CN112088005A

CN112088005A - 可用作hiv整合酶抑制剂的三环杂环化合物

Info

Publication number: CN112088005A
Application number: CN201980028504.5A
Authority: CN
Inventors: 余涛; J·M·阿普加; A·怀特赫德; 张永连; 扈志勇; V·W·舒特莱夫; J·A·麦考利; I·T·拉希姆
Original assignee: MERCK
Current assignee: MERCK
Priority date: 2018-04-27
Filing date: 2019-04-22
Publication date: 2020-12-15
Also published as: MA52367A; EP3784241A1; JP2021522254A; AU2019260608A1; KR20210005139A; WO2019209667A1; EP3784241A4; MX2020011317A; CA3101180A1; BR112020021768A2

Abstract

本发明涉及式(I)的三环杂环化合物及其药学上可接受的盐或前药，其中R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶和n如本文所定义。本发明还涉及包含至少一种三环杂环化合物的组合物，以及使用该三环杂环化合物治疗或预防个体的HIV感染的方法。

Description

可用作HIV整合酶抑制剂的三环杂环化合物

技术领域

本发明涉及三环杂环化合物，包含至少一种三环杂环化合物的组合物，以及使用所述三环杂环化合物治疗或预防个体的HIV感染的方法。

背景技术

人类免疫缺陷病毒(HIV)的逆转录病毒，特别是被称为HIV-1型(HIV-1)病毒和2型(HIV-2)病毒的菌株，是包括免疫系统的渐进性破坏(获得性免疫缺陷综合症；艾滋病)以及中枢和周围神经系统退化在内的复杂疾病的病因。逆转录病毒复制的共同特征是病毒编码的+原病毒DNA整合酶插入宿主细胞基因组，这是HIV在人T淋巴细胞和单核细胞中复制的必需步骤。据认为，整合是通过三个步骤的整合酶来介导的：稳定的核蛋白络合物与病毒DNA序列的组装；从线性原病毒DNA的3'末端切割两个核苷酸，并在宿主靶位点进行交错切割使原病毒DNA的凹入3'OH末端共价连接。该过程的第四步，修复合成所得缺口，可以通过细胞酶来完成。

HIV的核苷酸测序表明在一个开放阅读框中存在pol基因[Ratner,L.et al.,Nature,313,277(1985)]。氨基酸序列同源性提供了pol序列编码逆转录酶、整合酶和HIV蛋白酶的证据[Toh,H.et al.,EMBO J.4,1267(1985)；Power,M.D.et al.,Science,231,1567(1986)；Pearl,L.H.et al.,Nature,329,351(1987)]。已显示所有这三种酶对于HIV复制都是必不可少的。

已知一些充当HIV复制抑制剂的抗病毒化合物是治疗艾滋病和类似疾病的有效药剂，包括逆转录酶抑制剂例如叠氮胸苷(AZT)和依法韦仑，以及蛋白酶抑制剂例如茚地那韦和奈非那韦。本发明的化合物是HIV整合酶的抑制剂和HIV复制的抑制剂。

发明内容

一方面，本发明提供式(I)的化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

每次出现的R¹独立地为：卤素，羟基，C_1-6烷基和-O-(C₁-C₆烷基)；

R²是氢、甲基或乙基；

R³是氢、甲基或乙基；

R⁴是C_1-6烷基或(C_1-6烷基)OR⁷；

R⁵是氢、C_1-6烷基或(C_1-6烷基)OR⁷；

R⁶是氢、C_1-6烷基或(C_1-6烷基)OR⁷；

R⁷是氢或C_1-6烷基，其任选地被1-3个卤素取代；

n是介于1到3之间的整数。

式(I)的化合物(在本文中也称为“三环杂环化合物”)及其药学上可接受的盐或前药可用于例如抑制HIV病毒复制或复制子活性，或用于治疗或预防个体的HIV感染。不受任何具体理论的束缚，据信三环杂环化合物通过抑制HIV整合酶来抑制HIV病毒复制。

因此，本发明提供了用于在个体中治疗或预防HIV感染的方法，包括向个体施用有效量的至少一种三环杂环化合物。

本发明的细节在下面的详细描述中阐述。

尽管与本文描述的那些类似的任何方法和材料都可以用于本发明的实践或测试中，但是现在描述说明性的方法和材料。本发明的其他实施方案、方面和特征将在随后的描述、实施例和所附权利要求书中进一步描述或变得显而易见。

具体实施方式

本发明包括三环杂环化合物，包含至少一种三环杂环化合物的组合物，以及使用所述三环杂环化合物治疗或预防个体的HIV感染的方法。

定义和缩写

本文使用的术语具有其普通含义，并且这些术语的含义在每次出现时都是独立的。尽管如此，除非另有说明，以下定义适用于整个说明书和权利要求书。化学名称、通用名称和化学结构可以互换使用，以描述相同的结构。除非另有说明，否则无论术语是单独使用还是与其他术语组合使用，这些定义均适用。因此，“烷基”的定义适用于“烷基”以及“羟基烷基”、“卤代烷基”、“-O-烷基”等的“烷基”部分。

如本文所用以及贯穿本公开，除非另有说明，否则以下术语应理解为具有以下含义：

“个体”是人类或非人类哺乳动物。在一个实施方案中，个体是人。在另一个实施方案中，个体是灵长类动物。在另一个实施方案中，个体是猴子。在另一个实施方案中，个体是黑猩猩。在另一个实施方案中，个体是恒河猴。

如本文所用，术语“有效量”是指对患有HIV感染或AIDS的个体给药时有效抑制HIV复制并产生所需的治疗、改善、抑制或预防作用的三环杂环化合物和/或其他治疗剂或其组合物的量。在本发明的组合疗法中，有效量可以指每种单独的药剂或整个组合，其中施用的所有药剂的量合在一起是有效的，但是其中该组合的成分药剂可以不是以有效量单独存在。

本文针对HIV病毒感染或艾滋病所用的术语“治疗”包括抑制HIV感染或AIDS疾病的严重程度，即，阻止或减少HIV感染或AIDS疾病或其临床症状的发展；或减轻HIV感染或AIDS疾病，即导致HIV感染或AIDS疾病或其临床症状的严重程度降低。

如本文针对HIV病毒感染或AIDS所使用的术语“预防”是指降低HIV感染或AIDS的可能性或严重程度。

如本文所用，术语“烷基”是指其氢原子之一被键取代的脂族烃基。烷基可以是直链或支链的并且包含约1至约20个碳原子。在一个实施方案中，烷基包含约1至约12个碳原子。在不同的实施方案中，烷基包含1至6个碳原子(C₁-C₆烷基)或约1至约4个碳原子(C₁-C₄烷基)。烷基的非限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、新戊基、异戊基、正己基、异己基和新己基。在一个实施方案中，烷基是直链的。在另一个实施方案中，烷基是支链的。除非另有说明，否则烷基是未取代的。

如本文所用，术语“卤代”是指-F、-Cl、-Br或-I。

如本文所用，术语“卤代烷基”是指如上所定义的烷基，其中一个或多个烷基的氢原子已被卤素代替。在一个实施方案中，卤代烷基具有1至6个碳原子。在另一个实施方案中，卤代烷基被1-3个F原子取代。卤代烷基的非限制性实例包括–CH₂F、-CHF₂、-CF₃、-CH₂Cl和-CCl₃。术语“C₁-C₆卤代烷基”是指具有1-6个碳原子的卤代烷基。

术语“取代的”是指指定原子上的一个或多个氢被指定基团的选择所代替，条件是在现有情况下不超过指定原子的正常价，并且取代产生稳定的化合物。仅当取代基和/或变量的组合产生稳定的化合物时，才允许这些组合。“稳定的化合物”或“稳定的结构”是指足够坚固以至于可从反应混合物中分离至纯度可用的程度，并配制成有效治疗剂的化合物。

如本文所用，术语“基本上纯化的形式”是指化合物从合成过程(例如从反应混合物)、天然源或其组合中分离后的物理状态。术语“基本上纯化的形式”也指化合物从本文所述的纯化方法或本领域技术人员熟知的纯化方法(例如色谱法、重结晶法等)获得的化合物的物理状态，纯度足以通过本文所述或本领域技术人员熟知的标准分析技术表征。

还应注意，本文的文本、方案、实施例和表中的任何碳以及具有不满足化合价的杂原子均假定具有足够数量的氢原子来满足化合价。

当化合物中的官能团被称为“被保护的”时，这意味着该基团是修饰的形式，以防止当化合物进行反应时在被保护的位点发生不希望的副反应。合适的保护基团将由本领域普通技术人员以及参考标准教科书例如T.W.Greene等人，Protectivegroups inOrganiCSynthesis(1991)，Wiley，New York所识别。

当任何取代基或变量(例如R²和R³)在任何成分或式(I)中出现多次时，其在每次出现时的定义独立于在其他各次出现时的定义，除非另有说明。

如本文所用，术语“组合物”旨在涵盖包含指定量的指定成分的产品，以及由指定量的指定成分的组合产生的任何产品。

本发明化合物的前药和溶剂化物也被考虑在本文中。T.Higuchi和V.Stella,Pro-drugs as Novel Delivery Systems(1987)14 of the A.C.S.Symposium Series,和Bioreversible Carriers in Drug Design,(1987)爱德华·B·罗氏编著，美国药学会和佩加蒙出版社中提供了前药的讨论。术语“前药”是指在体内转化以提供三环杂环化合物或该化合物的药学上可接受的盐的化合物(例如，药物前体)。转化可以通过多种机制发生(例如通过代谢或化学过程)，例如通过在血液中水解。例如，如果三环杂环化合物或该化合物的药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物包含羧酸官能团，则前药可包括通过将酸基团的氢原子替换为诸如(C₁-C₈)烷基、(C₂-C₁₂)烷酰氧基甲基、具有4至9个碳原子的1-(烷酰氧基)乙基、具有5至10个碳原子的1-甲基-1-(烷酰氧基)-乙基、具有3至6个碳原子的烷氧基羰氧基甲基、具有4至7个碳原子的1-(烷氧基羰氧基)乙基、具有5至8个碳原子的1-甲基-1-(烷氧基羰氧基)乙基、具有3至9个碳原子的N-(烷氧基羰基)氨基甲基、具有4至10个碳原子的1-(N-(烷氧基羰基)氨基)乙基、3-邻苯二甲酰基、4-巴豆内酯基、γ-丁内酯-4-基，二-N,N-(C₁-C₂)烷基氨基(C₂-C₃)烷基(例如β-二甲基氨基乙基)、氨基甲酰基-(C₁-C₂)烷基、N,N-二(C₁-C₂)烷基氨基甲酰基-(C₁-C₂)烷基和哌啶-、吡咯烷或吗啉(C₂-C₃)烷基等。

类似地，如果三环杂环化合物包含醇官能团，则可以通过用诸如以下的基团代替醇基的一个或多个氢原子来形成前药，例如(C₁-C₆)烷酰氧基甲基、l-((C₁-C₆)烷酰氧基)乙基、1-甲基-1-((C₁-C₆)烷酰氧基)乙基、(C₁-C₆)烷氧基羰氧基甲基、N-(C₁-C₆)烷氧基羰基氨基甲基、琥珀酰基、(C₁-C₆)烷酰基、α-氨基(C₁-C₄)烷基、α-氨基(C₁-C₄)亚烷基-芳基、芳基酰基和α-氨基酰基，或α-氨基酰基-α-氨基酰基，其中每个α-氨基酰基独立地选自天然存在的L-氨基酸或糖基(从除去碳水化合物的半缩醛形式的羟基得到的基团)。

如果三环杂环化合物含有胺官能团，则前药可以通过用诸如以下的基团代替胺基中的氢原子来形成，例如：R-羰基-，RO-羰基-，NRR'-羰基-，其中R和R'各自独立地为(C₁-C₁₀)烷基，(C₃-C₇)环烷基，苄基，天然α-氨基酰基，-C(OH)C(O)OY¹(其中Y¹是H)，(C₁-C₆)烷基或苄基，-C(OY²)Y³(其中Y²为(C₁-C₄)烷基，且Y³为(C₁-C₆)烷基)；羧基(C₁-C₆)烷基；氨基(C₁-C₄)烷基或单-N-或二-N，N-(C₁-C₆)烷基氨基烷基；-C(Y⁴)Y⁵，其中Y⁴是H或甲基，而Y⁵是单-N-或二-N,N-(C₁-C₆)烷基氨基吗啉基；哌啶-1-基或吡咯烷-1-基等。

本发明化合物的药学上可接受的酯包括以下基团：(1)通过酯化羟基化合物的羟基获得的羧酸酯，其中酯基的羧酸部分的非羰基部分选自直链或支链烷基(例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、叔丁基、仲丁基或正丁基)，烷氧基烷基(例如甲氧基甲基)，芳烷基(例如苄基)，芳氧基烷基(例如苯氧甲基)，芳基(例如，任选地被例如卤素、C_1-4烷基、-O-(C_1-4烷基)或氨基取代的苯基)；(2)磺酸酯，例如烷基或芳烷基磺酰基(例如甲磺酰基)；(3)氨基酸酯，包括对应于天然和非天然氨基酸的那些(例如L-缬氨酰基或L-异亮氨酰基)；(4)膦酸酯和(5)单、二或三磷酸酯。磷酸酯可以通过例如C_1-20醇或其反应性衍生物或通过2,3-二(C_6-24)酰基甘油进一步酯化。

本发明的一种或多种化合物可以以非溶剂化的形式以及与药学上可接受的溶剂例如水、乙醇等的溶剂化的形式存在，并且意图是本发明包括溶剂化的形式和非溶剂化的形式。“溶剂化物”是指本发明化合物与一种或多种溶剂分子的物理缔合。这种物理缔合涉及不同程度的离子键和共价键，包括氢键。在某些情况下，例如当在结晶固体的晶格中掺入一种或多种溶剂分子时，溶剂化物将能够分离。“溶剂化物”包括溶液相和可分离的溶剂化物。溶剂化物的非限制性实例包括乙醇化物、甲醇化物等。“水合物”是其中溶剂分子是水的溶剂化物。

本发明的一种或多种化合物可以任选地转化为溶剂化物。溶剂合物的制备是众所周知的。因此，例如M.Caira et al,J.Pharmaceutical Sci.,93(3),601-611(2004)描述了在乙酸乙酯中以及从水中制备抗真菌氟康唑的溶剂化物。E.C.van Tonder et al,AAPSPharmSciTech.,5(1),article 12(2004)和A.L.Bingham et al,Chem.Commun.,603-604(2001)描述了溶剂化物、半溶剂化物、水合物等的类似制备。典型的非限制性方法包括在高于室温的条件下将本发明化合物溶于所需量的所需溶剂(有机溶剂或水或它们的混合物)中，并以足以形成晶体的速率冷却溶液，然后通过标准方法将其分离。诸如IR光谱的分析技术表明晶体中溶剂(或水)以溶剂化物(或水合物)的形式存在。

三环杂环化合物可以形成盐，其也在本发明的范围内。除非另有说明，否则本文中提及的三环杂环化合物应理解为包括提及其盐。本文所用的术语“盐”是指与无机酸和/或有机酸形成的酸性盐，以及与无机碱和/或有机碱形成的碱性盐。另外，当三环杂环化合物既包含碱性部分，例如但不限于吡啶或咪唑，又包含酸性部分，例如但不限于羧酸时，可以形成两性离子(“内盐”)，并且包括在本文所用术语“盐”中。在一个实施方案中，该盐是药学上可接受的(即，无毒的、生理上可接受的)盐。在另一个实施方案中，该盐不是药学上可接受的盐。式(I)化合物的盐可以例如通过使三环杂环化合物与一定量的酸或碱(例如等量)在诸如盐在其中沉淀的介质中或在水性介质中反应然后冻干而形成。

示例性的酸加成盐包括乙酸盐、抗坏血酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、富马酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、草酸盐、磷酸盐、丙酸盐、水杨酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐(也称为甲苯磺酸盐)等。另外，通常认为适合于形成来自碱性药物化合物的药学上有用的盐例如由P.Stahl等人，Camilleg.(eds.)Handbookof Pharmaceutical Salts.Properties,Selection and Use.(2002)Zurich:Wiley-VCH；S.Berge et al,Journal of Pharmaceutical Sciences(1977)66(1)1-19；P.gould,International J.of Pharmaceutics(1986)33201-217；Anderson et al,The Practiceof Medicinal Chemistry(1996),Academic Press,New York；和The Orange Book(Food&Drug Administration,Washington,D.C.在其网站上)讨论。这些公开内容通过引用并入本文。

示例性的碱性盐包括铵盐，碱金属盐例如钠、锂和钾盐，碱土金属盐例如钙和镁盐，与有机碱的盐(例如有机胺)例如二环己胺、叔丁胺、胆碱的盐；以及与氨基酸，例如精氨酸、赖氨酸等的盐。碱性含氮基团可以与诸如低级烷基卤化物(例如，甲基、乙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物)，二烷基硫酸酯(例如，二甲基、二乙基和二丁基硫酸酯)，长链卤化物(例如，癸基、月桂基和硬脂基氯化物、溴化物和碘化物)，芳基烷基卤化物(例如苄基和苯乙基溴化物)等的试剂季化。

在本发明的范围内，所有这些酸盐和碱盐均是药学上可接受的盐，并且出于本发明的目的，所有酸盐和碱盐均被认为等同于相应化合物的游离形式。

可以通过本领域技术人员众所周知的方法，例如通过色谱法和/或级分结晶，基于其物理化学差异将非对映异构体混合物分离为其单独的非对映异构体。对映异构体可以通过以下来分离：与合适的旋光活性化合物(例如，手性助剂，如手性醇或Mosher酰氯)反应使对映异构体混合物转化为非对映异构体混合物，分离非对映异构体，并将单个非对映异构体转化(例如水解)为相应的纯对映异构体。立体化学纯的化合物也可以通过使用手性原料或通过使用盐拆分技术来制备。而且，一些三环杂环化合物可以是阻转异构体(例如，取代的联芳基)，并被认为是本发明的一部分。对映异构体也可以使用手性色谱技术直接分离。

三环杂环化合物也可能以不同的互变异构形式存在，并且所有这些形式都包括在本发明的范围内。例如，化合物的所有酮-烯醇和亚胺-烯胺形式都包括在本发明中。

除非另有说明，否则本发明化合物的所有立体异构体(例如几何异构体、旋光异构体等)(包括化合物的盐、溶剂化物、水合物、酯和前药以及前药的盐、溶剂化物和酯)，例如由于各种取代基上的不对称碳而可能存在的那些，包括对映异构体形式(即使在缺乏不对称碳的情况下也可能存在)、旋转异构体形式、阻转异构体和非对映异构体形式，均被认为在本发明的范围内。如果三环杂环化合物含有双键或稠环，则顺式和反式形式以及其混合物均包括在本发明的范围内。

当没有描述手性碳原子上的取代基的立体化学时(通过使用至手性中心的直线键)，应理解为所述取代基的α和β构型均被认为是本发明的一部分。例如，本发明的化合物绘制如下：

被理解为在指定的手性中心包含两种立体异构体，其结构如下：

在下面的实施例部分中，有时以非立体特异性形式描绘已纯化为单个立体异构体的本发明化合物，但使用一种或多种术语进行识别：“非对映异构体1”，“非对映异构体2”，“异构体1”，“异构体2”，“对映异构体A”和“对映异构体B”。在这种情况下，尚未确定每个分离的非对映异构体和对映体中心的绝对立体化学，并且以上使用的术语用于表示每个单独的纯化的立体化学纯的化合物。

本发明化合物的各个立体异构体可以例如基本上不含其他异构体，或者可以例如作为外消旋体或与所有其他或其他选定的立体异构体混合。本发明的手性中心可具有如IUPAC1974 Recommendations所定义的S或R构型。术语“盐”、“溶剂化物”、“酯”、“前药”等的使用旨在等同地应用于本发明化合物的对映异构体、立体异构体、旋转异构体、互变异构体、外消旋体或前药的盐、溶剂化物、酯和前药。

在式(I)的化合物中，原子可以表现出其天然同位素丰度，或者一个或多个原子可以被人工富集于具有相同原子序数但原子质量或质量数不同于自然界中主要存在的原子质量或质量数的特定同位素。本发明旨在包括通式I的化合物的所有合适的同位素变体。例如，氢(H)的不同同位素形式包括氕(¹H)和氘(²H)。氕是自然界中最主要的氢同位素。氘的富集可以提供某些治疗优势，例如增加体内半衰期或降低剂量要求，或者可以提供用作表征生物样品的标准品的化合物。可以通过本领域技术人员熟知的常规技术或通过与本文方案和实施例中描述的那些类似的方法使用适当的同位素富集的试剂和/或中间体来制备同位素富集的式(I)化合物，无需大量的实验。在一个实施方案中，式(I)的化合物的一个或多个氢原子被氘代替。

三环杂环化合物可用于人类和兽医学中以治疗或预防个体的HIV感染。在一实施方案中，三环杂环化合物可以是HIV病毒复制的抑制剂。在一个具体的实施方案中，三环杂环化合物是HIV-1的抑制剂。因此，三环杂环化合物可用于治疗HIV感染和AIDS。根据本发明，可以将三环杂环化合物给予需要治疗或预防HIV感染的个体。

因此，在一个实施方案中，本发明提供了用于在个体中治疗HIV感染的方法，其包括向个体施用有效量的至少一种三环杂环化合物或其药学上可接受的盐。在一个具体的实施方案中，本发明提供了用于在个体中治疗AIDS的方法，其包括向个体施用有效量的至少一种三环杂环化合物或其药学上可接受的盐。

式(I)的化合物

本发明提供式(I)的三环杂环化合物：

及其药学上可接受的盐，其中：

R²是氢、甲基或乙基；

R³是氢、甲基或乙基；

R⁴是C_1-6烷基或(C_1-6烷基)OR⁷；

R⁵是氢、C_1-6烷基或(C_1-6烷基)OR⁷；

R⁶是氢、C_1-6烷基或(C_1-6烷基)OR⁷；

R⁷是氢或C_1-6烷基，其任选地被1-3个卤素取代；

n是介于1到3之间的整数。

在本发明的一个实施方案中，R¹是卤素。在实施方案的一类中，R¹是氟。在该实施方案的一类中，R¹是氯。

在本发明的一个实施方案中，R²是氢或甲基。在本发明的一类中，R²是氢。在本发明的另一类中，R²是甲基。

在本发明的一个实施方案中，R³是氢或甲基。在本发明的一类中，R³是氢。在本发明的另一类中，R³是甲基。

在本发明的一个实施方案中，R⁴是甲基、乙基、CH₂OCH₃、CH₂CH₂OCH₃或CH₂CH₂OCHF₂。在本发明的一类中，R⁴是甲基或乙基。在本发明的另一类中，R⁴是甲基。在本发明的另一类中，R⁴是乙基。在本发明的另一类中，R⁴是CH₂OCH₃。在本发明的另一类中，R⁴是CH₂CH₂OCH₃。在本发明的另一类中，R⁴是CH₂CH₂OCHF₂。

