜籽榨油后的主要副产品，富含丰富的天然植物蛋白，是动物饲料蛋白质的重要来源，同时其富含的其他活性成分也是重要的工业原料。由于菜籽粕中存在抗营养成分，如植酸、硫代葡萄糖甙等，会对动物适口性或生长发育产生不良影响，使得菜籽粕在饲料应用方面受到极大的限制。
目前，现有的菜籽蛋白的提取工艺存在不能有效脱除植酸、硫代葡萄糖甙等抗营养成分，得到的菜籽蛋白的利用率低以及菜籽蛋白的提取率低等问题。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种菜籽蛋白的提取工艺。本发明提供的菜籽蛋白的提取工艺菜籽蛋白的提取率高，而且能有效脱除植酸、硫代葡萄糖甙等抗营养成分，所得菜籽蛋白的消化率高，解决了现有的菜籽蛋白的提取工艺存在的不能有效脱除植酸、硫代葡萄糖甙等抗营养成分，得到的菜籽蛋白的利用率低以及菜籽蛋白的提取率低的技术难题。
本发明的技术方案是：
一种菜籽蛋白的提取工艺，包括以下步骤：
S1将油菜籽经过脱皮及仁皮分离后，对菜籽仁进行软化处理，控制软化水分为8-10％，软化温度为50-60℃，软化时间为15-25min，对经软化处理后的菜籽仁进行压榨处理，压榨处理时控制出料温度为65-75℃，控制出料饼胚残油率在12-14％，对经压榨处理后的饼胚进行粉碎，过80-120目筛，得菜籽粕；
S2将步骤S1所得菜籽粕置于容器中，加入石油醚，石油醚的加入量为菜籽粕质量的4-6倍，脱脂，脱脂温度为35-45℃，脱脂时间为7-9h，过滤，得脱脂后菜籽粕；
S3将步骤S2所得脱脂后菜籽粕置于容器中，加入混合液，混合液的加入量为脱脂后菜籽粕质量的3-6倍，浸泡2-4h后进行辐照处理，过滤，得辐照后沉淀物；
S4向步骤S3所得辐照后沉淀物中加入pH为3-5的盐酸水溶液，盐酸水溶液的加入量为辐照后沉淀物质量的5-7倍，超声处理15-25min，过滤，得混合料A；
S5向步骤S4所得混合料A中加入体积分数为75-85％的乙醇水溶液，乙醇水溶液加入量为混合料A质量的2-5倍，超声处理15-25min，过滤，得混合料B；
S6向步骤S5所得混合料B中加水，水的加入量为混合料B质量的7-10倍，调节pH至6-7，升温至40-50℃，加入复合酶，复合酶的加入量为混合料B质量的3-5‰，酶解时间为50-80min，升温至90-100℃，保持10-16min，灭酶，过滤，得酶解液；
S7向步骤S6所得酶解液中加入活性炭，搅拌30-60min，抽滤，得滤液，将滤液浓缩、冷冻干燥，得菜籽蛋白。
优选地，所述步骤S3所述混合液的制备方法为：取混合物，加水，使混合物的质量浓度为1-3％，即得。
优选地，所述混合物由氯化钠和硫酸亚铁按质量比1-2:4-7组成。
优选地，所述混合物由氯化钠和硫酸亚铁按质量比1:5组成。
优选地，所述复合酶由菠萝蛋白酶和改性蛋白酶按质量比2-5:6-10组成。
优选地，所述复合酶由菠萝蛋白酶和改性蛋白酶按质量比3:8组成。
优选地，所述改性蛋白酶的制备方法为：
向混合液中加入中性蛋白酶，混合液与中性蛋白酶的质量比为7-9:1，搅拌1-2h，加入质量浓度为20-30％的氯化钙水溶液，氯化钙水溶液的加入量为混合液质量的5-8％，搅拌15-30min，喷雾干燥，即得。
优选地，所述混合液的制备方法为：取海藻酸钠，加水，制成质量浓度为2-4％的海藻酸钠水溶液；取黄原胶，加水，制成质量浓度为1-2％的黄原胶水溶液；将海藻酸钠水溶液和黄原胶水溶液等体积混合均匀，即得。
