CN112569409A - 一种防止肌腱粘连的羊膜复合材料 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及医用材料技术领域,尤其涉及一种防止肌腱粘连的羊膜复合材料,包括以下步骤:S1、新鲜羊膜的获取:在羊膜与绒毛膜之间钝性分离,获得光滑、半透明的新鲜羊膜,用平衡盐溶液浸泡,置于DMEM培养基中并于4℃的温度在冰箱内保存,待用;S2、冻干羊膜的制备:将新鲜羊膜置于冷冻干燥机工作室,低温下预冻1~10小时,开启冷凝室制冷。本发明提高了羊膜基质的力学强度、疏水性、抗炎性能、构建了符合肌腱愈合周期的生长因子缓释系统,有效的解决了羊膜产品易撕裂、力学强度低、术中应用极易滑移等缺陷,为临床上亟待解决的肌腱粘连这一难题提供了新的途径。
Description
技术领域
本发明涉及医用材料技术领域,尤其涉及一种防止肌腱粘连的羊膜复合材料。
背景技术
随着社会进步和工业发展,外伤所致肌腱损伤极为常见,肌腱与周围组织粘连是肌腱损伤修复术后最常见的并发症,迄今为止仍无有效的解决方法,成为临床亟待解决的难题。通过对肌腱粘连形成机制的深入研究,探索了很多防止肌腱粘连的方法和材料。应用物理屏障阻断外源性愈合是目前预防肌腱粘连的主要方法,早期应用的非生物材料如硅胶、金箔及自体筋膜等,缺点较多,已经逐渐被淘汰。现在临床上广泛使用的可吸收高分子化合物,如透明质酸及其衍生物、几丁糖、聚羟基乙酸-聚乳酸复合物、胶原-粘多糖等,由于无通透性、阻碍营养物质的渗透而增加了肌腱发生坏死、永久性异物残留等并发症。来源于生物体的天然高分子物质羊膜是一种半透膜,光滑、无血管、神经及淋巴,含有丰富的基质、细胞因子、酶类等活性成分,其独有的结构使其成为理想的生物材料。
新鲜羊膜由于无法长期保存,不适用于临床常规使用。目前临床使用的羊膜产品均经过冷冻保存处理,能长期保存且即时可用,不仅能比较完好的保存羊膜结构,还能保存多种羊膜固有的生长因子,但冻干处理后的羊膜不含或细胞活性很低,无法将羊膜临床应用潜能发挥到最大化,临床应用中还发现冻干羊膜质脆、缺少足够的力学强度、溶解过快导致滑移。
创伤或植入物引起的细菌感染是创伤性植入手术后最常的临床并发症之一,特别是细菌感染由耐药菌株或革兰氏阴性菌引起时,其临床治疗会更加棘手,因为这两种类型的感染对传统抗生素治疗具有高度耐药性。银是一种有效的广谱抗菌剂,可以抑制或杀死大量的微生物,包括耐抗生素菌株和革兰氏阴性菌。银还具有其他的优点,如在生理条件下的稳定性和低细胞毒性,正因如此,银被广泛应用于各种抗感染的治疗。
为克服羊膜材料的上述局限性,需要引入其他材料或改变羊膜的形态构造以提高羊膜的强度、伸展性以、适度的疏水性及抗菌性能,来发挥羊膜组织结构特性的最大潜能。
因此,我们提出了一种防止肌腱粘连的羊膜复合材料用于解决上述问题。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点,而提出的一种防止肌腱粘连的羊膜复合材料。
一种防止肌腱粘连的羊膜复合材料,包括以下步骤:
S1、新鲜羊膜的获取:在羊膜与绒毛膜之间钝性分离,获得光滑、半透明的新鲜羊膜,用平衡盐溶液浸泡,置于DMEM培养基中并于4℃的温度在冰箱内保存,待用;
S2、冻干羊膜的制备:将新鲜羊膜置于冷冻干燥机工作室,低温下预冻1~10小时,开启冷凝室制冷,使冷阱温度达到-10℃~-56℃,开启真空泵,真空冷冻干燥,水份含量降低到20%以下后,再将冻干羊膜经钴60辐照灭菌;
