CN112400762B - 一种许氏平鲉的工厂化全人工繁殖方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种许氏平鲉的工厂化全人工繁殖方法；1)工厂化亲鱼优选及培育；2)人工授精；3)授精后亲鱼培育；4)亲鱼布池与产仔；5)苗种饲育。本发明建立了一种许氏平鲉的工厂化全人工繁殖方法，使其亲鱼授精成功率达到88.5%以上，产仔成活率达到78.6%以上，苗种成活率达到48.0%以上，经过2.5个月的培育可获得平均全长5.2cm的优质苗种，有效地提高了许氏平鲉雌性亲鱼的繁殖效率，突破其优质苗种的规模化量产，解决了直接捞取带仔亲鱼对野生资源和网箱养殖亲鱼群体的依赖，解决了工厂化交配率低和产仔成活率低等问题，具有较高的推广价值。

Description

一种许氏平鲉的工厂化全人工繁殖方法
技术领域
本发明属于海水鱼类繁育技术领域；尤其涉及一种许氏平鲉的工厂化全人工繁殖方法。
背景技术
许氏平鲉，Sebastes schlegelii (Hilgendorf, 1880)，又称黑鮶，英文名为Black Rockfish，属硬骨鱼纲鲉形目平鲉科平鲉属的一种近海冷温性底层恋礁性鱼类。国外主要分布于朝鲜东西两岸、日本北海道以南及鄂霍次克海南部水域，国内主要分布于渤海、黄海和东海海区。其肉质细嫩，味道鲜美、蛋白质丰富和脂肪含量低，北方享有“黑石斑”的美誉，深受广大消费者的欢迎；因其具有强抗病性、耐低温、粗广食性及生长速度快等养殖特性，已成为我国北方沿海新兴的重要网箱养殖鱼种。随着深水网箱养殖装备与技术的不断提高，许氏平鲉的年产量和市场价格呈明显上升趋势，年产量已达到2.0×104 T左右，市场价格也在60-100元/kg，且市场需求量明显增加，市场开发潜力大。同时伴随着近些年海洋牧场大力发展，是北方海区增殖放流的重要对象。因此，市场亟需量大且优质的许氏平鲉苗种。
许氏平鲉为卵胎生鱼类，且雌雄性腺发育性成熟不同步，雄性精巢在11月份左右性成熟，与雌鱼发生交配，精子储存在雌鱼卵巢体内，等到第二年雌鱼卵巢发育成熟，精子与卵子受精并在雌鱼体内进行胚胎发育，北方沿海一般在5月份左右产出自由活动的仔鱼，许氏平鮋这种体外交配、精子储存、体内受精及体内胚胎发育的繁殖特性，需要其特殊的全人工繁殖体系的构建与应用。
目前，部分北方地区获取许氏平鲉苗种仍有直接捞取野生苗种的现象，苗种存在靠天吃饭、苗种供应不稳定、配合饲料驯化难度大、苗种成活率低等现象，其苗种数量、质量和成活率都难以满足其养殖业的需求，且存在严重破坏自然资源和生态平衡。近些年随着许氏平鲉育苗技术的突破与发展，以及养殖企业对人工苗种的认可，其获取苗种的主要方式通过在4-5月份许氏平鲉繁殖季节直接捞野生或网箱养殖的怀仔亲鱼进行室内人工繁殖苗种，而此种繁殖方法也存在以下问题：1)怀仔亲鱼的来源问题：来源相对不稳定，一方面，一般情况下野生或网箱养殖亲鱼的性成熟年龄、规格不能满足繁殖需求，而亲鱼达到繁殖产仔阶段时间如若掌握不好的话，极容易导致亲鱼将仔鱼直接排到海里而造成损失；另一方面，如果11月份左右交尾季节，网箱养殖海区出现温度、风浪等巨大变化情况，会导致雌雄亲鱼自然交尾率低，直接影响来年的怀仔亲鱼的获取。2)运输问题：怀仔亲鱼从养殖海区到育苗车间，会经过温度、水质等反复变化，同时，许氏平鲉背部、腹鳍、鳃盖处分布尖锐的棘刺，在运输过程中亲鱼间易相互扎伤，易造成亲鱼应激流产、仔鱼产出死亡率高、出苗率低、畸形率高、成本高等问题。3)产后亲鱼重复利用率低的问题：经走访调研发现，经运输应激产仔后的亲鱼死亡率在70%以上，亲鱼重复利用率较低，造成不必要的损失。