本发明中，通过向脱脂后菜籽粕中加入由氯化钠和硫酸亚铁制成的混合液，浸泡后进行辐照处理等步骤，不仅可以提升对抗营养成分的脱除效果，提高菜籽蛋白体外消化性，显著提升所得产品的消化率和利用率，还可以破坏菜籽粕中蛋白质的结构，使二硫键断裂、肽键展开，促进菜籽粕中有效成分的溶出，提高菜籽蛋白的提取效率。本发明中，由菠萝蛋白酶和改性蛋白酶按一定质量比复配而成的复合酶，能够产生优异的酶解效果，提高菜籽蛋白的提取率。
与现有技术相比，本发明具有以下优势：
(1)本发明提供的菜籽蛋白的提取工艺菜籽蛋白的提取率高，且可以最大程度的保留菜籽蛋白的活性。
(2)本发明提供的菜籽蛋白的提取工艺能有效脱除植酸、硫代葡萄糖甙等抗营养成分，所得产物中植酸、硫代葡萄糖甙等抗营养成分含量低。
(3)采用本发明提供的菜籽蛋白的提取工艺所得菜籽蛋白的消化率高。
具体实施方式
以下通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的范围之内。
本发明中所用原料如无特殊说明均为市售。如菠萝蛋白酶可购自西安欣禄生物科技有限公司，货号：XL180614；中性蛋白酶可购自南宁庞博生物工程有限公司，货号：PBD-01-3；海藻酸钠可购自广东华展药业有限公司，货号：1002；黄原胶可购自南京熙美诺生物科技有限公司，货号：031。
实施例1、一种菜籽蛋白的提取工艺
所述菜籽蛋白的提取工艺，包括以下步骤：
S1将油菜籽经过脱皮及仁皮分离后，对菜籽仁进行软化处理，控制软化水分为8％，软化温度为50℃，软化时间为15min，对经软化处理后的菜籽仁进行压榨处理，压榨处理时控制出料温度为65℃，控制出料饼胚残油率在12％，对经压榨处理后的饼胚进行粉碎，过80目筛，得菜籽粕；
S2将步骤S1所得菜籽粕置于容器中，加入石油醚，石油醚的加入量为菜籽粕质量的4倍，脱脂，脱脂温度为35℃，脱脂时间为7h，过滤，得脱脂后菜籽粕；
S3将步骤S2所得脱脂后菜籽粕置于容器中，加入混合液，混合液的加入量为脱脂后菜籽粕质量的3倍，浸泡2h后进行辐照处理，辐照处理具体步骤为：将用混合液浸泡处理后的菜籽粕放入密封装置瓶中，用钴60射线对装有浸泡处理后的菜籽粕的密封装置瓶进行辐照，辐照剂量为1kGy，辐照时间为30min，过滤，得辐照后沉淀物；所述混合液的制备方法为：取由氯化钠和硫酸亚铁按质量比1:7组成的混合物，加水，使混合物的质量浓度为1％，即得；
S4向步骤S3所得辐照后沉淀物中加入pH为3的盐酸水溶液，盐酸水溶液的加入量为辐照后沉淀物质量的5倍，超声处理15min，过滤，得混合料A；
S5向步骤S4所得混合料A中加入体积分数为75％的乙醇水溶液，乙醇水溶液加入量为混合料A质量的2倍，超声处理15min，过滤，得混合料B；
S6向步骤S5所得混合料B中加水，水的加入量为混合料B质量的7倍，调节pH至6，升温至40℃，加入由菠萝蛋白酶和改性蛋白酶按质量比2:10组成的复合酶，复合酶的加入量为混合料B质量的3‰，酶解时间为50min，升温至90℃，保持10min，灭酶，过滤，得酶解液；
S7向步骤S6所得酶解液中加入活性炭，活性炭的加入量为酶解液质量的1％，搅拌30min，抽滤，得滤液，将滤液浓缩、冷冻干燥，得菜籽蛋白。
所述改性蛋白酶的制备方法为：
