CN112533495A - 能够满足人类或猪等单胃动物的氨基酸需求的氨基酸组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种组合物，所述组合物包含至少一种氨基酸和/或至少一种乳清蛋白以及控释脂质基质。此外，本发明涉及所述组合物在用于单胃受试者、优选人类受试者或猪的氨基酸供应的治疗方法或蛋白质缺乏以及源自所述蛋白质缺乏的病症、症状和/或紊乱的治疗方法中的用途。
Description
本发明涉及一种用于制备包含至少一种氨基酸、优选至少两种氨基酸及其盐的组合物的方法。此外，本发明还涉及用于人类或动物用途、优选用于单胃动物的组合物，其包含至少一种氨基酸和/或至少一种乳清蛋白以及控释(controlled-release)脂质基质，其中所述组合物可通过所述方法获得。此外，本发明还涉及用于人类或动物用途、优选用于单胃动物的所述组合物，其用于供应氨基酸，或蛋白质缺乏以及源自所述蛋白质缺乏的病症、症状和/或紊乱的治疗性和非治疗性治疗的方法。
骨骼肌的发育和维持是由肌肉蛋白质合成过程(简称MPS，基于肌肉膨胀的过程)和肌肉蛋白质分解过程(简称MPB，基于肌肉萎缩的过程)的总和决定的。由MPS和MPB之间的稳态平衡所决定的人体肌肉量的保存和发育，是维持新陈代谢健康和独立运动或总体上更好的生活质量的基本要素([1]Dideriksen等人，2013)。MPS和MPB之间的这种平衡可能会受到各种因素的干扰，包括一些慢性疾病、肌肉缺乏使用和衰老。事实上，肌肉量和肌肉强度的丧失(肌肉减少症)是导致老年人死亡率和发病率增加以及生活质量下降的主要原因([2]Nowson and O’connell 2015)。已经证实，在志愿者中静脉注射氨基酸(AA)，通过促进高氨基酸血症和高胰岛素血症，刺激了MPS([3]Philips,2014)。然而，肌肉蛋白质合成是一个被认为是“可饱和”的过程，因此，蛋白质来源的氨基酸组合物和通过饮食摄入的必需氨基酸(EAA)的量证明是至关重要的。人类有9种身体不能重新合成的EAA即AA，因此必须通过饮食获得：组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸和缬氨酸([4]DRI,2006)。至于猪，我们应该在这份EAA列表中添加：精氨酸、半胱氨酸和酪氨酸。在人类的9种EAA中，最近的研究表明，亮氨酸作为支链AA(BCAA)的一种，通过激活人类和猪的mTORC1分子途径中的信号级联，在MPS中起着至关重要的作用。事实上，在不同的AA中，这种AA已被确定为主要的合成代谢信号(Bohè等人，2003)。在餐后阶段(饭后1至4小时)，MPS较高，导致肌肉蛋白质平衡为正，而在禁食阶段MPS比率较低，蛋白质平衡为负([5]Jager等人，2017)。此外，研究表明，EAA的血液浓度可调节肌肉在休息时和运动后的蛋白质合成速率([5]Jager等人，2017)。
迄今为止，用于人类或动物蛋白质补充的市售组合物(药物组合物、膳食补充剂、食品、饲料、饲料添加剂、营养食品组合物)未提及特定的AA且未考虑每个受试者的特异性，可理解为实际的定性/定量要求。事实上，为了在MPS和MPB之间维持合适的平衡，重要的是要考虑到蛋白质和单个氨基酸(AA)的需求因受试者而异，这与多种因素有关，首先是年龄([4]DRI 2006)。例如，在老年受试者(75岁以上)中，存在所谓的“合成代谢抵抗”，即mTORC1通路出现失衡([6]Mitchell等人，2016)，并且蛋白质摄入量下降，这是根据受试者的蛋白质需求推荐的每日剂量没有考虑在其中的一个方面([2]Nowson and O’Connell 2015)。另一个影响因素是久坐的程度，在运动型个体的情况下，则是运动类型(有氧或抗阻)。事实上，运动、特别是抗阻运动，与饮食一起是MPS的驱动因素之一([7]Stokes等人，2018)；因此，运动型个体对氨基酸的需求是不同的。男性和女性之间也有差异。在文献中，大多数旨在确定氨基酸需求的研究主要在男性受试者身上进行，除了少数研究表明氨基酸需求随月经周期阶段的不同而变化([8]Elango等人，2008)。此外，在诸如怀孕和哺乳等异常条件下，这些需求各不相同([4]DRI,2006)。此外，众所周知，因种族不同，主要肌肉纤维类型存在差异，尽管还没有任何基于种族遗传学研究AA组成的研究，但仍很有可能AA的需求随主要肌肉纤维的类型而变化。
这些差异表明，有必要针对每个受试者的不同实际需要，并考虑到上述所有参数，来限定特定AA的补充。此外，能够确保在血液中有更大量且恒定的氨基酸将是非常有用的，从而通过限制主餐之间的波动能够使氨基酸在24小时内具有更恒定的血液生物利用度。
文献强调，在给人类受试者或单胃动物施用氨基酸时存在各种问题。特别是，游离氨基酸是高度酸性的；因此，当它们通过肠内施用时，它们会通过诱发胃灼热或胃溃疡而引起问题。此外，色氨酸在酸性pH下，例如在胃中的pH(pH 2至3)下降解，特别是在禁食期间。因此，对氨基酸的保护形式有很高的需求，从而允许它们能够在胃里运送，既不会对胃壁造成损伤，也不会发生降解。
因此，本发明所解决的技术问题是提供一种有效的解决方案，能够开发和制备从定性和定量的角度来看适合于向人类或动物受试者提供特定的氨基酸供应的组合物(药物组合物、膳食补充剂、食品、饲料、饲料添加剂或营养食品组合物)，其匹配所述受试者的特定需要(例如年龄、性别、种族或品种的遗传学/肌肉纤维的类型、健康状况、从事的体力活动、特定血液值)。为克服所述技术问题，本发明提供了一种能够制备包含氨基酸的组合物的方法，所述氨基酸就质量和数量而言是根据受试者或受试者群组的身体状况和需要类型为每个受试者或受试者群组特别选择的，如下详述。
此外，本发明提供了一种通过本发明的方法获得的组合物，其无副作用、易于制备且具有成本效益。
另外，本发明处理和解决的技术问题是提供适合向单胃受试者、优选人类受试者或猪提供氨基酸和/或蛋白质供应的组合物，以支持肌肉量的正常发育或有利于其增加。
另外，本发明处理和解决的技术问题是为所述受试者提供氨基酸和/或蛋白质，使其血液生物利用度在2至24小时内保持恒定，以限制其在主餐之间的血液水平波动。
最后，本发明处理和解决的技术问题是提供氨基酸和/或胃保护蛋白，它们可经肠施用，而不引起胃壁损伤和/或不在胃里发生降解。
由于在所附权利要求书中要求保护的技术特征，通过本发明的方法和组合物来实现这些目的和其它目的将从下面的详细描述中变得清楚。
申请人在经历了大量研究和开发阶段后发现了一种方法，基于受试者或受试者群组的几个参数来确定如何选择要配制的氨基酸(质量和数量)，以便提供能够满足为所述受试者供应充足氨基酸的需求的组合物。
