CN112120212B - 透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒及其制备方法与应用。所述纳米颗粒制备W2/O2/(O1/W1)型多重乳液的方法包括:使聚甘油蓖麻醇酯与玉米油于65℃混合形成第一油相,之后将氯化钠和明胶的混合溶液与所获第一油相混合并采用高压微射流进行均质处理,制得W2/O2型初级乳液;使第二油相与所述纳米颗粒的悬浮液混合并进行高剪切处理,制得O1/W1型皮克林乳液;以及,采用高压均质技术,使所述W2/O2型初级乳液与O1/W1型皮克林乳液混合,制得W2/O2/(O1/W1)型多重乳液。本发明多重乳液的制备方法简单,反应条件温和,适宜工业化生产,可用于食品,医药以及化妆品等领域。
Description
技术领域
本发明属于技术领域,具体涉及一种透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒及其制备方法 与应用,尤其涉及一种中空麦醇溶蛋白-EGCG/透明质酸-EGCG纳米颗粒及其制备方法,以及 中空麦醇溶蛋白-EGCG/透明质酸-EGCG纳米颗粒于制备W2/O2/(O1/W1)多重乳液中的应用。
背景技术
表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)具有优良的抗菌性和抗氧化活性,能够清除自由基, 被广泛用作功能食品添加剂。然而多酚含有的多个酚羟基基团使得它们对光、高温和碱性条 件不稳定,同时生物利用度也有所降低。许多研究表明多酚与生物聚合物的共价结合可能増 加其物理稳定性,抗氧化活性和生物利用度。
多重乳液的制备在食品、医药、化妆品和农业等领域的广泛应用而成为研究的热点。与 传统的乳液相比,多重乳液由于内部结构的划分,在食品工业中的应用具有独特的优势,例 如作为营养活性成分的递送载体,作为敏感性活性成分的保护层,油溶性和水溶性成分的双 向递送,药物控释等。然而,由于油滴的絮凝,聚结和内外水相组分的迁移导致多重乳液的 热力学不稳定特性,其应用受到很大限制。近年来,颗粒型乳化剂的研究引起了人们广大的 兴趣,其能够不可逆的吸附于油水界面,形成界面层,赋予乳液良好的稳定性。其中采用美 拉德反应制备的蛋白质/多糖食品级生物大分子已被发现具有稳定乳液的潜力。由于单独蛋白 稳定的乳液不稳定,容易发生液滴聚结和Ostwald熟化,美拉德反应可显著改善食品中蛋白 质的热稳定性和乳化性。
因此,因此如何构建抗氧化性纳米颗粒,并将其应用于多重乳液的制备,对提高多重乳 液的稳定性和脂质的抗氧化性,扩大其在食品,医药以及化妆品领域的应用具有重要意义。
发明内容
本发明的主要目的在于提供一种透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒及其制备方法与应 用,以克服现有技术的不足。
为实现前述发明目的,本发明采用的技术方案包括:
本发明实施例提供了一种透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒的制备方法,其包括:
使包含麦醇溶蛋白、EGCG、氢氧化钠、乙醇和水的第一混合反应体系于25℃反应24h, 获得麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物,之后使包含麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物、碳酸钠、乙 醇和水的第二混合反应体系于25℃反应4h,获得中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒;
使包含透明质酸、1,3-碳二亚胺、二甲氨基吡啶、DMSO和水的第三混合反应体系于25℃ 活化处理1h,之后向所述第三混合反应体系加入EGCG,并于60-65℃反应4h,获得透明质 酸-EGCG共价复合物;
以及,使包含所述中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒、透明质酸-EGCG共价复合物和水的 第四混合反应体系于25℃反应2h,获得中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒,即透明 质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒。
本发明实施例还提供了由前述方法制备的透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒。
本发明实施例还提供了前述的透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒于制备W2/O2/(O1/W1) 型多重乳液的中用途。
本发明实施例还提供了一种W2/O2/(O1/W1)型多重乳液的制备方法,其包括:
提供前述的透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒;
使聚甘油蓖麻醇酯与玉米油于65℃混合形成第一油相,之后将作为第一水相的氯化钠和 明胶的混合溶液与所获第一油相混合并采用高压微射流进行均质处理3min,制得W2/O2型初 级乳液;
使第二油相与作为第二水相的透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒的悬浮液混合并进行 高剪切处理3min,制得O1/W1型皮克林乳液;
以及,采用高压均质技术,使所述W2/O2型初级乳液与O1/W1型皮克林乳液混合,制得 W2/O2/(O1/W1)型多重乳液。
本发明实施例还提供了由前述方法制备的W2/O2/(O1/W1)型多重乳液。
本发明实施例还提供了前述的W2/O2/(O1/W1)型多重乳液于食品、医药或化妆品领域中的 用途。
在本发明中,与实心麦醇溶蛋白纳米颗粒相比,中空麦醇溶蛋白纳米颗粒对EGCG有更 高的封装度。中空麦醇溶蛋白稳定的W2/O2/(O1/W1)型多重乳液不稳定,容易出现聚集和聚结 现象。EGCG的醌类物质与玉米醇溶蛋白的亲核基团相互作用并形成共价键使得玉米醇溶蛋 白的溶解性和乳化性增强,可以提高W2/O2/(O1/W1)型多重乳液的稳定。透明质酸作为一种 多糖可以与醇溶蛋白静电复合提高醇溶蛋白的稳定性和乳化性。透明质酸作为一种多糖可以 与麦醇溶蛋白静电复合改善麦醇溶蛋白的疏水性,提高麦醇溶蛋白纳米颗粒的稳定性和乳化 性,可以进一步提高其稳定的W2/O2/(O1/W1)型多重乳液的稳定性。EGCG具有出色的生理功 效,例如抗氧化和抗癌等作用。但是由于其固有的物理化学不稳定性和在水性介质中的低溶 解度,其口服生物利用度较低。麦醇溶蛋白共价结合EGCG可以对EGCG进行包埋提高其溶 解度。透明质酸对EGCG也有包埋作用,与麦醇溶蛋白在包埋EGCG提高其水溶性和保护其 抵抗环境应力方面有协同作用。同时,EGCG同时嵌入麦醇溶蛋白和透明质酸中,可以更好 的增强多重乳液的抗氧化活性。与中空麦醇溶蛋白-EGCG/透明质酸稳定的多重乳液相比,麦 醇溶蛋白-EGCG/透明质酸-EGCG稳定的多重乳液具有更强的抗氧化能力。与中空麦醇溶蛋白 /EGCG稳定的多重乳液相比,中空麦醇溶蛋白-EGCG/透明质酸-EGCG稳定的多重乳液具有 高稳定性,在食品应用方面有利于提高货架期。而且与中空麦醇溶蛋白/EGCG稳定的多重乳 液相比,中空麦醇溶蛋白-EGCG/透明质酸-EGCG稳定的多重乳液还可以提高EGCG的生物 利用率。此多重乳液制备方法简单,利于实现工业化生产,扩大了多重乳液在食品工业上的 应用。
