CN112573959A - 高效安全的生物有机肥 - Google Patents

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CN112573959A CN202011517797.4A CN202011517797A CN112573959A CN 112573959 A CN112573959 A CN 112573959A CN 202011517797 A CN202011517797 A CN 202011517797A CN 112573959 A CN112573959 A CN 112573959A
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郭朝霞
宋艳芬
孙玲
邓文芬
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Abstract

本发明涉及微生物饲料添加剂技术领域,具体涉及高效安全的生物有机肥,由有机物料经发酵后添加多粘芽孢杆菌粉剂获得,多粘芽孢杆菌粉剂有效活菌数≥1.2×108个/g,肥料中全氮质量比含量为4~5%、总氮磷钾养分质量比为6~10%、有机质质量比含量为62~74%。与现有技术相比,本发明的高效安全的生物有机肥生产工艺简单,通过将有机质、木质纤维素废弃物、干酒糟和复合堆肥菌剂进行预发酵,利用干酒糟作为堆肥辅料,为菌剂微生物提供了十余种复合氨基酸以及促生因子等营养物质,极大缩短堆肥生产周期,多粘芽孢杆菌有效活菌数远远高于国内同类产品先进水平,有效解决了多粘类芽孢杆菌发酵液粘稠,不利于高密度发酵的缺陷,生产稳定,生产成本低。

Description

高效安全的生物有机肥
技术领域
本发明涉及微生物饲料添加剂技术领域,具体涉及高效安全的生物有机肥。
背景技术
传统农药和化肥的过量使用导致很多植物病虫产生抗药性,造成生态环境的恶性循环,因此高效、安全的微生物农药和生物化肥越来越受到人们的关注。而多粘类芽孢杆菌能分泌大量的活性物质,对许多细菌和真菌有抑制活性,能提高植物的抗病能力,促进植物生长,提高产量,并能产生多肽类抗菌物质,对植物病原真菌有较好的拮抗活性。它是一种较好的生防细菌。多粘类芽孢杆菌的活性包括固氮,溶解土壤中的磷,产生抗生素、激素、细胞分裂素、几丁质酶和水解酶,诱导植物的有关基因的表达,改善土壤结构。另外,多粘芽孢杆菌还具有多种酶活、抗氧化和抗肿瘤等生物活性。因此,随着多粘类芽孢杆菌研究的深入,它在工农业领域、医药领域、生物学理论研究方面将有更广阔的应用前景。
发明内容
为了克服上述技术缺陷的不足,本发明提供了高效安全的生物有机肥,解决现有堆肥发酵过程中,菌剂微生物利用率低,促生因子不足,营养利用不充分,生产周期长,有机肥产品营养组成不全面等问题。
高效安全的生物有机肥,关键在于:由有机物料经发酵后添加多粘芽孢杆菌粉剂获得,多粘芽孢杆菌粉剂有效活菌数≥1.2×108个/g,肥料中全氮质量比含量为4~5%、总氮磷钾养分质量比为6~10%、有机质质量比含量为62~74%。
优选的,所述有机物料是动物粪便、植物秸秆、蘑菇渣和糠醛渣中的一种或任意比例的两种以上。
优选的,所述有机物料的发酵过程为:将有机物料、木质纤维素废弃物和干酒糟混合均匀形成堆体,调节堆体碳氮比至25-30,调节含水率至50%~60%,获得调节含水率后堆体;向调节含水率后堆体中加入复合堆肥菌剂并混合,复合堆肥菌剂为调节含水率后堆体总质量的0.1%~0.5%,堆肥发酵15~20天后而成。
优选的,所述复合堆肥菌剂为质量比为1:(1.5-2):(0.8-1.2)的枯草芽孢杆菌、酿酒酵母和黑曲霉发酵液;枯草芽孢杆菌有效活菌数≥1.2×1010CFU/mL,酿酒酵母有效活菌数≥3.0×109CFU/mL,黑曲霉有效活菌数≥2.0×109CFU/mL,复合堆肥菌剂中有效活菌数≥5.5×109CFU/mL。