本发明的主题涉及一种用于制备下述组合物(简言之，本发明的组合物用于人类或动物用途，优选用于单胃动物)的方法(简言之，本发明的方法)，所述组合物包含至少一种氨基酸、优选至少两种氨基酸，或其可接受的药物或食品级盐；
所述方法包括以下步骤：
-对于人类受试者或动物、优选单胃动物，评估和/或量化至少第一参数，所述第一参数选自包括以下参数的组或由以下参数组成的组：性别、年龄、种族或品种、或基于种族或品种的肌肉纤维的氨基酸组成、参与的体育活动的类型、从事的工作类型、日常饮食，或两个以上所述第一参数的的组；和/或
-对于人类受试者或动物、优选单胃动物，评估和/或量化至少第二参数，所述第二参数选自包括以下参数的组或由以下参数组成的组：血浆氮浓度、血肌酐、血肌酸磷酸激酶、强体力活动后的血乳酸或乳酸盐、每日步数(number of daily steps)、或唾液样本或由基因表征获得的参数，或所述第二参数的组；随后
-基于所述至少第一参数或所述第一参数的组并基于所述至少第二参数或所述第二参数的组，选择至少一种氨基酸，优选至少两种氨基酸；随后
-基于所述至少第一参数或所述第一参数的组并基于所述至少第二参数或所述第二参数的组，选择第一量的所述至少一种氨基酸，优选所述至少两种氨基酸；随后，
-将在前述步骤中选择并量化的所述至少一种氨基酸、优选所述至少两种氨基酸配制成适合于施用给所述受试者或动物的组合物。
本发明的方法可以设想，将仅评估所述至少第一参数或所述第一参数的组；或者仅评估所述至少第二参数或所述第二参数的组。优选的是，本发明的方法设想，将评估所述至少第一参数或所述第一参数的组，并且将评估所述至少第二参数或所述第二参数的组。
根据本领域技术人员已知的标准方法来执行所述第二参数的评估(或测量)。
肌酐是一种主要存在于肌肉中的蛋白质。在通过检测排除肾脏损伤后，上述蛋白质的增加可能取决于剧烈的体力活动。
肌酸磷酸激酶(CPK)介入与肌酸相关的能量机制，它存在于肌肉(MM型)、心脏(MB)和大脑(BB)中。当出现肌纤维损伤或疲劳：剧烈活动、扭伤或受伤、外科干预，或在最严重的情况下，心肌梗死、神经肌肉疾病或甲状腺异常时，它通常由肌肉(骨骼和心脏)释放到血液中。
乳酸或乳酸盐是乳酸厌氧代谢的副产物。它是一种对细胞有毒的化合物，其在血液中的积累与所谓的肌肉疲劳的表现有关。
有利的是，通过研究受试者或动物的肌肉纤维的AA组成和/或分析唾液样品或血液样品或血液试验，获得对人类受试者或动物(优选单胃动物)的真实个体需求，因此基于该研究来选择和量化氨基酸。在优选的实施方式中，通过执行本领域的技术人员已知的标准方法，可通过收集唾液样本以收集单个个体的DNA和/或确定参与合成代谢过程和/或与肌纤维的组成相关和/或与特定病理相关的基因的存在来确定所述组合物。基于所述第一和/或第二参数的实际蛋白质需求的研究可以使用不同的方法进行，包括氮平衡或指示剂氨基酸氧化(IAAO)法，或测定个体必需AA的氧化的方法([9]LARN 2017)。后两种方法被认为是最适合定义更具体的AA需求的方法。
在优选的实施方式中，出于本发明的目的，除了选择至少一种氨基酸、优选至少两种氨基酸及其量的步骤之外，评估所述至少第一参数和/或所述至少第二参数的步骤之后还有以下步骤：
-基于所述至少第一参数或所述第一参数的组和/或基于所述至少第二参数或所述第二参数的组，选择至少一种非氨基酸组分，所述组分选自一种或多种有机或无机酸、一种或多种芳香成分、至少一种维生素、至少一种矿物盐、至少一种抗氧化剂、至少一种益生菌菌株，或所述非氨基酸组分的组；随后
-基于所述至少第一参数或所述第一参数的组和/或基于所述至少第二参数或所述第二参数的组，选择第二量的所述至少一种非氨基酸组分或所述非氨基酸组分的所述组；
-将所述第二量的所述至少一种非氨基酸组分或所述非氨基酸组分的组与所述至少两种氨基酸一起配制在所述组合物中。
如上所述，在本发明的上下文中，术语“非氨基酸组分”是指选自C组的非氨基酸性质的化合物，C组包括以下物质或由以下物质组成的组：有机或无机酸、芳香成分、维生素、矿物盐、抗氧化剂、益生菌菌株、益生元和酶。
有利的是，所述维生素是A、B、C、D和/或K族的维生素；优选的是，B族维生素选自包括以下物质的组或由以下物质组成的组：B1、B2、B3、B4、B5、B6、B7、B8、B9、B10、B11、B12及其混合物。
有利的是，所述一种矿物盐是金属阳离子的有机或无机盐，金属阳离子例如为Fe、Se、Mg、Ca、K、Zn或Cu。
有利的是，所述一种抗氧化剂选自N-乙酰半胱氨酸(NAC)、辅酶Q10(CoQ10)、L-乙酰肉碱等。
本发明的主题还涉及一种优选通过本发明的方法获得的组合物，所述组合物包含：
(i)下述混合物(简而言之，本发明的混合物或活性成分的混合物)，所述混合物包含以下成分，或由以下成分组成：(a)至少一种氨基酸，优选至少两种氨基酸，或其可接受的药物或食品级盐，和/或(b)乳清蛋白；
并且，任选地，所述组合物包含：
(ii)至少一种可接受的药物或食品级添加剂和/或赋形剂。
此外，本发明的组合物包含：(iii)如下所述的脂质基质，其任选地包含包覆添加剂(iii.1)。
在一个实施方式中，在本发明的组合物(包含所述(i)混合物和(iii)脂质基质，以及任选的(ii)添加剂和/或(iii.1)包覆添加剂(定义如下))中包含的所述至少一种氨基酸或所述至少两种氨基酸主要是单胃受试者(如人类或猪)必需的氨基酸；本发明的组合物优选包含两种以上必需氨基酸，例如三种、四种或五种。所述(a)至少一种必需或非必需氨基酸选自A组，A组包括以下物质，或由以下物质组成：组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、精氨酸、半胱氨酸、色氨酸、谷氨酰胺及其混合物；优选为谷氨酰胺、苯丙氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸或亮氨酸；更优选为亮氨酸、缬氨酸和组氨酸；甚至更优选为亮氨酸。
在一个实施方式中，所述A组不包括赖氨酸和/或色氨酸。
在一个实施方式中，当本发明的组合物包含磺胺甲嘧啶或磺胺二甲嘧啶(SMT)(IUPAC名：4-氨基-N-(4,6-二甲基嘧啶-2-基)苯磺酰胺，CAS号57-68-1)时，所述A组不包括色氨酸。
在一个实施方式中，当(iii)本发明的脂质基质包含长链脂肪酸(优选硬脂酸、棕榈酸、油酸和肉豆蔻酸的混合物)，或由长链脂肪酸(优选硬脂酸、棕榈酸、油酸和肉豆蔻酸的混合物)组成时，所述A组不包括色氨酸。
在本发明的组合物(包含所述(i)混合物和(iii)脂质基质，以及任选的(ii)添加剂和/或(iii.1)包覆添加剂)的一个实施方式中，所述(a)至少一种氨基酸是氨基酸混合物，其选自B组的混合物，该混合物包含以下成分，或由以下成分组成：
