CN112442094B - 利用液态热响聚合物eo20po80分离纯化泰乐菌素 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及利用热响应型聚合物环氧乙烷‑环氧丙烷无规共聚物水溶液经温度诱导形成两水相分离纯化泰乐菌素。本发明通过将EO20PO80与泰乐菌素发酵液按照体积比1:5混合均匀，调节pH至9.0，并通过温度诱导形成两水相体系，使发酵液中的泰乐菌素转移并富集于下相EO20PO80中；通过将上相去除，并向其中加入与下相等体积的水，调节pH至4.5，通过温度诱导使泰乐菌素由下相EO20PO80转移并富集于上相水溶液中，利用正向萃取与反向萃取实现泰乐菌素的分离纯化，通过温度调节，热响应型聚合物的回收率达99.53％。

Description

利用液态热响聚合物EO20PO80分离纯化泰乐菌素
技术领域
本发明涉及两水相萃取技术领域，更具体地，涉及可再生型两水相萃取技术领域，特别是指利用单一温敏聚合物构建可回收型两水相体系在泰乐菌素分离纯化过程中的工艺设计与优化。
背景技术
可再生两水相体系是利用响应型聚合物构建两水相体系，通过将响应型聚合物的高效回收，实现两水相体系的重复再利用。
环氧乙烷(EO)-环氧丙烷(PO)无规共聚物(EOPO)是一种热响应型聚合物，可根据环氧乙烷与环氧丙烷的比例，调节其亲疏水性合成不同浊点的热响应型聚合物，其中常用包括EO20PO80、EO30PO70、EO50PO50，并可根据分离目标物质的性质选择合适浊点的 EOPO。EOPO水溶液通过温度诱导可形成两水相体系，当温度升高至其浊点上15℃，可形成上、下界面清晰的两相，而当温度低于其浊点时，该水溶液为均一溶液，无法形成两相。两水相体系可通过对温敏型聚合物的回收实现该体系的回收再利用。
可再生两水相体系其含水量高，聚合物可被高效回收，与传统的有机溶剂萃取相比，该萃取条件温和，有效避免产品活性的损失。可再生型两水相体系具有绿色环保、操作安全且不需要进行防火防爆的特点。利用该双水相体系具有分配系数高，易实现绿色环保分离纯化泰乐菌素。
可再生型两水相萃取技术在产品方面具有独特优势与较好的应用前景，但形成可再生型两水相体系的响应型聚合物合成方法较为复杂，价格昂贵且不利于工业放大，两种响应型聚合物成相面临相分离时间过长，且工艺不够成熟目前只停留在小试阶段，这极大限制了可再生型两水相体系的发展。
因此，利用单一热响应型聚合物构建可再生两水相体系可快速成相，目标物质在该体系中的分配系数高且该热响应型聚合物可被高效回收，利用绿色环保的方法分离纯化抗生素成为本领域亟待解决的问题。
发明内容
本发明主要针对上面的问题，提供了一种热响应型可再生两水相体系分离纯化泰乐菌素的方法，该两水相体系为热响应型，该聚合物为热响应型液态聚合物，相较于固态聚合物，该液态聚合物通过改变溶液温度可被高效回收，且易于分相、成相时间短，并可显著降低抗生素分离纯化成本，易于实现绿色环保分离抗生素的目标且该技术易于工业放大。
为了实现上述的目的，本发明提供了一种利用液态热响聚合物EO20PO80分离纯化泰乐菌素的方法，其特点是，所述的方法包括：
正向萃取步骤：将EO20PO80与泰乐菌素发酵液按照1:5的体积比混合均匀，并调节pH 至9.0，静置于55℃水浴锅，直至分成上下界面清晰的两相，取出离心，发酵液中泰乐菌素经过正向萃取分配并富集于下相中，去除上相萃余液；
反向萃取步骤：加入与下相萃余液相等体积的水，混合均匀，并调节pH至4.5，静置于45℃水浴锅，直至形成上下界面清晰的两相，经过反向萃取，泰乐菌素富集于上相水溶液中。
较佳地，反向萃取后的下相在50℃的条件下加热30分钟，除去上层水相，回收热响应型聚合物EO20PO80。
本发明中所用的热响应型聚合物EO20PO80为市售品。
本发明的有益效果具体为：本发明设计了一种热响应型可再生EO20PO80/水两水相体系分离纯化泰乐菌素的工艺过程。此两水相体系为热响应型，热响应型聚合物EO20PO80浊点为27℃，分子量为3KDa，诱导温度高于其浊点15℃可形成两水相，EO20PO80的回收率达99％以上；本发明提供了泰乐菌素的正向萃取工艺，EO20PO80与泰乐菌素的发酵液可控制在30分钟之内形成两相；泰乐菌素反向萃取工艺，EO20PO80与水可在30分钟之内形成两相。因此，通过控制体系温度形成两水相体系并可通过调节pH实现从泰乐菌素发酵液中快速分离泰乐菌素，大大降低了从发酵液中分离纯化泰乐菌素的成本，且成相时间短，操作便捷，易于工艺化应用。
具体实施方式
为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明优选实施方案进行描述，但是应当理解，这些描述只是为了进一步说明本发明的特征和优点，而不是对发明权利要求的限制。
实施例1热响应型可再生EO20PO80/水两水相体系正向萃取泰乐菌素的方法。
将泰乐菌素发酵液经过预处理，过滤离心后备用，首先在10mL离心管中加入1mLEO20PO80，再在其中加入5mL泰乐菌素发酵液并振荡混合均匀，调节溶液pH至9.0，并将其静置于55℃水浴锅中静置30分钟即可成相，取出后，用离心机以6000rpm离心3min。并用移液枪分别吸取上、下相100μL，并将其用超纯水稀释10倍至1mL，并按照公知的泰乐菌素液相检测方法分别测定上下相中泰乐菌素的浓度。泰乐菌素在热响应型可再生 EO20PO80/水两水相体系中正向萃取的分配系数为0.063。
实施案例2热响应型可再生EO20PO80/水两水相体系反向萃取泰乐菌素的方法。
将实施案例1离心管中的上相萃余液去除，并加入与EO20PO80等体积的水，将其振荡混合均匀后，调节pH至4.5，并将其静置于45℃水浴锅中静置30分钟可形成两相，取出后，用离心机以6000rpm离心3min。并用移液枪分别吸取上、下相100μL，并将其用超纯水稀释10倍至1mL，并按照公知的泰乐菌素液相检测方法分别测定上下相中泰乐菌素的浓度。泰乐菌素在热响应型可再生EO20PO80/水两水相中的分配系数为上下相的浓度之比，在该条件下分相萃取中分配系数为7.925。
实施例3热响应型聚合物EO20PO80的回收试验。
将实施案例2中反萃得到的下相置于50℃水浴锅中，静置30分钟除去上层水溶液，分离纯化后的热响应型聚合物EO20PO80的回收率为99.53％。
综上所述，本发明的热响应型可再生EO20PO80/水两水相体系具有成相时间短、聚合物可被高效回收、通过简捷的方法可从泰乐菌素发酵液中分离出泰乐菌素，保护环境等特点，具备良好的分离效果。此两水相体系可大大降低抗生素从发酵液中分离出目标抗生素的成本，适用于大规模的工业应用。
在此说明书中，本发明已参照其特定的实施例作了描述。但是，很显然仍可以做出各种修改和变换而不背离本发明的精神和范围。因此，说明书应被认为是说明性的而非限制性的。

Claims (2)

1.一种利用液态热响聚合物EO20PO80分离纯化泰乐菌素的方法，其特征在于，所述的方法包括：
正向萃取步骤：将EO20PO80与泰乐菌素发酵液按照1:5的体积比混合均匀，并调节pH至9.0，静置于55℃水浴锅，直至分成上下界面清晰的两相，取出离心，去除上相萃余液；
反向萃取步骤：加入与下相萃余液相等体积的水，混合均匀，并调节pH至4.5，静置于45℃水浴锅，直至形成上下界面清晰的两相，经过反向萃取，泰乐菌素富集于上相水溶液中。
2.根据权利要求1所述的利用液态热响聚合物EO20PO80分离纯化泰乐菌素的方法，其特征在于，反向萃取后的下相在50℃的条件下加热30分钟，除去上层水相，回收热响应型聚合物EO20PO80。
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Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1195028A (zh) * 1998-04-08 1998-10-07 浙江大学 双水相萃取法提取红霉素的方法
US5985354A (en) * 1995-06-07 1999-11-16 Brown University Research Foundation Preparation of multiwall polymeric microcapsules from hydrophilic polymers
CN101906185A (zh) * 2010-07-13 2010-12-08 华东理工大学 两种温度敏感可逆溶解成相聚合物、其制备方法及形成的再生型两水相体系
US8906972B1 (en) * 2013-12-27 2014-12-09 King Fahd University Of Petroleum And Minerals Aqueous two phase (ATPSs) of pH-responsive poly(phosphonate-alt-sulfur dioxide) with PEG
PT107379A (pt) * 2013-12-23 2015-10-13 Faculdade De Ciências E Tecnologia Da Universidade Nova De Lisboa Extração líquido-líquido magnética para a purificação e separação de substâncias

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8268915B2 (en) * 2007-06-19 2012-09-18 Ge Healthcare Bio-Sciences Ab Polymer two phase system and use thereof

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5985354A (en) * 1995-06-07 1999-11-16 Brown University Research Foundation Preparation of multiwall polymeric microcapsules from hydrophilic polymers
CN1195028A (zh) * 1998-04-08 1998-10-07 浙江大学 双水相萃取法提取红霉素的方法
CN101906185A (zh) * 2010-07-13 2010-12-08 华东理工大学 两种温度敏感可逆溶解成相聚合物、其制备方法及形成的再生型两水相体系
PT107379A (pt) * 2013-12-23 2015-10-13 Faculdade De Ciências E Tecnologia Da Universidade Nova De Lisboa Extração líquido-líquido magnética para a purificação e separação de substâncias
US8906972B1 (en) * 2013-12-27 2014-12-09 King Fahd University Of Petroleum And Minerals Aqueous two phase (ATPSs) of pH-responsive poly(phosphonate-alt-sulfur dioxide) with PEG

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Effective extraction of tylosin and spiramycin from fermentation broth using thermo-responsive ethylene oxide/propylene oxide aqueous two-phase systems;Ting Yang et al.;《J Sep Sci》;20220131;第45卷(第2期);第575页 *
Thermoseparating Water/Polymer System: A Novel One-Polymer Aqueous Two-Phase System for Protein Purification;Hans-Olof Johansson et al.;《BIOTECHNOLOGY AND BIOENGINEERING》;19991231;第66卷(第4期);摘要 *
双水相萃取法在天然产物纯化中的应用;国大亮等;《天津药学》;20060228(第01期);第64-67页 *
双水相萃取泰乐菌素的研究;张咏梅 等;《山东轻工业学院学报》;20030331;第17卷(第1期);第40页 *

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