CN112545943A - 一种包含植物提取物的sod类化妆品添加剂 - Google Patents
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Abstract
本发明属于SOD类化妆品技术领域，公开了一种包含植物提取物的SOD类化妆品添加剂。本发明所述植物提取物为白芍和金银花的提取物，其制备方法包括以下步骤：(1)按白芍：金银花＝5：2‑3取白芍和金银花，粉碎混匀，过40‑60目筛，加入含六氟异丙醇和离子液体的磷酸盐缓冲溶液，以及纤维素酶和果胶酶，加热至40‑50℃浸泡提取2‑4小时后，过滤得滤液，静置分层后，收集离子液体层；(2)将步骤(1)所得离子液体层用乙酸乙酯萃取2‑3次，合并乙酸乙酯相后，依次用乙醇、饱和氯化钠溶液洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥、过滤，滤液浓缩干燥即得所述白芍和金银花的提取物。通过该方法获得的植物提取物具有极高的SOD酶活性、DPPH自由基清除能力和超氧阴离子清除能力。
Description
技术领域
本发明涉及SOD类化妆品技术领域，具体是涉及一种包含植物提取物的SOD类化妆品添加剂。
背景技术
超氧化物歧化酶(SOD)是生物体内存在的一种抗氧化金属酶，它能够催化超氧阴离子自由基歧化生成氧和过氧化氢，在机体氧化与抗氧化平衡中起着至关重要的作用，在防止癌细胞扩散、转移、抗辐射、增强免疫及在抗衰老和美容方面具有特殊的功效，与很多疾病的发生、发展密不可分。
因为SOD的上述功效，其在医药、食品及化妆保健品领域具有广大市场前景，国内外已有不少含SOD的食品、饮料、化妆品和保健品上市。目前，国内外SOD的获得大多是自动物血液和胰脏中提取。虽然很多植物中也含有SOD，但植物原料制备SOD一般在适当的缓冲液中进行，多数抽提是以缓冲液为基础液，收率较低，提取物的活性不高。例如，中国发明专利CN109091440公开了一种复方植物提取物的制备方法及作为SOD类化妆品添加剂的应用，该制备方法是利用离子液体([BMIM]PF6)与酶结合的方法提取白芍与槐花的有效成分，该方法制备的复方植物提取物对酪氨酸酶的抑制率较高，但DPPH自由基清除能力和超氧阴离子清除能力偏弱，且SOD酶活性也并不是很强。
发明内容
本发明的目的是为了克服上述背景技术的不足，提供了一种包含植物提取物的SOD类化妆品添加剂，该中SOD类化妆品添加剂中的植物提取物来源于白芍和金银花，通过采用含六氟异丙醇和1-丁基-3-甲基咪唑乙酸盐的磷酸盐缓冲溶液提取，获得的植物提取物具有极高的SOD酶活性、DPPH自由基清除能力和超氧阴离子清除能力。
为达到本发明的目的，本发明包含白芍和金银花的提取物的制备方法包括以下步骤：
(1)按白芍：金银花＝5：2-3取白芍和金银花，粉碎混匀，过40-60目筛，加入含六氟异丙醇和离子液体的磷酸盐缓冲溶液，以及纤维素酶和果胶酶，加热至40-50℃浸泡提取2-4小时后，过滤得滤液，静置分层后，收集离子液体层；
(2)将步骤(1)所得离子液体层用等体积的乙酸乙酯萃取2-3次，合并乙酸乙酯相后，依次用乙醇、饱和氯化钠溶液洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥、过滤，滤液浓缩干燥即得所述白芍和金银花的提取物。
进一步地，所述纤维素酶所述纤维素酶和果胶酶的质量比为2：1-2。
进一步地，所述纤维素酶所述纤维素酶的用量为白芍质量的0.5-1％，酶活为20-40u/mg。
进一步地，所述含六氟异丙醇和离子液体的磷酸盐缓冲溶液的pH值为4.5-5.5，且其中离子液体的质量分数为10％-15％。。
进一步地，所述六氟异丙醇和离子液体的质量比为1：3-5。
进一步地，所述离子液体为1-丁基-3-甲基咪唑乙酸盐或氢氧化1-乙胺基-3-甲基咪唑中的一种或多种。
优选地，所述离子液体为1-丁基-3-甲基咪唑乙酸盐。
进一步地，所述含六氟异丙醇和离子液体的磷酸盐缓冲溶液的用量为白芍质量的7-9倍。