与现有技术相比,本发明的有益效果在于:
本发明首先制备得到中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒和透明质酸-EGCG共价复合物,之 后中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒和透明质酸-EGCG共价复合物通过静电络合形成中空麦 醇溶蛋白-EGCG/透明质酸-EGCG纳米颗粒,EGCG的醌类物质与玉米醇溶蛋白的亲核基团相 互作用并形成共价键使得玉米醇溶蛋白的溶解性和乳化性增强,可以提高W2/O2/(O1/W1)型多 重乳液的稳定,使得本发明制备的W2/O2/(O1/W1)型多重乳液具有更好的乳化性、稳定性和抗 氧化性,同时提高了EGCG的生物利用率,且本发明制备的中空麦醇溶蛋白-EGCG/透明质酸 -EGCG纳米颗粒能够在液滴表面进行吸附,通过形成致密的界面膜抑制液滴的聚结和Ostwald 熟化,利于多重乳液的稳定;另外本发明提供的W2/O2/(O1/W1)型多重乳液的制备方法简单, 易于实现工业化生产,扩大了多重乳液在食品工业上的应用。
附图说明
为了更清楚地说明本申请实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例或现有技术 描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本申请中记 载的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根 据这些附图获得其他的附图。
图1为实施例2以及对比例1、2中制备的不同纳米颗粒的粒径图;
图2为实施例2以及对比例1、2中制备的不同纳米颗粒形成的多重乳液的粒径图;
图3为实施例1中制备的中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒在不同浓度下形成 的多重乳液粒径的变化图;
图4为实施例2以及对比例1、2制备的不同纳米颗粒形成的多重乳液的抗氧化活性图。
具体实施方式
鉴于现有技术的缺陷,本案发明人经长期研究和大量实践,得以提出本发明的技术方案, 下面将对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例是本发明一部分 实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创 造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
本发明实施例的一个方面提供了一种透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒的制备方法, 其包括:
使包含麦醇溶蛋白、EGCG、氢氧化钠、乙醇和水的第一混合反应体系于25℃反应24h, 获得麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物,之后使包含麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物、碳酸钠、乙 醇和水的第二混合反应体系于25℃反应4h,获得中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒;
使包含透明质酸、1,3-碳二亚胺、二甲氨基吡啶、DMSO和水的第三混合反应体系于25℃ 活化处理1h,之后向所述第三混合反应体系加入EGCG,并于60-65℃反应4h,获得透明质 酸-EGCG共价复合物;
以及,使包含所述中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒、透明质酸-EGCG共价复合物和水的 第四混合反应体系于25℃反应2h,获得中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒,即透明 质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒。
在一些较为具体的实施方案中,所述制备方法包括:
将麦醇溶蛋白、EGCG溶解于乙醇溶液形成混合溶液,之后向所获混合溶液中加入NaOH 溶液形成所述第一混合反应体系并发生反应,然后将所获混合物进行透析、冷冻干燥处理, 获得所述麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物,其中,所述第一混合反应体系的pH值为9.0;
以及,将所述麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物溶解于乙醇溶液形成麦醇溶蛋白-EGCG共价 复合物的分散液,之后与碳酸钠的乙醇悬浮液混合均匀,然后将所获麦醇溶蛋白-EGCG共价 复合物与碳酸钠的混合液与水混合形成所述第二混合反应体系并发生反应,获得所述中空麦 醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒。
进一步的,所述混合溶液中麦醇溶蛋白的浓度为0.1-2wt%。
进一步的,所述麦醇溶蛋白与EGCG的质量比为1:1-5:1。
进一步的,所述乙醇溶液中的乙醇的体积分数为80%。
进一步的,所述透析处理包括:在所述第一混合反应体系反应完成后,将所获混合物于 水浴中超声透析处理24h。
进一步的,所述碳酸钠的乙醇悬浮液为碳酸钠水溶液与无水乙醇的混合液。
进一步的,所述碳酸钠水溶液的浓度为2wt%。
进一步的,所述碳酸钠水溶液与无水乙醇的体积比为3:7。
进一步的,所述麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物的分散液与碳酸钠的乙醇悬浮液的体积比 为1:1。
进一步的,所述麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物与碳酸钠的混合液与水的体积比为1:6。
在一些较为具体的实施方案中,所述制备方法还包括:
在所述第三混合反应体系反应完成后,对所获混合物进行透析、冷冻干燥处理,获得所 述透明质酸-EGCG共价复合物。
进一步的,所述透析处理包括:将所获混合物依次于DMSO和去离子水中分别透析处理 1天和3天。
进一步的,所述透明质酸、1,3-碳二亚胺、二甲氨基吡啶与EGCG的质量比为 800:100:40:100。
在一些较为具体的实施方案中,所述制备方法包括:
分别将所述中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒、透明质酸-EGCG共价复合物溶于水形成中 空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒溶液和透明质酸-EGCG共价复合物溶液,之后将所述中空麦醇 溶蛋白-EGCG纳米颗粒溶液滴加至所述透明质酸-EGCG共价复合物溶液中形成所述第四混 合反应体系并发生反应,获得所述中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒,即透明质酸 基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒。