向混合液中加入中性蛋白酶，混合液与中性蛋白酶的质量比为7:1，搅拌1h，加入质量浓度为20％的氯化钙水溶液，氯化钙水溶液的加入量为混合液质量的5％，搅拌15min，喷雾干燥，即得；所述混合液的制备方法为：取海藻酸钠，加水，制成质量浓度为2％的海藻酸钠水溶液；取黄原胶，加水，制成质量浓度为1％的黄原胶水溶液；将海藻酸钠水溶液和黄原胶水溶液等体积混合均匀，即得。
实施例2、一种菜籽蛋白的提取工艺
所述菜籽蛋白的提取工艺，包括以下步骤：
S1将油菜籽经过脱皮及仁皮分离后，对菜籽仁进行软化处理，控制软化水分为10％，软化温度为60℃，软化时间为25min，对经软化处理后的菜籽仁进行压榨处理，压榨处理时控制出料温度为75℃，控制出料饼胚残油率在14％，对经压榨处理后的饼胚进行粉碎，过120目筛，得菜籽粕；
S2将步骤S1所得菜籽粕置于容器中，加入石油醚，石油醚的加入量为菜籽粕质量的6倍，脱脂，脱脂温度为45℃，脱脂时间为9h，过滤，得脱脂后菜籽粕；
S3将步骤S2所得脱脂后菜籽粕置于容器中，加入混合液，混合液的加入量为脱脂后菜籽粕质量的6倍，浸泡4h后进行辐照处理，辐照处理具体步骤为：将用混合液浸泡处理后的菜籽粕放入密封装置瓶中，用钴60射线对装有浸泡处理后的菜籽粕的密封装置瓶进行辐照，辐照剂量为2kGy，辐照时间为50min，过滤，得辐照后沉淀物；所述混合液的制备方法为：取由氯化钠和硫酸亚铁按质量比2:4组成的混合物，加水，使混合物的质量浓度为3％，即得；
S4向步骤S3所得辐照后沉淀物中加入pH为5的盐酸水溶液，盐酸水溶液的加入量为辐照后沉淀物质量的7倍，超声处理25min，过滤，得混合料A；
S5向步骤S4所得混合料A中加入体积分数为85％的乙醇水溶液，乙醇水溶液加入量为混合料A质量的5倍，超声处理25min，过滤，得混合料B；
S6向步骤S5所得混合料B中加水，水的加入量为混合料B质量的10倍，调节pH至7，升温至50℃，加入由菠萝蛋白酶和改性蛋白酶按质量比5:6组成的复合酶，复合酶的加入量为混合料B质量的5‰，酶解时间为80min，升温至100℃，保持16min，灭酶，过滤，得酶解液；
S7向步骤S6所得酶解液中加入活性炭，活性炭的加入量为酶解液质量的3％，搅拌60min，抽滤，得滤液，将滤液浓缩、冷冻干燥，得菜籽蛋白。
所述改性蛋白酶的制备方法为：
向混合液中加入中性蛋白酶，混合液与中性蛋白酶的质量比为9:1，搅拌2h，加入质量浓度为30％的氯化钙水溶液，氯化钙水溶液的加入量为混合液质量的8％，搅拌30min，喷雾干燥，即得；所述混合液的制备方法为：取海藻酸钠，加水，制成质量浓度为4％的海藻酸钠水溶液；取黄原胶，加水，制成质量浓度为2％的黄原胶水溶液；将海藻酸钠水溶液和黄原胶水溶液等体积混合均匀，即得。
实施例3、一种菜籽蛋白的提取工艺，包括以下步骤：
所述菜籽蛋白的提取工艺，包括以下步骤：
S1将油菜籽经过脱皮及仁皮分离后，对菜籽仁进行软化处理，控制软化水分为9％，软化温度为55℃，软化时间为20min，对经软化处理后的菜籽仁进行压榨处理，压榨处理时控制出料温度为70℃，控制出料饼胚残油率在13％，对经压榨处理后的饼胚进行粉碎，过100目筛，得菜籽粕；
S2将步骤S1所得菜籽粕置于容器中，加入石油醚，石油醚的加入量为菜籽粕质量的6倍，脱脂，脱脂温度为40℃，脱脂时间为8h，过滤，得脱脂后菜籽粕；
S3将步骤S2所得脱脂后菜籽粕置于容器中，加入混合液，混合液的加入量为脱脂后菜籽粕质量的4倍，浸泡3h后进行辐照处理，辐照处理具体步骤为：将用混合液浸泡处理后的菜籽粕放入密封装置瓶中，用钴60射线对装有浸泡处理后的菜籽粕的密封装置瓶进行辐照，辐照剂量为1.5kGy，辐照时间为40min，过滤，得辐照后沉淀物；所述混合液的制备方法为：取由氯化钠和硫酸亚铁按质量比1:5组成的混合物，加水，使混合物的质量浓度为2％，即得；
S4向步骤S3所得辐照后沉淀物中加入pH为4的盐酸水溶液，盐酸水溶液的加入量为辐照后沉淀物质量的6倍，超声处理20min，过滤，得混合料A；
S5向步骤S4所得混合料A中加入体积分数为80％的乙醇水溶液，乙醇水溶液加入量为混合料A质量的4倍，超声处理20min，过滤，得混合料B；
S6向步骤S5所得混合料B中加水，水的加入量为混合料B质量的9倍，调节pH至6.5，升温至45℃，加入由菠萝蛋白酶和改性蛋白酶按质量比3:8组成的复合酶，复合酶的加入量为混合料B质量的4‰，酶解时间为70min，升温至95℃，保持12min，灭酶，过滤，得酶解液；
S7向步骤S6所得酶解液中加入活性炭，活性炭的加入量为酶解液质量的2％，搅拌45min，抽滤，得滤液，将滤液浓缩、冷冻干燥，得菜籽蛋白。
所述改性蛋白酶的制备方法为：
向混合液中加入中性蛋白酶，混合液与中性蛋白酶的质量比为8:1，搅拌1.5h，加入质量浓度为25％的氯化钙水溶液，氯化钙水溶液的加入量为混合液质量的7％，搅拌20min，喷雾干燥，即得；所述混合液的制备方法为：取海藻酸钠，加水，制成质量浓度为3％的海藻酸钠水溶液；取黄原胶，加水，制成质量浓度为1.5％的黄原胶水溶液；将海藻酸钠水溶液和黄原胶水溶液等体积混合均匀，即得。
对比例1、一种菜籽蛋白的提取工艺
所述菜籽蛋白的提取工艺，包括以下步骤：
S1将油菜籽经过脱皮及仁皮分离后，对菜籽仁进行软化处理，控制软化水分为9％，软化温度为55℃，软化时间为20min，对经软化处理后的菜籽仁进行压榨处理，压榨处理时控制出料温度为70℃，控制出料饼胚残油率在13％，对经压榨处理后的饼胚进行粉碎，过100目筛，得菜籽粕；
S2将步骤S1所得菜籽粕置于容器中，加入石油醚，石油醚的加入量为菜籽粕质量的6倍，脱脂，脱脂温度为40℃，脱脂时间为8h，过滤，得脱脂后菜籽粕；
S3向步骤S2所得脱脂后菜籽粕中加入pH为4的盐酸水溶液，盐酸水溶液的加入量为脱脂后菜籽粕质量的6倍，超声处理20min，过滤，得混合料A；
S4向步骤S3所得混合料A中加入体积分数为80％的乙醇水溶液，乙醇水溶液加入量为混合料A质量的4倍，超声处理20min，过滤，得混合料B；
S5向步骤S4所得混合料B中加水，水的加入量为混合料B质量的9倍，调节pH至6.5，升温至45℃，加入由菠萝蛋白酶和改性蛋白酶按质量比3:8组成的复合酶，复合酶的加入量为混合料B质量的4‰，酶解时间为70min，升温至95℃，保持12min，灭酶，过滤，得酶解液；
S6向步骤S5所得酶解液中加入活性炭，活性炭的加入量为酶解液质量的2％，搅拌45min，抽滤，得滤液，将滤液浓缩、冷冻干燥，得菜籽蛋白。
所述改性蛋白酶的制备方法与实施例3类似。
与实施例3的在于，不包括S3将步骤S2所得脱脂后菜籽粕置于容器中，加入混合液，混合液的加入量为脱脂后菜籽粕质量的4倍，浸泡3h后进行辐照处理，过滤，得辐照后沉淀物。
对比例2、一种菜籽蛋白的提取工艺
所述菜籽蛋白的提取工艺，包括以下步骤：
S1将油菜籽经过脱皮及仁皮分离后，对菜籽仁进行软化处理，控制软化水分为9％，软化温度为55℃，软化时间为20min，对经软化处理后的菜籽仁进行压榨处理，压榨处理时控制出料温度为70℃，控制出料饼胚残油率在13％，对经压榨处理后的饼胚进行粉碎，过100目筛，得菜籽粕；
S2将步骤S1所得菜籽粕置于容器中，加入石油醚，石油醚的加入量为菜籽粕质量的6倍，脱脂，脱脂温度为40℃，脱脂时间为8h，过滤，得脱脂后菜籽粕；
S3将步骤S2所得脱脂后菜籽粕置于容器中，加入混合液，混合液的加入量为脱脂后菜籽粕质量的4倍，浸泡3h后进行辐照处理，辐照处理具体步骤为：将用混合液浸泡处理后的菜籽粕放入密封装置瓶中，用钴60射线对装有浸泡处理后的菜籽粕的密封装置瓶进行辐照，辐照剂量为1.5kGy，辐照时间为40min，过滤，得辐照后沉淀物；所述混合液的制备方法为：取由氯化钠和硫酸亚铁按质量比1:5组成的混合物，加水，使混合物的质量浓度为2％，即得；
S4向步骤S3所得辐照后沉淀物中加入pH为4的盐酸水溶液，盐酸水溶液的加入量为辐照后沉淀物质量的6倍，超声处理20min，过滤，得混合料A；
S5向步骤S4所得混合料A中加入体积分数为80％的乙醇水溶液，乙醇水溶液加入量为混合料A质量的4倍，超声处理20min，过滤，得混合料B；
S6向步骤S5所得混合料B中加水，水的加入量为混合料B质量的9倍，调节pH至6.5，升温至45℃，加入改性蛋白酶，改性蛋白酶的加入量为混合料B质量的4‰，酶解时间为70min，升温至95℃，保持12min，灭酶，过滤，得酶解液；
S7向步骤S6所得酶解液中加入活性炭，活性炭的加入量为酶解液质量的2％，搅拌45min，抽滤，得滤液，将滤液浓缩、冷冻干燥，得菜籽蛋白。
所述改性蛋白酶的制备方法与实施例3类似。
与实施例3的在于，未加入菠萝蛋白酶。
对比例3、一种菜籽蛋白的提取工艺
所述菜籽蛋白的提取工艺，包括以下步骤：
S1将油菜籽经过脱皮及仁皮分离后，对菜籽仁进行软化处理，控制软化水分为9％，软化温度为55℃，软化时间为20min，对经软化处理后的菜籽仁进行压榨处理，压榨处理时控制出料温度为70℃，控制出料饼胚残油率在13％，对经压榨处理后的饼胚进行粉碎，过100目筛，得菜籽粕；
S2将步骤S1所得菜籽粕置于容器中，加入石油醚，石油醚的加入量为菜籽粕质量的6倍，脱脂，脱脂温度为40℃，脱脂时间为8h，过滤，得脱脂后菜籽粕；
S3将步骤S2所得脱脂后菜籽粕置于容器中，加入混合液，混合液的加入量为脱脂后菜籽粕质量的4倍，浸泡3h后进行辐照处理，辐照处理具体步骤为：将用混合液浸泡处理后的菜籽粕放入密封装置瓶中，用钴60射线对装有浸泡处理后的菜籽粕的密封装置瓶进行辐照，辐照剂量为1.5kGy，辐照时间为40min，过滤，得辐照后沉淀物；所述混合液的制备方法为：取由氯化钠和硫酸亚铁按质量比1:5组成的混合物，加水，使混合物的质量浓度为2％，即得；
S4向步骤S3所得辐照后沉淀物中加入pH为4的盐酸水溶液，盐酸水溶液的加入量为辐照后沉淀物质量的6倍，超声处理20min，过滤，得混合料A；
S5向步骤S4所得混合料A中加入体积分数为80％的乙醇水溶液，乙醇水溶液加入量为混合料A质量的4倍，超声处理20min，过滤，得混合料B；
S6向步骤S5所得混合料B中加水，水的加入量为混合料B质量的9倍，调节pH至6.5，升温至45℃，加入由菠萝蛋白酶和蛋白酶按质量比3:8组成的复合酶，复合酶的加入量为混合料B质量的4‰，酶解时间为70min，升温至95℃，保持12min，灭酶，过滤，得酶解液；