在本发明的一个实施方案中，R⁵是C_1-6烷基。在本发明的另一个实施方案中，R⁵是氢或甲基。在本发明的一类中，R⁵是甲基。在本发明的另一类中，R⁵是氢。

在本发明的一个实施方案中，R⁶是C_1-6烷基。在本发明的一类中，R⁶是甲基或乙基。在本发明的另一类中，R⁶是甲基。在本发明的另一类中，R⁶是乙基。在本发明的另一个实施方案中，R⁶是氢。

在本发明的实施方案中，n是1。在本发明的另一个实施方案中，n是2。在本发明的另一个实施方案中，n是3。

在另一个实施方案中，式(I)化合物为基本上纯化的形式。

应当理解，任何前述实施方案可以与一个或多个单独的实施方案组合。

本发明的其他实施方案包括以下：

(a)药物组合物，其包含有效量的式(I)化合物和药学上可接受的载体。

(b)(a)的药物组合物，其进一步包含选自HIV抗病毒剂、免疫调节剂和抗感染剂的第二治疗剂。

(c)(b)的药物组合物，其中所述HIV抗病毒剂是选自HIV蛋白酶抑制剂和HIVNNRTI抑制剂的抗病毒剂。

(d)药物组合，其为(i)式(I)化合物和(ii)第二治疗剂的组合，第二种治疗剂选自HIV抗病毒剂、免疫调节剂和抗感染剂；其中式(I)化合物和第二治疗剂各自以使该组合有效抑制HIV复制或治疗HIV感染和/或降低HIV感染的可能性或症状的严重程度的量使用。

(e)(d)的组合，其中所述HIV抗病毒剂是选自HIV蛋白酶抑制剂和HIV NNRTI抑制剂的抗病毒剂。

(f)一种在有需要的个体中抑制HIV复制的方法，该方法包括向该个体施用有效量的式(I)化合物。

(g)一种在有需要的个体中治疗HIV感染和/或降低HIV感染可能性或症状的严重程度的方法，该方法包括向个体施用有效量的式(I)化合物。

(h)(g)的方法，其中式(I)化合物与有效量的至少一种第二治疗剂组合施用，所述第二治疗剂选自HIV抗病毒剂、免疫调节剂和抗感染剂。

(i)(h)的方法，其中所述HIV抗病毒剂是选自HIV蛋白酶抑制剂和HIV NNRTI抑制剂的抗病毒剂。

(j)一种在有需要的个体中抑制HIV复制的方法，该方法包括向该个体施用(a)、(b)或(c)的药物组合物或(d)或(e)的组合。

(k)一种在有需要的个体中治疗HIV感染和/或降低HIV感染的可能性或症状的严重程度的方法，该方法包括向个体施用(a)、(b)或(c)的药物组合物或(d)或(e)的组合。

本发明的其他实施方案包括以下：

(l)药物组合物，其包含有效量的式(I)化合物的药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。

(m)(l)的药物组合物，其进一步包含选自HIV抗病毒剂、免疫调节剂和抗感染剂的第二治疗剂。

(n)(m)的药物组合物，其中所述HIV抗病毒剂是选自HIV蛋白酶抑制剂和HIVNNRTI抑制剂的抗病毒剂。

(o)药物组合，其为(i)式(I)化合物的药学上可接受的盐和(ii)第二治疗剂的组合，第二治疗剂选自HIV抗病毒剂、免疫调节剂和抗感染剂；其中式(I)化合物的药学上可接受的盐和第二治疗剂各自以使该组合有效抑制HIV复制或治疗HIV感染和/或降低HIV感染的可能性或症状的严重程度的量使用。

(p)(o)的组合，其中HIV抗病毒剂是选自HIV蛋白酶抑制剂和HIV NNRTI抑制剂的抗病毒剂。

(q)一种在有需要的个体中抑制HIV复制的方法，该方法包括向该个体施用有效量的式(I)化合物的药学上可接受的盐。

(r)一种在有需要的个体中治疗HIV感染和/或降低HIV感染的可能性或症状的严重程度的方法，该方法包括向个体施用有效量的式(I)化合物的药学上可接受的盐。

(s)(r)的方法，其中将式(I)化合物的药学上可接受的盐与有效量的至少一种选自HIV抗病毒剂、免疫调节剂和抗感染剂的第二治疗剂联合施用。

(t)(s)的方法，其中所述HIV抗病毒剂是选自HIV蛋白酶抑制剂和HIV NS5B聚合酶抑制剂的抗病毒剂。

(u)一种在有需要的个体中抑制HIV复制的方法，该方法包括向该个体施用(l)、(m)或(n)的药物组合物或(o)或(p)的组合。

(v)一种在有需要的个体中治疗HIV感染和/或降低HIV感染的可能性或症状的严重程度的方法，该方法包括向个体施用(l)、(m)或(n)的药物组合物或(o)或(p)的组合。

本发明的其他实施方案包括以下：

(w)药物组合物，其包含有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。

(x)(w)的药物组合物，其进一步包含选自HIV抗病毒剂、免疫调节剂和抗感染剂的第二治疗剂。

(y)(x)的药物组合物，其中所述HIV抗病毒剂是选自HIV蛋白酶抑制剂和HIVNNRTI抑制剂的抗病毒剂。

(z)药物组合，其为(i)式(I)化合物或其药学上可接受的盐和(ii)第二治疗剂的组合，第二治疗剂选自HIV抗病毒剂、免疫调节剂和抗传染剂；其中式(I)化合物和第二治疗剂各自以使该组合有效抑制HIV复制或治疗HIV感染和/或降低HIV感染的可能性或症状的严重程度的量使用。

(aa)(z)的组合，其中所述HIV抗病毒剂是选自HIV蛋白酶抑制剂和HIV NNRTI抑制剂的抗病毒剂。

(bb)一种在有需要的个体中抑制HIV复制的方法，该方法包括向该个体施用有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

(cc)一种在有需要的个体中治疗HIV感染和/或降低HIV感染的可能性或症状的严重程度的方法，该方法包括向个体施用有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

(dd)(cc)的方法，其中式(I)化合物或其药学上可接受的盐与有效量的至少一种第二治疗剂联合给药，所述第二治疗剂选自HIV抗病毒剂、免疫调节剂和抗感染剂。

(ee)(dd)的方法，其中HIV抗病毒剂是选自HIV蛋白酶抑制剂和HIV NNRTI抑制剂的抗病毒剂。

(ff)一种在有需要的个体中抑制HIV复制的方法，该方法包括向该个体施用(w)、(x)或(y)的药物组合物或者(z)或(aa)的药物组合。

(gg)一种在有需要的个体中治疗HIV感染和/或降低HIV感染的可能性或症状的严重程度的方法，该方法包括向个体施用(w)、(x)或(y)的药物组合物或(z)或(aa)的药物组合。

本发明还包括用于(a)药品、(b)抑制HIV复制或(c)治疗HIV感染和/或降低HIV感染的可能性或症状的严重程度的(i)药物中、(ii)作为药物或(iii)制备药物的本发明的化合物。在这些用途中，本发明的化合物可以任选地与一种或多种选自HIV抗病毒剂、抗感染剂和免疫调节剂的第二治疗剂组合使用。

本发明的另外的实施方案包括以上(a)-(gg)中列出的药物组合物、组合和方法以及在前段中列出的用途，其中使用的本发明的化合物是上述化合物的实施方案、方面、类别、子类别或特征之一。在所有这些实施方案中，化合物可以适当地以药学上可接受的盐或水合物的形式任选地使用。

还应理解，以上(a)至(gg)提供的组合物和方法的实施方案应理解为包括化合物的所有实施方案，包括由实施方案的组合产生的这些实施方案。

式(I)化合物的非限制性实施例包括在以下实施例中列出的化合物1-80及其药学上可接受的盐。

制备式(I)化合物的方法

可以按照有机合成领域的技术人员已知的方法，由已知的或容易制备的原料制备式(I)的化合物。可用于制备式(I)化合物的方法在以下实施例中列出并在以下方案中概括。对于有机合成领域的技术人员来说，替代的合成途径和类似结构将是显而易见的。

缩写的一般列表

这里使用的缩写和缩略语包括以下：

一般步骤

购买原料或中间体或使用已知方法制备原料或中间体，或另有说明。在以下方案中描述了用于合成式I化合物的一般途径。在某些情况下，可以改变方案中反应步骤的顺序以促进反应或避免不希望的反应产物。

使用无水溶剂和试剂在氮气或氩气下进行对湿气或空气敏感的反应。通过通常用E.Merck预涂的TLC板、硅胶60F-254、层厚度0.25mm进行的分析薄层色谱法(TLC)或液相色谱-质谱法(LC/MS)确定反应的进程。

通常，所用的分析型LC-MS系统由Waters ZQ^TM平台组成，该平台具有在正离子检测模式下电喷雾电离和带有自动进样器的Agilent 1100系列HPLC。色谱柱通常为WatersXterra MS C18，3.0×50mm,5μm或Waters Acquity

BEH C18 1.0×50mm,1.7μm。流速为1mL/min，进样量为10μL。UV检测在210-400nm范围内。流动相由溶剂A(水+0.05％TFA)和溶剂B(MeCN+0.05％TFA)组成，梯度为100％的溶剂A，历时0.7分钟，在3.75分钟内变为100％的溶剂B，保持1.1分钟，然后在0.2分钟内恢复为100％溶剂A。或者，色谱柱通常是Waters Acquity

BEH 1.0×50mm,1.7μm。流速为0.3mL/min，进样量为0.5μL。UV检测为215或254nm。流动相由溶剂A(水+0.05％TFA)和溶剂B(MeCN+0.05％TFA)组成，梯度为在1.6分钟内从90％的溶剂A变为99％的溶剂B，保持0.4分钟，然后在0.1分钟内恢复为90％的溶剂A，或流动相由溶剂A(水+0.05％TFA)和溶剂B(MeCN+0.05％TFA)组成，梯度为在0.5分钟和0.9分钟内从97％的溶剂A变为4％然后是50％的溶剂B，在0.2分钟内50％-99％的溶剂B，保持0.4分钟，然后在0.1分钟内恢复为90％的溶剂A。

制备型HPLC纯化通常使用质谱导向系统或非质量导向系统进行。通常他们是在配置有LC-MS系统的Waters色谱工作站上进行的，该系统包括：带电喷雾电离的Waters ZQ^TM单四极杆MS系统，Waters 2525梯度泵，Waters 2767进样器/收集器，Waters 996 PDA检测器，MS条件：150-750amu，阳性电喷雾，MS触发收集和Waters

C-18 5微米,30mm(id)x 100mm色谱柱。流动相由乙腈(10-100％)在含有0.1％TFA的水中的混合物组成。流速保持在50mL/min，进样量为1800μL，UV检测范围为210-400nm。使用的另一种制备型HPLC系统是Gilson工作站，其包括：GilsongX-281进样器/收集器，Gilson UV/VIS-155检测器，Gilson 322、333和334泵，以及Phenomenexgemini-NX C-185微米，50mm(id)*250mm色谱柱，Waters XBridge^TM C-18 5微米OBD^TM,30mm(id)×250mm色谱柱或Waters SUNFIRE^TM C-18OBD^TM 10微米,30mm(id)x 150mm色谱柱。流动相由乙腈(0-90％)在含0.1％或0.05％TFA的水中的混合物组成。Waters Xbridge^TM色谱柱的流速保持在50mL/min，Phenomenexgemini色谱柱的流速保持在90mL/min，Waters SUNFIRE^TM色谱柱的流速保持在30mL/min。进样量为1000-8000μL，UV检测范围为210-400nm。针对各个化合物优化了流动相梯度。通常使用Personal Chemistry制造的Emrys Optimizer或Biotage制造的Initiator进行使用微波辐射进行的反应。通常使用第二代默克光反应器或Kessil 34W蓝色LED灯进行使用光子辐照进行的反应。溶液的浓缩在旋转蒸发仪上减压进行。快速色谱法通常使用

快速色谱仪(Dyax Corp.)、ISCO

Rf设备或ISCO

Companion XL在预包装的指定尺寸的柱体中的硅胶(32-63微米，孔径

)上进行。除非另有说明，¹H NMR光谱是在CDCl₃溶液中在500MHz光谱仪上获得的。化学位移的报告单位为百万分之一(ppm)。在CD₃Cl溶液中，将四甲基硅烷(TMS)用作内标，在CD₃OD溶液中，将残留的CH₃OH峰或TMS用作内标。偶合常数(J)以赫兹(Hz)表示。手性分析色谱法最常在

AS、

AD、OD、

IA或

OJ色谱柱(250x4.6mm)(Daicel Chemical Industries，Ltd.)之一上进行，其中指出的乙醇在己烷中的百分比(％EtOH/Hex)，异丙醇在庚烷中的百分比(％IP A/Hep)，乙醇在二氧化碳中的百分比(％EtOH/CO₂)或异丙醇在二氧化碳中的百分比(％IPA/CO₂)作为等度溶剂系统。用通过手性分析色谱法或超临界流体(SFC)条件鉴定的所需等度溶剂系统在CHIRALPAKAD的CHIRALPAK AS、

OD、

IA、

OJ色谱柱(20x250mm)(Daicel Chemical Industries，Ltd.)之一上进行手性制备色谱法。

实施例中还描述了几种制备本发明化合物的方法。起始原料和中间体可从通用目录来源商购或使用已知方法制备，或另有说明。

实施例1

中间体化合物Int-1的制备

步骤A——化合物Int-1a的合成

向在15℃下搅拌的3-羟基吡啶甲酸(340g，2.44mol)在2.8L MeOH中的溶液加入H₂SO₄(720g，7.33mol)。通过油浴将反应加热至65℃，并搅拌2小时。将其冷却至室温后，通过缓慢加入饱和的Na₂CO₃水溶液将反应内容物中和至pH＝7。所得混合物用EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用无水Na₂SO₄干燥。过滤后，将滤液真空浓缩，得到化合物Int-1a。粗物质无需进一步纯化即可用于下一反应。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ10.62(s,1H),6.28(d,J＝4.4Hz,2H),4.05(s,3H).

步骤B——化合物Int-1b的合成

向在15℃下搅拌的化合物Int-1a(50g，327mmol)在水(5.0L)中的混合物中添加溴(157g，979mmol)。将混合物在15℃下搅拌5小时。将得到的混合物过滤，并将滤饼用水洗涤并在真空下干燥以得到化合物Int-1b。粗物质无需进一步纯化即可用于下一反应。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ11.37(s,1H),7.87(s,1H),4.07(s,3H).

步骤C——化合物Int-1c的合成

向在15℃下搅拌的化合物Int-1b(200g，643mmol)的丙酮(4.0L)溶液中加入C_S2CO₃(377g，1.160 mol)，然后逐滴加入碘甲烷(274g，1930mmol)。将反应在60℃加热2小时。冷却至室温后，将反应混合物过滤。滤饼用丙酮洗涤，并通过硅胶色谱法纯化，用石油醚∶EtOA_C＝25∶1至10∶1洗脱，得到化合物Int-1c。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.85(s,1H),3.99(s,3H),3.98(s,3H).

步骤D——化合物Ind-1d的合成

向在15℃下搅拌的化合物Int-1c(350g，1080mmol)的THF(1.8L)溶液中，加入水(350mL)，然后加入氢氧化锂一水合物(54g，1300mmol)。将反应混合物在25℃搅拌2小时。真空除去溶剂，得到化合物Int-1d。粗物质无需进一步纯化即可用于下一反应。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ7.73(s,1H),3.83(s,3H).

步骤E——化合物Int-1e的合成

向在

搅拌的化合物Int-1d(240g，757mmol)和DMF(1.50L)的溶液中缓慢添加NaH(115g，2.88mol，60％wt)。将其在

下搅拌30分钟，然后加入(4-甲氧基苯基)甲醇(157g，1.14mol)的DMF(1.50L)溶液。将反应在

下搅拌30分钟，然后温热至15℃并搅拌2小时。通过加入1L饱和NH₄Cl水溶液淬灭反应，并用4N HCl水溶液酸化直至pH＝4-5。所得混合物用EtOAc萃取。有机层用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，然后在真空下浓缩，得到化合物Int-1e。C₁₅H₁₄NBrO₅的质量计算值：367.0，实测值389.8(M+Na)⁺。

步骤F——化合物Int-1f的合成

向在15℃下搅拌的化合物Int-1e(290g，788mmol)和K₂CO₃(272g，1970mmol)在DMF(2.5L)中的混合物中缓慢加入碘甲烷(355g，2360mmol)。将反应在15℃下搅拌12小时。将反应混合物用1.5L水稀释，并用EtOAc萃取。有机层用盐水洗涤，用无水Na₂SO₄干燥，然后在真空下浓缩。残余物通过硅胶色谱法纯化，用石油醚∶EtOAc∶二氯甲烷＝10∶1～2∶1洗脱。合并含产物的级分并真空浓缩。残余物从EtOA_C/石油醚中重结晶。过滤收集固体，用石油醚洗涤，并真空干燥，得到化合物Int-1。¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ7.35(d,J＝8.8Hz,2H),7.16(s,1H),6.95(d,J＝8.8Hz,2H),5.10(s,2H),3.95(s,3H),3.91(s,3H),3.84(s,3H).

实施例2

化合物Int-2e的制备

步骤A——化合物Int-2a的合成

在0℃下，向3-甲基丁-3-烯-1-醇(20g，232mmol)在DCM(300mL)中的溶液中分批添加咪唑(31.6g，464mmol)和TBDPSCl(89mL，348mmol)。将溶液在25℃下搅拌5小时，然后用水(80mL)淬灭并分离。用EtOAc(3×60mL)萃取水层。合并的有机相经无水Na₂SO₄干燥，过滤，并将滤液真空浓缩。将残余物通过硅胶(200g)柱色谱法纯化，用100％石油醚洗脱，得到化合物Int-2a。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:7.67(dd,J＝7.8,1.7Hz,4H)；7.45-7.35(m,6H)；4.78-4.64(m,2H)；3.76(t,J＝6.9Hz,2H)；2.28(t,J＝6.8Hz,2H)；1.68(s,3H)；1.04(s,9H).

步骤B——化合物Int-2b的合成

在0℃下，向化合物Int-2a(10g，30.8mmol)和多聚甲醛(1.018g，33.9mmol)在DCM(150mL)中的混合物中滴加1M二甲基氯化铝的庚烷溶液(40.1mL，40.1mmol)。将混合物在0℃下搅拌2小时，然后用水(40mL)淬灭。滴加1N HCl水溶液以溶解沉淀物。过滤混合物，并分离滤液。用EtOAc(3×40mL)萃取水层。合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残留物通过硅胶色谱法纯化，用10％EtOA_C/石油醚洗脱，得到化合物Int-2b。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:7.70-7.64(m,4H)；7.44-7.35(m,6H)；4.88(s,2H)；3.77(t,J＝6.7Hz,2H)；3.66(t,J＝6.2Hz,2H)；2.31-2.23(m,4H)；1.04(s,9H).

步骤C——化合物Int-2c的合成

在氮气气球下于25℃向化合物Int-2b(3g，8.46mmol)和乙酸钾(3.32g，33.8mmol)的DCM(4mL)和水(4mL)的混合物中加入(溴二氟甲基)三甲基硅烷(3.44g，16.92mmol)。将混合物在25℃下搅拌15小时，然后用水(5mL)稀释，并用EtOAc(3×15mL)萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。残余物通过快速硅胶色谱法(40g柱)纯化，用0-5％EtOA_C/石油醚洗脱，得到化合物Int-2c。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:7.66(dd,J＝7.7,1.5Hz,4H)；7.43-7.36(m,6H)；6.39-5.94(m,1H)；4.83(br s,2H)；3.89(t,J＝7.0Hz,2H)；3.75(t,J＝6.8Hz,2H)；2.30(dt,J＝12.5,6.5Hz,4H)；1.04(s,9H).

步骤D——化合物Int-2d的合成

向化合物Int-2c(8g，19.77mmol)在THF(80mL)中的混合物中加入1M TBAF在THF中的溶液(23.73mL，23.73mmol)。将混合物在15℃下搅拌2小时，然后真空浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱法(80g柱)纯化，用0-15％EtOAC/石油醚洗脱，得到化合物Int-2d。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:6.20(t,J＝75.0Hz,1H)；4.95(d,J＝6.8Hz,2H)；3.96(t,J＝13.0Hz,2H)；3.48(t,J＝7.2Hz,2H)；2.61(t,J＝7.6Hz,2H)；2.38(t,J＝6.4Hz,2H).

步骤E——化合物Int-2e的合成

向化合物Int-2d(4.2g，25.3mmol)在DCM(40mL)中的搅拌溶液中加入三苯膦(7.96g，30.3mmol)和四溴化碳(10.90g，32.9mmol)。将混合物在20℃搅拌1小时，然后真空浓缩。残余物通过快速硅胶色谱法(40g柱)纯化，用0-5％EtOA_C/石油醚洗脱，得到化合物Int-2e。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:6.21(t,J＝74.4Hz,1H)；4.96(d,J＝7.2Hz,2H)；3.97(t,J＝6.8Hz,2H)；3.48(t,J＝6.8Hz,2H)；2.63(t,J＝7.2Hz,2H)；2.40(t,J＝6.8Hz,2H).