进一步的,所述制备方法还包括:在所述第四混合反应体系反应完成后,调节所获混合 物的pH值为4.0;
进一步的,所述中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒与透明质酸-EGCG共价复合物的质量比 为4:1~1:4,优选为4:1、2:1、1:1、1:2、1:4中的任一者。
本发明所述的透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒制备方法包括:采用碱处理和反溶剂 沉淀合成中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒,随后HA-EGCG和中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗 粒通过静电络合形成中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒,即透明质酸基改性麦醇溶 蛋白纳米颗粒。
作为本发明的优选实施方案之一,所述透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒的制备方法 具体包括:
(1)中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒的制备
将麦醇溶蛋白和EGCG分别溶解于80%(v/v)的乙醇溶液,混合后用0.1mol/L的氢氧 化钠溶液将其pH值调至9.0,并于25℃连续搅拌反应24h,待反应结束后,将所获混合溶液 于水浴中超声透析24h,期间更换透析液8次以除去游离的EGCG,最后溶液通过冷冻干燥处理,制得麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物;
将2g麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物溶解于100mL乙醇溶液(体积分数80%)中,并于800rpm搅拌2h,静置至完全溶解,同时将2wt%的碳酸钠水溶液与无水乙醇按体积比3:7均匀混合形成碳酸钠的乙醇悬浮液,将上述悬浮液与麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物溶液按体积 比1:1混合,该步骤使麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物能够涂覆碳酸钠颗粒,将麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物和碳酸钠的混合溶液按照体积比1:6缓慢加入到蒸馏水中,并于800rpm搅拌反应4h,再经冷冻干燥处理,制得中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒。
(2)透明质酸-EGCG共价复合物(HA-EGCG)的制备
向100ml体积比为1:1(H2O/DMSO)混合溶液中加入800mg的透明质酸(HA)、100mg的1,3-碳二亚胺(DCC)和40mg的二甲氨基吡啶(DMAP),之后搅拌1h以活化HA的羧基;然后 将0.203mM EGCG溶解于50mL DMSO中,并缓慢加入上述混合液中,并于60-65℃搅拌反 应4h,待反应结束后使用透析膜(MWCO:3500)将所得溶液依次用DMSO透析1天,去 离子水透析3天,最后经冷冻干燥处理HA-EGCG共价复合物。
(3)中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒的制备
将1g中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒溶于50ml蒸馏水溶液中,并于800rpm搅拌2h形 成中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒溶液,同时将HA-EGCG共价复合物溶于在200ml的去离子水中,并于800rpm连续搅拌4h形成HA-EGCG共价复合物溶液,然后将50ml的中空麦 醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒溶液逐滴加入200ml的HA-EGCG共价复合物溶液中,并于800rpm 搅拌反应2h,同时将上述体系的pH值调整为4,得到不同质量比的中空麦醇溶蛋白 -EGCG/HA-EGCG纳米颗粒,即透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒。
进一步的,步骤(1)中麦醇溶蛋白的浓度为2wt%。
进一步的,步骤(1)中麦醇溶蛋白与EGCG质量比是5:1。
进一步的,步骤(3)中中空麦醇溶蛋白-EGCG与HA-EGCG质量比例是4:1,2:1,1:1,1:2,1:4。
本发明实施例的另一个方面还提供了由前述方法制备的透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米 颗粒。
本发明实施例的另一个方面还提供了前述的透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒于制备 W2/O2/(O1/W1)型多重乳液的中用途。
本发明实施例的另一个方面还提供了一种W2/O2/(O1/W1)型多重乳液的制备方法,其包括:
提供前述的透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒;
使聚甘油蓖麻醇酯与玉米油于65℃混合形成第一油相,之后将作为第一水相的氯化钠和 明胶的混合溶液与所获第一油相混合并采用高压微射流进行均质处理3min,制得W2/O2型初 级乳液;
使第二油相与作为第二水相的透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒的悬浮液混合并进行 高剪切处理3min,制得O1/W1型皮克林乳液;
以及,采用高压均质技术,使所述W2/O2型初级乳液与O1/W1型皮克林乳液混合,制得 W2/O2/(O1/W1)型多重乳液。
在一些较为具体的实施方案中,所述聚甘油蓖麻醇酯与玉米油的质量比为5:100。
进一步的,所述氯化钠和明胶的混合溶液与油相的体积比为1:9-5:5。
进一步的,所述O1/W1型皮克林乳液中透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒的浓度为 0.1-2.0wt%。
进一步的,所述第二油相为玉米油,且不限于此。
进一步的,所述第二油相与第二水相的体积比为2:8-5:5。
进一步的,所述W2/O2型初级乳液与O1/W1型皮克林乳液的体积比为1:9-5:5。
本发明利用三步乳化法制备W2/O2/(O1/W1)型皮克林乳液。(1)制备W2/O2型初级乳液:以 含有NaCl和明胶的混合溶液为水相,以含有聚甘油蓖麻醇酯的玉米油为油相,通过高压微射 流法制备W2/O2型乳液;(2)制备O1/W1型皮克林乳液:采用高剪切技术,玉米油和所述中空 麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒均匀混合,获得O1/W1型皮克林乳液;(3)制备W2/O2/(O1/W1)型皮克林乳液:将W2/O2型初级乳液加入到O1/W1型皮克林乳液中,经高压均 质得到稳定的W2/O2/(O1/W1)多重乳液。
作为本发明的优选实施方案之一,所述W2/O2/(O1/W1)型多重乳液的制备方法可以包括:
(1)W2/O2型初级乳液的制备
在65℃下,将聚甘油蓖麻醇酯与玉米油混合搅拌,完全溶解后获得油相。将含有NaCl 和明胶的混合溶液与获得的油相混合,所得混合物立即通过高压微射流进行均质处理,制备 得到W2/O2型初级乳液;
2)O1/W1型皮克林乳液的制备
将玉米油加入到中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒悬浮液中,高剪切3分钟。 得到O1/W1型皮克林乳液。
3)W2/O2/(O1/W1)型多重乳液的制备
将W2/O2型初级乳液加入到O1/W1型皮克林乳液中,经高压均质得到稳定的W2/O2/(O1/W1) 多重乳液。
优选的,所述聚甘油蓖麻醇酯的添加质量为玉米油质量的5%。
优选的,所述含有NaCl和明胶的混合溶液中,NaCl的浓度为3%(w/v),明胶的浓度为 0-7wt%。
优选的,所述W2/O2型初级乳液中水相(W2)和油相(O2)之间的体积比为1:9-5:5。
优选的,所述O1/W1型初级乳液中麦醇溶蛋白-EGCG/KGM纳米颗粒的浓度为0.1-2wt%。
优选的,所述O1/W1型皮克林乳液中水相(W1)和油相(O1)之间的体积比为1:9-5:5。
本发明实施例的另一个方面还提供了由前述方法制备的W2/O2/(O1/W1)型多重乳液。
本发明实施例的另一个方面还提供了前述的W2/O2/(O1/W1)型多重乳液于食品、医药或化 妆品领域中的用途。
下面结合若干优选实施例及附图对本发明的技术方案做进一步详细说明,本实施例在以 发明技术方案为前提下进行实施,给出了详细的实施方式和具体的操作过程,但本发明的保 护范围不限于下述的实施例。
下面所用的实施例中所采用的实验材料,如无特殊说明,均可由常规的生化试剂公司购 买得到。
本发明中,中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒、透明质酸-EGCG共价复合物(HA-EGCG)和透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒(中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒)均通过以下方法制备:
(1)中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒
将麦醇溶蛋白和EGCG分别溶解于80%(v/v)的乙醇溶液,用0.1M的NaOH溶液将其pH调至9.0,将上述两种溶液混合并连续搅拌24h。然后将混合溶液放在超声水浴中透析24h, 期间换透析液8次以除去游离的EGCG。最后溶液通过冷冻干燥得到麦醇溶蛋白-EGCG共价 复合物;
将2g麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物溶解在100mL80%乙醇溶液中,800rpm搅拌2小时, 并储存一夜以确保完全溶解。将2%的碳酸钠水溶液与无水乙醇体积比3∶7(V/V)均匀混合 以制备碳酸钠乙醇悬浮液,将上述分散液与麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物溶液体积比1∶1 (v/v)完全混合。该步骤使麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物能够涂覆碳酸钠颗粒。将以上混 合溶液按照体积比1∶6缓慢加入到去蒸馏水中,800rpm搅拌4h形成中空麦醇溶蛋白-EGCG 纳米颗粒,冷冻干燥备用;
(2)透明质酸-EGCG共价复合物(HA-EGCG)的制备
向100ml 1:1V/V(H2O/DMSO)混合物中加入800mg透明质酸(HA),100mg1,3-碳二亚胺 (DCC)和40mg二甲氨基吡啶(DMAP)。将溶液搅拌1h以活化HA的羧基;将0.203mMEGCG 溶解在50mL DMSO中,并缓慢加入上述溶液中。将混合物在60-65℃充分搅拌4h。使用透 析膜(MWCO:3500)将所得溶液用DMSO透析1天,然后用去离子水透析3天。然后冷冻 干燥得到HA-EGCG共价复合物。
(3)将1g中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒加入50ml蒸馏水溶液中,800rpm搅拌2小时。HA-EGCG溶解在200ml的去离子水,在800rpm连续搅拌4h。然后,将50ml的中空麦 醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒溶液逐滴加入200mlHA-EGCG的溶液中,在800rpm搅拌2h。将 上述分散体系的pH值调整为4,得到不同质量比的中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗 粒。
实施例1
(1)中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒的制备
将麦醇溶蛋白和EGCG分别溶解于80%(v/v)的乙醇溶液,混合后用0.1mol/L的氢氧 化钠溶液将其pH值调至9.0,并于25℃连续搅拌反应24h,待反应结束后,将所获混合溶液 于水浴中超声透析24h,期间更换透析液8次以除去游离的EGCG,最后溶液通过冷冻干燥处理,制得麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物;
将2g麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物溶解于100mL乙醇溶液(体积分数80%)中,并于800rpm搅拌2h,静置至完全溶解,同时将2wt%的碳酸钠水溶液与无水乙醇按体积比3:7均匀混合形成碳酸钠的乙醇悬浮液,将上述悬浮液与麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物溶液按体积 比1:1混合,该步骤使麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物能够涂覆碳酸钠颗粒,将麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物和碳酸钠的混合溶液按照体积比1:6缓慢加入到蒸馏水中,并于800rpm搅拌反应4h,再经冷冻干燥处理,制得中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒。
(2)透明质酸-EGCG共价复合物(HA-EGCG)的制备
向100ml体积比为1:1(H2O/DMSO)混合溶液中加入800mg的透明质酸(HA)、100mg的1,3-碳二亚胺(DCC)和40mg的二甲氨基吡啶(DMAP),之后搅拌1h以活化HA的羧基;然后 将0.203mM EGCG溶解于50mL DMSO中,并缓慢加入上述混合液中,并于60-65℃搅拌反 应4h,待反应结束后使用透析膜(MWCO:3500)将所得溶液依次用DMSO透析1天,去 离子水透析3天,最后经冷冻干燥处理HA-EGCG共价复合物。
(3)透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒(中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒) 的制备
将1g中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒溶于50ml蒸馏水溶液中,并于800rpm搅拌2h形 成中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒溶液,同时将HA-EGCG共价复合物溶于在200ml的去离子水中,并于800rpm连续搅拌4h形成HA-EGCG共价复合物溶液,然后将50ml的中空麦 醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒溶液逐滴加入200ml的HA-EGCG共价复合物溶液中,并于800rpm 搅拌反应2h,同时将上述体系的pH值调整为4,其中,中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒与 HA-EGCG的质量比为2:1,制得中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒。
(4)W2/O2/(O1/W1)多重乳液的制备
将3g明胶分散于3%(w/v)的NaCl水溶液中形成第一水相W2,同时于65℃将5%的聚甘 油蓖麻醇酯与玉米油混合搅拌15min形成第一油相O2,然后将第一水相W2和第一油相O2以3:7的比例混合,之后立即通过高压微射流进行均质处理3min,制得W2/O2型初级乳液;
将玉米油加入到中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒的悬浮液中,再经高压均质 3min得,制得到O1/W1皮克林乳液,其中乳化剂(中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒)的浓度为1.0wt%;
将W2/O2型初级乳液加入O1/W1型皮克林乳液中,并经高压均质3min,制得W2/O2/(O1/W1) 多重乳液,其中,W2/O2型初级乳液和O1/W1型皮克林乳液的体积比为4:6。
本实施例中中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒制备的双重乳液粒径25μm-50μm, 纳米颗粒能够在油/水界面不可逆地吸附和锚定,形成致密层增加了空间位阻效应从而增加乳 液的稳定,显著的提高了乳液抵抗聚结和Ostwald熟化的能力,利于多重乳液的稳定。
实施例2
(1)中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒的制备
将麦醇溶蛋白和EGCG分别溶解于80%(v/v)的乙醇溶液,混合后用0.1mol/L的氢氧 化钠溶液将其pH值调至9.0,并于25℃连续搅拌反应24h,待反应结束后,将所获混合溶液 于水浴中超声透析24h,期间更换透析液8次以除去游离的EGCG,最后溶液通过冷冻干燥处理,制得麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物;
将2g麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物溶解于100mL乙醇溶液(体积分数80%)中,并于800rpm搅拌2h,静置至完全溶解,同时将2wt%的碳酸钠水溶液与无水乙醇按体积比3:7均匀混合形成碳酸钠的乙醇悬浮液,将上述悬浮液与麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物溶液按体积 比1:1混合,该步骤使麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物能够涂覆碳酸钠颗粒,将麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物和碳酸钠的混合溶液按照体积比1:6缓慢加入到蒸馏水中,并于800rpm搅拌反应4h,再经冷冻干燥处理,制得中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒。
(2)透明质酸-EGCG共价复合物(HA-EGCG)的制备
向100ml体积比为1:1(H2O/DMSO)混合溶液中加入800mg的透明质酸(HA)、100mg的1,3-碳二亚胺(DCC)和40mg的二甲氨基吡啶(DMAP),之后搅拌1h以活化HA的羧基;然后 将0.203mM EGCG溶解于50mL DMSO中,并缓慢加入上述混合液中,并于60-65℃搅拌反 应4h,待反应结束后使用透析膜(MWCO:3500)将所得溶液依次用DMSO透析1天,去 离子水透析3天,最后经冷冻干燥处理HA-EGCG共价复合物。
(3)透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒(中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒) 的制备
将1g中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒溶于50ml蒸馏水溶液中,并于800rpm搅拌2h形 成中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒溶液,同时将HA-EGCG共价复合物溶于在200ml的去离子水中,并于800rpm连续搅拌4h形成HA-EGCG共价复合物溶液,然后将50ml的中空麦 醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒溶液逐滴加入200ml的HA-EGCG共价复合物溶液中,并于800rpm 搅拌反应2h,同时将上述体系的pH值调整为4,其中,中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒与 HA-EGCG的质量比为2:1,制得中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒。
(4)W2/O2/(O1/W1)多重乳液的制备
将2g明胶分散于3%(w/v)的NaCl水溶液中形成第一水相W2,同时于65℃将5%的聚甘 油蓖麻醇酯与玉米油混合搅拌15min形成第一油相O2,然后将第一水相W2和第一油相O2以2:8的比例混合,之后立即通过高压微射流进行均质处理3min,制得W2/O2型初级乳液;
将玉米油加入到中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒的悬浮液中,再经高压均质 3min得,制得到O1/W1皮克林乳液,其中乳化剂(中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒)的浓度为1.5wt%;