优选的,所述木质纤维素废弃物包括玉米秸秆、高粱秸秆、稻草秸秆、麦麸、玉米芯以及米糠中的一种或几种,混合前粉碎至1-2cm。
优选的,所述堆肥发酵具体为当堆体内部温度达到55℃前,每天翻堆一次;当堆体内部温度升至75℃时,每天翻堆一次;当堆体内部温度降至50℃后,三天翻堆一次;当堆体内部温度降至35℃后,停止翻堆。
优选的,所述多粘芽孢杆菌液依次经过PDA培养基的斜面培养、一级种子培养和发酵培养的深层液体发酵;其中,斜面培养基为含有牛肉膏0.4-0.8%、蛋白胨1-3%、氯化钠0.3-0.6%,pH为7.2-7.5的液体培养基,一级种子培养基为葡萄糖1-3%、玉米淀粉0.3-1%、鱼蛋白胨0.5-0.8%、酵母膏0.4-0.6%、豆粕粉0.3-0.7%、碳酸钙0.1-0.5%、pH为7.2-7.5的液体培养基,发酵培养基为葡萄糖1-3%、玉米淀粉0.2-0.6%、鱼蛋白胨0.4-0.8%、酵母膏0.05-0.2%、牛肉膏0.01-0.05%、氯化钙0.01-0.04%、七水硫酸镁0.02-0.06%、硫酸锰0.01-0.02%、硫酸亚镁0.01-0.04%,pH为7.0-7.5的液体培养基。
优选的,所述斜面培养条件为:培养温度为30-31℃,培养时间为96-120h。
优选的,所述一级种子培养条件为:每吨一级种子培养基接种2-5个斜面种子,培养温度为32-33℃,培养时间为10-14h。
优选的,所述发酵培养条件为:接种量为2-5%,培养温度为30-31℃,培养时间为44-56h。
有益效果:与现有技术相比,本发明的高效安全的生物有机肥生产工艺简单,通过将有机质、木质纤维素废弃物、干酒糟和复合堆肥菌剂进行预发酵,利用碱性蛋白酶处理干酒糟,以释放的复合氨基酸等营养元素作为培养基组分,增强复合堆肥菌剂微生物的代谢活性,利用干酒糟作为堆肥辅料,为堆肥过程中的菌剂微生物提供了包括谷氨酸、亮氨酸、缬氨酸及色氨酸在内的十余种复合氨基酸以及促生因子等营养物质,有效减少了营养环境差异,极大缩短堆肥生产周期,同时提高有机肥内钙磷元素、维生素以及氨基酸氮素含量,使肥料中营养组成更全面,多粘芽孢杆菌的有效活菌数大于1.2×108个/g,有机质质量分数(以烘干基计)高达74%,总养分(氮+五氧化二磷+氧化钾)质量分数高达10%,总砷、汞、铅、镉与铬无检出,pH5.5~8.5,已达到有机肥料相关国家标准NY525-2012与NY 884-2012;易于保存和施用,用于作物种植,能提供作物生长所需的养分,同时还具有良好的土壤修复能力,能够有效的改善长期施用单一的化学肥料或有机肥料造成的土地营养失衡,从而创造良好的土壤微生态环境来促进作物的生长,值得推广。
具体实施方法
为使本领域技术人员更好的理解本发明的技术方案,下面结合具体实施方式对本发明作详细说明。下述实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。多粘芽孢杆菌的菌种保藏号为CGMCC NO.13548,购于中国微生物菌种保藏管理委员会;葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏、酵母粉、碱性蛋白酶等生化试剂购自生工生物工程(上海)股份有限公司。
实施例1
将鸡粪、粉碎玉米秸秆、粉碎高粱秸秆、粉碎稻草秸秆和干酒糟混合,调节碳氮比为25,干酒糟用量为鸡粪质量的8%;搅拌均匀,控制含水率50%后堆体,加入复合堆肥菌剂,复合堆肥菌剂为调节含水率后堆体总质量的0.1%,采用静态腐熟发酵,当堆体内部温度达到55℃前,每天翻堆一次;当堆体内部温度升至75℃时,每天翻堆一次;当堆体内部温度降至50℃后,三天翻堆一次;当堆体内部温度降至35℃后,停止翻堆,20天即得即得成熟有机肥,再加入多粘芽孢杆菌粉剂,最后加入粘合剂,共同造粒,检验合格后打包入库即得生物有机肥;所述多粘芽孢杆菌依次经过PDA培养基的斜面培养、一级种子培养和发