目前国内外许氏平鲉人工繁殖尚未取得实质性突破，不能通过人工控制获得高稳定性的雌性亲鱼，也不能突破许氏平鲉质优苗种的规模化量产，因此，本发明通过建立的许氏平鲉的工厂化全人工繁殖方法，为下一步的苗种快速扩繁、良种选育和网箱养殖业的健康发展提供了新方法。
发明内容
本发明的目的是提供一种许氏平鲉的工厂化全人工繁殖方法，本发明显著提高了雌性亲鱼的受精成功率(产仔率)和育苗成活率，有效地突破许氏平鲉规模化量产繁育，同时，本发明解决了直接捞取带仔亲鱼对野生资源和网箱养殖亲鱼群体的依赖，解决了工厂化交配率产仔率低等问题，提高了亲鱼繁殖效率。
本发明是通过以下技术方案实现的：
本发明涉及一种许氏平鲉的工厂化全人工繁殖方法，所述方法包括如下步骤：
步骤1，亲鱼优选和培育；
步骤2，人工授精；
步骤3，授精后亲鱼培育；
步骤4，亲鱼布池与产仔；
步骤5，苗种饲育；主要包括：饵料投喂、分池和筛苗、水质调控管理、疾病防控。
优选地，步骤1中，所述亲鱼优选和培育具体为：从自然野生许氏平鲉群体经人工驯养繁育的第一代或第二代，经工厂化养殖且每年挑个体大、健康的个体作为亲鱼，选择4龄以上且体质量大于1.25kg以上的亲鱼培育作为全人工繁殖的亲鱼，分辨雌雄后分池培育。
优选地，步骤2中，所述人工授精具体为：每年11月中旬前后选择性成熟的许氏平鲉雄性亲鱼，解剖雄性亲鱼，使用2ml注射器吸取尿液，与胎牛血清按体积比为1:1混合配制成精子缓冲液，其精巢放入在研钵中按精巢重量：缓冲液体积2:3比例快速加入缓冲液，将精巢剪碎研破，用筛绢网过滤组织，吸取精子混合液在光学显微镜下观察精子活力，活力达95%以上用于人工授精；利用检测活力好的鲜精来进行雌性亲鱼的人工授精，用实验用微量进样器吸取100μL的精子混合液，插入到雌鱼生殖孔中，注射到鱼体内后将亲鱼放入养殖池继续培育。
优选地，步骤3中，所述授精后亲鱼培育具体为：授精后采用自然海水流水培育，当12月份下旬自然海水水温降至8℃时，利用地下井水保持水温在8℃以上，随着翌年自然海水水温升至8℃再改为自然海水培育；采用许氏平鲉专用配合饲料（生产厂家：青岛七好饲料厂）和冰鲜野杂鱼如小黄鱼、鲐鱼、面条鱼等，隔日交换投喂，每日投喂1次，日投喂量在鱼体重的1%-2%，光照强度控制在300lx-500lx，日换水量3-4量程；产前强化培育是在亲鱼产仔前1个月改为全部投喂冰鲜饵料如小黄花鱼、虾类、沙蚕等，并拌入维生素C和维生素E营养强化，光照强度控制在800lx-1000lx，日换水量提高至4-5个量程。
优选地，步骤4中，所述亲鱼布池与产仔的具体步骤为：
在翌年4月末雌亲鱼腹部膨大、手摸有颗粒状感觉，随机利用玻璃吸管吸取雌鱼体中仔鱼观察，如发现仔鱼体表色素明显、活力强即可准备布池；雌性亲鱼的待产池规格在5.0m×5.0m×1.2m，将雌性亲鱼放入待产池的产仔筐中待产，亲鱼的布池密度为4-8尾/池，产仔一般在半夜后，每天早上观察池中产苗情况，及时捞出产后亲鱼，仔鱼达到布池密度达到1.0×104-2.0×104尾/m3左右后，将未产亲鱼转至另池的产仔筐继续产仔。
优选地，步骤5中, 所述苗种饲育的具体步骤如下：
