CN112457996A - 一种木霉菌扩繁生产菌肥的方法 - Google Patents

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宋克超
华怀峰
张建
徐立明
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    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
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Abstract

本发明公开了一种木霉菌扩繁生产菌肥的方法，通过将木霉菌株接种到PDA培养基中培养3‑6天，得到木霉菌种，取重量分数玉米粉10份、麦糠10份、麸皮5份、蔗糖2份、碳酸钙1份以及磷酸亚铁0.1份加入无菌水，共同加入搅拌机中进行充分搅拌混合，制成液体发酵液以及一系列工艺方法得到菌肥，该种木霉菌扩繁生产菌肥的方法，采用廉价的生产原料，操作简单，无需大型设备，工业简单，生产的木霉菌产量大，效率高，容易推广，且该方法可以实现大规模分阶段实施，得到的中间产物悬浮混合液，可作为中间产物保存，使用及其方便，生产的木霉菌可以辅助植物生长，提高农产品的产品。

Description

一种木霉菌扩繁生产菌肥的方法
技术领域
本发明涉及生物菌生产技术领域，尤其涉及一种木霉菌扩繁生产菌肥的方法。
背景技术
木霉菌属真菌门，半知菌亚门，丝孢纲，丝孢目，丛梗孢科，木霉属，广泛存在于不同环境条件下的土壤中。自19世纪中叶，人类对木霉菌已有了初步的认识，但直到上世纪60年代木霉菌的分类地位才得以确定。大多数木霉菌可产生多种对植物病原真菌、细菌及昆虫具有拮抗作用的生物活性物质，比如细胞壁降解酶类和次级代谢产物，并能提高农作物的抗逆性，促进植物生长和提高农产品产量，因此被广泛用于生物防治、生物肥料及土壤改良剂。由于化学农药对环境的负面影响较为严重，所以对环境较为友好的生物农药木霉菌受到了广泛的关注。
为快速高效的得到大量的木霉菌，同时降低生产的经济成本，为此我们提供了一种木霉菌扩繁生产菌肥的方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种木霉菌扩繁生产菌肥的方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
本发明的目的是通过下述技术方案予以实现：一种木霉菌扩繁生产菌肥的方法，包括以下步骤：
步骤1：将木霉菌株接种到PDA培养基中培养3-6天，得到木霉菌种；
步骤2：取重量分数玉米粉10份、麦糠10份、麸皮5份、蔗糖2份、碳酸钙1份以及磷酸亚铁0.1份加入无菌水，共同加入搅拌机中进行充分搅拌混合，制成液体发酵液，调整PH为5.5-6，然后挤出多余的水分，在高压高温环境下，进行灭菌处理30-40min，自然冷却得到培养料；
步骤3：将步骤1中的木霉菌种加入步骤2中的培养料中，然后充分搅拌10-15分钟，使菌种在培养料中充分混合，调节培养温度在26-30摄氏度，培养5-10天，加入清水浸泡冲洗，经过多次洗涤后得到悬浮液；
步骤4：将步骤3中的悬浮液进行稀释，得到菌种稀释液，
步骤5：取1重量份数木屑10份、玉米杆屑10份、麦屑10份共同加入搅拌机中进行搅拌，使其充分均匀混合，在加入生石灰、磷酸二氢钾、硫酸镁以及尿素，进行再次搅拌混合，得到扩繁料；
步骤6：将步骤4中的菌种稀释液按照1:10加入步骤5中的扩繁料中，然后加入无菌水，进行混合使其湿度控制在55-65%之间，温度为25-30摄氏度，发酵8-15天停止，风干后储存即可。
本发明中，所述步骤3中的悬浮液或通过离心机进行辅助处理得到，将洗涤液加入离心机中进行中低速离心处理，取上层液即可。
本发明中，所述步骤4中悬浮液通过加入无菌水进行稀释，稀释后的浓度为1X107cfu/ml。
本发明中，所述步骤5中加入的生石灰、磷酸二氢钾、硫酸镁以及尿素的质量份数分别为1份、0.5份、0.2份以及0.8份。
作为优选方案,所述步骤5中加入的生石灰、磷酸二氢钾、硫酸镁以及尿素的质量份数分别为1.2份、0.3份、0.1份以及0.9份。
作为优选方案,所述步骤5中加入的生石灰、磷酸二氢钾、硫酸镁以及尿素的质量份数分别为0.8份、0.7份、0.3份以及0.7份。
与现有技术相比，本发明的有益效果是该发明一种木霉菌扩繁生产菌肥的方法，采用廉价的生产原料，操作简单，无需大型设备，工业简单，生产的木霉菌产量大，效率高，容易推广，且该方法可以实现大规模分阶段实施，得到的中间产物悬浮混合液，可作为中间产物保存，使用及其方便，生产的木霉菌可以辅助植物生长，提高农产品的产品。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例，基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明公开了一种木霉菌扩繁生产菌肥的方法，包括以下步骤：
步骤1：将木霉菌株接种到PDA培养基中培养3-6天，得到木霉菌种；
步骤2：取重量分数玉米粉10份、麦糠10份、麸皮5份、蔗糖2份、碳酸钙1份以及磷酸亚铁0.1份加入无菌水，共同加入搅拌机中进行充分搅拌混合，制成液体发酵液，调整PH为5.5-6，然后挤出多余的水分，在高压高温环境下，进行灭菌处理30-40min，自然冷却得到培养料；
步骤3：将步骤1中的木霉菌种加入步骤2中的培养料中，然后充分搅拌10-15分钟，使菌种在培养料中充分混合，调节培养温度在26-30摄氏度，培养5-10天，加入清水浸泡冲洗，经过多次洗涤后得到悬浮液；
步骤4：将步骤3中的悬浮液进行稀释，得到菌种稀释液，
步骤5：取1重量份数木屑10份、玉米杆屑10份、麦屑10份共同加入搅拌机中进行搅拌，使其充分均匀混合，在加入生石灰、磷酸二氢钾、硫酸镁以及尿素，进行再次搅拌混合，得到扩繁料；
步骤6：将步骤4中的菌种稀释液按照1:10加入步骤5中的扩繁料中，然后加入无菌水，进行混合使其湿度控制在55-65%之间，温度为25-30摄氏度，发酵8-15天停止，风干后储存即可。
本发明中，所述步骤3中的悬浮液或通过离心机进行辅助处理得到，将洗涤液加入离心机中进行中低速离心处理，取上层液即可。所述步骤4中悬浮液通过加入无菌水进行稀释，稀释后的浓度为1X107cfu/ml。所述步骤5中加入的生石灰、磷酸二氢钾、硫酸镁以及尿素的质量份数分别为1份、0.5份、0.2份以及0.8份。
该种木霉菌扩繁生产菌肥的方法，采用廉价的生产原料，操作简单，无需大型设备，工业简单，生产的木霉菌产量大，效率高，容易推广，且该方法可以实现大规模分阶段实施，得到的中间产物悬浮混合液，可作为中间产物保存，使用及其方便，生产的木霉菌可以辅助植物生长，提高农产品的产品。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (6)