酵培养的深层液体发酵,获得的发酵液进行浓缩后,真空低温干燥的条件下,通过喷雾方式进行干燥处理,制得多粘芽孢杆菌粉剂;其中,斜面培养基为含有牛肉膏0.4%、蛋白胨1%、氯化钠0.3%,pH为7.2的液体培养基,斜面培养条件为:培养温度为30℃,培养时间为96h;一级种子培养基为葡萄糖1%、玉米淀粉0.3%、鱼蛋白胨0.5%、酵母膏0.4%、豆粕粉0.3%、碳酸钙0.1%、pH为7.2的液体培养基,一级种子培养条件为:每吨一级种子培养基接种2个斜面种子,培养温度为32℃,培养时间为10h;发酵培养基为葡萄糖1%、玉米淀粉0.2%、鱼蛋白胨0.4%、酵母膏0.05%、牛肉膏0.01%、氯化钙0.01%、七水硫酸镁0.02%、硫酸锰0.01%、硫酸亚镁0.01%,pH为7.0的液体培养基,发酵培养条件为:接种量为2%,培养温度为30℃,培养时间为44h,有效活菌数为1.31×1010个/g。
检测结果:生物有机肥有机质质量分数为62%,全氮质量比含量为4.1%、总氮磷钾养分质量比为6.5%,总砷、汞、铅、镉与铬无检出。
实施例2
将鸡粪、粉碎玉米秸秆、粉碎高粱秸秆、粉碎稻草秸秆和干酒糟混合,调节碳氮比为30,干酒糟用量为鸡粪质量的12%;搅拌均匀,控制含水率60%后堆体,加入复合堆肥菌剂,复合堆肥菌剂为调节含水率后堆体总质量的0.5%,采用静态腐熟发酵,当堆体内部温度达到55℃前,每天翻堆一次;当堆体内部温度升至75℃时,每天翻堆一次;当堆体内部温度降至50℃后,三天翻堆一次;当堆体内部温度降至35℃后,停止翻堆,15天即得即得成熟有机肥,再加入多粘芽孢杆菌粉剂,最后加入粘合剂,共同造粒,检验合格后打包入库即得生物有机肥;所述多粘芽孢杆菌依次经过PDA培养基的斜面培养、一级种子培养和发酵培养的深层液体发酵,获得的发酵液进行浓缩后,真空低温干燥的条件下,通过喷雾方式进行干燥处理,制得多粘芽孢杆菌粉剂;其中,斜面培养基为含有牛肉膏0.8%、蛋白胨3%、氯化钠0.6%,pH为7.5的液体培养基,斜面培养条件为:培养温度为31℃,培养时间为120h;一级种子培养基为葡萄糖3%、玉米淀粉1%、鱼蛋白胨0.5-0.8%、酵母膏0.6%、豆粕粉0.7%、碳酸钙0.5%、pH为7.5的液体培养基,一级种子培养条件为:每吨一级种子培养基接种5个斜面种子,培养温度为33℃,培养时间为14h;发酵培养基为葡萄糖3%、玉米淀粉0.6%、鱼蛋白胨0.8%、酵母膏0.2%、牛肉膏0.05%、氯化钙0.04%、七水硫酸镁0.06%、硫酸锰0.02%、硫酸亚镁0.04%,pH为7.5的液体培养基,发酵培养条件为:接种量为5%,培养温度为31℃,培养时间为56h,有效活菌数为1.2×1010个/g。
检测结果:生物有机肥的有机质质量分数为68%,全氮质量比含量为4.8%、总氮磷钾养分质量比为8.8%,总砷、汞、铅、镉与铬无检出。
实施例3
将鸡粪、粉碎玉米秸秆、粉碎高粱秸秆、粉碎稻草秸秆和干酒糟混合,调节碳氮比为28,干酒糟用量为鸡粪质量的10%;加入复合堆肥菌剂,复合堆肥菌剂为调节含水率后堆体总质量的0.35%,搅拌均匀,控制含水率54%后堆体,采用静态腐熟发酵,当堆体内部温度达到55℃前,每天翻堆一次;当堆体内部温度升至75℃时,每天翻堆一次;当堆体内部温度降至50℃后,三天翻堆一次;当堆体内部温度降至35℃后,停止翻堆,18天即得即得成熟有机肥,再加入多粘芽孢杆菌粉剂,最后加入粘合剂,共同造粒,检验合格后打包入库即得生物有机肥;所述多粘芽孢杆菌依次经过PDA培养基的斜面培养、一级种子培养和发酵培养的深层液体发酵,获得的发酵液进行浓缩后,真空低温干燥的条件下,通过喷雾方式进行干燥处理,制得多粘芽孢杆菌粉剂;其中,斜面培养基为含有牛肉膏0.6%、蛋白胨2.1%、氯化钠0.5%,pH为7.3的液体培养基,斜面培养条件为:培养温度为30℃,培养时间为105h;一级种子培养基为葡萄糖2%、玉米淀粉0.55%、鱼蛋白胨0.7%、酵母膏0.45%、豆粕粉0.62%、碳酸钙0.4%、pH为7.4的液体培养基,一级种子培养条件为:每吨一级种子培养基接种3个斜面种子,培养温度为33℃,培养时间为12h;发酵培养基为葡萄糖2.5%、玉米淀粉0.5%、鱼蛋白胨0.5%、酵母膏0.18%、牛肉膏0.04%、氯化钙0.03%、七水硫酸镁0.04%、硫酸锰0.01%、硫酸亚镁0.03%,pH为7.2的液体培养基,发酵培养条件为:接种量为3%,培养温度为31℃,培养时间为50h,有效活菌数为1.42×1010个/g。