将W2/O2型初级乳液加入O1/W1型皮克林乳液中,并经高压均质3min,制得W2/O2/(O1/W1) 多重乳液,其中,W2/O2型初级乳液和O1/W1型皮克林乳液的体积比为2:8。
本实施例中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒制备的多重乳液粒径25μm-50μm, 纳米颗粒能够在油/水界面不可逆地吸附和锚定,形成致密层增加了空间位阻效应从而增加乳 液的稳定,显著的提高了乳液抵抗聚结和Ostwald熟化的能力,利于多重乳液的稳定。
实施例3
(1)中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒的制备
将麦醇溶蛋白和EGCG分别溶解于80%(v/v)的乙醇溶液,混合后用0.1mol/L的氢氧 化钠溶液将其pH值调至9.0,并于25℃连续搅拌反应24h,待反应结束后,将所获混合溶液 于水浴中超声透析24h,期间更换透析液8次以除去游离的EGCG,最后溶液通过冷冻干燥处理,制得麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物;
将2g麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物溶解于100mL乙醇溶液(体积分数80%)中,并于800rpm搅拌2h,静置至完全溶解,同时将2wt%的碳酸钠水溶液与无水乙醇按体积比3:7均匀混合形成碳酸钠的乙醇悬浮液,将上述悬浮液与麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物溶液按体积 比1:1混合,该步骤使麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物能够涂覆碳酸钠颗粒,将麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物和碳酸钠的混合溶液按照体积比1:6缓慢加入到蒸馏水中,并于800rpm搅拌反应4h,再经冷冻干燥处理,制得中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒。
(2)透明质酸-EGCG共价复合物(HA-EGCG)的制备
向100ml体积比为1:1(H2O/DMSO)混合溶液中加入800mg的透明质酸(HA)、100mg的1,3-碳二亚胺(DCC)和40mg的二甲氨基吡啶(DMAP),之后搅拌1h以活化HA的羧基;然后 将0.203mM EGCG溶解于50mL DMSO中,并缓慢加入上述混合液中,并于60-65℃搅拌反 应4h,待反应结束后使用透析膜(MWCO:3500)将所得溶液依次用DMSO透析1天,去 离子水透析3天,最后经冷冻干燥处理HA-EGCG共价复合物。
(3)透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒(中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒) 的制备
将1g中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒溶于50ml蒸馏水溶液中,并于800rpm搅拌2h形 成中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒溶液,同时将HA-EGCG共价复合物溶于在200ml的去离子水中,并于800rpm连续搅拌4h形成HA-EGCG共价复合物溶液,然后将50ml的中空麦 醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒溶液逐滴加入200ml的HA-EGCG共价复合物溶液中,并于800rpm 搅拌反应2h,同时将上述体系的pH值调整为4,其中,中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒与 HA-EGCG的质量比为2:1,制得中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒。
(4)W2/O2/(O1/W1)多重乳液的制备
将5g明胶分散于3%(w/v)的NaCl水溶液中形成第一水相W2,同时于65℃将5%的聚甘 油蓖麻醇酯与玉米油混合搅拌15min形成第一油相O2,然后将第一水相W2和第一油相O2以5:5的比例混合,之后立即通过高压微射流进行均质处理3min,制得W2/O2型初级乳液;
将玉米油加入到中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒的悬浮液中,再经高压均质 3min得,制得到O1/W1皮克林乳液,其中乳化剂(中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒)的浓度为0.5wt%;
将W2/O2型初级乳液加入O1/W1型皮克林乳液中,并经高压均质3min,制得W2/O2/(O1/W1) 多重乳液,其中,W2/O2型初级乳液和O1/W1型皮克林乳液的体积比为5:5。
本实施例中中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒制备的双重乳液粒径25μm-50μm, 纳米颗粒能够在油/水界面不可逆地吸附和锚定,形成致密层增加了空间位阻效应从而增加乳 液的稳定,显著的提高了乳液抵抗聚结和Ostwald熟化的能力,利于多重乳液的稳定。
对比例1:中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒制备的多重乳液
(1)中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒的制备
将麦醇溶蛋白和EGCG分别溶解于80%(v/v)的乙醇溶液,混合后用0.1mol/L的氢氧 化钠溶液将其pH值调至9.0,并于25℃连续搅拌反应24h,待反应结束后,将所获混合溶液 于水浴中超声透析24h,期间更换透析液8次以除去游离的EGCG,最后溶液通过冷冻干燥处理,制得麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物;
将2g麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物溶解于100mL乙醇溶液(体积分数80%)中,并于800rpm搅拌2h,静置至完全溶解,同时将2wt%的碳酸钠水溶液与无水乙醇按体积比3:7均匀混合形成碳酸钠的乙醇悬浮液,将上述悬浮液与麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物溶液按体积 比1:1混合,该步骤使麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物能够涂覆碳酸钠颗粒,将麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物和碳酸钠的混合溶液按照体积比1:6缓慢加入到蒸馏水中,并于800rpm搅拌反应4h,再经冷冻干燥处理,制得中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒。
(2)多重乳液的制备
将2g明胶分散于3%(w/v)的NaCl水溶液中形成第一水相W2,同时于65℃将5%的聚甘 油蓖麻醇酯与玉米油混合搅拌15min形成第一油相O2,然后将第一水相W2和第一油相O2以2:8的比例混合,之后立即通过高压微射流进行均质处理3min,制得W2/O2型初级乳液;
将玉米油加入到中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒的悬浮液中,再经高压均质3min得, 制得到O1/W1皮克林乳液,其中乳化剂(中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒)的浓度为1.5wt%;
将W2/O2型初级乳液加入O1/W1型皮克林乳液中,并经高压均质3min,制得W2/O2/(O1/W1) 多重乳液,其中,W2/O2型初级乳液和O1/W1型皮克林乳液的体积比为2:8。
对比例2:中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA纳米颗粒制备的多重乳液
(1)中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA纳米颗粒的制备
将麦醇溶蛋白和EGCG分别溶解于80%(v/v)的乙醇溶液,混合后用0.1mol/L的氢氧 化钠溶液将其pH值调至9.0,并于25℃连续搅拌反应24h,待反应结束后,将所获混合溶液 于水浴中超声透析24h,期间更换透析液8次以除去游离的EGCG,最后溶液通过冷冻干燥处理,制得麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物;
将2g麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物溶解于100mL乙醇溶液(体积分数80%)中,并于800rpm搅拌2h,静置至完全溶解,同时将2wt%的碳酸钠水溶液与无水乙醇按体积比3:7均匀混合形成碳酸钠的乙醇悬浮液,将上述悬浮液与麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物溶液按体积 比1:1混合,该步骤使麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物能够涂覆碳酸钠颗粒,将麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物和碳酸钠的混合溶液按照体积比1:6缓慢加入到蒸馏水中,并于800rpm搅拌反应4h,再经冷冻干燥处理,制得中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒;
将1g中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒溶于50ml蒸馏水溶液中,并于800rpm搅拌2h形 成中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒溶液,然后将50ml的中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒溶 液逐滴加入200ml的HA溶液中,并于800rpm搅拌反应2h,同时将上述体系的pH值调整为4,其中,中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒与HA的质量比为2:1,制得中空麦醇溶蛋白 -EGCG/HA纳米颗粒。
(2)多重乳液的制备
将2g明胶分散于3%(w/v)的NaCl水溶液中形成第一水相W2,同时于65℃将5%的聚甘 油蓖麻醇酯与玉米油混合搅拌15min形成第一油相O2,然后将第一水相W2和第一油相O2以2:8的比例混合,之后立即通过高压微射流进行均质处理3min,制得W2/O2型初级乳液;
将玉米油加入到中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA纳米颗粒的悬浮液中,再经高压均质3min 得,制得到O1/W1皮克林乳液,其中乳化剂(中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA纳米颗粒)的浓度为1.5wt%;
将W2/O2型初级乳液加入O1/W1型皮克林乳液中,并经高压均质3min,制得W2/O2/(O1/W1) 多重乳液,其中,W2/O2型初级乳液和O1/W1型皮克林乳液的体积比为2:8。
性能表征:
图1为实施例2以及对比例1、2中制备的不同纳米颗粒的粒径图;从图1中可以看出, 中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒粒径最小,纳米颗粒的粒径为130.6nm;
图2为实施例2以及对比例1、2中制备的不同纳米颗粒形成的多重乳液的粒径图,从图 2中可以看出,中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒制备的多重乳液粒径最小,乳液 滴为47.7μm,且储藏一个月后,粒径没有显著变化,表明其具有良好的稳定性。此处,单独 的中空麦醇溶蛋白纳米颗粒稳定制备的多重乳液聚结,所以无法测的其稳定的乳液粒径;
图3为实施例1中制备的中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒在不同浓度下形成 的多重乳液粒径的变化图;
图4为实施例2以及对比例1、2制备的不同纳米颗粒形成的多重乳液的抗氧化活性图, 从图4中可以看出,中空麦醇溶蛋白-EGCG/HA-EGCG纳米颗粒稳定的多重乳液有最高的抗 氧化活性。
此外,本案发明人还参照前述实施例,以本说明书述及的其它原料、工艺操作、工艺条 件进行了试验,并均获得了较为理想的结果。
本发明的各方面、实施例、特征及实例应视为在所有方面为说明性的且不打算限制本发 明,本发明的范围仅由权利要求书界定。在不背离所主张的本发明的精神及范围的情况下, 所属领域的技术人员将明了其它实施例、修改及使用。
在本发明案中标题及章节的使用不意味着限制本发明;每一章节可应用于本发明的任何 方面、实施例或特征。
在本发明案通篇中,在将组合物描述为具有、包含或包括特定组份之处或者在将过程描 述为具有、包含或包括特定过程步骤之处,预期本发明教示的组合物也基本上由所叙述组份 组成或由所叙述组份组成,且本发明教示的过程也基本上由所叙述过程步骤组成或由所叙述 过程步骤组组成。
应理解,各步骤的次序或执行特定动作的次序并非十分重要,只要本发明教示保持可操 作即可。此外,可同时进行两个或两个以上步骤或动作。
尽管已参考说明性实施例描述了本发明,但所属领域的技术人员将理解,在不背离本发 明的精神及范围的情况下可做出各种其它改变、省略及/或添加且可用实质等效物替代所述实 施例的元件。另外,可在不背离本发明的范围的情况下做出许多修改以使特定情形或材料适 应本发明的教示。因此,本文并不打算将本发明限制于用于执行本发明的所揭示特定实施例, 而是打算使本发明将包含归属于所附权利要求书的范围内的所有实施例。此外,除非具体陈 述,否则术语第一、第二等的任何使用不表示任何次序或重要性,而是使用术语第一、第二 等来区分一个元素与另一元素。