产仔池培育水温控制在14-20℃，盐度28-33，溶解氧≥6.5mg/L，光照强度控制在2000-3000lx；
（1）饵料投喂：产出后1日龄即开口摄食，将S型褶皱臂尾轮虫作为开口饵料；产仔后1-22日龄投喂营养强化后的轮虫，第10-45日龄投喂强化后的卤虫无节幼体，鱼苗在投喂轮虫和卤虫无节幼体期间，池中添加浓缩的海水小球藻液，其密度保持2.0×105-4.0×105个/mL，池水呈现微绿色；第22日龄鱼苗达到平均全长1.0cm以上开始利用粒径300-450μm的配合饲料开始驯化，直至全部驯化成功；
（2）分池和筛苗：鱼苗平均全长1.5cm时进行第1次分池，平均全长达到2.0cm时第1次大小筛苗，生长至平均全长5.0cm左右需经4-5次筛苗与分池，以防互残。
（3）水质调控管理：鱼苗产出后1日龄即采用微流水培育，整个苗期的流水量从0.4-0.6个量程逐步加大到3-4个量程，充气量也随鱼苗生长从微充气到逐步增大，开始摄食卤虫无节幼体后每2d对池底吸污1次；
（4）疾病防控：以疾病预防为主，保证投喂饵料的数量和质量，保证苗种培育密度适宜，定期全池泼洒EM菌等，以避免疾病的发生；
所述轮虫每天投喂5-6次，投喂密度20-40个/mL，水体中保持密度5-8个/mL；卤虫无节幼体每天投喂次数3-4次，投喂密度10-20个/mL，水体中保持密度为2-3个/mL；
所述活轮虫须用浓缩的海水小球藻与裂壶藻液联合营养强化14h再投喂；卤虫卵须用200ppm甲醛或淡水浸泡30min后再孵化后投喂；
所述转口期每天驯化6-8次，每次投喂卤虫前驯化1次，驯化后0.5-1h再投喂卤虫，早上第1次的驯化尤为关键；
优选地，所述鱼苗平均全长1.5-2.5cm，鱼苗培育密度为0.4×104-0.6×104尾/m3；鱼苗平均全长2.5cm-3.5cm，密度为0.3×104-0.4×104尾/m3；鱼苗平均全长3.5-5.0cm培育密度为0.2×104-0.3×104尾/m3。
优选的，所述饵料投喂中，轮虫每天投喂5-6次，投喂密度20-40个/mL，水体中保持密度5-8个/mL；卤虫无节幼体每天投喂次数3-4次，投喂密度10-20个/mL，水体中保持密度为2-3个/mL；
优选的，所述饵料投喂中，活轮虫须用浓缩的海水小球藻液和裂壶藻液联合营养强化14h再投喂；卤虫卵须用200ppm甲醛或淡水浸泡30min后再孵化后投喂；
优选的，所述饵料投喂中，转口期每天驯化6-8次，每次投喂卤虫前驯化1次，驯化后0.5-1h再投喂卤虫，早上第1次的驯化尤为关键；
优选的，所述分池和筛苗中，鱼苗平均全长1.5-2.5cm鱼苗培育密度为0.4×104-0.6×104尾/m3；鱼苗平均全长2.5-3.5cm密度为0.3×104-0.4×104尾/m3；，鱼苗平均全长3.5-5.0cm培育密度为0.2×104-0.3×104尾/m3；
优选的，所述 水质调控管理中，鱼苗1-10日龄池中中心管外套60目筛网，11-25日龄池中中心管外套40目筛网，随着鱼苗的生长逐步减小池中中心管外套筛网的网目。
本发明选择的雌性亲鱼年龄在4龄以上且体重在1.25kg以上，能获得量大且质优的产仔苗种。雌性亲鱼在3龄仅部分亲鱼能达到性成熟，4龄均能达到性成熟，体重大于1.25kg的亲鱼怀仔量更大，每尾亲鱼产仔达到5万尾以上，保证了产仔数量和质量；
本发明方法在人工授精步骤中采用尿液和胎牛血清体积比为1：1的混合液作为精子缓冲液，经人工授精操作后通过翌年吸管吸取体内胚胎观察验证雌性亲鱼成功率达到88.5%以上；
