CN112088885A - 一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂及其在黄瓜幼苗期中的应用 - Google Patents

一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂及其在黄瓜幼苗期中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,原料按照重量份包括氨基寡糖素1‑3份、芸苔素内酯0.8‑3.5份、单氟磷酸钠0.01‑0.1份、3‑(二氟甲基)‑1‑甲基‑N‑(3,4,5‑三氟联苯‑2‑基)吡唑‑4‑甲酰胺0.9‑2份、线性多糖β‑1,4‑木聚糖0.1‑0.8份、微量金属离子化合物0.5‑1.5份、营养活化剂10‑20份和增效剂0.8‑3.0份;本发明组合物配方合理,且易于制备,存储稳定性高,有效成分含量损失率小;本发明含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂应用于烟草立枯病中,能促进作物健康或生长发育,对烟草立枯病有较强的防治效果,抑制率达97.9‑99.6%。

Description

一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂及其在黄瓜幼苗期中的 应用
技术领域
本发明属于植物免疫技术领域,涉及一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,具体涉及一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂及其在黄瓜幼苗期中的应用。
背景技术
植物免疫诱抗剂,或称之为植物疫苗,当植物受到外界刺激或处于逆境条件时,能够通过调节自身的防卫和代谢系统产生免疫反应,植物的这种防御反应或免疫抗性反应,可以使植物延迟或减轻病害的发生和发展,减少化学农药与化学肥料的使用量,降低农产品残留。是继人用疫苗、动物疫苗后,疫苗工程技术出现的新领域,也是当前国际上生物农药创制较为热门的研究方向。该植物疫苗是科学家在揭示植物、病虫害、生物农药三者关系的理论基础上,科学控制病虫害的实践,具有提高农作物抗性和有效防控农作物病害的能力。
公开号为CN110063364A、申请人为福建省亚热带植物研究所提供了一种植物免疫诱抗剂及其应用,该植物免疫诱抗剂的有效成分包括2-氨基-3,5-二氯苯甲酸、磺胺氯哒嗪和壳聚糖。在采后柑橘中使用上述成分的植物免疫诱抗剂,可诱导采后柑橘免疫青霉病的发生,有效地抑制青霉病对于采后柑橘品质的破坏作用,且该植物免疫诱抗剂无毒无公害,可直接作用于采后柑橘上,无农药残留,但其存储的稳定性不佳。
申请号为2015102632617的发明专利公开了一种植物免疫诱抗剂及其应用,该免疫诱抗剂按重量百分数计,有效成分包括:0.001-0.02%的氨基寡糖素和0.01-0.2%的亚磷酸盐,采用将氨基寡糖素和亚磷酸盐进行组合,获得的免疫诱抗剂各组分混合比例合理,应用于玉米不仅对小斑病的防治效果好,而且能够提高玉米的产量,实现了玉米散粉和吐丝的同步,但其不能抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌病菌的生长,对炭疽病的防治效果不佳。
公开号CN110923178A、申请人为中国农业科学院农业资源与农业区划研究所,公开了一种植物免疫诱抗菌剂及其应用,该植物免疫诱抗菌剂具体可为预防和/或治疗烟草野火病的菌剂,该菌剂含有皱纹假单胞菌S58,该菌剂对烟草野火病病菌、西瓜噬酸菌、密执安棒形杆菌和稻黄单胞菌的菌剂等植物病原菌具有抑制作用。皱纹假单胞菌S58能够通过激发免疫抗性显著控制烟草野火病的发生,能够水解有机磷,可用于土壤改良,但其对炭疽病的防治效果不明显,应用范围受到一定限制。现有的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂存在以下主要缺陷:(1)不能抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌病菌的生长;(2)配方繁杂,不易制备,常温存储稳定性差;(3)对黄瓜幼苗期的炭疽病的防治效果不显著。
发明内容
本发明针对以上不足,本发明所要解决的技术问题是提供一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂及其在黄瓜幼苗期中的应用。本发明可以实现以下发明目的:
(1)采用本发明的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,能够明显地抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌病菌的生长;
(2)本发明含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,配方合理,制备方法简单,存储稳定性高;
(3)本发明含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂应用于黄瓜幼苗的炭疽病中,有较强的防治效果,对黄瓜幼苗的炭疽病病害防治作用显著。
为解决上述技术问题,采用以下技术方案:
本发明的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,原料包括氨基寡糖素、芸苔素内酯、微量金属离子化合物、营养活化剂和增效剂。
以下方案是对本发明技术方案的优化:
所述含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,原料还包括单氟磷酸钠、3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(3,4,5-三氟联苯-2-基)吡唑-4-甲酰胺、线性多糖β-1,4-木聚糖。
本发明的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,原料包括氨基寡糖素、芸苔素内酯、单氟磷酸钠、3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(3,4,5-三氟联苯-2-基)吡唑-4-甲酰胺、线性多糖β-1,4-木聚糖、微量金属离子化合物、营养活化剂和增效剂。
所述营养活化剂,由乙酸锌10-12份、苹果酸0.1-1份、钼酸铵0.8-1.5份、硼酸1-3份、硫酸锌1-2份、乙酸铜0.5-1份、柠檬酸铁0.5-1份、硫酸镁0.15-0.5份、硫酸镁0.1-0.6份、硝酸铵2-5份、磷酸二氢钾1-6份、磷酸二氢铵2-5份、聚磷酸铵2-7份、聚磷酸钾3-5份、硫酸锰2-3份组成。
所述增效剂,按重量份包括葡糖酸1-5份、脂肪醇聚氧乙烯醚10-15份、十二烷基苯磺酸钙5-8份、十二烷基硫酸钠10-15份、桃胶提取物1-5份、拉开粉BX 2-8份、硫酸亚铁0.1-2份。
所述微量金属离子化合物,包含钴1-1.2份、锰5-6.5份、氟0.8-1份、钼3.2-5份、硒0-0.5份、硼6.5-7.5份、锌1-5.5份、铁10-35份。
所需原料按照重量份包括:氨基寡糖素1-3份、芸苔素内酯0.8-3.5份、单氟磷酸钠0.01-0.1份、3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(3,4,5-三氟联苯-2-基)吡唑-4-甲酰胺0.9-2份、线性多糖β-1,4-木聚糖0.1-0.8份、微量金属离子化合物0.5-1.5份、营养活化剂10-20份和增效剂0.8-3.0份。
所述氨基寡糖素,其制备方法为:将假单胞菌接种至pH为5.5-7.0的发酵培养基中发酵,发酵温度为22-28℃,发酵天数为5天,发酵完毕后分离提纯得到低毒氨基寡糖素。
所述假单胞菌为产壳聚糖酶假单胞菌,接种浓度为0.5-5×106个/mL。
所述发酵培养基的组成为:壳聚糖10-20g、无菌鱼粉0.1-1g、脱脂大豆粉0.5-2g、NaCl 0.1-0.5g、硫酸亚铁0.1-1g、磷酸二氢钾0.1-1g。
所述单氟磷酸钠,熔点为620℃,pH值为7.1。
所述营养活化剂,由乙酸锌5-10份、苹果酸0.1-1份、钼酸铵0.8-1.5份、硼酸1-3份、硫酸锌2份、乙酸铜0.5份、柠檬酸铁0.5份、硫酸镁0.15份、硫酸镁0.1份、硝酸铵5份、磷酸二氢钾6份、磷酸二氢铵5份、聚磷酸铵7份、聚磷酸钾3份、硫酸锰2份组成。
所述3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(3,4,5-三氟联苯-2-基)吡唑-4-甲酰胺,纯度≥99.2%,水分含量<0.1%。
所述微量金属离子化合物,由钴1.2份、锰6.5份、氟0.8份、钼3.2份、硒0.5份、硼6.55份、锌5.5份、铁35份组成。
所述增效剂,按重量份包括葡糖酸1-5份、脂肪醇聚氧乙烯醚15份、十二烷基苯磺酸钙8份、十二烷基硫酸钠10份、桃胶提取物5份、拉开粉BX 8份、硫酸亚铁0.1-2份。
所述桃胶提取物,溶解度≥98%,粒度80-120目,水分≤6%,菌落总数<1000。
本发明的一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂的制备方法,包括如下步骤:
步骤一、氨基寡糖素的制备:将假单胞菌接种至pH为5.5-7.0的发酵培养基中发酵,发酵温度为22-28℃,发酵天数为5天,发酵完毕后分离提纯得到低毒氨基寡糖素。
所述假单胞菌为产壳聚糖酶假单胞菌,接种浓度为0.5-5×106个/mL;
所述发酵培养基的组成为:壳聚糖10-20g、无菌鱼粉0.1-1g、脱脂大豆粉0.5-2g、NaCl0.1-0.5g、硫酸亚铁0.1-1g、磷酸二氢钾0.1-1g。
步骤二、按照实施例所述的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂的配方比例称取各个组分,备用;
步骤三、将芸苔素内酯、3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(3,4,5-三氟联苯-2-基)吡唑-4-甲酰胺和线性多糖β-1,4-木聚糖依次进行混合,搅拌,得到初级混合物;
步骤四、将营养活化剂、微量金属离子化合物、单氟磷酸钠添加至初级混合物中,增加温度至温度为50-85℃,经高速剪切混合机混合,剪切速率为800-1200rad/min,混合至均匀后降温至常温;
步骤五、添加入氨基寡糖素、增效剂继续混合,搅拌25-45min,加入适量去离子水进行捏合并加入流化床中造粒,过筛,颗粒粒径1.5-2.5mm占比95%以上,即得到本发明的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂。