检测结果:生物有机肥的有机质质量分数为74%,全氮质量比含量为5%、总氮磷钾养分质量比为8%,总砷、汞、铅、镉与铬无检出。
对比例1
将鸡粪、粉碎玉米秸秆、粉碎高粱秸秆、粉碎稻草秸秆混合,调节碳氮比为30,搅拌均匀,控制含水率60%后堆体,加入复合堆肥菌剂,复合堆肥菌剂为调节含水率后堆体总质量的0.5%,采用静态腐熟发酵,当堆体内部温度达到55℃前,每天翻堆一次;当堆体内部温度升至75℃时,每天翻堆一次;当堆体内部温度降至50℃后,三天翻堆一次;当堆体内部温度降至35℃后,停止翻堆,30天即得即得成熟有机肥,再加入多粘芽孢杆菌粉剂,最后加入粘合剂,共同造粒,检验合格后打包入库即得生物有机肥;所述多粘芽孢杆菌依次经过PDA培养基的斜面培养、一级种子培养和发酵培养的深层液体发酵,获得的发酵液进行浓缩后,真空低温干燥的条件下,通过喷雾方式进行干燥处理,制得多粘芽孢杆菌粉剂;其中,斜面培养基为含有牛肉膏0.8%、蛋白胨3%、氯化钠0.6%,pH为7.5的液体培养基,斜面培养条件为:培养温度为31℃,培养时间为120h;一级种子培养基为葡萄糖3%、玉米淀粉1%、鱼蛋白胨0.5-0.8%、酵母膏0.6%、豆粕粉0.7%、碳酸钙0.5%、pH为7.5的液体培养基,一级种子培养条件为:每吨一级种子培养基接种5个斜面种子,培养温度为33℃,培养时间为14h;发酵培养基为葡萄糖3%、玉米淀粉0.6%、鱼蛋白胨0.8%、酵母膏0.2%、牛肉膏0.05%、氯化钙0.04%、七水硫酸镁0.06%、硫酸锰0.02%、硫酸亚镁0.04%,pH为7.5的液体培养基,发酵培养条件为:接种量为5%,培养温度为31℃,培养时间为56h。
检测结果:生物有机肥的有机质质量分数为66%,全氮质量比含量为4.3%、总氮磷钾养分质量比为7.8%,总砷、汞、铅、镉与铬无检出。但与实施例2对比,在同样达到有机肥料相关国家标准条件下,本发明堆肥时间明显缩短,提高堆肥效率。
对比例2
将鸡粪、粉碎玉米秸秆、粉碎高粱秸秆、粉碎稻草秸秆和干酒糟混合,调节碳氮比为28,干酒糟用量为鸡粪质量的10%;加入复合堆肥菌剂,复合堆肥菌剂为调节含水率后堆体总质量的0.35%,搅拌均匀,控制含水率54%后堆体,采用静态腐熟发酵,当堆体内部温度达到55℃前,每天翻堆一次;当堆体内部温度升至75℃时,每天翻堆一次;当堆体内部温度降至50℃后,三天翻堆一次;当堆体内部温度降至35℃后,停止翻堆,18天即得即得成熟有机肥,再加入多粘芽孢杆菌液,最后加入粘合剂,共同造粒,检验合格后打包入库即得生物有机肥;
所述多粘芽孢杆菌液依次经过活化培养和发酵培养;其中,活化培养基为胰蛋白胨10g/L,酵母粉5g/L,NaCl 10g/L,琼脂20g/L,其余为自来水,自然pH,121℃灭菌15分钟后,倒平板;发酵培养基为葡萄糖60g/L,蛋白胨15g/L,牛肉膏30g/L,酵母粉15g/L,碳酸钙15g/L,其余为自来水,调节初始pH7.2~7.6,121℃灭菌15分钟;活化培养条件为:将多粘类芽孢杆菌菌种涂布于固体活化培养基平板上,33℃恒温培养20小时,获得活化的多粘类芽孢杆菌菌落;发酵培养条件为:挑取活化后的多粘类芽孢杆菌单菌落,接种于液体发酵培养基中,200rpm,33℃恒温培养18小时,有效活菌数为2.8×108CFU/mL。
