CN112552191B - 一种儿茶酚胺类物质冻干粉及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及试剂保存技术领域，特别涉及一种儿茶酚胺类物质冻干粉及其制备方法。该儿茶酚胺类物质冻干粉包括儿茶酚胺类物质、酸性缓冲物、赋形剂、保护剂、蛋白保护剂和防腐剂；保护剂为金属离子螯合剂，或者为金属离子螯合剂和抗氧化剂的组合。本发明通过一定浓度的儿茶酚胺类物质及多种保护剂组合，进行冻干处理，可以实现长期保存，使用时添加一定体积的纯化水进行复溶，混匀即可。该方法使用和保存更方便，制备更简单。
Description
技术领域
本发明涉及试剂保存技术领域，特别涉及一种儿茶酚胺类物质冻干粉及其制备方法。
背景技术
儿茶酚胺类物质主要包括肾上腺素(epinephrin adrenalin,E)、去甲肾上腺素(norepinephrin noradrenalin,NE)和多巴胺(dopamin,DA)，在人体内由肾上腺髓质和一些交感神经元嗜铬细胞所分泌。嗜铬细胞瘤/副神经节瘤(Pheochromocytoma/Paragangliomas.PH/PGL)是一种少见的导致内源性儿茶酚胺过量的神经内分泌肿瘤，来源于肾上腺或肾上腺外的嗜铬细胞。位于肾上腺的称为嗜铬细胞瘤，位于肾上腺外的称为副神经节瘤。除嗜铬细胞瘤/副神经节瘤外，压力、长期使用安非他明等药物均可导致体内儿茶酚胺(包括肾上腺素、去甲肾上腺素以及多巴胺)过高。过量儿茶酚胺典型临床的特征包括头痛、大汗、心悸、胸痛、导致心肌病变、糖代谢异常等，还可导致严重的心血管疾病，引起阵发性或持续性高血压，虽然是高血压的罕见原因，但必须尽早诊断以避免与儿茶酚胺过度释放肿瘤有关的并发症。儿茶酚胺类物质具有邻苯二酚结构，容易受到光、温度、空气的影响被氧化。在酸性条件下比较稳定，中性或碱性条件下易被氧化成醌。
对于儿茶酚胺类物质的保存技术，常使用盐酸溶液，添加抗氧化剂包括亚硫酸钠、焦亚硫酸钠、抗坏血酸及其盐类、焦亚硫酸钠、半胱氨酸、谷胱甘肽中的一种或多种组合等进行液态保存，另外还需进行密封和氮气保护，这些方法虽然可以保存一段时间，但整体过程繁琐，工艺要求较高；或者使用固态保存，但使用前需称量，易造成物质浪费、引起称量误差(使用量较少，不好称量，不同次称量误差较大)，使用不方便。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了一种儿茶酚胺类物质冻干粉及其制备方法。本发明冻干粉可以实现长期保存，使用和保存更方便，制备更简单。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种儿茶酚胺类物质冻干粉，包括儿茶酚胺类物质、酸性缓冲物、赋形剂、保护剂、蛋白保护剂和防腐剂；保护剂为金属离子螯合剂，或者为金属离子螯合剂和抗氧化剂的组合；
以配制体积为1L计，各组分的用量配比为：
作为优选，酸性缓冲物选自磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲物、柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲物、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲物、乙酸-乙酸钠缓冲物、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲物、磷酸盐缓冲物；
作为优选，酸性缓冲物的pH值为5.0～6.5。
优选地，酸性缓冲物的pH值为6.0。
作为优选，赋形剂选自牛血清白蛋白、酪蛋白、海藻糖中的一种。
作为优选，金属离子螯合剂选自钠离子螯合物、镁离子螯合物中的一种或两种。
在本发明提供的具体实施例中，钠离子螯合物为EDTA-2Na，镁离子螯合物为EDTA-Mg。
金属离子的作用是降低儿茶酚胺类物质苯环的电子密度。
作为优选，抗氧化剂选自焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、半胱氨酸、谷胱甘肽、抗坏血酸、二硫苏糖醇、三(2-羧乙基)膦中的一种或几种。
作为优选，保护剂为金属离子螯合剂和抗氧化剂的组合。
作为优选，保护剂为EDTA-2Na和焦亚硫酸钠的组合。二者可以任意比例组合。
作为优选，保护剂为EDTA-2Na和焦亚硫酸钠的组合时，EDTA-2Na和焦亚硫酸钠的质量比为(1～10)：(1～10)。
在本发明提供的具体实施例中，保护剂为EDTA-2Na和焦亚硫酸钠的组合时，EDTA-2Na和焦亚硫酸钠的质量比为1：1。
作为优选，蛋白保护剂为BBI或ADP。
作为优选，防腐剂选自苯甲酸及其盐类、叠氮钠、Proclin-300、单碘代丙炔基丁基氨基甲酸酯(IPBC)中的一种或多种。
作为优选，以配制体积为1L计，各组分的用量配比为：