本发明方法有效将许氏平鲉布池产仔水温控制在12-14℃，水温低于12℃产仔晚、成活率低，当水温高于14℃，促使亲鱼加快产仔，容易导致仔鱼胎中发育不好、产仔成活率低且畸形率高；在许氏平鲉鱼苗培育过程中水温控制为14-20℃能够取得较好效果。当温度高于20℃时，鱼苗畸形率会明显提高；而当温度低于14℃时，鱼苗生长的速度明显下降，增加了育苗周期和育苗成本；
本发明方法中，在亲鱼布池与产仔步骤中的进水管、中心排水管和出水管的设计，进水管的扁平开口冲击池壁避免水流冲击鱼苗，打孔的中央排水管并根据鱼苗生长大小并套上不同网目筛网，即保证了水流的通畅，又防止鱼苗逃逸；出水管能调节池中换水量，在投喂轮虫和卤虫时可以调节高度，保存了池中活饵料。此设计以维持水质干净清洁，保障鱼苗健康；
本发明方法将产仔布池的密度控制在1.0×104-2.0×104尾/m3，密度＞2.0×104尾/m3时，会对鱼苗造成拥挤胁迫，导致鱼苗生长速度和成活率下降，育苗效果变差；产仔布池密度＜1.0×104尾/m3时影响到育苗车间的利用效率和经济效益；
本发明方法苗种饲育中的饵料投喂中，第1日龄即及时添加轮虫，许氏平鲉仔鱼产出后口裂较大，大部分仔鱼已开始摄食S型褶皱臂尾轮虫，如果不及时添加轮虫会引起仔鱼饥饿不可逆点的出现而造成苗种死亡；
本发明方法苗种饲育中的饵料投喂中，池中添加浓缩海水小球藻且水体保持密度在2.0×105-4.0×105个/mL，通过食物链的作用起到对池中轮虫和卤虫一个持续营养强化的作用，从而保证了苗种对不饱和脂肪酸的摄入，保证苗种的营养供应，提高了苗种成活率；同时还起到了调节水色的作用。小球藻水体中密度＜2.0×105个/mL，不能满足池中轮虫的供应，密度＞4.0×105个/mL，增加养殖成本，水色太深后苗种数量、生长情况也不太容易观察；
本发明方法所涉及的许氏平鲉苗种饲育中的饵料投喂中，轮虫和卤虫无节幼体的营养尤其是多不饱和脂肪酸的含量不能够完全满足许氏平鲉苗种生长发育的需要，因而需要强化，本发明采用浓缩小球藻和裂壶藻进行联合强化，混合强化效果明显比单一藻液强化效果更好，保证了轮虫和卤虫的DHA的摄入，由于轮虫个体小、数量大、密度高，考虑到成本和效果，通过裂壶藻和小球藻液混合强化，能够达到满意的营养强化效果。添加轮虫需要强化14h以上一方面将土池繁殖的轮虫摄入的有毒物质如甲藻等能代谢掉，对鱼苗没有伤害，同时对轮虫强化效果好；
本发明方法所涉及的许氏平鲉苗种饲育中的饵料投喂中，配合饲料的每天驯化次数6-8次，并且投喂活性卤虫之前驯化，为了鱼苗在饥饿前通过配合饲料的多次强化诱食，能尽快提早完成配合饲料的驯化，缩短驯化周期和活性饵料投喂周期，卤虫的投入量的减少必然降低了培育成本，及时驯化成功能降低大小鱼苗的互残情况，降低损失；如果驯化次数过多，容易导致池中因未驯化的配合饲料的堆积，而滋生细菌等疾病，如果驯化次数过少，会延长驯化周期，增加互残和养殖成本；
本发明方法所涉及的鱼苗平均全长达到2.0cm时第1次大小筛苗，由于许氏平鲉生长中存在大小参差不齐和互残习性，平均全长＞2.0m时会出现苗种的互残情况，因此此时要及时并多次筛苗，能有效防止大小之间相互残食，避免造成不必要的损失；同时，分苗能降低苗种的密度，加快苗种的生长速度。
本发明具有以下优点：
（1）本发明提供一种许氏平鲉的工厂化全人工繁殖方法，本发明显著提高了雌性亲鱼的受精成功率(产仔率)和育苗成活率，有效地突破许氏平鲉规模化量产繁育，同时，本发明解决了直接捞取带仔亲鱼对野生资源和网箱养殖亲鱼群体的依赖，解决了工厂化交配率产仔率低等问题，提高了亲鱼繁殖效率。
（2）本发明所提供一种许氏平鲉的工厂化全人工繁殖方法，建立了营体内受精鱼类许氏平鲉的工厂化全人工繁育方法，直接替代了捞取野生苗种进行养殖方式，间接地保护了许氏平鲉自然资源和生物遗传多样性。
（3） 本发明通过建立的工厂化全人工繁育方法，也替代了利用野生或网箱养殖的带仔亲鱼繁育的方式，通过人工授精的方法可获得的优质且高受精率的雌性亲鱼，填补了该领域的空白；克服了怀仔亲鱼来源不稳定、运输难度大、成本的增加、运输应激易亲鱼流产和死亡、仔鱼成活率低、畸形率高等问题；使性成熟雌性亲鱼授精成功率在88.5%以上；本发明显著提高了雌性亲鱼的产仔率和育苗成活率。
（4）本发明通过工厂化越冬培育并使用生境模拟的方法，成功地促使了许氏平鲉授精后雌性亲鱼卵巢的性腺发育，使卵巢发育速度提前1个月，并使能卵成熟度达到了90%以上，促使精子和卵子在翌年的提前受精，实现提早产仔；本发明方法越冬培育和产前强化培育实现了许氏平鲉雌性亲鱼性腺的快速发育和卵成熟度的发育，有利于提高精卵的受精率，降低初孵仔鱼的畸形率，提高苗种初始成活率。
（5）本发明通过建立许氏平鲉的工厂化全人工繁育方法，经苗种培育后可获得量大且优良的苗种，为深水网箱养殖提供充分的苗种；本发明的技术方法通过多次生产验证，可操作性及实用性较强。
（6）本发明与室内自然交配方法相比，避免了人工控制水温、光照、水流及声音等养殖条件在交配期的干扰，大大提高了受精率，进而提高产仔率，保证翌年苗种繁育顺利进行；且与现有车间自由交配技术相比，人工授精后雌鱼授精成功率及体内受精率显著提高，技术指导性强。
（7） 本发明为许氏平鲉家系构建、新品系和品种的选育提供了便利。构建全同胞家系、半同胞家系及新品系（种）的选育及亲子鉴定等科研提供科研材料和方便。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。应当指出的是，以下的实施实例只是对本发明的进一步说明，但本发明的保护范围并不限于以下实施例。
实施例
2018年11月份按下述以下步骤在山东烟台泰华海洋科技有限公司的许氏平鲉国家级原种场车间，通过人工授精雌性亲鱼210尾，2019年5月1日开始陆续产仔的雌性亲鱼共计186尾，亲鱼授精成功率为88.6%，产仔苗种成活率为78.6%，利用1200m3水体，至2019年7月15日共培育出平均全长5.2cm许氏平鮋优质苗种168万尾，其苗种成活率在48.0%。
本实施例涉及一种许氏平鲉的工厂化全人工繁殖方法，所述方法包括如下步骤：
步骤1，亲鱼优选和培育；
步骤2，人工授精；
步骤3，授精后亲鱼培育；
步骤4，亲鱼布池与产仔；
步骤5，苗种饲育；主要包括：饵料投喂、分池和筛苗、水质调控管理、疾病防控。
详细步骤如下：
步骤1，亲鱼优选和培育：首先收集许氏平鲉自然野生群体经工厂化繁殖一代或二代，在工厂化养殖条件下每年经过挑生长快且健康的个体作为后续亲鱼，经过挑选后，繁殖季节分辨雌雄后进行分池培育，共计挑选620尾，选择4龄以上且体重1.25kg以上的雌雄亲鱼作为全人工繁育亲鱼的人工授精亲鱼。
步骤2，人工授精：在每年11月中旬前后选择性成熟的许氏平鲉雄性亲鱼，解剖雄性亲鱼，用2mL注射器针头插入膀胱中吸取尿液，与胎牛血清按体积比为1:1混合配制成精子缓冲液，获得的精巢称其重量放入研钵中，按精巢重与精子缓冲液体积为2:3比例快速加入缓冲液，用剪刀剪碎精巢，用筛绢网过滤组织碎片2次，然后吸取精子稀释液放入离心管中待用；取精子混合液立即在光学显微镜下观察精子活力，将精子活力达95%以上的精子稀释液用于雌性亲鱼的人工授精；使用浓度为120mg/L的活鱼专用麻醉剂MS-222麻醉雌性亲鱼，将其置于操作台上，两人合作进行人工授精操作，一人用湿毛巾覆盖鱼体头部并稍用力固定，然后将雌鱼腹部朝上，使鱼体垂直于操作台，另一人用实验用微量进样器吸取100μL的精子混合液，缓慢插入到雌鱼肛门孔后方的生殖孔中并快速注射到雌鱼体内，操作完成后将亲鱼放入养殖池继续培育。
步骤3，授精后亲鱼培育：
授精后采用自然海水流水培育，当12月份下旬自然海水水温开始降至8-10℃时，利用地下井水保持水温在8-10℃，随着第二年自然海水水温升至10℃改为自然海水培育；采用许氏平鲉专用配合饲料和冰鲜饵料隔天交换投喂，每天投喂1次，日投喂量在鱼体重的1%-2%，日换水量2-3量程，光照强度控制在300lx-500lx；产前强化培育是在亲鱼产仔前1个月改为全部投喂冰鲜饵料如小黄花鱼、虾类、沙蚕等，并拌入维生素C 和维生素E营养强化培育，光照强度控制在800-1000lx，日换水量提高至4-5个量程；除投喂和清除粪便残饵等必要养殖工作，减少人为车间活动，为其营造一个安静的待产环境。
步骤4，亲鱼布池与产仔：
在翌年4月末雌亲鱼腹部膨大、手摸有颗粒状感觉，随机利用玻璃吸管吸取雌鱼体中仔鱼观察，如发现仔鱼色素清晰、活力强即可准备布池；产仔水温控制在12-14℃，雌性亲鱼的待产池规格在5.0m×5.0m×1.2m，将雌性亲鱼放入待产池的产仔筐中待产，亲鱼的布池密度为每池4-8尾，产仔一般在半夜后，每天早上观察池中产苗情况，及时捞出产后亲鱼，仔鱼达到布池密度达到1.0×104-2.0×2.4尾/m3左右后，将未产亲鱼转至另池的产仔筐继续产仔；
步骤5，苗种饲育：培育的基本条件：采用二级沙滤海水，产仔池培育水温控制在14-20℃，盐度28-33，溶解氧≥6.5mg/L，光照强度控制在2000-3000lx。
(1) 饵料投喂：培苗投喂饵料顺序为S型褶皱臂尾轮虫→卤虫无节幼体→配合饵料，产出后1日龄即有25%仔鱼开口摄食，将S型褶皱臂尾轮虫作为开口饵料；产仔后1-22日龄投喂营养强化后的轮虫，第10-45日龄投喂强化后的卤虫无节幼体，轮虫每天投喂5-6次，投喂密度20-40个/mL，水体中保持密度5-8个/mL，活轮虫须用浓缩的海水小球藻液和裂壶藻液联合营养强化14h再投喂；卤虫卵须用200ppm甲醛或淡水浸泡30min后再孵化后投喂；卤虫无节幼体每天投喂次数3-4次，投喂密度10-20个/mL，水体中保持密度为2-3个/mL；鱼苗在投喂轮虫和卤虫无节幼体期间，池中添加浓缩的海水小球藻液，密度保持2.0×105-4.0×105个/mL，池水呈现微绿色；第22日龄达到平均全长1.0cm以上开始使用粒径300-450μm的配合饲料驯化，直至完全摄食配合饲料为止。转口期每天驯化7次，每次投喂卤虫前驯化1次，驯化后0.5-1h再投喂卤虫，早上第1次的驯化尤为关键；
