CN112250675B - 一种含酰胺结构的酪氨酸激酶抑制剂及其制备方法 - Google Patents

一种含酰胺结构的酪氨酸激酶抑制剂及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN112250675B
CN112250675B CN202011301357.5A CN202011301357A CN112250675B CN 112250675 B CN112250675 B CN 112250675B CN 202011301357 A CN202011301357 A CN 202011301357A CN 112250675 B CN112250675 B CN 112250675B
Authority
CN
China
Prior art keywords
reaction
tyrosine kinase
compound
pharmaceutically acceptable
hours
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202011301357.5A
Other languages
English (en)
Other versions
CN112250675A (zh
Inventor
谭回
任力杰
胡诗雨
冯宏业
王洋
雷志浩
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shenzhen Second Peoples Hospital
Original Assignee
Shenzhen Second Peoples Hospital
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shenzhen Second Peoples Hospital filed Critical Shenzhen Second Peoples Hospital
Priority to CN202011301357.5A priority Critical patent/CN112250675B/zh
Publication of CN112250675A publication Critical patent/CN112250675A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN112250675B publication Critical patent/CN112250675B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/06—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Abstract

本发明涉及一种含酰胺结构的酪氨酸激酶抑制剂，或其药学上可接受的盐，它们的制备方法，并且涉及该化合物在制备与酪氨酸激酶有关疾病的药物中的用途。

Description

一种含酰胺结构的酪氨酸激酶抑制剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及药物化学领域，具体地涉及一种含酰胺结构的酪氨酸激酶抑制剂、其制备方法及其用途。
背景技术
肿瘤是威胁人类健康的重大疾病，全球每年因恶性肿瘤而死亡患者人数占所有疾病死亡人数的第二位。抗肿瘤药物的研究一直被全世界所密切关注。传统的化学治疗药物可非特异性地阻断细胞分裂或直接引起细胞死亡，因此杀伤肿瘤细胞的同时，也破坏了人体正常细胞。随着对肿瘤发生、发展机制的深入了解，以肿瘤细胞信号转导通路的关键酶为靶点，开发高效、低毒、特异性强的新型药物已经成为当今抗肿瘤药物研究的重要方向。
在众多的抗肿瘤药物的靶点中，蛋白酪氨酸激酶信号通路与肿瘤细胞的增殖和分化有密切关系，干扰或阻断酪氨酸激酶信号通路已成为当前抗肿瘤药物研发的热点，每年都有大量的研究报道。已有多种酪氨酸激酶抑制剂上市，如治疗肺癌的酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼、治疗慢性髓性白血病的酪氨酸激酶抑制剂格列卫、以及治疗晚期肾细胞癌的苏尼替尼等，它们可作用于EGFR和VEGFR等多个靶点。还有更多开发中的酪氨酸激酶抑制剂已进入不同的临床研究阶段。
抗肿瘤药物吉非替尼(Gifitinib，Iressa)是由英国阿斯利康公司开发的一种酪氨酸激酶抑制剂，于2003年在美国批准用于晚期或转移性非小细胞肺癌。2005年在中国批准上市。在中国的5个临床研究基地中进行了临床研究，以评估吉非替尼片250mg/日在既往接受过化学治疗的非小细胞肺癌患者中的客观缓解率。共有159名受试者至少服用了一次吉非替尼片250mg，结果表明客观缓解率为27.0％(吉非替尼说明书)。
因此，继续寻找高效的酪氨酸激酶抑制剂，具有重要的实际意义。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是：提供了一种含酰胺结构的酪氨酸激酶抑制剂。
本发明的第一个方面，是提供一种式I所示化合物及其药学上可接受的盐，其具有如下结构：
Figure BDA0002786681810000021
优选地，所述药学上可接受的盐选自：盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、硫酸盐、乙酸盐、草酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、三氟乙酸盐、甲烷磺酸盐、乙烷磺酸盐、对甲苯磺酸盐或水杨酸盐；
本发明的另一方面提供一种制备式I化合物的方法，其合成路线如下：
Figure BDA0002786681810000022
具体反应步骤如下：
步骤1)：将2-溴-6-(溴甲基)吡啶和亚磷酸三乙酯加入到反应瓶中，100-160℃下反应4-24小时；反应结束后，经分离纯化得到中间体1；
步骤2)：在0℃下将中间体1、四氢-4H-吡喃-4-酮和有机溶剂加入到反应瓶中，加入碱，搅拌反应15分钟后，转移至室温继续反应2-8小时；经后处理得到中间体2；
步骤3)：将中间体2、4-氟苯甲酰胺、碱、碘化亚铜、(1R,2R)-N1,N2-二甲基环己烷-1,2-二胺(122mg,0.86mmol)、水和甲苯加入到反应瓶中，氮气保护下115℃继续反应6-24小时；经分离纯化得到式I化合物。
优选地，步骤一：2-溴-6-(溴甲基)吡啶和亚磷酸三乙酯的摩尔比为：1:1-3，优选为1:1.75；反应温度为140℃；反应时间为12小时；
步骤二：中间体1和四氢-4H-吡喃-4-酮的摩尔比为：1:1-3，优选为1:1.8-2.2；所述碱为氢化钠；反应时间为6小时；
步骤三：中间体2和4-氟苯甲酰胺的摩尔比为：1:1.5-2.0。
本发明的另一方面提供一种药物组合物，其包含式I所示的化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体、赋形剂。
本发明另一方面涉及一种式I化合物及其药学上可接受的盐或包含其药物组合物在制备酪氨酸激酶抑制剂药物中的用途；
定义：
在某些实施方案中，药学上可接受的形式是药学上可接受的盐,药学上可接受的盐在本领域中是熟知的。药学上可接受的盐的实例是诸如盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸、高氯酸、乙酸、草酸、顺丁烯二酸、酒石酸、柠檬酸、丁二酸或丙二酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、乳酸、三氟乙酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等与化合物形成盐的形式。
“药学上可接受的载体”或“药学上可接受的赋形剂”包括任何和所有溶剂、分散介质、包覆剂、等张剂和吸收延迟剂等。药学上可接受的载体或赋形剂不破坏公开的化合物的药理学活性，并且在以足以递送治疗量的化合物的剂量施用时是无毒的。药物活性物质的所述介质和试剂的使用在本领域中是熟知的。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
(1)本发明提供了一类新的酪氨酸激酶抑制剂，拓宽了现有的具有酪氨酸激酶抑制活性的化合物，可作为先导化合物继续优化；
(2)本发明化合物具有良好的酪氨酸激酶抑制活性，具有成药前景。
具体实施方式
下面通过实施例来具体说明本发明的内容。在本发明中，以下实施例是为了更好地阐述本发明，并不是用来限制本发明的范围。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1
Figure BDA0002786681810000041
步骤1)：将2-溴-6-(溴甲基)吡啶(2.5g，10mmol)和亚磷酸三乙酯(3.0mL,17.5mmol)加入到100mL单口圆底烧瓶中，140℃下反应12小时；反应结束后，减压旋干，柱层析分离纯化得到中间体1为淡黄色油状物2.53g。
1HNMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)7.48(t,1H),7.29-7.34(m,2H),4.14-4.03(m,4H),3.37(d,2H),1.26(t,6H).
步骤2)：在0℃下将中间体2(462mg,1.5mmol)、四氢-2H-吡喃(300mg,3.0mmol)和四氢呋喃(10mL)加入到100mL单口圆底烧瓶中，加入氢化钠(70mg,1.75mmol)，搅拌反应15分钟后，转移至室温继续反应6小时；停止反应，加入水(20mL)，再用二氯甲烷萃取(30mL×2)，收集有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压旋干，柱层析分离纯化得到中间体2无色油状物345mg。
1HNMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)7.45(t,1H),7.30(d,1H),7.08(d,1H),6.32(s,1H),3.58-3.51(m,2H),3.48-3.42(m,2H),2.88(brs,2H),2.33(t,2H).
步骤3)：将中间体2(381mg,1.5mmol)、4-氟苯甲酰胺(348mg,2.50mmol)、碳酸钾1.40g、碘化亚铜300mg、(1R,2R)-N1,N2-二甲基环己烷-1,2-二胺145mg、水(1.5mL)和甲苯(10mL)加入到100mL单口圆底烧瓶中，氮气保护下115℃继续反应14小时；停止反应，加入水(20mL)，再用二氯甲烷萃取(30mL×2)，收集有机相，加入无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压旋干，柱层析分离纯化得到式I化合物为淡黄色油状物，390mg。