另一方面，本发明还提供了一种包含植物提取物的SOD类化妆品添加剂，所述植物提取物为前述包含白芍和金银花的提取物。
进一步地，所述SOD类化妆品为SOD面膜、SOD保湿乳液。
与现有技术相比，本发明的优点如下：
本发明的植物提取物以白芍和金银花作为活性物质来源，通过纤维素酶、果胶酶以及本发明混合提取液的共同作用，工艺简单，充分提取出了植物中的活性成分，并保留了其活性，未改变原有活性物质的基本功能和性质，提取率高，所得提取物在DPPH自由基清除能力、超氧阴离子清除能力、酪氨酸酶抑制率及其SOD酶活性方面都表现较优，可作为SOD类化妆品添加剂。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。应当理解，以下描述仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
本文中所用的术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括。例如，包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素，而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。
本发明所述磷酸盐缓冲溶液可由磷酸二氢钠/钾、磷酸氢二钠/钾、氢氧化钠、磷酸中的两种或几种配置成pH4.5-5.5的缓冲液。此外，本发明各个实施方式中所涉及到的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
实施例1
一种SOD类化妆品添加剂，其中包含白芍和金银花的提取物，所述白芍和金银花的提取物的制备方法包括以下步骤：
(1)按白芍500g，金银花250g，粉碎混匀，过50目筛，加入含六氟异丙醇和离子液体1-丁基-3-甲基咪唑乙酸盐的磷酸盐缓冲溶液(pH5.0，4.0kg，其中含125g六氟异丙醇和500g离子液体1-丁基-3-甲基咪唑乙酸盐，以及纤维素酶(4g，30u/mg)和果胶酶(3g，30u/mg)，加热至45℃浸泡提取3小时后，过滤得滤液，静置分层后，收集离子液体层；
(2)将步骤(1)所得离子液体层用等体积的乙酸乙酯萃取2次，合并乙酸乙酯相后，依次用乙醇、饱和氯化钠溶液洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥、过滤，滤液浓缩干燥即得所述白芍和金银花的提取物15.52g。
实施例2
一种SOD类化妆品添加剂，其中包含白芍和金银花的提取物，所述白芍和金银花的提取物的制备方法包括以下步骤：
(1)按白芍500g，金银花200g，粉碎混匀，过40目筛，加入含六氟异丙醇和离子液体1-丁基-3-甲基咪唑乙酸盐的磷酸盐缓冲溶液(pH5.0，3.5kg，其中含105g六氟异丙醇和525g离子液体1-丁基-3-甲基咪唑乙酸盐，以及纤维素酶(5g，20u/mg)和果胶酶(2g，40u/mg)，加热至50℃浸泡提取2小时后，过滤得滤液，静置分层后，收集离子液体层；
(2)将步骤(1)所得离子液体层用等体积的乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯相后，依次用乙醇、饱和氯化钠溶液洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥、过滤，滤液浓缩干燥即得所述白芍和金银花的提取物14.68g。
实施例3
一种SOD类化妆品添加剂，其中包含白芍和金银花的提取物，所述白芍和金银花的提取物的制备方法包括以下步骤：
(1)按白芍500g，金银花300g，粉碎混匀，过60目筛，加入含六氟异丙醇和离子液体1-丁基-3-甲基咪唑乙酸盐的磷酸盐缓冲溶液(pH4.5，4.5kg，其中含150g六氟异丙醇和450g离子液体1-丁基-3-甲基咪唑乙酸盐，以及纤维素酶(2.5g，40u/mg)和果胶酶(2.5g，20u/mg)，加热至40℃浸泡提取4小时后，过滤得滤液，静置分层后，收集离子液体层；