检测结果:生物有机肥的有机质质量分数为68%,全氮质量比含量为4.1%、总氮磷钾养分质量比为6.8%,总砷、汞、铅、镉与铬无检出。但与实施例2对比,在同样达到有机肥料相关国家标准条件下,本发明的多粘芽孢杆菌有效活菌数远远高于国内同类产品先进水平,并且有效解决了多粘类芽孢杆菌发酵液粘稠,不利于高密度发酵的缺陷,生产水平稳定,降低了生产成本。
最后需要说明,上述描述仅为本发明的优选实施例,本领域的技术人员在本发明的启示下,在不违背本发明宗旨及权利要求的前提下,可以做出多种类似的表示,这样的变换均落入本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.高效安全的生物有机肥,其特征在于:由有机物料经发酵后添加多粘芽孢杆菌粉剂获得,多粘芽孢杆菌粉剂有效活菌数≥1.2×1010个/g,肥料中全氮质量比含量为4~5%、总氮磷钾养分质量比为6~10%、有机质质量比含量为62~74%。
2.根据权利要求1所述的高效安全的生物有机肥,其特征在于:所述有机物料是动物粪便、植物秸秆、蘑菇渣和糠醛渣中的一种或任意比例的两种以上。
3.根据权利要求1所述的高效安全的生物有机肥,其特征在于所述有机物料的发酵过程为:将有机物料、木质纤维素废弃物和干酒糟混合均匀形成堆体,调节堆体碳氮比至25-30,调节含水率至50%~60%,获得调节含水率后堆体;向调节含水率后堆体中加入复合堆肥菌剂并混合,复合堆肥菌剂为调节含水率后堆体总质量的0.1%~0.5%,堆肥发酵15~20天后而成。
4.根据权利要求3所述的高效安全的生物有机肥,其特征在于:所述复合堆肥菌剂为质量比为1:(1.5-2):(0.8-1.2)的枯草芽孢杆菌、酿酒酵母和黑曲霉发酵液;枯草芽孢杆菌有效活菌数≥1.2×1010CFU/mL,酿酒酵母有效活菌数≥3.0×109CFU/mL,黑曲霉有效活菌数≥2.0×109CFU/mL,复合堆肥菌剂中有效活菌数≥5.5×109CFU/mL。
5.根据权利要求3所述的高效安全的生物有机肥,其特征在于:所述木质纤维素废弃物包括玉米秸秆、高粱秸秆、稻草秸秆、麦麸、玉米芯以及米糠中的一种或几种,混合前粉碎至1-2cm。
6.根据权利要求3所述的高效安全的生物有机肥,其特征在于:所述堆肥发酵具体为当堆体内部温度达到55℃前,每天翻堆一次;当堆体内部温度升至75℃时,每天翻堆一次;当堆体内部温度降至50℃后,三天翻堆一次;当堆体内部温度降至35℃后,停止翻堆。
7.根据权利要求1所述的高效安全的生物有机肥,其特征在于所述多粘芽孢杆菌液依次经过PDA培养基的斜面培养、一级种子培养和发酵培养的深层液体发酵;其中,斜面培养基为含有牛肉膏0.4-0.8%、蛋白胨1-3%、氯化钠0.3-0.6%,pH为7.2-7.5的液体培养基,一级种子培养基为葡萄糖1-3%、玉米淀粉0.3-1%、鱼蛋白胨0.5-0.8%、酵母膏0.4-0.6%、豆粕粉0.3-0.7%、碳酸钙0.1-0.5%、pH为7.2-7.5的液体培养基,发酵培养基为葡萄糖1-3%、玉米淀粉0.2-0.6%、鱼蛋白胨0.4-0.8%、酵母膏0.05-0.2%、牛肉膏0.01-0.05%、氯化钙0.01-0.04%、七水硫酸镁0.02-0.06%、硫酸锰0.01-0.02%、硫酸亚镁0.01-0.04%,pH为7.0-7.5的液体培养基。
8.根据权利要求7所述的高效安全的生物有机肥,其特征在于所述斜面培养条件为:培养温度为30-31℃,培养时间为96-120h。
9.根据权利要求7所述的高效安全的生物有机肥,其特征在于所述一级种子培养条件为:每吨一级种子培养基接种2-5个斜面种子,培养温度为32-33℃,培养时间为10-14h。
10.根据权利要求7所述的高效安全的生物有机肥,其特征在于;所述发酵培养条件为:接种量为2-5%,培养温度为30-31℃,培养时间为44-56h。
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