实施例3

化合物1-4的制备

步骤A——化合物Int-3a的合成

向化合物Int-1(10g，26.2mmol)在THF(3mL)中的搅拌溶液中加入乙胺(30mL，26.2mmol，THF溶剂)。将混合物在20℃搅拌5小时，然后减压浓缩，得到化合物Int-3a。C₁₇H₁₉BrN₂O₄的LCMS分析计算值：394.1，396.1；实测值：395.0，397.0(M+1)⁺。

步骤B——化合物Int-3b的合成

向化合物Int-3a(10g，25.3mmol)在DCM(50mL)中的搅拌溶液中加入TFA(10mL)。将混合物在20℃搅拌2小时，然后减压浓缩。残余物通过硅胶色谱法纯化，用10％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-3b。C₉H₁₁BrN₂O₃的LCMS分析计算值：274.0，276.0；实测值：275.0，277.0(M+1)⁺。

步骤C——化合物Int-3c的合成

向装有磁力搅拌棒的小瓶(小瓶A)装入Ir[dF(CF₃)ppy]₂(dtbpy)PF₆(8.16mg,7.27μmol)、化合物Int-3b(200mg，0.727mmol)、碳酸钠(154mg，1.454mmol)和三(三甲基甲硅烷基)硅烷(542mg，2.181mmol)。同时，向另一个小瓶(小瓶B)依次装入氯化镍(II)乙二醇二甲醚络合物(37mg，0.168mmol)、4,4'-二叔丁基-2,2'-联吡啶(45mg，0.168mmol)和16mLMeCN，然后将混合物超声处理直至均匀(～15分钟)。将7.3mL在小瓶B中的这种储备溶液添加到包含其他反应组分的小瓶A中。通过用氮气鼓泡10分钟使反应混合物脱气。在将小瓶用封口膜密封之前，添加化合物Int-2e(500mg，2.181mmol)。然后将小瓶放在Kessil 34W蓝色LED灯的前面。将反应物在辐射下搅拌4小时，然后过滤。真空浓缩滤液，残余物通过快速硅胶色谱法(20g柱)纯化，用0-10％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-3c。C₁₆H₂₂F₂N₂O₄:344.2的LCMS分析计算值：344.2；实测值：345.2(M+1)⁺。

步骤D——化合物Int-3d的合成

向化合物Int-3c(380mg，1.104mmol)在THF(5mL)中的搅拌溶液中加入NBS(393mg，2.207mmol)。将混合物在15℃下搅拌0.5小时，然后真空浓缩。残余物通过快速硅胶色谱法(12g柱)纯化，用0-10％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-3d。C₁₆H₂₀Br₂F₂N₂O₄的LCMS分析计算值：502.0；实测值：503.0(M+1)⁺。

步骤E——化合物Int-3e的合成

将化合物Int-3d(570mg，1.135mmol)和CS₂CO₃(1110mg，3.41mmol)在DMF(10mL)中的混合物在20℃搅拌9小时，然后过滤。真空浓缩滤液，残余物通过快速硅胶色谱法(20g柱)纯化，用0-10％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-3e。C₁₆H₁₉BrF₂N₂O₄的LCMS分析计算值：420.1，422.1；实测值：420.9，422.9(M+1)⁺。

步骤F——化合物Int-3f的合成

在-78℃下向化合物Int-3e(160mg，0.380mmol)在THF(16mL)中的溶液中加入1MLiHMDS在THF中的溶液(1.140mL，1.140mmol)。20分钟后，在-78℃下向混合物中加入3-苯基-2-(苯基磺酰基)-1,2-氧杂吖丙啶(198mg，0.760mmol)的THF(0.5mL)溶液。将混合物在16℃下搅拌20分钟，然后用MeOH(2mL)淬灭，并真空浓缩。残余物通过快速硅胶色谱法(12g柱)纯化，用0-10％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-3f。C₁₆H₁₉BrF₂N₂O₅的LCMS分析计算值：436.0，438.0；实测值：437.1，439.1(M+1)⁺。

步骤H——化合物Int-3g的合成

向化合物Int-3f(40mg，0.091mmol)在DMSO(1.5mL)和MeOH(0.5mL)中的溶液中加入(2,4-二氟苯基)甲胺(39.3mg，0.274mmol)、N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(59.1mg，0.457mmol)和Pd(Ph₃P)₄(52.9mg，0.046mmol)。将混合物脱气并用CO吹扫三次。将所得混合物在120℃在CO(15psi)下搅拌。2小时后，将混合物用EtOAc(20mL)稀释，并用水(5mL)和盐水(5mL)洗涤。有机层经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过制备型TLC板纯化，用100％EtOAc洗脱，得到产物，将其通过制备型SFC(DAICEL CHIRALPAK AD-H,5μm,30×250mm柱,60mL/min,40％(EtOH+0.1％NH₃H₂O)/CO₂)进一步纯化，得到化合物Int-3g的异构体A(第一洗脱组分)，化合物Int-3g的异构体B(第二洗脱组分)，化合物Int-3g的异构体C(第三洗脱组分)和化合物Int-3g的异构体D(第四洗脱组分)。通过制备型SFC(DAICEL CHIRALCELOJ-H,5μm,30×250mm柱,60mL/min,30％(EtOH+0.1％NH₃H₂O)/CO₂)进一步纯化化合物Int-3g的异构体C，得到化合物Int-3g的异构体C。通过制备型SFC(DAICEL CHIRALCEL OJ-H,5μm,30×250mm柱,60mL/min,30％(EtOH+0.1％NH₃H₂O)/CO₂)进一步纯化化合物Int-3g的异构体D，得到化合物Int-3g的异构体D。C₂₄H₂₅F₄N₃O₆的LCMS分析计算值：527.2；实测值：528.1(M+1)⁺。

步骤H——化合物1、化合物2、化合物3和化合物4的合成

向化合物Int-3g(7mg，0.013mmol)的异构体A的乙腈(1mL)的搅拌溶液中加入溴化镁(12.22mg，0.066mmol)。将混合物在30℃下搅拌2小时，然后通过制备型反相HPLC(BostonGreen ODS,5μm,30×150mm柱)纯化，用30-60％ACN/(水+0.1％TFA)洗脱。冻干后，将产物与甲苯(2×10mL)共蒸发，得到化合物1。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ:7.48-7.37(m,1H)；7.00-6.86(m,2H)；6.49-6.06(m,1H)；5.69(t,J＝7.9Hz,1H)；4.63(br s,2H)；3.99-3.83(m,4H)；3.73(br dd,J＝13.4,6.8Hz,1H)；3.50-3.61(m,1H)；3.02(dd,J＝13.1,7.7Hz,1H)；2.23-1.97(m,3H)；1.24(t,J＝7.2Hz,3H).C₂₃H₂₃F₄N₃O₆的LCMS分析计算值：513.2；实测值：514.0(M+1)⁺。

基本上按照实施例3的步骤H中用于制备化合物1的方法，由化合物Int-3g的异构体B制备化合物2。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ:7.48-7.39(m,1H)；6.99-6.89(m,2H)；6.55-6.12(m,1H)；5.73(d,J＝7.6Hz,1H)；4.62(s,2H)；4.02-4.15(m,2H)；3.94-3.87(m,1H)；3.84-3.72(m,2H)；3.50(dq,J＝13.8,7.1Hz,1H)；2.55-2.48(m,1H)；2.43-2.28(m,3H)；1.24(t,J＝7.2Hz,3H).C₂₃H₂₃F₄N₃O₆的LCMS分析计算值:513.2；实测值:514.0(M+1)⁺.

基本上按照实施例3的步骤H中用于制备化合物1的方法，由化合物Int-3g的异构体C制备化合物3。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ:7.43(br d,J＝6.8Hz,1H)；7.00-6.87(m,2H)；6.57-6.12(m,1H)；5.73(br d,J＝7.3Hz,1H)；4.62(br s,2H)；4.09(br d,J＝5.1Hz,2H)；3.94-3.87(m,1H)；3.86-3.75(m,2H)；3.53-3.46(m,1H)；2.56-2.47(m,1H)；2.44-2.30(m,3H)；1.24(br t,J＝7.2Hz,3H).C₂₃H₂₃F₄N₃O₆的LCMS分析计算值:513.2；实测值:514.0(M+1)⁺.

基本上按照实施例3的步骤H中用于制备化合物1的方法，由化合物Int-3g的异构体D制备化合物4。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ:7.42(br d,J＝8.3Hz,1H)；6.94(br d,J＝11.2Hz,2H)；6.49-6.06(m,1H)；5.75-5.62(m,1H)；4.63(br s,2H)；3.91(br d,J＝12.5Hz,4H)；3.72(br s,1H)；3.61-3.52(m,1H)；3.09-2.97(m,1H)；2.24-2.04(m,3H)；1.24(br t,J＝7.3Hz,3H).C₂₃H₂₃F₄N₃O₆的LCMS分析计算值:513.2；实测值:514.0(M+1)⁺.

实施例4

化合物5-8的制备

步骤A——化合物Int-4a的合成

向化合物Int-3a(5g，12.65mmol)在乙腈(100mL)中的溶液中加入三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(5.13mL，15.18mmol)和双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.888g，1.265mmol)。向混合物中鼓泡氮气5分钟，然后在75℃下加热过夜。在添加磷酸(12.65mL，12.65mmol)之前，将反应冷却至室温。将反应搅拌1小时，然后加入饱和碳酸氢钠水溶液(150mL)。将混合物用EtOAc(3×100mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。残余物通过快速硅胶色谱法(220g柱)纯化，用0-100％EtOAC/己烷洗脱，得到化合物Int-4a。C₁₉H₂₂N₂O₅的LCMS分析计算值：358.15；实测值：359.12(M+1)⁺。

步骤B——化合物Int-4b的合成

在N₂气氛下向化合物Int-4a(2.0g，5.58mmol)的四氢呋喃(50mL)溶液中加入3-溴-2-甲基丙-1-烯(1.507g，11.16mmol)、碘化钠(1.673g，11.16mmol)和铟(1.281g，11.16mmol)。将该混合物在室温下搅拌30分钟，然后加热至70℃持续1小时。将反应冷却至室温并过滤。将滤液浓缩并将残余物通过快速硅胶色谱法(80g柱)纯化，用10％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-4b。C₂₃H₃₀N₂O₅的LCMS分析计算值：414.22；实测值：415.30(M+1)⁺。

步骤C——化合物Int-4c的合成

向化合物Int-4b(2.0g，4.83mmol)在二氯甲烷(20mL)中的溶液中添加三氟乙酸(2mL，26.1mmol)。在浓缩之前，将混合物在室温搅拌1小时。向所得残余物在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的溶液中加入咪唑(0.657g，9.65mmol)，然后加入三乙基氯硅烷(1.09g，7.24mmol)。将得到的混合物在50℃下搅拌2小时，然后浓缩。所得残余物通过硅胶色谱柱(80g柱)纯化，用0-10％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-4c。C₂₁H₃₆N₂O₄Si的LCMS分析计算值：408.24；实测值：409.34(M+1)⁺。

步骤D——化合物Int-4d的合成

向化合物Int-4c(1.0g，2.447mmol)在乙腈(25mL)中的搅拌溶液中加入1-溴吡咯烷-2,5-二酮(1.089g，6.12mmol)。将混合物在室温搅拌1.5小时，然后浓缩。将残余物溶解在50％EtOA_C/己烷(3mL)中并过滤。将滤液浓缩并将得到的残余物通过C18反相色谱法(80g柱)纯化，用10-100％(ACN/水)+0.05％TFA洗脱，得到化合物Int-4d。C₂₁H₃₄Br₂N₂O₄Si的LCMS分析计算值：566.06；实测值：567.06(M+1)⁺。

步骤E——化合物Int-4e的合成

向化合物Int-4d(720mg，1.271mmol)在二甲亚砜(12mL)中的搅拌溶液中加入碳酸铯(621mg，1.907mmol)。将混合物在室温搅拌1.5小时，然后在C18反相柱上直接纯化，用0-100％(ACN/水)+0.05％TFA洗脱，得到化合物Int-4e。C₂₁H₃₃BrN₂O₄Si的LCMS分析计算值：484.14；实测：485.13(M+1)⁺。

步骤F——化合物Int-4f的合成

将4M盐酸的二噁烷溶液(0.520mL，2.080mmol)加入到化合物Int-4e(0.5g，1.04mmol)在甲醇(15mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在室温搅拌2小时，然后减压浓缩。将得到的残留物重新溶于甲醇(15mL)，加入钯/碳(10％wt.)(0.111g，0.104mmol)，然后将混合物置于H₂气球下。2小时后，将反应过滤并在减压下浓缩。残余物通过快速硅胶色谱法(40g柱)纯化，用0-30％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-4f。C₁₅H₂₀N₂O₄的LCMS分析计算值：292.14；实测值：293.12(M+1)⁺。

步骤G——化合物Int-4g的合成

将N-碘代琥珀酰亚胺(142mg，0.631mmol)和3-氯过氧苯甲酸(136mg，0.631mmol)加入到化合物Int-4f(123mg，0.421mmol)在甲醇(5mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在70℃下加热2小时，然后冷却至室温并在减压下浓缩。通过制备型TLC板纯化所得残余物，用10％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-4g。C₁₅H₁₉IN₂O₄的LCMS分析计算值：418.04；实测值：419.00(M+1)⁺。

步骤H——化合物Int-4h的合成

将四(三苯基膦)钯(0)(61mg，0.053mmol)、N,N-二异丙基乙胺(184μl，1.052mmol)和2,4-二氟苄胺(75mg，0.526mmol)加入到化合物Int-4g(110mg，0.263mmol)在二甲亚砜(2mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物脱气并置于一氧化碳气氛下。将所得反应混合物在90℃下搅拌1小时，然后冷却至室温，通过0.45μm注射式过滤器过滤，用甲醇稀释，并通过反相HPLC(RediSep R_f C18,100g柱)纯化，用10-100％(ACN/水)+0.05％TFA洗脱得到产物，将其通过手性制备型SFC(ChiralPak AD-H,21×250mm柱,70g/min,120巴,25％EtOH/CO₂,40℃)进一步纯化，得到化合物Int-4h的异构体A(第一洗脱)组分)，化合物Int-4h的异构体B(第二洗脱组分)，化合物Int-4h的异构体C(第三洗脱组分)和化合物Int-4h的异构体D(第四洗脱组分))。C₂₃H₂₅F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：461.18；实测值：462.41(M+1)⁺。

步骤I——化合物5、化合物6、化合物7和化合物8的合成

将化合物Int-4h的异构体A(19.0mg，0.041mmol)、溴化镁(114mg，0.618mmol)和乙腈(1.0mL)合并并在室温下搅拌。30分钟后，将反应混合物用MeOH稀释，并通过0.45μm注射器式过滤器过滤，然后通过反相HPLC(Waters Sunfire C18 OBD，10μm,30×150mm柱)纯化。合并产物级分，冷冻并冻干，得到化合物5。¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ11.48(s,1H)；8.20(brs,1H)；7.35–7.25(m,1H)；6.82–6.78(m,2H)；4.66–4.65(m,2H)；3.83-3.79(d,J＝20Hz,1H)；3.74(m,1H)；3.69(m,1H)；3.50–3.47(m,1H)；2.46(m,2H)；1.86(s,3H)；1.54(s,3H)；1.26(t,J＝5.0Hz,3H).C₂₂H₂₃F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：447.16；实测值：448.13(M+1)⁺。

基本上按照实施例4的步骤I中用于制备化合物5的方法，由化合物Int-4h的异构体B制备化合物6。¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ10.75(s,1H)；7.40–7.26(m,1H)；6.84–6.81(m,2H)；4.72–4.68(m,2H)；4.60-4.56(m,2H)；3.76-3.71(m,2H)；3.58-3.50(m,2H)；2.59–2.56(d,J＝15Hz,1H)；2.13-2.10(s,J＝15Hz,1H)；1.73(s,3H)；1.65(s,3H)；1.27(t,J＝10Hz,3H).C₂₂H₂₃F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：447.16；实测值：448.40(M+1)⁺。

基本上按照实施例4的步骤I中用于制备化合物5的方法，由化合物Int-4h的异构体C制备化合物7。¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ10.75(s,1H)；7.41–7.35(m,1H)；6.86–6.78(m,2H)；4.73–4.68(m,2H)；4.60-4.56(m,2H)；3.77-3.70(m,2H)；3.57-3.50(m,2H)；2.59–2.56(d,J＝15Hz,1H)；2.13-2.10(s,J＝15Hz,1H)；1.72(s,3H)；1.65(s,3H)；1.27(t,J＝10Hz,3H).C₂₂H₂₃F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：447.16；实测值：448.42(M+1)⁺。

基本上按照实施例4的步骤I中用于制备化合物5的方法，由化合物Int-4h的异构体D制备化合物8。C₂₂H₂₃F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：447.16；实测值：448.13(M+1)⁺。

实施例5

化合物9-12的制备

步骤A——化合物Int-5a的合成

向装有磁力搅拌棒的40mL小瓶中加入Ir[dF(CF₃)ppy]₂(dtbpy)PF₆(12.23mg,10.91μmol)、化合物Int-3b(300mg，1.091mmol)、碳酸钠(231mg，2.181mmol)和l,l,1,3,3,3-六甲基-2-(三甲基甲硅烷基)三硅烷(1.009mL，3.27mmol)。同时，在另外的40mL小瓶中装入氯化镍(II)甘醇二甲醚(50.3mg)和4.4'-二-叔丁基-2.2'-联吡啶(61.5mg)。加入1,2-二甲氧基乙烷(22.9mL)，并将混合物超声处理直至均匀(～15分钟)。将10.9mL的该溶液添加到包含其他反应组分的小瓶中。通过用N₂鼓泡将反应混合物脱气10分钟。加入4-溴-2-甲基丁-1-烯(0.390mL，3.27mmol)，然后用封口膜密封小瓶。然后将小瓶放入第二代默克光反应器中(50％LED功率，1000rpm搅拌，10200rpm风扇冷却)。1小时后，打开小瓶，并将混合物在空气下搅拌。过滤混合物，用二氯甲烷洗涤。将滤液真空浓缩并将残余物在硅胶(80g柱)上进行色谱分离，用0-90％(25％EtOH/EtOAc)/己烷洗脱，得到化合物Int-5a。C₁₄H₂₀N₂O₃的LCMS分析计算值：264.15；实测值：265.24(M+1)⁺。

步骤B——化合物Int-5b的合成

在装有磁力搅拌棒的100mL圆底烧瓶中装入化合物Int-5a(406mg，1.536mmol)。加入THF(15.4mL)和N-溴代琥珀酰亚胺(547mg，3.07mmol)，并将混合物在室温搅拌。15分钟后，将混合物真空浓缩，得到化合物Int-5b，其无需进一步纯化即可用于实施例5的步骤C。C₁₄H₁₈Br₂N₂O₃的LCMS分析计算值：421.97；实测值：423.07(M+1)⁺。

步骤C——化合物Int-5c的合成

在含有化合物Int-5b的40mL小瓶中配备磁力搅拌棒。加入碳酸铯(1501mg，4.61mmol)和DMSO(30.7mL)，并将混合物在室温搅拌。16.5小时后，将反应混合物用二氯甲烷、水和盐水稀释。用三份二氯甲烷萃取水层。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过硅胶快速色谱法(80g柱)纯化，用0-100％(25％EtOH/EtOAc)/己烷洗脱。发现残留物含有DMSO，因此将其溶解在DCM中并用LiCl洗涤。将LiCl层用DCM反萃取一次。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，得到化合物Int-5c。C₁₄H₁₇BrN₂O₃的LCMS分析计算值：340.04；实测值：341.10(M+1)⁺。

步骤D——化合物Int-5d的合成

将化合物Int-5c置于N₂气氛下。加入THF(21.2mL)和DMF(4.25mL)，并在搅拌下将混合物冷却至-78℃。滴加1.0M双(三甲基甲硅烷基)氨基锂的THF溶液(3.825mL，3.82mmol)，并将该混合物在-78℃搅拌10分钟。然后将3-苯基-2-(苯基磺酰基)-1,2-氧杂吖丙啶(733mg，2.80mmol)作为在最小体积的THF中的溶液逐滴加入。使混合物温热至室温。反应温热至室温(

分钟)后，将混合物用MeOH稀释并浓缩。将混合物在EtOAc和水之间分配，并分离各层。用另外部分的水萃取EtOAc层。过滤合并的水层，并通过反相HPLC直接纯化，用0-50％(MeCN/H₂O)+0.1％TFA洗脱，得到化合物Int-5d。C₁₄H₁₇BrN₂O₄的LCMS分析计算值：356.04；实测值：357.13(M+1)⁺。

步骤E——化合物Int-5e的合成

装有化合物Int-5d(320mg，0.896mmol)的100mL圆底烧瓶配有磁力搅拌棒。加入DMSO(17.9mL)。抽空烧瓶，先用N₂回填，然后加入(2,4-二氟苯基)甲胺(319μl，2.69mmol)、N,N-二异丙基乙胺(782μl，4.48mmol)和Pd(dppf)Cl₂(131mg，0.179mmol)。将烧瓶抽空并从气球中用CO回填三次，然后加热至100℃并搅拌24小时。将混合物冷却，用少量甲醇稀释，并过滤。所得溶液通过反相HPLC纯化，用20-90％(MeCN/H₂O)+0.1％TFA洗脱。来自产物级分的物质通过硅胶色谱法(40g柱)进一步纯化，用0-70％(25％EtOH/EtOAc)/己烷洗脱，得到产物，其通过手性制备型SFC(ChiralPak AD-H,20×250mm柱,50mL/min,100巴,50％MeOH/CO₂)进一步纯化，得到化合物Int-5e的异构体A(第一洗脱组分)，化合物Int-5e的异构体B(第二洗脱组分)，化合物Int-5e的异构体C(第三洗脱组分)和化合物Int-5e的异构体D(第四洗脱组分)。异构体B在相同的SFC条件下进一步纯化以提供足够纯度的材料。C₂₂H₂₃F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：447.16；实测值：448.26(M+1)⁺。

步骤F——化合物9、化合物10、化合物11和化合物12的合成

在装有磁力搅拌棒的4mL小瓶中加入化合物Int-5e的异构体A和DMF(223μl)。加入氯化锂(9.47mg，0.223mmol)，并在搅拌下将混合物加热至100℃。2小时后，将混合物用DMF稀释，并通过反相HPLC直接纯化，以5-95％(MeCN/H₂O)+0.1％TFA洗脱。将纯级分冻干，得到化合物9。¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ11.29(s,1H)；7.35(q,J＝8.4Hz,1H)；6.87–6.78(m,2H)；5.73(t,J＝7.9Hz,1H)；4.69(dd,J＝15.2,5.7Hz,1H)；4.62(dd,J＝15.0,5.3Hz,1H)；3.88(d,J＝12.9Hz,1H)；3.73(dq,J＝14.4,7.4Hz,1H)；3.64–3.49(m,2H)；2.81(dd,J＝12.6,7.4Hz,1H)；2.20(dd,J＝12.5,8.7Hz,1H)；1.45(s,3H)；1.28(t,J＝7.2Hz,3H).C₂₁H₂₁F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：433.14；实测值：434.26(M+1)⁺。

基本上按照实施例5的步骤F中用于制备化合物9的方法，由化合物Int-5e的异构体B制备化合物10。¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ10.86(s,1H)；7.36(q,J＝8.2Hz,1H)；6.89–6.76(m,2H)；5.72(d,J＝7.5Hz,1H)；4.67(dd,J＝15.2,5.8Hz,1H)；4.60(dd,J＝15.3,5.5Hz,1H)；3.81–3.70(m,2H)；3.61–3.49(m,2H)；2.43(d,J＝13.5Hz,1H)；2.34(dd,J＝13.6,7.7Hz,1H)；1.69(s,3H)；1.28(t,J＝7.2Hz,3H).C₂₁H₂₁F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：433.14；实测值：434.24(M+1)⁺。

基本按照实施例5的步骤F中用于制备化合物9的方法，由化合物Int-5e的异构体C制备化合物11。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ10.92(s,1H)；7.40–7.33(m,1H)；6.87–6.78(m,2H)；5.68(d,J＝7.5Hz,1H)；5.26(s,1H)；4.67(dd,J＝15.2,6.3Hz,1H)；4.60(dd,J＝15.4,5.5Hz,1H)；3.81–3.67(m,2H)；3.60–3.46(m,2H)；2.40(d,J＝13.5Hz,1H)；2.33(dd,J＝13.5,7.8Hz,1H)；1.67(s,3H)；1.27(t,J＝7.2Hz,3H).C₂₁H₂₁F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：433.14；实测值：434.24(M+1)⁺。

基本按照实施例5的步骤F中用于制备化合物9的方法，由化合物Int-5e的异构体D制备化合物12。¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ11.31(t,J＝5.1Hz,1H)；7.36(q,J＝8.2Hz,1H)；6.87–6.78(m,2H)；5.72(t,J＝8.0Hz,1H)；4.69(dd,J＝15.3,5.7Hz,1H)；4.62(dd,J＝15.2,5.6Hz,1H)；3.88(d,J＝12.8Hz,1H)；3.73(dq,J＝14.3,7.2Hz,1H)；3.63–3.52(m,2H)；2.80(dd,J＝12.6,7.4Hz,1H)；2.20(dd,J＝12.5,8.7Hz,1H)；1.45(s,3H)；1.28(t,J＝7.2Hz,3H).C₂₁H₂₁F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：433.14；实测值：434.24(M+1)⁺。

实施例6

化合物Int-6c的制备

步骤A——化合物Int-6a的合成

向3-甲基丁-3-烯-1-醇(21g，244mmol)和咪唑(33g，487mmol)在DCM(200mL)中的混合物中分批加入TBDPSCl(100g，0.365mmol)。将混合物在25℃下搅拌10小时，然后用盐水(100mL)洗涤。用EtOAc(2×100mL)萃取水层。合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。所得残余物通过硅胶色谱法纯化，用100％PE洗脱，得到化合物Int-6a。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:7.68-7.66(m,4H)；7.42-7.36(m,6H)；4.74-4.67(d,J＝24.8Hz,2H)；3.77-3.74(t,J＝7.2Hz,2H)；2.29-2.25(t,J＝6.8Hz,2H)；1.67(s,3H)；1.04(s,9H).