1HNMR(400MHz，CDCl3)δ(ppm)8.48(s,1H),7.87-7.65(m,4H),7.46(t,1H),7.32(d,1H),7.11(d,1H),6.30(s,1H),3.57-3.50(m,2H),3.48-3.40(m,2H),2.87(brs,2H),2.35(t,2H).
实施例2酪氨酸激酶抑制活性筛选
所用材料如下：
酪氨酸激酶缓冲液：10mL 1M HEPES(pH7.5)，0.4mL 5％BSA/PBS，0.2mL 0.1MNa3VO4，1mL 5M NaCl加入88.4mL双蒸水中；。
ATP：三磷酸腺苷，Amresco公司。
组织提取物PTK的提取：快速取出小鼠脑组织，称重，加入5倍体积预冷匀浆缓冲液(配方：20mM Tris HCl buffer pH7.5,0.25M蔗糖，2mM EDTA,2mM Na3VO4及蛋白酶抑制剂：1mM PMSF,50μg/ml leupeptin,25μg/ml aprotinin,10μg/ml pepstatin A,2mMdithiothreitol)，匀浆。4℃、1000g离心10min，除去细胞核及细胞碎片。收集上清S1，4℃、10000g离心20min，收集上清S2。保留沉淀P2，代表粗膜蛋白部分。S2包含细胞浆蛋白，用于检测PTK(酪氨酸蛋白激酶)活性。如果检测膜蛋白部分，取P2，加2倍体积裂解缓冲液(配方：50mM HEPES buffer pH7.4,1％Triton X-100,10％甘油，1mM dithiothreitol(DTT)，1mMNa3VO4及蛋白酶抑制剂：1mM benzamidine,10μg/ml aprotinin,10μg/ml leupeptin,2μg/ml pepstatin A)，冰上放置10min。4℃，10000×g离心10min。收集上清液部分S3代表粗膜蛋白，其中包含可溶性膜蛋白，用于检测PTK活性。用BCA蛋白浓度试剂盒(购自碧云天生物技术研究所)检测细胞浆或膜蛋白的蛋白含量。组织提取物在-70℃保存。
96孔板包被：溶解PTK底物。加100μl底物到各孔，盖上盖子，4℃孵育过夜(10-12小时)。用200μl洗脱缓冲液洗涤1次。37℃干燥2h，再用10mM PBS洗涤一次，室温干燥后存放于4℃备用。
实验分组：空白对照：80μl含ATP的1×酪氨酸激酶缓冲液+20μl1×酪氨酸激酶缓冲液；阴性对照：80μl含ATP的1×酪氨酸激酶缓冲液+10μl1×酪氨酸激酶缓冲液+7μl组织提取物+3μl1×酪氨酸激酶缓冲液；阳性对照：80μl含ATP的1×酪氨酸激酶缓冲液+10μl吉非替尼+7μl组织提取物+3μl1×酪氨酸激酶缓冲液(先在室温下让阳性药与酪氨酸激酶组织提取液作用10min，同时阴性对照组的组织提取物也在室温下放置10min，再分别加入80μl含ATP的1×酪氨酸激酶缓冲液)；溶媒对照：80μl含ATP的1×酪氨酸激酶缓冲液+10μlDMSO+7μl组织提取物+3μl 1×酪氨酸激酶缓冲液；待筛药物：80μl含ATP的1×酪氨酸激酶缓冲液+10μl受试药+7μl组织提取物+3μl1×酪氨酸激酶缓冲液。
PTK活性测定：取1mL酪氨酸激酶缓冲液加9mL双蒸水，混匀。组织提取物用酪氨酸激酶缓冲液适当稀释，轻轻混匀，放置于冰上。溶解ATP存储液，48μl加1mL酪氨酸激酶缓冲液，混匀，放置于冰上。按上述实验分组配制各孔加入酶标板后，盖上盖，室温孵育30min。200μl洗脱缓冲液(配方：PBST,含0.05％Tween20的10mM PBS,pH7.4)洗涤，拍干，重复5次。各孔加100μl抗体稀释液(抗体用洗脱缓冲液按1：2000比例稀释)。盖上盖，室温孵育30min。配OPD溶液，4.86mL0.1mol/L柠檬酸液加5.14mL0.2mol/L Na2HPO4液中溶解4mg OPD，加50μl30％H2O2，使其完全溶解，避光。除去抗体液。200μl洗脱缓冲液洗涤，拍干，重复5次。加100μl现配的OPD，室温下避光准确反应7min，阳性孔呈橘黄色。加入100μl 2.5N H2SO4终止反应。492nm测OD值。
样品筛选：初筛样品，测定样品对蛋白质酪氨酸激酶活性的影响，计算抑制率；抑制率(％)＝(阴性对照OD值-样品OD值)/(阴性对照OD值*-空白OD值)×100％；*在求阳性药物抑制率时，式中的阴性对照OD值改为溶媒对照OD值，以扣除DMSO对PTK活性的影响。
实验结果如表1所示，表1列出待筛药物组(对应实施例1-23得到的化合物编号)和阳性药物组(吉非替尼)的实验结果。表1数据显示：阳性药物吉非替尼在100μM浓度下对酪氨酸激酶具有明显的抑制作用，抑制率为41.5％；本发明实施例1-23中化合物(T1-T3、T6-T7、T9-T23)在相同浓度下对酪氨酸激酶的抑制作用较强，抑制率均在38％以上，与阳性对照药物相当或更优，说明这些化合物对于高表达的酪氨酸激酶的肿瘤具有潜在的防治作用，可以其为活性成分制备抗肿瘤药物。
表1化合物对酪氨酸激酶的抑制率
化合物编号 抑制率
吉非替尼 41.8％
式I化合物 35.4％