-(B.1)亮氨酸、缬氨酸和异亮氨酸(BCAA)；
-(B.2)亮氨酸和选自A组的至少一种或多种氨基酸，其优选为选自赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和谷氨酰胺中的一种或多种氨基酸，例如，以下混合物：亮氨酸和赖氨酸；亮氨酸和蛋氨酸；亮氨酸和苏氨酸；亮氨酸和色氨酸；亮氨酸和缬氨酸；亮氨酸和异亮氨酸；亮氨酸和组氨酸；亮氨酸和谷氨酰胺；亮氨酸和赖氨酸以及选自蛋氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和谷氨酰胺的一种；亮氨酸和蛋氨酸以及选自赖氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和谷氨酰胺的一种；亮氨酸和苏氨酸以及选自赖氨酸、蛋氨酸、色氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和谷氨酰胺的一种；亮氨酸和色氨酸以及选自赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和谷氨酰胺的一种；亮氨酸和缬氨酸以及选自赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、色氨酸、异亮氨酸、组氨酸和谷氨酰胺的一种；亮氨酸和异亮氨酸以及选自赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、组氨酸和谷氨酰胺的一种；亮氨酸和组氨酸以及选自赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、异亮氨酸和谷氨酰胺的一种；亮氨酸和谷氨酰胺以及选自赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、异亮氨酸和组氨酸的一种；亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸以及选自赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、色氨酸、组氨酸和谷氨酰胺的一种；
-(B.3)亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸和色氨酸；
-(B.4)亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、色氨酸和组氨酸；
-(B.5)赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、色氨酸；
-(B.6)赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、色氨酸和缬氨酸。
当所述受试者是人类受试者时，选自所述B组的所述氨基酸的混合物优选选自(B.1)、(B.2)、(B.3)和(B.4)。
当所述受试者是猪时，选自所述B组的所述氨基酸的混合物优选选自(B.5)和(B.6)。
优选的是，在B组的所述二元混合物中，例如，(B.1)组的那些：亮氨酸和赖氨酸、亮氨酸和蛋氨酸、亮氨酸和苏氨酸、亮氨酸和色氨酸、亮氨酸和缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸、亮氨酸和组氨酸、亮氨酸和谷氨酰胺，两种氨基酸彼此的重量比优选为1:10至10:1，优选1:5至5:1，更优选1:3至3:1，甚至更优选1:1。
在本发明的上下文中，术语“氨基酸”涉及L-α-氨基酸，即，其氨基基团和羧基基团以L构型键合至相同的碳原子(准确地说，称为α-碳)的那些氨基酸，并且因此被赋予相应的光学活性，唯一例外的是甘氨酸，其是非手性的。氨基酸是蛋白质的组成单位(蛋白原)；根据不同氨基酸结合的类型、数量和顺序，可以获得大量的蛋白质。在自然界中，我们通常知道20种蛋白原氨基酸。我们的身体能够合成一些构建蛋白质所必需的氨基酸，但不能构建其他氨基酸，因此这些氨基酸被定义为“必需氨基酸”(EAA)，必须通过食物引入。
“乳清蛋白”或多种乳清蛋白是从牛奶乳清中分离出来的蛋白质混合物，是构成干酪加工副产品的液体物质。牛奶中的蛋白质由大约20％的乳清蛋白和80％的酪蛋白组成，而人乳中的蛋白质由60％的乳清蛋白和40％的酪蛋白组成。乳清蛋白通常是β-乳球蛋白、α-乳白蛋白、血清蛋白和其他次要组分的混合物，它们的天然形式是可溶的，不受pH值的影响。乳清中的蛋白质组分(占乳清中干物质的约10％)包含四种主要蛋白质组分和六种次要蛋白质组分。乳清的主要蛋白质组分为：β-乳球蛋白(约65％)、α-乳白蛋白(约25％)和血清蛋白(约8％)；而乳清的次要组分(约2％)为：乳铁蛋白、免疫球蛋白、糖巨肽、乳过氧化物酶和溶菌酶。此外，乳清蛋白由40％至50％的必需氨基酸(EAA)组成，并且被认为是这些氨基酸的丰富来源。
如Gorissen等人(Amino Acids,50:1685–1695,2018)所述，乳清蛋白的氨基酸组成如下所示。
表1
| 必需AA(EAA) | g/100g乳清蛋白 |
| 苏氨酸 | 5.4 |
| 蛋氨酸 | 1.8 |
| 苯丙氨酸 | 2.5 |
| 组氨酸 | 1.4 |
| 赖氨酸 | 7.1 |
| 缬氨酸 | 3.5 |
| 异亮氨酸 | 3.8 |
| 亮氨酸 | 8.6 |
| 非必需AA(NEAA) | |
| 丝氨酸 | 4.0 |
| 甘氨酸 | 1.5 |
| 谷氨酸 | 16.0 |
| 脯氨酸 | 8.7 |
| 半胱氨酸 | 0.1 |
| 丙氨酸 | 2.6 |
| 酪氨酸 | 4.4 |
| 精氨酸 | 2.9 |
在本发明的组合物(包含所述(i)、(iii)和任选的(ii))的一个实施方式中，所述(a)至少一种氨基酸或所述至少两种氨基酸，和/或所述(b)乳清蛋白总共(仅有(a)或仅有(b)或(a)和(b))以相对于组合物的总重量为1％至90％、优选10％至50％、乃至更优选15％至45％的浓度(重量％)存在于本发明的组合物中。
除了(i)混合物，和任选的(ii)添加剂和/或赋形剂之外，本发明的组合物还包含(iii)包覆基质(或本发明的控释脂质包覆基质或控释脂质基质或脂质基质)，其中根据本发明的定义并根据本发明的制备方法，所述(iii)包覆基质包埋或结合或分散和/或微包封所述(i)混合物。
综上所述，本发明的组合物包含：
-(i)下述混合物，所述混合物包含以下成分，或由以下成分组成：(a)选自所述A组或B组混合物的至少一种氨基酸或氨基酸的混合物，或其可接受的药物或食品级盐，和/或(b)乳清蛋白；
-(iii)如本发明的上下文中定义的控释脂质基质，其中根据本发明中的定义并根据本发明的制备方法，所述(iii)脂质基质包埋或结合或分散所述(i)混合物；
以及，任选地，所述(iii)脂质基质包含所述(iii.1)至少一种包覆添加剂(如下所述)；
并且，任选地，所述组合物包含：
(ii)至少一种可接受的药物或食品级添加剂和/或赋形剂。
在一个实施方式中，除了(a)至少一种氨基酸，优选至少两种氨基酸，和/或(b)所述乳清蛋白之外，本发明的组合物(包含所述(i)和(iii)，以及任选的(ii)和/或(iii.1))还包含(c)至少一种选自如上所述的C组中的非氨基酸组分，C组包括以下物质，或由以下物质组成：有机或无机酸、芳香成分、维生素、矿物盐、抗氧化剂、益生菌菌株、益生元和酶。
在存在所述(iii)包覆基质时，所述(c)非氨基酸组分可包含在(i)混合物中，并且其本身也可由所述(iii)脂质包覆基质微包封或包埋或结合或分散，或者微包封或包埋或结合或分散在所述(iii)脂质包覆基质中，作为另选，其可以包含在组合物中，但不包含在由(iii)包覆基质微包封或包埋的(i)混合物中。如果存在，选自C组中的所述(c)非氨基酸组分优选包含在(i)混合物中，并且因此其本身也由所述(iii)脂质基质包埋或结合或分散，或者包埋或结合或分散在所述(iii)脂质基质中。
在优选的实施方式中，本发明的组合物包含：
-所述(i)混合物，该混合物包含以下物质，或由以下物质组成：(a)选自所述A组或B组的至少一种氨基酸或氨基酸的混合物，或其盐，和/或(b)乳清蛋白；
-所述(iii)控释脂质基质(以及任选地(iii.1))；和
-(c)选自A、B、C、D或K族的维生素中的至少一种维生素；优选的是，B族维生素，其选自包括以下物质的组，或由以下物质组成的组：B1、B2、B3、B4、B5、B6、B7、B8、B9、B10、B11、B12及其混合物。
本发明的组合物优选包含：
-所述(a)至少一种氨基酸或氨基酸的混合物，或其盐，其选自所述A组或B组(例如B.1、B.2、B.3、B.4、B.5或B.6)，优选为亮氨酸、亮氨酸和赖氨酸、亮氨酸和蛋氨酸、亮氨酸和苏氨酸、亮氨酸和色氨酸、亮氨酸和缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸、亮氨酸和组氨酸、亮氨酸和谷氨酰胺或亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸混合物；
-所述(iii)控释脂质基质和任选的(iii.1)；和
-B族维生素，其选自包括以下物质的组，或由以下物质组成的组：B1、B2、B3、B4、B5、B6、B7、B8、B9、B10、B11、B12及其混合物。有利的是，在该实施方式中，所述(a)至少一种氨基酸或氨基酸的混合物，或其盐，和所述B族维生素的重量比((a)：维生素B)为1:10至10:1，优选1:5至5:1，更优选1:3至3:1，甚至更优选1:1。
所述(iii)包覆基质能够在给受试者施用后控制释放氨基酸(简言之，控释包覆基质)。
在给受试者施用后能够控制释放氨基酸或氨基酸的混合物和/或乳清蛋白的所述(iii)包覆基质包含以下物质，或由以下物质构成：
-至少一种饱和或不饱和、游离或酯化的碳原子数为C10至C30、优选C14至C24的脂肪酸，和/或
-至少一种具有碳原子数为C6至C30、优选C14至C24的饱和或不饱和脂肪酸链的甘油三酯，和/或
-至少一种碳原子数为C16至C36、优选C24至C36的蜡或其混合物；为简单起见，下文中称为控释脂质包覆基质；以及，任选地，
-至少一种如下所述的包覆添加剂(iii.1)。
所述(iii)控释脂质包覆基质能够随时间的推移释放(i)混合物(即，(a)和/或(b)以及任选的(c))中存在的成分，如果经肠给药，则能够随着消化过程的推移释放这些成分。有利的是，所述(iii)控释脂质包覆基质能够确保在血液中有更大量且恒定的氨基酸，并且能够在24(或18)小时内使氨基酸和/或乳清蛋白和/或非氨基酸成分(c)的血液生物利用度更恒定，从而有利地限制主餐之间的这些成分的波动。
由所述(iii)控释脂质包覆基质微包封或包埋或结合或分散、或微包封或包埋或结合或分散在所述(iii)控释脂质包覆基质中的(i)混合物利用专利文件EP 1391155A1第[0048]至[0049]和[0077]段中描述的制造方法生产(简言之，本发明的制备方法)；所述段落通过引用并入本说明书中。简言之，本发明的制备方法包括以下步骤：
-步骤(I)，制备本发明任一个实施方式的所述(iii)控释脂质基质，以及如果存在，制备所述(ii)至少一种添加剂和/或赋形剂，以获得均质体(温度为约80℃至120℃)，随后
-步骤(II)，将本发明任一个实施方式的所述(i)活性成分的混合物(即，(a)和/或(b)以及任选的(c))分散在所述均质体(I)中，以产生物料(II)(温度为约55℃至70℃)，随后-步骤(III)，在冷室(温度低于15℃)中喷涂物料(II)以得到本发明的组合物，其优选处于相对为球形的颗粒的形式，其中所述(i)混合物中包含的活性成分(即，(a)和/或(b)以及任选的(c))，和如果存在的所述(ii)添加剂由所述(iii)控释脂质基质分散或结合或包埋、或分散或结合或包埋在所述(iii)控释脂质基质中。
换言之，由本发明的制备方法获得的本发明的组合物是分散在所述(iii)控释脂质基质中的(a)和/或(b)、和如果存在的(c)以及任选的(ii)的聚集体。
因此，在本发明的上下文中，表述“(iii)包覆基质，其中所述(iii)包覆基质包埋或结合或分散和/或微包封所述(i)混合物”是指分散在(iii)控释脂质基质中的(i)混合物中包含的成分(即，(a)和/或(b)和如果存在的(c))的聚集体。
表述“(iii)包覆基质，其中所述(iii)包覆基质包埋或结合或分散和/或微包封所述(i)混合物”不是指包覆有所述(iii)控释脂质基质的膜的(i)混合物中包含的成分(即，(a)和/或(b)和如果存在的(c))。
此外，表述“(iii)包覆基质，其中所述(iii)包覆基质包埋或结合或分散和/或微包封所述(i)混合物”不是指包覆有(iii)控释脂质基质或(iii)的膜的处于片、丸等形式的(i)混合物中包含的成分(即，(a)和/或(b)和如果存在的(c))。
本发明的组合物的优点，特别是本发明的混合物或组合物中所含活性成分的长期(2小时至24小时)血液生物利用度，源自所述(iii)控释脂质基质的物理化学性质和本发明的特定制备工艺，其能够使(i)混合物的活性成分(即，(a)和/或(b)和如果存在的(c))结合或分散或包埋在(iii)脂质基质中。
事实上，除了在肠道(gut)内提供包含在(i)混合物中的活性成分(即，(a)和/或(b)和如果存在的(c))的受控释放外，所述(iii)控释脂质基质还有利于胃保护，因为所述(iii)基质在胃的酸性pH(pH 2至3)下是稳定的。
因此，所述(iii)脂质基质通过结合和/或包埋所述活性成分(即(a)和/或(b)和如果存在的(c))使其能够通过胃而不发生降解，并且不存在氨基酸、酸性物质对胃壁造成损伤。当本发明的组合物到达肠道时，此处的pH值高于胃中的pH值(pH 6至7.5)，所述(iii)脂质基质缓慢溶解，允许活性成分的受控释放，因此，在2小时至24小时的时间范围内保持恒定的血液生物利用度。此外，肠道具有富含脂肪酶的酶促能力，其通过消化脂质基质而能够使活性成分受控释放。
为了证明脂质基质对组合物中所含活性成分的胃保护的有效性，进行了一项研究，其中在第一组猪和第二组猪的胃肠道不同部分的内容物中监测山梨酸和香兰素(标记物)的存在，使第一组猪口服包含天然酸(包括山梨酸)和风味剂(包括香兰素)并包封在脂质基质中的组合物，并使第二组猪施用游离形式的相同成分(未封装在脂质基质中)。这项研究表明，这两种标记物(山梨酸和香兰素)只有以包封在脂质基质中的形式施用时，才会存在于不同的肠部分中，这是因为脂质基质能使通过胃，并能够在肠道水平缓慢释放，在这情况下标志物被吸收并在血液中可利用，从而增加血液生物利用度。
此外，使用磺胺甲嘧啶作为研究标记物，进行了一项研究以证明在用脂质基质包封活性组分后，活性组分的生物利用度随着时间的推移而延长。特别是，第一组猪口服包含用脂质基质包封的磺胺甲嘧啶的组合物，对第二组猪以1g/猪的剂量施用包含游离形式的磺胺甲嘧啶(未包封在脂质基质中)的组合物。施用8小时后，脂质基质中结合的磺胺甲嘧啶的吸收分数显示为比游离形式的磺胺甲嘧啶小31.8±13％。采用包封在脂质基质中的形式，磺胺甲嘧啶的吸收在24小时内完成，而采用游离形式时在10小时内完成，因此揭示了以脂质基质包封的形式在24小时内的时间-受控释放和恒定血液生物利用度的效果。
使用山梨酸、香兰素和磺胺甲嘧啶代替氨基酸作为脂质基质释放的标志物，这是因为考虑到高含量的膳食氨基酸、肠脱皮细胞与微生物增殖时，在分析中几乎不可能在肠道水平确定正在进行分析的组合物释放的限制性氨基酸的存在。
由此可见，经由本发明的组合物向单胃受试者、优选人类受试者或猪的饮食中添加合适的氨基酸和/或蛋白质，能够提高所施用的氨基酸/蛋白质的效率，因此，既减少受试者肠道中过量的未消化蛋白质，从而限制潜在传染病的发生，又减少所述受试者排出的氮，从而限制牲畜产生的环境影响。
此外，通过本发明的组合物满足限制性氨基酸或蛋白质的要求有助于降低单胃受试者饮食中蛋白质的百分比，当所述受试者是动物(例如猪)时，在饲料成本方面带来经济优势。
此外，本发明的组合物没有副作用，因此可施用于广泛的动物或人类受试者，也包括儿科受试者、老年人和孕妇。
最后，本发明的组合物易于制备且具有成本效益。
在本发明的上下文中，术语“受试者”是指人类受试者或单胃动物，优选人类受试者或猪。
在本发明的上下文中，术语“单胃”是指其胃有一个单独的腔室进行化学和酶消化的动物。相反，多胃动物或反刍动物的胃由四个不同的腔室组成：瘤胃、网胃、重瓣胃和皱胃(皱胃相当于单胃动物的胃，因为它是唯一具有胃粘膜的胃)。属于这一类的有骆驼科动物(有三腔胃)和严格意义上的反刍动物(牛科、鹿科、长颈鹿科等)。由于在瘤胃中发生的反刍和微生物消化作用，多胃动物对植物饲料的消化能力更强。
“甘油三酯”(或三酰甘油)是甘油的中性酯，其中三个长链脂肪酸的链取代羟基基团的氢原子而存在。在甘油三酯的常见结构中，脂肪酸链的长度可以是5至28个碳原子，但最常见的是17和19个碳原子。
术语“脂肪酸”(缩写为FA)是指脂肪族一元羧酸，其通常为、但不仅仅是具有偶数个碳原子的长链，并且为无支链的和非环状的(即由不具有形成闭环的链的分子组成)。脂肪酸可以是饱和的(如果其分子具有C-C单键)或不饱和的(如果其具有C＝C双键)。
术语“蜡”是指具有高分子量一元醇的长链脂肪酸酯。蜡可以是植物源的，也可以是动物源的(蜂蜡)。蜂蜡由不同化合物组成，例如包含：碳氢化合物14％、单酯35％、二酯14％、三酯3％、羟基单酯4％、羟基聚酯8％、酸酯1％、酸聚酯2％、游离酸12％、游离醇1％、不明成分6％。蜂蜡的主要成分是棕榈酸酯、棕榈酸、羟基棕榈酸酯和由脂肪醇长链(30至32个碳原子)形成的油酸酯，两种主要成分、棕榈酸三十烷酯(棕榈酸蜂花基酯)CH3(CH2)29O-CO-(CH2)14CH3和蜡酸CH3(CH2)24COOH的比率为6:1。蜂蜡的熔点在62℃至64℃之间。15℃密度在0.958至0.970g/cm3的范围之间。蜂蜡可分为两大类：欧洲型和东方型。欧洲型的皂化数为3至5，东方型的皂化数为8至9。
有利的是，包含在(iii)控释脂质包覆基质中的所述脂肪酸可以是植物和/或动物来源的氢化或非氢化脂肪酸。
有利的是，包含在(iii)控释脂质包覆基质中的所述甘油三酯可以是植物和/或动物来源的氢化或非氢化甘油三酯。
有利的是，包含在(iii)控释脂质包覆基质中的所述蜡可以是植物来源和/或动物来源；优选为蜂蜡。
在优选的实施方式中，所述(iii)控释脂质包覆基质包含以下物质，或由以下物质组成：至少一种植物和/或动物来源的氢化脂肪酸和/或至少一种植物和/或动物来源的氢化甘油三酯和/或至少一种蜡，以及任选的所述包覆添加剂(iii.1)中的至少一种；优选为至少一种植物来源的氢化脂肪酸和/或至少一种植物来源的氢化甘油三酯和/或至少一种动物来源的蜡。
氢化植物甘油三酯选自包括棕榈油、葵花籽油、玉米油、菜籽油、花生油、橄榄油和大豆油的组。
动物来源的甘油三酯(优选为氢化的)选自鸡脂、氢化鸡脂、牛油和猪油。
组合物在其各种实施方式中可优选包含所述(iii)包覆基质(控释脂质包覆基质)，其量相对于组合物的总重量(重量％)为10％至80％；优选为40％至60％，更优选为45％至55％。
在本发明的一个实施方式中，本发明的包含所述(i)和(iii)以及任选的(ii)和/或(iii.1)的组合物包含所述(i)混合物，该混合物包含，本发明的任一个实施方式的(a)和/或(b)以及任选地(c)，其相对于组合物的总重量的重量％为1％至90％、优选为10％至50％、更优选为15％至45％；以及本发明任一个实施方式的所述(iii)控释脂质基质，其相对于组合物的总重量的重量％为10％至80％、优选为40％至60％、更优选为45％至55％。(iii)的所述％表示(iii)的总％，而与(iii)中包含的成分无关，例如包含或不包含(iii.1)。
在优选的实施方式中，本发明的组合物包含：
-(i)下述混合物，所述混合物包含以下物质，或由以下物质组成：亮氨酸或其盐，以及任选的一种或多种选自所述A组或B组的氨基酸；
-(iii)如本发明上下文中定义的控释脂质基质，其包含以下物质，或由以下物质组成：至少一种脂肪酸和/或甘油三酯和/或蜡或其混合物，优选选自棕榈油、向日葵油、玉米油、菜籽油、花生油、大豆油、橄榄油、蜂蜡及其混合物，其中所述脂质基质包埋或结合或分散(i)混合物的活性成分，提供了对(i)混合物的活性成分的胃保护，其在肠道中的受控释放及其在2至24小时内的恒定血液生物利用度；并且，任选地，所述基质包含(iii.1)；以及，任选地，所述组合物包含(ii)；其中所述(i)和(iii)以本发明中定义的重量％存在。
在优选的实施方式中，本发明的组合物包含：
-(i)下述混合物，所述混合物包含以下物质，或由以下物质组成：亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸的混合物，或其盐，以及任选的一种或多种选自所述A组或B组的氨基酸；
-(iii)如本发明上下文中定义的控释脂质基质，其包含以下物质，或由以下物质组成：至少一种脂肪酸和/或甘油三酯和/或蜡或其混合物，优选选自棕榈油、向日葵油、玉米油、菜籽油、花生油、大豆油、橄榄油、蜂蜡及其混合物，其中所述包覆基质包埋或结合或分散(i)混合物的活性成分，提供了对(i)混合物的活性成分的胃保护，其在肠道中的受控释放及其在2至24小时内的恒定血液生物利用度；并且，任选地，所述基质包含(iii.1)；以及，任选地，所述组合物包含(ii)；其中所述(i)和(iii)以本发明中定义的重量％存在。
在优选的实施方式中，本发明的组合物包含：
-(i)下述混合物，所述混合物包含以下物质，或由以下物质组成：(b)乳清蛋白，和任选的一种或多种选自所述A组或B组的氨基酸；
-(iii)如本发明上下文中定义的控释包覆基质，其包含以下物质，或由以下物质组成：至少一种脂肪酸和/或甘油三酯和/或蜡或其混合物，优选选自棕榈油、向日葵油、玉米油、菜籽油、花生油、大豆油、橄榄油、蜂蜡及其混合物，其中所述包覆基质包埋或结合或分散(i)混合物的活性成分，提供了对(i)混合物的活性成分的胃保护，其在肠道中的受控释放及其在2至24小时内的恒定血液生物利用度；并且，任选地，所述基质包含(iii.1)；
以及，任选地，所述组合物包含(ii)；其中所述(i)和(iii)以本发明中定义的重量％存在。
在其各种实施方式中，由所述(iii)包覆基质(控释脂质包覆基质)微包封或包埋或结合或分散、或在所述(iii)包覆基质(控释脂质包覆基质)中微包封或包埋或结合或分散的(i)混合物通过本发明的制备方法形成的球形颗粒的粒径(平均粒径)为100μm至2000μm、优选200μm至1500μm、更优选250μm至1000μm。特别是，当本发明的组合物旨在用于人类受试者时，所述平均粒径优选地为100μm至1000μm。当本发明的组合物旨在用于猪时，所述平均粒径优选为500μm至2000μm、更优选500μm至1500μm或500μm至1000μm。
在以上描述的各种实施方式中，本发明的(iii)包覆基质(控释脂质包覆基质)还包含一种或多种包覆添加剂(iii.1)。包覆添加剂(iii.1)选自包括以下物质的组，或由以下物质组成的组：气相二氧化硅、硬脂酸钙、硬脂酸镁、硫酸钙、沉淀二氧化硅、硅酸钙、硅酸铝和疏水二氧化硅。使用的包覆添加剂(iii.1)用于增加基质的粘度并降低其渗透性。本发明的(iii)包覆基质优选包含多种包覆添加剂(iii.1)，相对于(iii)包覆基质的总重量，其总量(以重量计)为0.1％至30％、优选1％至20％、更优选5％至10％。
除了(i)混合物和(iii)包覆基质，本发明的组合物还可以包含(ii)至少一种药物或食品级添加剂和/或赋形剂，即，适合于药物或食品用途的无治疗活性的物质。在本发明的上下文中，药物或食品用途的可接受的组分包括本领域技术人员已知的所有辅助物质，例如，作为非限制性实例，稀释剂、溶剂(包括水、甘油、乙醇)、增溶剂、增稠剂、甜味剂、风味剂、着色剂、润滑剂、表面活性剂、抗菌剂、抗氧化剂、防腐剂、用于稳定pH的缓冲剂及其混合物。此类物质的非限制性实例为麦芽糊精、磷酸盐缓冲液、碱(例如氢氧化钠)、黄原胶、瓜尔胶、果糖和天然或人造风味剂。
本发明的主题还涉及药物组合物、营养食品组合物、膳食补充剂产品或食品或特殊医疗用途食品、饲料、饲料添加剂或医疗器械用组合物，其包含本发明的组合物，或由本发明的组合物组成，根据本发明的任一个实施方式，本发明的组合物包含(i)、(iii)和任选的(ii)和/或(iii.1)。
在本发明的上下文中，术语“医疗器械”的含义符合1997年2月24日第46号意大利立法法令(Italian Legislative Decree)或符合新的医疗器械法规(Medical DeviceRegulation)(EU)2017/745(MDR)。
在包含本发明组合物(包含所述(i)和(iii)和任选的(ii)和/或(iii.1))的所述药物组合物、营养食品组合物、膳食补充剂产品或食品或特殊医疗用途食品、饲料、饲料添加剂或医疗器械用组合物的优选实施方式中，(i)混合物包含以下物质，或由以下物质组成：亮氨酸或亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸的混合物，或乳清蛋白和任选的选自上述A组或B组中的至少一种氨基酸。
作为非限制性实例，本发明的组合物可以是：液体形式，作为溶液、两相液体体系、悬浮液或糖浆剂；半固体形式，作为凝胶、乳膏或泡沫；或固体形式，作为粉末、颗粒、薄片、聚集体、胶囊、片剂、棒料和等效形式。
本发明的组合物优选用于口服(经肠)用途，优选为固体形式，作为颗粒、微粒、薄片或粉末；甚至更优选为药物形式，作为片剂、胶囊或软凝胶胶囊；例如为微胶囊或微粒的形式封入待吞咽的胶囊中、封入人类和动物的补充剂中或封入人类和动物的完整食品中。作为另选，本发明的组合物以液体形式作为悬浮液口服使用，例如悬浮液中的颗粒、微粒或粉末。
当本发明的组合物为片剂形式时，意味着将在(i)混合物中包含的活性成分(即(a)和/或(b)，以及任选的(c))和包埋或结合所述活性成分的(iii)脂质基质之间形成的聚集体处理形成片剂。
片剂形式的本发明组合物不是包覆有本发明(iii)的脂质基质的片剂。
除非另有规定，组合物或混合物“包含”一种或多种成分或物质的指示表明除一种或多种明确指出的成分或物质外，还可能存在其他成分或物质。
本发明的主题涉及本发明的组合物(包含(i)和(iii)以及任选的(ii)和/或(iii.1))，根据本发明的任一个实施方式，其通过/可通过本发明的上述制备方法(步骤(I)、(II)和(III))获得。
本发明的主题涉及本发明的组合物(包含所述(i)和(iii)以及任选的(ii)和/或(iii.1))，根据本发明的任一个实施方式，其作为药物组合物、营养食品组合物、膳食补充剂产品或食品或特殊医疗用途食品、饲料、饲料添加剂或医疗器械用组合物，其用作药物。
本发明的主题还涉及本发明的组合物(包含所述(i)和(iii)以及任选的(ii)和/或(iii.1))，根据本发明的任一个实施方式，其作为药物组合物、营养食品组合物、膳食补充剂产品或食品或特殊医疗用途食品、饲料、饲料添加剂或医疗器械用组合物，其用于向单胃受试者、优选人类受试者或猪供应氨基酸的治疗方法。
术语“氨基酸供应”是对于受试者正常发育的氨基酸(或蛋白质或其类似物)的日平均供应，或对于与受试者所属物种的平均发育相比更大或更快的发育的氨基酸(或蛋白质或其类似物)的日平均供应。
本发明的主题还涉及本发明的组合物(包含(i)和(iii)以及任选的(ii)和/或(iii.1))，根据上述实施方式，其用于预防性和/或治疗性治疗有需要的受试者的蛋白质缺乏和与所述蛋白质缺乏相关的病症、症状和/或紊乱的方法。
轻度蛋白质缺乏可导致：代谢效率降低(例如，容易出血、伤口愈合缓慢等)、血液中的红细胞成分减少、体重减轻(肌肉减少所致)、肌肉体积减少、过早疲劳、难以集中注意力和学习困难、喜怒无常、肌肉和/或关节和/或骨痛、血糖变化以及更易感染。
不太常见的情况是，轻度白质缺乏也会导致：焦虑(由于神经递质合成的改变)、运动机能下降(训练刺激的补偿减少)、睡眠改变(一些假说认为这可能是由色氨酸和血清素合成的改变引起的)和消化不平衡(蛋白质能够自然合成消化酶)。
此外，蛋白质缺乏可产生更严重的症状或紊乱或病症，如肌肉萎缩(包括肌肉蛋白的自我消化以产生能量)、肌肉量和强度减少、以及所有基于蛋白质的成分(如指甲、头发、皮肤、酶、神经递质、激素和免疫球蛋白)的严重减少。
在一个实施方式中，本发明的组合物用于预防性和/或治疗性治疗有需要的受试者的肌肉量减少和/或肌肉强度降低以及与所述肌肉量减少和/或肌肉强度降低相关的病症、症状和/或紊乱的方法，该相关的病症、症状和/或紊乱例如，肌肉减少症、肌肉萎缩、肌营养不良和肌肉分解代谢。
本发明的主题还涉及通过供应氨基酸进行的预防性和/或治疗性治疗的方法，或用于预防性和/或治疗性治疗蛋白质缺乏以及与所述蛋白质缺乏相关的病症、症状和/或紊乱的方法，其中所述治疗包括对有需要的受试者施用以上定义的本发明的组合物；特别是用于预防性和/或治疗性治疗肌肉量减少和/或肌肉强度降低。
在本发明的上下文中，“治疗方法”是指一种干预措施，包括施用一种物质或物质混合物或其组合，其目的是消除、减轻/减少或预防病症或疾病和与其相关的症状或紊乱。
最后，本发明的主题涉及上述实施方式的本发明组合物的非治疗用途，其中所述用途用于通过供应氨基酸进行的非治疗性治疗，或对有需要的受试者非治疗性治疗蛋白质缺乏以及与所述蛋白质缺乏相关的紊乱，其中，所述非治疗性用途包括施用所述组合物；与所述蛋白质缺乏相关的所述紊乱优选是肌肉量减少和/或肌肉强度降低。
最后，本发明的主题涉及本发明的组合物(包含(i)和(iii)以及任选的(ii)和/或(iii.1))，根据本发明的任一个实施方式，在制备单胃动物(优选猪)的饲料或饲料添加剂的用途。
除非另有规定，“组合物或混合物包含在x至y范围内的量的成分”表示所述成分可以以所述范围中存在的所有量存在于所述组合物或混合物中，即使未明确说明，所述范围的端点也包括在内。
以下公开了本发明的实施方式(FRn)：
FR1.一种用于制备组合物的方法，所述组合物包含至少一种氨基酸、优选至少两种氨基酸，或其可接受的药物或食品级盐，所述方法包括以下步骤：
-对于人类受试者或动物、优选单胃动物，评估和/或量化至少第一参数，所述第一参数选自包括以下参数的组，或由以下参数组成的组：性别、年龄、种族或品种、或基于种族或品种的肌肉纤维的氨基酸组成、参与的体育活动的类型，从事的工作类型、日常饮食，或两个以上所述第一参数的组；和/或
-对于人类受试者或动物、优选单胃动物，评估和/或量化至少第二参数，所述第二参数选自包括以下参数的组或由以下参数组成的组：血浆氮浓度、血肌酐、血肌酸磷酸激酶、强体力活动后的血乳酸或乳酸盐、每日步数、或唾液样本或由基因表征获得的参数，或所述第二参数的组；随后
-基于所述至少第一参数或所述第一参数的组并基于所述至少第二参数或所述第二参数的组，选择至少一种氨基酸，优选至少两种氨基酸；随后
-基于所述至少第一参数或所述第一参数的组并基于所述至少第二参数或所述第二参数的组，选择第一量的所述至少一种氨基酸，优选所述至少两种氨基酸；随后-将在前述步骤中选择并量化的所述至少一种氨基酸、优选所述至少两种氨基酸配制成适合于施用给所述受试者或动物的组合物。
FR2.根据FR1的方法，其中，所述第一和/或第二参数通过对受试者或动物分析肌肉纤维的氨基酸组成和/或分析唾液样品或血液样品或血液试验来评估和量化；优选通过收集唾液样本以收集单个个体的DNA和/或通过执行标准方法来确定参与合成代谢过程的基因和/或与肌纤维的组成相关和/或与特定病理相关的基因的存在来确定。
FR3.根据FR1或FR2的方法，其中，测量所述第一参数和评估所述第二参数的步骤之后还有以下步骤：
-基于所述至少第一参数或所述第一参数的组和/或基于所述至少第二参数或所述第二参数的组，选择至少一种非氨基酸组分，所述组分选自一种或多种有机或无机酸、一种或多种芳香成分、至少一种维生素、矿物盐、抗氧化剂、蔬菜提取物、益生菌菌株及其混合物；随后
-基于所述至少第一参数或所述第一参数的组和/或基于所述至少第二参数或所述第二参数的组，选择第二量的所述至少一种非氨基酸组分；随后
-将所述第二量的所述至少一种非氨基酸组分与所述至少一种氨基酸、优选所述至少两种氨基酸或其盐一起配制在所述组合物中。
FR4.一种组合物，所述组合物通过根据FR1至FR3中任一项的方法获得，所述组合物包含：
(i)混合物，所述混合物包含以下成分，或由以下成分组成：至少一种氨基酸，优选至少两种氨基酸，或其可接受的药物或食品级盐构成，和任选地，
(ii)至少一种可接受的药物或食品级添加剂和/或赋形剂。
FR5.根据FR4的组合物，其中，所述至少一种氨基酸、优选所述至少两种氨基酸或其盐中的至少一种是必需氨基酸，其选自由组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸和缬氨酸组成的组；优选为苯丙氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、色氨酸和亮氨酸，更优选为亮氨酸。
FR6.根据FR4或FR5的组合物，其中，所述组合物还包含：