步骤B——化合物Int-6b的合成

在0℃下向化合物Int-6a(10g，30.8mmol)和多聚甲醛(1.018g，33.9mmol)的DCM(150mL)的混合物中，逐滴加入1M二甲基氯化铝的己烷溶液(40.1mL，40.1mmol)。将混合物在0℃下搅拌2小时，然后用水(40mL)淬灭。滴加1N HCl以溶解沉淀物。将混合物用DCM(3×40mL)萃取，并将合并的有机层用硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。所得残余物通过硅胶色谱法纯化，用10％EtOAC/PE洗脱，得到化合物Int-6b。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:7.68(dd,J＝7.7,1.5Hz,4H)；7.44-7.37(m,6H)；4.89(s,2H)；3.78(t,J＝6.8Hz,2H)；3.67(t,J＝6.4Hz,2H)；2.30-2.22(m,4H)；1.06-1.05(m,9H).

步骤C——化合物Int-6c的合成

向化合物Int-6b(12g，33.8mmol)在DCM(120mL)中的搅拌溶液中加入三苯膦(10.65g，40.6mmol)和CBr₄(14.59g，44.0mmol)。将混合物在20℃搅拌2.5小时，然后真空浓缩。所得残余物通过硅胶色谱法纯化，用2％EtOAC/PE洗脱，得到化合物Int-6c。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:7.67(dd,J＝7.9,1.3Hz,4H)；7.45-7.37(m,6H)；4.89-4.81(m,2H)；3.79-3.71(m,2H)；3.39(t,J＝7.5Hz,2H)；2.54(t,J＝7.5Hz,2H)；2.28(t,J＝6.8Hz,2H)；1.07-1.05(m,9H).

实施例7

化合物13-16的制备

步骤A——化合物Int-7a的合成

向化合物Int-1(3g，7.85mmol)在DCM(30mL)中的搅拌溶液中逐滴加入TFA(10mL，130mmol)。将混合物在25℃下搅拌3小时，然后真空浓缩。所得残余物通过快速硅胶色谱法(24g柱)纯化，用5％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-7a。C₈H₈BrNO₄的LCMS分析计算值：263.0；实测值：263.9(M+1)⁺。

步骤B——化合物Int-7b的合成

向装有磁力搅拌棒的小瓶(小瓶A)中加入Ir[dF(CF₃)ppy]₂(dtbpy)PF₆(4.28mg,3.82μmol)、化合物Int-7a(100mg，0.382mmol)、碳酸钠(81mg，0.763mmol)和三(三甲基甲硅烷基)硅烷(285mg，1.145mmol)。同时，在另一个小瓶(小瓶B)中加入氯化镍(II)乙二醇二甲醚络合物(37mg，0.168mmol)和4,4'-二叔丁基-2,2'-联吡啶(45mg，0.168mmol)。加入DME(16mL)，并将混合物超声处理直至均匀(～15分钟)。将3.6mL该储备溶液添加至包含其他反应组分的小瓶A中。通过用N₂鼓泡将反应混合物脱气10分钟。在用封口膜密封小瓶之前，加入化合物Int-6c(319mg，0.763mmol)。然后将小瓶放在Kessil 34W蓝色LED灯的前面。使反应在辐射下搅拌并通过风扇冷却。16小时后，将反应混合物用EtOAc(20mL)稀释，并用水(10mL)洗涤。用EtOAc(3×20mL)萃取水层。合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过制备型TLC板纯化，用9％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-7b。C₃₀H₃₇NO₅Si的LCMS分析计算值：519.2；实测值：520.2(M+1)⁺。

步骤C——化合物Int-7c的合成

将化合物Int-7b(1.1g，2.117mmol)、O-(2,4-二硝基苯基)羟胺(0.843g，4.23mmol)和双[铑(α,α,α',α'-四甲基-1,3-苯二丙酸)](0.032g，0.042mmol)在CF₃CH₂OH(15mL)中的混合物脱气并用氮气吹扫。将所得混合物在50℃下搅拌10小时，然后真空浓缩，并通过硅胶色谱法纯化，用7％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-7c。C₂₉H₃₄N₂O₄Si的LCMS分析计算值：502.2；实测值：503.0(M+1)⁺。

步骤D——化合物Int-7d的合成

向化合物Int-7c(1.1g，2.188mmol)和碘乙烷(1.024g，6.56mmol)在DMF(15mL)中的混合物中加入氢化钠(0.175g，4.38mmol，60％w/w)。将混合物在0℃搅拌1小时，然后用1MHCl水溶液(3mL，3mmol)淬灭，并真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法纯化，用9％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-7d。C₃₁H₃₈N₂O₄Si的LCMS分析计算值：530.3；实测值：531.1(M+1)⁺。

步骤E——化合物Int-7e的合成

向化合物Int-7d(0.9g，1.696mmol)在THF(5mL)中的混合物中加入在THF中的1.0MTBAF(2.035mL，2.035mmol)。将混合物在15℃下搅拌2小时，然后真空浓缩。所得残余物通过制备型TLC纯化，用30％MeOH/THF洗脱，得到化合物Int-7e。C₁₅H₂₀N₂O₄的LCMS分析计算值：292.1；实测值：293.0(M+1)⁺。

步骤F——化合物Int-7f的合成

在0℃下向化合物Int-7e(150mg，0.513mmol)在DMF(5mL)中的搅拌混合物中加入氢化钠(41.0mg，1.026mmol，60％w/w)和碘甲烷(87mg，0.616mmol)。将混合物在20℃搅拌1小时，然后用饱和NH₄Cl水溶液(5mL)淬灭，并真空浓缩。所得残余物通过硅胶色谱法纯化，用9％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-7f。C₁₆H₂₂N₂O₄的LCMS分析计算值：306.2；实测值：307.0(M+1)⁺。

步骤G——化合物Int-7g的合成

在-78℃下向化合物Int-7f(100mg，0.326mmol)在THF(8mL)和DMF(1.5mL)中的溶液中加入在THF中的1M LiHMDS(0.979mL，0.979mmol)。20分钟后，在-78℃下，向上述混合物中加入在THF(1mL)中的3-苯基-2-(苯磺酰基)-1,2-氧杂吖丙啶(171mg，0.653mmol)。将所得混合物在16℃下搅拌20分钟，然后用MeOH淬灭并真空浓缩。粗产物通过制备型TLC纯化，用10％甲醇/二氯甲烷洗脱，得到化合物Int-7g。C₁₆H₂₂N₂O₅的LCMS分析计算值：322.2；实测值：323.2(M+1)⁺。

步骤H——化合物Int-7h的合成

向化合物Int-7g(40mg，0.124mmol)的MeOH(1mL)的搅拌溶液中加入m-CPBA(26.8mg，0.124mmol)和NIS(55.8mg，0.248mmol)。将混合物在60℃搅拌1小时，然后用饱和Na₂SO₃水溶液(2mL)淬灭，并真空浓缩。将所得残余物通过制备型TLC板纯化，用6％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-7h。C₁₆H₂₁IN₂O₅的LCMS分析计算值：448.1；实测值：449.1(M+1)⁺。

步骤I——化合物Int-7i的合成

在N₂下向化合物Int-7h(45mg，0.100mmol)在DMSO(2mL)中的搅拌溶液中加入(2,4-二氟苯基)甲胺(28.7mg，0.201mmol)、N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(64.9mg，0.502mmol)和Pd(PPh₃)₄(116mg，0.100mmol)。将反应混合物在75℃在CO(15psi)下搅拌1.5小时，然后用水(5mL)和EtOAc(5mL)处理。分离有机层，并将水层用EtOAc(2×5mL)萃取。合并的有机萃取物用水和盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并真空浓缩。粗产物使用制备型TLC(SiO₂，石油醚/EtOA_C＝1：2)纯化，然后通过SFC(DAICEL CHIRALPAK AD,10μm,30×250mm柱,60mL/min,40％(EtOH+0.1％NH₃H₂O)/CO₂)进一步纯化，得到化合物Int-7i的异构体A(第一洗脱组分)，化合物Int-7i的异构体B(第二洗脱组分)，化合物Int-7i的异构体C(第三洗脱组分)和化合物Int-7i的异构体D(第四洗脱组分)。C₂₄H₂₇F₂N₃O₆的LCMS分析计算值：491.2；实测值：492.2(M+1)⁺。

步骤J——化合物13、化合物14、化合物15和化合物16的合成

向化合物Int-7i的异构体A(10mg，0.020mmol)在乙腈(1mL)中的溶液中添加溴化镁(18.73mg，0.102mmol)。将混合物在室温20℃下搅拌1小时，然后过滤并通过反相HPLC(Boston Green ODS,5μm,30×150mm柱)纯化，用40-70％ACN/(水+0.1TFA)洗脱，得到化合物13。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:7.46-7.43(m,1H)；6.98-6.91(m,2H)；5.66-5.62(t,J＝2.4,1H)；4.64(s,2H)；3.90(s,2H)；3.72-3.34(m,4H)；3.17(s,3H)；3.04-2.99(m,1H)；2.08-1.93(m,3H)；1.28-1.20(t,J＝7.2Hz,3H).C₂₃H₂₅F₂N₃O₆的LCMS分析计算值：477.2；实测值：478.0(M+1)⁺。

基本按照实施例7的步骤J中用于制备化合物13的方法，由化合物Int-7i的异构体B制备化合物14。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:7.44(s,1H)；6.95-6.93(m,2H)；5.71-5.69(m,1H)；4.62(s,2H)；3.98-3.58(m,6H)；3.27(s,3H)；2.55-2.15(m,4H)；1.26-1.20(t,J＝7.2Hz,3H).C₂₃H₂₅F₂N₃O₆的LCMS分析计算值：477.2；实测值：478.0(M+1)⁺。

基本按照实施例7的步骤J中用于制备化合物13的方法，由化合物Int-7i的异构体C制备化合物15。¹H NMR(400MHz,CD₃Cl)δ:7.48-7.44(m,1H)；6.99-6.91(m,2H)；5.70-5.68(m,1H)；4.62(m,2H)；3.98-3.49(m,6H)；3.27(s,3H)；2.54-2.13(m,4H)；1.26-1.22(t,J＝7.2Hz,3H).C₂₃H₂₅F₂N₃O₆的LCMS分析计算值：477.2；实测值：478.0(M+1)⁺。

基本按照实施例7的步骤J中用于制备化合物13的方法，由化合物Int-7i的异构体D制备化合物16。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:7.43(s,1H)；6.93(s,2H)；5.66-5.62(t,J＝2.4,1H)；4.64(s,2H)；3.90(s,2H)；3.70-3.34(m,4H)；3.17(s,3H)；3.04-2.99(m,1H)；2.08-1.93(m,3H)；1.28-1.22(t,J＝7.2Hz,3H).C₂₃H₂₅F₂N₃O₆的LCMS分析计算值：477.2；实测值：478.0(M+1)⁺。

实施例8

化合物17-20的制备

步骤A——化合物Int-8a的合成

向装有磁力搅拌棒的40mL小瓶中加入Ir[dF(CF₃)ppy]₂(dtbpy)PF₆(12.84mg,0.011mmol)、化合物Int-7a(300mg，1.145mmol)、l,l,l,3,3,3-六甲基-2-(三甲基甲硅烷基)三硅烷(1.060mL，3.43mmol)和2,6-二甲基吡啶(0.265mL，2.290mmol)。同时，在另外的40mL小瓶中装入氯化镍(II)甘醇二甲醚(37.0mg)和4,4'-二叔丁基-2,2'-联吡啶(45.0mg)。加入1,2-二甲氧基乙烷(16.7mL)，并将混合物超声处理直至均匀(～15分钟)。将11.4mL的该储备溶液添加到包含其他反应组分的小瓶中。通过用N₂鼓泡使反应混合物脱气10分钟。加入4-溴-2-甲基丁-1-烯(0.409mL，3.43mmol)，然后用封口膜密封小瓶。然后将小瓶放入第二代默克光反应器中(50％LED功率，700rpm搅拌，10200rpm风扇冷却)。2小时后，将反应从光下移开并浓缩。残余物通过硅胶快速色谱法(120g柱)纯化，用0-100％(25％EtOH/EtOAc)/己烷洗脱，得到不纯的产物。将该物质通过反相HPLC(Sunfire Prep C18OBD，10μm,50×250mm柱)进一步纯化，用0-80％(MeCN/H₂O)+0.1％TFA洗脱，得到化合物Int-8a。C₁₃H₁₇NO₄的LCMS分析计算值：251.12；实测值：252.15(M+1)⁺。

步骤B——化合物Int-8b的合成

在装有磁力搅拌棒的40mL小瓶中装入化合物Int-8a(505mg，2.010mmol)的甲醇(10.0mL)中的溶液。加入2.0M甲胺的THF溶液(10.05mL，20.10mmol)，并将混合物在室温搅拌。6小时后，将混合物真空浓缩，得到化合物Int-8b，其无需进一步纯化即可用于实施例8的步骤C。C₁₃H₁₈N₂O₃的LCMS分析计算值：250.13；实测值：251.16(M+1)⁺。

步骤C——化合物Int-8c的合成

在含有化合物Int-8b(503mg，2.01mmol)的40mL小瓶中配备磁力搅拌棒。加入THF(20.1mL)和N-溴代琥珀酰亚胺(787mg，4.42mmol)，并将混合物在室温搅拌。15分钟后，将混合物用MeOH稀释并浓缩，得到化合物Int-8c，其无需进一步纯化即可用于实施例8的步骤D。C₁₃H₁₆Br₂N₂O₃的LCMS分析计算值：407.95；实测值：409.04(M+1)⁺。

步骤D——化合物Int-8d的合成

在装有磁力搅拌棒的40mL小瓶中装入化合物Int-8c(820mg，2.01mmol)。加入DMSO(20.1mL)和碳酸铯(2619mg，8.04mmol)，并将混合物在室温下搅拌。1小时后，将混合物过滤，用DMSO洗涤，并通过反相HPLC(Sunfire Prep C18 OBD,10μm,50×250mm)纯化，用0-60％(MeCN/H₂O)+0.1％TFA洗脱。将来自过滤的固体溶解在MeOH中，并再次过滤。将滤液浓缩并溶解在DMSO/MeOH中。使用上述相同条件，通过反相HPLC纯化该混合物。将产物级分真空浓缩，得到化合物Int-8d。C₁₃H₁₅BrN₂O₃的LCMS分析计算值：326.03；实测值：327.08(M+1)⁺。

步骤E——化合物Int-8e的合成

在装有磁力搅拌棒的经火焰干燥的200mL圆底烧瓶中装入化合物Int-8d(608mg，1.858mmol)并置于N₂气氛下。加入THF(24.8mL)和DMF(12.4mL)，并将混合物在搅拌下冷却至-78℃。逐滴加入1.0M双(三甲基甲硅烷基)氨基锂的THF溶液(5.575mL，5.58mmol)，并将该混合物在-78℃下搅拌10分钟。然后逐滴加入3-苯基-2-(苯基磺酰基)-1,2-氧杂吖丙啶(1068mg，4.09mmol)在最小体积的THF的溶液中。使混合物温热至室温。将混合物在水和EtOAc之间分配。添加少量盐水以促进各层分离。用另外两小部分水洗涤EtOAc层。过滤合并的水层，并通过反相HPLC(Sunfire Prep C18 OBD,10μm,50×250mm柱)直接纯化，先用100％H₂O+0.1％TFA等度洗脱，然后用0-50％(MeCN/H₂O)+0.1％TFA洗脱。收集产物，并通过反相HPLC(Phenomenex Luna Prep C18,5μm,50×250mm柱)进一步纯化，先用100％H₂O+0.1％TFA等度洗脱，然后用0-50％(MeCN/H₂O)+0.1％TFA等度洗脱，然后用0-50％(MeCN/H₂O)+0.1％TFA洗脱。浓缩产物级分，得到化合物Int-8e。C₁₃H₁₅BrN₂O₄的LCMS分析计算值：342.02。实测值：343.07(M+1)⁺。

步骤F——化合物Int-8f的合成

在装有磁力搅拌棒的50mL圆底烧瓶中装入化合物Int-8e(140mg，0.408mmol)。加入DMSO(8.16mL)、(2,4-二氟苯基)甲胺(0.145mL，1.224mmol)、N,N-二异丙基乙胺(0.356mL，2.040mmol)和Pd(dppf)Cl₂(59.7mg，0.082mmol)。将烧瓶抽空，并从气球中用CO回填三次，然后加热至100℃并搅拌7.5小时。将反应冷却至室温，过滤，并通过反相HPLC(Sunfire Prep C18 OBD,10μm,50×250mm柱)纯化，用5-85％(MeCN/H₂O)+0.1％TFA洗脱，得到浅黄色泡沫/固体。将该物质通过手性制备型SFC(ChiralPak IA,20×150mm柱,65mL/min,100巴,20-35％乙醇/CO₂)进一步纯化，得到化合物Int-8f的异构体A(第一洗脱组分)，化合物Int-8f的异构体B(第二洗脱组分)，化合物Int-8f的异构体C(第三洗脱组分)和化合物Int-8f的异构体D(第四洗脱组分)。C₂₁H₂₁F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：433.14；实测值：434.21(M+1)⁺。

步骤G——化合物17、化合物18、化合物19和化合物20的合成

在含有化合物Int-8f的异构体A(21mg，0.048mmol)的20mL小瓶中配备磁力搅拌棒。加入DMF(0.500mL)，然后加入氯化锂(20.54mg，0.485mmol)，并在搅拌下将混合物加热至100℃。3小时后，将反应冷却至室温。将混合物用DMSO稀释并通过反相HPLC(SunfirePrep C18 OBD,5μm,30×150mm柱)纯化，用5-95％(MeCN/H₂O)+0.1％TFA洗脱。浓缩产物级分，与DCM/MeOH/甲苯共蒸发，并冻干得到化合物17。¹H NMR(500MHz,SO(CD₃)₂)δ11.66(s,1H)；11.45(t,J＝5.5Hz,1H)；7.44(q,J＝7.9,7.4Hz,1H)；7.30–7.21(m,1H)；7.13–7.04(m,1H)；6.89(s,1H)；5.63(t,J＝7.9Hz,1H)；4.58(qd,J＝14.9,6.1Hz,2H)；3.95(d,J＝12.9Hz,1H)；3.73(d,J＝12.8Hz,1H)；3.09(s,3H)；2.71(dd,J＝11.9,7.6Hz,1H)；2.03–1.96(m,1H)；1.36(s,3H).C₂₀H₁₉F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：419.13；实测值：420.23(M+1)⁺。

基本按照实施例8的步骤G中用于制备化合物17的方法，由化合物Int-8f的异构体B制备化合物18。¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ11.41(br.s,1H)；10.89(t,J＝5.0Hz,1H)；7.37(q,J＝8.2Hz,1H)；6.88–6.77(m,2H)；5.66(d,J＝7.4Hz,1H)；5.24(s,1H)；4.70–4.56(m,2H)；3.84(d,J＝12.7Hz,1H)；3.51(d,J＝12.7Hz,1H)；3.21(s,3H)；2.39(d,J＝13.4Hz,1H)；2.32(dd,J＝13.4,7.5Hz,1H)；1.68(s,3H).C₂₀H₁₉F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：419.13；实测值：420.23(M+1)⁺。

基本按照实施例8的步骤G中用于制备化合物17的方法，由化合物Int-8f的异构体C制备化合物19。¹H NMR(500MHz,SO(CD₃)₂)δ11.66(s,1H)；11.45(t,J＝5.8Hz,1H)；7.44(q,J＝8.5Hz,1H)；7.26(td,J＝10.6,2.4Hz,1H)；7.08(td,J＝8.8,2.2Hz,1H)；6.89(s,1H)；5.62(t,J＝8.0Hz,1H)；4.58(qd,J＝15.1,5.9Hz,2H)；3.95(d,J＝12.8Hz,1H)；3.73(d,J＝12.8Hz,1H)；3.08(s,3H)；2.71(dd,J＝12.2,7.4Hz,1H)；1.99(dd,J＝12.1,8.9Hz,1H)；1.36(s,3H).C₂₀H₁₉F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：419.13；实测值：420.22(M+1)⁺。

基本按照实施例8的步骤G中用于制备化合物17的方法，由化合物Int-8f的异构体D制备化合物20。¹H NMR(500MHz,SO(CD₃)₂)δ11.47(s,1H)；10.85(t,J＝5.3Hz,1H)；7.42(q,J＝8.4Hz,1H)；7.24(td,J＝10.5,10.0,2.2Hz,1H)；7.07(td,J＝8.6,1.9Hz,1H)；5.68(d,J＝7.1Hz,1H)；5.45(s,1H)；4.56(d,J＝5.4Hz,2H)；3.79(d,J＝12.7Hz,1H)；3.72(d,J＝12.8Hz,1H)；3.09(s,3H)；2.32(dd,J＝13.2,7.3Hz,1H)；2.15(d,J＝13.4Hz,1H)；1.56(s,3H).C₂₀H₁₉F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：419.13；实测值：420.22(M+1)⁺。

实施例9

化合物21-24的制备

从Int-8e开始，使用与实施例8中步骤F和步骤G中所述基本相同的方法，不同之处在于用4-氟苄胺代替，通过手性制备型SFC(ChiralPak AD-H,20×250mm柱,60mL/min,100巴,35％MeOH/CO₂)纯化，得到异构体A和异构体B、异构体C和异构体D的混合物，并进一步通过手性制备型SFC(ChiralPak AD-H,20×250mm柱,70mL/min,100巴,25％MeOH/CO₂)纯化异构体A和异构体B的混合物，在步骤F中得到异构体A和异构体B，制备得以下化合物：

实施例10

化合物25-28的制备

从Int-8e开始，使用与实施例8中步骤F和步骤G中所述基本相同的方法，不同之处在于用2,4,6-三氟苄胺代替，通过手性制备型SFC(ChiralPak AD-H,20×150mm柱,60mL/min,100巴,20％MeOH/CO₂)纯化得到异构体A、异构体B、异构体C和异构体D，并在相同的SFC条件下进一步纯化异构体C和异构体D，在步骤F中获得足够纯的物质，制备以下化合物：

实施例11

化合物29-32的制备

从Int-8e开始，使用与实施例8中步骤F和步骤G中所述基本相同的方法，不同的是用3-氯-2,6-二氟苄胺代替，通过手性制备型SFC(ChiralPak IA,20×150mm柱,65mL/min,100巴,25％EtOH/CO₂)进行纯化，得到异构体A、异构体B、异构体C和异构体D，并在相同的SFC条件下进一步纯化异构体B、异构体C和异构体D，在步骤F中获得具有足够纯的物质，制备以下化合物：

实施例12

化合物33-36的制备

从Int-8e开始，使用与实施例8中步骤F和步骤G中所述基本相同的方法，不同的是用3-氯-2-氟苄胺代替，并通过手性制备型SFC(ChiralPak IA,20×150mm柱,65mL/min,100巴,25-35％MeOH/CO₂)进行纯化，在步骤F中获得异构体A、异构体B、异构体C和异构体D，制备以下化合物：

实施例13

化合物Int-13b的制备

步骤A——化合物Int-13a的合成

向2-亚甲基丁醛(20g，238mmol)在MeOH(120mL)中的溶液中分批添加NaBH₄(9.45g，250mmol)。将混合物在0℃下搅拌1小时。将混合物用饱和NH₄Cl水溶液(40mL)淬灭并用水(80mL)稀释，然后用EtOAc(3×100mL)萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并蒸发。所得残余物通过快速硅胶色谱法(80g柱)纯化，用0-10％EtOAc/石油醚洗脱，得到化合物Int-13a。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:4.99(s,1H)；4.98(s,1H)；4.07(s,2H)；2.08-2.02(m,2H)；1.22-1.02(m,3H).

步骤B——化合物Int-13b的合成

在0℃下向化合物Int-13a(2g，23.22mmol)在DCM(40mL)中的溶液中添加PBr₃(1.095mL，11.61mmol)。将该混合物加热至20℃并搅拌12小时。将混合物冷却至0℃，用5％K₂CO₃水溶液(15mL)淬灭，并用水(20mL)稀释。分离有机相，用盐水(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，并真空浓缩，得到化合物Int-13b。该物质无需进一步纯化即可用于实施例14的步骤D。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:5.23(s,1H)；4.99(s,1H)；3.83(s,2H)；2.20-2.14(m,2H)；1.03-1.00(m,3H).

实施例14

化合物37-40的制备

步骤A——化合物Int-14a的合成

将1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷络合物(590.9mg，0.724mmol)加入化合物Int-1(5.04g，13.19mmol)、乙烯基三氟硼酸钾(3.52g，26.3mmol)和碳酸钾(3.65g，26.4mmol)的二噁烷(53.0mL)和水(13.0mL)的搅拌溶液中。将反应混合物脱气(3×)并置于氮气下，然后加热至80℃保持3小时。反应混合物冷却至室温，然后在EtOAc(200mL)和水(200mL)之间分配。用EtOAc(2×100mL)萃取水层。合并有机层，用盐水(1×30mL)洗涤，用MgSO₄干燥。过滤，并减压蒸发。将所得固体通过硅胶柱(220g)色谱法纯化，用0-40％(25％EtOH/EtOAc)/己烷洗脱，得到化合物Int-14a。C₁₈H₁₉NO₅的LCMS分析计算值：329.13；实测值：330.21(M+1)⁺。

步骤B——化合物Int-14b的合成

将在叔丁醇中的2.5wt％的四氧化锇(3.4mL，0.271mmol)和NMO(1.4025g，11.97mmol)加入到化合物Int-14a(1.7072g，5.18mmol)在THF(24.0mL)、叔丁醇(21.0mL)和水(4.0mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在室温搅拌2.5小时，然后用THF(52.0mL)稀释。向反应混合物中加入偏亚硫酸氢钠(24.60g，129.4mmol)，将其再搅拌一小时，然后通过硅藻土垫过滤。滤液经Na₂SO₄干燥，过滤，并减压蒸发。将得到的油通过硅胶柱(120g)色谱法纯化，用0-8％的MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-14b。C₁₈H₂₁NO₇的LCMS分析计算值：363.13；实测值：364.25(M+1)⁺。

步骤C——化合物Int-14c的合成

将高碘酸钠(2.1g，9.82mmol)加入到化合物Int-14b(1.7344g，4.77mmol)在THF(38.0mL)和水(10.0mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在室温搅拌3.5小时，然后通过硅藻土垫过滤，将其用EtOAc(2×30mL)洗涤。将滤液在EtOAc(40mL)、水(50mL)和饱和硫代硫酸钠水溶液(50mL)之间分配。用EtOAc(2×50mL)萃取水层。合并有机层，用盐水(1×30mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤，并减压蒸发。将所得固体通过硅胶柱(40g)色谱法纯化，用0-40％EtOA_C/己烷洗脱，得到化合物Int-14c。C₁₇H₁₇NO₆的LCMS分析计算值：331.11；实测值：332.22(M+1)⁺。

步骤D——化合物Int-14d的合成

将化合物Int-14c(106.7mg，0.322mmol)、碘化钠(142.6mg，0.951mmol)、Int-13b(73.4mg，0.493mmol)、THF(1.5mL)和水(1.5mL)合并，并在室温下剧烈搅拌。十分钟后，将铟(76.7mg，0.668mmol)加入到反应混合物中。17.5小时后，将反应混合物用EtOAc(30mL)稀释并进行超声处理，然后通过硅藻土垫过滤，将其用另外的EtOAc(2×10mL)洗涤。合并的滤液经MgSO₄干燥，过滤，并减压蒸发。残余物通过硅胶柱(12g)色谱法纯化，用0-30％(25％EtOH/EtOAc)/己烷洗脱，得到化合物Int-14d。C₂₂H₂₇NO₆的LCMS分析计算值：401.18；实测值：402.24(M+1)⁺。

步骤E——化合物Int-14e的合成

将化合物Int-14d(63.3mg，0.158mmol)和甲胺2.0M在THF中的溶液(1.6mL，3.20mmol)合并并在室温下搅拌。2天后，将2.0M甲胺的THF溶液(1.6mL，3.20mmol)加入反应混合物中。再过3天后，将反应混合物减压蒸发并将所得残余物溶于2.0M甲胺的THF溶液(1.6mL，3.20mmol)。将所得溶液在室温下搅拌3天，然后加热至40℃再保持19.5小时。将反应混合物冷却至室温，并减压蒸发。将所得残余物溶于ACN/水中，冷冻并冻干，得到化合物Int-14e。C₂₂H₂₈N₂O₅的LCMS分析计算值：400.20；实测值：401.31(M+1)⁺。

步骤F——化合物Int-14f的合成

将对甲苯磺酸一水合物(604.8mg，3.18mmol)加入到化合物Int-14e(391.2mg，0.977mmol)的MeOH(10.0mL)搅拌溶液中。将反应混合物在室温搅拌24小时，然后加入另外的对甲苯磺酸一水合物(315.8mg，1.66mmol)。再经过17小时后，将另外的对甲苯磺酸一水合物(213.8mg，1.12mmol)加入到反应混合物中。再过4天后，将反应混合物减压浓缩至

然后通过反相色谱法(50g C18 RediSep^TM金柱)纯化，用0-60％(ACN/水)+0.05％TFA洗脱。合并干净的产物级分，冷冻并冻干。合并被甲苯磺酸显著污染的产物级分，并用EtOAc(3×50mL)萃取。向水层中加入两勺NaCl，将其用EtOAc(50mL)和DCM(50mL)萃取。向水层中加入三勺NaCl，将其用DCM(50mL)和10％MeOH/DCM(50mL)萃取。将另外三勺NaCl添加至水层，将其用10％MeOH/DCM(2×50mL)萃取。合并有机层，经MgSO₄干燥，过滤，并减压蒸发。所得残余物通过反相HPLC(Waters Sunfire C18 OBD，10μm,30×150mm柱)纯化，用10-60％(ACN/水)+0.05％TFA洗脱。合并产物级分，并减压蒸发。将所得残余物溶解于MeOH/EtOAc中，与来自ISCO纯化的冻干产物合并，并减压蒸发，得到化合物Int-14f。C₁₄H₂₀N₂O₄的LCMS分析计算值：280.14；实测值：281.23(M+1)⁺。

步骤G——化合物Int-14g的合成

将叔丁基二甲基氯硅烷(475.0mg，3.15mmol)加入到化合物Int-14f(371.6mg，1.326mmol)、咪唑(381.1mg，5.60mmol)和DMAP(28.0mg，0.229mmol)在DMF(6.6mL)的搅拌溶液中。将反应混合物在室温搅拌15小时，然后在EtOAc(150mL)和水(40mL)之间分配。用水(2×40mL)和盐水(1×20mL)洗涤有机层，用MgSO₄干燥。过滤，并减压蒸发。将所得油状物通过硅胶柱(24g)色谱法纯化，用0-40％(25％EtOH/EtOAc)/己烷洗脱，得到化合物Int-14g。C₂₀H₃₄N₂O₄Si的LCMS分析计算值：394.23；实测值：395.42(M+1)⁺。

步骤H——化合物Int-14h的合成

将NBS(277.1mg，1.557mmol)加入到化合物Int-14g(306.9mg，0.778mmol)在THF(7.8mL)的搅拌溶液中。将反应混合物在室温搅拌2小时，然后添加另外的NBS(69.3mg，0.389mmol)。另外1.5小时后，将另外的NBS(86.9mg，0.488mmol)加入到反应混合物中。再过一小时后，将另外的NBS(91.1mg，0.512mmol)加入到反应混合物中。15分钟后，将反应混合物在EtOAc(125mL)和0.1M NaOH(50mL)之间分配。有机层用0.1M NaOH(1×50mL)和盐水(1×20mL)洗涤。有机层用DCM

稀释。合并的水层用DCM(1×50mL)萃取。合并有机层，经MgSO₄干燥，过滤，并减压蒸发。将所得残余物通过柱(24g)色谱法纯化，用0-80％(25％EtOH/EtOAc)/己烷洗脱，然后用10％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-14h。C₂₀H₃₂Br₂N₂O₄Si的LCMS分析计算值：552.05；实测值：553.23(M+1)⁺。

步骤I——化合物Int-14i的合成

将碳酸铯(1.1225g，3.45mmol)加入到化合物Int-14h(411.5mg，0.745mmol)在DMSO(7.5mL)中的搅拌悬浮液中。将反应混合物在室温搅拌17.5小时，然后在EtOAc(175mL)和水(50mL)之间分配。用水(2×50mL)和盐水(1×20mL)洗涤有机层。合并的水层用EtOAc(1×50mL)萃取。合并有机层，经MgSO₄干燥，过滤，并减压蒸发。将所得固体通过硅胶柱(24g)色谱法纯化，用0-50％(25％EtOH/EtOAc)/己烷洗脱，得到化合物Int-14i。C₂₀H₃₁BrN₂O₄Si的LCMS分析计算值：470.12，472.12；实测值：471.27，473.27(M+1)⁺。

步骤J——化合物Int-14j的合成

将化合物Int-14i(300.8mg，0.638mmol)和1.25M HCl在MeOH中的溶液(6.5mL，8.13mmol)合并，并在搅拌下加热至40℃。3天后，发现瓶盖已吹开，所有溶剂均已蒸发。将所得残余物通过硅胶柱(24g)色谱法纯化，用0-10％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-14j。C₁₄H₁₇BrN₂O₄的LCMS分析计算值：356.04，358.04；实测值：357.16，359.16(M+1)⁺。

步骤K——化合物Int-14k的合成

将N,N-二异丙基乙胺(0.2mL，1.145mmol)、2,4-二氟苄胺(0.08mL，0.673mmol)和1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷络合物(35.2mg，0.043mmol)加入到化合物Int-14j(80.3mg，0.225mmol)在DMSO(2.3mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物脱气(3x)并置于氮气下，然后脱气并置于一氧化碳气球下。将反应混合物在100℃下搅拌16.5小时。将反应混合物冷却至室温，用MeOH稀释，过滤(0.45μm注射器式过滤器)，然后通过反相色谱法(50g C18RediSep^TM金柱)纯化，用0-100％(ACN/水)+0.05％TFA洗脱。合并产物级分，冷冻并冻干，得到琥珀色固体，其通过手性制备型SFC(ChiralPak AD-H,21 250×mm柱,50g/min,120巴,35％(1:1ACN/MeOH+0.2％DIPA)/CO₂,40℃)进一步纯化，得到化合物Int-14k的异构体A(第一洗脱组分)，化合物Int-14k的异构体B(第二洗脱组分)，化合物Int-14k的异构体C(第三洗脱组分)和化合物Int-14k的异构体D(第四洗脱组分)。使用上述手性制备型SFC条件第二次分离异构体C和异构体D，以提供足够的纯度。C₂₂H₂₃F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：447.16；实测值：448.30(M+1)⁺。

步骤L——化合物37、化合物38、化合物39和化合物40的合成

将化合物Int-14k的异构体A(37.5mg，0.084mmol)、溴化镁(160.2mg，0.870mmol)和乙腈(1.8mL)合并并在室温搅拌3小时。将反应混合物用MeOH稀释并过滤(0.45μm注射器式过滤器)，然后通过反相HPLC(Waters Sunfire C18 OBD,10μm,30×150mm柱)纯化，用10-90％(ACN/水)+0.05％TFA洗脱。合并产物级分并在减压下浓缩直至除去大部分乙腈。剩余的水溶液用

萃取。有机层依次用硫酸钠干燥，过滤，合并，并在减压下蒸发。将得到的残余物溶于ACN/水中，冷冻，并冻干，得到化合物37。¹H NMR(500MHz,CD₃OD):δ7.49–7.42(m,1H)；7.02–6.91(m,2H)；5.68(t,J＝7.9Hz,1H)；4.70–4.61(m,2H)；3.91(d,J＝13.3Hz,1H)；3.84(d,J＝13.3Hz,1H)；3.18(s,3H)；2.91(dd,J＝13.1,7.7Hz,1H)；2.03(dd,J＝12.9,8.1Hz,1H)；1.84(dq,J＝14.8,7.4Hz,1H)；1.74(dq,J＝14.7,7.5Hz,1H)；0.85(t,J＝7.5Hz,3H).C₂₁H₂₁F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：433.14；实测值：434.20(M+1)⁺。

基本按照实施例14的步骤L中用于制备化合物37的方法，由化合物Int-14k的异构体B制备化合物38。¹H NMR(500MHz,CD₃OD):δ7.50–7.42(m,1H)；7.01–6.91(m,2H)；5.72(d,J＝7.7Hz,1H)；4.69–4.60(m,2H)；3.87(d,J＝13.4Hz,1H)；3.75(d,J＝13.4Hz,1H)；3.18(s,3H)；2.42(d,J＝13.9Hz,1H)；2.29(dd,J＝13.9,7.8Hz,1H)；1.99(q,J＝7.4Hz,2H)；1.03(t,J＝7.5Hz,3H).C₂₁H₂₁F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：433.14；实测值：434.22(M+1)+。

基本按照实施例14的步骤L中用于制备化合物37的方法，由化合物Int-14k的异构体C制备化合物39。¹H NMR(500MHz,CD₃OD):δ7.50–7.42(m,1H)；7.01–6.91(m,2H)；5.72(d,J＝7.8Hz,1H)；4.69–4.60(m,2H)；3.87(d,J＝13.4Hz,1H)；3.75(d,J＝13.4Hz,1H)；3.18(s,3H)；2.42(d,J＝13.9Hz,1H)；2.29(dd,J＝13.9,7.8Hz,1H)；1.99(q,J＝7.4Hz,2H)；1.03(t,J＝7.5Hz,3H).C₂₁H₂₁F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：433.14；实测值：434.23(M+1)+。

基本按照实施例14的步骤L中用于制备化合物40的方法，由化合物Int-14k的异构体D制备化合物40。¹H NMR(500MHz,CD₃OD):δ7.50–7.42(m,1H)；7.02–6.91(m,2H)；5.68(t,J＝7.9Hz,1H)；4.70–4.60(m,2H)；3.92(d,J＝13.2Hz,1H)；3.84(d,J＝13.3Hz,1H)；3.18(s,3H)；2.91(dd,J＝13.1,7.7Hz,1H)；2.04(dd,J＝12.9,8.1Hz,1H)；1.84(dq,J＝14.8,7.5Hz,1H)；1.74(dq,J＝14.7,7.4Hz,1H)；0.85(t,J＝7.5Hz,3H).C₂₁H₂₁F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：433.14；实测值：434.27(M+1)+。

实施例15

化合物41-44的制备

步骤A——化合物Int-15a的合成

在0℃下向化合物Int-14d(15.7g，39.1mmol)在DCM(200mL)中的溶液中加入DMAP(2.389g，19.55mmol)、2,6-二甲基吡啶(12.57g，117mmol)和叔丁基二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(20.68g，78mmol)。将反应混合物在20℃搅拌2小时，然后用水(50mL)淬灭并用DCM(100mL)萃取。合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤，真空浓缩。粗产物通过快速硅胶色谱法纯化，用0-20％EtOA_C/石油醚洗脱，得到化合物Int-15a。C₂₈H₄₁NO₆Si的LCMS分析计算值：515.3；实测值：516.9(M+1)⁺。

步骤B——化合物Int-15b的合成

在0℃下向化合物Int-15a(8.4g，16.29mmol)的DCM(85mL)溶液中加入TFA(8.5mL)。将反应混合物在20℃搅拌2小时，然后用饱和NaHCO₃水溶液(50mL)淬灭，并用水(50mL)稀释。将水相用DCM(100mL)萃取，并将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤，并真空浓缩。粗产物通过快速硅胶色谱法(120g柱)纯化，用0-50％EtOA_C/石油醚洗脱，得到化合物Int-15b。C₂₀H₃₃NO₅Si的LCMS分析计算值：395.2；实测值：396.5(M+1)⁺。

步骤C——化合物Int-15c的合成

向化合物Int-15b(5.3g，13.40mmol)和O-(2,4-二硝基苯基)羟胺(8.00g，40.2mmol)在CF₃CH₂OH(80mL)中的混合物中加入双[铑(α,α,α',α'-四甲基-1,3-苯二丙酸)](0.204g，0.268mmol)。将反应混合物在氮气下在65℃搅拌6小时，然后真空浓缩。所得残余物通过快速硅胶色谱法(40g柱)纯化，用0-10％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-15c。C₁₉H₃₀N₂O₄Si的LCMS分析计算值：378.2；实测值：379.0(M+1)⁺。

步骤D——化合物Int-15d的合成

在0℃下，向化合物Int-15d(1.35g，3.57mmol)在DMF(25mL)中的混合物中加入NaH(0.428g，10.70mmol)和碘甲烷(0.666mL，10.70mmol)。将反应混合物在20℃搅拌2小时，然后用1N HCl(0.5mL)淬灭并真空浓缩。粗产物通过制备型TLC板纯化，用10％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-15d。C₂₀H₃₂N₂O₄Si的LCMS分析计算值：392.2；实测值：393.3(M+1)⁺。

步骤E——化合物Int-15e的合成

在0℃下向化合物Int-15d(2.5g，6.37mmol)的THF(40mL)混合物中添加TBAF(12.74mL，12.74mmol)。将反应混合物在20℃搅拌2小时，然后真空浓缩。粗产物通过制备型TLC板纯化，用12％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-15e。C₁₄H₁₈N₂O₄的LCMS分析计算值：278.1；实测值：279.1(M+1)⁺。

步骤F——化合物Int-15f的合成

向化合物Int-15e(1.7g，6.11mmol)在MeOH(30mL)中的溶液中添加m-CPBA(5.27g，24.43mmol)和NIS(5.50g，24.43mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌1.5小时，然后用饱和Na₂SO₃(15mL)水溶液淬灭。过滤反应混合物，并通过制备型反相HPLC(Phenomenex SynergiMax-RP，10μm,50×250mm柱)纯化，用0-20％ACN/(水+0.1％TFA)洗脱，得到化合物Int-15f。C₁₄H₁₇IN₂O₄的LCMS分析计算值：404.0；实测值：404.8(M+1)⁺。

步骤G——化合物Int-15g的合成

向化合物Int-15f(300mg，0.742mmol)在DMSO(5mL)中的溶液中加入(3-氯-2-氟苯基)甲胺(237mg，1.484mmol)、Pd(Ph₃P)₄(429mg，0.371mmol)和DIEA(0.648mL，3.71mmol)。将反应混合物脱气并用CO(3×)吹扫，然后在80℃下在CO气球下搅拌1.5小时。将反应混合物过滤并通过制备型反相HPLC(Boston Green ODS，5μm,30×150mm柱)纯化，用40-60％ACN/(水+0.1％TFA)洗脱。通过手性制备型SFC(DAICEL CHIRALPAK AS-H，5μm,30×250mm色谱柱，60mL/min，40％(EtOH+0.1％NH₃H₂O)/CO₂，220nm)进一步纯化该物质，得到化合物Int-15g的异构体A和异构体B的混合物(第一洗脱组分)、化合物Int-15g的异构体C(第二洗脱组分)和化合物Int-15g的异构体D(第三洗脱组分)。通过制备型手性SFC(DAICEL CHIRALPAKIC,10μm,30×250mm柱,50mL/min,50％(EtOH+0.1％NH₃H₂O)/CO₂,220nm)进一步纯化化合物Int-15g的异构体A和异构体B的混合物，得到化合物Int-15g的异构体A(第一洗脱组分)和化合物Int-15g的异构体B(第二洗脱组分)。化合物Int-15g的异构体A进一步通过手性制备型SFC(DAICEL CHIRALPAK AD,10μm,30×250mm,70mL/min,50％(MeOH+0.1％NH₃H₂O)/CO₂,220nm)纯化，得到Int-15g的异构体A。C₂₂H₂₃ClFN₃O₅的LCMS分析计算值：463.1；实测值：464.1(M+1)⁺。

步骤H——化合物41、化合物42、化合物43和化合物44的合成

向化合物Int-15g(50mg，0.108mmol)的异构体B在乙腈(3mL)中的溶液中添加溴化镁(99mg，0.539mmol)。将混合物在10℃下搅拌12小时，然后用MeOH(0.5mL)稀释，并通过制备型反相HPLC(Boston Green ODS，5μm,30×150mm柱)纯化，用33-63％ACN/(水+0.1％TFA)洗脱。产物级分与甲苯共蒸发两次，得到化合物42。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:10.99(br s,1H)；7.30(q,J＝6.6Hz,2H)；7.11-6.98(m,1H)；5.67(d,J＝7.9Hz,1H)；4.86-4.63(m,2H)；3.69(s,2H)；3.20(s,3H)；2.46(d,J＝14.0Hz,1H)；2.20-2.14(m,1H)；2.04-1.88(m,2H)；1.09-1.00(m,3H).C₂₁H₂₁ClFN₃O₅的LCMS分析计算值：449.1；实测值：450.2(M+1)⁺。

基本上按照实施例15的步骤H中用于制备化合物42的方法，由化合物Int-15g的异构体A制备化合物41。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:11.43(br s,1H)；7.33-7.26(m,2H)；7.04(t,J＝7.9Hz,1H)；5.66(t,J＝7.9Hz,1H)；4.72(br d,J＝5.7Hz,2H)；3.87(d,J＝13.2Hz,1H)；3.63(d,J＝12.7Hz,1H)；3.20(s,3H)；2.82(dd,J＝13.2,7.9Hz,1H)；2.35(s,1H)；2.07(dd,J＝13.2,7.9Hz,1H)；1.86-1.67(m,2H)；0.85(t,J＝7.5Hz,3H).C₂₁H₂₁ClFN₃O₅的LCMS分析计算值：449.1；实测值：450.2(M+1)⁺。

基本上按照实施例15的步骤H中用于制备化合物42的方法，由化合物Int-15g的异构体C制备化合物43。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:11.42(br s,1H)；7.33-7.27(m,2H)；7.08-7.00(m,1H)；5.66(t,J＝7.9Hz,1H)；4.72(br d,J＝5.7Hz,2H)；3.87(d,J＝13.2Hz,1H)；3.63(d,J＝13.2Hz,1H)；3.20(s,3H)；2.82(dd,J＝13.2,7.9Hz,1H)；2.07(dd,J＝13.2,8.3Hz,1H)；1.86-1.68(m,2H)；0.85(t,J＝7.5Hz,3H).C₂₁H₂₁ClFN₃O₅的LCMS分析计算值：449.1；实测值：450.2(M+1)⁺。

基本上按照实施例15的步骤H中用于制备化合物42的方法，由化合物Int-15g的异构体D制备化合物44。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:10.99(br s,1H)；7.34-7.27(m,2H)；7.04(t,J＝7.9Hz,1H)；5.65(d,J＝7.9Hz,1H)；4.78-4.58(m,2H)；3.76-3.64(m,2H)；3.20(s,3H)；2.45(d,J＝14.0Hz,1H)；2.18(dd,J＝14.0,8.3Hz,1H)；2.06-1.90(m,2H),1.27(br d,J＝7.0Hz,1H),1.01(t,J＝7.5Hz,3H).C₂₁H₂₁ClFN₃O₅的LCMS分析计算值：449.1；实测值：450.2(M+1)⁺。

实施例16

化合物45-48的制备

从Int-15f开始，使用与实施例15中步骤G和步骤H所述基本相同的方法，不同之处在于用2,4,6-三氟苄胺代替，通过手性制备型SFC(DAICEL CHIRALPAK AS-H纯化，5μm,30×250mm柱，65mL/min，35％(EtOH+0.1％NH₃H₂O)/CO₂，220nm)纯化，得到异构体A和异构体B、异构体C和异构体D的混合物，通过手性制备型SFC(DAICEL CHIRALPAK AD，10μm,30×250mm柱，70mL/min，40％(EtOH+0.1％NH₃H₂O)/CO₂，220nm)进一步纯化异构体A和异构体B的混合物，得到异构体A和异构体B，然后在步骤G中通过手性制备型SFC(DAICEL CHIRALPAK AD，10μm,30×250mm柱，50mL/min，50％(MeOH+0.1％NH₃H₂O)/CO₂，220nm)进一步纯化异构体A，制备得以下化合物：

实施例17

化合物49-52的制备

从Int-15f开始，使用与实施例15中步骤G和步骤H中所述基本相同的方法，不同之处在于用2,3,6-三氟苄胺代替，通过手性制备型SFC(DAICEL CHIRALPAK AD，10μm,30×250mm柱，50mL/min，35％(EtOH+0.1％NH₃H₂O)/CO₂，220nm)纯化，得到异构体A、异构体B以及异构体C和异构体D的混合物，并在步骤G中进一步通过手性制备型SFC(DAICEL CHIRALPAKAD，10μm,30×250mm柱，50mL/min，25％(EtOH+0.1％NH₃H₂O)/CO₂，220nm)纯化异构体C和D的混合物，得到异构体C和异构体D，制备得以下化合物：

实施例18

化合物53-56的制备

从Int-15f开始，使用与实施例15中步骤G和步骤H中所述基本相同的方法，不同之处在于用(3-氯-2,6-二氟苯基)甲胺代替，通过手性制备型SFC(DAICEL CHIRALPAK AD,10μm,30×250mm柱,70mL/min,40％(EtOH+0.1％NH₃H₂O)/CO₂,220nm)纯化，得到异构体A，异构体B和异构体C的混合物，以及异构体D，在步骤G中进一步通过手性制备型SFC(DAICELCHIRALPAK OJ-H,5μm,30×250mm柱,50mL/min,30％(EtOH+0.1％NH₃H₂O)/CO₂,220nm)纯化异构体B和C的混合物，得到异构体B和异构体C，进一步通过手性制备型SFC(DAICELCHIRALPAK OJ-H,5μm,30×250mm柱,50mL/min,30％(EtOH+0.1％NH₃H₂O)/CO₂,220nm)纯化异构体B，制备得以下化合物：

实施例19

化合物Int-19b的制备

步骤A——化合物Int-19a的合成

将TBDPSCl(9.0mL，35.0mmol)滴加到2-亚甲基丙烷-1,3-二醇(3g，34.1mmol)和咪唑(4.70g，69.0mmol)在DCM(340mL)中的搅拌的混浊溶液中。将反应混合物在室温搅拌过夜。第二天早晨，将反应混合物减压浓缩

然后通过硅藻土垫过滤，再用另外的DCM/MeOH冲洗。减压蒸发滤液。所得油状物通过硅胶柱(220g)色谱法纯化，用0-20％EtOAC/己烷洗脱，得到化合物Int-19a。.¹H NMR(500MHz,CDCl₃):δ7.69(d,J＝7.4Hz,4H)；7.49–7.37(m,6H)；5.16(app.s,1H)；5.13(app.s,1H)；4.27(s,2H)；4.19(d,J＝6.2Hz,2H)；1.80(t,J＝6.1Hz,1H)；1.08(s,9H).

步骤B——化合物Int-19b的合成

将三苯基膦(3.87g，14.75mmol)和四溴化碳(5.12g，15.44mmol)加入到搅拌的Int-19a(3.8542g，11.80mmol)的DCM(118.0mL)溶液中。将反应混合物在室温搅拌1.5小时，然后减压浓缩至15-20mL。浓缩的反应混合物通过硅胶柱(120g)色谱法纯化，用0-10％DCM/己烷洗脱，得到化合物Int-19b。¹H NMR(500MHz,CDCl₃):δ7.69(d,J＝7.0Hz,4H)；7.49–7.37(m,6H)；5.32(app.s,1H)；5.30(app.s,1H)；4.31(s,2H)；4.04(s,2H)；1.08(s,9H).

实施例20

化合物57-60的制备

步骤A——化合物Int-20a的合成

将化合物Int-14c(503.2mg，1.519mmol)、碘化钠(762.5mg，5.09mmol)、化合物Int-19b(1.1612g，2.98mmol)、THF(6.0mL)和水(6.0mL)合并。将反应混合物在室温下剧烈搅拌10分钟，然后添加铟(392.5mg，3.42mmol)。16.5小时后，将反应混合物用EtOAc(75mL)稀释，然后通过硅藻土垫过滤，用另外的EtOAc(2×50mL)冲洗。将合并的滤液倒入250mL分液漏斗中，并使各层分离。有机层经MgSO₄干燥，过滤，并减压蒸发。所得泡沫通过硅胶柱(40g)色谱法纯化，用0-80％(25％EtOH/EtOAc)/己烷洗脱，得到化合物Int-20a。C₃₇H₄₃NO₇Si的LCMS分析计算值：641.28；实测值：642.42(M+1)⁺。

步骤B——化合物Int-20b的合成

将化合物Int-20a(886.0mg，1.380mmol)在DCM(14.0mL)中的搅拌溶液在冰浴中冷却至0℃。将N,N-二异丙基乙胺(1.2mL，6.87mmol)、MOMCl(0.52mL，6.85mmol)(逐滴加入)和DMAP(37.2mg，0.304mmol)加入到反应混合物中。50分钟后，将反应混合物从浴中移出并使其温热至室温。1.5天后，将反应混合物减压浓缩(剩余约6mL)，然后通过硅胶柱(40g)色谱法纯化，用0-20％(25％EtOH/EtOAc)/己烷洗脱，得到化合物Int-20b。C₃₉H₄₇NO₈Si的LCMS分析计算值：685.31；实测值：686.51(M+1)⁺。

步骤C——化合物Int-20c的合成

将1.0M TBAF的THF(1.7mL，1.700mmol)加入到化合物Int-20b(866.6mg，1.263mmol)的THF(11.0mL)搅拌溶液中。将反应混合物在室温搅拌。4.5小时后，将反应混合物在减压下蒸发。将所得产物通过硅胶柱(40g)色谱法纯化，用0-50％(25％EtOH/EtOAc)/己烷洗脱，得到化合物Int-20c。C₂₃H₂₉NO₈的LCMS分析计算值：447.19；实测值：448.23(M+1)⁺。

步骤D——化合物Int-20d的合成

将碘甲烷(0.21mL，3.36mmol)和氢化钠在油中的60％分散体(107.1mg，2.68mmol)依次添加至化合物Int-20c(498.1mg，1.113mmol)的THF(11.0mL)搅拌溶液中，该搅拌溶液已在冰浴中冷却至0℃。50分钟后，将反应混合物从冰浴中移出并使其升温至室温。再过20分钟后，将反应混合物在冰浴中冷却至0℃，然后用EtOAc(50mL)稀释。用另外的水将1.0MHCl(3mL，3mmol)稀释至50mL。将约10-15mL的该HCl溶液缓慢加入反应中。从冰浴中移出反应混合物，并立即在EtOAc(50mL)和剩余的稀HCl溶液之间分配。用EtOAc(2×50mL)萃取水层。合并有机层，经MgSO₄干燥，过滤，并减压蒸发。将得到的油状物溶解在MeOH(10.0mL)中，并逐滴加入在乙醚(2.0mL，4.00mmol)中的2.0M TMS-重氮甲烷。将反应混合物在室温搅拌2小时，然后减压蒸发。所得产物通过硅胶柱(40g)色谱法纯化，用0-30％(25％EtOH/EtOAc)/己烷洗脱，得到化合物Int-20d。C₂₄H₃₁NO₈的LCMS分析计算值：461.20；实测值：462.33(M+1)⁺。

步骤E——化合物Int-20e的合成

将4-甲基苯磺酸水合物(281.3mg，1.479mmol)添加至化合物Int-20d(502.8mg，1.089mmol)在MeOH(11.0mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在室温搅拌20小时。将碳酸氢钠(123.9mg，1.475mmol)和三乙胺(0.21mL，1.507mmol)加入到反应混合物中，将其在冰箱中放置整个周末。将反应混合物从冰箱中移出，使其升温至室温，过滤(0.45μm注射器式过滤器)，并用MeOH稀释，然后通过反相HPLC(Waters Sunfire C18 OBD，10μm,30×150mm柱)纯化，用0-60％(ACN/水)+0.05％TFA洗脱。合并产物级分并减压浓缩直至水开始蒸发。剩余的水溶液(～100mL)用DCM(4×50mL)萃取。合并有机层，经Na₂SO₄干燥，过滤，并减压蒸发，得到化合物Int-20e。C₁₆H₂₃NO₇的LCMS分析计算值：341.15；实测值：342.32(M+1)⁺。

步骤F——化合物Int-20f的合成

将双[铑(α,α,α',α'-四甲基-1,3-苯二丙酸)](21.6mg，0.028mmol)和O-(2,4-二硝基苯基)羟胺(290.7mg，1.460mmol)加入到化合物Int-20e(318.9mg，0.934mmol)在2,2,2-三氟乙醇(9.5mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在室温搅拌3小时。将另外的双[铑(α,α,α',α'-四甲基-1,3-苯二丙酸)](25.8mg，0.034mmol)和O-(2,4-二硝基苯基)羟胺(286.5mg，1.44mmol)加入到反应混合物中。再过21小时后，将反应混合物在减压下蒸发。将所得残余物通过硅胶柱(40g)色谱法纯化，用0-100％(90∶9∶1DCM/MeOH/NH₄OH)/DCM洗脱，得到化合物Int-20f。C₁₅H₂₀N₂O₆的LCMS分析计算值：324.13；实测值：325.21(M+1)⁺。

步骤G——化合物Int-20g的合成

将碳酸铯(615.0mg，1.888mmol)和碘乙烷(65μl，0.804mmol)加入到化合物Int-20f(199.5mg，0.615mmol)在DMSO(6.0mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在室温下搅拌3.5小时，然后过滤(0.45μm注射器式过滤器)，并通过反相HPLC(Waters Sunfire C18 OBD，10μm,30×150mm柱)纯化，用0-70％(ACN/水)+0.05％TFA洗脱。合并产物级分，在减压下部分浓缩，冷冻，并冻干，得到化合物Int-20g。C₁₇H₂₄N₂O₆的LCMS分析计算值：352.16；实测值：353.28(M+1)⁺。

步骤H——化合物Int-20h的合成

将NIS(237.5mg，1.056mmol)和m-CPBA(217.1mg，0.969mmol)加入到化合物Int-20g(199.7mg，0.567mmol)在MeOH(5.6mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物加热至70℃持续2小时，然后冷却至室温，并减压蒸发。所得固体通过硅胶柱(24g)色谱法纯化，用0-4％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-20h。C₁₇H₂₃IN₂O₆的LCMS分析计算值：478.06；实测值：479.09(M+1)⁺。

步骤I——化合物Int-20i的合成

将化合物Int-20h(271mg，0.567mmol)溶于1.25M HCl的MeOH溶液(6.0mL，7.50mmol)中，并加热至40℃。18.5小时后，将反应混合物冷却至室温，并减压蒸发。将所得固体通过硅胶柱(24g)色谱法纯化，用0-10％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-20i。C₁₅H₁₉IN₂O₅的LCMS分析计算值：434.03；实测值：435.05(M+1)⁺。

步骤J——化合物Int-20j的合成

将双(2-二苯基膦基苯基)醚(8.9mg，0.017mmol)、N,N-二异丙基乙胺(62μl，0.355mmol)、2,4-二氟苄胺(25μl，0.210mmol)和Pd(OAc)₂(9.5mg，0.042mmol)加入到化合物Int-20i(30.1mg，0.069mmol)在DMSO(1.0mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物脱气(3x)并置于氮气下，然后脱气并置于一氧化碳气球下。将反应混合物在100℃下搅拌16小时，然后冷却至室温，过滤(0.45μm注射器式过滤器)，用MeOH稀释，并通过反相HPLC(WatersSunfire C18 OBD，C18 OBD,10μm,30×150mm柱)纯化，用10-90％(ACN/水)+0.05％TFA洗脱。合并产物级分，冷冻并冻干，将其通过手性制备型SFC(ChiralPak AD-H,21×250mm柱,70g/min,120巴,25％IPA/CO₂,40℃)进一步纯化，得到化合物Int-20j的异构体A(第一洗脱组分)、化合物Int-20j的异构体B(第二洗脱组分)、化合物Int-20j的异构体C(第三洗脱组分)和化合物Int-20j的异构体D(第四洗脱组分)。异构体A、异构体C和异构体D各自使用上述手性制备型SFC条件进一步纯化以提供足够的纯度。C₂₃H₂₅F₂N₃O₆的LCMS分析计算值：477.17；实测值：478.17(M+1)⁺。

步骤K——化合物57、化合物58、化合物59和化合物60的合成

将化合物Int-20j的异构体A(11.0mg，0.023mmol)、溴化镁(45.9mg，0.249mmol)和乙腈(0.5mL)合并并在室温下搅拌。2小时后，将反应混合物用MeOH稀释，过滤(0.45μm注射器式过滤器)，然后通过反相HPLC(Waters Sunfire C18 OBD,10μm,30×150mm柱)纯化，并用10-90％(ACN/水)+0.05％TFA洗脱。合并产物级分并在减压下浓缩直至除去大部分ACN。剩余的水溶液用

萃取。有机层依次用Na₂SO₄干燥，过滤，合并，并减压蒸发。将所得残余物溶于

用水

稀释，冷冻并冻干，得到化合物57。¹H NMR(500MHz,CD₃OD):δ7.50–7.43(m,1H)；7.02–6.92(m,2H)；5.66(t,J＝7.8Hz,1H)；4.69–4.61(m,2H)；3.96(d,J＝13.4Hz,1H)；3.89(d,J＝13.3Hz,1H)；3.71(dq,J＝14.4,7.1Hz,1H)；3.61–3.49(m,3H)；3.26(s,3H)；2.93(dd,J＝12.8,7.8Hz,1H)；2.07(dd,J＝12.8,7.9Hz,1H)；1.24(t,J＝7.2Hz,3H)。C₂₂H₂₃F₂N₃O₆的LCMS分析计算值：463.16；实测值：464.35(M+1)⁺。

基本上按照实施例20的步骤K中用于制备化合物57的方法，由化合物Int-20j的异构体B制备化合物58。¹H NMR(500MHz,CD₃OD):δ7.50–7.43(m,1H)；7.01–6.91(m,2H)；5.74(d,J＝7.5Hz,1H)；4.69–4.60(m,2H)；4.00(d,J＝13.0Hz,1H)；3.84–3.72(m,2H)；3.69(d,J＝9.1Hz,1H)；3.64(d,J＝9.1Hz,1H)；3.44(dq,J＝14.1,7.1Hz,1H)；3.38(s,3H)；2.49(d,J＝13.9Hz,1H)；2.32(dd,J＝13.5,7.7Hz,1H)；1.25(t,J＝7.2Hz,3H).C₂₂H₂₃F₂N₃O₆的LCMS分析计算值：463.16；实测值：464.13(M+1)⁺。

基本上按照实施例20的步骤K中用于制备化合物57的方法，由化合物Int-20j的异构体C制备化合物59。¹H NMR(500MHz,CD₃OD):δ7.50–7.43(m,1H)；7.02–6.92(m,2H)；5.66(t,J＝7.8Hz,1H)；4.69–4.61(m,2H)；3.96(d,J＝13.4Hz,1H)；3.89(d,J＝13.3Hz,1H)；3.71(dq,J＝14.3,7.2Hz,1H)；3.61–3.49(m,3H)；3.26(s,3H)；2.93(dd,J＝12.8,7.7Hz,1H)；2.07(dd,J＝12.8,7.8Hz,1H)；1.24(t,J＝7.2Hz,3H).C₂₂H₂₃F₂N₃O₆的LCMS分析计算值：463.16；实测值：464.18(M+1)⁺。

基本上按照实施例20的步骤K中用于制备化合物57的方法，由化合物Int-20j的异构体D制备化合物60。¹H NMR(500MHz,CD₃OD):δ7.49–7.42(m,1H)；7.01–6.91(m,2H)；5.74(d,J＝7.5Hz,1H)；4.68–4.60(m,2H)；4.00(d,J＝13.0Hz,1H)；3.84–3.72(m,2H)；3.69(d,J＝9.0Hz,1H)；3.64(d,J＝9.1Hz,1H)；3.44(dq,J＝14.3,7.3Hz,1H)；3.38(s,3H)；2.48(d,J＝13.9Hz,1H)；2.32(dd,J＝13.5,7.8Hz,1H)；1.25(t,J＝7.2Hz,3H).C₂₂H₂₃F₂N₃O₆的LCMS分析计算值：463.16；实测值：464.19(M+1)⁺。

实施例21

化合物61-64的制备

从Int-20i开始，使用与实施例20中步骤J和步骤K中所述基本相同的方法，不同之处在于用2,4,6-三氟苄胺代替，通过手性制备型SFC(ChiralPak AS-H,21×250mm柱,50g/min,120巴,30％EtOH/CO₂,40℃)纯化，得到异构体A和异构体B的混合物，异构体C和异构体D，在步骤J中进一步通过手性制备SFC(ChiralPak OJ-H,21×250mm柱two times,50g/min,120巴,15％EtOH/CO₂,40℃)纯化异构体A和异构体B的混合物，得到异构体A和异构体B，并进一步通过手性制备SFC(ChiralPak OJ-H,21×250mm柱two times,50g/min,120巴,15％EtOH/CO₂,40℃)纯化异构体B，制备得以下化合物：

实施例22

化合物65-72的制备

步骤A——化合物Int-22a的合成

将化合物Int-14c(50mg，0.151mmol)和K₂CO₃(83mg，0.604mmol)在无水丙酮(5mL)中的混合物在70℃下搅拌。14小时后，将反应混合物过滤并将滤液蒸发，得到化合物Int-22a。该物质无需进一步纯化即可用于实施例22的步骤B。C₂₀H₂₃NO₇的LCMS分析计算值：389.2；实测值：390.1(M+1)+。

步骤B——化合物Int-22b的合成

在0℃在N₂下向化合物Int-22a(60mg，0.154mmol)、DMAP(9.41mg，0.077mmol)和2,6-二甲基吡啶(165mg，1.541mmol)在DCM(5mL)中的溶液中滴加叔丁基二甲基硅烷基三氟甲磺酸酯(244mg，0.925mmol)。将混合物在25℃搅拌1小时，然后用水(10mL)淬灭。分离的水相用DCM(2×10m)萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过快速硅胶色谱法(4g柱)纯化，用0-25％EtOAC/石油醚洗脱，得到化合物Int-22b。C₂₆H₃₇NO₇Si的LCMS分析计算值：503.2；实测值：504.4(M+1)⁺。

步骤C——化合物Int-22c的合成

在-78℃在N₂下向化合物Int-22b(6.2g，12.31mmol)和5-(乙基磺酰基)-1-苯基-1H-四唑(5.87g，24.62mmol)的THF(120mL)溶液中逐滴加入1M LiHMDS在THF中的溶液(49.2mL，49.2mmol)。然后将反应混合物在-78℃下搅拌1小时，然后在-78℃下用NH₄Cl水溶液(200mL)淬灭。用EtOAc(3×100mL)萃取水层。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过快速硅胶色谱法(120g柱)纯化，用0-8％EtOA_C/石油醚洗脱，得到化合物Int-22c。C₂₈H₄₁NO₆Si的LCMS分析计算值：515.3；实测值：516.3(M+1)⁺。

步骤D——化合物Int-22d的合成

将化合物Int-22c(2.45g，4.75mmol)在DCM(50mL)和TFA(5mL)中的混合物在25℃下搅拌。1小时后，蒸发溶剂，并将残余物通过快速硅胶色谱法(40g柱)纯化，用0-50％EtOA_C/石油醚洗脱，得到化合物Int-22d。C₂₀H₃₃NO₅Si的LCMS分析计算值：395.2；实测值：396.2(M+1)⁺。

步骤E——化合物Int-22e的合成

向化合物Int-22d(1.7g，4.30mmol)和O-(2,4-二硝基苯基)羟胺(2.57g，12.89mmol)在CF₃CH₂OH(20mL)中的混合物中添加双[铑(α,α,α',α'-四甲基-1,3-苯二丙酸)](0.164g，0.215mmol)。将混合物在60℃在N₂下搅拌。36小时后，蒸发溶剂，并将残余物通过快速硅胶色谱法(40g柱)纯化，用0-5％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-22e。C₁₉H₃₀N₂O₄Si的LCMS分析计算值：378.2；实测值：379.1(M+1)⁺。

步骤F——化合物Int-22f的合成

在0℃在N₂下向化合物Int-22e(1g，2.64mmol)和MeI(0.496mL，7.93mmol)在DMF(10mL)中的混合物中添加NaH(0.211g，5.28mmol)。将混合物在0℃搅拌1小时，然后用NH₄Cl水溶液(2mL)淬灭。混合物通过制备型反相HPLC(Phenomenex Synergi C18,4μm,30×150mm柱)纯化，用34-44％ACN/(水+0.1％TFA)洗脱，得到化合物Int-22f的异构体A、异构体B、异构体C和异构体D的混合物(第一洗脱组分)，化合物Int-22f的异构体E和异构体F的混合物(第二洗脱组分)，以及化合物Int-22f的异构体G和异构体H的混合物(第三洗脱组分)。C₂₀H₃₂N₂O₄Si的LCMS分析计算值：392.2；实测值：393.2(M+1)⁺。

步骤G——化合物Int-22g的合成

将化合物Int-22f的异构体A、异构体B、异构体C和异构体D的混合物(270mg，0.688mmol)和在THF中的1M TBAF(0.344mL，0.344mmol)的THF(5mL)溶液在25℃下搅拌。14小时后，将溶剂蒸发至干，残余物通过快速硅胶色谱(12g柱)纯化，用0-12％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-22g的异构体A、异构体B、异构体C和异构体D的混合物。C₁₄H₁₈N₂O₄的LCMS分析计算值：278.1；实测值：279.1(M+1)⁺。

向化合物Int-22f的异构体E和异构体F(120mg，0.306mmol)在THF(5mL)中的溶液中添加1M TBAF在THF中的溶液(0.611mL，0.611mmol)。将反应在25℃下搅拌1小时。将溶剂蒸发至干并将残余物通过快速硅胶色谱法(4g柱)纯化，用0-10％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-22g的异构体E和异构体F的混合物。C₁₄H₁₈N₂O₄的LCMS分析计算值：278.1；实测值：279.1(M+1)⁺。

将化合物Int-22f的异构体G和异构体H的混合物(400mg，1.019mmol)和THF中的1MTBAF(3.06mL，3.06mmol)在THF(5mL)中在25℃下搅拌。14小时后，将溶剂蒸发至干并将残余物通过快速硅胶色谱(12g柱)纯化，用0-10％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-22g的异构体G和异构体H的混合物。C₁₄H₁₈N₂O₄的LCMS分析计算值：278.1；实测值：279.1(M+1)⁺。

步骤H——化合物Int-22h的合成

将化合物Int-22g的异构体A、异构体B、异构体C和异构体D的混合物(0.25g，0.898mmol)、m-CPBA(0.620g，3.59mmol)和甲醇(10mL)中的NIS(0.808g，3.59mmol)在90℃下搅拌。1小时后，用2g Na₂S₂O₅和0.5mL水淬灭反应。将混合物在25℃下搅拌10分钟，然后蒸发溶剂，并将残余物通过快速硅胶色谱法(12g柱)纯化，用0-10％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-22h的异构体A、异构体B、异构体C和异构体D的混合物。C₁₄H₁₇IN₂O₄的LCMS分析计算值：404.0；实测值：405.0(M+1)⁺。

将化合物Int-22g的异构体E和异构体F的混合物(70mg，0.252mmol)、m-CPBA(130mg，0.755mmol)和MeOH(10mL)中的NIS(170mg，0.755mmol)在90℃下搅拌。1小时后，用300mg Na₂S₂O₅和1mL水淬灭反应。将混合物在25℃下搅拌10分钟，然后蒸发溶剂，并将残余物通过快速硅胶色谱法(4g柱)纯化，用0-12％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-22h的异构体E和异构体F的混合物。C₁₄H₁₇IN₂O₄的LCMS分析计算值：404.0；实测值：405.1(M+1)⁺。

将化合物Int-22g的异构体G和异构体H的混合物(160mg，0.575mmol)、m-CPBA(298mg，1.725mmol)和MeOH(10mL)中的NIS(388mg，1.725mmol)在90℃下搅拌。2小时后，用700mg Na₂S₂O₅和1mL水淬灭反应。将混合物在25℃搅拌10分钟，然后蒸发溶剂，残余物通过快速硅胶(12g柱)色谱法纯化，用0-10％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-22h的异构体G和异构体H的混合物。C₁₄H₁₇IN₂O₄的LCMS分析计算值：404.0；实测值：405.1(M+1)⁺。

步骤I——化合物Int-22i的合成

向化合物Int-22h的异构体A、异构体B、异构体C和异构体D的混合物(370mg，0.915mmol)的DMSO(3mL)溶液中添加(2,4-二氟苯基)甲胺(393mg，2.75mmol)、DIEA(0.959mL，5.49mmol)和Pd(Ph₃P)₄(529mg，0.458mmol)。将混合物脱气并用CO吹扫三次。将所得混合物在90℃下在CO(15psi)下搅拌。3小时后，将混合物过滤并通过制备型反相HPLC(Boston Green ODS,5μm,30×150mm柱)纯化，用29-49％ACN/(水+0.1％TFA)洗脱，通过制备型SFC(DAICEL CHIRALPAK AD-H,5μm,30×250mm柱,50mL/min,35％(IPA+0.1％NH₃H₂O)/CO₂)进一步纯化，得到化合物Int-22i的异构体A(第一洗脱组分)，化合物Int-22i的异构体B(第二洗脱组分)，化合物Int-22i的异构体C(第三洗脱组分)和化合物Int-22i的异构体D(第四洗脱组分)。C₂₂H₂₃F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：447.2；实测值：448.2(M+1)⁺。

向化合物Int-22h的异构体E和异构体F的混合物(110mg，0.272mmol)的DMSO(10mL)溶液中加入(2,4-二氟苯基)甲胺(117mg，0.816mmol)、DIEA(0.285mL，1.633mmol)和Pd(Ph₃P)₄(157mg，0.136mmol)。将混合物脱气并用CO吹扫三次。将所得混合物在90℃下在CO(15psi)下搅拌。2小时后，将混合物过滤并通过制备型反相HPLC(Boston Green ODS,5μm,30×150mm柱)纯化，用29-49％ACN/(水+0.1％TFA)洗脱，通过制备型SFC(DAICELCHIRALPAK AD,10μm,50×250mm柱,70mL/min,40％(IPA+0.1％NH₃H₂O)/CO₂)进一步纯化，得到化合物Int-22i的异构体E(第一洗脱组分)和化合物Int-22i的异构体F(第二洗脱组分)。C₂₂H₂₃F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：447.2；实测值：448.2(M+1)⁺。

向化合物Int-22h的异构体G和异构体H的混合物(320mg，0.792mmol)在DMSO(10mL)中的溶液中加入(2,4-二氟苯基)甲胺(340mg，2.375mmol)、DIEA(0.830mL，4.75mmol)和Pd(Ph₃P)₄(457mg，0.396mmol)。将混合物脱气并用CO吹扫三次。将所得混合物在90℃下在CO(15psi)下搅拌。3小时后，将混合物过滤并通过制备型反相HPLC(BostonGreen ODS,5μm,30×150mm柱)纯化，用29-49％ACN/(水+0.1％TFA)洗脱，通过制备型SFC(DAICEL CHIRALPAK AD,10μm,50×250mm柱,70mL/min,50％(IPA+0.1％NH₃H₂O)/CO₂)进一步纯化，得到化合物Int-22i的异构体G(第一洗脱组分)和化合物Int-22i的异构体H(第二洗脱组分)。C₂₂H₂₃F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：447.2；实测值：448.2(M+1)⁺。

步骤J——化合物65、化合物66、化合物67、化合物68、化合物69、化合物70、化合物 71和化合物72的合成

将化合物Int-22i的异构体A(7mg，0.016mmol)和溴化镁(28.8mg，0.156mmol)在乙腈(3mL)中的混合物在25℃下搅拌。2小时后，加入MeOH(1mL)，混合物通过制备型HPLC(Boston Green ODS,5μm,30×150mm柱)纯化，用30-60％ACN/(水+0.1％TFA)洗脱，得到化合物65。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ:11.34(br s,1H)；7.60-7.25(m,1H)；7.06-6.75(m,2H)；5.67(t,J＝7.9Hz,1H)；4.72-4.53(m,2H)；3.91(q,J＝6.6Hz,1H)；3.23-3.11(m,3H)；2.67(dd,J＝13.0,7.8Hz,1H)；2.26(dd,J＝13.0,8.1Hz,1H)；1.59-1.37(m,3H)；1.26(d,J＝6.6Hz,3H).C₂₁H₂₁F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：433.1；实测值：434.2(M+1)⁺。

基本上按照实施例22的步骤J中用于制备化合物65的方法，由化合物Int-22i的异构体B制备化合物66。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ:7.52-7.34(m,1H)；7.02-6.83(m,2H)；5.64(t,J＝8.1Hz,1H)；4.73-4.53(m,2H)；4.06(q,J＝7.0Hz,1H)；3.14(s,3H)；2.80(dd,J＝12.5,7.3Hz,1H)；2.13-1.98(m,1H)；1.45(d,J＝7.1Hz,3H)；1.28(s,3H).C₂₁H₂₁F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：433.1；实测值：434.2(M+1)⁺。

基本上按照实施例22的步骤J中用于制备化合物65的方法，由化合物Int-22i的异构体C制备化合物67。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ:11.34(br s,1H)；7.53-7.31(m,1H)；7.06-6.78(m,2H)；5.67(t,J＝7.9Hz,1H)；4.72-4.53(m,2H)；3.96-3.78(m,1H)；3.23-3.12(m,3H)；2.67(dd,J＝13.0,7.8Hz,1H)；2.32-2.19(m,1H)；1.51-1.41(m,3H)；1.26(br d,J＝6.6Hz,3H).C₂₁H₂₁F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：433.1；实测值：434.2(M+1)⁺。

基本上按照实施例22的步骤J中用于制备化合物65的方法，由化合物Int-22i的异构体D制备化合物68。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ:7.55-7.33(m,1H)；7.00-6.79(m,2H)；5.63(t,J＝8.1Hz,1H)；4.75-4.45(m,2H)；4.07(q,J＝6.8Hz,1H)；3.13(s,3H)；2.79(dd,J＝12.5,7.6Hz,1H)；2.06(br dd,J＝12.1,8.9Hz,1H)；1.44(d,J＝6.8Hz,3H)；1.27(s,3H).C₂₁H₂₁F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：433.1；实测值：434.2(M+1)⁺。

基本上按照实施例22的步骤J中用于制备化合物65的方法，由化合物Int-22i的异构体E制备化合物69。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ:10.90(br s,1H)；7.53-7.28(m,1H)；7.03-6.75(m,2H)；5.75(d,J＝7.8Hz,1H)；4.63(s,2H)；3.92(m,1H)；3.18(s,3H)；2.61(dd,J＝13.8,7.5Hz,1H)；2.16(d,J＝14.2Hz,1H)；1.70(s,3H)；1.17(d,J＝6.6Hz,3H).C₂₁H₂₁F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：433.1；实测值：434.2(M+1)⁺。

基本上按照实施例22的步骤J中用于制备化合物65的方法，由化合物Int-22i的异构体F制备化合物70。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ:10.90(br s,1H)；7.57-7.31(m,1H)；7.06-6.78(m,2H)；5.75(d,J＝7.8Hz,1H)；4.62(s,2H)；3.92(q,J＝6.6Hz,1H)；3.18(s,3H)；2.61(dd,J＝14.1,7.7Hz,1H)；2.16(d,J＝13.9Hz,1H)；1.70(s,3H)；1.17(d,J＝6.6Hz,3H).C₂₁H₂₁F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：433.1；实测值：434.2(M+1)⁺。

基本上按照实施例22的步骤J中用于制备化合物65的方法，由化合物Int-22i的异构体G制备化合物71。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ:7.50-7.34(m,1H)；7.04-6.83(m,2H)；5.66(d,J＝7.3Hz,1H)；4.68-4.54(m,2H)；3.96(m,1H)；3.13(s,3H)；2.40-2.24(m,2H)；1.48(s,3H)；1.45(d,J＝6.8Hz,3H).C₂₁H₂₁F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：433.1；实测值：434.2(M+1)⁺。

基本上按照实施例22的步骤J中用于制备化合物65的方法，由化合物Int-22i的异构体H制备化合物72。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ:7.52-7.36(m,1H)；7.03-6.82(m,2H)；5.66(d,J＝7.1Hz,1H)；4.71-4.49(m,2H)；3.96(q,J＝6.8Hz,1H)；3.13(s,3H)；2.46-2.18(m,2H)；1.48(s,3H)；1.45(d,J＝6.8Hz,3H).C₂₁H₂₁F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：433.1；实测值：434.2(M+1)⁺。

实施例23

化合物Int-23b的制备

步骤A——化合物Int-23a的合成

在N₂下在45分钟内向0℃下的3M甲基溴化镁在Et₂O(71.1mL，213mmol)中的搅拌溶液中滴加甲基丙烯醛(13.6g，194mmol)在Et₂O(130mL)中的溶液。加完后，将溶液在0℃下搅拌30分钟，然后在0℃下倒入200mL 2N HCl中。分离各层，并将水层用Et₂O(2×200mL)萃取。合并的有机萃取物用NaHCO₃(150mL)和盐水(150mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并过滤。将滤液在室温下浓缩，留下残余物，将其减压蒸馏(水泵，

)，得到化合物Int-23a。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:4.93(s,1H)；4.77(s,1H)；4.22(q,J＝6.3Hz,1H)；1.73(s,3H)；1.26(d,J＝6.6Hz,3H).

步骤B——化合物Int-23b的合成

在氮气下剧烈搅拌下，向化合物Int-23a(3g，34.8mmol)在Et₂O(50mL)中的0℃溶液中滴加三溴化磷(1.314mL，13.93mmol)。在0℃下1小时后，用20mL水淬灭反应。分离各层，有机萃取物用NaHCO₃水溶液(30mL)和水(30mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，并过滤。在室温下浓缩滤液，得到化合物Int-23b，其无需进一步纯化即可用于实施例14的步骤C。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:5.06(s,1H)；4.86(t,J＝1.3Hz,1H)；4.72(q,J＝6.8Hz,1H)；1.88(s.3H)；1.62(d,J＝6.8Hz,3H).

实施例24

化合物73-80的制备

步骤A——化合物Int-24a的合成

将化合物Int-14c(1g，3.02mmol)、碘化钠(0.905g，6.04mmol)和铟(1.733g，15.09mmol)在DMF(15mL)中的混合物在25℃搅拌10分钟，然后添加Int-23b(1.349g，9.05mmol)。将混合物在25℃搅拌14小时，然后用EtOAc(50mL)稀释。过滤后，将有机相用水(2×20mL)和盐水(20mL)洗涤，然后用Na₂SO₄干燥。过滤后，真空除去有机溶剂，残余物通过快速硅胶色谱法(20g柱)纯化，用0-35％EtOAC/石油醚洗脱，得到化合物Int-24a。C₂₂H₂₇NO₆的计算值：401.2；实测值：402.2(M+1)⁺。

步骤B——化合物Int-24b的合成

向化合物Int-24a(800mg，1.993mmol)、DMAP(122mg，0.996mmol)和2,6-二甲基吡啶(2135mg，19.93mmol)在DCM(10mL)中的0℃溶液中滴加叔丁基二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(3161mg，11.96mmol)。将混合物在25℃搅拌1小时，然后用水(20mL)淬灭。分离的水相用DCM(2×20mL)萃取，合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩至干。所得残余物通过快速硅胶色谱法(40g柱)纯化，用0-25％EtOAC/石油醚洗脱，得到化合物Int-24b。C₂₈H₄₁NO₆Si的LCMS分析计算值：515.3；实测值：516.3(M+1)⁺。

步骤C——化合物Int-24c的合成

将化合物Int-24b(750mg，1.454mmol)的DCM(10mL)和TFA(1mL)的混合物在25℃下搅拌。2小时后，将混合物真空浓缩，残余物通过快速硅胶色谱法(12g柱)纯化，用0-50％EtOAC/石油醚洗脱，得到化合物Int-24c。C₂₀H₃₃NO₅Si的LCMS分析计算值：395.2；实测值：396.2(M+1)⁺。

步骤D——化合物Int-24d的合成

向化合物Int-24c(640mg，1.618mmol)和O-(2,4-二硝基苯基)羟胺(966mg，4.85mmol)在CF₃CH₂OH(10mL)中的混合物中加入双[铑(α,α,α',α'-四甲基-1,3-苯二丙酸)](24.67mg，0.032mmol)。将混合物在60℃在N₂下搅拌。36小时后，蒸发溶剂，并将残余物通过快速硅胶色谱法(24g柱)纯化，用0-3％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-24d。C₁₉H₃₀N₂O₄Si的LCMS分析计算值：378.2；实测值：379.2(M+1)⁺。

步骤E——化合物Int-24e的合成

在N₂下向化合物Int-24d(340mg，0.898mmol)和MeI(0.168mL，2.69mmol)在DMF(5mL)中的0℃混合物中添加NaH(71.8mg，1.796mmol)。将混合物在0℃下搅拌1小时，然后用NH₄Cl水溶液(20mL)淬灭。用EtOAc(3×20mL)萃取水层。合并的有机层用盐水(3×10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并蒸发至干。将所得残余物通过快速硅胶色谱法(4g柱)纯化，用0-8％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-24e。C₂₀H₃₂N₂O₄Si的LCMS分析计算值：392.2；实测值：393.2(M+1)⁺。

步骤F——化合物Int-24f的合成

将化合物Int-24e(270mg，0.688mmol)和THF(1.376mL，1.376mmol)中的1M TBAF在THF(5mL)中的混合物在25℃下搅拌。1小时后，将溶剂蒸发至干，残留物通过快速硅胶色谱(12g柱)纯化，用0-15％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-24f。C₁₄H₁₈N₂O₄的LCMS分析计算值：278.1；实测值：279.1(M+1)⁺。

步骤G——化合物Int-24g的合成

将化合物Int-24f(210mg，0.755mmol)、m-CPBA(521mg，3.02mmol)和NIS(679mg，3.02mmol)在MeOH(5mL)中的混合物在90℃搅拌。1小时后，反应用1g Na₂S₂O₅和5mL水淬灭。将混合物在25℃下搅拌10分钟，然后蒸发溶剂，并将残余物通过快速硅胶色谱法(20g柱)纯化，用0-10％MeOH/DCM洗脱，得到化合物Int-24g。C₁₄H₁₇IN₂O₄的LCMS分析计算值：404.0；实测值：405.0(M+1)⁺。

步骤H——化合物Int-24h的合成

向化合物Int-24g(580mg，1.435mmol)在DMSO(10mL)中的溶液中加入(2,4-二氟苯基)甲胺(616mg，4.30mmol)、DIEA(1.504mL，8.61mmol)和Pd(Ph₃P)₄(829mg，0.717mmol)。将混合物脱气并用CO吹扫三次。将所得混合物在90℃下在CO(15psi)下搅拌。6小时后，将反应混合物用EtOAc(30mL)稀释，并用水(2×10mL)和盐水(1×10mL)洗涤。有机层经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱法(12g柱)纯化，用50-100％EtOAc/石油醚洗脱，得到粗产物，将其通过制备型反相HPLC(Phenomenex Synergi C18,4μm,30×150mm柱)进一步纯化，用26-41％ACN/(水+0.1％TFA)洗脱，得到化合物Int-24h的异构体A和异构体B的混合物(第一洗脱组分)和化合物Int-24h的异构体C、异构体D、异构体E、异构体F、异构体G和异构体H的混合物(第二洗脱组分)。

化合物Int-24h的异构体A和异构体B的混合物通过制备型SFC(Phenomenex-Cellulose-2,10μm,30×250mm柱,80mL/min,50％(EtOH+0.1％NH₃H₂O)/CO₂)进一步纯化，得到化合物Int-24h的异构体A(第一洗脱组分)和化合物Int-24h的异构体B(第二洗脱组分)。

化合物Int-24h的异构体C、异构体D、异构体E、异构体F、异构体G和异构体H的混合物通过制备型SFC(Phenomenex-Cellulose-2,5μm,30×250mm柱,50mL/min,40％(EtOH+0.1％NH₃H₂O)/CO₂)进一步纯化，得到化合物Int-24h的异构体C、异构体D和异构体E的混合物(第一洗脱组分)，化合物Int-24h的异构体F(第二洗脱组分)，化合物Int-24h的异构体G(第三洗脱组分)和化合物Int-24h的异构体H(第四洗脱组分)。化合物Int-24h的异构体C、异构体D和异构体E的混合物通过制备型SFC(YMC CHIRAL Amylose-C,10μm,30×250mm柱,70mL/min,55％(EtOH+0.1％NH₃H₂O)/CO₂)进一步纯化，得到化合物Int-24h的异构体C(第一洗脱组分)，化合物Int-24h的异构体D(第二洗脱组分)和化合物Int-24h的异构体E(第三洗脱组分)。化合物Int-24h的异构体G通过制备型SFC(DAICEL CHIRALPAK IC,5μm,30×250mm柱,50mL/min,50％(EtOH+0.1％NH₃H₂O)/CO₂)进一步纯化，得到化合物Int-24h的异构体G。C₂₂H₂₃F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：447.2；实测值：448.1(M+1)⁺。

步骤I——化合物73、化合物74、化合物75、化合物76、化合物77、化合物78、化合物 79和化合物80的合成

将化合物Int-24h的异构体A(33mg，0.074mmol)和溴化镁(136mg，0.738mmol)在乙腈(3mL)中的混合物在25℃下搅拌。2小时后，加入MeOH(1mL)，混合物通过制备型反相HPLC(Boston Green ODS,5μm,30×150mm柱)纯化，用30-60％ACN/(水+0.1％TFA)洗脱。将产物级分与甲苯(2x)共蒸发，得到化合物73。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:10.95(br,1H)；7.46-7.30(m,1H)；6.93-6.68(m,2H)；5.26(s,1H)；4.74-4.52(m,2H)；3.91(d,J＝12.7Hz,1H)；3.30(d,J＝12.7Hz,1H)；3.22(s,3H)；2.64(q,J＝7.7Hz,1H)；1.70(s,3H)；1.11(d,J＝7.9Hz,3H).C₂₁H₂₁F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：433.1；实测值：434.2(M+1)⁺。

基本上按照实施例24的步骤I中用于制备化合物73的方法，由化合物Int-24h的异构体B制备化合物74。1H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:10.95(br,1H)；7.45-7.29(m,1H),6.88-6.68(m,2H)；5.26(s,1H)；4.73-4.48(m,2H)；3.91(d,J＝12.7Hz,1H)；3.30(d,J＝12.7Hz,1H)；3.22(s,3H)；2.64(q,J＝7.7Hz,1H)；1.70(s,3H)；1.11(d,J＝7.5Hz,3H).C₂₁H₂₁F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：433.1；实测值：434.2(M+1)⁺。

基本上按照实施例24的步骤I中用于制备化合物73的方法，由化合物Int-24h的异构体C制备化合物75。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:11.35(br,1H)；7.38-7.22(m,1H)；7.02(s,1H)；6.82-6.63(m,2H)；5.06(d,J＝9.0Hz,1H)；4.71-4.38(m,2H)；3.76-3.63(m,1H)；3.39(s,1H)；3.15(s,3H)；2.37-2.27(m,1H)；1.32-1.24(m,6H).C₂₁H₂₁F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：433.1；实测值：434.2(M+1)⁺。

基本上按照实施例24的步骤I中用于制备化合物73的方法，由化合物Int-24h的异构体D制备化合物76。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:11.62-11.34(m,2H)；7.48-7.39(m,1H)；7.37-7.24(m,1H)；6.80-6.64(m,2H)；5.61(d,J＝7.1Hz,1H)；4.64-4.47(m,2H)；3.92(d,J＝13.0Hz,1H)；3.22(d,J＝13.0Hz,1H)；3.16(s,3H)；2.88(m,1H)；1.40(s,3H)；1.02(d,J＝7.3Hz,3H).C₂₁H₂₁F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：433.1；实测值：434.1(M+1)⁺。

基本上按照实施例24的步骤I中用于制备化合物73的方法，由化合物Int-24h的异构体E制备化合物77。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:11.34(br,1H)；7.34-7.23(m,1H)；7.08-6.91(m,1H)；6.83-6.57(m,2H)；5.05(d,J＝8.8Hz,1H)；4.72-4.47(m,2H)；3.73(d,J＝13.0Hz,1H)；3.41(d,J＝12.7Hz,1H)；3.15(s,3H)；2.39-2.23(m,1H)；1.37-1.20(m,6H).C₂₁H₂₁F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：433.1；实测值：434.2(M+1)⁺。

基本上按照实施例24的步骤I中用于制备化合物73的方法，由化合物Int-24h的异构体F制备化合物78。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:11.36(br,1H)；10.80(br,1H)；7.34-7.23(m,1H)；6.87-6.65(m,2H)；5.38(d,J＝6.6Hz,1H)；4.90(br s,1H)；4.62-4.51(m,2H)；3.66(d,J＝12.5Hz,1H)；3.40(d,J＝12.7Hz,1H)；3.14(s,3H)；2.37-2.24(m,1H)；1.46(s,3H)；1.21(d,J＝7.1Hz,3H).C₂₁H₂₁F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：433.1；实测值：434.2(M+1)⁺。

基本上按照实施例24的步骤I中用于制备化合物73的方法，由化合物Int-24h的异构体G制备化合物79。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:11.47(br,2H)；7.47-7.40(m,1H)；7.34-7.26(m,1H)；6.82-6.67(m,2H)；5.61(d,J＝6.8Hz,1H)；4.66-4.48(m,2H)；3.92(d,J＝13.0Hz,1H)；3.22(d,J＝12.7Hz,1H)；3.16(s,3H)；2.92-2.84(m,1H)；1.40(s,3H)；1.03(br d,J＝3.4Hz,3H).C₂₁H₂₁F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：433.1；实测值：434.1(M+1)⁺。

基本上按照实施例24的步骤I中用于制备化合物73的方法，由化合物Int-24h的异构体H制备化合物80。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:11.35(br,1H)；10.79(br,1H)；7.39-7.26(m,1H)；6.86-6.65(m,2H)；5.38(d,J＝6.8Hz,1H)；4.90(br s,1H)；4.64-4.44(m,2H)；3.67(d,J＝12.7Hz,1H)；3.40(d,J＝12.7Hz,1H)；3.23-3.04(m,3H),2.34-2.22(m,1H)；1.46(s,3H)；1.20(d,J＝7.1Hz,3H).C₂₁H₂₁F₂N₃O₅的LCMS分析计算值：433.1；实测值：434.2(M+1)⁺。

在多轮HIV-1感染测定中评估抗病毒效力

在测量细胞培养物中HIV复制速率的测定中评估本文实施例的抗病毒活性，并根据以下程序进行测定。使用MT4-gag-GFP克隆D3(以下称为MT4-GFP)监测HIV复制，MT4-gag-GFP克隆D3是经修饰以包含GFP报告基因的MT-4细胞，其表达取决于HIV-1表达的蛋白tat和rev。用HIV-1有效感染MT4-GFP细胞导致感染后约24小时GFP表达。在补充有10％胎牛血清、100U/ml青霉素/链霉素和400μg/ml G418的RPMI 1640中，将MT4-GFP细胞维持在37℃/5％CO₂/90％相对湿度下，以维持报告基因。对于感染，将MT4-GFP细胞置于缺乏G418的相同培养基中，并在相同的孵育条件下以约0.01的感染复数感染HIV-1(H9/IIIB株)病毒过夜。然后洗涤细胞，并以2 x 10⁵细胞/mL(0％NHS条件)在RPMI 1640中重悬或以2 x 10⁵细胞/mL(100％NHS条件)在100％人血清(NHS)中重悬。通过使用ECHO声分发器将溶于DMSO的化合物分配到384孔聚D-赖氨酸涂覆的板的孔(0.2μl/孔)中来制备化合物板。每种化合物均以10点连续3倍稀释度进行测试(典型的最终浓度：对于0％NHS条件为1050nM-0.05nM，对于100％NHS条件为42μM-2.13nM)。对照包括无抑制剂(仅DMSO)和三种抗病毒剂(依非韦伦、茚地那韦、一种内部整合酶链转移抑制剂，每种终浓度均为4μM)的组合。将细胞(50μL/孔)添加至化合物板，并将感染的细胞维持在37℃/5％CO₂/90％相对湿度。

通过使用Acumen eX3扫描仪计数每个孔中的绿色细胞数量，在感染后约48h和72h的两个时间点对感染的细胞进行定量。在约24小时内，绿色细胞数量的增加给出了生殖比率R0，通常为5-15，并且已通过实验证明其处于对数期(数据未显示)。计算每个孔的R0抑制，并通过非线性4-参数曲线拟合确定IC₅₀。测定IC₅₀结果示于下表。

HIV感染的治疗或预防

三环杂环化合物可用于在基于细胞的系统中抑制HIV、抑制HIV整合酶、治疗HIV感染和/或降低HIV感染的可能性或症状的严重程度以及抑制HIV病毒复制和/或产生HIV病毒。例如，三环杂环化合物可用于治疗疑似过去暴露于HIV后的HIV感染，例如通过输血、体液交换、咬伤、意外的针刺或在手术或其他医疗程序中暴露于个体的血液中。

因此，在一个实施方案中，本发明提供了用于治疗个体中的HIV感染的方法，所述方法包括向个体施用有效量的至少一种三环杂环化合物或其药学上可接受的盐或前药。在一个具体的实施方案中，施用的量可有效治疗或预防个体中的HIV感染。在另一个具体的实施方案中，施用的量可有效抑制个体中的HIV病毒复制和/或病毒产生。在一个实施方案中，HIV感染已发展成艾滋病。

三环杂环化合物也可用于制备抗病毒化合物和执行抗病毒化合物的筛选测定。例如，三环杂环化合物可用于鉴定具有突变的抗性HIV细胞系，这是用于更强的抗病毒化合物的出色筛选工具。此外，三环杂环化合物可用于建立或确定其他抗病毒剂与HIV整合酶的结合位点。

本发明的组合物和组合可用于治疗患有与任何HIV基因型有关的感染的个体。

联合疗法

在另一个实施方案中，用于治疗或预防HIV感染的本发明方法可进一步包括给予非三环杂环化合物的一种或多种另外的治疗剂。

在一个实施方案中，另外的治疗剂是抗病毒剂。

在另一个实施方案中，另外的治疗剂是免疫调节剂，例如免疫抑制剂。

因此，在一个实施方案中，本发明提供了用于治疗个体中的病毒感染的方法，该方法包括向个体施用：(i)至少一种三环杂环化合物(其可以包括两种或更多种不同的三环杂环化合物)或其药学上可接受的盐或前药，以及(ii)除三环杂环化合物以外的至少一种另外的治疗剂，其中施用的量一起可有效治疗或预防病毒感染。

当向个体施用本发明的联合疗法时，可以以任何顺序(例如依次、并列、一起、同时等)施用组合中的治疗剂或包含治疗剂的一种或多种药物组合物。在这种联合疗法中各种活性物质的量可以是不同的量(不同的剂量)或相同的量(相同的剂量)。因此，出于非限制性说明的目的，三环杂环化合物和另外的治疗剂可以在单一剂量单位(例如胶囊、片剂等)中以固定量(剂量)存在。

在一个实施方案中，在另外的治疗剂发挥其预防或治疗作用的时间期间施用至少一种三环杂环化合物，反之亦然。

在另一个实施方案中，至少一种三环杂环化合物和另外的治疗剂以当这类药剂用作治疗病毒感染的单一疗法时常用的剂量给予。

在另一个实施方案中，至少一种三环杂环化合物和另外的治疗剂以低于当这类药剂用作治疗病毒感染的单一疗法时常用的剂量的剂量施用。

在又一个实施方案中，至少一种三环杂环化合物和另外的治疗剂协同作用，并且以比当将这类药剂用作治疗病毒感染的单一疗法时常用的剂量低的剂量施用。

在一个实施方案中，至少一种三环杂环化合物和另外的治疗剂存在于同一组合物中。在一个实施方案中，该组合物适合于口服施用。在另一个实施方案中，该组合物适合于静脉内施用。在另一个实施方案中，该组合物适合于皮下施用。在另一个实施方案中，该组合物适合于肠胃外施用。

可以使用本发明的联合治疗方法治疗或预防的病毒感染和病毒相关疾病包括但不限于以上所列的那些。

在一个实施方案中，病毒感染是HIV感染。

在另一个实施方案中，病毒感染是艾滋病。

至少一种三环杂环化合物和另外的治疗剂可以加和或协同作用。协同组合可以允许使用较低剂量的一种或多种药剂和/或较少频率地施用联合疗法的一种或多种药剂。一种或多种药剂的较低剂量或较低频率的施用可以降低治疗的毒性而不降低治疗的功效。

在一个实施方案中，至少一种三环杂环化合物和另外的治疗剂的施用可以抑制病毒感染对这些药剂的抗性。

如上所述，本发明还涉及式I化合物与一种或多种抗HIV剂的用途。“抗HIV剂”是直接或间接地抑制HIV逆转录酶或HIV复制或感染所需的另一种酶，治疗或预防HIV感染，和/或治疗、预防或延迟艾滋病的发作或发展中的任何试剂。可以理解的是，抗-HIV剂可有效治疗、预防或延迟HIV感染或艾滋病和/或由此引起或与其相关的疾病或病症的发作或发展。例如，无论是在暴露前和/或暴露后，本发明的化合物都可以与有效量的一种或多种选自HIV抗病毒剂、免疫调节剂、抗感染剂或可用于治疗HIV感染或艾滋病的疫苗有效地组合施用。与本发明化合物组合使用的合适的HIV抗病毒剂包括，例如，表A中所列的那些，如下所示：

表A

E1＝进入抑制剂；FI＝融合抑制剂；PI＝蛋白酶抑制剂；nRTI＝核苷逆转录酶抑制剂；II＝整合酶抑制剂；nnRTI＝非核苷逆转录酶抑制剂。表中列出的某些药物以盐形式使用；例如，硫酸阿巴卡韦，硫酸茚地那韦，硫酸阿扎那韦，甲磺酸奈非那韦。

在一个实施方案中，一种或多种抗HIV药物选自拉米夫定、阿巴卡韦、利托那韦、地瑞那韦、阿扎那韦、恩曲他滨、替诺福韦、利匹韦林和洛匹那韦。

在另一个实施方案中，式(I)化合物与拉米夫定组合使用。

在另一个实施方案中，式(I)化合物与阿扎那韦组合使用。

在另一个实施方案中，式(I)化合物与地瑞那韦组合使用。

在另一个实施方案中，式(I)化合物与利匹韦林组合使用。

在一个实施方案中，式(I)化合物与拉米夫定和阿巴卡韦组合使用。

在另一个实施方案中，式(I)化合物与地瑞那韦组合使用。

在另一个实施方案中，式(I)化合物与恩曲他滨和替诺福韦组合使用。

在另一个实施方案中，式(I)化合物与阿扎那韦组合使用。

在另一个实施方案中，式(I)化合物与利托那韦和洛匹那韦组合使用。

在一个实施方案中，式(I)化合物与阿巴卡韦和拉米夫定组合使用。

在另一个实施方案中，式(I)化合物与洛匹那韦和利托那韦组合使用。

在一个实施方案中，本发明提供了药物组合物，其包含(i)式(I)化合物或其药学上可接受的盐或前药；(ii)药学上可接受的载体；(iii)一种或多种选自拉米夫定、阿巴卡韦、利托那韦和洛匹那韦或其药学上可接受的盐或前药的另外的抗HIV剂，其中组分(i)和(iii)的存在量一起对有需要的个体中HIV感染的治疗或预防有效或对艾滋病的发作或进展地治疗、预防或延迟有效。

在另一个实施方案中，本发明提供了用于在有需要的个体中治疗或预防HIV感染或用于艾滋病的发作或进展的治疗、预防或延迟的方法，所述方法包括向个体施用(i)式(I)化合物或其药学上可接受的盐或前药，以及(ii)一种或多种选自拉米夫定、阿巴卡韦、利托那韦和洛匹那韦或其药学上可接受的盐或前药的抗HIV剂，其中组分(i)和(ii)的施用量一起对有需要的个体中HIV感染的治疗或预防有效或对艾滋病的发作或进展的治疗、预防或延迟有效。

应当理解，本发明化合物与抗-HIV剂的组合范围不限于表A中所列的HIV抗病毒剂，而原则上包括与任何可用于治疗或预防艾滋病的药物组合物的组合。通常将HIV抗病毒剂和其他药剂以它们在本领域中报道的常规剂量范围和方案以这些组合形式使用，包括例如在Physicians'Desk Reference,Thomson PDR,Thomson PDR,第57版(2003),第58版(2004),第59版(2005)等中描述的剂量。这些组合中本发明化合物的剂量范围与上述剂量范围相同。

本发明的组合疗法中用于治疗或预防HIV感染的其他药物的剂量和剂量方案可以由主治医生根据包装说明书中批准的剂量和剂量方案、个体的年龄、性别和总体健康状况以及病毒感染或相关疾病或病症的类型和严重程度确定。当组合施用时，可以同时(即，在同一组合物中或单独的组合物中一个接一个)或依次施用三环杂环化合物和其他药剂。当组合的组分按不同的给药时间表给予时，这尤其有用，例如，一种组分每天给药一次，另一种成分每六小时给药一次，或当药物组合物不同时，例如一种是片剂而一种是胶囊。因此，包含单独剂型的试剂盒是有利的。

组合物和施用

当施用至个体时，三环杂环化合物可以作为包含药学上可接受的载体或媒介物的组合物的组分来施用。本发明提供了药物组合物，其包含有效量的至少一种三环杂环化合物和药学上可接受的载体。在本发明的药物组合物和方法中，通常将活性成分与根据预期给药形式适当选择的合适载体材料混合给药，即口服片剂、胶囊剂(固体填充的、半固体填充的或液体填充的)、用于构成的粉末、口服凝胶剂、酏剂、可分散颗粒剂、糖浆剂、混悬剂等，并与常规制药实践一致。例如，对于以片剂或胶囊剂形式的口服给药，可以将活性药物成分与任何口服无毒的药学上可接受的惰性载体组合，例如乳糖、淀粉、蔗糖、纤维素、硬脂酸镁、磷酸二钙、硫酸钙、滑石粉、甘露醇、乙醇(液体形式)等。固体剂型包括散剂、片剂、可分散颗粒剂、胶囊剂、扁囊剂和栓剂。散剂和片剂可包含约0.5％至约95％的本发明组合物。片剂、散剂、扁囊剂和胶囊剂可用作适合口服的固体剂型。

此外，当希望或需要时，合适的粘合剂、润滑剂、崩解剂和着色剂也可掺入混合物中。合适的粘合剂包括淀粉、明胶、天然糖、玉米甜味剂、天然和合成树胶例如阿拉伯胶、海藻酸钠、羧甲基纤维素、聚乙二醇和蜡。在这些剂型中可以提及的润滑剂包括硼酸、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等。崩解剂包括淀粉、甲基纤维素、瓜尔豆胶等。适当时还可以包括甜味剂和调味剂以及防腐剂。

液体形式的制剂包括溶液剂、混悬剂和乳剂，并且可以包括用于肠胃外注射的水或水-丙二醇溶液。

液体形式制剂还可以包括用于鼻内给药的溶液。

还包括固体形式的制剂，打算在使用前不久将其转变成用于口服或肠胃外给药的液体形式的制剂。这样的液体形式包括溶液、悬浮液和乳液。

为了制备栓剂，首先将低熔点蜡(例如脂肪酸甘油酯或可可脂的混合物)熔融，并且通过搅拌将活性成分均匀分散在其中。然后将熔化的均质混合物倒入常规尺寸的模具中，使其冷却并固化。

另外，可以将本发明的组合物配制成持续释放形式，以提供任何一种或多种组分或活性成分的速率受控释放以优化治疗效果，即抗病毒活性等。持续释放的合适剂型包括含有各种崩解速率的层的分层片剂或浸渍有活性成分并制成有这种浸渍或包封的多孔聚合物基质的片剂或胶囊的控释聚合物基质。

在一个实施方案中，一种或多种三环杂环化合物经口服施用。

在另一个实施方案中，一种或多种三环杂环化合物经静脉内施用。

在一个实施方案中，包含至少一种三环杂环化合物的药物制剂为单位剂型。以这种形式，将制剂细分为含有有效量活性成分的单位剂量。

可以分别根据常规的混合、制粒或包衣方法制备组合物，并且在一个实施方案中，本发明的组合物可以包含按重量或体积计约0.1％至约99％的三环杂环化合物。在各种实施方案中，本发明的组合物在一个实施方案中可包含按重量或体积计约1％至约70％或约5％至约60％的三环杂环化合物。

式I化合物可以单一剂量或分剂量每天以0.001-1000mg/kg哺乳动物(例如人)体重的剂量范围口服施用。一个剂量范围是单一剂量或分剂量每天口服0.01-500mg/kg体重。另一个剂量范围是每天口服一次或分次服用0.1-100mg/kg体重。对于口服给药，组合物可以以含有1.0-500mg活性成分提供，特别是1mg、5mg、10mg、15mg、15mg、20mg、25mg、50mg、75mg、100mg、150mg、200mg、250mg、300mg、400和500mg活性成分的片剂或胶囊剂形式提供，用于对待治疗个体进行症状性剂量调节。对于任何特定个体，具体的剂量水平和给药频率可以变化，并且取决于多种因素，包括所用具体化合物的活性、该化合物的代谢稳定性和作用时间、年龄、体重、一般健康情况、性别、饮食、给药方式和时间、排泄率、药物组合、特定疾病的严重程度以及接受治疗的宿主。

为了方便起见，如果需要，可以将每日总剂量分开并在一天中分批给予。在一个实施方案中，每日剂量以一份施用。在另一个实施方案中，在24小时内以两个分开的剂量施用每日总剂量。在另一个实施方案中，每日总剂量在24小时内以三个分开的剂量施用。在又一个实施方案中，在24小时内以四个分开的剂量施用每日总剂量。

三环杂环化合物的单位剂量可以不同的频率施用。在一个实施方案中，单位剂量的三环杂环化合物可以每天施用一次。在另一个实施方案中，三环杂环化合物的单位剂量可以每周施用两次。在另一个实施方案中，单位剂量的三环杂环化合物可以每周施用一次。在另一个实施方案中，单位剂量的三环杂环化合物可以每两周施用一次。在另一个实施方案中，单位剂量的三环杂环化合物可以每月施用一次。在另一个实施方案中，单位剂量的三环杂环化合物可以每两个月施用一次。在另一个实施方案中，单位剂量的三环杂环化合物可以每三个月施用一次。在另一个实施方案中，单位剂量的三环杂环化合物可以每六个月施用一次。在另一个实施方案中，单位剂量的三环杂环化合物可以每年施用一次。

将根据主治医生的判断来调节三环杂环化合物的施用量和频率，其中要考虑诸如年龄、个体的状况和大小以及所治疗症状的严重性等因素。本发明的组合物可以进一步包含一种或多种选自本文以上所列的治疗剂。

试剂盒

在一个方面，本发明提供了一种试剂盒，其包含治疗有效量的至少一种三环杂环化合物或所述化合物的药学上可接受的盐或前药和药学上可接受的载体、媒介物或稀释剂。

本发明的另一方面提供了一种试剂盒，其包含一定量的至少一种三环杂环化合物或该化合物的药学上可接受的盐或前药和一定量的至少一种以上所列的其他治疗剂，其中一定量的两种或更多种活性成分可产生所需的治疗效果。在一个实施方案中，一种或多种三环杂环化合物和一种或多种其他治疗剂在同一容器中提供。在一个实施方案中，一种或多种三环杂环化合物和一种或多种其他治疗剂在分开的容器中提供。

本发明不受实施方案中公开的特定实施例的限制，所述实施例意在举例说明本发明的几个方面，并且功能上等同的任何实施方案均在本发明的范围内。实际上，除了本文中示出和描述的那些之外，本发明的各种修改对于本领域技术人员而言将变得显而易见，并且旨在落入所附权利要求的范围内。

本文已经引用了许多参考文献，其全部公开内容通过引用并入本文。

Claims

1.下式的化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

R²是氢、甲基或乙基；

R³是氢、甲基或乙基；

R⁴是C_1-6烷基或(C_1-6烷基)OR⁷；

R⁵是氢、C_1-6烷基或(C_1-6烷基)OR⁷；

R⁶是氢、C_1-6烷基或(C_1-6烷基)OR⁷；

R⁷是氢或C_1-6烷基，其任选地被1-3个卤素取代；

n是介于1到3之间的整数。

2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中每个R¹是卤素。

3.根据权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R²是氢或甲基。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R³是氢或甲基。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴是甲基、乙基、CH₂OCH₃、CH₂CH₂OCH₃、CH₂CH₂OCHF₂。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴是甲基或乙基。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁵是氢或甲基。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁶是甲基或乙基。

9.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物选自：

10.药物组合物，其包含有效量的权利要求1-9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。

11.一种用于在有需要的个体中抑制HIV整合酶的方法，所述方法包括向所述个体施用有效量的权利要求1-9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐。

12.一种在有需要的个体中治疗HIV感染或艾滋病的方法，所述方法包括向所述个体施用有效量的权利要求1-9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐。

13.根据权利要求10所述的药物组合物，其进一步包含一种或多种另外的治疗剂，所述另外的治疗剂选自雷特格韦、拉米夫定、阿巴卡韦、利托那韦、度鲁格韦、达芦那韦、阿扎那韦、恩曲他滨、替诺福韦、埃替格韦、利匹韦林和洛匹那韦。

14.根据权利要求12所述的方法，其进一步包括向所述个体施用一种或多种选自雷特格韦、拉米夫定、阿巴卡韦、利托那韦、度鲁格韦、达芦那韦、阿扎那韦、恩曲他滨、替诺福韦、埃替格韦、利匹韦林和洛匹那韦的另外的治疗剂，其中权利要求1-9中任一项所述的化合物和一种或多种另外的治疗剂的的施用量一起有效地治疗HIV感染或治疗、预防或延迟艾滋病的发作或发展。

15.根据权利要求1-9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其用于制备用于在有需要的个体中抑制HIV整合酶、用于治疗或预防HIV感染或用于治疗、预防或延迟艾滋病的发作或进展的药物。

16.根据权利要求1-9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗。