CN112362528B - 一种测试方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种微球测试方法，将微球样品浸泡在生理盐水中5‑10h，然后对浸泡有微球样品的生理盐水溶液在36.5‑37.5℃的环境下进行缓慢震荡，并保持震荡0.5‑15h；将浸泡有微球样品的生理盐水溶液全部倒入干燥已恒重的蒸发皿中，用吸管垂直接触蒸发皿底部，将保存液小心吸出，尽量避免吸去微球，至微球表面无明水，再用滤纸吸去蒸发皿上残留明水待收集的微球样品无明水后，称重无明水的微球样品，称重微球样品的重量，记录重量为W1；将上述无明水的微球样品放入蒸发皿中，置于电热鼓风干燥箱中，100‑150℃干燥，并对干燥后的微球样品进行冷却，将冷却后的微球样品称重，记录重量，以评估微球的含水量。
Description
技术领域
本发明属于测试领域，具体的，涉及一种医疗器械的测试方法。
背景技术
随着临床介入治疗技术和生物医学的不断发展，具有缓释和靶向给药功能的载药系统越来越多的应用于临床治疗。目前研究较多的有粒径为纳米级的纳米载药系统，如纳米粒、纳米球、纳米囊等；以及粒径为微米级的微球载药微球，如淀粉微球、明胶微球、壳聚糖微球等。与普通口服的药物剂型相比，载药系统的优点是具有药物缓释和靶向给药特点，使靶区能够快速达到所需的药物浓度，而其它部位分布较少，从而提高病灶对药物的吸收率，减少用药量，降低了药物对正常机体的毒副作用。
当下临床对载药微球应用较为成熟，所载药物绝大多数为水溶性小分子药物，如阿霉素、表柔比星、吡柔比星等。微球通过离子键和氢键作用与药物结合，可以精确定量，到达病灶后通过离子交换机制缓慢释放药物，用于治疗肝癌，已获批在国内上市。
但载药微球的含水量直接关系到载药微球的稳定性以及所载药的含量，因而需要对其进行评估，以评估载药微球的稳定性。
发明内容
本发明的目的在于克服上述不足之处，提供一种测试方法，以评估微球在不同溶液中的含水量，进而评估微球的稳定性，对于微球的储藏、运输和使用具有重要的应用价值。
本发明的技术方案，一种测试方法：
将微球样品浸泡在生理盐水中5-10h，然后对浸泡有微球样品的生理盐水溶液在36.5-37.5℃的环境下进行缓慢震荡，并保持震荡0.5-15h；
将浸泡有微球样品的生理盐水溶液全部倒入干燥已恒重的蒸发皿中，用吸管垂直接触蒸发皿底部，将保存液小心吸出，至微球样品表面无明水，再用滤纸吸去蒸发皿上残留明水，待收集的微球样品无明水后，称重无明水的微球样品，记录重量为W1；
将上述无明水的微球样品放入蒸发皿中，置于电热鼓风干燥箱中，100-150℃干燥，干燥至恒重，并对干燥后的微球样品进行冷却，将冷却后的微球样品称重，记录重量为W2；
通过如下公式计算微球样品的含水量，%(m/m)=(W1-W2)/W1*100%。
较佳的，所述干燥温度为105℃。
本发明还提供一种测试方法：
将蒸发皿置于电热鼓风干燥箱中，100-150℃干燥，干燥至恒重，置干燥器中冷却，记录重量为W3。
将微球样品浸泡在生理盐水中5-10h，然后对浸泡有微球样品的生理盐水溶液在36.5-37.5℃的环境下进行缓慢震荡，并保持震荡0.5-15h；
将浸泡有微球样品的生理盐水溶液全部倒入干燥已恒重的蒸发皿中，用吸管垂直接触蒸发皿底部，将保存液小心吸出，至微球样品表面无明水，再用滤纸吸去蒸发皿上残留明水待收集的微球样品无明水后，称重含无明水微球样品的蒸发皿，记录干燥前微球样品和蒸发皿的总重量记录为W4。