Claims (12)
1.一种透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒的制备方法,其特征在于包括:
使包含麦醇溶蛋白、EGCG、氢氧化钠、乙醇和水的第一混合反应体系于25℃反应24h,获得麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物,之后使包含麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物、碳酸钠、乙醇和水的第二混合反应体系于25℃反应4h,获得中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒;
使包含透明质酸、DCC、二甲氨基吡啶、DMSO和水的第三混合反应体系于25℃活化处理1h,之后向所述第三混合反应体系加入EGCG,并于60-65℃反应4h,获得透明质酸-EGCG共价复合物;
以及,使包含所述中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒、透明质酸-EGCG共价复合物和水的第四混合反应体系于25℃反应2h,获得中空麦醇溶蛋白-EGCG/透明质酸-EGCG纳米颗粒,即透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于包括:
将麦醇溶蛋白、EGCG溶解于乙醇溶液形成混合溶液,之后向所获混合溶液中加入氢氧化钠溶液形成所述第一混合反应体系并发生反应,然后将所获混合物进行透析、冷冻干燥处理,获得所述麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物,其中,所述第一混合反应体系的pH值为9.0;
以及,将所述麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物溶解于乙醇溶液形成麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物的分散液,之后与碳酸钠的乙醇悬浮液混合均匀,然后将所获麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物与碳酸钠的混合液与水混合形成所述第二混合反应体系并发生反应,获得所述中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒;
其中,所述混合溶液中麦醇溶蛋白的浓度为0.1-2wt%;
所述麦醇溶蛋白与EGCG的质量比为1:1-5:1;
所述乙醇溶液中的乙醇的体积分数为80%;
所述透析处理包括:在所述第一混合反应体系反应完成后,将所获混合物于水浴中超声透析处理24h;
所述碳酸钠的乙醇悬浮液为碳酸钠水溶液与无水乙醇的混合液;所述碳酸钠水溶液的浓度为2wt%;所述碳酸钠水溶液与无水乙醇的体积比为3:7;
所述麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物的分散液与碳酸钠的乙醇悬浮液的体积比为1:1;
所述麦醇溶蛋白-EGCG共价复合物与碳酸钠的混合液与水的体积比为1:6。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于还包括:
在所述第三混合反应体系反应完成后,对所获混合物进行透析、冷冻干燥处理,获得所述透明质酸-EGCG共价复合物;所述透析处理包括:将所获混合物依次于DMSO和去离子水中分别透析处理1天和3天。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述透明质酸、DCC、二甲氨基吡啶与EGCG的质量比为800:100:40:100。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于包括:分别将所述中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒、透明质酸-EGCG共价复合物溶于水形成中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒溶液和透明质酸-EGCG共价复合物溶液,之后将所述中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒溶液滴加至所述透明质酸-EGCG共价复合物溶液中形成所述第四混合反应体系并发生反应,反应完成后调节所获混合物的pH值为4.0,获得所述中空麦醇溶蛋白-EGCG/透明质酸-EGCG纳米颗粒,即透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒;
其中,所述中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒与透明质酸-EGCG共价复合物的质量比为4:1~1:4。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于:所述中空麦醇溶蛋白-EGCG纳米颗粒与透明质酸-EGCG共价复合物的质量比为4:1、2:1、1:1、1:2、1:4中的任一者。
7.由权利要求1-6中任一项所述方法制备的透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒。
8.权利要求7所述的透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒于制备W2/O2/(O1/W1)型多重乳液中的用途。
9.一种W2/O2/(O1/W1)型多重乳液的制备方法,其特征在于包括:
提供权利要求7所述的透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒;
使聚甘油蓖麻醇酯与玉米油于65℃混合形成第一油相,之后将作为第一水相的氯化钠和明胶的混合溶液与所获第一油相混合并采用高压微射流进行均质处理3min,制得W2/O2型初级乳液;
使第二油相与作为第二水相的透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒的悬浮液混合并进行高剪切处理3min,制得O1/W1型皮克林乳液;
以及,采用高压均质技术,使所述W2/O2型初级乳液与O1/W1型皮克林乳液混合,制得W2/O2/(O1/W1)型多重乳液。
10.根据权利要求9所述的制备方法,其特征在于:所述聚甘油蓖麻醇酯与玉米油的质量比为5:100;
所述氯化钠和明胶的混合溶液与油相的体积比为1:9-5:5;
所述O1/W1型皮克林乳液中透明质酸基改性麦醇溶蛋白纳米颗粒的浓度为0.1-2.0wt%;
所述第二油相为玉米油;
所述第二油相与第二水相的体积比为2:8-5:5;
所述W2/O2型初级乳液与O1/W1型皮克林乳液的体积比为1:9-5:5。
11.由权利要求9或10任一项所述方法制备的W2/O2/(O1/W1)型多重乳液。
12.权利要求11所述的W2/O2/(O1/W1)型多重乳液在制备食品、药物或化妆品中的用途。
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