CN112135834A - 3’,3’-cGAMP的水合物晶体 - Google Patents
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Abstract
3’,3’‑cGAMP通常以冻干产品所知,但冻干产品在制造过程中需要冷冻干燥机,因此扩大规模以进行批量生产自然是受限制的。因此,期望开发一种无需使用冷冻干燥机等特殊装置就可以简单大量获得的晶体。另外,由于现已知的冻干产品或乙醇沉淀物表现出高吸湿性,因此本发明的目的是提供具有优异的可操作性和优异的储存性的晶体。本发明的3’,3’‑cGAMP的水合物晶体,无论是碱金属盐晶体还是游离酸晶体,都比现有粉末具有更低的吸湿性,因而易于在各种用途中处理,并且可用作药物的原料。
Description
【技术领域】
本发明涉及被认为可用作佐剂的物质3’,3’-环化GMP-AMP(3’,3’-cGAMP)的水合物的晶体以及该晶体的制造方法。
【背景技术】
3',3'-cGAMP是一种参与细胞中I型干扰素(IFN)产量增加的信号传导剂,并有望在近年来用作佐剂,抗病毒剂和抗癌剂(专利文献1)。作为合成3',3'-cGAMP的方法,例如,已知有使用衍生自Geobacter sulfreducens和Vibrio cholerae的环状GMP-AMP合酶的合成方法以及化学合成方法(非专利文献1、2、3)。
当前,出售的3',3'-cGAMP是冻干产品或乙醇沉淀物。一些市售产品以晶体性固体(“crystalline solid”)的形式出售,但是购入分析的结果,它们都是无固定形状的,压碎时不会延展,此时的外观例如如图1所示。此外,它具有高度吸湿性,并在几分钟内糖状化。因此,澄清了市售的3’,3’-cGAMP晶体性固体均不是晶体。
【现有技术文献】
【专利文献】
【专利文献1】日本专利再公开2016-079899号公报
【非专利文献】
【非专利文献1】Ming C.Hammond,et al.,PNAS,2016,113(7),1790-1795
【非专利文献2】John J.Mekalanos,et al.,Cell,2012,149,358-370
【非专利文献3】Dinshaw J.Patel,et al.,Cell,2013,153(5),1094-1107
【发明内容】
【发明要解决的问题】
3’,3’-cGAMP通常以冻干产品所知,但冻干产品在制造过程中需要冷冻干燥机,因此扩大规模以进行批量生产自然是受限制的。因此,期望开发一种无需使用冷冻干燥机等特殊装置就可以简单大量获得的晶体。另外,由于现已知的冻干产品或乙醇沉淀物表现出高吸湿性,因此本发明的目的是提供具有优异的可操作性和优异的储存性的晶体。
【解决问题的方法】
本发明人对3’,3’-cGAMP的结晶化深入研究的结果,初次获取了3’,3’-cGAMP的水合物晶体从而完成了本发明。
【发明的效果】
本发明的3’,3’-cGAMP的水合物晶体,无论是碱金属盐晶体还是游离酸晶体,都比现有粉末具有更低的吸湿性,因而易于在各种用途中处理,并且可用作药物的原料。应予说明,在本说明书中,低吸湿性是指(A)在温度为30℃且湿度为43%的条件下静置1天,然后(B)在温度为30℃且湿度为93%的条件下静置3天时,(B)结束时的水分含量为25%以下,(A)结束时的水分含量的差在±5%之内。
另外,本发明的3’,3’-cGAMP的水合物晶体中,碱金属盐晶体可通过将3’,3’-cGAMP水溶液调节为pH4~11后添加有机溶剂的简单的方法制备,游离酸晶体可通过向3’,3’-cGAMP水溶液添加酸降低至pH1~3的简单的方法制备。
【附图说明】
图1表示延展市售3’,3’-cGAMP结晶性固体时的外观照片。
图2表示3’,3’-cGAMP钠盐晶体的晶体照片。
图3表示3’,3’-cGAMP钠盐晶体的X射线衍射谱。
图4表示3’,3’-cGAMP钠盐晶体的红外吸收光谱。
图5表示3’,3’-cGAMP钠盐晶体的热重测量/差热分析结果。
图6表示3’,3’-cGAMP游离酸晶体的晶体照片。
图7表示3’,3’-cGAMP游离酸晶体的X射线衍射谱。
图8表示3’,3’-cGAMP游离酸晶体的红外吸收光谱。
图9表示3’,3’-cGAMP游离酸晶体的热重测量/差热分析结果。
图10表示3’,3’-cGAMP冻干产品的X射线衍射谱。
图11表示3’,3’-cGAMP冻干产品的红外吸收光谱。
图12表示3’,3’-cGAMP冻干产品的热重测量/差热分析结果。
【具体实施方式】
本发明提供以下的结构式表示的3’,3’-cGAMP的水合物晶体。应予说明,本发明中的“3’,3’-cGAMP”在没有特别限定的情况下,指以下所示的c[G(3’,5’)pA(3’,5’)p]。
【化学式1】
本发明的3’,3’-cGAMP的水合物晶体可以是碱金属盐晶体、游离酸晶体中的任一个。即,上述化学式1中所示的X可以是碱金属(Li,Na,K,Rb,Cs,Fr)或者氢(H)。另外,上述碱金属盐晶体中,特别优选钠盐晶体。以下,作为碱金属盐晶体的记载的说明,例示钠盐晶体。
用Karl-Fischer法测定水分含量时,如后述实施例所示,本发明的水合物晶体的水分含量为5.0~30.0%,其中优选5.0~25.0%。即,相对于3’,3’-cGAMP1分子,本发明的3’,3’-cGAMP的水合物晶体结合或附着2.0~16.1分子的水分子,其中优选2.0~12.0分子。
本发明的碱金属盐晶体中,若以优选晶体的钠盐晶体作为例示说明,钠盐晶体将得到立方体晶体(参照图2)。
另外,若使用Cu-Kα射线粉末X射线衍射仪分析本发明的钠盐晶体,如后述实施例所示,在衍射角(2θ)9.3、10.0、11.7、14.4、17.3、19.1、20.3、22.6、23.3、23.8、24.3、25.6、28.2(°)附近示出了特征峰(参照图3)。
应予说明,通常,从粉末X射线衍射中的衍射角(2θ)包括小于5%的误差范围的情况出发,除粉末X射线衍射中的峰的衍射角完全一致的晶体之外,峰的衍射角以小于5%的误差一致的晶体也包括在本发明的钠盐晶体。例如,粉末X射线衍射中,衍射角(2θ)在9.3±0.5、10.0±0.5、11.7±0.6、14.4±0.7、17.3±0.9、19.1±1.0、20.3±1.0、22.6±1.1、23.3±1.2、23.8±1.2、24.3±1.2、25.6±1.3、28.2±1.4(°)具有特征峰。
在测定红外吸收光谱时,本发明的钠盐晶体在3328、3200、1677、1629、1604、1225、1209、1073、1052(cm-1)附近具有特征峰(参照图4)。
应予说明,从红外吸收光谱测定通常包括小于2(cm-1)的误差范围的情况出发,除上述数值与红外吸收光谱中的峰的位置完全一致的晶体之外,以峰小于2cm-1的误差一致的晶体也包括于本发明的钠盐晶体。例如,测定红外吸收光谱时,在3328±1.9、3200±1.9、1677±1.9、1629±1.9、1604±1.9、1225±1.9、1209±1.9、1073±1.9、1052±1.9(cm-1)具有特征峰。
用热重测量/差热分析(TG/DTA)仪(升温速度5℃/分)分析时,本发明的钠盐晶体不具有吸热峰(参照图5)。
本发明的钠盐晶体通过原子吸收分光光度法测定时的钠含量为3~9.5%w/w。即,本发明的钠盐晶体可以包括1~3分子的钠。另外,考虑到溶解时的pH成为中性的高便利性,优选5~7%w/w,即,包括2分子钠的晶体。
另一方面,本发明的游离酸晶体得到八面体晶体(参照图6)。
另外,若使用Cu-Kα射线粉末X射线衍射仪分析本发明的游离酸晶体,如后述实施例所示,在衍射角(2θ)7.0、8.3、8.9、15.1、15.7、18.2、18.6、20.0、20.9、26.5、26.9(°)附近示出了特征峰(参照图7)。
应予说明,通常,从粉末X射线衍射中的衍射角(2θ)包括小于5%的误差范围的情况出发,除粉末X射线衍射中的峰的衍射角完全一致的晶体之外,峰的衍射角以小于5%的误差一致的晶体也包括在本发明的游离酸晶体。例如,在粉末X射线衍射中,衍射角(2θ)在7.0±0.4、8.3±0.4、8.9±0.4、15.1±0.8、15.7±0.8、18.2±0.9、18.6±0.9、20±1.0、20.9±1.0、26.5±1.3、26.9±1.3(°)具有特征峰。
测定红外吸收光谱时,本发明的游离酸晶体在3146、1688、1645、1605、1218、1059(cm-1)附近具有特征峰(参照图8)。
应予说明,从红外吸收光谱测定中通常包括小于2(cm-1)的误差范围的情况出发,除上述数值与红外吸收光谱中的峰的位置完全一致的晶体之外,峰以小于2cm-1的误差一致的晶体也包括在本发明的游离酸晶体。例如,测定红外吸收光谱时,在3146±1.9、1688±1.9、1645±1.9、1605±1.9、1218±1.9、1059±1.9(cm-1)具有特征峰。
用热重测量/差热分析(TG/DTA)仪(升温速度5℃/分)分析时,本发明的游离酸晶体在260℃附近具有吸热峰(图9参照)。
以高效液相色谱法进行纯度检定时,本发明的3’,3’-cGAMP的水合物晶体具有97%以上的纯度,优选为99%以上的纯度。
接下来,说明本发明的3’,3’-cGAMP的水合物晶体的制备方法。用于结晶化的3’,3’-cGAMP可根据酶合成法或化学合成法等公知的方法合成。在进行酶合成中可遵循已知的方法,例如可使用非专利文献1,2所述的方法。反应后,反应液中生成的3’,3’-cGAMP可使用活性炭或反相色谱等纯化。
本发明的碱金属盐晶体的获取可例示钠盐晶体进行说明。可通过将3’,3’-cGAMP水溶液调节至pH4~11,添加有机溶剂从而得到钠盐晶体。
为得到更高收率的晶体,在钠盐晶体化中优选进行以下工序:(1)使3’,3’-cGAMP水溶液在测定波长260nm中的吸光度OD260为500~20000的工序、(2)将3’,3’-cGAMP水溶液加热至50~70℃的工序、(3)向3’,3’-cGAMP水溶液添加酸或碱,将pH调整至4~11的工序、(4)向3’,3’-cGAMP水溶液添加有机溶剂的工序、(5)将3’,3’-cGAMP水溶液冷却至1~20℃的工序。
作为上述工序(3)所使用的酸可例示盐酸、硫酸、硝酸,但不限于此。作为使用的碱可例示氢氧化钠等,但不限于此。为防止快速添加酸以及碱引起的非晶化或快速的晶体析出,优选缓慢添加。
作为上述工序(4)所使用的有机溶剂可例示甲醇、乙醇等碳原子数6以下的醇类、丙酮等酮类、二噁烷等醚类、乙腈等丁腈类、二甲基甲酰胺等酰胺类等,但不限于此。
进一步,(2)和(3)的工序可以同时进行。同样的,(4)(5)的工序也可以同时进行。
游离酸晶体化中,可通过向3’,3’-cGAMP水溶液添加酸降低至pH1~3,优选为pH1.5~2.0,从而得到游离酸晶体。
另外,为得到更高收率的晶体,在游离酸晶体化中优选进行以下工序:(1)将在测定波长260nm中的3’,3’-cGAMP水溶液的吸光度OD260调节为10~15000的工序、(2)将3’,3’-cGAMP水溶液加热至50~70℃的工序、(3)向3’,3’-cGAMP水溶液添加酸,将pH降低至pH1~3的工序、(4)将3’,3’-cGAMP水溶液冷却至1~20℃的工序。作为上述工序(3)所使用的酸可例示盐酸、硫酸、硝酸等,但不限于此。为防止快速添加酸引起的非晶化或快速的晶体析出,优选缓慢添加。
进一步,(2)(3)的工序可以同时进行。同样的,(3)(4)的工序也可以同时进行。
由上述制造方法得到的3’,3’-cGAMP晶体可通过过滤提取后干燥从而得到产品。干燥时,可以适当地利用减压干燥等方法。
【实施例】
以下用实施例具体说明本发明,但本发明明显不限于此。
(实施例1)3’,3’-cGAMP钠盐晶体的制造
遵循公知的方法,酶促地合成3’,3’-cGAMP进行纯化。将纯化得到的OD260为6200、pH8.5的3’,3’-cGAMP溶液(10mL)用恒温箱加温至30℃,搅拌的同时缓缓添加乙醇12mL。向其中加入在调整至pH8.5的3’,3’-cGAMP溶液叠加乙醇得到的晶种20mg,确认到晶种不溶。
添加晶种后,液体温度冷却至5℃从而析出晶体。这样析出的晶体用膜过滤器(3μm)过滤提取得到湿晶体。湿晶体在30℃干燥1小时得到干燥晶体0.96g。
示出对于通过上述实施例1制备的3’,3’-cGAMP钠盐晶体的仪器分析结果。
(仪器分析)
(A)纯度检定
用高效液相色谱法分析由实施例1得到的3’,3’-cGAMP钠盐晶体的纯度的结果,3’,3’-cGAMP纯度为99.7%。应予说明,高效液相色谱法以以下条件进行。
(条件)
柱:Hydrosphere C18(YMC公司制造)
洗脱液:0.1mol/L TEA-P(pH6.0)+乙腈5%
检测方法:由UV260nm检测
另外,该晶体以60℃保管实施了稳定性测试,但未见到3’,3’-cGAMP的分解,在高温条件下仍非常稳定。
(B)晶体形状
将通过实施例1制备的3’,3’-cGAMP钠盐晶体的代表照片示于图2。如图2所示,本发明的3’,3’-cGAMP钠盐晶体为立方体晶体形状。
(C)水分
通过实施例1制备的3’,3’-cGAMP钠盐晶体,由Karl-Fischer法测定刚刚干燥后的晶体的水分含量的结果,水分含量为7.9%。即,相对于3’,3’-cGAMP1分子,刚刚干燥后的本发明的3’,3’-cGAMP钠盐晶体中结合或附着3~4分子的水分子。另外,为了使水分含量稳定,同样测定在43%湿度保管1天的晶体的水分含量的结果,水分含量为18.1%。即,相对于3’,3’-cGAMP1分子,在43%湿度保管1天的本发明的3’,3’-cGAMP钠盐晶体中结合或附着7~8分子的水分子。
(D)粉末X射线衍射
使用X射线衍射仪X’Pert PRO MPD(Spectris)以以下的测定条件测定本发明的3’,3’-cGAMP钠盐晶体的X射线衍射谱。
(测定条件)
靶:Cu
X射线管电流:40mA
X射线管电压:45kV
扫描范围:2θ=4.0~40.0°
预处理:使用玛瑙研钵粉碎
如图3以及表1所示,本发明的3’,3’-cGAMP钠盐晶体在衍射角(2θ)9.3、10.0、11.7、14.4、17.3、19.1、20.3、22.6、23.3、23.8、24.3、25.6、28.2(°)附近示出了特征峰。
【表1】
Pos.[°2Th.] | d-spacing[A] | NET强度[cts] | 相对强度[%] |
9.3 | 9.50 | 4515 | 28.85 |
10.0 | 8.87 | 4443 | 28.39 |
11.7 | 7.56 | 2692 | 17.2 |
11.9 | 7.41 | 1115 | 7.12 |
14.4 | 6.14 | 7073 | 45.2 |
16.7 | 5.32 | 1146 | 7.33 |
17.3 | 5.13 | 1584 | 10.12 |
19.1 | 4.65 | 15649 | 100 |
20.3 | 4.37 | 2080 | 13.29 |
21.0 | 4.23 | 1035 | 6.61 |
21.3 | 4.17 | 954 | 6.1 |
22.6 | 3.94 | 1569 | 10.02 |
23.3 | 3.82 | 2673 | 17.08 |
23.8 | 3.74 | 2346 | 14.99 |
24.3 | 3.67 | 2691 | 17.2 |
25.6 | 3.49 | 8394 | 53.64 |
27.0 | 3.30 | 933 | 5.96 |
27.5 | 3.24 | 1332 | 8.51 |
28.2 | 3.16 | 1803 | 11.52 |
(E)红外吸收光谱
使用傅立叶变换红外分光光度计Spectrum One(Perkin Elmer)通过ATR(AttenuatedTotal Reflectance、衰减全反射)法测定本发明3’,3’-cGAMP钠盐晶体的红外吸收光谱。
本发明的3’,3’-cGAMP钠盐晶体在3328、3200、1677、1629、1604、1225、1209、1073、1052(cm-1)附近具有特征峰。这些结果示于图4。
(F)差示扫描热量分析
用热重测量/差热分析(TG/DTA)仪(升温速度5℃/分)分析的结果,本发明的3’,3’-cGAMP钠盐晶体不具有吸热峰(图5)。
(G)钠含量
使用原子吸收分光光度法测定通过实施例1制备的3’,3’-cGAMP钠盐晶体的钠含量。其结果为6.2%w/w,明显包括2分子的钠。
(实施例2)3’,3’-cGAMP游离酸晶体的制造
遵循公知的方法,酶促地合成3’,3’-cGAMP进行纯化。将纯化得到的OD260为168的3’,3’-cGAMP溶液(360mL)用恒温箱加温至60℃,搅拌的同时缓缓添加1mol/L的盐酸溶液,调整至pH1.5。
添加盐酸溶液后,液体温度冷却至5℃从而析出晶体。这样析出的晶体用玻璃过滤器(17G3)过滤提取得到湿晶体。湿晶体在30℃干燥1小时得到干燥晶体1.63g。
示出对于通过上述实施例2制备的3’,3’-cGAMP游离酸晶体的仪器分析结果。
(仪器分析)
(A)纯度检定
用高效液相色谱法分析由实施例得到的3’,3’-cGAMP晶体的纯度的结果,3’,3’-cGAMP纯度为99.5%。应予说明,高效液相色谱法以以下条件进行。
(条件)
柱:Hydrosphere C18(YMC公司制造)
洗脱液:0.1mol/L TEA-P(pH6.0)+乙腈5%
检测方法:由UV260nm检测
另外,该晶体以60℃保管实施了稳定性测试,但未见到3’,3’-cGAMP的分解,在高温条件下仍非常稳定。
(B)晶体形状
将通过实施例2制备的3’,3’-cGAMP游离酸晶体的代表照片示于图6。如图6所示,本发明的3’,3’-cGAMP游离酸晶体为八面体晶体形状。
(C)水分测定
为了使通过实施例2制备的3’,3’-cGAMP游离酸晶体的水分含量稳定,用Karl-Fischer法测定在43%湿度保管1天的该晶体的水分含量。其结果为,水分含量为24.7%。即,相对于3’,3’-cGAMP1分子,本发明的3’,3’-cGAMP游离酸晶体中结合或附着12~13分子的水分子。
(D)粉末X射线衍射
使用X射线衍射仪X’Pert PRO MPD(Spectris)以以下的测定条件测定本发明的3’,3’-cGAMP游离酸晶体的X射线衍射谱。
(测定条件)
靶:Cu
X射线管电流:40mA
X射线管电压:45kV
扫描范围:2θ=4.0~40.0°
预处理:使用玛瑙研钵粉碎
如图7以及表2所示,本发明的3’,3’-cGAMP游离酸晶体在衍射角(2θ)7.0、8.3、8.9、15.1、15.7、18.2、18.6、20.0、20.9、26.5、26.9(°)附近显示特征峰。
【表2】
Pos.[°2Th.] | d-spacing[A] | NET强度[cts] | 相对强度[%] |
7.0 | 12.6 | 3491 | 47.19 |
8.3 | 10.7 | 2335 | 31.56 |
8.9 | 9.97 | 6295 | 85.09 |
10.6 | 8.32 | 1463 | 19.77 |
11.2 | 7.93 | 1674 | 22.63 |
11.7 | 7.56 | 1303 | 17.61 |
12.4 | 7.16 | 775 | 10.47 |
13.7 | 6.45 | 770 | 10.41 |
15.1 | 5.86 | 2651 | 35.84 |
15.7 | 5.66 | 2804 | 37.9 |
16.1 | 5.51 | 7474 | 10.1 |
16.6 | 5.35 | 1746 | 23.6 |
17.4 | 5.08 | 1018 | 13.77 |
17.8 | 4.99 | 1828 | 24.71 |
18.2 | 4.88 | 3555 | 48.05 |
18.6 | 4.77 | 2985 | 40.35 |
19.3 | 4.60 | 1688 | 22.82 |
20.0 | 4.45 | 2608 | 35.25 |
20.3 | 4.38 | 1008 | 13.63 |
20.9 | 4.24 | 3311 | 44.76 |
22.1 | 4.02 | 1149 | 15.53 |
22.9 | 3.89 | 747 | 10.09 |
23.6 | 3.78 | 875 | 11.83 |
23.9 | 3.73 | 2055 | 27.77 |
24.1 | 3.70 | 1365 | 18.45 |
24.3 | 3.66 | 1110 | 15.01 |
25.1 | 3.55 | 1526 | 20.63 |
26.5 | 3.36 | 7398 | 100 |
26.9 | 3.32 | 7287 | 98.5 |
30.5 | 2.93 | 846 | 11.44 |
(E)红外吸收光谱
使用傅立叶变换红外分光光度计Spectrum One(Perkin Elmer)通过ATR(AttenuatedTotal Reflectance、衰减全反射)法测定本发明3’,3’-cGAMP游离酸晶体的红外吸收光谱。
本发明的3’,3’-cGAMP游离酸晶体在3146、1688、1645、1605、1218、1059(cm-1)附近具有特征峰。这些结果示于图8。
(F)差示扫描热量分析
用热重测量/差热分析(TG/DTA)仪(升温速度5℃/分)分析的结果,本发明的3’,3’-cGAMP游离酸晶体在约260℃附近显示特征性的吸热峰(图9)。
(参考例)3’,3’-cGAMP的冻干产品的制造
通过将3’,3’-cGAMP游离酸晶体500mg悬浮于10mL的水后,用1mol/L的NaOH溶液调整至pH8.5,从而溶解悬浮的3’,3’-cGAMP晶体。
通过适当稀释溶解的3’,3’-cGAMP溶液后,进行冻结干燥从而得到3’,3’-cGAMP的钠盐的冻干产品。
示出对于通过上述参考例制备的3’,3’-cGAMP冻干产品的仪器分析结果。
(仪器分析)
(A)纯度检定
用高效液相色谱法分析由参考例得到的3’,3’-cGAMP冻干产品的纯度的结果,3’,3’-cGAMP纯度为99.7%。应予说明,高效液相色谱法以以下条件进行。
(条件)
柱:Hydrosphere C18(YMC公司制造)
洗脱液:0.1mol/L TEA-P(pH6.0)+乙腈5%
检测方法:由UV260nm检测
(B)粉末X射线衍射
使用X射线衍射仪X’Pert PRO MPD(Spectris)以以下的测定条件测定本发明的3’,3’-cGAMP钠冻干产品的X射线衍射谱。
(测定条件)
靶:Cu
X射线管电流:40mA
X射线管电压:45kV
扫描范围:2θ=4.0~40.0°
预处理:使用玛瑙研钵粉碎
如图10所示,3’,3’-cGAMP冻干产品不显示峰。
(C)红外吸收光谱
使用傅立叶变换红外分光光度计Spectrum One(Perkin Elmer)通过ATR(AttenuatedTotal Reflectance、衰减全反射)法测定本发明3’,3’-cGAMP钠冻干产品的红外吸收光谱。
3’,3’-cGAMP冻干产品在3319、3194、1637、1600、1235、1218、1072、1055(cm-1)附近具有特征峰。这些结果示于图11。
(D)差示扫描热量分析
用热重测量/差热分析(TG/DTA)仪(升温速度5℃/分)分析的结果,3’,3’-cGAMP冻干产品不显示吸热峰(图12)。
(实施例3)将通过上述实施例1以及2得到的晶体和通过参考例得到的冻干产品于填充有饱和硝酸钾溶液并维持在温度30℃、湿度93%的烘干器中静置3天。用Karl-Fischer法比较静置前后的水分含量。得到的结果示于表3。
【表3】
静置前 | 静置后 | Δ水分含量 | |
参考例 | 12.94 | 36.01 | +23.07 |
实施例1 | 18.10 | 21.60 | +3.50 |
实施例2 | 24.71 | 23.09 | -1.62 |
(%)
如表3所示,可知所属于本发明的3’,3’-cGAMP晶体相比于以往的冻干产品耐湿性优异。
Claims (6)
1.一种3’,3’-环化GMP-AMP的水合物晶体。
2.根据权利要求1所述的晶体,其特征在于,
通过Karl-Fischer法测定时的水分为5~30%。
3.根据权利要求1或2所述的水合物晶体,其特征在于,
所述水合物晶体为碱金属盐晶体。
4.一种权利要求1至3中任一项所述的碱金属盐晶体的制造方法,由下述工序构成:
调整3’,3’-环化GMP-AMP水溶液的pH至4~11,添加有机溶剂,获取析出的晶体。
5.根据权利要求1或2所述的水合物晶体,其特征在于,
所述水合物晶体为游离酸晶体。
6.一种权利要求5所述的游离酸晶体的制造方法,由下述工序构成:
向3’,3’-环化GMP-AMP水溶液中添加酸,降低至pH1~3,获取析出的晶体。
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