本发明含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂应用于黄瓜幼苗的炭疽病中,有较强的防治效果,对黄瓜幼苗的炭疽病病害防治作用显著,防治率为92.2-93.9%。
本发明的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,原料包括氨基寡糖素、芸苔素内酯、单氟磷酸钠、3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(3,4,5-三氟联苯-2-基)吡唑-4-甲酰胺、线性多糖β-1,4-木聚糖、微量金属离子化合物、营养活化剂和增效剂。所需原料按照重量份包括:氨基寡糖素1-3份、芸苔素内酯0.8-3.5份、单氟磷酸钠0.01-0.1份、3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(3,4,5-三氟联苯-2-基)吡唑-4-甲酰胺0.9-2份、线性多糖β-1,4-木聚糖0.1-0.8份、微量金属离子化合物0.5-1.5份、营养活化剂10-20份和增效剂0.8-3.0份。
所述单氟磷酸钠,熔点为620℃,pH值为7.1;
所述营养活化剂,由乙酸锌10份、苹果酸0.1-1份、钼酸铵0.8-1.5份、硼酸1-3份、硫酸锌2份、乙酸铜0.5份、柠檬酸铁0.5份、硫酸镁0.15份、硫酸镁0.1份、硝酸铵5份、磷酸二氢钾6份、磷酸二氢铵5份、聚磷酸铵7份、聚磷酸钾3份、硫酸锰2份组成;
所述3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(3,4,5-三氟联苯-2-基)吡唑-4-甲酰胺,纯度≥99.2%,水分含量<0.1%;
所述增效剂,按重量份包括葡糖酸1-5份、脂肪醇聚氧乙烯醚15份、十二烷基苯磺酸钙8份、十二烷基硫酸钠10份、桃胶提取物5份、拉开粉BX 8份、硫酸亚铁0.1-2份;
所述桃胶提取物,溶解度≥98%,粒度80-120目,水分≤6%,菌落总数<1000。
本发明的一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂的制备方法,包括如下步骤:
步骤一、氨基寡糖素的制备:将假单胞菌接种至pH为5.5-7.0的发酵培养基中发酵,发酵温度为22-28℃,发酵天数为5天,发酵完毕后分离提纯得到低毒氨基寡糖素。
所述假单胞菌为产壳聚糖酶假单胞菌,接种浓度为0.5-5×106个/mL;
所述发酵培养基的组成为:壳聚糖10-20g、无菌鱼粉0.1-1g、脱脂大豆粉0.5-2g、NaCl0.1-0.5g、硫酸亚铁0.1-1g、磷酸二氢钾0.1-1g。
步骤二、按照实施例所述的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂的配方比例称取各个组分,备用;
步骤三、将芸苔素内酯、3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(3,4,5-三氟联苯-2-基)吡唑-4-甲酰胺和线性多糖β-1,4-木聚糖依次进行混合,搅拌,得到初级混合物;
步骤四、将营养活化剂、微量金属离子化合物、单氟磷酸钠添加至初级混合物中,增加温度至温度为50-85℃,经高速剪切混合机混合,剪切速率为800-1200rad/min,混合至均匀后降温至常温;
步骤五、添加入氨基寡糖素、增效剂继续混合,搅拌25-45min,加入适量去离子水进行捏合并加入流化床中造粒,过筛,颗粒粒径1.5-2.5mm占比95%以上,即得到本发明的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂。
本发明采用以上技术方案,与现有技术相比,具有以下优点:
本发明含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂的有益效果:(1)采用本发明的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,能够明显地抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌病菌的生长,其中,对金黄色葡萄球菌的抑制率为74.2-82.7%,对大肠杆菌的抑制率为91.7-98.8%;
(2)本发明含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,配方合理,制备方法简单,存储稳定性高,1年后,有效成分含量损失率为1.02-1.16%;常温避光存储2年后,有效成分含量损失率1.89-2.42%;常温避光存储3年后,有效成分含量损失率3.17-3.52%;
(3)本发明含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂应用于黄瓜幼苗的炭疽病中,有较强的防治效果,对黄瓜幼苗的炭疽病病害防治作用显著,防治率为92.2-93.9%。
具体实施方式
实施例1一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂
本发明的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,原料包括氨基寡糖素、芸苔素内酯、单氟磷酸钠、3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(3,4,5-三氟联苯-2-基)吡唑-4-甲酰胺、线性多糖β-1,4-木聚糖、微量金属离子化合物、营养活化剂和增效剂。所需原料按照重量份包括:氨基寡糖素1份、芸苔素内酯3.5份、单氟磷酸钠0.01份、3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(3,4,5-三氟联苯-2-基)吡唑-4-甲酰胺2份、线性多糖β-1,4-木聚糖0.1份、微量金属离子化合物1.5份、营养活化剂10份和增效剂3.0份。
所述单氟磷酸钠,熔点为620℃,pH值为7.1;
所述营养活化剂,由乙酸锌10份、苹果酸0.1份、钼酸铵1.5份、硼酸1份、硫酸锌2份、乙酸铜0.5份、柠檬酸铁0.5份、硫酸镁0.15份、硫酸镁0.1份、硝酸铵5份、磷酸二氢钾6份、磷酸二氢铵5份、聚磷酸铵7份、聚磷酸钾3份、硫酸锰2份组成;
所述3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(3,4,5-三氟联苯-2-基)吡唑-4-甲酰胺,纯度≥99.2%,水分含量<0.1%;
所述微量金属离子化合物,由钴1.2份、锰6.5份、氟0.8份、钼3.2份、硒0.5份、硼6.55份、锌5.5份、铁35份组成;
所述增效剂,按重量份包括葡糖酸1份、脂肪醇聚氧乙烯醚15份、十二烷基苯磺酸钙8份、十二烷基硫酸钠10份、桃胶提取物5份、拉开粉BX 8份、硫酸亚铁2份;
所述桃胶提取物,溶解度≥98%,粒度80-120目,水分≤6%,菌落总数<1000。
本发明的一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂的制备方法,包括如下步骤:
步骤一、氨基寡糖素的制备:将假单胞菌接种至pH为7.0的发酵培养基中发酵,发酵温度为22℃,发酵天数为5天,发酵完毕后分离提纯得到低毒氨基寡糖素。
所述假单胞菌为产壳聚糖酶假单胞菌,接种浓度为0.8×106个/mL;
所述发酵培养基的组成为:壳聚糖10g、无菌鱼粉1g、脱脂大豆粉0.5g、NaCl 0.5g、硫酸亚铁0.1g、磷酸二氢钾1g。
步骤二、按照实施例所述的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂的配方比例称取各个组分,备用;
步骤三、将芸苔素内酯、3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(3,4,5-三氟联苯-2-基)吡唑-4-甲酰胺和线性多糖β-1,4-木聚糖依次进行混合,搅拌,得到初级混合物;
步骤四、将营养活化剂、微量金属离子化合物、单氟磷酸钠添加至初级混合物中,增加温度至温度为50℃,经高速剪切混合机混合,剪切速率为1200rad/min,混合至均匀后降温至常温;
步骤五、添加入氨基寡糖素、增效剂继续混合,搅拌25min,加入适量去离子水进行捏合并加入流化床中造粒,过筛,颗粒粒径1.5-2.5mm占比95%,即得到本发明的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂。
实施例2一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂
本发明的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,原料包括氨基寡糖素、芸苔素内酯、单氟磷酸钠、3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(3,4,5-三氟联苯-2-基)吡唑-4-甲酰胺、线性多糖β-1,4-木聚糖、微量金属离子化合物、营养活化剂和增效剂。所需原料按照重量份包括:氨基寡糖素2份、芸苔素内酯2.5份、单氟磷酸钠0.06份、3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(3,4,5-三氟联苯-2-基)吡唑-4-甲酰胺1.2份、线性多糖β-1,4-木聚糖0.5份、微量金属离子化合物0.9份、营养活化剂18份和增效剂1.8份。
所述单氟磷酸钠,熔点为620℃,pH值为7.1;
所述营养活化剂,由乙酸锌10份、苹果酸0.5份、钼酸铵0.9份、硼酸2份、硫酸锌2份、乙酸铜0.5份、柠檬酸铁0.5份、硫酸镁0.15份、硫酸镁0.1份、硝酸铵5份、磷酸二氢钾6份、磷酸二氢铵5份、聚磷酸铵7份、聚磷酸钾3份、硫酸锰2份组成;
所述3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(3,4,5-三氟联苯-2-基)吡唑-4-甲酰胺,纯度≥99.2%,水分含量<0.1%;
所述微量金属离子化合物,由钴1.2份、锰6.5份、氟0.8份、钼3.2份、硒0.5份、硼6.55份、锌5.5份、铁35份组成;
所述增效剂,按重量份包括葡糖酸3份、脂肪醇聚氧乙烯醚15份、十二烷基苯磺酸钙8份、十二烷基硫酸钠10份、桃胶提取物5份、拉开粉BX 8份、硫酸亚铁0.9份;
所述桃胶提取物,溶解度≥98%,粒度80-120目,水分≤6%,菌落总数<1000。
本发明的一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂的制备方法,包括如下步骤:
步骤一、氨基寡糖素的制备:将假单胞菌接种至pH为7.0的发酵培养基中发酵,发酵温度为25℃,发酵天数为5天,发酵完毕后分离提纯得到低毒氨基寡糖素。
所述假单胞菌为产壳聚糖酶假单胞菌,接种浓度为3.5×106个/mL;
所述发酵培养基的组成为:壳聚糖15g、无菌鱼粉0.5g、脱脂大豆粉1.5g、NaCl 0.3g、硫酸亚铁0.5g、磷酸二氢钾0.8g。
步骤二、按照实施例所述的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂的配方比例称取各个组分,备用;
步骤三、将芸苔素内酯、3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(3,4,5-三氟联苯-2-基)吡唑-4-甲酰胺和线性多糖β-1,4-木聚糖依次进行混合,搅拌,得到初级混合物;
步骤四、将营养活化剂、微量金属离子化合物、单氟磷酸钠添加至初级混合物中,增加温度至温度为65℃,经高速剪切混合机混合,剪切速率为1000rad/min,混合至均匀后降温至常温;
步骤五、添加入氨基寡糖素、增效剂继续混合,搅拌35min,加入适量去离子水进行捏合并加入流化床中造粒,过筛,颗粒粒径1.5-2.5mm占比95%,即得到本发明的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂。
实施例3一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂
本发明的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,原料包括氨基寡糖素、芸苔素内酯、单氟磷酸钠、3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(3,4,5-三氟联苯-2-基)吡唑-4-甲酰胺、线性多糖β-1,4-木聚糖、微量金属离子化合物、营养活化剂和增效剂。所需原料按照重量份包括:氨基寡糖素3份、芸苔素内酯0.8份、单氟磷酸钠0.1份、3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(3,4,5-三氟联苯-2-基)吡唑-4-甲酰胺0.9份、线性多糖β-1,4-木聚糖0.8份、微量金属离子化合物0.5份、营养活化剂20份和增效剂0.8份。
所述单氟磷酸钠,熔点为620℃,pH值为7.1;
所述营养活化剂,由乙酸锌10份、苹果酸1份、钼酸铵0.8份、硼酸3份、硫酸锌2份、乙酸铜0.5份、柠檬酸铁0.5份、硫酸镁0.15份、硫酸镁0.1份、硝酸铵5份、磷酸二氢钾6份、磷酸二氢铵5份、聚磷酸铵7份、聚磷酸钾3份、硫酸锰2份组成;
所述3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(3,4,5-三氟联苯-2-基)吡唑-4-甲酰胺,纯度≥99.2%,水分含量<0.1%;
所述微量金属离子化合物,由钴1.2份、锰6.5份、氟0.8份、钼3.2份、硒0.5份、硼6.55份、锌5.5份、铁35份组成;
所述增效剂,按重量份包括葡糖酸5份、脂肪醇聚氧乙烯醚15份、十二烷基苯磺酸钙8份、十二烷基硫酸钠10份、桃胶提取物5份、拉开粉BX 8份、硫酸亚铁0.1份;
所述桃胶提取物,溶解度≥98%,粒度80-120目,水分≤6%,菌落总数<1000。
本发明的一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂的制备方法,包括如下步骤:
步骤一、氨基寡糖素的制备:将假单胞菌接种至pH为7.0的发酵培养基中发酵,发酵温度为24℃,发酵天数为5天,发酵完毕后分离提纯得到低毒氨基寡糖素。
所述假单胞菌为产壳聚糖酶假单胞菌,接种浓度为3.5×106个/mL;
所述发酵培养基的组成为:壳聚糖20g、无菌鱼粉0.1g、脱脂大豆粉2g、NaCl 0.1g、硫酸亚铁1g、磷酸二氢钾0.1g。
步骤二、按照实施例所述的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂的配方比例称取各个组分,备用;
步骤三、将芸苔素内酯、3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(3,4,5-三氟联苯-2-基)吡唑-4-甲酰胺和线性多糖β-1,4-木聚糖依次进行混合,搅拌,得到初级混合物;
步骤四、将营养活化剂、微量金属离子化合物、单氟磷酸钠添加至初级混合物中,增加温度至温度为50-85℃,经高速剪切混合机混合,剪切速率为1200rad/min,混合至均匀后降温至常温;
步骤五、添加入氨基寡糖素、增效剂继续混合,搅拌25min,加入适量去离子水进行捏合并加入流化床中造粒,过筛,颗粒粒径1.5-2.5mm占比96%,即得到本发明的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂。
本发明含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂的效果
1、本发明含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂对金黄色葡萄球菌抑制率、大肠杆菌抑制率的抑菌率:
Figure DEST_PATH_IMAGE002
从表1的实验结果可以看出,本发明实施例1-3的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂可以明显地抑制金黄色葡萄球菌和大肠杆菌两种病菌的生长。采用本发明的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,能够明显地抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌病菌的生长,其中,对金黄色葡萄球菌的抑制率为74.2-82.0%;对大肠杆菌的抑制率为91.7-98.8%。
2、本发明含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂常温下的存储稳定性高,损失率低,避光放置后的有效成分损失率(以氨基寡糖素计)如下所示:
Figure DEST_PATH_IMAGE004
由上表可知,本发明的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂存储稳定性高,常温避光存储1年后,有效成分含量损失率(以氨基寡糖素计)为1.02-1.16%;常温避光存储2年后,有效成分含量损失率(以氨基寡糖素计)1.89-2.42%;常温避光存储3年后,有效成分含量损失率(以氨基寡糖素计)3.17-3.52%。
实施例4一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂在黄瓜幼苗期中的应用
取本发明含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂按与水重量比为 1:300 的比例溶解稀释成药液,采用该药液喷洒至轻度感染了炭疽菌的大田露地黄瓜幼苗上,黄瓜幼苗为含有2-3片真叶,连续沿顺垄方向定株调查1000株,含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂用药量为10克/亩,连续喷雾两次,二次药后跟踪7天、14天和30天,观察本发明的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂的防治效果。结果如下表所示:
表1:7天防治效果
Figure DEST_PATH_IMAGE006
本发明的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂对黄瓜幼苗的炭疽病病害防治作用显著,防治率为97.7-98.9%。
表2:14天防治效果
Figure DEST_PATH_IMAGE008
本发明的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂对黄瓜幼苗的炭疽病病害防治作用显著,防治率为93.3-95.1%。
表3:30天防治效果
Figure DEST_PATH_IMAGE010
本发明的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂对黄瓜幼苗的炭疽病病害防治作用显著,防治率为92.2-93.9%。
综上所述,本发明含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂:(1)采用本发明的含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,能够明显地抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌病菌的生长,其中,对金黄色葡萄球菌的抑制率为74.2-82.%,对大肠杆菌的抑制率为91.7-98.8%;
(2)本发明含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,配方合理,制备方法简单,存储稳定性高,1年后,有效成分含量损失率为1.02-1.16%;常温避光存储2年后,有效成分含量损失率1.89-2.42%;常温避光存储3年后,有效成分含量损失率3.17-3.52%;
(3)本发明含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂应用于黄瓜幼苗的炭疽病中,有较强的防治效果,对黄瓜幼苗的炭疽病病害防治作用显著,防治率为92.2-93.9%。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出:对于本技术领域的技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
除非另有说明,本发明所采用的百分数均为重量百分数,本发明所述的比例,均为质量比例。
最后应说明的是:以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,尽管参照前述实施例对本发明进行了详细说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,其特征在于,
所述含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,原料包括氨基寡糖素、芸苔素内酯、微量金属离子化合物、营养活化剂和增效剂;