S3、电纺溶液的制备:配置PCL纺丝液并加入纳米银颗粒和1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐水溶液混合,用磁力棒搅拌混匀制得电纺溶液并过夜;
S4、静电纺纳米纤维复合膜的制备:设定环境温度、湿度参数,连接静电纺丝装置,将电纺溶液放入注射器中,调整溶液的流速、高电压、调整接收距离,冻干羊膜表面分别接收PCL纤维膜和负载纳米银颗粒PCL纤维膜,得静电纺纳米纤维复合膜。
优选的,所述S1中平衡盐溶液中含有50ug/ml的青霉素和50ug/ml的链霉素。
优选的,所述S1中平衡盐溶液浸泡的时间为20~30分钟。
优选的,所述S2中低温预冻的环境为0℃~-50℃。
优选的,所述S3中设定的环境温度为25℃,湿度为60%。
优选的,所述S4中注射器的容积为2ml且其带有直径0.7mm针头。
优选的,所述S4中调整溶液时的流速为3.0ml/h,电压为15 kV,接收距离为15cm。
优选的,所述PCL纺丝液的配制方法如下:在聚己内酯中加入溶剂,搅拌获得浓度为质量体积比5%~15%的混合溶液,再加入占溶剂体积百分比0.1%~1%的添加剂,搅拌均匀,得到PCL纺丝液。
优选的,所述溶剂为N,N-二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷的混合液,添加剂为双硬脂酸乙酯基羟乙基甲基硫酸甲酯铵。
本发明的有益效果是:
本发明通过高压静电纺丝技术将羊膜与PCL、纳米银等其他高分子物质混纺形成多层纳米纤维,并在电纺溶液中混入疏水性离子液体1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐,提高了羊膜基质的力学强度、疏水性、抗炎性能、构建了符合肌腱愈合周期的生长因子缓释系统,有效的解决了羊膜产品易撕裂、力学强度低、术中应用极易滑移等缺陷,为临床上亟待解决的肌腱粘连这一难题提供了新的途径。
附图说明
图1为本发明结构示意图;
图2为本发明包裹肌腱预防粘连的示意图;
图中:1静电纺纳米纤维复合膜、2冻干羊膜、3肌腱。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步解说。
实施例一:
S1、新鲜羊膜的获取:在羊膜与绒毛膜之间钝性分离,获得光滑、半透明的新鲜羊膜后,用含50ug/ml的青霉素和50ug/ml的链霉素的平衡盐溶液浸泡20分钟,置于DMEM培养基中并于4℃的温度在冰箱内保存,待用;
S2、冻干羊膜2的制备:将新鲜羊膜置于冷冻干燥机工作室,于低温0℃~-50℃的环境下预冻8小时,开启冷凝室制冷,使冷阱温度达到-10℃~-56℃,开启真空泵,真空冷冻干燥,水份含量降低到20%以下后,再将冻干羊膜经钴60辐照灭菌;
S3、电纺溶液的制备:配置PCL纺丝液并加入纳米银颗粒和1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐水溶液混合,用磁力棒搅拌混匀制得电纺溶液并过夜;
S4、静电纺纳米纤维复合膜1的制备:设定环境温度为25℃、湿度为60%,连接静电纺丝装置,将电纺溶液放入带直径0.7mm针头的2ml注射器中,调整溶液的流速为3.0ml/h、电压为15 kV、接收距离为15 cm, 以冻干羊膜2两个表面接收PCL纤维膜和负载纳米银颗粒PCL纤维膜,得静电纺纳米纤维复合膜1。
其中,PCL纺丝液的配制方法如下:在聚己内酯中加入溶剂(即N,N-二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷的混合液),搅拌获得浓度为质量体积比15%的混合溶液,再加入占溶剂体积百分比0.3%的双硬脂酸乙酯基羟乙基甲基硫酸甲酯铵,搅拌均匀,得到PCL纺丝液。
实施例二:
静电纺丝过程中,可以使冻干羊膜2单面(上皮细胞面或基底膜面)接收PCL纤维膜,形成双层复合膜。实际应用中,复合膜羊膜面包裹肌腱3,更利于生长因子的快速释放,促进组织愈合,纳米纤维面隔离周围组织侵入,防治肌腱3粘连。
实施例三:
静电纺丝过程中各种参数,如聚合物(PCL)的分子量和浓度影响纳米纤维得降解速率,纺丝液的粘度、表面张力、导电性、针头的直径、流速、电压和接收距离决定了纳米纤维的直径,是可以更改并得到进一步优化,通过静电纺过程中参数的更改,调整纳米纤维的直径、孔隙率和比表面积,亲水性等复合膜的各种属性,另外,疏水性离子液体可以辅助提高该材料的疏水性能。
以上所述,仅为本发明较佳的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (9)
1.一种防止肌腱粘连的羊膜复合材料,其特征在于,包括以下步骤:
S1、新鲜羊膜的获取:在羊膜与绒毛膜之间钝性分离,获得光滑、半透明的新鲜羊膜,用平衡盐溶液浸泡,置于DMEM培养基中并于4℃的温度在冰箱内保存,待用;
S2、冻干羊膜的制备:将新鲜羊膜置于冷冻干燥机工作室,低温下预冻1~10小时,开启冷凝室制冷,使冷阱温度达到-10℃~-56℃,开启真空泵,真空冷冻干燥,水份含量降低到20%以下后,再将冻干羊膜经钴60辐照灭菌;
S3、电纺溶液的制备:配置PCL纺丝液并加入纳米银颗粒和1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐水溶液混合,用磁力棒搅拌混匀制得电纺溶液并过夜;
S4、静电纺纳米纤维复合膜的制备:设定环境温度、湿度参数,连接静电纺丝装置,将电纺溶液放入注射器中,调整溶液的流速、高电压、调整接收距离,冻干羊膜表面分别接收PCL纤维膜和负载纳米银颗粒PCL纤维膜,得静电纺纳米纤维复合膜。
2.根据权利要求1所述的一种防止肌腱粘连的羊膜复合材料,其特征在于,所述S1中平衡盐溶液中含有50ug/ml的青霉素和50ug/ml的链霉素。
3.根据权利要求1所述的一种防止肌腱粘连的羊膜复合材料,其特征在于,所述S1中平衡盐溶液浸泡的时间为20~30分钟。
4.根据权利要求1所述的一种防止肌腱粘连的羊膜复合材料,其特征在于,所述S2中低温预冻的环境为0℃~-50℃。
5.根据权利要求1所述的一种防止肌腱粘连的羊膜复合材料,其特征在于,所述S3中设定的环境温度为25℃,湿度为60%。
6.根据权利要求1所述的一种防止肌腱粘连的羊膜复合材料,其特征在于,所述S4中注射器的容积为2ml且其带有直径0.7mm针头。
7.根据权利要求1所述的一种防止肌腱粘连的羊膜复合材料,其特征在于,所述S4中调整溶液时的流速为3.0ml/h,电压为15 kV,接收距离为15cm。
8.根据权利要求1所述的一种防止肌腱粘连的羊膜复合材料,其特征在于,所述PCL纺丝液的配制方法如下:在聚己内酯中加入溶剂,搅拌获得浓度为质量体积比5%~15%的混合溶液,再加入占溶剂体积百分比0.1%~1%的添加剂,搅拌均匀,得到PCL纺丝液。
9.根据权利要求8所述的一种防止肌腱粘连的羊膜复合材料,其特征在于,所述溶剂为N,N-二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷的混合液,添加剂为双硬脂酸乙酯基羟乙基甲基硫酸甲酯铵。
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