S7向步骤S6所得酶解液中加入活性炭，活性炭的加入量为酶解液质量的2％，搅拌45min，抽滤，得滤液，将滤液浓缩、冷冻干燥，得菜籽蛋白。
与实施例3的在于，未对中性蛋白酶进行改性处理。
试验例一、菜籽蛋白提取率的测定
1、试验材料：实施例3、对比例1、对比例2、对比例3制备的菜籽蛋白。
2、试验方法：
参照GB/T 5009.5-2003，采用凯氏定氮法测定蛋白含量，计算菜籽蛋白提取率。
3、试验结果：
试验结果如表1所示。
表1：菜籽蛋白提取率测定结果
项目 实施例3 对比例1 对比例2 对比例3
菜籽蛋白提取率(％) 89.24 80.33 71.85 75.63
由表1可以看出，采用本发明菜籽蛋白的提取工艺的菜籽蛋白提取率高，这说明通过本发明提供的菜籽蛋白的提取工艺能够显著提高提取效率；与对比例1-3相比，本发明实施例3的提取率更高。
试验例二、抗营养成分含量测定
1、试验材料：采用实施例3、对比例1的菜籽蛋白的提取工艺制得的菜籽蛋白。
2、试验方法：采用氯化钯法测定菜籽蛋白中硫代葡萄糖甙的含量，采用硫酸铁铵-双吡啶分光光度法测定菜籽蛋白中植酸的含量，参照GB/T 27985-2011中Folin-Denis比色法测定菜籽蛋白中单宁的含量。
3、试验结果：
试验结果如表2所示。
表2：抗营养成分含量的测定结果
测试项目 实施例3 对比例1
硫代葡萄糖甙的含量(μmol/g) 1.03 2.52
植酸的含量(％) 0.07 0.35
单宁的含量(％) 0.11 0.58
由表2可以看出，采用本发明实施例3的菜籽蛋白的提取工艺制得的菜籽蛋白中硫代葡萄糖甙、植酸、单宁的含量明显低于采用对比例1的菜籽蛋白的提取工艺制得的菜籽蛋白中硫代葡萄糖甙、植酸、单宁的含量。由此可见，通过本发明提供的菜籽蛋白的提取工艺制得的菜籽蛋白中抗营养成分含量更低，极大的提高了产品的质量，保证了产品的安全性。
试验例三、菜籽蛋白的体外消化率的测定
1、试验材料：实施例3、对比例1制得的菜籽蛋白。
2、试验方法：
(1)体外消化实验：将菜籽蛋白用水稀释成质量浓度为0.3％的样品溶液，调节pH至1.5。将样品溶液放入37℃恒温振荡摇床，加入胃蛋白酶溶液，使其用量达到1.0％(酶与底物质量比)，开始消化。30min后，调pH至6.0中止反应。随后升温到40℃，调pH为7.8。加入新鲜的胰蛋白酶溶液3.2％(酶与底物质量比)，继续消化。反应60min后，加入浓度为150mM的Na2CO3溶液使反应中止，并将消化物立即放在冰上冷却。
(2)氮释放量(体外消化率)的测定：采用三氯乙酸(TCA)-可溶性氮法对样品的体外消化率进行测定。取10mL消化液加入10mL体积分数为10％的TCA溶液，于5000r/min离心30min后，倒出上清液，得到TCA可溶组分。沉淀部分再用10mL体积分数为10％的TCA溶液洗涤，并于同样条件下离心，得到TCA不溶组分。蛋白质总氮和TCA不溶性氮含量采用凯氏定氮法测得。消化过程氮释放量＝(N0—Nt)/Ntot；其中：Nt为消化tmin时的TCA不溶性氮，mg；N0为蛋白样品中的TCA不溶性氮，mg；Ntot为蛋白样品中的总氮量，mg。
3、试验结果如表3所示。
表3：菜籽蛋白的体外消化率的测定结果
组别 实施例3 对比例1