Claims (8)

1.一种式I所示化合物及其药学上可接受的盐，其具有如下结构：
Figure FDA0004172367400000011
2.根据权利要求1所述的式I化合物或其药学上可接受的盐，所述药学上可接受的盐选自：盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、硫酸盐、乙酸盐、草酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、三氟乙酸盐、甲烷磺酸盐、乙烷磺酸盐、对甲苯磺酸盐或水杨酸盐。
3.一种制备如权利要求1所述的式I化合物的方法，其反应路线如下：
Figure FDA0004172367400000012
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
步骤1)：将2-溴-6-(溴甲基)吡啶和亚磷酸三乙酯加入到反应瓶中，100-160℃下反应4-24小时；反应结束后，经分离纯化得到中间体1；
步骤2)：在0℃下将中间体1、四氢-4H-吡喃-4-酮和有机溶剂加入到反应瓶中，加入碱，搅拌反应15分钟后，转移至室温继续反应2-8小时；经后处理得到中间体2；
步骤3)：将中间体2、4-氟苯甲酰胺、碱、碘化亚铜、(1R,2R)-N1,N2-二甲基环己烷-1,2-二胺、水和甲苯加入到反应瓶中，氮气保护下115℃继续反应6-24小时；经分离纯化得到式I化合物。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：
步骤一：2-溴-6-(溴甲基)吡啶和亚磷酸三乙酯的摩尔比为：1:1-3；反应温度为140℃；反应时间为12小时；
步骤二：中间体1和四氢-4H-吡喃-4-酮的摩尔比为：1:1-3；所述碱为氢化钠；反应时间为6小时；
步骤三：中间体2和4-氟苯甲酰胺的摩尔比为：1:1.5-2.0。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：
步骤一：2-溴-6-(溴甲基)吡啶和亚磷酸三乙酯的摩尔比为：1:1.75；
步骤二：中间体1和四氢-4H-吡喃-4-酮的摩尔比为：1:1.8-2.2。
7.一种药物组合物，其包含权利要求1-2中任一项所述式I化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体。
8.权利要求1-2中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或权利要求7所述的药物组合物在制备治疗与酪氨酸激酶相关疾病的药物中的用途。
CN202011301357.5A 2020-11-19 2020-11-19 一种含酰胺结构的酪氨酸激酶抑制剂及其制备方法 Active CN112250675B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011301357.5A CN112250675B (zh) 2020-11-19 2020-11-19 一种含酰胺结构的酪氨酸激酶抑制剂及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011301357.5A CN112250675B (zh) 2020-11-19 2020-11-19 一种含酰胺结构的酪氨酸激酶抑制剂及其制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN112250675A CN112250675A (zh) 2021-01-22
CN112250675B true CN112250675B (zh) 2023-06-27