(2)将步骤(1)所得离子液体层用等体积的乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯相后，依次用乙醇、饱和氯化钠溶液洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥、过滤，滤液浓缩干燥即得所述白芍和金银花的提取物16.89g。
对比例1
一种SOD类化妆品添加剂，其中包含白芍和金银花的提取物，所述白芍和金银花的提取物的制备方法包括以下步骤：
(1)取白芍400g、金银花100g，将其粉碎混匀，过80目筛，加入含离子液体[BMIM]PF6的磷酸盐缓冲溶液(pH5.0，5.0kg,其中含1.0kg[BMIM]PF6)和纤维素酶(3g，40u/mg)，加热至40℃浸泡提取5小时后，过滤，除去滤渣，滤液静置分层后，收集离子液体层；
(2)将步骤(1)得到的离子液体层用等体积的乙酸乙酯萃取2次，合并乙酸乙酯相后，依次用水、饱和氯化钠溶液洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥、过滤，滤液浓缩、干燥即得所述白芍和金银花的提取物7.11g。
对比例2
一种SOD类化妆品添加剂，其中包含白芍和槐花的提取物，所述白芍和槐花的提取物的制备方法包括以下步骤：
(1)按白芍500g，槐花125g，粉碎混匀，过50目筛，加入含六氟异丙醇和离子液体1-丁基-3-甲基咪唑乙酸盐的磷酸盐缓冲溶液(pH5.0，4.0kg，其中含125g六氟异丙醇和500g离子液体1-丁基-3-甲基咪唑乙酸盐，以及纤维素酶(4g，30u/mg)和果胶酶(3g，30u/mg)，加热至45℃浸泡提取3小时后，过滤得滤液，静置分层后，收集离子液体层；
(2)将步骤(1)所得离子液体层用等体积的乙酸乙酯萃取2次，合并乙酸乙酯相后，依次用乙醇、饱和氯化钠溶液洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥、过滤，滤液浓缩干燥即得所述白芍和槐花的提取物9.45g。
对比例3
一种SOD类化妆品添加剂，其中包含白芍和金银花的提取物，所述白芍和金银花的提取物的制备方法包括以下步骤：
(1)按白芍500g，金银花250g，粉碎混匀，过50目筛，加入含六氟异丙醇和离子液体氢氧化1-乙胺基-3-甲基咪唑的磷酸盐缓冲溶液(pH5.0，4.0kg，其中含125g六氟异丙醇和500g离子液体氢氧化1-乙胺基-3-甲基咪唑，以及纤维素酶(4g，30u/mg)和果胶酶(3g，30u/mg)，加热至45℃浸泡提取3小时后，过滤得滤液，静置分层后，收集离子液体层；
(2)将步骤(1)所得离子液体层用等体积的乙酸乙酯萃取2次，合并乙酸乙酯相后，依次用乙醇、饱和氯化钠溶液洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥、过滤，滤液浓缩干燥即得所述白芍和金银花的提取物13.21g。
对比例4
一种SOD类化妆品添加剂，其中包含白芍和金银花的提取物，所述白芍和金银花的提取物的制备方法包括以下步骤：
(1)按白芍500g，金银花250g，粉碎混匀，过50目筛，加入含离子液体1-丁基-3-甲基咪唑乙酸盐的磷酸盐缓冲溶液(pH5.0，4.0kg，其中含500g离子液体1-丁基-3-甲基咪唑乙酸盐，以及纤维素酶(4g，30u/mg)和果胶酶(3g，30u/mg)，加热至45℃浸泡提取3小时后，过滤得滤液，静置分层后，收集离子液体层；
(2)将步骤(1)所得离子液体层用等体积的乙酸乙酯萃取2次，合并乙酸乙酯相后，依次用乙醇、饱和氯化钠溶液洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥、过滤，滤液浓缩干燥即得所述白芍和金银花的提取物12.86g。
对比例5
一种SOD类化妆品添加剂，其中包含白芍和金银花的提取物，所述白芍和金银花的提取物的制备方法包括以下步骤：
(1)按白芍500g粉碎混匀，过50目筛，加入含六氟异丙醇和离子液体1-丁基-3-甲基咪唑乙酸盐的磷酸盐缓冲溶液(pH5.0，4.0kg，其中含125g六氟异丙醇和500g离子液体1-丁基-3-甲基咪唑乙酸盐，以及纤维素酶(4g，30u/mg)和果胶酶(3g，30u/mg)，加热至45℃浸泡提取3小时后，过滤得滤液，静置分层后，收集离子液体层；
(2)将步骤(1)所得离子液体层用等体积的乙酸乙酯萃取2次，合并乙酸乙酯相后，依次用乙醇、饱和氯化钠溶液洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥、过滤，滤液浓缩干燥即得所述白芍的提取物8.89g；
(3)重复步骤(1)和(2)，提取对象为250g金银花，得金银花的提取物4.36g；
(4)将前述所得白芍的提取物和金银花的提取物混合即得白芍和金银花的提取物13.25g。
效果实施例
实施例1-3和对比例1-5所得最终提取物分别记作A、B、C、D、E、F、G、H，取提取物A-H用DMSO溶解，配制成质量浓度为1.0mg/mL的溶液，按照背景技术CN109091440中的方法检测各自对酪氨酸酶的抑制率、DPPH自由基清除能力、超氧阴离子清除能力以及SOD酶活性，结果如下表所示。
由上表的检测结果可知，采用本发明的提取方法同时提取白芍和金银花，所获得的提取物具有优异的酪氨酸酶抑制率、DPPH自由基清除能力、超氧阴离子清除能力以及SOD酶活性。
本领域的技术人员容易理解，以上所述仅为本发明的实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种包含白芍和金银花的提取物，其特征在于，所述包含白芍和金银花的提取物的制备方法包括以下步骤：
(1)按白芍：金银花＝5：2-3取白芍和金银花，粉碎混匀，过40-60目筛，加入含六氟异丙醇和离子液体的磷酸盐缓冲溶液，以及纤维素酶和果胶酶，加热至40-50℃浸泡提取2-4小时后，过滤得滤液，静置分层后，收集离子液体层；
(2)将步骤(1)所得离子液体层用等体积的乙酸乙酯萃取2-3次，合并乙酸乙酯相后，依次用乙醇、饱和氯化钠溶液洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥、过滤，滤液浓缩干燥即得所述白芍和金银花的提取物。
2.根据权利要求1所述的包含白芍和金银花的提取物，其特征在于，所述纤维素酶所述纤维素酶和果胶酶的质量比为2：1-2。
3.根据权利要求1所述的包含白芍和金银花的提取物，其特征在于，所述纤维素酶所述纤维素酶的用量为白芍质量的0.5-1％，酶活为20-40u/mg。
4.根据权利要求1所述的包含白芍和金银花的提取物，其特征在于，所述含六氟异丙醇和离子液体的磷酸盐缓冲溶液的pH值为4.5-5.5，且其中离子液体的质量分数为10％-15％。
5.根据权利要求1所述的包含白芍和金银花的提取物，其特征在于，所述六氟异丙醇和离子液体的质量比为1：3-5。
6.根据权利要求1所述的包含白芍和金银花的提取物，其特征在于，所述离子液体为1-丁基-3-甲基咪唑乙酸盐或氢氧化1-乙胺基-3-甲基咪唑中的一种或多种。
7.根据权利要求6所述的包含白芍和金银花的提取物，其特征在于，所述离子液体为1-丁基-3-甲基咪唑乙酸盐。
8.根据权利要求1所述的包含白芍和金银花的提取物，其特征在于，所述含六氟异丙醇和离子液体的磷酸盐缓冲溶液的用量为白芍质量的7-9倍。
9.包含植物提取物的SOD类化妆品添加剂，其特征在于，所述植物提取物为权利要求1-8任一项所述的包含白芍和金银花的提取物。
10.根据权利要求9所述的包含植物提取物的SOD类化妆品添加剂，其特征在于，所述SOD类化妆品为SOD面膜、SOD保湿乳液。
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