CN113170798B - 一种防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂及制备方法和应用 - Google Patents

一种防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂及制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂,由以下质量百分比的原料制成:0.05~0.06%氨基寡糖素、0.05~0.06%营养补充剂、0.02~0.03%芸苔素内脂、0.02~0.03%硫磺粉、10~15%白刺花水提液,余量为水。本申请创造性研发出取代化学农药防控猕猴桃斑点早期落叶病的植物源抗病复合诱抗剂,在猕猴桃斑点早期落叶病未见明显症状时期,每年6月1~15号时喷施猕猴桃叶背面,使得植物获得系统抗病性,从而达到提前防控病害的目的,该复合诱抗剂能提高猕猴桃抗病性,还能有效降低猕猴桃斑点早期落叶病发病率和病情指数,减少农药使用,提高猕猴桃食品质量安全。

Description

一种防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂 及制备方法和应用
技术领域
本发明属于果蔬病虫害防治技术领域,尤其涉及一种防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂及制备方法和应用。
背景技术
猕猴桃(Actinidia)是重要的水果类型之一,营养丰富,其果实细嫩多汁,清香鲜美,酸甜宜人,营养极为丰富。它的维生素C含量高,比柑桔、苹果等水果高几倍甚至几十倍,同时还含大量的糖、蛋白质、氨基酸等多种有机物和人体必需的多种矿物质,素有水果之王的美誉。
近年,随着猕猴桃种植产业的不断发展,猕猴桃果树上的病害问题也愈发严重。猕猴桃斑点早期落叶病是猕猴桃叶部的一种重要病害,主要危害“红阳”猕猴桃品种,是由链格孢(Alternariasp)和棒(Corynesporasp)菌混合侵染的斑点早期落叶病,该病能引起90%的叶片早期脱落,树上仅剩果实,导致当年果实干物质积累降低,果实储藏时间缩短,树体当年出现第二次萌芽和开花,进而导致次年萌芽不整齐,严重影响当年和次年猕猴桃产量和品质。近年来猕猴桃斑点早期落叶病在南方区域发病严重,尤其在贵州红阳猕猴桃各主产区已爆发成灾,每年发病率均达80~90%以上,由此每年给南方地区猕猴桃产业造成重大经济损失。目前,猕猴桃斑点早期落叶病的研究尚处于起步阶段,田间防控多采用戊唑醇、代森锰锌、甲基硫菌灵、嘧菌酯等化学药剂进行防控,长期大量使用导致猕猴桃斑点早期落叶病对大多化学药剂产生了抗药性,而且果实农药残留较高,污染环境严重,面对这一生产需求,急需探索高效绿色的防控新途径。
现有专利申请CN201110416242.5,公开一种猕猴桃靠接方法,针对目前猕猴桃早期落叶病的防治提出,采用狗枣猕猴桃和葛枣猕猴桃进行靠接换砧以达到防治目的。试验研究成功后,探索出苍溪独有的防治红阳猕猴桃早期落叶病技术体系,结合农业措施系列技术形成技术标准,为低海拔和高湿地区生产优质猕猴桃果品提供技术支撑,扩大猕猴桃生产优势。但是该方法防治效果不佳,且并不适用于防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病。但是该方法与本发明有两点本质区别:
第一,由于在红阳猕猴桃桃旁边增加了2株狗枣猕猴桃或葛枣猕猴桃,无疑占用了红阳猕猴桃的株行距,原本每亩种植的株数增加了2倍数量,使猕猴桃果园的通风和通光性较差,间接诱发其它病虫害的发生;同时,新增加的狗枣猕猴桃或葛枣猕猴桃与原有红阳猕猴桃抢夺营养,增加了种植和管理成本。
第二,该方法尽管从红阳猕猴桃为害症状的描述上与本发明描述的很类似,但专利申请CN201110416242.5并未对该病是否由相同的发病原因或相同的致病菌引起的早期落叶进行研究。
因此,为了有效防控南方地区由致病菌导致的红阳猕猴桃斑点早期落叶病,达到节本增效的目的,研制出能够防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的新方法尤为重要。
发明内容
本发明为解决上述技术问题,提供了一种防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂及制备方法和应用。本发明通过筛选抗病诱导剂,诱导猕猴桃植物自身产生抗病性,进而达到防治猕猴桃斑点早期落叶病的目的,该专利的实施应用对控制南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的为害及猕猴桃食品安全意义重大。
为了能够达到上述所述目的,本发明采用以下技术方案:
一种防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂,由以下质量百分比的原料制成:0.05~0.06%氨基寡糖素、0.05~0.06%营养补充剂、0.02~0.03%芸苔素内脂、0.02~0.03%硫磺粉、10~15%白刺花水提液,余量为水。
进一步地,所述的一种防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂,由以下质量百分比的原料制成:0.06%氨基寡糖素、0.06%营养补充剂、0.02%芸苔素内酯、0.02%硫磺粉,15%白刺花水提液,余量为水。
进一步地,所述氨基寡糖素为水溶性氨基寡糖素。
进一步地,所述营养补充剂为寡糖、硼、锌以及甘氨酸和天门冬氨酸组成的复合型水溶性氨基酸。
进一步地,所述芸苔素内酯为水溶性24-表芸苔素内酯。
进一步地,所述硫磺粉为固体粉末硫磺粉;所述水为蒸馏水、去离子水、高纯水中的一种或一种以上。
进一步地,所述白刺花水提液的制备方法,包括以下步骤:
①选取白刺花根皮和白刺花干花:取1~2年生刚挖出土的白刺花连根,将主根、侧根和须根分别剪下、清洗干净,取主根和侧根的皮,将主根和侧根的皮以及须根分别切成5~10cm小段,沥干表面水分,得白刺花根皮;取刚采摘的新鲜白刺花,洗净去杂后均匀撒在磁盘中,烘干,得白刺花干花;
②浸泡、煎煮:按照质量百分比将步骤①的白刺花根皮、白刺花干花与水混合,浸泡煎煮,过滤收集滤液,向滤液中加入水配成pH为5.5~6.0的白刺花水提液,分装后密封,高温高压灭菌,获得所述白刺花水提液。
进一步地,在步骤①,所述烘干是放入35~40℃的恒温培养箱中烘36~48h。
进一步地,在步骤②,所述白刺花根皮、白刺花干花与水按照以下质量百分比:10~12%白刺花根皮、5~7%白刺花干花,余量为水;所述浸泡煎煮是:在常温下浸泡2~3h后,大火烧开后转小火慢煮60~65min;所述高温高压灭菌是将物料置于121℃下高压蒸汽灭菌锅中保压灭菌20~23min。
进一步地,一种如上述所述的防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)按照质量百分比称取氨基寡糖素、营养补充剂、芸苔素内脂、硫磺粉、白刺花水提液,在搅拌状态下,先向硫磺粉中缓慢加入白刺花水提液,混合均匀后加水,再依次加入氨基寡糖素、营养补充剂、芸苔素内脂,搅拌均匀,得到复合诱抗剂半成品;
(2)将步骤(1)的复合诱抗剂半成品装入无菌的玻璃瓶或塑料瓶中,并密封保存,制得所述复合诱抗剂。
进一步地,一种如上述所述的防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂的应用,将其应用在南方地区猕猴桃斑点早期落叶病的防治。
白刺花水提液的筛选
实验1:白刺花干花水提液:取1~2年生刚挖出土的白刺花根,将主根、侧根和须根分别剪下、清洗干净,取主根和侧根的皮,将主根和侧根的皮以及须根分别切成5~10cm小段,沥干表面水分,得白刺花根皮;按照质量百分比将上述的白刺花根皮与水混合,浸泡煎煮,过滤收集滤液,向滤液中加入水配成 pH为5.5~6.0的白刺花水提液,分装后密封,高温高压灭菌,获得所述白刺花干花水提液。
实验2:白刺花根皮水提液:取刚采摘的新鲜白刺花,洗净去杂后均匀撒在磁盘中,烘干,得白刺花干花;按照质量百分比将上述的白刺花干花与水混合,浸泡煎煮,过滤收集滤液,向滤液中加入水配成pH为5.5~6.0的白刺花水提液,分装后密封,高温高压灭菌,获得所述白刺花根皮水提液。
实验3:白刺花根皮和白刺花干花水提液:取1~2年生刚挖出土的白刺花连根,将主根、侧根和须根分别剪下、清洗干净,取主根和侧根的皮,将主根和侧根的皮以及须根分别切成5~10cm小段,沥干表面水分,得白刺花根皮;取刚采摘的新鲜白刺花,洗净去杂后均匀撒在磁盘中,烘干,得白刺花干花;按照质量百分比将上述的白刺花根皮、白刺花干花与水混合,浸泡煎煮,过滤收集滤液,向滤液中加入水配成pH为5.5~6.0的白刺花水提液,分装后密封,高温高压灭菌,获得所述白刺花水提液。
将实验1~3制得的水提液成分进行代谢组检测(LC-MS/MS),实验1(白刺花干花水提液相对含量)、实验2(白刺花根皮水提液相对含量)、实验3(白刺花根+干花水提液相对含量)用色谱峰的峰面积表示,结果如下表1所示。
表1
Figure BDA0002997470120000051
Figure BDA0002997470120000061
Figure BDA0002997470120000071
Figure BDA0002997470120000081
Figure BDA0002997470120000091
Figure BDA0002997470120000101
注:表1中物质定性采用迈维公司自建数据库MWDB(metwaredatabase)及代谢物信息公共数据库,根据二级谱信息进行物质定性。
由表1实验结果发现:采用白刺花根皮和白刺花干花制得的白刺花水提液中含有的物质种类比单纯的白刺花干花水提液或白刺花根皮水提液要多,且物质的相对含量也较高,对于防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的效果也更加,因此选用白刺花根皮和白刺花干花制得的白刺花水提液作为原料。
本发明复合诱抗剂的使用方法为:在猕猴桃斑点早期落叶病未见明显症状时期,即每年6月1~15号时喷施300~400倍液在猕猴桃叶背面。
本申请所用硫磺粉是一种矿物质元素,也是最常见的一种中药,具有杀菌、杀虫等功效,硫磺在适宜浓度下使用时,能使猕猴桃叶片角质层松解,也能刺激猕猴桃叶片气孔开放,当猕猴桃叶片气孔打开时有利于药剂和营养成分渗透到叶内,有利于猕猴桃叶片更好吸收。
所用白刺花植物的根、茎、叶、花均为民间药物,该植物的花和根水提物主要化学成分为生物碱类、黄酮类、氨基酸类、萜类、有机酸类等物质,其中生物碱类、黄酮类、氨基酸类物质种类丰富且相对含量较高,生物碱类和黄酮类物质具有广谱的杀菌(真菌、细菌)、杀虫(杀刺吸式昆虫、咀嚼式口气昆虫、根结线虫)等效果。生物碱类易与酸性物质混用,能相互促进其作用和功效,因此本申请在白刺花水提液中加入硫磺粉既有利于硫磺溶解,还能产生含生物碱类的硫悬浮剂,其粘着性能好,药效长,耐雨水冲刷,而且增强药物的渗透性和功效,长期使用不易产生抗性。此外,生物碱类还是一种有机氮类化合物,降解后可成为猕猴桃叶片所需营养成分,促进植物生长。白刺花根和花混合后提取物中无论是成分还是含量均比单独提取其成分和含量均发生了显著变化。
配方中还加入适宜浓度芸苔素内酯喷施猕猴桃叶片,能促使猕猴桃叶片加深变绿,不利于病菌侵入。
添加的氨基寡糖素可诱导植物产生抗病性,偏酸性条件下,氨基寡糖素分子中-NH+3与细菌细胞壁所含硅酸、磷酸脂等解离出阴离子结合,从而阻碍细菌大量繁,还能抑制真菌菌丝生长和孢子萌发。
营养补充剂(寡糖、硼、锌以及甘氨酸和天门冬氨酸)喷施非常有利于猕猴桃叶片吸收,因氨基酸是构成蛋白质的最小分子,能够快速补充猕猴桃叶片所需的氨基酸,能增强植物的代谢功能,它是一种细胞赋活剂,利于微量元素能被植物快速吸收,适宜浓度下硼和锌搭配能相互促进。本申请中加入甘氨酸和天门冬氨酸是因为在白刺花水提液中没有检测到甘氨酸和天门冬氨酸,而在花和根混合液体中检测到了其他丰富的氨基酸(谷氨酸、亮氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸等)。为更全面补充营养,增强叶片代谢功能,因而添加了甘氨酸和天门冬氨酸。
采用以上原料进行搭配,且采用本申请科学合理的配方,并最佳时间喷施猕猴桃叶,具有防控、协调猕猴桃叶片营养平衡、增强光合作用、增强猕猴桃叶片抗病性等多重功能。
由于本发明采用了以上技术方案,具有以下有益效果:
(1)本申请创造性研发出一种取代化学农药防控猕猴桃斑点早期落叶病的植物源抗病复合诱抗剂,在猕猴桃斑点早期落叶病未见明显症状时期,即每年6 月1~15号时喷施猴桃叶背面,使得植物获得系统抗病性,从而达到提前防控病害的目的,该复合诱抗剂能提高猕猴桃抗病性,还能有效降低猕猴桃斑点早期落叶病发病率和病情指数,减少农药使用,提高猕猴桃食品质量安全。
(2)本发明的目的在于解决南方地区红阳猕猴桃生产中面临的猕猴桃斑点早期落叶病导致猕猴桃叶片早期脱落,树上仅剩果实,致使当年果实干物质积累降低,果实储藏时间缩短,树体当年出现第二次萌芽和开花,进而导致次年萌芽不整齐,严重影响当年和次年猕猴桃产量和品质的问题,提供一种防治猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂,该复合诱抗剂使得植物获得系统抗病性,提高猕猴桃抗病性,从而达到防控病害的目的,且该复合诱抗剂无毒无害、环保友好、材料来源易取,能有效防控猕猴桃斑点早期落叶病,减少农药使用,提高猕猴桃食品质量安全。
(3)本发明以植物源药剂——白刺花水提液为主,配合营养成分和微量元素,制得的复合诱抗剂在猕猴桃斑点早期落叶病病防治上表现优异,适合用于防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病,田间防治于每年6月1~15号时使用 300~400倍液喷施猴桃叶背面,使得植物获得系统抗病性,从而达到预防病害的目的。
(4)本发明植物源复合诱抗剂原料来源廉价易取,无需高端设备,易操作,并且成本低廉,对猕猴桃斑点早期落叶病的防效好,降低了化学农药的使用,能有效提高猕猴桃的食品安全性,具有显著的生态环境效益。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实例或现有技术中的技术方案,下面将对实施实例或现有技术描述中所需要的附图做简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实例,对于本领域普通技术人员来说,在不付出创造性的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图:
图1为本申请应用实例1白刺花水提液单施与混施对猕猴桃斑点早期落叶病发病率示意图;
图2为本申请白刺花水提液单施与混施对猕猴桃斑点早期落叶病病情指数示意图;
图3为本申请白刺花水提液单施与混施对猕猴桃斑点早期落叶病的防治效果示意图;
图4为本申请白刺花水提液与氨基酸组分及微量元素混施对猕猴桃斑点早期落叶病的发病率示意图;
图5为本申请白刺花水提液与氨基酸组分及微量元素混施对猕猴桃斑点早期落叶病病情指数示意图;
图6为本申请白刺花水提液与氨基酸组分及微量元素混施对猕猴桃斑点早期落叶病的防治效果示意图。
附图中:a、b、c、d是用spss软件进行单因素方差分析结果标记的一种方法,表示在P=0.01时,各处理间方差分析是否有差异,含有相同字母的表明处理间没有显著差异,不同字母表示处理间有显著差异。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方式作进一步详细的说明,但本发明并不局限于这些实施方式,任何在本实施例基本精神上的改进或代替,仍属于本发明权利要求所要求保护的范围。
实施例1
一种防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂,由以下质量百分比的原料制成:0.05%氨基寡糖素、0.05%营养补充剂、0.02%芸苔素内脂、0.02%硫磺粉、10%白刺花水提液,余量为水。
进一步地,所述氨基寡糖素为水溶性氨基寡糖素;所述营养补充剂为寡糖、硼、锌以及甘氨酸和天门冬氨酸组成的复合型水溶性氨基酸;所述芸苔素内酯为水溶性24-表芸苔素内酯;所述硫磺粉为固体粉末硫磺粉;所述水为蒸馏水、去离子水、高纯水中的一种或一种以上;所述白刺花水提液的制备方法,包括以下步骤:
①选取白刺花根皮和白刺花干花:取1~2年生刚挖出土的白刺花根,将主根、侧根和须根分别剪下、清洗干净,取主根和侧根的皮,将主根和侧根的皮以及须根分别切成5~10cm小段,沥干表面水分,得白刺花根皮;取刚采摘的新鲜白刺花,洗净去杂后均匀撒在磁盘中,烘干,得白刺花干花;所述烘干是放入 35℃的恒温培养箱中烘36h;
②浸泡、煎煮:按照质量百分比将步骤①的白刺花根皮、白刺花干花与水混合,浸泡煎煮,过滤收集滤液,向滤液中加入水配成pH为5.5~6.0的白刺花水提液,分装后密封,高温高压灭菌,获得所述白刺花水提液;所述白刺花根皮、白刺花干花与水按照以下质量百分比:10%白刺花根皮、5%白刺花干花,余量为水;所述浸泡煎煮是:在常温下浸泡2h后,大火烧开后转小火慢煮60min;所述高温高压灭菌是将物料置于121℃下高压蒸汽灭菌锅中保压灭菌20min。
一种如上述所述的防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)按照质量百分比称取氨基寡糖素、营养补充剂、芸苔素内脂、硫磺粉、白刺花水提液,在搅拌状态下,先向硫磺粉中缓慢加入白刺花水提液,混合均匀后加水,再依次加入氨基寡糖素、营养补充剂、芸苔素内脂,搅拌均匀,得到复合诱抗剂半成品;
(2)将步骤(1)的复合诱抗剂半成品装入无菌的玻璃瓶或塑料瓶中,并密封保存,制得所述复合诱抗剂。
一种如上述所述的防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂的应用,将其应用在南方地区猕猴桃斑点早期落叶病的防治。
实施例2
一种防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂,由以下质量百分比的原料制成:0.06%氨基寡糖素、0.06%营养补充剂、0.03%芸苔素内脂、0.03%硫磺粉、15%白刺花水提液,余量为水。
进一步地,所述氨基寡糖素为水溶性氨基寡糖素;所述营养补充剂为寡糖、硼、锌以及甘氨酸和天门冬氨酸组成的复合型水溶性氨基酸;所述芸苔素内酯为水溶性24-表芸苔素内酯;所述硫磺粉为固体粉末硫磺粉;所述水为蒸馏水、去离子水、高纯水中的一种或一种以上;所述白刺花水提液的制备方法,包括以下步骤:
①选取白刺花根皮和白刺花干花:取1~2年生刚挖出土的白刺花根,将主根、侧根和须根分别剪下、清洗干净,取主根和侧根的皮,将主根和侧根的皮以及须根分别切成5~10cm小段,沥干表面水分,得白刺花根皮;取刚采摘的新鲜白刺花,洗净去杂后均匀撒在磁盘中,烘干,得白刺花干花;所述烘干是放入 40℃的恒温培养箱中烘48h;
②浸泡、煎煮:按照质量百分比将步骤①的白刺花根皮、白刺花干花与水混合,浸泡煎煮,过滤收集滤液,向滤液中加入水配成pH为5.5~6.0的白刺花水提液,分装后密封,高温高压灭菌,获得所述白刺花水提液;所述白刺花根皮、白刺花干花与水按照以下质量百分比:12%白刺花根皮、7%白刺花干花,余量为水;所述浸泡煎煮是:在常温下浸泡3h后,大火烧开后转小火慢煮65min;所述高温高压灭菌是将物料置于121℃下高压蒸汽灭菌锅中保压灭菌23min。
一种如上述所述的防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)按照质量百分比称取氨基寡糖素、营养补充剂、芸苔素内脂、硫磺粉、白刺花水提液,在搅拌状态下,先向硫磺粉中缓慢加入白刺花水提液,混合均匀后加水,再依次加入氨基寡糖素、营养补充剂、芸苔素内脂,搅拌均匀,得到复合诱抗剂半成品;
(2)将步骤(1)的复合诱抗剂半成品装入无菌的玻璃瓶或塑料瓶中,并密封保存,制得所述复合诱抗剂。
一种如上述所述的防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂的应用,将其应用在南方地区猕猴桃斑点早期落叶病的防治。
实施例3
一种防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂,由以下质量百分比的原料制成:0.052%氨基寡糖素、0.053%营养补充剂、0.023%芸苔素内脂、 0.022%硫磺粉、11%白刺花水提液,余量为水。
进一步地,所述氨基寡糖素为水溶性氨基寡糖素;所述营养补充剂为寡糖、硼、锌以及甘氨酸和天门冬氨酸组成的复合型水溶性氨基酸;所述芸苔素内酯为水溶性24-表芸苔素内酯;所述硫磺粉为固体粉末硫磺粉;所述水为蒸馏水、去离子水、高纯水中的一种或一种以上;所述白刺花水提液的制备方法,包括以下步骤:
①选取白刺花根皮和白刺花干花:取1~2年生刚挖出土的白刺花根,将主根、侧根和须根分别剪下、清洗干净,取主根和侧根的皮,将主根和侧根的皮以及须根分别切成5~10cm小段,沥干表面水分,得白刺花根皮;取刚采摘的新鲜白刺花,洗净去杂后均匀撒在磁盘中,烘干,得白刺花干花;所述烘干是放入 36℃的恒温培养箱中烘38h;
②浸泡、煎煮:按照质量百分比将步骤①的白刺花根皮、白刺花干花与水混合,浸泡煎煮,过滤收集滤液,向滤液中加入水配成pH为5.5~6.0的白刺花水提液,分装后密封,高温高压灭菌,获得所述白刺花水提液;所述白刺花根皮、白刺花干花与水按照以下质量百分比:10.5%白刺花根皮、5.5%白刺花干花,余量为水;所述浸泡煎煮是:在常温下浸泡2.2h后,大火烧开后转小火慢煮61min;所述高温高压灭菌是将物料置于121℃下高压蒸汽灭菌锅中保压灭菌21min。
一种如上述所述的防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)按照质量百分比称取氨基寡糖素、营养补充剂、芸苔素内脂、硫磺粉、白刺花水提液,在搅拌状态下,先向硫磺粉中缓慢加入白刺花水提液,混合均匀后加水,再依次加入氨基寡糖素、营养补充剂、芸苔素内脂,搅拌均匀,得到复合诱抗剂半成品;
(2)将步骤(1)的复合诱抗剂半成品装入无菌的玻璃瓶或塑料瓶中,并密封保存,制得所述复合诱抗剂。
一种如上述所述的防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂的应用,将其应用在南方地区猕猴桃斑点早期落叶病的防治。
实施例4
一种防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂,由以下质量百分比的原料制成:0.058%氨基寡糖素、0.058%营养补充剂、0.027%芸苔素内脂、 0.028%硫磺粉、14%白刺花水提液,余量为水。
进一步地,所述氨基寡糖素为水溶性氨基寡糖素;所述营养补充剂为寡糖、硼、锌以及甘氨酸和天门冬氨酸组成的复合型水溶性氨基酸;所述芸苔素内酯为水溶性24-表芸苔素内酯;所述硫磺粉为固体粉末硫磺粉;所述水为蒸馏水、去离子水、高纯水中的一种或一种以上;所述白刺花水提液的制备方法,包括以下步骤:
①选取白刺花根皮和白刺花干花:取1~2年生刚挖出土的白刺花根,将主根、侧根和须根分别剪下、清洗干净,取主根和侧根的皮,将主根和侧根的皮以及须根分别切成5~10cm小段,沥干表面水分,得白刺花根皮;取刚采摘的新鲜白刺花,洗净去杂后均匀撒在磁盘中,烘干,得白刺花干花;所述烘干是放入 39℃的恒温培养箱中烘45h;
②浸泡、煎煮:按照质量百分比将步骤①的白刺花根皮、白刺花干花与水混合,浸泡煎煮,过滤收集滤液,向滤液中加入水配成pH为5.5~6.0的白刺花水提液,分装后密封,高温高压灭菌,获得所述白刺花水提液;所述白刺花根皮、白刺花干花与水按照以下质量百分比:11.5%白刺花根皮、6.5%白刺花干花,余量为水;所述浸泡煎煮是:在常温下浸泡2.8h后,大火烧开后转小火慢煮64min;所述高温高压灭菌是将物料置于121℃下高压蒸汽灭菌锅中保压灭菌22min。
一种如上述所述的防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)按照质量百分比称取氨基寡糖素、营养补充剂、芸苔素内脂、硫磺粉、白刺花水提液,在搅拌状态下,先向硫磺粉中缓慢加入白刺花水提液,混合均匀后加水,再依次加入氨基寡糖素、营养补充剂、芸苔素内脂,搅拌均匀,得到复合诱抗剂半成品;
(2)将步骤(1)的复合诱抗剂半成品装入无菌的玻璃瓶或塑料瓶中,并密封保存,制得所述复合诱抗剂。
一种如上述所述的防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂的应用,将其应用在南方地区猕猴桃斑点早期落叶病的防治。
实施例5
一种防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂,由以下质量百分比的原料制成:0.06%氨基寡糖素、0.06%营养补充剂、0.02%芸苔素内酯、0.02%硫磺粉,15%白刺花水提液,余量为水。
进一步地,所述氨基寡糖素为水溶性氨基寡糖素;所述营养补充剂为寡糖、硼、锌以及甘氨酸和天门冬氨酸组成的复合型水溶性氨基酸;所述芸苔素内酯为水溶性24-表芸苔素内酯;所述硫磺粉为固体粉末硫磺粉;所述水为蒸馏水、去离子水、高纯水中的一种或一种以上;所述白刺花水提液的制备方法,包括以下步骤:
①选取白刺花根皮和白刺花干花:取1~2年生刚挖出土的白刺花根,将主根、侧根和须根分别剪下、清洗干净,取主根和侧根的皮,将主根和侧根的皮以及须根分别切成5~10cm小段,沥干表面水分,得白刺花根皮;取刚采摘的新鲜白刺花,洗净去杂后均匀撒在磁盘中,烘干,得白刺花干花;所述烘干是放入 38℃的恒温培养箱中烘42h;
②浸泡、煎煮:按照质量百分比将步骤①的白刺花根皮、白刺花干花与水混合,浸泡煎煮,过滤收集滤液,向滤液中加入水配成pH为5.5~6.0的白刺花水提液,分装后密封,高温高压灭菌,获得所述白刺花水提液;所述白刺花根皮、白刺花干花与水按照以下质量百分比:11%白刺花根皮、6%白刺花干花,余量为水;所述浸泡煎煮是:在常温下浸泡2.5h后,大火烧开后转小火慢煮63min;所述高温高压灭菌是将物料置于121℃下高压蒸汽灭菌锅中保压灭菌22min。
一种如上述所述的防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)按照质量百分比称取氨基寡糖素、营养补充剂、芸苔素内脂、硫磺粉、白刺花水提液,在搅拌状态下,先向硫磺粉中缓慢加入白刺花水提液,混合均匀后加水,再依次加入氨基寡糖素、营养补充剂、芸苔素内脂,搅拌均匀,得到复合诱抗剂半成品;
(2)将步骤(1)的复合诱抗剂半成品装入无菌的玻璃瓶或塑料瓶中,并密封保存,制得所述复合诱抗剂。
一种如上述所述的防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂的应用,将其应用在南方地区猕猴桃斑点早期落叶病的防治。
为了进一步说明本发明能够达到所述技术效果,做以下实验:
应用实例1
将实施例1制得的复合诱抗剂用于猕猴桃斑点早期落叶病的防治,观察白刺花水提液单施与混施对猕猴桃斑点早期落叶病的影响。
(1)选择一块树龄均为5年的红阳猕猴桃种植区,试验采取随机区组设计,每个处理选择长势基本一致的10棵红阳猕猴桃树,第一次喷施时间2020年6月 11日,每个处理间隔10d左右喷施一次,一共连续喷施3次。试验期间天气以晴为主,喷施后2-3天无降雨。喷施结束后分别于2020年7月14日,7月24 日,8月4日调查猕猴桃斑点早期落叶病的发病率、病情指数和防控效果。田间试验白刺花水提液防控效果成分配比如表2所示。
表2白刺花水提液单施与混施对猕猴桃斑点早期落叶病的影响配比表
Figure BDA0002997470120000201
(2)猕猴桃斑点早期落叶病发病情况调查:
每个处理调查10棵猕猴桃树,每棵树调查50片叶子,通过计算发病率、病情指数和相对防效分析不同处理下猕猴桃斑点早期落叶病的发生情况和防治效果,共调查3次,分别是2020年7月14日,7月24日,8月4日。发病情况调查表分级标准见表3
表3猕猴桃斑点早期落叶病分级标准
Figure BDA0002997470120000202
Figure BDA0002997470120000211
相关公式:
发病率(%)=发病叶数/调查总叶数×100;
病情指数=Σ(各级代表值*各级病叶数)/最高级代表值×调查总叶数;
相对防治效果(%)=(对照病情指数-处理病情指数)/对照病情指数×100。
实验数据采用SPSS和GraphPadPrism软件进行数据分析和作图,实验结果如图1、图2、图3所示。
(3)防治效果
从试验结果图1、图2、图3可知,对照和不同处理下,斑点早期落叶病的发病率和病情指数随着时间的增加不断地升高,采用不同处理后的相对防效也有一定程度的增加,但是使用处理1-6方法处理后,和对照相比,病害的发病率、病情指数和相对防效比对照(甲基托布津)都有所降低。从调查的3个时间点来分析,可以看出处理6的防治效果最好,其发病率最高达到59.1%,病情指数最高为7.49,防治效果为73.28%;其次为处理5,3次调查后发病率为64.5%,病情指数为10.34,防治效果为70.9%。此试验结果表明:0.06%氨基寡糖素、0.06%氨基酸、0.03%芸苔素内酯、0.03%硫磺粉、15%白刺花水提液、84.82%水,稀释300后喷施效果较好。
应用实例2
将实施例2制得的复合诱抗剂用于猕猴桃斑点早期落叶病的防治,观察白刺花水提液、氨基酸组分及微量元素混施对猕猴桃斑点早期落叶病的影响。
(1)选择一块树龄均为5年的红阳猕猴桃种植区,试验采取随机区组设计,每个处理选择长势基本一致的10棵红阳猕猴桃树。试验区块不同,选择的树龄、品种、喷施时间、喷施次数、调查时间均与应用实例1相同。复合诱抗剂的田间试验防控效果成分配比如表4所示。
表4白刺花水提液与氨基酸、微量元素混施对猕猴桃斑点早期落叶病影响配比表
Figure BDA0002997470120000221
(2)猕猴桃斑点早期落叶病发病情况调查
调查方法,调查时间,分级标准,发病率、病情指数、防效效果和计算方法均与应用实例1相同,实验结果如图4、图5、图6所示。
(3)效果
对照(甲基拖布津)和4个不同的处理在3个调查点的发病率和病情指数都在存在显著差异。其中处理7的防治效果较差,发病率为70%,病情指数为10.2,防治效果为32.5%;处理10的防控效果相对较好,发病率为57%、病情指数为 7.4,防治效果为56%。此试验结果表明:白刺花水提液、甘氨酸、色氨酸、寡糖、硼、锌、84.83%水,稀释300后喷施效果相对其它处理较好。
应用实例3
将实施例3制得的复合诱抗剂用于猕猴桃斑点早期落叶病的防治,观察白刺花水提液不同喷施时间对猕猴桃斑点早期落叶病的影响。
(1)选择一块树龄均为5年的红阳猕猴桃种植区,试验采取随机区组设计,每个处理选择长势基本一致的10棵红阳猕猴桃树。只是试验区块不同,选择的树龄、品种均与应用实例1相同。
(2)猕猴桃斑点早期落叶病发病情况调查
调查方法、调查时间、分级标准、发病率、病情指数、防效效果、计算方法均与应用实例1相同;
药物组成和使用方法为:0.06%氨基寡糖素、0.06%氨基酸、0.03%芸苔素内酯、0.03%硫磺粉、15%白刺花水提液、84.82%水,稀释300倍后喷施,采用甲基拖布津作为对照试验;
喷施时间设计:每个处理间隔10天,连续喷施3次,6月11日第一次喷药为处理11,6月22日第一次喷药为处理12,7月4日第一次喷药为处13,对照喷施时间与处理11为同一时间,于同年8月4日调查一次。
(3)结果
实验结果如表5所所示:对照的发病率为87.43%,病情指数为14.38;处理 11的防治效果最好,发病率为59.53%,病情指数6.90,相对防效为51.54%;处理12和处理13之间没有明显的差异,相对防效为34%左右。
此试验结果表明:在进行斑点早期落叶病防治的过程中,从第一次发现有病斑或者病斑未出现之前就应该及时进行预防,可以达到较好的效果。在南方红阳猕猴桃产业园区,防控猕猴桃斑点早期落叶病的最佳预防时间为6月11日左右。
表5不同喷施时间对猕猴桃斑点早期落叶病的防治效果
不同处理 发病率(%) 病情指数 相对防效(%)
对照 87.43 14.38 /
处理11 59.53 6.90 51.54a
处理12 69.20 9.46 34.28b
处理13 77.67 9.54 33.57b
注:表5中的ab是用spss软件进行单因素方差分析结果标记的一种方法,表示在P=0.01 时,各处理间方差分析是否有差异,含有相同字母的表明处理间没有显著差异,不同字母表示处理间有显著差异。
从应用实例1~应用实例3可以看出,创造性设计将白刺花水提液单施与氨基酸组分或微量元素混施,以及不同喷施时间的试验进行筛选,并分别从发病率、病情指数、防控效果指标进行统计和分析,最终创造性得出了能显著提高猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂,且还知道了最佳防控时间。
对于本领域技术人员而言,显然本发明不限于上述示范性实施例的细节,而且在没有背离本发明的精神或基本特征的情况下,能够以其他的具体形式实现本发明。因此,无论从哪一点来看,均应将实施例看作是示范性的,而且是非限制性的,本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定,因此旨在将落在权利要求的等同含义和范围内的所有变化囊括在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂,其特征在于,由以下质量百分比的原料制成:0.05~0.06%氨基寡糖素、0.05~0.06%营养补充剂、0.02~0.03%芸苔素内酯、0.02~0.03%硫磺粉、10~15%白刺花水提液,余量为水;
所述营养补充剂为寡糖、硼、锌以及甘氨酸和天门冬氨酸组成的复合型水溶性氨基酸;
所述白刺花水提液的制备方法,包括以下步骤:
①选取白刺花根皮和白刺花干花:取1~2年生刚挖出土的白刺花根,将主根、侧根和须根分别剪下、清洗干净,取主根和侧根的皮,将主根和侧根的皮以及须根分别切成5~10cm小段,沥干表面水分,得白刺花根皮;取刚采摘的新鲜白刺花,洗净去杂后均匀撒在磁盘中,烘干,得白刺花干花;
②浸泡、煎煮:按照质量百分比将步骤①的白刺花根皮、白刺花干花与水混合,浸泡煎煮,过滤收集滤液,向滤液中加入水配成pH为5.5~6.0的白刺花水提液,分装后密封,高温高压灭菌,获得所述白刺花水提液;
在步骤②,所述白刺花根皮、白刺花干花与水按照以下质量百分比:10~12%白刺花根皮、5~7%白刺花干花,余量为水;所述浸泡煎煮是:在常温下浸泡2~3h后,大火烧开后转小火慢煮60~65min;所述高温高压灭菌是将物料置于121℃下高压蒸汽灭菌锅中保压灭菌20~23min。
2.根据权利要求1所述的一种防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂,其特征在于:所述氨基寡糖素为水溶性氨基寡糖素。
3.根据权利要求1所述的一种防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂,其特征在于:所述芸苔素内酯为水溶性24-表芸苔素内酯。
4.根据权利要求1所述的一种防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂,其特征在于:所述硫磺粉为固体粉末硫磺粉;所述水为蒸馏水、去离子水、高纯水中的一种或一种以上。
5.根据权利要求1所述的一种防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂,其特征在于:在步骤①,所述烘干是放入35~40℃的恒温培养箱中烘36~48h。
6.一种如权利要求1~5任一项所述的一种防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂,其特征在于:所述的复合诱抗剂由以下质量百分比组成:0.06%氨基寡糖素、0.06%氨基酸、0.02%芸苔素内酯、0.02%硫磺粉,15%白刺花根皮和花的复合水提液、84.82%的水;所述的氨基酸为甘氨酸、天门冬氨酸、寡糖、硼、锌组成的复合型水溶性氨基酸;所述的芸苔素内酯为水溶性24-表芸苔素内酯;所述的硫磺粉为固体粉末硫磺粉。
7.一种如权利要求1~6任一项所述的防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)按照质量百分比称取氨基寡糖素、营养补充剂、芸苔素内酯、硫磺粉、白刺花水提液,在搅拌状态下,先向硫磺粉中缓慢加入白刺花水提液,混合均匀后加水,再依次加入氨基寡糖素、营养补充剂、芸苔素内酯,搅拌均匀,得到复合诱抗剂半成品;
(2)将步骤(1)的复合诱抗剂半成品装入无菌的玻璃瓶或塑料瓶中,并密封保存,制得所述复合诱抗剂。
8.一种如权利要求1~7任一项所述的防治南方地区红阳猕猴桃斑点早期落叶病的复合诱抗剂的应用,其特征在于:将其应用在南方地区猕猴桃斑点早期落叶病的防治。
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