Family

ID=74266289

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202011301357.5A Active CN112250675B (zh) 2020-11-19 2020-11-19 一种含酰胺结构的酪氨酸激酶抑制剂及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN112250675B (zh)

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104211632A (zh) * 2013-05-31 2014-12-17 中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所 具有酪氨酸激酶抑制活性的2-吲哚酮衍生物及其制备方法与应用

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104211632A (zh) * 2013-05-31 2014-12-17 中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所 具有酪氨酸激酶抑制活性的2-吲哚酮衍生物及其制备方法与应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN112250675A (zh) 2021-01-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109963844B (zh) 一类抑制并降解酪氨酸蛋白激酶alk的化合物
US7098332B2 (en) 5,8-Dihydro-6H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ones
CN102271515B (zh) 吡唑并嘧啶jak抑制剂化合物和方法
US20030176699A1 (en) Purine inhibitors of protein kinases, G proteins and polymerases
CA2981530A1 (en) Substituted quinazoline compounds and methods of use thereof
EP3312180A1 (en) Use of pteridinone derivative serving as egfr inhibitor
CN102131390A (zh) 三唑并吡啶jak抑制剂化合物和方法
EP2826780B1 (en) Thieno[2,3-d]pyridazine derivatives and therapeutic use thereof for protein kinase inhibition
WO2016124160A1 (zh) 作为egfr抑制剂的嘧啶并嘧啶二酮衍生物及其应用
CN111249283A (zh) 具有抗癌作用的嘧啶衍生物
CN112424202B (zh) 抑制cdk4/6活性化合物的晶型及其应用
EP3661935A1 (en) Substituted pyrazolopyrimidines useful as kinases inhibitors
CN112250675B (zh) 一种含酰胺结构的酪氨酸激酶抑制剂及其制备方法
CN112300138B (zh) 一种含酯基结构的酪氨酸激酶抑制剂及其制备方法
CN101058573B (zh) 2-腙代三嗪类化合物,其制备方法和以该化合物为活性成分的药物组合物及其用途
CN110357852B (zh) 苯并嘧啶类化合物、制备方法和用途
CN117916234A (zh) 作为tyk2/jak1假激酶结构域抑制剂的化合物及合成和使用方法
CN110590778B (zh) 3，10二对甲氧基苯基6，12二氮杂四高立方烷类化合物及合成方法和药物组合物
CN112457365B (zh) 一类靶向蛋白质水解通路的功能分子及其制备和应用
CN113166148B (zh) 作为cdk-hdac双通路抑制剂的杂环化合物
CN116239594B (zh) 6-(咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)喹唑啉衍生物及用途
AU2018278283A1 (en) Pyridoquinazoline derivatives useful as protein kinase inhibitors
Wang et al. Design, synthesis, and anticancer evaluation of arylurea derivatives as potent and selective type II irreversible covalent FGFR4 inhibitors
CN114478318B (zh) 二腈异佛尔酮衍生物、其制备方法及应用
CN110483523B (zh) 一种吡唑并嘧啶衍生物表皮生长因子抑制剂及其制备方法与用途

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant