CN112121147A - 多肽在治疗或预防骨髓瘤药物中的应用、多肽、核酸、药物及重组表达载体 - Google Patents

多肽在治疗或预防骨髓瘤药物中的应用、多肽、核酸、药物及重组表达载体 Download PDF

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Abstract

本发明的实施例提供了一种多肽在治疗或预防骨髓瘤药物中的应用、多肽、核酸、药物及重组表达载体，涉及免疫治疗领域，为预防或治疗骨髓瘤而发明。所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少29‑50位置处氨基酸序列，且所述多肽的氨基酸序列长度小于200个氨基酸。本发明可用于骨髓瘤的预防或治疗中。

Description

多肽在治疗或预防骨髓瘤药物中的应用、多肽、核酸、药物及 重组表达载体
技术领域
本发明涉及生物医药领域，尤其涉及一种多肽在治疗或预防骨髓瘤药物中的应用、多肽、核酸、药物及重组表达载体。
背景技术
Dickkopf-1(DKK1)为dickkopf蛋白家族的成员，为Wnt信号传导的负调节剂。Wnt信号传导在骨发育及骨形成中具有重要作用。经研究表明，DKK1在几乎所有的骨髓瘤患者的肿瘤细胞中高表达，而在除胎盘和前列腺外的正常组织器官中不表达。
既往研究尝试采用鼠源性DKK1DNA疫苗应用于骨髓瘤MOPC-21小鼠模型来验证DKK1DNA与骨髓瘤细胞的关系。但是DKK1DNA疫苗为鼠源性，且为DNA类型，因此涉及到伦理问题。另外采用DNA类型的疫苗容易导致免疫耐受性问题。
发明内容
本发明的实施例的主要目的在于，提供一种多肽在治疗或预防骨髓瘤药物中的应用、多肽、核酸、药物及重组表达载体，以预防或治疗骨髓瘤。
为了解决上述技术问题，本发明实施例提供了一种多肽在制备预防或治疗骨髓瘤药物中的应用，所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少29-50位置处氨基酸序列，且所述多肽的氨基酸序列长度小于200个氨基酸。
可选的，所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少29-61位置处的氨基酸序列。
可选的，所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少29-76位置处的氨基酸序列。
可选的，所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少3-50位置处的氨基酸序列。
可选的，所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少3-76位置处的氨基酸序列。
可选的，所述多肽的氨基酸序列仅选自DKK1蛋白的氨基酸序列，且为DKK1蛋白的氨基酸序列上的连续序列。
可选的，所述多肽的氨基酸序列为选自DKK1蛋白的氨基酸序列3-76位置处的氨基酸序列。
可选的，所述骨髓瘤为多发性骨髓瘤。
可选的，所述多发性骨髓瘤包括意义未明单克隆免疫球蛋白血症、冒烟型骨髓瘤及症状性骨髓瘤。
相应的，本发明实施例还提供了一种多肽，所述多肽的氨基酸序列长度小于200个氨基酸；且
所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少29-50位置氨基酸序列；或者
所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少29-61位置处的氨基酸序列；或者
所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少29-76位置处的氨基酸序列；或者
所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少3-50位置处的氨基酸序列；或者
所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少3-76位置处的氨基酸序列。
可选的，所述多肽的氨基酸序列仅选自DKK1蛋白的氨基酸序列，且为DKK1蛋白的氨基酸序列上的连续序列。
可选的，所述多肽的氨基酸序列为选自DKK1蛋白的氨基酸序列3-76位置处的氨基酸序列。
相应的，本发明实施例还提供了一种核酸，所述核酸编码本发明实施例提供的多肽。
相应的，本发明实施例还提供了一种药物，所述药物包括本发明实施例提供的多肽。
可选的，所述药物为疫苗。
相应的，本发明实施例还提供了一种重组表达载体，所述重组表达载体含有编码本发明实施例提供的多肽的核苷酸序列。
本发明实施例提供了一种多肽在治疗或预防骨髓瘤药物中的应用、多肽、核酸、药物及重组表达载体。所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少29-50位置处氨基酸序列，且所述多肽的氨基酸序列长度小于200个氨基酸。具有该氨基酸长度与位置的多肽包括多重HLA-I和HLA-II表位，并能够被抗原呈递细胞进行正确切割，从而结合到具有各种HLA类型的细胞上而分别诱导CTL细胞和Th细胞。能够同时诱导CTL细胞和Th细胞是具有理想免疫治疗效果的体现。另外，至少29-50位置处的具有一定长度的氨基酸序列可被抗原呈递细胞进行多种类型的切割，从而引发多重免疫反应，产生协同作用。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明实施例提供的多肽的CTL细胞免疫反应实验结果图；
图2为本发明实施例提供的多肽的增殖实验与Th细胞免疫反应实验结果图；
图3为本发明实施例提供的多肽的体液免疫反应实验结果图；
图4为本发明实施例提供的多肽在健康人外周血细胞免疫反应结果图；
图5为本发明实施例提供的多肽在多发性骨髓瘤患者外周血细胞免疫反应结果图。
具体实施方式
下面将结合附图对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明实施例提供了一种多肽在制备预防或治疗骨髓瘤药物中的应用，所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少29-50位置处氨基酸序列，且所述多肽的氨基酸序列长度小于200个氨基酸。
在免疫生物学中，HLA是一个重要的研究领域。HLA(human leukocyte antigen，人类白细胞抗原)是人类的主要组织相容性复合体(MHC)的表达产物。任何T细胞对于特定多肽绑定到特定HLA分子的复合体都是特异性的。
HLA分子包括HLA-I类分子和HLA-II类分子。HLA-I类分子存在三种高度多态性的同型抗原：HLA-A，HLA-B，HLA-C，它们能被细胞毒性T细胞识别。HLA-II分子存在三种高度多态性的同型抗原：HLA-DR，HLA-DQ，HLA-DP，他们能够被辅助T细胞识别。一个特殊的人类个体能够表达3-6个不同的HLA-I分子和3-8个不同的HLA-II分子。被特异性结合的HLA-I类分子能够诱导CD8、CTL等细胞，被特异性结合的HLA-II类分子能够诱导CD4、Th等细胞。多肽类药物尤其是疫苗需要具有能够特异性结合到这些HLA分子上的表位从而诱导免疫效应，这是多肽类药物尤其是疫苗在人体中发挥作用的基础。
在DKK1药物及疫苗的研制过程中，曾采用DKK1蛋白的氨基酸序列上的9-11个长度范围内的氨基酸序列多肽进行研究。这些多肽仅具有对应于HLA-I类分子的表位，引发较为单一的免疫反应。本发明实施例采用DKK1蛋白的氨基酸序列上的至少29-50位置处的氨基酸序列，能够同时具有对应于HLA-I类分子(例如A0201/P36、A1/P35、A10201/P32等)的表位与HLA-II类分子(例如DRB1*0301/P26、DRB1*0701/P26、DRB1*0401/P30等)的表位，从而引发多种免疫反应，因此，预防或治疗效果较9-11个长度范围内的氨基酸序列多肽更好。
另外，由于全长的DKK1蛋白序列为人类自有的蛋白序列，难以诱导免疫反应，因此，本发明实施例将氨基酸序列的长度设置为小于200个氨基酸，具体的，例如小于180、150、120、100、90、80个氨基酸长度。即，本发明实施例的多肽的氨基酸序列的长度至少为22个氨基酸长度，并且小于200个氨基酸长度。对于本发明的具有一定氨基酸长度的多肽，抗原呈递细胞例如树突细胞可以根据人类个体所具有的独特的HLA分子亚类型对多肽进行正确切割，从而形成适合个体CD4或CD8细胞的表位。另外，即是针对同一个体，抗原呈递细胞例如树突细胞也可以对具有一定长度的多肽进行不同类型的切割，从而产生针对多种HLA分子亚类型的多重表位，从而引发多重免疫反应，产生协同作用。多重免疫反应包括但不限于细胞(CD4、CD8)免疫反应、体液免疫反应等。因此，本发明实施例提供的多肽具有广谱、强大的免疫激活效应。
本发明实施例提供了一种多肽在治疗或预防骨髓瘤药物中的应用。所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少29-50位置处氨基酸序列，且所述多肽的氨基酸序列长度小于200个氨基酸。具有该氨基酸长度与位置的多肽包括多重HLA-I和HLA-II表位，并能够被抗原呈递细胞进行正确切割，从而结合到具有各种HLA类型的细胞上而分别诱导CTL细胞和Th细胞。能够同时诱导CTL细胞和Th细胞是具有理想免疫治疗效果的体现。另外，至少29-50位置处的具有一定长度的氨基酸序列可被抗原呈递细胞进行多种类型的切割，从而引发多重免疫反应，产生协同作用。
在本发明提供的又一个实施例中，所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少29-61位置处的氨基酸序列。具有该位置和长度的氨基酸序列的多肽进一步具有对应于HLA-I类分子亚型B5103/P51的表位。
在本发明提供的又一个实施例中，所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少29-76位置处的氨基酸序列。具有该位置和长度的氨基酸序列的多肽进一步具有对应于HLA-I类分子亚型B7/P59、B5102/P68、B5101/P68、B62/P66、A0201/P66的表位。
在本发明提供的又一个实施例中，所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少3-50位置处的氨基酸序列。具有该位置和长度的氨基酸序列的多肽进一步具有对应于如下HLA-I类分子亚型的表位：B5103/P5、B5201/P4、A0201/P3、A0205/P13、CW0401/P12、A0205/P11、A0201/P11、A0201/P25、CW0401/P24、B7/P24、A0201/P20；以及具有对应于如下HLA-II类分子亚型的表位：DRB1*1501/P7、DRB1*0101/P10。
在本发明提供的又一个实施例中，所述多肽的氨基酸序列仅选自DKK1蛋白的氨基酸序列，且为DKK1蛋白的氨基酸序列上的连续序列。与其他的多肽类药物尤其是疫苗不同，本发明实施例完全采用自有蛋白上氨基酸序列的独特截取方式，而不对序列进行其他修饰。
在本发明提供的又一个实施例中，所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少3-76位置处的氨基酸序列。具有该位置和长度的氨基酸序列的多肽具有如上提及的所有HLA-I类分子亚型和HLA-II类分子亚型，即HLA-I类的：A0201/P36、A1/P35、A10201/P32、B5103/P51、B7/P59、B5102/P68、B5101/P68、B62/P66、A0201/P66、B5103/P5、B5201/P4、A0201/P3、A0205/P13、CW0401/P12、A0205/P11、A0201/P11、A0201/P25、CW0401/P24、B7/P24、A0201/P20及HLA-II类的：DRB1*0301/P26、DRB1*0701/P26、DRB1*0401/P30、DRB1*1501/P7、DRB1*0101/P10。
在本发明能提供的又一实施例中，该多肽的氨基酸序列为DKK1蛋白的氨基酸序列3-76位置处的氨基酸序列。具有该位置和长度的氨基酸序列的多肽具有如上提及的所有HLA-I类分子亚型和HLA-II类分子亚型。该多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示：
Phe-Leu-Ser-Glu-Leu-Gln-Ala-Phe-Ala-Leu-Val-Phe-Val-Ala-Met-Val-Ala-Ala-Ala-Leu-Gly-Gly-His-Pro-Leu-Leu-Gly-Val-Ser-Ala-Thr-Leu-Asn-Ser-Val-Leu-Asn-Ser-Asn-Ala-Ile-Lys-Asn-Leu-Pro-Pro-Pro-Leu-Gly-Gly-Ala-Ala-Gly-His-Pr o-Gly-Ser-Ala-Val-Ser-Ala-Ala-Pro-Gly-Ile-Leu-Tyr-Pro-Gly-Gly-Asn-Lys-Tyr-Gl n-Thr。
本发明实施例提供的多肽能够诱导包括HLA-A，HLA-B，HLA-C，HLA-DR在内的多种常见HLA表位的小鼠的Th1细胞应答，并且能诱导特异性CTL和CD4+T细胞，另外还可以诱导出体液免疫。本发明实施例的多肽还可以增强健康供者和多发性骨髓瘤患者PBMC中DKK1短肽特异性CTL及CD4+T细胞。
在本发明提供的又一个实施例中，所述骨髓瘤为多发性骨髓瘤。即，多肽能够预防或治疗骨髓瘤，尤其是多发性骨髓瘤。并且对于骨髓瘤尤其是多发性骨髓瘤的预防和治疗涉及到相关疾病的整个发展、演进过程。例如，多发性骨髓瘤包括冒烟型骨髓瘤，而冒烟型骨髓瘤又是从意义未明单克隆免疫球蛋白血症演变发展而来，进而又发展为症状性骨髓瘤。本发明实施例的多肽能够对各个进程中的疾病阶段进行相应的预防或治疗。
与上述多肽在制备预防或治疗骨髓瘤药物中的应用的实施例相对应的，本发明一实施例还提供了一种多肽，所述多肽的氨基酸序列长度小于200个氨基酸；且所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少29-50位置氨基酸序列；或者所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少29-61位置处的氨基酸序列；或者所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少29-76位置处的氨基酸序列；或者所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少3-50位置处的氨基酸序列；或者所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少3-76位置处的氨基酸序列。
在本发明的又一实施例中，所述多肽的氨基酸序列仅选自DKK1蛋白的氨基酸序列，且为DKK1蛋白的氨基酸序列上的连续序列。
在本发明的又一实施例中，所述多肽的氨基酸序列为选自DKK1蛋白的氨基酸序列3-76位置处的氨基酸序列。
上述各实施例提供的多肽相关解释说明参见前述多肽在制备预防或治疗骨髓瘤药物中的应用的对应实施例，此处不再赘述。另外上述实施例具有与相应的应用实施例相对应的有益效果，此处也不再赘述。
与上述实施例相对应的，本发明实施例还提供了一种核酸，所述核酸编码上述实施例提供的多肽。
与上述实施例相对应的，本发明实施例还提供了一种药物，其特征在于，所述药物包括上述实施例提供的多肽。可选的，所述药物为疫苗。
与上述实施例相对应的，本发明实施例还提供了一种重组表达载体，所述重组表达载体含有编码上述实施例提供的多肽的核苷酸序列。
上述各实施例的相关解释说明参见前述多肽在制备预防或治疗骨髓瘤药物中的应用的对应实施例，此处不再赘述。另外上述实施例具有与相应的应用实施例相对应的有益效果，此处也不再赘述。
为了更好的说明本发明，下面提供了几个具体实施例进行举例说明。以下实施例仅为示例，并不限定本发明的保护范围。
实施例DKK13-76多肽的合成
采用化学合成法于安德森癌症中心合成具有SEQ ID NO:1序列的多肽。纯度高于98％。该SEQ ID NO:1为：
Phe-Leu-Ser-Glu-Leu-Gln-Ala-Phe-Ala-Leu-Val-Phe-Val-Ala-Met-Val-Ala-Ala-Ala-Leu-Gly-Gly-His-Pro-Leu-Leu-Gly-Val-Ser-Ala-Thr-Leu-Asn-Ser-Val-Leu-Asn-Ser-Asn-Ala-Ile-Lys-Asn-Leu-Pro-Pro-Pro-Leu-Gly-Gly-Ala-Ala-Gly-His-Pro-Gly-Ser-Ala-Val-Ser-Ala-Ala-Pro-Gly-Ile-Leu-Tyr-Pro-Gly-Gly-Asn-Lys-Tyr-Gln-Thr。
为了预测可能的包含HLA-I和HLA-II的人DKK1肽，使用免疫表位数据库(IEBD)推荐方法来分析人DKK1蛋白的氨基酸序列。该程序分析出了包含整个DKK1蛋白的74个氨基酸长度的序列。该DKK13-76多肽对包括HLA–DR1、-DR4、–DR7在内的多个HLA-I和HLA-II表位有较强的亲和力。该76-mer多肽还包含了一个10-merCTL表位(DKK120–28-A2多肽)。
性能测试
为了更好的说明实施例的有益效果，对上述实施例进行了性能测试。
性能测试1DKK13-76多肽的CTL细胞免疫反应实验
1、实验分组
实验组：100μL的DKK13-76多肽
对照组：100μL的DKK120-28多肽
2、实验方法
室温下，将实验组与对照组的多肽分别溶于DMSO后，再与PBS混合，与等量氟氏不完全佐剂(Sigma)乳化，按100μL(含100μg肽段)每只注射入人HLA-A2转基因小鼠体内，免疫4次。两周后处死小鼠，取脾脏。然后通过四聚体标记检测实验组与对照组的多肽诱导的DKK120-28特异性CTL细胞以及DKK160-68特异性CTL细胞的能力。
3、实验结果
如图1中的A所示，图中数字反应了实验组与对照组多肽所诱导的CD8+细胞在全部CD8+细胞中的占比。可见，实验组与对照组的多肽均能够诱导DKK120-28特异性CTL细胞，但实验组多肽的诱导效果更好，尤其是在第二次免疫和第三次免疫之后。
如图1中的B所示，7-AAD为7-氨基放线菌素，CFSE为荧光染料。E:T为效应细胞(effector cell)与靶细胞(target cell)的比例。对照组与实验组的多肽均达到了良好的效果。
如图1中的C所示，图中数字反应了实验组与对照组多肽所诱导的CD8+细胞在全部CD8+细胞中的占比。可见，实验组多肽能够诱导DKK160-68特异性CTL细胞，而对照组多肽无法显著诱导DKK160-68特异性CTL细胞。因此，本发明实施例通过多重表位诱导了CTL细胞。
图1的内容还说明了抗原呈递细胞APC能够将DKK13-76多肽进行正确的识别、处理和呈递，从而产生了上述的DKK120-28特异性CTL细胞免疫反应及DKK160-68特异性CTL细胞免疫反应。
性能测试2DKK13-76多肽的增殖实验与Th细胞免疫反应实验
1、实验方法
增殖实验
采用实施例DKK13-76多肽对HLA-DR4转基因小鼠进行冲击，然后将该小鼠的自体的负载有实施例DKK13-76多肽的树突细胞与自体T细胞共同培养，进行CSFE增殖实验，从而检查T细胞的增殖情况。
Th细胞免疫反应实验
室温下，将DKK13-76多肽溶于PBS中，混合后，与等量弗氏不完全佐剂(Sigma)乳化，按100μL(含100μg肽段)每只注射入人HLA-DR4转基因小鼠体内，免疫4次。两周后处死小鼠，取脾脏。然后通过检测IFNγ来验证实施例DKK13-76多肽的Th细胞免疫反应。
2、实验结果
增殖实验
如图2中的A所示，为经过实施例DKK13-76多肽冲击过的HLA-DR4转基因小鼠的树突细胞与自身T细胞共同培养后的CSFE增殖实验，该实验证明，T细胞可以增殖。
如图2中的B所示，进一步证实了，在增殖实验中，扩增的T细胞既包括CD4+T淋巴细胞也包括CD8+T淋巴细胞。
Th细胞免疫反应实验
如图2中的C所示可见，IFN-γ相对于基线值显著增加，而FOXP3相对于基线值没有显著增加。说明了CD4+T淋巴细胞主要表达起到正向免疫作用的IFN-γ，而不表达非调节T细胞FOXP3。
图2的内容还说明了抗原呈递细胞APC能够将DKK13-76多肽进行正确的识别、处理和呈递，从而产生了上述的Th细胞免疫反应。
性能测试3DKK13-76多肽的体液免疫反应实验
1、实验方法
进一步验证树突细胞是否识别、处理和呈递DKK1蛋白，从而诱导DKK1特异性体液免疫。发明人检测了经DKK13-762多肽免疫后，HLA-A2转基因小鼠和HLA-DR4转基因小鼠血清中的DKK1抗体。
2、实验结果
如图3中的A所示，应用实施例DKK13-76多肽接种HLA-A2转基因小鼠后，可诱导出抗人DKK1抗体，并且OD值显著高于对照组的DKK120-28多肽。
如图3中的B所示，应用实施例DKK13-76多肽接种HLA-DR4转基因小鼠后，可诱导出抗人DKK1抗体。
图3说明了树突细胞能够识别、处理和呈递DKK1蛋白，并诱导DKK1特异性体液免疫。
性能测试4DKK13-76多肽在健康人中的外周血细胞免疫反应
1、实验方法
用实施例DKK13-76多肽冲击树突细胞，通过检测IFNγ来验证其能否诱导DKK120-28-A2多肽特异性CTL细胞。用DKK13-76多肽冲击自体树突细胞，检测能否诱导DKK120-28A2多肽特异性CTL细胞的扩增。
2、实验结果
如图4中的A所示，在具有HLA-A0201(HLA-I类)、HLA-DR4(HLA-II类)亚型的健康供者1中，经DKK13-76多肽免疫后均诱导出分泌IFN-r的CD8+T细胞及CD4+T细胞。
如图4中的B所示，在具有HLA-A1,A32；HLA-B B35,B57HLA-DR1亚型的健康供者2中，经DKK13-76多肽免疫后也能够诱导出CD4+T细胞。
如图4中的C所示，在具有HLA-A3,A32；HLA-B B51,B55HLA-DR 11亚型的健康供者3中，经DKK13-76多肽免疫后也能够诱导出CD4+T细胞。
另外，图4还表明，DKK13-76多肽冲击的树突细胞交叉呈递诱导了DKK120-28-A2多肽特异性CTL细胞的扩增。DKK13-76多肽能在不同HLA表型健康人外周血诱导出强有力的免疫反应，诱导出分泌IFN-r的CD8+T细胞及CD4+T细胞。证明了本发明实施例对骨髓瘤的预防效果。
性能测试5DKK13-76多肽在多发性骨髓瘤患者中的外周血细胞免疫反应
1、实验方法
用实施例DKK13-76多肽冲击树突细胞，通过检测IFNγ来验证其能否诱导DKK120-28-A2多肽特异性CTL细胞。用DKK13-76多肽冲击自体树突细胞，检测能否诱导DKK120-28A2多肽特异性CTL的扩增。
2、实验结果
如图5中的A所示，在具有HLA-A0201，DR4+亚型的多发性骨髓瘤的患者中，经DKK13-76多肽免疫后能够诱导出CD8+T细胞。
如图5中的B所示，在具有HLA-A0201，DR4+亚型的多发性骨髓瘤的患者中，经DKK13-76多肽免疫后能够诱导出CD4+T细胞。
图5还表明经本实施例DKK13-76多肽冲击的树突细胞交叉呈递诱导了DKK120-28-A2多肽特异性CTL细胞的扩增。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。

Claims (16)

1.一种多肽在制备预防或治疗骨髓瘤药物中的应用，其特征在于，
所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少29-50位置处氨基酸序列，且
所述多肽的氨基酸序列长度小于200个氨基酸。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，
所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少29-61位置处的氨基酸序列。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，
所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少29-76位置处的氨基酸序列。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，
所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少3-50位置处的氨基酸序列。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，
所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少3-76位置处的氨基酸序列。
6.根据权利要求1-5任一项所述的应用，其特征在于，
所述多肽的氨基酸序列仅选自DKK1蛋白的氨基酸序列，且为DKK1蛋白的氨基酸序列上的连续序列。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，
所述多肽的氨基酸序列为选自DKK1蛋白的氨基酸序列3-76位置处的氨基酸序列。
8.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，
所述骨髓瘤为多发性骨髓瘤。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，
所述多发性骨髓瘤包括意义未明单克隆免疫球蛋白血症、冒烟型骨髓瘤及症状性骨髓瘤。
10.一种多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列长度小于200个氨基酸；且
所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少29-50位置氨基酸序列；或者
所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少29-61位置处的氨基酸序列；或者
所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少29-76位置处的氨基酸序列；或者
所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少3-50位置处的氨基酸序列；或者
所述多肽的氨基酸序列包括DKK1蛋白的氨基酸序列的至少3-76位置处的氨基酸序列。
11.根据权利要求10所述的多肽，其特征在于，
所述多肽的氨基酸序列仅选自DKK1蛋白的氨基酸序列，且为DKK1蛋白的氨基酸序列上的连续序列。
12.根据权利要求11所述的多肽，其特征在于，
所述多肽的氨基酸序列为选自DKK1蛋白的氨基酸序列3-76位置处的氨基酸序列。
13.一种核酸，其特征在于，所述核酸编码根据权利要求10-12所述的多肽。
14.一种药物，其特征在于，所述药物包括根据权利要求10-12所述的多肽。
15.根据权利要求14所述的药物，其特征在于，所述药物为疫苗。
16.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体含有编码如权利要求10-12所述的多肽的核苷酸序列。
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