(iii)包覆基质，其包含以下物质，或由以下物质组成：至少一种饱和或不饱和的碳原子数为C10至C30、优选C14至C24的脂肪酸，和/或至少一种具有碳原子数为C6至C30、优选C14至C24的饱和或不饱和脂肪酸链的甘油三酯，和/或至少一种碳原子数为C16至C36、优选C24至C36的蜡；其中，所述(iii)包覆基质结合和/或微包封所述(i)混合物，并且其中，所述(iii)包覆基质在施用给所述受试者后能够受控释放氨基酸，因此通过限制主餐之间的氨基酸的波动，确保在血液中有更大量且恒定的氨基酸，以及在24小时内具有更恒定的氨基酸血液生物利用度。
FR7.根据FR4至FR6中任一项的组合物，其中，所述(iii)包覆基质包含以下物质，或由以下物质组成：至少一种植物和/或动物来源的氢化脂肪酸，优选植物来源；和/或至少一种植物和/或动物来源的氢化或非氢化甘油三酯，动物来源的甘油三酯优选选自：鸡脂、氢化鸡脂、牛油和猪油；和/或蜡，优选蜂蜡。
FR8.根据实施方式FR4至FR7中任一项的组合物，其中，所述组合物用于预防性和/或治疗性治疗有需要的受试者的蛋白质缺乏和与所述蛋白质缺乏相关的病症、症状和/或紊乱的方法。
FR9.根据实施方式FR4至FR8中任一项所述应用的组合物，其中，所述组合物对于人类或动物、优选单胃动物而言，用于预防性和/或治疗性治疗有需要的受试者的肌肉量减少和/或肌肉强度降低以及与所述肌肉量减少和/或肌肉强度降低相关的病症、症状和/或紊乱的方法。
FR10.根据FR4至FR9中任一项所述应用的组合物，其中，所述组合物用于预防性和/或治疗性治疗肌肉减少症的方法。
FR11.根据实施方式FR4至FR7中任一项的组合物的非治疗性用途，其中，所述用途用于蛋白质缺乏和与所述蛋白质缺乏相关的紊乱的非治疗性治疗，其中，所述非治疗性治疗包括对有需要的受试者施用所述组合物；优选的是，与所述蛋白质缺乏相关的所述紊乱是肌肉量减少和/或肌肉强度降低。
除非另有规定，表述组合物以“包含在x至y范围内”的量包含一种成分表示所述成分可以以所述范围中存在的所有量存在于所述组合物，即使未明确说明，所述范围的端点也包括在内。
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9.LARN:Livelli of Assunzione of Riferimento of Nutrienti and energiaper the popolazione italiana.SICS Editore,2017.
Claims (15)
1.一种组合物，所述组合物包含：
(i)活性成分的混合物，所述混合物包含以下成分，或由以下成分组成：(a)至少一种氨基酸，或其可接受的药物或食品级盐，和/或(b)乳清蛋白；
(ii)控释脂质基质，所述控释脂质基质包埋或结合所述(i)活性成分的混合物，其中，所述控释脂质基质包含以下物质，或由以下物质组成：至少一种饱和或不饱和、游离或酯化的碳原子数为C10至C30的脂肪酸，和/或至少一种具有碳原子数为C6至C30的饱和或不饱和脂肪酸链的甘油三酯，和/或至少一种碳原子数为C16至C36的蜡；并且，任选地，所述组合物包含：
(ii)至少一种可接受的药物或食品级添加剂和/或赋形剂；
其中，所述(iii)脂质基质使所述(i)混合物中包含的活性成分能够实现胃保护和在肠道中的受控释放，从而确保其在2至24小时的时间内恒定的血液生物利用度。
2.如权利要求1所述的组合物，其中，所述(a)至少一种氨基酸选自A组，所述A组包括以下物质，或由以下物质组成：组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、精氨酸、半胱氨酸、色氨酸、谷氨酰胺及其混合物。
3.如权利要求1或2所述的组合物，其中，所述(a)至少一种氨基酸是亮氨酸。
4.如权利要求1或2所述的组合物，其中，所述(a)至少一种氨基酸是亮氨酸、缬氨酸和异亮氨酸的混合物。
5.如权利要求1或2所述的组合物，其中，所述(a)至少一种氨基酸是亮氨酸和选自下组的至少一种或多种氨基酸的混合物，所述组包括以下物质，或由以下物质组成：赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和谷氨酰胺。
6.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中，所述(i)活性成分的混合物还包含(c)选自C组中的至少一种非氨基酸组分，所述C组包括以下物质，或由以下物质组成：至少一种维生素，优选B族维生素；至少一种有机或无机酸；至少一种矿物盐，优选Fe、Se、Mg、Ca、K、Zn或Cu阳离子的有机或无机盐；至少一种抗氧化剂；至少一种益生菌菌株；至少一种益生元；至少一种酶及其混合物。
7.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中，所述(iii)控释脂质基质选自包括以下物质的组、或由以下物质组成的组：棕榈油、向日葵油、玉米油、菜籽油、花生油、大豆油、橄榄油、蜂蜡及其混合物。
8.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中，所述(iii)控释脂质基质还包含(iii.1)至少一种包覆添加剂，所述包覆添加剂选自包括以下物质的组、或由以下物质组成的组：气相二氧化硅、硬脂酸钙、硬脂酸镁、硫酸钙、沉淀二氧化硅、硅酸钙、硅酸铝和疏水二氧化硅。
9.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中，所述组合物是药物组合物、医疗器械用组合物、营养食品组合物、膳食补充剂产品、食品、特殊医疗用途食品、饲料或饲料添加剂。
10.如权利要求1至8中任一项所述的组合物，其中，所述组合物用作药物。
11.如权利要求1至8中任一项所述的组合物，其中，所述组合物用于向有需要的单胃受试者、优选人类受试者或猪供应氨基酸的治疗方法。
12.如权利要求1至8中任一项所述的组合物，其中，所述组合物用于治疗有需要的单胃受试者、优选人类受试者或猪的蛋白质缺乏和与所述蛋白质缺乏相关的病症、症状和/或紊乱的方法。
13.如权利要求1至8中任一项所述的组合物，其中，所述组合物用于预防性和/或治疗性治疗肌肉量减少和/或肌肉强度降低以及与所述肌肉量减少和/或肌肉强度降低相关的病症、症状和/或紊乱的方法。
14.如权利要求13所述的组合物，其中，与所述肌肉量减少和/或肌肉强度降低相关的所述病症、症状和/或紊乱选自肌肉减少症、肌肉萎缩、肌营养不良和肌肉分解代谢。
15.权利要求1至8中任一项所述的组合物在制备用于单胃动物、优选猪的饲料或饲料添加剂中的用途。
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