所述氨基寡糖素,其制备方法为:将假单胞菌接种至pH为5.5-7.2的发酵培养基中发酵,发酵温度为22-28℃,发酵天数为5天,发酵完毕后分离提纯得到低毒氨基寡糖素;
所述假单胞菌为产壳聚糖酶假单胞菌,接种浓度为0.5-5×106个/mL;
所述发酵培养基的组成为:壳聚糖10-20g、无菌鱼粉0.1-1g、脱脂大豆粉0.5-2g、NaCl0.1-0.5g、硫酸亚铁0.1-1g、磷酸二氢钾0.1-1g。
2.根据权利要求1所述的一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,其特征在于,
所述含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,原料还包括单氟磷酸钠、3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(3,4,5-三氟联苯-2-基)吡唑-4-甲酰胺、线性多糖β-1,4-木聚糖。
3.根据权利要求1或2所述的一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,其特征在于,
所述含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,所需原料按照重量份包括:氨基寡糖素1-3份、芸苔素内酯0.8-3.5份、单氟磷酸钠0.01-0.1份、3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(3,4,5-三氟联苯-2-基)吡唑-4-甲酰胺0.9-2份、线性多糖β-1,4-木聚糖0.1-0.8份、微量金属离子化合物0.5-1.5份、营养活化剂10-20份和增效剂0.8-3.0份。
4.根据权利要求1或3所述的一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,其特征在于,
所述单氟磷酸钠,熔点为620℃,pH值为7.1。
5.根据权利要求1或4所述的一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,其特征在于,
所述营养活化剂,由乙酸锌10-12份、苹果酸0.1-1份、钼酸铵0.8-1.5份、硼酸1-3份、硫酸锌1-2份、乙酸铜0.5-1份、柠檬酸铁0.5-1份、硫酸镁0.15-0.5份、硫酸镁0.1-0.6份、硝酸铵2-5份、磷酸二氢钾1-6份、磷酸二氢铵2-5份、聚磷酸铵2-7份、聚磷酸钾3-5份、硫酸锰2-3份组成。
6.根据权利要求1或4所述的一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,其特征在于,
所述增效剂,按重量份包括葡糖酸1-5份、脂肪醇聚氧乙烯醚10-15份、十二烷基苯磺酸钙5-8份、十二烷基硫酸钠10-15份、桃胶提取物1-5份、拉开粉BX 2-8份、硫酸亚铁0.1-2份。
7.根据权利要求6所述的一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,其特征在于,
所述桃胶提取物,溶解度≥98%,粒度80-120目,水分≤6%,菌落总数<1000。
8.根据权利要求1或2所述的一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,其特征在于,
所述微量金属离子化合物,包含钴1-1.2份、锰5-6.5份、氟0.8-1份、钼3.2-5份、硒0-0.5份、硼6.5-7.5份、锌1-5.5份、铁10-35份。
9.根据权利要求1或2所述的一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,其特征在于,
本发明的一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂的制备方法,包括如下步骤:
步骤一、氨基寡糖素的制备:将假单胞菌接种至pH为5.5-7.0的发酵培养基中发酵,发酵温度为22-28℃,发酵天数为5天,发酵完毕后分离提纯得到低毒的氨基寡糖素;
步骤二、按照配方比例称取各个组分,备用;
步骤三、将芸苔素内酯、3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(3,4,5-三氟联苯-2-基)吡唑-4-甲酰胺和线性多糖β-1,4-木聚糖依次进行混合,搅拌,得到初级混合物;
步骤四、将营养活化剂、微量金属离子化合物、单氟磷酸钠添加至初级混合物中,增加温度至温度为50-85℃,经高速剪切混合机混合,剪切速率为800-1200rad/min,混合至均匀后降温至常温;
步骤五、添加入氨基寡糖素、增效剂继续混合,搅拌25-45min,加入适量去离子水进行捏合并加入流化床中造粒,过筛,颗粒粒径1.5-2.5mm占比95%以上,即得到含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂。
10.一种含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂在黄瓜幼苗期中的应用,所述含氨基寡糖素的植物免疫诱抗剂,对黄瓜幼苗的炭疽病病害防治率为92.2-93.9%。
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