1.一种木霉菌扩繁生产菌肥的方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤1：将木霉菌株接种到PDA培养基中培养3-6天，得到木霉菌种；
步骤2：取重量分数玉米粉10份、麦糠10份、麸皮5份、蔗糖2份、碳酸钙1份以及磷酸亚铁0.1份加入无菌水，共同加入搅拌机中进行充分搅拌混合，制成液体发酵液，调整PH为5.5-6，然后挤出多余的水分，在高压高温环境下，进行灭菌处理30-40min，自然冷却得到培养料；
步骤3：将步骤1中的木霉菌种加入步骤2中的培养料中，然后充分搅拌10-15分钟，使菌种在培养料中充分混合，调节培养温度在26-30摄氏度，培养5-10天，加入清水浸泡冲洗，经过多次洗涤后得到悬浮液；
步骤4：将步骤3中的悬浮液进行稀释，得到菌种稀释液，
步骤5：取1重量份数木屑10份、玉米杆屑10份、麦屑10份共同加入搅拌机中进行搅拌，使其充分均匀混合，在加入生石灰、磷酸二氢钾、硫酸镁以及尿素，进行再次搅拌混合，得到扩繁料；
步骤6：将步骤4中的菌种稀释液按照1:10加入步骤5中的扩繁料中，然后加入无菌水，进行混合使其湿度控制在55-65%之间，温度为25-30摄氏度，发酵8-15天停止，风干后储存即可。
2.根据权利要求1所述的 一种木霉菌扩繁生产菌肥的方法，其特征在于：所述步骤3中的悬浮液或通过离心机进行辅助处理得到，将洗涤液加入离心机中进行中低速离心处理，取上层液即可。
3.根据权利要求1所述的 一种木霉菌扩繁生产菌肥的方法，其特征在于：所述步骤4中悬浮液通过加入无菌水进行稀释，稀释后的浓度为1X107cfu/ml。
4.根据权利要求1所述的 一种木霉菌扩繁生产菌肥的方法，其特征在于：所述步骤5中加入的生石灰、磷酸二氢钾、硫酸镁以及尿素的质量份数分别为1份、0.5份、0.2份以及0.8份。
5.根据权利要求1所述的 一种木霉菌扩繁生产菌肥的方法，其特征在于：所述步骤5中加入的生石灰、磷酸二氢钾、硫酸镁以及尿素的质量份数分别为1.2份、0.3份、0.1份以及0.9份。
6.根据权利要求1所述的 一种木霉菌扩繁生产菌肥的方法，其特征在于：所述步骤5中加入的生石灰、磷酸二氢钾、硫酸镁以及尿素的质量份数分别为0.8份、0.7份、0.3份以及0.7份。
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