将上述无明水的微球样品和蒸发皿置于电热鼓风干燥箱中，100-150℃干燥，干燥至恒重，并对干燥后的微球样品进行冷却，将冷却后的微球样品称重，记录干燥后微球样品和蒸发皿的总重量记录为W5；
通过如下公式计算微球样品的含水量，%(m/m)=(W4-W5)/ (W4-W3)*100%。
较佳的：所述干燥温度为105℃。
本发明公开一种测试方法：
将微球样品浸泡在血液模拟溶液中5-10h，然后对浸泡有微球样品的血液模拟溶液在36.5-37.5℃的环境下进行缓慢震荡，并保持震荡0.5-15h；
将浸泡有微球样品的血液模拟溶液全部倒入干燥已恒重的蒸发皿中，用吸管垂直接触蒸发皿底部，将保存液小心吸出，至微球样品表面无明水，再用滤纸吸去蒸发皿上残留明水待收集的微球样品无明水后，称重无明水的微球样品的重量，记录重量为W1；
将上述无明水的微球样品放入蒸发皿中，置于电热鼓风干燥箱中，100-150℃干燥，干燥至恒重，并对干燥后的微球样品进行冷却，将冷却后的微球样品称重，记录重量为W2；
通过如下公式计算微球样品的含水量，%(m/m)=(W1-W2)/W1*100%。
较佳的：对浸泡有微球样品的血液模拟溶液在36.5-37.5℃的环境下进行缓慢震荡5h。
较佳的：所述干燥温度为125℃。
本发明还提供一种测试方法：
将蒸发皿置于电热鼓风干燥箱中，100-150℃干燥，置干燥器中冷却，干燥至恒重，记录重量为W3。
将微球样品浸泡在血液模拟溶液中5-10h，然后对浸泡有微球样品的血液模拟溶液在36.5-37.5℃的环境下进行缓慢震荡，并保持震荡0.5-15h；
将浸泡有微球样品的血液模拟溶液全部倒入干燥已恒重的蒸发皿中，用吸管垂直接触蒸发皿底部，将保存液小心吸出，至微球样品表面无明水，再用滤纸吸去蒸发皿上残留明水待收集的微球样品无明水后，称重含无明水微球样品的蒸发皿，记录干燥前微球样品和蒸发皿的总重量记录为W4。
将上述无明水的微球样品和蒸发皿置于电热鼓风干燥箱中，100-150℃干燥，干燥至恒重，并对干燥后的微球样品进行冷却，将冷却后的微球样品称重，记录干燥后微球样品和蒸发皿的总重量记录为W5；
通过如下公式计算微球样品的含水量，%(m/m)=(W4-W5)/ (W4-W3)*100%。
较佳的：所述干燥温度为105℃。
较佳的：对浸泡有微球样品的血液模拟溶液在36.5-37.5℃的环境下进行缓慢震荡5h。
本发明采用上述技术方法后，主要有以下有益效果：
1、本发明创造性的设计了微球样品含水量的测量方法，为评估微球样品的稳定性提供一种可靠指标；
2、本发明测试方法准确度高，不受微球样品粒径的影响；
3、本发明测试方法可以评估微球样品在生理盐水，或者复杂的血液模拟溶液中的稳定性，具有较高的应用价值；
4、本发明测试方法简单，方便快捷，且准确度高，具有较好的实用价值。
附图说明
图1为实施例1三种不同微球样品含水量检测结果统计分析。
图2为实施例2三种不同微球样品含水量检测结果统计分析。
图3为实施例3三种不同微球样品含水量检测结果统计分析。
图4为实施例4三种不同微球样品含水量检测结果统计分析。
具体实施方式
实施例1
将1份(瓶)微球样品浸泡在生理盐水中5-10h，然后对浸泡有微球样品的生理盐水溶液在36.5-37.5℃的环境下进行缓慢震荡，并保持震荡0.5-15h；
将浸泡有微球样品的生理盐水溶液全部倒入干燥已恒重的蒸发皿中，用吸管垂直接触蒸发皿底部，将保存液小心吸出，尽量避免吸去微球样品，至微球样品表面无明水，再用滤纸吸去蒸发皿上残留明水待收集的微球样品无明水后，用天平（例如精度为万分之一天平）称重无明水的微球样品，称重微球样品的重量，记录重量为W1。
将上述无明水的微球样品放入蒸发皿中，置于电热鼓风干燥箱中，100-150℃（较佳为105℃）干燥，干燥至恒重(恒重指供试品连续两次干燥后称重的差异在0.2mg以下的重量)，并对干燥后的微球样品进行冷却，将冷却后的微球样品用天平（例如精度为万分之一天平）称重，记录重量为W2。
则，通过如下公式计算微球样品的含水量，%(m/m)=(W1-W2)/W1*100%。
于实际操作中，为了校准方法的准确性，需要计算测试结果的平均值以及标准偏差。
具体操作如下：取六份同类型微球样品，每份样品按上述方法进行测量，得到微球样品的含水量，并对所有结果进行统计分析。
图一，是对三种不同粒径的微球样品的测试结果进行统计分析，其中每种微球样品均有3份，对每种样品进行上述方法的测试。
对结果进行数据统计分析见图一，取测试结果数据的平均值和标准偏差。对不同微球样品的微球样品含水量数据进行单因子方差分析，结果显示，3种不同微球装量产品的含水量数据的P值>0.05，无统计学差异，表明微球样品的含水量的测试准确度不受微球样品直径和生理盐水的影响。
实施例2
于实际操作时，将蒸发皿置于电热鼓风干燥箱中，100-150℃（较佳为105℃）干燥，干燥至恒重(恒重指供试品连续两次干燥后称重的差异在0.2mg以下的重量)，置干燥器中冷却，用天平（例如精度为万分之一天平）称重，记录重量为W3。
将1份(瓶)微球样品浸泡在生理盐水中5-10h，然后对浸泡有微球样品的生理盐水溶液在36.5-37.5℃的环境下进行缓慢震荡，并保持震荡0.5-15h；
将浸泡有微球样品的生理盐水溶液全部倒入干燥已恒重的蒸发皿中，用吸管垂直接触蒸发皿底部，将保存液小心吸出，尽量避免吸去微球样品，至微球样品表面无明水，再用滤纸吸去蒸发皿上残留明水待收集的微球样品无明水后，用天平（例如精度为万分之一天平）再称重含无明水微球样品的蒸发皿，记录干燥前微球样品和蒸发皿的总重量记录为W4。
将上述无明水的微球样品和蒸发皿置于电热鼓风干燥箱中，100-150℃（较佳为105℃）干燥，干燥至恒重(恒重指供试品连续两次干燥后称重的差异在0.2mg以下的重量)，并对干燥后的微球样品进行冷却，将冷却后的微球样品用天平（例如精度为万分之一天平）称重，记录干燥后微球样品和蒸发皿的总重量记录为W5。
计算公式： 微球样品的含水量，%(m/m)=(W4-W5)/ (W4-W3)*100%。
于实际操作中，为了校准方法的准确性，需要计算测试结果的平均值以及标准偏差。
具体操作如下：取六份同类型微球样品，每份样品按上述方法进行测量，得到微球样品的含水量，并对所有结果进行统计分析。
图二，是对三种不同粒径的微球样品的测试结果进行统计分析，其中每种微球样品均有3份，对每种样品进行上述方法的测试。
图二，三种不同微球样品含水量检测结果统计分析。
对结果进行数据统计分析见图二，取测试结果数据的平均值和标准偏差。对不同微球样品的微球样品含水量数据进行单因子方差分析，结果显示， 3种不同微球样品装量产品的含水量数据的P值>0.05，无统计学差异，表明微球样品的含水量的测试准确度不受微球样品直径和生理盐水的影响。
实施例3
将1份(瓶)微球样品浸泡在血液模拟溶液中5-10h，然后对浸泡有微球样品的血液模拟溶液在36.5-37.5℃的环境下进行缓慢震荡，并保持震荡0.5-25h；
将浸泡有微球样品的血液模拟溶液全部倒入干燥已恒重的蒸发皿中，用吸管垂直接触蒸发皿底部，将保存液小心吸出，尽量避免吸去微球样品，至微球样品表面无明水，再用滤纸吸去蒸发皿上残留明水待收集的微球样品无明水后，用天平（例如精度为万分之一天平）称重无明水的微球样品，称重微球样品的重量，记录重量为W1。
将上述无明水的微球样品放入蒸发皿中，置于电热鼓风干燥箱中，100-150℃（较佳为105℃）干燥，干燥至恒重(恒重指供试品连续两次干燥后称重的差异在0.2mg以下的重量)，并对干燥后的微球样品进行冷却，将冷却后的微球样品用天平（例如精度为万分之一天平）称重，记录重量为W2。
则，通过如下公式计算微球样品的含水量，%(m/m)=(W1-W2)/W1*100%。
于实际操作中，为了校准方法的准确性，需要计算测试结果的平均值以及标准偏差。
具体操作如下：取六份同类型微球样品，每份样品按上述方法进行测量，得到微球样品的含水量，并对所有结果进行统计分析。
图三，是对三种不同粒径的微球样品的测试结果进行统计分析，其中每种微球样品均有3份，对每种样品进行上述方法的测试。
对结果进行数据统计分析见图三，取测试结果数据的平均值和标准偏差。对不同微球样品的微球样品含水量数据进行单因子方差分析，结果显示，3种不同微球样品装量产品的含水量数据的P值>0.05，无统计学差异，表明微球样品的含水量的测试准确度不受微球样品直径和血液模拟溶液的影响。
实施例4
于实际操作时，将蒸发皿置于电热鼓风干燥箱中，100-150℃（较佳为105℃）干燥，干燥至恒重(恒重指供试品连续两次干燥后称重的差异在0.2mg以下的重量)，置干燥器中冷却，用天平（例如精度为万分之一天平）称重，记录重量为W3。
将1份(瓶)微球样品浸泡在血液模拟溶液中5-10h，然后对浸泡有微球样品的血液模拟溶液在36.5-37.5℃的环境下进行缓慢震荡，并保持震荡0.5-25h；
将浸泡有微球样品的血液模拟溶液全部倒入干燥已恒重的蒸发皿中，用一次性塑料吸管垂直接触蒸发皿底部，将保存液小心吸出，尽量避免吸去微球样品，至微球样品表面无明水，再用滤纸吸去蒸发皿上残留明水待收集的微球样品无明水后，用天平（例如精度为万分之一天平）再称重含无明水微球样品的蒸发皿，记录干燥前微球样品和蒸发皿的总重量记录为W4。
将上述无明水的微球样品和蒸发皿置于电热鼓风干燥箱中，100-150℃（较佳为105℃）干燥，干燥至恒重(恒重指供试品连续两次干燥后称重的差异在0.2mg以下的重量)，并对干燥后的微球样品进行冷却，记录干燥后微球样品和蒸发皿的总重量记录为W5。
计算公式： 微球样品的含水量，%(m/m)=(W4-W5)/ (W4-W3)*100%。
于实际操作中，为了校准方法的准确性，需要计算测试结果的平均值以及标准偏差。
具体操作如下：取六份同类型微球样品，每份样品按上述方法进行测量，得到微球样品的含水量，并对所有结果进行统计分析。
图四，是对三种不同粒径的微球样品的测试结果进行统计分析，其中每种微球样品均有3份，对每种样品进行上述方法的测试。
对结果进行数据统计分析见图四，取测试结果数据的平均值和标准偏差。对不同微球样品的微球样品含水量数据进行单因子方差分析，结果显示，3种不同微球装量产品的含水量数据的P值>0.05，无统计学差异，表明微球样品的含水量的测试准确度不受微球样品直径和血液模拟溶液的影响。
需要特别说明的是，上述实施例采用天平进行称重，在实际情况下，亦可以采用其他元器件进行称重，并不以此为限。另外，上述实施例均以吸管来吸取明水，但本发明并不限于此，其他可吸除明水且不会吸除微球样品的吸取装置和方法均可用于本发明。
Claims (10)
1.一种载药微球测试方法，其特征是：
分别取序号1、2、3的微球样品各六份，其中，序号1的六份微球样品的尺寸范围为20-50微米，序号2的六份微球样品的尺寸范围为50-100微米，序号3的六份微球样品的尺寸范围为200-500微米，分别将上述序号1、2、3的微球样品进行如下测试：
将微球样品浸泡在生理盐水中5-10h，然后对浸泡有微球样品的生理盐水溶液在36.5-37.5℃的环境下进行缓慢震荡，并保持震荡0.5-15h；
将浸泡有微球样品的生理盐水溶液全部倒入干燥已恒重的蒸发皿中，用吸管垂直接触蒸发皿底部，将保存液小心吸出，至微球表面无明水，再用滤纸吸去蒸发皿上残留明水，待收集的微球样品无明水后，称重无明水的微球样品，记录重量为W1；
将上述无明水的微球样品放入蒸发皿中，置于电热鼓风干燥箱中，100-150℃干燥，干燥至恒重，并对干燥后的微球样品进行冷却，将冷却后的微球样品称重，记录重量为W2；
通过如下公式计算微球样品的含水量，%(m/m)=(W1-W2)/W1*100%；
然后，对上述不同序号的微球样品的测试结果取平均值和标准偏差，其中，序号1的六份微球样品的含水量的均值为95.0%，标准偏差为0.15%；序号2的六份微球样品的含水量的均值为95.2%，标准偏差为0.19%；序号3的六份微球样品的含水量的均值为94.9%，标准偏差为0.08%；以及对上述不同序号的微球样品的测试结果进行单因子方差分析，序号1、2、3的各六份微球样品的含水量数据的P值>0.05，无统计学差异；微球的含水量的测试准确度不受微球直径的影响。
2.如权利要求1所述的载药微球测试方法，其特征是：所述干燥温度为105℃。
3.一种载药微球测试方法，其特征是：
分别取序号1、2、3的微球样品各六份，其中，序号1的六份微球样品的尺寸范围为20-50微米，序号2的六份微球样品的尺寸范围为50-100微米，序号3的六份微球样品的尺寸范围为200-500微米，分别将上述序号1、2、3的微球样品进行如下测试：
将蒸发皿置于电热鼓风干燥箱中，100-150℃干燥，干燥至恒重，置干燥器中冷却，记录重量为W3；
将微球样品浸泡在生理盐水中5-10h，然后对浸泡有微球样品的生理盐水溶液在36.5-37.5℃的环境下进行缓慢震荡，并保持震荡0.5-15h；
将浸泡有微球样品的生理盐水溶液全部倒入干燥已恒重的蒸发皿中，用吸管垂直接触蒸发皿底部，将保存液小心吸出，至微球表面无明水，再用滤纸吸去蒸发皿上残留明水待收集的微球样品无明水后，称重含无明水微球的蒸发皿，记录干燥前微球和蒸发皿的总重量记录为W4；
将上述无明水的微球样品和蒸发皿置于电热鼓风干燥箱中，100-150℃干燥，干燥至恒重，并对干燥后的微球样品进行冷却，将冷却后的微球样品称重，记录干燥后微球和蒸发皿的总重量记录为W5；
通过如下公式计算微球的含水量，%(m/m)=(W4-W5)/ (W4-W3)*100%；
然后，对上述不同序号的微球样品的测试结果取平均值和标准偏差，其中，序号1的六份微球样品的含水量的均值为95.3%，标准偏差为0.19%；序号2的六份微球样品的含水量的均值为95.0%，标准偏差为0.12%；序号3的六份微球样品的含水量的均值为95.2%，标准偏差为0.21%；以及对上述不同序号的微球样品的测试结果进行单因子方差分析，序号1、2、3的各六份微球样品的含水量数据的P值>0.05，无统计学差异；微球的含水量的测试准确度不受微球直径的影响。
4.如权利要求3所述的载药微球测试方法，其特征是：所述干燥温度为105℃。
5.一种载药微球测试方法，其特征是：
分别取序号1、2、3的微球样品各六份，其中，序号1的六份微球样品的尺寸范围为20-50微米，序号2的六份微球样品的尺寸范围为50-100微米，序号3的六份微球样品的尺寸范围为200-500微米，分别将上述序号1、2、3的微球样品进行如下测试：将微球样品浸泡在血液模拟溶液中5-10h，然后对浸泡有微球样品的血液模拟溶液在36.5-37.5℃的环境下进行缓慢震荡，并保持震荡0.5-15h；
将浸泡有微球样品的血液模拟溶液全部倒入干燥已恒重的蒸发皿中，用吸管垂直接触蒸发皿底部，将保存液小心吸出，尽量避免吸去微球，至微球表面无明水，再用滤纸吸去蒸发皿上残留明水待收集的微球样品无明水后，称重无明水的微球样品的重量，记录重量为W1；
将上述无明水的微球样品放入蒸发皿中，置于电热鼓风干燥箱中，100-150℃干燥，干燥至恒重，并对干燥后的微球样品进行冷却，将冷却后的微球样品称重，记录重量为W2；
通过如下公式计算微球样品的含水量，%(m/m)=(W1-W2)/W1*100%；
然后，对上述不同序号的微球样品的测试结果取平均值和标准偏差，其中，序号1的六份微球样品的含水量的均值为95.2%，标准偏差为0.16%；序号2的六份微球样品的含水量的均值为95.1%，标准偏差为0.17%；序号3的六份微球样品的含水量的均值为94.3%，标准偏差为0.10%；以及对上述不同序号的微球样品的测试结果进行单因子方差分析，序号1、2、3的各六份微球样品的含水量数据的P值>0.05，无统计学差异；微球的含水量的测试准确度不受微球直径的影响。
6.如权利要求5所述的载药微球测试方法，其特征是：对浸泡有微球样品的血液模拟溶液在36.5-37.5℃的环境下进行缓慢震荡5h。
7.如权利要求5所述的载药微球测试方法，其特征是：所述干燥温度为125℃。
8.一种载药微球测试方法，其特征是：
分别取序号1、2、3的微球样品各六份，其中，序号1的六份微球样品的尺寸范围为20-50微米，序号2的六份微球样品的尺寸范围为50-100微米，序号3的六份微球样品的尺寸范围为200-500微米，分别将上述序号1、2、3的微球样品进行如下测试：将蒸发皿置于电热鼓风干燥箱中，100-150℃干燥，置干燥器中冷却，干燥至恒重，记录重量为W3；
将微球样品浸泡在血液模拟溶液中5-10h，然后对浸泡有微球样品的血液模拟溶液在36.5-37.5℃的环境下进行缓慢震荡，并保持震荡0.5-15h；
将浸泡有微球样品的血液模拟溶液全部倒入干燥已恒重的蒸发皿中，用吸管垂直接触蒸发皿底部，将保存液小心吸出，至微球表面无明水，再用滤纸吸去蒸发皿上残留明水待收集的微球样品无明水后，称重含无明水微球的蒸发皿，记录干燥前微球和蒸发皿的总重量记录为W4；
将上述无明水的微球样品和蒸发皿置于电热鼓风干燥箱中，100-150℃干燥，干燥至恒重，并对干燥后的微球样品进行冷却，将冷却后的微球样品称重，记录干燥后微球和蒸发皿的总重量记录为W5；
通过如下公式计算微球的含水量，%(m/m)=(W4-W5)/ (W4-W3)*100%；
然后，对上述不同序号的微球样品的测试结果取平均值和标准偏差，其中，序号1的六份微球样品的含水量的均值为95.8%，标准偏差为0.16%；序号2的六份微球样品的含水量的均值为95.3%，标准偏差为0.14%；序号3的六份微球样品的含水量的均值为95.0%，标准偏差为0.18%；以及对上述不同序号的微球样品的测试结果进行单因子方差分析，序号1、2、3的各六份微球样品的含水量数据的P值>0.05，无统计学差异；微球的含水量的测试准确度不受微球直径的影响。
9.如权利要求8所述的载药微球测试方法，其特征是：所述干燥温度为105℃。
10.如权利要求8所述的载药微球测试方法，其特征是：对浸泡有微球样品的血液模拟溶液在36.5-37.5℃的环境下进行缓慢震荡5h。
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