在本发明提供的具体实施例中，以配制体积为1L计，各组分的用量配比为：
本发明儿茶酚胺类物质冻干粉用作儿茶酚胺类物质检测校准物质及质控品。
本发明还提供了上述儿茶酚胺类物质冻干粉的制备方法，其为：将配方中各组分溶于水，冻干。
作为优选，冻干前还包括如下步骤：置于-80℃进行预冻。
本发明提供了一种儿茶酚胺类物质冻干粉及其制备方法。该儿茶酚胺类物质冻干粉包括儿茶酚胺类物质、酸性缓冲物、赋形剂、保护剂、蛋白保护剂和防腐剂；保护剂为金属离子螯合剂，或者为金属离子螯合剂和抗氧化剂的组合。本发明具有如下有益效果：
本发明方法制备得到的冻干粉保存时间：37℃放置，加速考核14d，进行检测，变幅小于10％，根据阿伦尼乌斯公式推算效期为2年，冻干粉加纯化水复溶后-20℃可保存2个月，4℃可保存5d。
可见，本发明通过一定浓度的儿茶酚胺类物质及多种保护剂组合，进行冻干处理，可以实现长期保存，使用时添加一定体积的纯化水进行复溶，混匀即可。该方法使用和保存更方便，制备更简单。
具体实施方式
本发明公开了一种儿茶酚胺类物质冻干粉及其制备方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
本发明提供的儿茶酚胺类物质冻干粉及其制备方法中的应用中所用试剂、仪器等均可由市场购得。
下面结合实施例，进一步阐述本发明：
实施例1儿茶酚胺类物质冻干粉配方及制备方法
1、儿茶酚胺类物质冻干粉溶液配方：
儿茶酚胺类物质：肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)和多巴胺(DA)中的一种；
E的6个浓度水平为：0ng/mL、3ng/mL、9ng/mL、18ng/mL、54ng/mL、135ng/mL；
NE的6个浓度水平为：0ng/mL、10ng/mL、30ng/mL、60ng/mL、180ng/mL、450ng/mL；
D的6个浓度水平为：0ng/mL、120ng/mL、360ng/mL、720ng/mL、2160ng/mL、5400ng/mL。
磷酸氢二钠和磷酸二氢钠缓冲液(0.2M，磷酸氢二钠8.81g，磷酸二氢钠缓冲液27.36)，pH＝6；
赋形剂：牛血清白蛋白(BSA)，质量分数2％；
金属离子螯合剂：EDTA2Na，质量分数0.02％；
抗氧化剂：焦亚硫酸钠，质量分数0.02％；
蛋白保护剂：ADP，质量分数为0.1％；
防腐剂：Proclin-300，体积分数为0.1％。
2、制备方法
将配方中各组分加入水中，启动磁力搅拌器混合均匀，备用。
配制完成后，根据需要进行分装于4mL棕色玻璃瓶中，置于-80℃进行预冻，然后置于冻干机进行冻干。
试验例1
对配制的6个不同浓度的儿茶酚胺类冻干粉分别放置烘箱37℃7d、10d、14d，分别与2-8℃检测浓度值进行比较(使用质谱方法进行检测)，保存效果如下：
一、稳定性数据：
具体实验过程：对配制的6个不同浓度的儿茶酚胺类冻干粉分别放置烘箱37℃7d、10d、14d，分别与2-8℃同时添加1mL纯化水复溶，使用质谱方法同时检测浓度值进行比较；
结果：加速放置14d与2-8℃检测结果相比偏倚在±10％以内，根据阿伦尼乌斯公式计算，表明本发明制备的控制物质可在2～8℃稳定存放2年。
表1
二、不同批瓶间检测数据：
具体实验过程：同一种方法不同时间分别配制校准品(6个不同浓度)，1mL分装，冻干，得到三个批次校准品，分别取三批次中的一套校准品，同时1mL纯化水复溶，使用质谱方法同时检测浓度值进行比较，计算均值，偏差以及变异；
结果：三批各浓度变异均小于10％，表明该工艺可以稳定制备。
表2
三、精密性数据：
具体实验过程：
按照校准品的配制方法配制两个浓度的质控品，任取一套，添加1mL纯化水复溶，使用质谱方法连续检测10次，求出平均值，计算变异；
结果：质控品Q1和Q2浓度10孔变异均小于10％，表明该方法制备质量控制物质精密性较好。
表3
对比试验例1
四、对比试验稳定性数据：
具体实验过程：配制不添加金属离子螯合物(无EDTA2Na)的稀释液，对配制的6个不同浓度的儿茶酚胺类冻干粉分别放置烘箱37℃7d、10d、14d，分别与2-8℃同时添加1mL纯化水复溶，使用质谱方法同时检测浓度值进行比较；
结果：加速放置7d与2-8℃检测结果相比偏倚大于10％，且随着加速时间延长，浓度值逐渐降低，加速14d时，低值区降幅已达50％，稳定性较差。
表4
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (8)
1.一种儿茶酚胺类物质冻干粉，其特征在于，包括儿茶酚胺类物质、酸性缓冲物、赋形剂、保护剂、蛋白保护剂和防腐剂；所述保护剂为金属离子螯合剂，或者为金属离子螯合剂和抗氧化剂的组合；