(2) 分池和筛苗：鱼苗平均全长1.5cm时进行第1次分池；平均全长达到2.0cm时第1次筛苗，生长至平均全长5cm需经4-5次筛苗与分池，以防互残；鱼苗平均全长1.5-2.5cm鱼苗培育密度为0.4×104-0.6×104尾/m3，鱼苗平均全长2.5-3.5cm密度为0.3×104-0.4×104尾/m3，鱼苗平均全长3.5-5.0cm培育密度为0.2×104-0.3×104尾/m3；
(3) 水质调控管理：鱼苗产出后1日龄即微流水培育，生长到5.0cm左右苗期的流水量从0.4-0.6个量程逐步加大到3-4个量程，中央排水筛管外套筛网的网目逐渐减小，充气量也随鱼苗生长而逐步增大，开始摄食卤虫无节幼体后每2d对池底吸污1次；鱼苗1-10日龄中央排水筛管外套60目筛网，11-25日龄中央排水筛管外套40目筛网，第26日龄后中央排水筛管外套20目筛网；
(4) 疾病防控：以疾病预防为主，保证投喂饵料的数量和质量，保证苗种培育密度适宜，定期全池泼洒EM菌等，以避免疾病的发生。
本发明与现有技术相比，本发明具有以下优点：
（1）本发明提供一种许氏平鲉的工厂化全人工繁殖方法，本发明显著提高了雌性亲鱼的受精成功率(产仔率)和育苗成活率，有效地突破许氏平鲉规模化量产繁育，同时，本发明解决了直接捞取带仔亲鱼对野生资源和网箱养殖亲鱼群体的依赖，解决了工厂化交配率产仔率低等问题，提高了亲鱼繁殖效率。
（2）本发明所提供一种许氏平鲉的工厂化全人工繁殖方法，建立了营体内受精鱼类许氏平鲉的工厂化全人工繁育方法，直接替代了捞取野生苗种进行养殖方式，间接地保护了许氏平鲉自然资源和生物遗传多样性。
（3） 本发明通过建立的工厂化全人工繁育方法，也替代了利用野生或网箱养殖的带仔亲鱼繁育的方式，通过人工授精的方法可获得的优质且高受精率的雌性亲鱼，填补了该领域的空白；克服了怀仔亲鱼来源不稳定、运输难度大、成本的增加、运输应激易亲鱼流产和死亡、仔鱼成活率低、畸形率高等问题；使性成熟雌性亲鱼授精成功率在88.5%以上；本发明显著提高了雌性亲鱼的产仔率和育苗成活率。
（4）本发明通过工厂化越冬培育并使用生境模拟的方法，成功地促使了许氏平鲉授精后雌性亲鱼卵巢的性腺发育，使卵巢发育速度提前1个月，并使能卵成熟度达到了90%以上，促使精子和卵子在翌年的提前受精，实现提早产仔；本发明方法越冬培育和产前强化培育实现了许氏平鲉雌性亲鱼性腺的快速发育和卵成熟度的发育，有利于提高精卵的受精率，降低初孵仔鱼的畸形率，提高苗种初始成活率。
（5）本发明通过建立许氏平鲉的工厂化全人工繁育方法，经苗种培育后可获得量大且优良的苗种，为深水网箱养殖提供充分的苗种；本发明的技术方法通过多次生产验证，可操作性及实用性较强。
（6）本发明与室内自然交配方法相比，避免了人工控制水温、光照、水流及声音等养殖条件在交配期的干扰，大大提高了体内受精率，进而提高产仔率，保证翌年苗种繁育顺利进行；且与现有车间自由交配技术相比，人工授精后雌鱼成功率及体内受精率显著提高，技术指导性强。
（7） 本发明为许氏平鲉家系构建、新品系和品种的选育提供了便利。构建全同胞家系、半同胞家系及新品系（种）的选育及亲子鉴定等科研提供科研材料和方便。
以上对本发明的具体实施例进行了描述。需要理解的是，本发明并不局限于上述特定实施方式，本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变形或修改，这并不影响本发明的实质。

Claims (1)

1.一种许氏平鲉的工厂化全人工繁殖方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
步骤1，亲鱼优选和培育；
步骤2，人工授精；
步骤3，雌性亲鱼的越冬培育和产前强化培育；
步骤4，亲鱼的布池与产仔；
步骤5，苗种饲育；主要包括：饵料投喂、分池和筛苗、水质调控管理、疾病防控；
步骤1中，所述亲鱼优选和培育具体为：从自然野生许氏平鲉群体经人工驯养繁育的第一代或第二代，经工厂化养殖且每年挑个体大、健康的个体作为亲鱼，选择4龄以上且体质量大于1.25kg以上的亲鱼培育作为全人工繁殖的亲鱼，分辨雌雄后分池培育；
步骤2中，所述人工授精具体为：每年11月中旬前后选择性成熟的许氏平鲉雄性亲鱼，解剖雄性亲鱼，使用2ml注射器吸取尿液，与胎牛血清按体积比为1:1混合配制成精子缓冲液，其精巢放入在研钵中按精巢重量：缓冲液体积2:3比例快速加入缓冲液，将精巢剪碎研破，用筛绢网过滤组织，采用检测活力好的鲜精来进行雌性亲鱼的人工授精，吸取100μL的精子混合液，插入到雌性亲鱼生殖孔中，注射到鱼体内后将亲鱼放入养殖池继续培育；
步骤3中，所述雌性亲鱼的越冬培育和产前强化培育具体为：12月份下旬自然海水水温降至8℃时，利用地下井水保持水温在8℃以上，自然海水水温升至8℃改为自然海水培育；采用许氏平鲉配合饲料和冰鲜饵料隔日交换投喂，每日投喂1次，日投喂量在鱼体重的1％-2％，光照强度控制在300lx-500lx，日换水量3-4量程；
步骤4中，所述亲鱼的布池与产仔的具体步骤为：
在翌年4月末雌性亲鱼腹部膨大、手摸有颗粒状，玻璃吸管吸取雌性亲鱼体中仔鱼观察，雌性亲鱼的待产池规格为5.0m×5.0m×1.2m，将雌性亲鱼放入待产池的产仔筐中待产，亲鱼的布池密度为4-8尾/池，产仔一般在半夜后，每天早上观察池中产苗情况，及时捞出产后亲鱼，仔鱼达到布池密度达到1.0×104-2.0×104尾/m3后，将未产亲鱼转至另池的产仔筐继续产仔；
步骤5中,所述苗种饲育的具体步骤如下：
(1)饵料投喂：产出后1日龄即开口摄食，将S型褶皱臂尾轮虫作为开口饵料；产仔后1-22日龄投喂营养强化后的轮虫，第10-45日龄投喂强化后的卤虫无节幼体，鱼苗在投喂轮虫和卤虫无节幼体期间，池中添加浓缩的海水小球藻液，其密度为2.0×105-4.0×105个/mL，池水呈现微绿色；第22日龄鱼苗达到平均全长1.0cm以上开始利用粒径300-450μm的配合饲料开始驯化，直至全部驯化成功；
(2)分池和筛苗：鱼苗平均全长1.5cm时进行第1次分池，平均全长达到2.0cm时第1次大小筛苗，生长至平均全长5.0cm左右需经4-5次筛苗与分池，以防互残；
(3)水质调控管理：鱼苗产出后1日龄即采用微流水培育，整个苗期的流水量从0.4-0.6个量程逐步加大到3-4个量程，充气量也随鱼苗生长从微充气到逐步增大，开始摄食卤虫无节幼体后每2d对池底吸污1次；
(4)疾病防控：以疾病预防为主，满足投喂饵料的数量和质量，苗种培育密度适宜，定期全池泼洒EM菌；
所述鱼苗平均全长1.5-2.5cm，鱼苗培育密度为0.4×104-0.6×104尾/m3；鱼苗平均全长2.5cm-3.5cm，密度为0.3×104-0.4×104尾/m3；鱼苗平均全长3.5-5.0cm培育密度为0.2×104-0.3×104尾/m3。
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