体外消化率(％) 90.15 78.21
由表3可以看出，采用本发明实施例3的菜籽蛋白的提取工艺制得的菜籽蛋白的体外消化率明显高于采用对比例1的菜籽蛋白的提取工艺制得的菜籽蛋白的体外消化率。由此可见，通过本发明菜籽蛋白的提取工艺制得的菜籽蛋白的体外消化率较高，具有良好的体外消化性。

Claims (8)

1.一种菜籽蛋白的提取工艺，其特征在于，包括以下步骤：
S1将油菜籽经过脱皮及仁皮分离后，对菜籽仁进行软化处理，控制软化水分为8-10％，软化温度为50-60℃，软化时间为15-25min，对经软化处理后的菜籽仁进行压榨处理，压榨处理时控制出料温度为65-75℃，控制出料饼胚残油率在12-14％，对经压榨处理后的饼胚进行粉碎，过80-120目筛，得菜籽粕；
S2将步骤S1所得菜籽粕置于容器中，加入石油醚，石油醚的加入量为菜籽粕质量的4-6倍，脱脂，脱脂温度为35-45℃，脱脂时间为7-9h，过滤，得脱脂后菜籽粕；
S3将步骤S2所得脱脂后菜籽粕置于容器中，加入混合液，混合液的加入量为脱脂后菜籽粕质量的3-6倍，浸泡2-4h后进行辐照处理，过滤，得辐照后沉淀物；S4向步骤S3所得辐照后沉淀物中加入pH为3-5的盐酸水溶液，盐酸水溶液的加入量为辐照后沉淀物质量的5-7倍，超声处理15-25min，过滤，得混合料A；S5向步骤S4所得混合料A中加入体积分数为75-85％的乙醇水溶液，乙醇水溶液加入量为混合料A质量的2-5倍，超声处理15-25min，过滤，得混合料B；S6向步骤S5所得混合料B中加水，水的加入量为混合料B质量的7-10倍，调节pH至6-7，升温至40-50℃，加入复合酶，复合酶的加入量为混合料B质量的3-5‰，酶解时间为50-80min，升温至90-100℃，保持10-16min，灭酶，过滤，得酶解液；
S7向步骤S6所得酶解液中加入活性炭，搅拌30-60min，抽滤，得滤液，将滤液浓缩、冷冻干燥，得菜籽蛋白。
2.如权利要求1所述的菜籽蛋白的提取工艺，其特征在于，所述步骤S3所述混合液的制备方法为：取混合物，加水，使混合物的质量浓度为1-3％，即得。
3.如权利要求2所述的菜籽蛋白的提取工艺，其特征在于，所述混合物由氯化钠和硫酸亚铁按质量比1-2:4-7组成。
4.如权利要求1所述的菜籽蛋白的提取工艺，其特征在于，所述混合物由氯化钠和硫酸亚铁按质量比1:5组成。
5.如权利要求1所述的菜籽蛋白的提取工艺，其特征在于，所述复合酶由菠萝蛋白酶和改性蛋白酶按质量比2-5:6-10组成。
6.如权利要求1所述的菜籽蛋白的提取工艺，其特征在于，所述复合酶由菠萝蛋白酶和改性蛋白酶按质量比3:8组成。
7.如权利要求5所述的菜籽蛋白的提取工艺，其特征在于，所述改性蛋白酶的制备方法为：
向混合液中加入中性蛋白酶，混合液与中性蛋白酶的质量比为7-9:1，搅拌1-2h，加入质量浓度为20-30％的氯化钙水溶液，氯化钙水溶液的加入量为混合液质量的5-8％，搅拌15-30min，喷雾干燥，即得。
8.如权利要求7所述的菜籽蛋白的提取工艺，其特征在于，所述混合液的制备方法为：取海藻酸钠，加水，制成质量浓度为2-4％的海藻酸钠水溶液；取黄原胶，加水，制成质量浓度为1-2％的黄原胶水溶液；将海藻酸钠水溶液和黄原胶水溶液等体积混合均匀，即得。
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