所述酸性缓冲物选自磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲物、柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲物、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲物、乙酸-乙酸钠缓冲物、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲物、磷酸盐缓冲物；所述酸性缓冲物的pH值为5.0~6.5；
所述赋形剂选自牛血清白蛋白、酪蛋白、海藻糖中的一种；
以配制体积为1L计，各组分的用量配比为：
儿茶酚胺类物质 ≤10 mg
酸性缓冲物 0.05~0.5 mol
赋形剂 10~50 g
保护剂 0.1~5g
蛋白保护剂 0.5~10 g
防腐剂 0.1~10 mL。
2.根据权利要求1所述的儿茶酚胺类物质冻干粉，其特征在于，所述金属离子螯合剂选自钠离子螯合物、镁离子螯合物中的一种或两种。
3.根据权利要求1所述的儿茶酚胺类物质冻干粉，其特征在于，所述抗氧化剂选自焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、半胱氨酸、谷胱甘肽、抗坏血酸、二硫苏糖醇、三(2-羧乙基)膦中的一种或几种。
4.根据权利要求1所述的儿茶酚胺类物质冻干粉，其特征在于，所述蛋白保护剂为BBI或ADP。
5.根据权利要求1所述的儿茶酚胺类物质冻干粉，其特征在于，所述防腐剂选自苯甲酸及其盐类、叠氮钠、Proclin-300、单碘代丙炔基丁基氨基甲酸酯中的一种或多种。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的儿茶酚胺类物质冻干粉，其特征在于，以配制体积为1L计，各组分的用量配比为：
儿茶酚胺类物质 ≤10 mg
酸性缓冲物 0.1~0.5 mol
赋形剂 10~30 g
保护剂 0.1~1 g
蛋白保护剂 0.5~2 g
防腐剂 1~10mL。
7.权利要求6所述儿茶酚胺类物质冻干粉的制备方法，其特征在于，将配方中各组分溶于水，冻干。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述冻干前还包括如下步骤：置于-80℃进行预冻。
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Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101053557A (zh) * | 2006-04-13 | 2007-10-17 | 邵长青 | 重酒石酸去甲肾上腺素药物组合物冻干粉针注射剂 |
| CN101125126A (zh) * | 2006-08-16 | 2008-02-20 | 丛繁滋 | 一种医用冻干粉(针)剂的制备方法 |
| CN101683341A (zh) * | 2008-09-22 | 2010-03-31 | 广东肇庆星湖生物科技股份有限公司 | 含有左布比卡因和左异丙肾上腺素的冻干粉针制剂 |
| CN101822841A (zh) * | 2010-04-12 | 2010-09-08 | 四川大学 | 有机胺衍生物作为小分子药物脑靶向修饰基团的用途 |
| CN102000049A (zh) * | 2009-09-01 | 2011-04-06 | 北京利乐生制药科技有限公司 | 含依替卡因异构体的注射用制剂 |
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Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101053557A (zh) * | 2006-04-13 | 2007-10-17 | 邵长青 | 重酒石酸去甲肾上腺素药物组合物冻干粉针注射剂 |
| CN101125126A (zh) * | 2006-08-16 | 2008-02-20 | 丛繁滋 | 一种医用冻干粉(针)剂的制备方法 |
| CN101683341A (zh) * | 2008-09-22 | 2010-03-31 | 广东肇庆星湖生物科技股份有限公司 | 含有左布比卡因和左异丙肾上腺素的冻干粉针制剂 |
| CN102000049A (zh) * | 2009-09-01 | 2011-04-06 | 北京利乐生制药科技有限公司 | 含依替卡因异构体的注射用制剂 |
| CN101822841A (zh) * | 2010-04-12 | 2010-09-08 | 四川大学 | 有机胺衍生物作为小分子药物脑靶向修饰基团的用途 |
| CN102631328A (zh) * | 2012-05-04 | 2012-08-15 | 常州千红生化制药股份有限公司 | 重组人抗血栓蛋白冻干粉针剂及其制备方法 |
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